專利名稱：作為醫(yī)學(xué)產(chǎn)品的涂層材料的低聚肽的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及包含一個(gè)caspase蛋白酶抑制劑和/或一個(gè)通式R-賴氨酸-X的化合物的一個(gè)藥物組分，使用所述的caspase蛋白酶抑制劑和/或所述的通式R-賴氨酸-X的化合物覆蓋醫(yī)學(xué)產(chǎn)品的方法以及具有所述caspase蛋白酶抑制劑和/或所述的通式R-賴氨酸-X的化合物涂層的醫(yī)學(xué)產(chǎn)品。
背景技術(shù)：
關(guān)于冠狀動(dòng)脈的發(fā)明以及特別是關(guān)于經(jīng)皮穿刺腔內(nèi)冠狀動(dòng)脈成形術(shù)(PTCA)，被證明這種非外科的治療是有限的，因?yàn)樵侏M窄率達(dá)到35％。個(gè)別研究表明，氣球成形術(shù)并且同樣支架移植引起血小板壁和血管壁的傷害和破裂，導(dǎo)致內(nèi)膜增殖和平滑肌細(xì)胞增生。
所述的平滑肌細(xì)胞在最新形成的內(nèi)膜創(chuàng)造了細(xì)胞外基質(zhì)。進(jìn)一步地，傷害引起局部炎癥以及淋巴細(xì)胞，巨噬細(xì)胞和單核細(xì)胞移往最新形成的內(nèi)膜。這種內(nèi)膜增殖引起再狹窄，由此人們想得到在控制增殖和逐漸減少炎癥活動(dòng)中再狹窄風(fēng)險(xiǎn)減少的方法。
本發(fā)明的物體是提供混合物和藥物合成物用于減少再狹窄，醫(yī)學(xué)產(chǎn)品的涂層，這種涂層減少了再狹窄的風(fēng)險(xiǎn)以及所述有涂層醫(yī)學(xué)產(chǎn)品的制造方法。
物體通過獨(dú)立權(quán)利要求的教義解釋。本發(fā)明進(jìn)一步的好處明顯體現(xiàn)在從屬權(quán)利要求，說明和實(shí)例。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明涉及caspase蛋白酶抑制劑和/或至少一個(gè)通式R-賴氨酸-X的化合物的使用，用于藥物合成物的制備，所述caspase蛋白酶抑制劑和/或所述至少一個(gè)通式R-賴氨酸-X的化合物或者所述藥物合成物的使用，用于醫(yī)學(xué)產(chǎn)品的涂層表面，特別是支架。進(jìn)一步地，本發(fā)明涉及根據(jù)發(fā)明涂層方法涂層的醫(yī)學(xué)產(chǎn)品，特別是根據(jù)發(fā)明的方法涂層的支架。
caspase蛋白酶是普遍的保守蛋白酶，被認(rèn)為是細(xì)胞凋亡的重要效應(yīng)物。
caspase蛋白酶抑制劑的一個(gè)大的范圍已知是肽caspase蛋白酶抑制劑，例如芐氧基羰基-纈氨酸-丙氨酸-天冬氨酸-氟甲基酮或者異亮氨酸-谷氨酸-蘇氨酸-天冬氨酸-氟甲基酮是最普遍的例子。優(yōu)先的是，caspase蛋白酶抑制劑以自由的或者受保護(hù)的肽的形式，這種肽包含兩個(gè)，三個(gè)，四個(gè)或者五個(gè)氨基酸。
不過，caspase蛋白酶抑制劑包含只一個(gè)氨基酸也是在本發(fā)明的應(yīng)用中有用的。所述抑制劑的實(shí)例包括例如t-丁氧基羰基-天冬氨酸(OCH3)-CH2F，叔丁氧羰基-天冬氨酰(OMe)-氟甲基酮(BAF)和叔丁氧羰基-天冬氨酸-fmk(BD)。
作為caspase蛋白酶抑制劑，二肽的實(shí)例是BD-fmk和Z-FA-fmk。
作為caspase蛋白酶抑制劑，三肽的實(shí)例是z-VAD，z-纈氨酸-丙氨酸-天冬氨酸-氟甲基酮(z-VAD-fmk)，IAP，芐氧基羰基-纈氨酸-丙氨酸-天冬氨酸(OCH3)-CH2-氟甲基酮，芐氧基羰基-異亮氨酸-谷氨酸(OCH3)-蘇氨酸-天冬氨酸(OCH3)-CH2--氟甲基酮和Z-AAD-fmk。
作為caspase蛋白酶抑制劑，四肽的實(shí)例是DEVD，Ac-DEVD-CHO，Z-天冬氨酸-CH2-DCB，乙?；?天冬氨酸-谷氨酸-纈氨酸-天冬氨酸-氟甲基酮(Ac-DEVD-FMK)，YVAD，乙酰基-酪氨酸-纈氨酸-丙氨酸-天冬氨酸-氯甲基酮(Ac-YVAD-CMK)，z-DEVD-fmk，芐氧基羰基-天冬氨酸(OCH3)-谷氨酸(OCH3)-纈氨酸-天冬氨酸(OCH3)-CH2-氟甲基酮和z-IETD-fmk。
作為caspase蛋白酶抑制劑，五肽的實(shí)例包括例如Z-VDVAD-fmk。
用于以上保護(hù)基團(tuán)的縮寫包括Z-(或者z-)，用于芐氧基羰基；BOC(或者boc)，用于t-丁氧基羰基；Bz1，用于苯甲基；Fmoc，用于9-芴氧基；Ac，用于乙?；?；FMK(或者fmk)，用于氟甲基酮；CMK(或者cmk)，用于氯甲基酮。
進(jìn)一步地，病毒編碼的caspase蛋白酶抑制劑，例如牛痘病毒CrmA蛋白和Bc1-2致癌蛋白或者caspase蛋白酶抑制劑Diap1，cIAP1，cIAP2，XIAP和p35，同樣可以用于藥物合成物和用在醫(yī)學(xué)產(chǎn)品涂層的方法。
caspase蛋白酶抑制劑可以從酶系統(tǒng)(Livermore CA)購買。
上面提到的caspase蛋白酶抑制劑可以在藥物合成物的制備中使用。所述藥物合成物可以進(jìn)一步使用在醫(yī)學(xué)產(chǎn)品的涂層上，例如人造的心臟，心臟部分，肺，動(dòng)脈，靜脈，大動(dòng)脈，心臟瓣膜，尸體血管，瓣膜，槽，袋，罐，針，導(dǎo)管和零件，特別是用于心臟血管系統(tǒng)和體外循環(huán)的人造零件，外科移植例如支架或者導(dǎo)管以及分析目的的設(shè)備例如測(cè)試管，濃度測(cè)定板，微濃度測(cè)定板，孔培養(yǎng)板，分析芯片或者用于色譜分析的材料例如膠，硅膠，柱，礬土，瓊脂糖凝膠和類似的東西。最優(yōu)先的是支架用涂層混合物覆蓋，例如上面提到的藥物合成物。
優(yōu)先的是包含兩個(gè)，三個(gè)或者四個(gè)氨基酸的caspase蛋白酶抑制劑。所述二，三或者四肽可以以它們自由的形式或者與一個(gè)或多個(gè)保護(hù)基團(tuán)結(jié)合在上面使用。
作為保護(hù)基團(tuán)，芐氧基羰基，氟甲基酮，氯甲基酮和t-丁氧基羰基是最佳的。
一個(gè)特別好的caspase蛋白酶抑制劑是酪氨酸-纈氨酸-丙氨酸-天冬氨酸(YVAD)作為上面提到的醫(yī)學(xué)產(chǎn)品的涂層組分。
優(yōu)先的是，上面提到的caspase蛋白酶抑制劑的至少一個(gè)氨基酸具有D構(gòu)型，特別是如果酪氨酸-纈氨酸-丙氨酸-天冬氨酸的一個(gè)氨基酸具有D構(gòu)型。
