專(zhuān)利名稱(chēng)：含有n－(3－氯－1h－吲哚－7－基)－4－氨磺?；交酋０泛土硪环N細(xì)胞毒藥物的藥物組合的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種含有可用作抗癌藥物的化合物、特別是N-(3-氯-1H-吲哚-7-基)-4-氨磺?；交酋０坊蚱淇伤幱名}以及另一種抗癌劑的新藥物組合。
背景技術(shù)：
在癌癥化學(xué)治療中常規(guī)使用的化學(xué)藥物有很多，例如烷化劑環(huán)磷酰胺、抗代謝物甲氨喋呤和氟尿嘧啶、抗生素阿霉素、絲裂霉素和博萊霉素、來(lái)源于植物的長(zhǎng)春新堿和鬼臼乙叉甙、金屬?gòu)?fù)合物順鉑，但是它們的抗腫瘤作用還不夠充分，因此存在研制新抗腫瘤劑的需要。
一方面，本發(fā)明的發(fā)明者第一次成功地合成了全新的芳磺酰胺或芳基磺酸酯類(lèi)化合物，他們意外地發(fā)現(xiàn)這些化合物具有很好的抗腫瘤活性，他們還提供了具有新作用機(jī)理的有用的抗腫瘤劑(JP-A 7-165708)。具體而言，他們發(fā)現(xiàn)N-(3-氯-1H-吲哚-7-基)-4-氨磺酰基苯磺酰胺(以下也稱(chēng)為“E7070”)顯示對(duì)各種類(lèi)型的腫瘤都有活性，非常有用，它可由下式代表 在有些情況下，某種化合物對(duì)某種類(lèi)型的癌癥有效但對(duì)其它類(lèi)型的癌癥效果不佳。另外，施用單一組分可能無(wú)法獲得充分的效果。也就是說(shuō)，本發(fā)明的目的是要提供一種藥物組合，其具有很好的抗腫瘤活性，因而能夠解決這些問(wèn)題。

發(fā)明內(nèi)容
考慮到上述情況，本發(fā)明的發(fā)明者為尋找優(yōu)秀的抗腫瘤組合而進(jìn)行了廣泛的研究，結(jié)果他們意外地發(fā)現(xiàn)通過(guò)使某種抗癌劑與N-(3-氯-1H-吲哚-7-基)-4-氨磺酰基苯磺酰胺或其鹽聯(lián)合應(yīng)用可獲得更優(yōu)異的協(xié)同抗腫瘤活性，本發(fā)明由此完成。
也就是說(shuō)，本發(fā)明涉及1.藥物組合，該藥物組合含有N-(3-氯-1H-吲哚-7-基)-4-氨磺?；交酋０坊蚱潲}，以及至少一種選自于(1)卡鉑、(2)奧沙利鉑、(3)卡培他濱、(4)上述(1)至(3)的鹽的物質(zhì)；2.以上1中描述的藥物組合，該藥物組合作為抗癌劑；3.以上2中描述的藥物組合，該藥物組合含有N-(3-氯-1H-吲哚-7-基)-4-氨磺?；交酋０坊蚱潲}以及卡鉑或其鹽；4.以上2中描述的藥物組合，該藥物組合含有N-(3-氯-1H-吲哚-7-基)-4-氨磺?；交酋０坊蚱潲}以及奧沙利鉑或其鹽；5.以上2中描述的藥物組合，該藥物組合含有N-(3-氯-1H-吲哚-7-基)-4-氨磺酰基苯磺酰胺或其鹽以及卡培他濱或其鹽；6.藥物組合，該藥物組合含有N-(3-氯-1H-吲哚-7-基)-4-氨磺?；交酋０坊蚱潲}、5-氟尿嘧啶或其鹽以及奧沙利鉑或其鹽；7.以上6中描述的藥物組合，該藥物組合作為抗癌劑；8.N-(3-氯-1H-吲哚-7-基)-4-氨磺?；交酋０坊蚱潲}與至少一種選自于(1)卡鉑；(2)奧沙利鉑；(3)卡培他濱；(4)上述(1)至(3)的鹽的物質(zhì)一起用于制備預(yù)防或治療癌癥的活性劑中的用途；9.N-(3-氯-1H-吲哚-7-基)-4-氨磺?；交酋０坊蚱潲}、5-氟尿嘧啶或其鹽以及奧沙利鉑或其鹽一起用于制備預(yù)防或治療癌癥的活性劑中的用途；10.藥盒，該藥盒用于向患者同時(shí)或分別施用有效量的N-(3-氯-1H-吲哚-7-基)-4-氨磺?；交酋０坊蚱潲}與至少一種選自于(1)卡鉑；(2)奧沙利鉑；(3)卡培他濱；(4)上述(1)至(3)的鹽的物質(zhì)；
