專(zhuān)利名稱(chēng)：一種治療糖尿病或糖尿病腎病的藥物組合物及其制備方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明屬制藥領(lǐng)域，具體涉及一種用于治療糖尿病或糖尿病腎病的中藥有效組分組合物。具體為中藥黃柏、知母及肉桂的有效組分配伍的藥物組合物。
背景技術(shù)：
世界衛(wèi)生組織(WHO)連續(xù)數(shù)年的統(tǒng)計(jì)資料表明，糖尿病及其并發(fā)癥已成為僅次于癌癥和心腦血管病的嚴(yán)重危害人類(lèi)健康的疑難病。目前糖尿病治療藥物主要有三大類(lèi)生物藥胰島素，化學(xué)藥磺酰脲類(lèi)、雙胍類(lèi)以及中成藥類(lèi)。胰島素制劑價(jià)格昂貴，難以推廣；化學(xué)藥雖降糖作用明顯，但對(duì)肝、腎等毒副作用較大，還容易導(dǎo)致心血管并發(fā)癥加重等。中成藥雖有一定治療作用，但目前臨床使用的多為粗提物制劑或醫(yī)生自擬的處方湯藥，缺乏藥效顯著，有效成份和作用機(jī)理清楚，質(zhì)量可控，劑型先進(jìn)的現(xiàn)代中藥。
由黃柏、知母和肉桂三味中藥組成的復(fù)方，最早收載于我國(guó)金代著名醫(yī)家李杲編撰的《蘭室秘藏》，稱(chēng)“通關(guān)丸”?！吨腥A人民共和國(guó)藥品標(biāo)準(zhǔn)，中藥成方制劑第一冊(cè)，WS3-B-0158-89》收載的“滋腎丸”，處方與“通關(guān)丸”相同，也由黃柏、知母和肉桂組成。古代和現(xiàn)代臨床將該中藥復(fù)方用于治療淋證、癃閉等，如熱蘊(yùn)膀胱，小腹脹滿，尿閉不通。
近年來(lái)，有關(guān)黃柏、知母和肉桂單味藥材及其有效成分治療糖尿病的研究較多。例如，《Acta Pharmacologica Sinica，2004，25496-502》報(bào)道，小檗堿能促進(jìn)胰島素分泌，調(diào)節(jié)脂質(zhì)代謝而具有抗糖尿病效果；《新中醫(yī)，1997，29(3)33-34》報(bào)道，黃連素(小檗堿)臨床對(duì)II型糖尿病患者有效率為63.3％，不良反應(yīng)?。弧禘xp Clin EndocrinolDiabetes，2004，112520-525》報(bào)道，知母醇提物可刺激糖尿病大鼠分泌胰島素而起到降血糖作用；《中草藥，1996，17605-606》報(bào)道，知母中的多糖類(lèi)成分可顯著降低四氧嘧啶誘導(dǎo)的糖尿病小鼠血糖及肝糖元；《中國(guó)中醫(yī)藥信息雜志，2001，826》報(bào)道，肉桂揮發(fā)油具有明顯的降低糖尿病小鼠血糖作用。
中國(guó)專(zhuān)利CN1127657A中公開(kāi)了黃柏、知母和肉桂與其它藥物組合制成的降糖膠囊具有治療II型糖尿病的作用；CN1259383A中公開(kāi)了黃柏、知母、邊桂(即肉桂)與其它藥物組合制成的降糖膠囊；CN1555817A中公開(kāi)了黃柏、肉桂與其它藥物組合制成的治療糖尿病藥膏；CN1370585A中公開(kāi)了肉桂、知母與其它藥物組合制成的治療2型糖尿病的中藥制劑；CN1088748A中公開(kāi)了知母皂苷與其它其它成分組合制成的適合于糖尿病患者的保健食品；CN1386527A中公開(kāi)了含有鹽酸小檗堿的中藥組合物具有治療胃熱型糖尿病的作用；CN1498545A中公開(kāi)了桂皮醛與其它成分組合制成的用于糖尿病的食療奶片；CN1475222A公開(kāi)了花青素與其它成分組合制成的制劑具有降血糖作用。