神經(jīng)肽作為前促黑激素肽(POMC)，特別是α-，β-和γ-黑素細(xì)胞刺激激素(MSH)，更特別是α-MSH，和促腎上腺皮質(zhì)激素(ACTH)和它們有關(guān)的三肽(KPV)，是已知在內(nèi)皮細(xì)胞具有抗炎癥和免疫抑制的效果(Broadmedical research脯氨酸gram for the Eli and Edythe L.BroadFoundation；Kucharzik 2003)。這些特征存在于十三肽α-MSH的C-末端部分和KPVs，它由三個(gè)氨基酸賴氨酸-脯氨酸-纈氨酸構(gòu)成(Catania andLipton，Endocrin.Rev.1993，14，564-578；Bhardvaj et al.，J.Immunol.1996，156，2517-2521)。MSH是結(jié)構(gòu)上與ACTH有關(guān)系并且在生物學(xué)上是從先驅(qū)POMC產(chǎn)生的。MSH的兩個(gè)不同種類，α-MSH和β-MSH，與ACTH一樣有最開始的13個(gè)氨基酸。體液調(diào)理素(LPH)和心臟調(diào)理素類似肽(CLIP)同樣起源于先驅(qū)POMC并且據(jù)推測(cè)有積極的效果(Clin.Endocrin.& Metabol.2001，86(7)；2997-3000)。
因此，涉及來自POMC肽家族的化合物用途的本發(fā)明的另一個(gè)方面是α-，β-或者γ-MSH，ACTH，LPH或者CLIP或者所述化合物保護(hù)的，?；?，乙酰化的衍生物，用于醫(yī)學(xué)產(chǎn)品的表面涂層。
某些caspase蛋白酶抑制劑可以用公式R-賴氨酸-X表達(dá)。令人驚奇的發(fā)現(xiàn)是，不僅caspase蛋白酶抑制劑而且低聚肽和具有通式R-賴氨酸-X的肽也有能力解決發(fā)明潛在的問題。所述化合物包括caspase蛋白酶抑制劑也可以用于藥物組分的制備和醫(yī)學(xué)產(chǎn)品的表面涂層，它們可以用通式R-賴氨酸-X表達(dá)，其中X代表羥基，氨基，一烷基或二烷氨基，烷氧基，氨基酸，帶1-10個(gè)氨基酸的低聚肽以及其中R選自下列組群氫，?；阴；?，氨基酸或者帶2-50個(gè)氨基酸的肽。通式R-賴氨酸-X的化合物也可以被當(dāng)作caspase蛋白酶抑制劑。因此，象在這里所說的，術(shù)語caspase蛋白酶抑制劑應(yīng)該參考文獻(xiàn)中已知的caspase蛋白酶抑制劑和同樣公式R-賴氨酸-X的化合物。
優(yōu)先地，R代表有3-50個(gè)氨基酸的肽，更優(yōu)先地，R代表有5-35個(gè)氨基酸的肽，還要更優(yōu)先地，R代表有6-20個(gè)氨基酸的肽，進(jìn)一步還要更優(yōu)先地，R代表有7-15個(gè)氨基酸的肽，還要更優(yōu)先地，R代表有8-12個(gè)氨基酸的肽，以及最優(yōu)先地，R代表有9-11個(gè)氨基酸的肽。此外，最優(yōu)先地，R是有10個(gè)氨基酸的肽。
進(jìn)一步地，這是有優(yōu)勢(shì)的，如果R代表包含四肽組氨酸-苯丙氨酸-精氨酸-色氨酸或者三肽苯丙氨酸-精氨酸-色氨酸或者組氨酸-苯丙氨酸-精氨酸的肽。
進(jìn)一步優(yōu)先的體現(xiàn)在包含通式R-賴氨酸-X的化合物，其中殘基R和/或X的至少一個(gè)氨基酸具有D構(gòu)型。更優(yōu)先的是化合物，其中X由L氨基酸組成以及R包含至少一個(gè)D氨基酸。另一個(gè)本發(fā)明更優(yōu)先的體現(xiàn)在包含通式R-賴氨酸-X的化合物，其中殘基X所有的氨基酸具有L構(gòu)型以及殘基R所有的氨基酸具有D構(gòu)型。在所有提到的體現(xiàn)中，在R-賴氨酸-X中的氨基酸-賴氨酸-有L構(gòu)型是有優(yōu)勢(shì)的。
根據(jù)肽的命名法，R是指向肽N末端的殘基以及X是與在R-賴氨酸-X中的氨基酸-賴氨酸-的C末端結(jié)合的殘基。
兩個(gè)末端，通式R-賴氨酸-X的化合物的C末端和N末端，可能被常見氨基或者羧基保護(hù)基團(tuán)例如?；鶊F(tuán)保護(hù)。優(yōu)先的氨基保護(hù)基團(tuán)是?；鶊F(tuán)，例如甲酸基，乙?；?，丙?；约案m宜乙酰基基團(tuán)。羧酸的優(yōu)先保護(hù)基團(tuán)是一烷氨基基團(tuán)，二烷氨基基團(tuán)，烷氧基團(tuán)，氟甲基酮和氯甲基酮。所述保護(hù)基團(tuán)可以出現(xiàn)在C末端或者N末端或者兩個(gè)末端或者兩個(gè)末端都沒有。
本發(fā)明進(jìn)一步的優(yōu)先體現(xiàn)在包含通式R-賴氨酸-X的化合物，其中X代表低聚肽，它選自包含根據(jù)權(quán)利要求15-18中任一項(xiàng)的藥物組分的族群，其中X代表選自以下族群的低聚肽脯氨酸，脯氨酸-蘇氨酸，脯氨酸-纈氨酸，脯氨酸-丙氨酸，脯氨酸-精氨酸，脯氨酸-天冬酰胺，脯氨酸-天冬氨酸，脯氨酸-半胱氨酸，脯氨酸-谷氨酸，脯氨酸-谷氨酰胺，脯氨酸-甘氨酸，脯氨酸-組氨酸，脯氨酸-異亮氨酸，脯氨酸-亮氨酸，脯氨酸-賴氨酸，脯氨酸-甲硫氨酸，脯氨酸-苯丙氨酸，脯氨酸-脯氨酸，脯氨酸-絲氨酸，脯氨酸-色氨酸，脯氨酸-蘇氨酸-蘇氨酸，脯氨酸-蘇氨酸-纈氨酸，脯氨酸-蘇氨酸-丙氨酸，脯氨酸-蘇氨酸-精氨酸，脯氨酸-蘇氨酸-天冬酰胺，脯氨酸-蘇氨酸-天冬氨酸，脯氨酸-蘇氨酸-半胱氨酸，脯氨酸-蘇氨酸-谷氨酸，脯氨酸-蘇氨酸-谷氨酰胺，脯氨酸-蘇氨酸-甘氨酸，脯氨酸-蘇氨酸-組氨酸，脯氨酸-蘇氨酸-異亮氨酸，脯氨酸-蘇氨酸-亮氨酸，脯氨酸-蘇氨酸-賴氨酸，脯氨酸-蘇氨酸-甲硫氨酸，脯氨酸-蘇氨酸-苯丙氨酸，脯氨酸-蘇氨酸-脯氨酸，脯氨酸-蘇氨酸-絲氨酸，脯氨酸-蘇氨酸-色氨酸，脯氨酸-纈氨酸-蘇氨酸，脯氨酸-纈氨酸-纈氨酸，脯氨酸-纈氨酸-丙氨酸，脯氨酸-纈氨酸-精氨酸，脯氨酸-纈氨酸-天冬酰胺，脯氨酸-纈氨酸-天冬氨酸，脯氨酸-纈氨酸-半胱氨酸，脯氨酸-纈氨酸-谷氨酸，脯氨酸-纈氨酸-谷氨酰胺，脯氨酸-纈氨酸-甘氨酸，脯氨酸-纈氨酸-組氨酸，脯氨酸-纈氨酸-異亮氨酸，脯氨酸-纈氨酸-亮氨酸，脯氨酸-纈氨酸-賴氨酸，脯氨酸-纈氨酸-甲硫氨酸，脯氨酸-纈氨酸-苯丙氨酸，脯氨酸-纈氨酸-脯氨酸，脯氨酸-纈氨酸-絲氨酸和脯氨酸-纈氨酸-色氨酸。之前提到的二肽和三肽和脯氨酸可以用上面提到的保護(hù)基團(tuán)之一保護(hù)，這些保護(hù)基團(tuán)用于羧酸，特別是氟甲基酮和氯甲基酮。
其它根據(jù)通式R-賴氨酸-X的化合物的優(yōu)先實(shí)例選自族群R-賴氨酸-脯氨酸-X，R-賴氨酸-脯氨酸-蘇氨酸-X和R-賴氨酸-脯氨酸-纈氨酸-X。
進(jìn)一步地，以下化合物是優(yōu)先的R”-組氨酸-苯丙氨酸-精氨酸-色氨酸-R’-賴氨酸-X，R”-組氨酸-苯丙氨酸-精氨酸-色氨酸-R’-賴氨酸-脯氨酸-X’，R”-組氨酸-苯丙氨酸-精氨酸-色氨酸-R’-賴氨酸-脯氨酸-蘇氨酸-X’，R”-組氨酸-苯丙氨酸-精氨酸-色氨酸-R’-賴氨酸-脯氨酸-纈氨酸-X’，R”-苯丙氨酸-精氨酸-色氨酸-R’-賴氨酸-X，R”-苯丙氨酸-精氨酸-色氨酸-R’-賴氨酸-脯氨酸-X’，R”-苯丙氨酸-精氨酸-色氨酸-R’-賴氨酸-脯氨酸-蘇氨酸-X’，R”-苯丙氨酸-精氨酸-色氨酸-R’-賴氨酸-脯氨酸-纈氨酸-X’，R”-組氨酸-苯丙氨酸-精氨酸-R’-賴氨酸-X，R”-組氨酸-苯丙氨酸-精氨酸-R’-賴氨酸-脯氨酸-X’，R”-組氨酸-苯丙氨酸-精氨酸-R’-賴氨酸-脯氨酸-蘇氨酸-X’，和R”-組氨酸-苯丙氨酸-精氨酸-R’-賴氨酸-脯氨酸-纈氨酸-X’，其中X代表羥基基團(tuán)，氨基基團(tuán)，一烷基或者二烷氨基基團(tuán)，烷氧集團(tuán)，氨基酸，帶1-8個(gè)，優(yōu)先帶1-3個(gè)以及更優(yōu)先帶1或者兩個(gè)氨基酸的低聚肽和其中R’代表帶1-10個(gè)氨基酸的低聚肽和R”選自以下族群氫，酰基基團(tuán)，乙?；鶊F(tuán)，氨基酸或者帶1-60個(gè)氨基酸的肽。