11.藥盒，該藥盒用于向患者同時(shí)或分別施用有效量的N-(3-氯-1H-吲哚-7-基)-4-氨磺?；交酋０坊蚱潲}、5-氟尿嘧啶或其鹽以及奧沙利鉑或其鹽。
以下將描述本說(shuō)明書(shū)中使用的符號(hào)、術(shù)語(yǔ)等的意義，并詳細(xì)描述本發(fā)明。
在本申請(qǐng)的說(shuō)明書(shū)中，雖然為方便起見(jiàn)將化合物的結(jié)構(gòu)式表達(dá)為某種異構(gòu)體的形式，但無(wú)需說(shuō)明，本發(fā)明的藥物組合中所含有化合物的結(jié)構(gòu)并不限于為便于說(shuō)明而使用的結(jié)構(gòu)式，其結(jié)構(gòu)也包括可能存在的全部異構(gòu)體例如幾何異構(gòu)體、基于不對(duì)稱(chēng)碳原子的光學(xué)異構(gòu)體、旋轉(zhuǎn)異構(gòu)體、立體異構(gòu)體和互變異構(gòu)體，還包括這些異構(gòu)體的混合物。而且，上述化合物還可能存在晶體的多晶型現(xiàn)象，但是同樣這方面也不存在限制，任何一種單晶型或混合物形式都可以。此外，上述化合物還可以是無(wú)水物或水合物，兩者均包括在本發(fā)明權(quán)利要求的范圍內(nèi)。本發(fā)明的藥物組合顯示了很強(qiáng)的抗腫瘤活性，它也包括上述化合物的衍生物，這些衍生物經(jīng)體內(nèi)代謝例如氧化、還原、水解和結(jié)合作用后才顯示抗腫瘤活性。另外，本發(fā)明還包括經(jīng)體內(nèi)代謝例如氧化、還原、水解和結(jié)合作用后可以生成本發(fā)明組合中化合物的化合物。
在本說(shuō)明中，N-(3-氯-1H-吲哚-7-基)-4-氨磺?；交酋０泛虴7070是指下式代表的化合物 5-氟尿嘧啶(5-FU(5-氟-2，4-(1H，3H)-嘧啶二酮))在本說(shuō)明中是指下式代表的化合物
卡鉑(順式-二氨(1，1-環(huán)丁烷二羧酸)鉑)在本說(shuō)明中是指下式代表的化合物 奧沙利鉑(草酸合(1R，2R-環(huán)己二胺)鉑)在本說(shuō)明中是指下式代表的化合物 卡培他濱(N-4-戊氧羰基-5′-脫氧-5-氟胞嘧啶)在本說(shuō)明中是指下式代表的化合物 本說(shuō)明中使用的“鹽”的類(lèi)型沒(méi)有具體限定，它們的實(shí)例包括無(wú)機(jī)酸加成鹽如鹽酸鹽、硫酸鹽、碳酸鹽、碳酸氫鹽、氫溴酸鹽、氫碘酸鹽等，有 機(jī)酸加成鹽如乙酸鹽、馬來(lái)酸鹽、乳酸鹽、酒石酸鹽、三氟乙酸鹽等，有機(jī)磺酸加成鹽如甲磺酸鹽、羥甲磺酸鹽、羥乙磺酸鹽、苯磺酸鹽、甲苯磺酸鹽、牛膽酸鹽等，胺加成鹽如三甲胺鹽、三乙胺鹽、吡啶鹽、普魯卡因鹽、甲基吡啶鹽、二環(huán)己胺鹽、N，N′-二芐基乙二胺鹽、N-甲基葡萄糖胺鹽、二乙醇胺鹽、三乙醇胺鹽、三(羥甲基氨基)甲烷鹽、苯乙基芐胺鹽等，氨基酸加成鹽如精氨酸鹽、賴(lài)氨酸鹽、絲氨酸鹽、甘氨酸鹽、天冬氨酸鹽、谷氨酸鹽等。
N-(3-氯-1H-吲哚-7-基)-4-氨磺?；交酋０?E7070)可根據(jù)已知方法(WO95/07276或JP-A 7-165708中的實(shí)施例19)或與之類(lèi)似的方法制備。
5-氟尿嘧啶、卡鉑、奧沙利鉑和卡培他濱是已知的化合物，可通過(guò)已知方法或類(lèi)似方法制備。
起始化合物或制備過(guò)程中的各種試劑隨起始原料、所用溶劑等的不同可能形成鹽或水合物，只要不抑制反應(yīng)進(jìn)行則對(duì)其沒(méi)有具體限制。所用溶劑也隨起始原料、試劑等的不同而變化，只要它對(duì)反應(yīng)是惰性的并且可以在某種程度上溶解起始原料，則對(duì)其也沒(méi)有具體限制。