但是，在上述對(duì)比文件中均沒(méi)有公開(kāi)只有黃柏、知母和肉桂三種藥材的提取物制成的治療糖尿病的藥物制劑，也沒(méi)有公開(kāi)以黃柏中的生物堿類(lèi)成分(小檗堿)、知母中的苷類(lèi)成分(知母皂苷，知母寧)和肉桂中成分的揮發(fā)油類(lèi)(肉桂醛)及多元酚類(lèi)成分(原花青素)配伍組合制成的藥物制劑。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的在于提供一種由中藥黃柏、知母和肉桂的提取物為有效藥用組分配伍的藥物組合物，用于治療糖尿病或糖尿病腎病。
在本發(fā)明提供的治療糖尿病或糖尿病腎病的藥物組合物中，各有效藥用組分提取物以相當(dāng)于其提取所用的藥材重量比為黃柏2份，知母1-8份，肉桂0.1-1份。在此基礎(chǔ)上，各有效藥用組分提取物以相當(dāng)于其提取所用的藥材重量比在以下范圍內(nèi)更為理想黃柏2份，知母2份，肉桂0.3份。
在本發(fā)明藥物組合物中，含有以下一種或多種有效成分黃柏總生物堿含量≥10％[其中的小檗堿(Berberine)或鹽酸小檗堿(Berberine Hydrochloride)含量≥1％；總生物堿含量用薄層分光光度法測(cè)定(時(shí)珍國(guó)醫(yī)國(guó)藥，1999年第8期)；小檗堿或鹽酸小檗堿含量用高效液相色譜法測(cè)定(解放軍藥學(xué)學(xué)報(bào)，2004年第3期)]；知母總苷含量≥8％[其中知母皂苷A3(Timosaponin A3)含量≥0.3％；知母寧(Mangiferin)含量≥0.1％；知母總苷、知母皂苷A3和知母寧含量均用高效液相色譜法測(cè)定(中國(guó)藥典2005年版)]；肉桂揮發(fā)油成分含量≥0.1％[其中肉桂醛(cinnamicaldehyde)含量≥0.05％；總揮發(fā)油和肉桂醛含量均用氣相色譜法測(cè)定(藥物分析雜志，2000年第2期)]，多元酚類(lèi)成分含量≥1％[其中原花青素(procyanidins)含量≥0.05％；多元酚總成分含量用比色法測(cè)定(食品與發(fā)酵工業(yè)，2002年第3期)；原花青素含量用高效液相色譜法測(cè)定(天然藥物研究與開(kāi)發(fā)，2002年第4期)]。
本發(fā)明藥物組合物可與適當(dāng)?shù)乃巹┹o料制成各種臨床用藥物制劑，如片劑，膠囊劑，滴丸劑，緩釋控釋制劑，顆粒劑，口服液，皮下給藥及注射給藥制劑等。
本發(fā)明藥物組合物可通過(guò)以下方法制備。
黃柏提取物的制備方法1取黃柏藥材，粉碎，用50-90％乙醇回流(或滲漉)提取，過(guò)濾(或離心)，濾液(或上清液)回收乙醇并濃縮后用大孔樹(shù)脂吸附，水洗脫雜質(zhì)，再用65-80％乙醇洗脫，回收乙醇，濃縮，干燥即得。提取物中總生物堿含量≥50％，其中小檗堿或鹽酸小檗堿含量≥5％(含量測(cè)定方法同上)。
方法2取黃柏藥材，粉碎，用乙醇-鹽酸混合溶劑(乙醇∶鹽酸＝100∶0.5-3)回流(或滲漉)提取，過(guò)濾(或離心)，濾液(或上清液)用石灰水調(diào)PH至8.5-10，過(guò)濾(或離心)，濾液(或上清液)加氯化鈉，用鹽酸調(diào)PH至1-2，抽濾，干燥即得。提取物中總生物堿含量≥50％，其中小檗堿或鹽酸小檗堿含量≥5％(含量測(cè)定方法同上)。
知母提取物的制備方法1取知母藥材，粉碎，用50-90％乙醇回流(或滲漉)提取，過(guò)濾(或離心)，濾液(或上清液)回收乙醇并濃縮后用大孔樹(shù)脂吸附，水洗脫雜質(zhì)，再用65-80％乙醇洗脫，回收乙醇，濃縮，干燥即得。提取物中總苷含量≥30％，其中知母皂苷A3含量≥0.5％，知母寧含量≥0.2％(含量測(cè)定方法同上)。
方法2取知母藥材，粉碎，用50-90％乙醇回流(或滲漉)提取，過(guò)濾(或離心)，濾液(或上清液)回收乙醇并濃縮后，用正丁醇萃取，回收正丁醇，浸膏水溶后用大孔樹(shù)脂吸附，水洗脫雜質(zhì)，再用65-80％乙醇洗脫，回收乙醇，濃縮，干燥即得。提取物中總苷含量≥40％，其中知母皂苷A3含量≥0.8％，知母寧含量≥0.4％(含量測(cè)定方法同上)。