最優(yōu)先地，X’代表C末端被保護(hù)或不被保護(hù)的氨基酸基團(tuán)。進(jìn)一步地，X’的L構(gòu)型是優(yōu)先的。
R’是更優(yōu)先的選自以下族群1-5個(gè)低聚肽序列，還要更優(yōu)先的1-3個(gè)和最優(yōu)先的一或者兩個(gè)氨基酸殘基。進(jìn)一步地，R’氨基酸的L構(gòu)型是優(yōu)先的。
此外，N末端保護(hù)的或不保護(hù)的肽由1-40個(gè)氨基酸組成，優(yōu)先2-30，更優(yōu)先3-20，還要更優(yōu)先3-13，再要更優(yōu)先4-7，以及最優(yōu)先5或者6個(gè)是象殘基R”一樣有用。進(jìn)一步地，這是有好處的，如果殘基R”的至少一個(gè)氨基酸具有D構(gòu)型。這是更有好處的，如果10％和還要更有好處的，如果50％和最有好處的，如果多于90％R”的氨基酸具有D構(gòu)型。
一個(gè)特別優(yōu)先的通式R-賴氨酸-X的化合物是SYSMEHFRWGKPV。這也是優(yōu)先的，如果一個(gè)氨基酸，更優(yōu)先的，如果三個(gè)氨基酸，還要更優(yōu)先的，如果六個(gè)氨基酸以及最優(yōu)先的，如果多于10個(gè)氨基酸具有D構(gòu)型。
同樣優(yōu)先的是通式R-賴氨酸-X的化合物，其中公式R-賴氨酸-X的化合物由POMC肽家族衍生而來，這些肽具有抗炎癥和抗免疫抑制的特征。
公式賴氨酸-X的化合物，其中X代表羥基基團(tuán)，氨基基團(tuán)，烷氧基團(tuán)，脯氨酸或者脯氨酸-蘇氨酸是已知具有抗炎癥的特征(WO 02/064131)以及適合于在醫(yī)學(xué)設(shè)備上作為涂層合成物。賴氨酸或者蘇氨酸側(cè)鏈的衍生物也同樣是有可能不失去治療特征，鏈延長直到α-MSH的長度以及更提供衍生物廣泛的變化。
本發(fā)明的另一個(gè)方面涉及醫(yī)學(xué)產(chǎn)品的覆蓋方法。這樣的方法包括以下步驟a)提供一個(gè)醫(yī)學(xué)產(chǎn)品的表面，b)用涂層組分覆蓋所述的表面，此組分包含至少一個(gè)caspase蛋白酶抑制劑和/或至少一個(gè)公式R-賴氨酸-X的化合物。
覆蓋層包括caspase蛋白酶抑制劑可以被直接應(yīng)用在表面上，通常在醫(yī)學(xué)產(chǎn)品未覆蓋的表面上。這是有可能的，形成第一個(gè)覆蓋層包含生物上穩(wěn)定的和/或生物可降解的聚合物以及用包含所述caspase蛋白酶抑制劑和/或至少通式R-賴氨酸-X的一個(gè)化合物的第二涂層覆蓋所述第一涂層，其中R和X具有上面說明的意義。所述第一覆蓋層可以進(jìn)一步包括至少一種抗炎癥，抗增殖，抗血栓形成，和/或抗凝結(jié)的活性劑或者所述第一覆蓋層可以完全或者主要由所述抗炎癥，抗增殖，抗血栓形成，和/或抗凝結(jié)的活性劑組成。優(yōu)先地，抗炎癥，抗增殖，抗血栓形成，和/或抗凝結(jié)的活性劑如下所列用覆蓋方法使用。
進(jìn)一步地，這是有好處的，提供另一個(gè)涂層作為最外面的涂層在涂層之外或者之上，這個(gè)涂層包含所述至少一個(gè)caspase蛋白酶抑制劑和/或所述至少通式R-賴氨酸-X的一個(gè)化合物。一個(gè)涂層或者多個(gè)涂層包含一個(gè)生物學(xué)上穩(wěn)定的聚合物，一個(gè)生物可降解的聚合物，至少一個(gè)caspase蛋白酶抑制劑和/或至少通式R-賴氨酸-X的一個(gè)化合物，它們可以進(jìn)一步包含至少一種抗炎癥，抗增殖，抗血栓形成，和/或抗凝結(jié)的活性劑。
有可能地，涂層由一個(gè)或者兩個(gè)層構(gòu)成。涂層，優(yōu)先地最外面的涂層可以設(shè)計(jì)在某種程度上有能力允許至少一種抗炎癥，抗增殖，抗血栓形成，和/或抗凝結(jié)的活性劑和/或至少一個(gè)caspase蛋白酶抑制劑和/或至少通式R-賴氨酸-X的一個(gè)化合物有控制的釋放。
這是有好處的，包含至少通式R-賴氨酸-X的一個(gè)化合物和/或caspase蛋白酶抑制劑的涂層之下或者之上的涂層進(jìn)一步包含至少一種抗炎癥，抗增殖，抗血栓形成，和/或抗凝結(jié)的活性劑或者所述的涂層完全或者主要由所述的抗炎癥，抗增殖，抗血栓形成，和/或抗凝結(jié)的活性劑構(gòu)成。因此，兩個(gè)具體表現(xiàn)是優(yōu)先的a)第一層主要或完全由至少一種抗炎癥，抗增殖，抗血栓形成，和/或抗凝結(jié)的活性劑，優(yōu)先紅豆杉醇(紫杉酚)構(gòu)成，或者第一層主要由生物穩(wěn)定和/或生物可降解的聚合物，優(yōu)先選自下面提到的族群構(gòu)成，所述的層包含至少一種抗炎癥，抗增殖，抗血栓形成，和/或抗凝結(jié)的活性劑，優(yōu)先紅豆杉醇(紫杉酚)，以及第二層在所述第一層上形成，第一層包含所述caspase蛋白酶抑制劑和/或所述通式R-賴氨酸-X的化合物或者b)具體是其中第一和第二層互相交換。因此，有可能有一層包含或者主要包括所述至少一種抗炎癥，抗增殖，抗血栓形成，和/或抗凝結(jié)的活性劑。這也是有可能的，至少一種抗炎癥，抗增殖，抗血栓形成，和/或抗凝結(jié)的活性劑合并入至少一層，這層包含生物穩(wěn)定和/或生物可降解的聚合物和/或至少通式R-賴氨酸-X的一個(gè)化合物和/或一個(gè)caspase蛋白酶抑制劑。進(jìn)一步地，有可能有不同的抗炎癥，抗增殖，抗血栓形成，和/或抗凝結(jié)的活性劑在不同的層中或者有相同的抗炎癥，抗增殖，抗血栓形成，和/或抗凝結(jié)的活性劑在不同的層中。所述活性劑和/或所述通式R-賴氨酸-X的化合物和/或所述caspase蛋白酶抑制劑可以從不同的層中以不同的釋放率或者從相同的層中以不同的釋放率釋放。釋放率是通過使用的聚合物的特征調(diào)節(jié)和控制的。
另一種優(yōu)先體現(xiàn)在包含層，這層只由至少一種抗炎癥，抗增殖，抗血栓形成，和/或抗凝結(jié)的活性劑和至少通式R-賴氨酸-X的一個(gè)化合物和/或至少一個(gè)caspase蛋白酶抑制劑構(gòu)成。有兩層的具體表現(xiàn)是有一種生物穩(wěn)定和/或生物可降解聚合物層在所述層之下或者之上，這層只由至少一種抗炎癥，抗增殖，抗血栓形成，和/或抗凝結(jié)的活性劑和至少通式R-賴氨酸-X的一個(gè)化合物和/或至少一個(gè)caspase蛋白酶抑制劑構(gòu)成。