當(dāng)希望的化合物以游離形式獲得時(shí)，可通過(guò)常規(guī)方法將其轉(zhuǎn)化為可藥用鹽。此外，所得的各種異構(gòu)體(例如幾何異構(gòu)體、基于不對(duì)稱(chēng)碳原子的光學(xué)異構(gòu)體、旋轉(zhuǎn)異構(gòu)體、立體異構(gòu)體、互變異構(gòu)體等)可通過(guò)常規(guī)分離方法例如重結(jié)晶、非對(duì)映體鹽法、酶分離法以及各種色譜法(例如薄層色譜法、柱色譜法、氣相色譜法等)進(jìn)行純化和分離。
“抗癌藥物”在本說(shuō)明中的意義是用于抗腫瘤特別是惡性腫瘤的藥物。本發(fā)明的藥物組合或抗癌藥物可有效對(duì)抗的癌病包括例如腦瘤、頭頸癌、食道癌、胃癌、結(jié)腸癌、肝癌、胰腺癌、肺癌、乳腺癌、皮膚癌、卵巢癌、前列腺癌、腎臟瘤、膀胱癌、淋巴瘤、白血病等。本發(fā)明的藥物組合或抗癌藥物可用于在哺乳動(dòng)物(例如人類(lèi)、小鼠、大鼠、豚鼠、兔、狗、馬、猴等)中治療或預(yù)防癌病，特別是治療或預(yù)防人類(lèi)的癌病。
在本發(fā)明中，“與...聯(lián)合的藥物組合”以及“含有...的藥物組合”分別是指其中含有兩種或多種聯(lián)合的活性成分或抗癌劑的“藥物組合”，該“藥物組合”可以以含有兩種或多種活性成分的單一制劑形式制備和施用，或者分別制備為兩種或多種藥物組合物同時(shí)施用，或者分別制備為兩種或多種藥物組合物、先施用其中一種組合物，經(jīng)過(guò)預(yù)定的時(shí)間后再施用另一種組合物。在本發(fā)明中，“藥物組合”包括上述給藥形式中使用的任一藥物組合或藥物組合物。另外，對(duì)于聯(lián)合應(yīng)用的兩種或多種藥物組合的優(yōu)選比例沒(méi)有具體限定，可適當(dāng)?shù)剡x擇。
上述的活性成分可用于組成本發(fā)明的藥物組合，在施用藥物組合或抗癌藥物時(shí)，施用方式并不局限于同時(shí)施用，各個(gè)成分可相隔預(yù)定的時(shí)間間隔分別施用以增加它們的協(xié)同效應(yīng)。
具體而言，通過(guò)以下方法可增強(qiáng)協(xié)同效應(yīng)(A)通過(guò)一種預(yù)防或治療癌癥的方法，通過(guò)向患者施用E7070或其鹽，然后在預(yù)定的時(shí)間向患者施用至少一種選自于(1)卡鉑；(2)奧沙利鉑；(3)卡培他濱；(4)上述(1)至(3)的鹽的物質(zhì)，(B)通過(guò)一種預(yù)防或治療癌癥的方法，通過(guò)向患者施用E7070或其鹽，然后在預(yù)定的時(shí)間向患者施用5-氟尿嘧啶或其鹽與奧沙利鉑或其鹽，(C)通過(guò)一種預(yù)防或治療癌癥的方法，通過(guò)向患者施用至少一種選自于(1)卡鉑；(2)奧沙利鉑；(3)卡培他濱；(4)上述(1)至(3)的鹽的物質(zhì)，然后在預(yù)定的時(shí)間向患者施用E7070或其鹽，本發(fā)明包括這種預(yù)防或治療方法，或者(D)通過(guò)一種預(yù)防或治療癌癥的方法，通過(guò)向患者施用5-氟尿嘧啶或其鹽與奧沙利鉑或其鹽，然后在預(yù)定的時(shí)間向患者施用E7070或其鹽，本發(fā)明包括這種預(yù)防或治療方法。
可通過(guò)使用以下藥盒獲得協(xié)同抗腫瘤效應(yīng)(A)藥盒，該藥盒用于向患者同時(shí)或分別施用有效量的E7070或其鹽與至少一種選自于(1)卡鉑；(2)奧沙利鉑；(3)卡培他濱；(4)上述(1)至(3)的鹽的物質(zhì)，以達(dá)到如上所述的預(yù)防或治療方法中在預(yù)定的時(shí)間間隔施用各個(gè)成分的目的，或者(B)藥盒，該藥盒用于向患者同時(shí)或分別施用有效量的E7070或其鹽、5-氟尿嘧啶或其鹽與奧沙利鉑或其鹽，以到達(dá)如上所述的預(yù)防或治療方法中在預(yù)定的時(shí)間間隔施用各個(gè)成分的目的。本發(fā)明包括這樣的藥盒。例如以上提及的藥盒，其中的成分均以小容器包裝，然后包裝于同一盒中。