肉桂提取物的制備揮發(fā)油類(lèi)成分的提取方法1取肉桂藥材，粉碎，置超臨界流體萃取裝置萃取柱內(nèi)，采用二氧化碳作超臨界流體進(jìn)行萃取(壓力25-35Mpa，流量2.0-3.0L/min，溫度35-50℃)，得揮發(fā)油提取物，其中肉桂醛含量≥5％(含量測(cè)定方法同上)。
方法2取肉桂藥材，粉碎，用水浸泡濕潤(rùn)，置蒸餾器中，通入水蒸汽，收集冷凝后的餾出液，經(jīng)油水分離，得揮發(fā)油，其中含肉桂醛≥1％(含量測(cè)定方法同上)。
多元酚類(lèi)成分的提取方法1取肉桂藥材，粉碎，用50-80％乙醇滲漉(或冷浸或常溫動(dòng)態(tài)萃取)提取，過(guò)濾(或離心)，濾液(或上清液)回收乙醇并濃縮后，用大孔樹(shù)脂吸附，水洗脫雜質(zhì)，再用乙酸乙酯洗脫，回收溶劑，干燥，即得多元酚提取物，其中原花青素含量≥1％(含量測(cè)定方法同上)。
方法2取肉桂藥材，粉碎，用丙酮冷浸(或常溫動(dòng)態(tài)萃取)提取，過(guò)濾，濾液回收溶劑，用石油醚或三氯甲烷萃取脫脂，再用乙酸乙酯萃取，回收溶劑，干燥，即得多元酚提取物，其中原花青素含量≥1％(含量測(cè)定方法同上)。
將上述肉桂揮發(fā)油提取物和多元酚提取物混合，即得肉桂有效藥用組分。
本發(fā)明的藥物組合物既可由黃柏、知母和肉桂單味藥材分別按上述方法提取后以相當(dāng)于其提取所用的藥材重量比為黃柏2份，知母1-8份，肉桂0.1-1份，或黃柏2份，知母2份，肉桂0.3份配伍混合，也可按以下方法將黃柏和知母兩味藥材合并提取后再與肉桂揮發(fā)油及多元酚提取物配伍混合，或?qū)ⅫS柏、知母和肉桂三味藥材合并提取后再與肉桂揮發(fā)油配伍混合。
黃柏和知母兩味藥材合并提取取黃柏2份，知母1-8份，或黃柏2份，知母2份，合并粉碎，用50-90％乙醇回流(或滲漉)提取，過(guò)濾(或離心)，濾液(或上清液)回收乙醇，藥液用弱極性或非極性大孔樹(shù)脂吸附，用水洗脫雜質(zhì)，再用60-80％乙醇洗脫，洗脫液回收乙醇，濃縮，干燥，即得含黃柏總生物堿和知母總苷的提取物。其中小檗堿或鹽酸小檗堿含量≥2％，知母皂苷A3含量≥0.5％，知母寧含量≥0.2％(含量測(cè)定方法同上)。
該提取物與按上述方法提取的肉桂揮發(fā)油和多元酚提取物配伍混合，即可制成本發(fā)明藥物細(xì)合物。
黃柏、知母和肉桂三味藥材合并提取取黃柏2份，知母1-8份，肉桂0.1-1份，或黃柏2份，知母2份，肉桂0.3份，合并粉碎，用50-90％乙醇滲漉(或冷浸或常溫動(dòng)態(tài)萃取)提取，過(guò)濾(或離心)，濾液(或上清液)回收乙醇，藥液用弱極性或非極性大孔樹(shù)脂吸附，用水洗脫雜質(zhì)，再用60-80％乙醇洗脫，洗脫液回收乙醇，濃縮，干燥，即得含黃柏總生物堿、知母總苷和肉桂多元酚的提取物。其中小檗堿或鹽酸小檗堿含量≥1.5％，知母皂苷A3含量≥0.4％，知母寧含量≥0.3％，原花青素含量≥0.01％(含量測(cè)定方法同上)。
該提取物與按上述方法提取的肉桂揮發(fā)油配伍混合，即可制成本發(fā)明藥物組合物。
將本發(fā)明藥物組合物灌胃給予鏈脲霉素致糖尿病模型大鼠四周，觀察其對(duì)隨機(jī)血糖、空腹血糖、糖耐量、體重、胰島素耐量及C肽等藥理指標(biāo)的影響，結(jié)果發(fā)現(xiàn)該藥物組合物具有以下藥理作用●糖尿病大鼠的隨機(jī)血糖和空腹血糖明顯下降，與模型組相比有顯著性差異(P＜0.01，P＜0.05)。
●糖耐量試驗(yàn)表明，糖尿病大鼠在給糖前和給糖后30、60、90及120min時(shí)的血糖均明顯低于模型組(p＜0.01)。