術(shù)語“生物穩(wěn)定和生物可降解聚合物意味著或者至少一種生物穩(wěn)定聚合物和至少一種生物可降解聚合物的合成物或者至少一種嵌段聚合物由生物穩(wěn)定序列和生物可降解序列構(gòu)成。
術(shù)語“主要”意味著至少85％，優(yōu)先至少90％，更優(yōu)先超過95％，還更優(yōu)先至少98％，以及最優(yōu)先超過99％。
包含所述caspase蛋白酶抑制劑和/或所述通式R-賴氨酸-X的化合物和/或所述抗炎癥，抗增殖，抗血栓形成，和/或抗凝結(jié)的活性劑的層可以直接在醫(yī)學(xué)產(chǎn)品一般不血相容的表面上形成，或者在使用于醫(yī)學(xué)產(chǎn)品表面的第一層上。在包含所述caspase蛋白酶抑制劑和/或所述通式R-賴氨酸-X的化合物和/或所述抗炎癥，抗增殖，抗血栓形成，和/或抗凝結(jié)的活性劑的層之上可以形成另外一層。
所述最外層優(yōu)先包含生物學(xué)上穩(wěn)定的和/或生物可降解的聚合物以及更優(yōu)先主要由生物學(xué)上穩(wěn)定的和/或生物可降解的聚合物構(gòu)成。此外，所述最外層可以包含其它抗炎癥，抗增殖，抗血栓形成，和/或抗凝結(jié)的活性劑，這些活性劑可以相同與或不同與在所述最外層之下層中使用的活性劑。另一個(gè)優(yōu)先的體現(xiàn)是只在最外層包含一種抗炎癥，抗增殖，抗血栓形成，和/或抗凝結(jié)的活性劑。
醫(yī)學(xué)產(chǎn)品的表面可以由金屬組成，例如不銹鋼或者鈦，鉻，鎢，釩，黃金，銅，鎳鈦諾，鉬，合金，陶瓷，礦物，硅酸鹽材料比如玻璃，自然材料比如組織，細(xì)胞，生物聚合物，合成聚合物或者塑料例如特氟綸(聚四氟乙烯)，PCV(聚氯乙烯)，聚對(duì)苯二甲酸乙二醇酯，聚乙烯，聚丙烯，聚酰胺，聚亞安酯，聚碳酸酯，聚砜，聚芳砜，聚醚砜，修飾的聚砜，修飾的聚芳砜，修飾的聚醚砜，親水的聚砜，厭水的聚砜，聚醚醚酮，硅樹脂，聚苯乙烯，聚甲基丙烯酸甲酯，聚偏二氟乙烯以及上述塑料和合成聚合物的混合物或者共聚物。
作為生物穩(wěn)定聚合物可以使用聚丙烯酸，聚丙烯酸脂，聚甲基丙烯酸甲酯，聚丁基異丁烯酸脂，聚丙烯酰胺，聚丙烯腈，聚酰胺，聚醚酰胺，聚乙烯胺，聚酰亞胺，聚碳酸酯，聚碳乙烷，聚乙烯酮，聚乙烯鹵，聚亞乙烯鹵，聚乙烯醚，芳香聚乙烯，聚乙烯酯，聚乙烯吡咯烷酮，聚甲醛，聚乙烯，聚丙烯，聚四氟乙烯，聚亞安酯，聚烯烴-人造橡膠，聚異丁烯，EPDM-橡膠，氟硅氧烷，羧甲基，殼聚糖，聚對(duì)苯二甲酸乙二醇酯，聚戊酸酯，羧甲基纖維素，纖維素，人造纖維，人造纖維三乙酸，乙酸纖維素丁酸酯，乙烷乙烯乙酸-共聚物，聚砜及其修飾近似物，環(huán)氧樹脂，ABS樹脂，EPDM-橡膠，硅樹膠例如聚硅氧烷，聚乙烯鹵，以及共聚物，纖維素醚，纖維素三醋酸，殼聚糖及共聚物和/或上述聚合物的混合物。
生物可降解聚合物可以選自以下族群聚戊內(nèi)酯，聚丁位正戊基戊內(nèi)酯，聚丙交酯，聚乙交酯，聚丙交酯和聚乙交酯的共聚物，聚-ε-己內(nèi)酯，聚羥基丁酸，聚羥基丁酸酯，聚羥基戊酸酯，聚羥基丁酸酯-共-戊酸酯，聚(1，4-二惡烷-2，3-二酮)，聚(1，3-二惡烷-2-酮)，聚對(duì)二惡烷，聚酐例如馬來酐，多羥基異丁烯酸脂，纖維蛋白，氰基丙烯酸酯，聚二甲基丙烯酸己內(nèi)酯，聚-β-馬來酸，聚丁基丙烯酸己內(nèi)酯，來自低聚二醇己內(nèi)酯和低聚二醇二氧雜環(huán)己烷的嵌段聚合物，來自聚乙二醇(PEG)和聚丁烯對(duì)苯二酸酯的醚酯嵌段聚合物，對(duì)苯二酸酯，聚樞內(nèi)酯，聚乙醇酸三甲基碳酸酯，聚己內(nèi)酯-乙交酯，聚(γ-乙烷谷氨酸酯)，聚(DTH-亞氨碳酸酯)，聚(DTE-共-DT-碳酸酯)，聚(雙酚A-亞氨碳酸酯)，聚正酯，聚乙醇酸三甲基碳酸酯，聚三甲基碳酸酯，聚亞氨碳酸酯，聚(N-乙烯)吡咯烷酮，聚乙烯醇，聚酯胺，乙醇酸聚酯，聚磷酸酯，聚膦腈，聚[p-羧基苯氧基)丙烷]，聚羥基戊酸，聚酐，聚乙撐氧-環(huán)氧丙烷，軟聚氨酯橡膠，主鏈上帶有氨基酸殘基的軟聚氨酯橡膠，聚醚酯例如聚乙撐氧，聚草酸烯，聚正酯以及其共聚物，角叉膠，纖維蛋白原，淀粉，膠原質(zhì)，蛋白質(zhì)為基礎(chǔ)的聚合物，聚氨基酸，合成的聚氨基酸，玉米朊，被修飾的玉米朊，聚羥鏈烷酸酯，果膠酸，光化學(xué)酸，被修飾的和未被修飾的纖維蛋白和酪蛋白，硫酸羧甲基，白蛋白，透明質(zhì)酸，類肝素硫酸，肝磷脂，硫酸軟骨素，右旋糖苷，β-環(huán)式糊精，聚乙二醇和/或聚丙烯乙二醇的共聚物，阿拉伯樹膠，瓜爾豆，明膠，膠原，膠原-N-羥基琥珀酰亞胺，上述生物可降解聚合物的衍生物，修飾物，共聚物和/或混合物。
抗炎癥，抗增殖，抗血栓形成，和/或抗凝結(jié)的活性劑可以選自以下族群西羅莫司(雷怕霉素)，依維莫司，吡美莫司，生長激素抑制素，他克莫司，羅紅霉素，敦耐霉素，子囊霉素，巴菲洛霉素(bafilomycin)，紅霉素，麥迪霉素，交沙霉素，肯卡那霉素(concanamycin)，克拉霉素，醋竹桃霉素，多葉霉素，西立伐他汀，辛伐他汀，洛伐他汀，氟伐他汀，羅蘇伐他汀，阿托伐他汀，普伐他汀，匹伐他汀，長春堿，長春新堿，長春地辛，長春瑞濱，依托泊苷，替尼泊苷，尼莫司汀，卡莫司汀，洛莫司汀，環(huán)磷酰胺，4-羥基環(huán)磷酰胺，雌莫司汀，美法侖，異環(huán)磷酰胺，苯丁酸氮芥，苯達(dá)莫司汀，達(dá)卡巴嗪，白消安，丙卡巴肼，曲奧舒凡，替莫唑胺，塞替派，柔紅霉素，多柔比星，阿柔比星，表柔比星，米托蒽醌，伊達(dá)比星，博來霉素，絲裂霉素，放線菌素D，甲氨蝶呤，氟達(dá)拉濱，氟達(dá)拉濱-5，二氫磷(32P)酸鈉，克拉屈濱，巰嘌呤，硫鳥嘌呤，阿糖胞苷，氟尿嘧啶，吉西他濱，卡培他濱，多西紫杉醇，順羧酸鉑，順鉑，奧沙利鉑，安丫啶，伊立替康，托泊替康，羥基脲，米替福新，噴司他丁，阿地白介素，維A酸，門冬酰胺酶，培門冬酶，阿那曲唑，依西美坦，來曲唑，福美坦，氨魯米特，多柔比星，阿奇霉素，螺旋霉素，西法安汀，smc增殖抑制劑-2w，艾普西隆A和B，米托蒽醌，硫唑嘌呤，霉酚酸酯，反義c-myc，反義b-myc，白樺脂酸，喜樹堿，PI-88(硫酸化的低聚糖)，黑素細(xì)胞刺激激素(α-MSH)，活性蛋白C，IL 