當(dāng)本發(fā)明的藥物組合用作藥物制劑時(shí)，對(duì)于施用形式?jīng)]有具體限制，可以以口服途徑或胃腸外途徑施用。它可用于治療或預(yù)防哺乳動(dòng)物(例如人類(lèi)、小鼠、大鼠、豚鼠、兔、狗、馬、猴等)、特別是人類(lèi)的疾病。隨癥狀的嚴(yán)重程度、患者的年齡、性別、體重以及對(duì)化學(xué)藥物的敏感性、施用形式、施用時(shí)間、施用時(shí)間間隔、藥物制劑的性質(zhì)、處方和類(lèi)型、活性成分類(lèi)型的不同，施用劑量也會(huì)變化，但沒(méi)有具體限制。例如E7070或其鹽以單劑量或分份劑量給予人類(lèi)時(shí)，通常日劑量約為5至6000mg，優(yōu)選約50至4000mg，更優(yōu)選100至3000mg。其它成分的日劑量如下5-氟尿嘧啶，5至20mg/kg；卡鉑300至400mg/m2；奧沙利鉑85至130mg/m2；卡培他濱1900至2500mg/m2，但這是藥物單獨(dú)施用時(shí)的標(biāo)準(zhǔn)劑量。在本發(fā)明中，隨成分組成不同劑量可作適當(dāng)?shù)恼{(diào)整。例如各個(gè)成分的成人日劑量可通常確定在1至6000mg的范圍內(nèi)，優(yōu)選10至1000mg，更優(yōu)選20至300mg。
本發(fā)明的藥物組合可使用原本的活性成分本身或通過(guò)將其與本身已知的可藥用載體經(jīng)常規(guī)方法混合來(lái)制備。優(yōu)選的制劑形式包括注射劑、片劑、散劑、微粒劑、顆粒劑、包衣片、膠囊、糖漿劑、錠劑、吸入劑、栓劑、軟膏劑、眼膏、滴眼劑、滴鼻劑、滴耳劑、泥敷劑和洗劑。為制備這些藥物制劑，可以使用常用的填充劑、粘合劑、潤(rùn)滑劑、著色劑、調(diào)味劑，如果需要還可以使用穩(wěn)定劑、乳化劑、吸收促進(jìn)劑和表面活性劑?？蓪⑼ǔＳ米魉幬镏苿┢鹗荚系某煞忠猿Ｒ?guī)方法混合后制備。
以上提及的制劑組分包括例如動(dòng)物或植物油如豆油、牛脂、合成甘油酯，碳?xì)浠衔锶缫籂钍?、角鯊?fù)榛蚬腆w石蠟，酯類(lèi)油脂如辛基十二烷基十四酸酯或異丙基十四酸酯，高級(jí)醇如十八十六醇或二十二醇，硅樹(shù)脂，硅油，表面活性劑如聚氧乙烯脂肪酸酯、去水山梨糖醇脂肪酸酯、甘油脂肪酸酯、聚氧乙烯脫水山梨醇脂肪酸酯、聚氧乙烯氫化蓖麻油或聚氧乙烯/聚氧丙烯嵌段共聚物，水溶性聚合物如羥乙基纖維素、聚丙稀酸、羧乙烯聚合物、聚乙二醇、聚乙烯吡咯烷酮或甲基纖維素，醇類(lèi)如乙醇或異丙醇，多元醇如甘油、丙二醇、雙丙二醇或山梨醇，糖類(lèi)如葡萄糖或蔗糖，無(wú)機(jī)物粉末如硅酐、硅酸鎂鋁或硅酸鋁，以及純水。調(diào)節(jié)pH值可使用無(wú)機(jī)酸例如鹽酸或磷酸、無(wú)機(jī)酸堿金屬鹽如磷酸鈉、無(wú)機(jī)堿如氫氧化鈉、有機(jī)酸如低級(jí)脂肪酸、檸檬酸或乳酸、有機(jī)酸堿金屬鹽如檸檬酸鈉或乳酸鈉、有機(jī)堿如精氨酸或乙醇胺等。如果需要可添加防腐劑、抗氧化劑等。
例如，制備口服施用的固體制劑時(shí)，將填充劑，如果需要還有粘合劑、崩解劑、潤(rùn)滑劑、著色劑、調(diào)味劑等加至主要成分中，然后經(jīng)常規(guī)方法制備成為片劑、包衣片、顆粒劑、微粒劑、散劑、膠囊等。