1-β-抑制劑，胸腺素α-1，反丁烯二酸和它的酯，卡泊三醇，他卡西醇，拉帕醇，β-拉帕醇，鬼臼毒素，樺木素，鬼臼酸2-乙基酰肼，莫拉司亭(rhuGM-CSF)，聚乙二醇化干擾素α-2b，拉諾司亭(r-HuG-CSF)，非格司亭，聚乙二醇，aginex，納-尿-肽，達(dá)卡巴嗪，巴利昔單抗，達(dá)(克)珠單抗，選擇蛋白(細(xì)胞因子對(duì)抗物)，CETP抑制劑，鈣粘蛋白，細(xì)胞分裂素抑制劑，COX-2-抑制劑，NFkB，血管肽素，環(huán)丙沙星，喜樹堿，氟拉西汀(Fluroblastin)，單克隆抗體，其抑制肌細(xì)胞增殖，bFGF抗體，普羅布考，前列腺素，1，11-二甲氧基鐵屎米-6-酮，1-羥基-11-甲氧基鐵屎米-6-酮，司克來亭(scopolectin)，秋水仙素，NO供體例如硝酸季戊四醇酯和辛地酮亞胺(syndoeimines)，S-亞硝基衍生物，他莫昔芬，星孢素(staurosporin)，β-雌二醇，α-雌二醇，雌三醇，雌酮，乙炔雌二醇，磷雌酚，甲羥孕酮，雌二醇環(huán)戊丙酸鹽，雌二醇苯甲酸脂，曲尼司特，卡美巴考啉(kamebakaurin)以及其他萜類化合物，維拉帕米，其應(yīng)用與癌癥的治療，酪氨酸致活酶抑制劑(酪氨酸磷酸化抑制劑)，環(huán)胞素A，紫杉醇及其衍生物，例如6-α-羥基紫杉醇，漿果赤霉素，多西紫杉醇，人工合成的大環(huán)二氧化三碳低聚物(MCS)及其衍生物，單苯保泰松，阿西美辛，雙氯芬酸，氯那唑酸，氨苯砜，o-氨基甲酰苯氧基乙酸，利多卡因，酮洛芬，甲芬那酸，吡羅昔康，美洛昔康，磷酸氯喹，青霉胺，腫瘤抑素，阿瓦斯丁，D-24851，SC-58125，羥氯喹，金諾芬，金硫蘋果酸納，奧沙西羅，塞來考昔，β-谷固醇，腺苷蛋氨酸，麥替卡因，聚乙二醇單十二醚，諾香草胺，左薄荷腦，苯佐卡因，七葉皂苷，艾力替新，D-24851(calbiochem)，秋水仙酰胺，秋水仙酰胺A-E，茚達(dá)諾辛(indanocine)，諾考達(dá)唑，S100蛋白質(zhì)，桿菌肽，玻璃黏附蛋白受體對(duì)抗物，氮卓斯汀，胍基環(huán)化酶胍基刺激素，金屬蛋白水解酶-1和-2的抑制劑，自由核酸，混合入病毒遞質(zhì)的核酸，DNA和RNA片段，纖維蛋白溶酶原激活質(zhì)抑制物-1，纖維蛋白溶酶原激活質(zhì)抑制物-2，IL-1β抑制劑，反義寡核苷酸，VEGF(血管內(nèi)皮(細(xì)胞)生長因子)抑制劑，IGF-1，抗生素例如頭孢羥氨芐，頭孢唑林，頭孢克洛，頭霉噻吩，妥布拉霉素，慶大霉素，青霉素類如雙氯青霉素，苯唑西林，磺胺類藥物，甲硝唑，抗血栓藥如阿加曲班，阿司匹林，阿昔單抗，合成的抗凝血酶，比伐盧定，香豆定，依諾肝素，脫硫酸和N-載乙?；嗡兀M織纖維蛋白溶酶原激活劑，GpIIb/IIIa血小板膜受體，Xa因子抑制劑抗體，肝素，水蛭素，r-水蛭素，PPACK，精蛋白酶，2-噻唑烷-1，4-二羥基鈉鹽(硫酸鈉)，尿激酶原，鏈激酶，華法林，尿激酶，血管擴(kuò)張劑例如雙嘧達(dá)莫，曲匹地爾，硝普鹽，PDGF對(duì)抗物例如三唑并嘧啶和噻拉明(seramin)，ACE抑制劑例如卡托普利，西拉普利，賴諾普利，依那普利，氯沙坦，硫代蛋白酶抑制劑，依前列醇，伐哌前列素，干擾素α，β和γ，組胺對(duì)抗物，5-羥色胺阻滯劑，編程性細(xì)胞死亡抑制劑，編程性細(xì)胞死亡調(diào)節(jié)劑例如p65，NF-kB或Bcl-xL反義寡核苷酸，Halofuginon，鹵夫酮，硝苯地平，維生素B1，B2，B6和B12，葉酸，特拉呢拉西特(tranirast)，嗎多明，茶多酚，表兒茶酸的棓酸鹽，表沒食子兒茶素的棓酸鹽，乳香脂酸及其衍生物，來氟米特，阿那白滯素，依那西普，柳氮磺吡啶，依托泊苷，雙氯西林，四環(huán)素，曲安西龍，絲裂霉素，普魯卡因胺，D24851，SC-58125，維A酸，奎尼丁，丙吡胺，氟卡尼，普羅帕酮，索他洛爾，鹽酸美沙酮，天然的或者人工合成的類固醇，例如環(huán)落地生根素A，衣諾脫二醇(inotodiol)，馬奎爾糖苷A(maquiroside A)，哈喇秦糖苷(ghalakinoside)，曼森南天竹堿(mansonine)，斯坦卜糖苷(strebloside)，氫化可的松，倍他米松，地塞米松，非甾體抗炎藥(NSAIDS)例如非諾洛芬，布洛芬，吲哚美辛，甲氧萘丙酸，保泰松以及其他抗病毒劑例如阿昔洛維，更昔洛韋和齊多夫定，抗真菌藥例如克霉唑，氟胞嘧啶，灰黃霉素，酮康唑，咪康唑，制霉菌素，特比萘芬，抗瘧劑例如氯喹，甲氟喹，奎寧，天然的萜類化合物例如西波秦皮素葡糖甙(hippocaesculin)，玉蕊精醇-C21-萜類化合物，14-去氫阿咯思泰啉(14-dehydro agrostistachin)，阿咯思科啉(agroskerin)，阿咯思泰啉(agrostistachin)，17-脫羥基阿咯思泰啉(17-hydroxyagrostistachin)，鷗瓦特二交酯(ovatodiolids)，4，7-氧環(huán)阿尼色梅立酸(4，7-oxycycloanisomelic acid)，巴查立三萜(baccharinoids)B1，B2，B3和B7，土貝母皂甙，鴉膽子醇A，B和C，抗痢鴉膽子甙C，鴉膽子糖苷N和P，異去氧地膽草素，脫門分品A和B(tomenphantopin A and B)，二羥丙茶堿(coronarin)A，B，C和D，熊果酸，西皮他可酸A(hyptatic acid A)，澤渥萜，異德國鳶尾醛，梅他佛立奧(maytenfoliol)，艾佛散丁A，艾思散寧A和B(excisanin A和B)，長栲利素B，黃花香茶菜素C，卡美寶寧(kamebaunin)，路卡梅寧A和B，13，18-脫水-6-α-異戊烯酰查杷林，美麗紅豆杉素A和B，雷咯尼醇，雷公藤內(nèi)酯，磁麻甙，毒毛旋花(子)甙元，馬兜鈴酸，阿諾蝶呤(anopterin)，羥基阿諾蝶呤(hydroxyanopterin)，銀蓮花素，原白頭翁素，黃連素，氯化柯立不啉(cheliburin chloride)，西克霉素(cictoxin)，西諾印防己毒素(sinococuline)，本波雷思它丁A和B(bombrestatin A and B)，庫拉異黃酮A(cudraisoflavone A)，姜黃，二氫光花椒堿，氯化光葉花椒堿，12-β-羥基孕二亞乙基三胺-3，20-二酮(12-β-hydroxypregnadien-3，20-dione)，白果酚，銀杏酚，銀杏酸，錦雞菊素，大尾搖辛，大尾搖辛-N-氧化物，毛果天芥菜堿，衣諾脫二醇(inotodiol)，糖苷1a，鬼臼毒素，爵床脂素A和B，拉力亭(larreatin)，馬咯特啉(malloterin)，馬咯特色原烷醇(mallotochromanol)，異丁酰馬咯特色原烷醇(isobutyrylmallotochromanol)，馬奎爾糖苷A(maquiroside A)，馬奇安亭A(marchantin A)，美登素，萊克里二辛(lycoridicin)，石蒜西定，盤克拉特思坦丁(pancratistatin)，鵝掌揪堿，氧化黃心樹寧堿(oxoushinsunine)，馬兜鈴內(nèi)酰胺A II，百思帕森諾立丁(bisparthenolidine)，杠柳甙A，哈喇秦糖苷(ghalakinoside)，熊果酸，脫氧普思咯思婆明(deoxypsorospermin)，菲克盧賓(psycorubin)，蓖麻毒素A，血根堿，曼烏小麥酸(manwu wheat acid)，甲基珍珠梅甙，思法立克咯門敏(sphatheliachromen)，思地唑非林(stizophyllin)，曼森南天竹堿(mansonine)，斯坦卜糖苷(strebloside)，東非馬錢堿，二氫烏撒巴林(dihydrousambaraensine)，羥基烏撒巴林(hydroxyusambarensine)，思吹克諾噴他明(strychnopentamine)，思吹克諾非林(strychnophylline)，烏撒巴林，黃連素，鵝掌揪堿，氧化黃心樹寧堿，西瑞香素，落葉松脂素，落葉松脂素，丁香脂素，傘形酶蛋白，阿咯蒙森(afromoson)，乙?；S斯米酮B(acetylvismione B)，去乙?；S斯米酮A(bisparthenolidine)，維斯米酮A和B(vismione A and B)以及硫磺包含氨基酸例如胱氨酸及其鹽和/或上述活性劑的混合物。