填充劑的實(shí)例有乳糖、玉米淀粉、蔗糖、葡萄糖、山梨醇、微晶纖維素和二氧化硅；粘合劑的實(shí)例有聚乙烯醇、乙基纖維素、甲基纖維素、阿拉伯膠、羥丙纖維素和羥丙基甲基纖維素；潤(rùn)滑劑的實(shí)例有硬脂酸鎂、滑石粉和硅膠；著色劑是可藥用的；調(diào)味劑的實(shí)例有可可粉、薄荷醇、芳香劑、薄荷油、冰片和肉桂粉。這些片劑和顆粒劑當(dāng)然可以適當(dāng)?shù)匾蕴?、明膠或其它材料包衣。
制備注射劑時(shí)，如果需要可向主要成分中加入pH調(diào)節(jié)劑、緩沖劑、助懸劑、助溶劑、穩(wěn)定劑、等滲劑、防腐劑等，然后經(jīng)常規(guī)方法制備為用于靜脈、皮下或肌內(nèi)途徑施用的注射劑。這里，如果需要它也可經(jīng)常規(guī)方法制備為凍干產(chǎn)品。
助懸劑的實(shí)例有甲基纖維素、聚山梨醇酯80、羥乙基纖維素、阿拉伯膠、西黃芪膠粉、羧甲基纖維素鈉和聚氧乙烯脫水山梨醇單月桂酸酯。
助溶劑的實(shí)例有聚氧乙烯氫化蓖麻油、聚山梨醇酯80、煙酰胺、聚氧乙烯脫水山梨醇單月桂酸酯、聚乙二醇和蓖麻油脂肪酸乙酯。
穩(wěn)定劑的實(shí)例有亞硫酸鈉和次硫酸鈉。防腐劑的實(shí)例有對(duì)羥基苯甲酸甲酯、對(duì)羥基苯甲酸乙酯、山梨酸、苯酚、甲酚和氯甲酚。
本發(fā)明可提供一種聯(lián)合應(yīng)用的新藥物組合，它甚至對(duì)于常規(guī)抗腫瘤藥物對(duì)其不足夠有效的癌癥都顯示出了抗腫瘤活性。本發(fā)明的藥物組合可用于治療或預(yù)防腦瘤、頭頸癌、食道癌、胃癌、結(jié)腸癌、肝癌、胰腺癌、肺癌、乳腺癌、皮膚癌、卵巢癌、前列腺癌、腎臟瘤、膀胱癌、淋巴瘤、白血病等。
與單獨(dú)施用大量的每種成分相比，本發(fā)明的藥物組合中聯(lián)合應(yīng)用的活性成分施用劑量較小，幾乎不會(huì)引起每個(gè)成分的副作用，因而可降低全部成分的副作用，通過(guò)使用相對(duì)高效的廉價(jià)藥物，還可以降低長(zhǎng)期使用大量貴重藥品帶來(lái)的費(fèi)用負(fù)擔(dān)。


圖1表示E7070與卡培他濱聯(lián)合應(yīng)用的效果?？v坐標(biāo)表示相對(duì)腫瘤重量(上)與相對(duì)體重(下)，橫坐標(biāo)表示開(kāi)始施用后的天數(shù)。
圖2表示等效線圖解的標(biāo)準(zhǔn)?？v坐標(biāo)表示B的劑量，橫坐標(biāo)表示A的劑量。
圖3表示在HCT15細(xì)胞中聯(lián)合應(yīng)用E7070與順鉑的等效線圖解分析的標(biāo)準(zhǔn)?？v坐標(biāo)表示順鉑的劑量，橫坐標(biāo)表示E7070的劑量。
圖4表示在HCT15細(xì)胞中聯(lián)合應(yīng)用E7070與卡鉑的等效線圖解分析的標(biāo)準(zhǔn)?？v坐標(biāo)表示卡鉑的劑量，橫坐標(biāo)表示E7070的劑量。
圖5表示在HCT15細(xì)胞中聯(lián)合應(yīng)用E7070與奧沙利鉑的等效線圖解分析的標(biāo)準(zhǔn)。縱坐標(biāo)表示奧沙利鉑的劑量，橫坐標(biāo)表示E7070的劑量。
具體的實(shí)施方式實(shí)施例以下本文將描述實(shí)施例和試驗(yàn)實(shí)施例以表明本發(fā)明組合的優(yōu)異效果，但這些只是起舉例說(shuō)明的作用，在任何情況下，本發(fā)明都不受以下具體實(shí)施例的限制。