本發(fā)明的另一方面涉及根據(jù)上面描述的涂層方法之一可得到的醫(yī)學(xué)產(chǎn)品。最優(yōu)先地，涂層的醫(yī)學(xué)產(chǎn)品是支架。
優(yōu)先的抗炎癥，抗增殖，抗血栓形成，和/或抗凝結(jié)的活性劑是他克莫司，吡美莫司，PI 88，紫杉醇及其衍生物，曲匹地爾，α-和β-雌二醇，2-噻唑烷-2，4-二羥基酸及其鹽，優(yōu)先地鈉鹽，大環(huán)二氧化三碳(MCS)及其衍生物，西羅莫司，反丁烯二酸及其酯，活性蛋白C，IL 1-β-抑制劑，黑素細(xì)胞刺激激素(α-MSH)，胱氨酸，艾力替新，Bohemin，茚達(dá)諾辛(indanocine)，秋水仙酰胺及其衍生物，甲硫氨酸及其鹽和/或上述活性劑的混合物。
Taxol(紫杉醇)是最優(yōu)先的抗炎癥，抗增殖，抗血栓形成，和/或抗凝結(jié)的活性劑。
具體實(shí)施例方式
根據(jù)本發(fā)明，支架覆蓋形式的方法是使用動(dòng)物模型研究的。
豬冠動(dòng)脈中程序性死亡的平滑肌細(xì)胞數(shù)目的增加可以在氣球血管成形術(shù)30分鐘后被探測(cè)。其后，動(dòng)脈外膜和內(nèi)膜被分開分析以及程序性死亡率根據(jù)不同時(shí)間變化被測(cè)量。平滑肌細(xì)胞，炎癥細(xì)胞和外膜的纖維原細(xì)胞程序性死亡的最高水平分別在PTCA(經(jīng)皮穿刺腔內(nèi)冠狀動(dòng)脈成形術(shù))之后的18個(gè)小時(shí)，6個(gè)小時(shí)和7天被探測(cè)。在不同細(xì)胞類型和氣球血管成形術(shù)和支架移植后的血管壁中的程序性死亡率的定量測(cè)定如下操作重量在20和30kg之間的馴養(yǎng)的豬用正常的飼料喂養(yǎng)，在整個(gè)測(cè)試中不附加脂肪增補(bǔ)物。豬在晚上被禁食并且其后給予鎮(zhèn)靜劑30mg每公斤體重的可他命，12mg azepromazin和1安瓿的rubinol。在插管前，5mg/kg戊硫代巴比妥被給予。在氣管內(nèi)插管后，豬被給予人造呼吸，使用的是20％純氧和80％正?？諝獾幕旌衔铩夤軆?nèi)插管是這樣一個(gè)程序，一個(gè)管子通過嘴被插入氣管(從嘴到肺大的通氣道)。在大藥丸中加入0.1mg芬太奴和2.5mg azepromazin后，麻醉用給予0.08mg/kg芬太奴(灌輸0.05mg/ml)維持。為了抗體保護(hù)，奴弗卡因-青霉素G200,000IU/ml和二氫硫酸鏈霉素(200mg/10kg體重)被肌肉內(nèi)給予。
之后，頸總動(dòng)脈的動(dòng)脈切開術(shù)在消毒條件下進(jìn)行，一個(gè)7F管道被引入。加上，動(dòng)脈血壓和體溫在整個(gè)手術(shù)中被測(cè)量。此外，血液氣體和酸-堿-新陳代謝通過動(dòng)脈血液樣本對(duì)照。在給予200IU/kg體重肝磷脂和250mg/kg阿司匹林之后，一個(gè)7F導(dǎo)管被插入大動(dòng)脈。附加的每小時(shí)400IU肝磷脂通過灌輸給予。在冠動(dòng)脈內(nèi)加入200μg硝化甘油之后，左和右冠動(dòng)脈的血管成形術(shù)通過使用非離子的對(duì)照劑進(jìn)行。
左動(dòng)脈系統(tǒng)的一個(gè)動(dòng)脈(或者室間或者旋肱)被隨機(jī)選擇做支架移植和另一個(gè)動(dòng)脈用做氣球血管成形術(shù)。右動(dòng)脈被用做未被處理的對(duì)照導(dǎo)管。
氣球有至少氣球-導(dǎo)管-比率1.3∶1用做氣球血管成形術(shù)，在過度膨脹是為了損傷動(dòng)脈。導(dǎo)管被擴(kuò)大(膨脹)三倍，在同一位置30秒和6壓強(qiáng)下(大氣壓強(qiáng))。
之后，15mm長的支架被根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)方法移植。支架的直徑選擇方式是支架-導(dǎo)管-比率是1.1∶1。在移植中，支架氣球被吹起三次30秒，應(yīng)用6巴的壓強(qiáng)。
在處理血管的對(duì)照血管成形術(shù)進(jìn)行后，右冠狀動(dòng)脈的血管成形術(shù)被執(zhí)行。接著，導(dǎo)液管和導(dǎo)管被移開和在動(dòng)脈切開地方綁上后，筋膜和皮膚被縫合。之后，麻醉停止以及抗生素甲氧芐氨嘧啶和磺胺鄰二甲氧嘧啶與止痛藥安乃近一起被給予。此外，動(dòng)物剩余存活時(shí)間內(nèi)在插入之后，250mg阿司匹林被每天通過孔(嘴)給予，為了防止支架引起的急性的或者亞急性的血栓癥。
4個(gè)星期后，左和右冠狀動(dòng)脈系統(tǒng)對(duì)照的血管成形術(shù)形成，支架和加寬氣球處理地方的血管內(nèi)的超聲波檢查可以操作。
其后，豬通過靜脈注射10ml飽和氯化鉀溶液被安樂死。豬的心被保留并用氯化鈉溶液被洗凈。接著，使用緩沖液甲醛(4％)和大約100-110mmHG灌注壓力進(jìn)行壓力固定。隨后，心的冠狀動(dòng)脈被切開，在緩沖液甲醛(2％)以及之后在石蠟中保存24小時(shí)。在保存導(dǎo)管在石蠟之前，支架使用顯微鏡移出，為了防止導(dǎo)管的損傷。
在三個(gè)連續(xù)實(shí)驗(yàn)中，在測(cè)試階段通過灌注氣球依靠聚腔導(dǎo)管的幫助，caspase蛋白酶抑制劑酪氨酸-纈氨酸-丙氨酸-天冬氨酸(YVAD)或者SYSMEHFRWGKPV或者Ac-His-Phe-Arg-Lys-Pro-Asp-CMK被局部給予。所述導(dǎo)管由一個(gè)灌注連接器，一個(gè)導(dǎo)管體和包含4個(gè)隔離腔的末梢灌注區(qū)域組成。
一組測(cè)試動(dòng)物得到caspase蛋白酶抑制劑(YVAD or SYSMEHFRWGKPV orAc-His-Phe-Arg-Lys-Pro-Asp-CMK)，同時(shí)另一組保持未處理作為對(duì)照組。內(nèi)膜增殖可通過IVUS肉眼評(píng)估，但分析是在氣球血管成形術(shù)和支架移植的4個(gè)星期后。所有IVUS的測(cè)量方法是離線評(píng)價(jià)，依靠計(jì)算機(jī)為基礎(chǔ)的IVUS分析系統(tǒng)。IVUS分析定性包括斑合成物的評(píng)價(jià)(分別硬或軟，血栓，撕裂斑或者石灰化)以及離心率。內(nèi)膜增殖是通過3個(gè)值的平均數(shù)計(jì)算。此外還進(jìn)行了組織學(xué)上的研究。為此，動(dòng)脈每個(gè)節(jié)段的切口用蘇木精-曙紅和Verhoeff-van-Gieson染色，為了顯示通過插入引起的導(dǎo)管損傷。