如上所述，含有E7070或其鹽與至少一種選自于(1)卡鉑；(2)奧沙利鉑；(3)卡培他濱；(4)上述(1)至(3)的鹽的物質(zhì)相聯(lián)合的藥物組合，以及含有E7070或其鹽、5-氟尿嘧啶或其鹽與奧沙利鉑或其鹽的藥物組合，由于其每一種藥物之間的協(xié)同作用而表現(xiàn)出優(yōu)異的抗腫瘤活性，這種協(xié)同作用的存在與否根據(jù)雙向ANOVA方法來(lái)檢測(cè)(參見(jiàn)以下文獻(xiàn)(i)至(iii)(i)5-氟尿嘧啶、亞葉酸與葡萄糖二酸鹽在大鼠結(jié)腸腫瘤外植體中的作用，CancerChemother Pharmacol.1992；30(1)25-30；(ii)同時(shí)給予抗腫瘤核糖核酸酶onconase對(duì)長(zhǎng)春新堿在抗藥細(xì)胞中細(xì)胞毒性的增強(qiáng)作用，J Natl CancerInst.1996 Jun 5；88(11)747-53；(iii)生長(zhǎng)激素與睪酮對(duì)切除睪丸的高齡大鼠骨皮質(zhì)的形成和骨密度的影響，Bone.1999 May；24(5)491-7)。
實(shí)施例1E7070與卡培他濱在人乳腺癌HBC4異種移植模型中的聯(lián)合應(yīng)用在5％CO2氣體培養(yǎng)箱中，將人乳腺癌HBC4(購(gòu)買(mǎi)于日本癌癥研究基金會(huì)癌癥化學(xué)治療中心(日本東京))在RPMI1640(含10％FBS)中培養(yǎng)至達(dá)到約80％連生，用胰蛋白酶-EDTA采集細(xì)胞并將其懸浮于Hanks平衡液中制備5×107細(xì)胞/ml的混懸液。將0.1ml細(xì)胞混懸液植入裸鼠皮下。移植后當(dāng)平均腫瘤體積達(dá)到114mm3時(shí)，單獨(dú)或聯(lián)合施用劑量為30.625mg/kg/日的E7070和/或劑量為1.3125mmol/kg/日的卡培他濱。單獨(dú)施用的E7070以靜脈注射途徑施用，每日一次，共5日(第一至第五日)，而單獨(dú)施用的卡培他濱以靜脈注射途徑施用，每日一次，共14日(第一至第十四日)。也進(jìn)行了預(yù)先施用E7070的方案(在第一日至第五日施用E7070，第六日至第九日施用卡培他濱)。開(kāi)始施用藥物后，每星期用數(shù)碼測(cè)徑器(Mitsutoyo)測(cè)量?jī)纱文[瘤的長(zhǎng)短直徑，并根據(jù)以下方程式計(jì)算腫瘤體積腫瘤體積＝腫瘤長(zhǎng)徑(mm)×腫瘤短徑(mm)2/2確定抗腫瘤效果的是以下二量Tx4腫瘤尺寸達(dá)到初尺寸的4倍時(shí)所用的天數(shù)。
最小相對(duì)腫瘤體積(mRTV)相對(duì)腫瘤體積的最小值(RTV*)*第一次給藥后第n日的腫瘤體積/初給藥時(shí)的腫瘤體積當(dāng)聯(lián)合給予的藥物顯示的抗腫瘤效果較單獨(dú)給予藥物的效果好、同時(shí)雙向ANOVA也識(shí)別出統(tǒng)計(jì)學(xué)顯著性相互作用時(shí)，則該抗腫瘤作用被確定為協(xié)同作用。結(jié)果表示于表1和圖1。
從表1和圖1中明顯可見(jiàn)，聯(lián)合應(yīng)用E7070與卡培他濱使它們各自的作用呈加成性增強(qiáng)，這表明聯(lián)合E7070與卡培他濱可作為優(yōu)秀的抗腫瘤劑。
實(shí)施例2對(duì)聯(lián)合應(yīng)用E7070、順鉑、卡鉑、奧沙利鉑在人結(jié)腸癌HCT15細(xì)胞中的作用的體外評(píng)價(jià)采集快速生長(zhǎng)的人結(jié)腸癌種HCT15細(xì)胞(購(gòu)買(mǎi)于ATCC)，計(jì)數(shù)后以適當(dāng)?shù)臐舛冉臃N(1,250細(xì)胞/孔)于96孔微量培養(yǎng)板中。第二天(第0日)將藥物溶于DMSO(E7070)、生理鹽水(順鉑和卡鉑)或5％葡萄糖溶液(奧沙利鉑)中，用培養(yǎng)液稀釋為各個(gè)濃度，一式三份加至培養(yǎng)孔中。