導(dǎo)管損傷的定量分析和支架移植的內(nèi)膜反應(yīng)通過使用切口染色進(jìn)行，染色根據(jù)Verhoeff-van-Gieson是使用Schwartz et al創(chuàng)造的方法。根據(jù)由于電線引起的損傷的程度以及所述電線在血管壁組織學(xué)上的涂層位置，支架的每個(gè)電線被評(píng)價(jià)和分類。
為了鑒定巨噬細(xì)胞和平滑肌細(xì)胞，老鼠的抗兔巨噬細(xì)胞抗體(RAM 11，DAKO Corp.)和老鼠的抗兔平滑肌細(xì)胞α-肌動(dòng)蛋白單克隆抗體被使用。增通過用抗PCNA(增生細(xì)胞核抗原，clone PC 10，DAKO)的老鼠抗體標(biāo)志切口，生的細(xì)胞被檢測(cè)。為此，組織與第一抗體一起在37℃在潮濕室里培養(yǎng)1個(gè)小時(shí)。使用一個(gè)間接的生物素-streptavadin-山葵-過氧化物酶(Amersham)或者堿性磷酸酶(Sigma)方法完成抗體的結(jié)合。方法的使用根據(jù)供應(yīng)商的說明書。
最終，程序性死亡細(xì)胞的原位評(píng)價(jià)完成了。為此，末端轉(zhuǎn)移酶調(diào)節(jié)的dUTP缺口末端標(biāo)志工具包(TUNEL)，一個(gè)用于顯示原位程序性死亡的工具包，根據(jù)供應(yīng)商的說明書被使用。其中，在染色固定和滲透后，為了分裂DNA和得到DNA片段，陽性對(duì)照用DNAse處理。同時(shí)，陰性對(duì)照用染色液染色(沒有末端轉(zhuǎn)移酶)代替TUNEL反應(yīng)混合物?？贵w的結(jié)合通過對(duì)二氨基聯(lián)苯胺可視。與二氨基聯(lián)苯胺的反應(yīng)產(chǎn)生褐色。
可以證明，血管的上述部分，如果用程序性死亡抑制劑處理(在本例中YVAD or SYSMEHFRWGKPV or Ac-His-Phe-Arg-Lys-Pro-Asp-CMK)，顯示斑體積的減少大約1/6到1/7，斑面積最大的減少到大約1/3以及支架面(與引入的支架有接觸的面積)的減少到大約30％-40％，與從陰性對(duì)照組得到的數(shù)據(jù)比較。每個(gè)實(shí)驗(yàn)組，陽性和陰性對(duì)照組用7只豬。
上面引用的出版物引入?yún)⒖紩恐小?br> 從前面的描述，本發(fā)明的附加體現(xiàn)會(huì)立刻結(jié)合在熟練于最新技術(shù)的人員上。所有這樣的體現(xiàn)是有意包含這里揭露的發(fā)明以及定義在前面的權(quán)利要求中。
權(quán)利要求
1.一種藥物組分，其特征在于其包括一個(gè)caspase蛋白酶抑制劑和/或一個(gè)公式R-賴氨酸-X的化合物以及至少一種藥物學(xué)上可接受的載體，基質(zhì)聚合物，溶劑和/或稀釋液。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的藥物組分，其特征在于其中caspase蛋白酶抑制劑選自以下族群芐氧基羰基-纈氨酸-丙氨酸-天冬氨酸-氟甲基酮，異亮氨酸-谷氨酸-蘇氨酸-天冬氨酸-氟甲基酮，t-丁氧基羰基-天冬氨酸(OCH3)-CH2F，叔丁氧羰基-天冬氨酰(OMe)-氟甲基酮(BAF)和叔丁氧羰基-天冬氨酸-fmk(BD)，BD-fmk，Z-FA-fmk，z-VAD，z-纈氨酸-丙氨酸-天冬氨酸-氟甲基酮(z-VAD-fmk)，IAP，芐氧基羰基-纈氨酸-丙氨酸-天冬氨酸(OCH3)-CH2-氟甲基酮，芐氧基羰基-異亮氨酸-谷氨酸(OCH3)-蘇氨酸-天冬氨酸(OCH3)-CH2--氟甲基酮，Z-AAD-fmk，DEVD，Ac-DEVD-CHO，Z-天冬氨酸-CH2-DCB，乙?；?天冬氨酸-谷氨酸-纈氨酸-天冬氨酸-氟甲基酮(Ac-DEVD-FMK)，YVAD，乙酰基-酪氨酸-纈氨酸-丙氨酸-天冬氨酸-氯甲基酮(Ac-YVAD-CMK)，z-DEVD-fmk，芐氧基羰基-天冬氨酸(OCH3)-谷氨酸(OCH3)-纈氨酸-天冬氨酸(OCH3)-CH2-氟甲基酮，z-IETD-fmk，Z-VDVAD-fmk，CrmA，Bcl-2，Diap1，cIAP1，cIAP2，XIAP和p35。
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的藥物組分，其特征在于其中caspase蛋白酶抑制劑是與氯甲基酮共價(jià)結(jié)合的二，三，四或者五肽。
4.根據(jù)權(quán)利要求3所述的藥物組分，其特征在于其中caspase蛋白酶抑制劑是酪氨酸-纈氨酸-丙氨酸-天冬氨酸(YVAD)。
5.根據(jù)權(quán)利要求1所述的藥物組分，其特征在于其中公式R-賴氨酸-X的化合物選自以下族群其中X代表一個(gè)羥基基團(tuán)，一個(gè)氨基基團(tuán)，一個(gè)單烷或雙烷氨基基團(tuán)，一個(gè)烷氧基基團(tuán)，一個(gè)氨基酸，一個(gè)含1-10個(gè)氨基酸的低聚肽以及其中R選自以下族群氫，酰基基團(tuán)，乙?；鶊F(tuán)，一個(gè)氨基酸或者一個(gè)含2-70個(gè)氨基酸的肽。
6.根據(jù)權(quán)利要求5所述的藥物組分，其特征在于其中R代表含8-12個(gè)氨基酸的肽。
7.根據(jù)權(quán)利要求5所述的藥物組分，其特征在于其中R代表一個(gè)包含四肽組氨酸-苯丙氨酸-精氨酸-色氨酸的肽。
8.根據(jù)權(quán)利要求5所述的藥物組分，其特征在于其中R代表一個(gè)包含三肽苯丙氨酸-精氨酸-色氨酸的肽。
9.根據(jù)權(quán)利要求5所述的藥物組分，其特征在于其中R代表一個(gè)包含三肽組氨酸-苯丙氨酸-精氨酸的肽。
10.根據(jù)權(quán)利要求5所述的藥物組分，其特征在于其中R代表一個(gè)肽，這個(gè)肽包含至少一個(gè)具有D構(gòu)型的氨基酸。
11.根據(jù)權(quán)利要求5所述的藥物組分，其特征在于其中R代表一個(gè)肽，這個(gè)肽包含具有D構(gòu)型的氨基酸。
12.根據(jù)權(quán)利要求5所述的藥物組分，其特征在于其中R代表一個(gè)在氨基末端有一個(gè)酰基基團(tuán)或者乙?；鶊F(tuán)的肽。
13.根據(jù)權(quán)利要求5所述的藥物組分，其特征在于其中X代表一個(gè)選自以下族群的低聚肽脯氨酸，脯氨酸-蘇氨酸，脯氨酸-纈氨酸，脯氨酸-丙氨酸，脯氨酸-精氨酸，脯氨酸-天冬酰胺，脯氨酸-天冬氨酸，脯氨酸-半胱氨酸，脯氨酸-谷氨酸，脯氨酸-谷氨酰胺，脯氨酸-甘氨酸，脯氨酸-組氨酸，脯氨酸-異亮氨酸，脯氨酸-亮氨酸，脯氨酸-賴氨酸，脯氨酸-甲硫氨酸，脯氨酸-苯丙氨酸，脯氨酸-脯氨酸，脯氨酸-絲氨酸，脯氨酸-色氨酸，脯氨酸-蘇氨酸-蘇氨酸，脯氨酸-蘇氨酸-纈氨酸，脯氨酸-蘇氨酸-丙氨酸，脯氨酸-蘇氨酸-精氨酸，脯氨酸-蘇氨酸-天冬酰胺，脯氨酸-蘇氨酸-天冬氨酸，脯氨酸-蘇氨酸-半胱氨酸，脯氨酸-蘇氨酸-谷氨酸，脯氨酸-蘇氨酸-谷氨酰胺，脯氨酸-蘇氨酸-甘氨酸，脯氨酸-蘇氨酸-組氨酸，脯氨酸-蘇氨酸-異亮氨酸，脯氨酸-蘇氨酸-亮氨酸，脯氨酸-蘇氨酸-賴氨酸，脯氨酸-蘇氨酸-甲硫氨酸，脯氨酸-蘇氨酸-苯丙氨酸，脯氨酸-蘇氨酸-脯氨酸，脯氨酸-蘇氨酸-絲氨酸，脯氨酸-蘇氨酸-色氨酸，脯氨酸-纈氨酸-蘇氨酸，脯氨酸-纈氨酸-纈氨酸，脯氨酸-纈氨酸-丙氨酸，脯氨酸-纈氨酸-精氨酸，脯氨酸-纈氨酸-天冬酰胺，脯氨酸-纈氨酸-天冬氨酸，脯氨酸-纈氨酸-半胱氨酸，脯氨酸-纈氨酸-谷氨酸，脯氨酸-纈氨酸-谷氨酰胺，脯氨酸-纈氨酸-甘氨酸，脯氨酸-纈氨酸-組氨酸，脯氨酸-纈氨酸-異亮氨酸，脯氨酸-纈氨酸-亮氨酸，脯氨酸-纈氨酸-賴氨酸，脯氨酸-纈氨酸-甲硫氨酸，脯氨酸-纈氨酸-苯丙氨酸，脯氨酸-纈氨酸-脯氨酸，脯氨酸-纈氨酸-絲氨酸和脯氨酸-纈氨酸-色氨酸。
14.根據(jù)權(quán)利要求13所述的藥物組分，其特征在于其中X代表一個(gè)選自以下族群的低聚肽脯氨酸，脯氨酸-蘇氨酸或脯氨酸-纈氨酸。
15.根據(jù)權(quán)利要求5，13或者14所述的藥物組分，其特征在于其中X代表一個(gè)低聚肽，這個(gè)肽在羧基末端具有一個(gè)氨基基團(tuán)，一個(gè)單烷或雙烷氨基基團(tuán)，一個(gè)烷氧基基團(tuán)，一個(gè)氟甲基酮或者一個(gè)氯甲基酮。
16.根據(jù)權(quán)利要求5所述的藥物組分，其特征在于其中X代表一個(gè)低聚肽，這個(gè)肽包含至少一個(gè)具有D構(gòu)型的氨基酸。
17.根據(jù)權(quán)利要求5所述的藥物組分，其特征在于其中公式R-賴氨酸-X的化合物是SYSMEHFRWGKPV。
18.根據(jù)權(quán)利要求17所述的藥物組分，其特征在于其中化合物SYSMEHFRWGKPV中的至少一個(gè)氨基酸具有D構(gòu)型。
19.根據(jù)權(quán)利要求5所述的藥物組分，其特征在于其中通式R-賴氨酸-X的化合物是從POMC-肽家族衍生而來的化合物，這種肽具有抗炎癥和抗免疫抑制的特征。
20.根據(jù)權(quán)利要求19所述的藥物組分，其特征在于其中從POMC-肽家族衍生而來的化合物是α-，β-或γ-MSH，ACTH，LPH或者CLIP或者所述化合物的保護(hù)的，?；?，乙?；难苌铩?br> 21.根據(jù)權(quán)利要求5所述的藥物組分，其特征在于其進(jìn)一步包括至少一種抗炎癥，抗增殖，抗血栓形成和/或抗凝結(jié)的活性劑。
22.一種具有血相容涂層的醫(yī)學(xué)產(chǎn)品的制備方法，其特征在于其包括以下步驟a)提供一個(gè)醫(yī)學(xué)產(chǎn)品的表面，b)用涂層組分覆蓋所述的表面，此組分包含至少一個(gè)caspase蛋白酶抑制劑和/或至少一個(gè)公式R-賴氨酸-X的化合物。
23.根據(jù)權(quán)利要求22所述的具有血相容涂層的醫(yī)學(xué)產(chǎn)品的制備方法，進(jìn)一步包含步驟c)c)覆蓋所述caspase蛋白酶抑制劑和/或通式R-賴氨酸-X的化合物包含涂層，涂層包含生物學(xué)上穩(wěn)定的和/或生物降解的聚合物。
24.一種具有血相容涂層的醫(yī)學(xué)產(chǎn)品的制備方法，包括以下步驟a)提供一個(gè)醫(yī)學(xué)產(chǎn)品的表面，b’)覆蓋所述的表面，使用的第一涂層包含生物學(xué)上穩(wěn)定的和/或生物降解的聚合物以及b”)覆蓋所述的第一涂層，使用的涂層組分包含至少一個(gè)caspase蛋白酶抑制劑和/或至少一個(gè)公式R-賴氨酸-X的化合物。
25.根據(jù)權(quán)利要求24所述的具有血相容涂層的醫(yī)學(xué)產(chǎn)品的制備方法，其特征在于其進(jìn)一步包含步驟c)c)覆蓋所述caspase蛋白酶抑制劑和/或通式R-賴氨酸-X的化合物包含涂層，涂層包含生物學(xué)上穩(wěn)定的和/或生物降解的聚合物。
26.根據(jù)權(quán)利要求22-25的任一權(quán)利要求所述的方法，其特征在于其中生物學(xué)上穩(wěn)定和/或生物降解的聚合物的涂層和/或包含所述caspase蛋白酶抑制劑和/或所述通式R-賴氨酸-X的化合物的涂層進(jìn)一步包含一種抗炎癥，抗增殖，抗血栓形成和/或抗凝結(jié)的活性劑。
27.根據(jù)權(quán)利要求22-25的任一權(quán)利要求所述的方法，其特征在于其中caspase蛋白酶抑制劑選自以下族群芐氧基羰基-纈氨酸-丙氨酸-天冬氨酸-氟甲基酮，異亮氨酸-谷氨酸-蘇氨酸-天冬氨酸-氟甲基酮，t-丁氧基羰基-天冬氨酸(OCH3)-CH2F，叔丁氧羰基-天冬氨酰(OMe)-氟甲基酮(BAF)和叔丁氧羰基-天冬氨酸-FMK(BD)，BD-fmk，Z-FA-fmk，z-VAD，z-纈氨酸-丙氨酸-天冬氨酸-氟甲基酮(z-VAD-fmk)，IAP，芐氧基羰基-纈氨酸-丙氨酸-天冬氨酸(OCH3)-CH2-氟甲基酮，芐氧基羰基-異亮氨酸-谷氨酸(OCH3)-蘇氨酸-天冬氨酸(OCH3)-CH2--氟甲基酮，Z-AAD-fmk，DEVD，Ac-DEVD-CHO，Z-天冬氨酸-CH2-DCB，乙?；?天冬氨酸-谷氨酸-纈氨酸-天冬氨酸-氟甲基酮(Ac-DEVD-FMK)，YVAD，乙酰基-酪氨酸-纈氨酸-丙氨酸-天冬氨酸-氯甲基酮(Ac-YVAD-CMK)，z-DEVD-fmk，芐氧基羰基-天冬氨酸(OCH3)-谷氨酸(OCH3)-纈氨酸-天冬氨酸(OCH3)-CH2-氟甲基酮，z-IETD-fmk，Z-VDVAD-fmk，CrmA，Bcl-2，Diap1，cIAP1，cIAP2，XIAP和p35。
28.根據(jù)權(quán)利要求22-25的任一權(quán)利要求所述的方法，其特征在于其中通式R-賴氨酸-X的化合物選自以下族群其中X代表一個(gè)羥基基團(tuán)，一個(gè)氨基基團(tuán)，一個(gè)單烷或雙烷氨基基團(tuán)，一個(gè)烷氧基基團(tuán)，一個(gè)氨基酸，一個(gè)含1-10個(gè)氨基酸的低聚肽以及其中R選自以下族群氫，?；鶊F(tuán)，乙?；鶊F(tuán)，一個(gè)氨基酸或者一個(gè)含2-70個(gè)氨基酸的肽。
29.一種根據(jù)權(quán)利要求22-25的任一方法得到的有涂層的醫(yī)學(xué)產(chǎn)品。
30.根據(jù)權(quán)利要求29所述的醫(yī)學(xué)產(chǎn)品，其特征在于其中醫(yī)學(xué)產(chǎn)品是一種支架。
全文摘要
本發(fā)明涉及包含一個(gè)caspase蛋白酶抑制劑和/或一個(gè)通式R－賴氨酸－X的化合物的一個(gè)藥物組分，使用所述的caspase蛋白酶抑制劑和/或所述的通式R－賴氨酸－X的化合物覆蓋醫(yī)學(xué)產(chǎn)品的方法以及具有所述caspase蛋白酶抑制劑和/或所述的通式R－賴氨酸－X的化合物涂層的醫(yī)學(xué)產(chǎn)品。
文檔編號(hào)A61L31/16GK1889974SQ200480035948
公開日2007年1月3日 申請(qǐng)日期2004年10月5日 優(yōu)先權(quán)日2003年10月7日
發(fā)明者艾利克·霍夫曼, 邁可·霍夫曼, 羅蘭·河瑞斯 申請(qǐng)人:漢莫堤克科技公司