在同時(shí)給予藥物的方案中，將E7070、順鉑、卡鉑或奧沙利鉑一次性加入其中。在37℃下和5％CO2中進(jìn)一步培養(yǎng)72小時(shí)后，使用MTT分析法測(cè)定存活細(xì)胞數(shù)(第3日)。
在先后給予藥物(預(yù)先給予E7070)的方案中，在第0天加入E7070。培養(yǎng)24小時(shí)后，用新制培養(yǎng)液洗去E7070后加入鉑(第1日)。在37℃下和5％CO2中再培養(yǎng)48小時(shí)后，使用MTT分析法測(cè)定存活細(xì)胞數(shù)(第3日)。
在先后給予藥物(預(yù)先給予鉑)的方案中，在第0天加入鉑，即順鉑、卡鉑或奧沙利鉑。培養(yǎng)24小時(shí)后，用新制培養(yǎng)液洗去鉑后加入E7070(第1日)。在37℃下和5％CO2中再培養(yǎng)48小時(shí)后，使用MTT分析法測(cè)定存活細(xì)胞數(shù)(第3日)。
E7070與順鉑、卡鉑或奧沙利鉑相結(jié)合的效果通過(guò)由Steel和Peckam(Steel GG和Peckham MJ在聯(lián)合放射療法-化學(xué)療法中可采用的機(jī)理加成作用的概念，Int J Radiat Oncol Biol Phys 585-91，1979)描述的、由Kano等(Kano Y，Suzuki K，Akutsu M等CPT-11與其它抗癌劑相結(jié)合在培養(yǎng)物中的作用，Int J Cancer 50604-610，1992)修改的等效線圖解法進(jìn)行分析。圖2簡(jiǎn)要地表示了等效線圖解法的標(biāo)準(zhǔn)。三條線(模式I、模式IIa和模式IIb)是從藥物A和藥物B單獨(dú)施用時(shí)的生長(zhǎng)抑制曲線中估計(jì)的IC50值。當(dāng)聯(lián)合應(yīng)用(數(shù)據(jù)點(diǎn))時(shí)的實(shí)際IC50值落在這些線包圍的區(qū)域(加成口袋(envelope ofadditivity))中時(shí)，這種聯(lián)合應(yīng)用則被認(rèn)為是有加成作用的(Pb點(diǎn))。當(dāng)數(shù)據(jù)點(diǎn)落在加成口袋的左側(cè)區(qū)域內(nèi)(Pa點(diǎn))、右側(cè)區(qū)域內(nèi)(Pc點(diǎn))以及正方形之外時(shí)，兩種藥物的相互作用則被認(rèn)為是協(xié)同作用、拮抗作用以及保護(hù)作用。圖3、4和5表示了E7070與鉑聯(lián)合應(yīng)用的結(jié)果。
從圖3、4和5中明顯可見(jiàn)，聯(lián)合應(yīng)用E7070和順鉑只是在預(yù)先給予E7070的方案中才表現(xiàn)出協(xié)同作用，在其它給予方案中沒(méi)有協(xié)同作用。另一方面，E7070與卡鉑或奧沙利鉑聯(lián)合應(yīng)用時(shí)則在同時(shí)給予的方案中表現(xiàn)為協(xié)同作用。此外，在預(yù)先給予奧沙利鉑的方案中，聯(lián)合應(yīng)用E7070與奧沙利鉑使它們各自的作用得到協(xié)同性的增強(qiáng)。這些數(shù)據(jù)表明1)在協(xié)同性增強(qiáng)抗腫瘤效應(yīng)方面，聯(lián)合應(yīng)用E7070與鉑是一種有益的用藥法。2)在增強(qiáng)抗腫瘤效應(yīng)方面，E7070與卡鉑或奧沙利鉑聯(lián)合應(yīng)用跟與順鉑聯(lián)合應(yīng)用相比在給藥方式上較為靈活。也就是說(shuō)，在E7070與卡鉑的聯(lián)合應(yīng)用中可以允許兩種藥物同時(shí)施用的方案和預(yù)先施用E7070的方案。E7070與奧沙利鉑可以同時(shí)施用，或者在預(yù)定的時(shí)間后施用兩者之一，而且無(wú)論先施用E7070還是奧沙利鉑，均會(huì)表現(xiàn)出協(xié)同作用。
從以上提及的實(shí)驗(yàn)實(shí)施例中可以明顯的看到，本發(fā)明組合表現(xiàn)出了優(yōu)異的抗腫瘤活性，可用作抗腫瘤劑。至于癌癥的類(lèi)型，各個(gè)成分對(duì)其有效的癌癥都可以在范圍內(nèi)，由于這些癌癥類(lèi)型將隨組合物組成的不同而變化，另外由于本發(fā)明中的協(xié)同作用優(yōu)于單個(gè)藥物的作用，因此癌癥類(lèi)型沒(méi)有具體限定。
表1E7070與卡培他濱單獨(dú)應(yīng)用或聯(lián)合應(yīng)用時(shí)在HBC4外植物模型中的抗腫瘤效應(yīng)

m(最小)RTV∶RTV＝第一次給藥后第n日的腫瘤體積/給藥之初的腫瘤體積?！?”意指沒(méi)有腫瘤消退。
m(最小)RBW∶RBW＝第一次給藥后第n日的體重/給藥之初的體重部分應(yīng)答(PR)腫瘤消退的發(fā)生率(腫瘤消退50％以上)完全應(yīng)答(CR)無(wú)腫瘤小鼠的發(fā)生率RBW＜0.80體重減輕20％以上(毒性異常)的發(fā)生率
權(quán)利要求
1.藥物組合，該藥物組合含有N-(3-氯-1H-吲哚-7-基)-4-氨磺?；交酋０坊蚱潲}，以及至少一種選自于(1)卡鉑、(2)奧沙利鉑、(3)卡培他濱、(4)上述(1)至(3)的鹽的物質(zhì)的。
2.權(quán)利要求1的藥物組合，該藥物組合為抗癌劑。
3.權(quán)利要求2的藥物組合，該藥物組合含有N-(3-氯-1H-吲哚-7-基)-4-氨磺酰基苯磺酰胺或其鹽以及卡鉑或其鹽。
4.權(quán)利要求2的藥物組合，該藥物組合含有N-(3-氯-1H-吲哚-7-基)-4-氨磺?；交酋０坊蚱潲}以及奧沙利鉑或其鹽。
5.權(quán)利要求2的藥物組合，該藥物組合含有N-(3-氯-1H-吲哚-7-基)-4-氨磺?；交酋０坊蚱潲}以及卡培他濱或其鹽。
6.藥物組合，該藥物組合含有N-(3-氯-1H-吲哚-7-基)-4-氨磺?；交酋０坊蚱潲}、5-氟尿嘧啶或其鹽以及奧沙利鉑或其鹽。
7.權(quán)利要求6的藥物組合，該藥物組合為抗癌劑。
8.N-(3-氯-1H-吲哚-7-基)-4-氨磺酰基苯磺酰胺或其鹽與至少一種選自于(1)卡鉑；(2)奧沙利鉑；(3)卡培他濱；(4)上述(1)至(3)的鹽的物質(zhì)一起用于制備預(yù)防或治療癌癥的藥物中的用途。
9.N-(3-氯-1H-吲哚-7-基)-4-氨磺?；交酋０坊蚱潲}、5-氟尿嘧啶或其鹽以及奧沙利鉑或其鹽一起用于制備預(yù)防或治療癌癥的藥物中的用途。
10.藥盒，該藥盒用于向患者同時(shí)或分別施用有效量的N-(3-氯-1H-吲哚-7-基)-4-氨磺?；交酋０坊蚱潲}與至少一種選自于(1)卡鉑；(2)奧沙利鉑；(3)卡培他濱；(4)上述(1)至(3)的鹽的物質(zhì)。
11.藥盒，該藥盒用于向患者同時(shí)或分別施用有效量的N-(3-氯-1H-吲哚-7-基)-4-氨磺?；交酋０坊蚱潲}、5-氟尿嘧啶或其鹽以及奧沙利鉑或其鹽。
全文摘要
本發(fā)明提供具有優(yōu)異抗腫瘤活性的藥物組合。也就是說(shuō)，本發(fā)明提供含有N－(3－氯－1H－吲哚－7－基)－4－氨磺?；交酋０坊蚱潲}，結(jié)合以至少一種選自于(1)卡鉑、(2)奧沙利鉑、(3)卡培他濱、(4)上述(1)至(3)的鹽的物質(zhì)的藥物組合。
文檔編號(hào)A61K31/505GK1780629SQ20048001129
公開(kāi)日2006年5月31日 申請(qǐng)日期2004年4月30日 優(yōu)先權(quán)日2003年5月8日
發(fā)明者小沢陽(yáng)一 申請(qǐng)人:衛(wèi)材株式會(huì)社