●對(duì)鏈脲霉素誘導(dǎo)的糖尿病大鼠體重有明顯的恢復(fù)作用(p＜0.01)。
●在胰島素耐量試驗(yàn)中，糖尿病大鼠在各個(gè)時(shí)間點(diǎn)的血糖水平都明顯低于模型組(p＜0.01)。
●血清C肽水平檢測(cè)表明，糖尿病大鼠的C肽水平明顯高于模型組(P＜0.05)，表明血清中胰島素水平明顯恢復(fù)。
●糖尿病大鼠的24小時(shí)尿量和尿蛋白含量明顯低于模型組(P＜0.01，P＜0.05)。
●糖尿病大鼠的尿肌苷明顯上升，與模型組比較差異顯著(P＜0.05)。
●糖尿病大鼠的腎指數(shù)明顯低于模型組(P＜0.05)。
藥理試驗(yàn)結(jié)果表明，本發(fā)明藥物組合物具有顯著的治療糖尿病和糖尿病腎病作用。
具體實(shí)施例方式
以下通過(guò)實(shí)施例進(jìn)一步說(shuō)明本發(fā)明，但不受實(shí)施例限制。
實(shí)施例1取黃柏2份，知母2份，肉桂0.3份，合并粉碎，用70％乙醇滲漉提取，收集滲漉液，離心，上清液減壓回收乙醇，藥液用AB-8大孔樹(shù)脂吸附，用1.5個(gè)柱體積的水洗脫雜質(zhì)，再用5個(gè)柱體積的70％乙醇洗脫，洗脫液減壓回收乙醇，濃縮，干燥，即得含黃柏總生物堿、知母總苷和肉桂多元酚的提取物。其中鹽酸小檗堿含量大于1.5％，知母皂苷A3含量大于0.4％，知母寧含量大于0.3％，原花青素含量大于0.01％(含量測(cè)定方法同上)。
實(shí)施例2取肉桂藥材0.3份，粉碎，置超臨界流體萃取裝置萃取柱內(nèi)，采用二氧化碳作超臨界流體進(jìn)行萃取(壓力30Mpa，流量2.0L/min，溫度40℃)，得揮發(fā)油提取物，其中肉桂醛含量大于5％(含量測(cè)定方法同上)。
將實(shí)施例1制得的提取物與實(shí)施例2制得的提取物配伍混合，即得本發(fā)明藥物組合物。
實(shí)施例3取SD大鼠，體重200+5g，適應(yīng)性飼養(yǎng)一周后，按55mg/kg腹腔注射鏈脲霉素，注射后第七天檢測(cè)隨機(jī)血糖，根據(jù)隨機(jī)血糖水平進(jìn)行隨機(jī)分組，每組10只，兩周后血糖水平基本穩(wěn)定，開(kāi)始分別口服本發(fā)明藥物組合物(2g生藥/kg)和陽(yáng)性對(duì)照藥鹽酸二甲雙胍(18mg/kg)治療，給藥四周后測(cè)定各組的隨機(jī)血糖、空腹血糖、糖耐量、胰島素耐量、體重等指標(biāo)。結(jié)果如下1、對(duì)隨機(jī)血糖的影響鏈脲霉素致糖尿病大鼠經(jīng)藥物治療四周后隨機(jī)血糖情況

**與模型組比較有極顯著差異P＜0.01結(jié)果表明鏈脲霉素導(dǎo)致大鼠隨機(jī)血糖水平升高，與正常組相比有極顯著差異；經(jīng)分別用本發(fā)明藥物組合物和陽(yáng)性對(duì)照藥鹽酸二甲雙胍治療四周后，隨機(jī)血糖水平大幅度下降，與模型組相比有極顯著差異P＜0.01。
2、對(duì)空腹血糖的影響鏈脲霉素致糖尿病大鼠經(jīng)藥物治療四周后空腹血糖情況

*與模型組比較有顯著差異P＜0.05**與模型組比較有極顯著差異P＜0.01結(jié)果表明鏈脲霉素導(dǎo)致大鼠空腹血糖水平升高，與正常組相比有極顯著差異；經(jīng)分別用本發(fā)明藥物組合物和陽(yáng)性對(duì)照藥鹽酸二甲雙胍治療四周后，空腹血糖水平大幅度下降，與模型組相比有顯著差異(P＜0.05，P＜0.01)。
3、對(duì)糖耐量的影響鏈脲霉素致糖尿病大鼠經(jīng)藥物治療四周后糖耐量情況 **與模型組比較有極顯著差異P＜0.01結(jié)果表明各組大鼠空腹8小時(shí)，測(cè)血糖后給予葡萄糖灌胃，劑量2g/kg，不同時(shí)間點(diǎn)采血測(cè)血糖。本發(fā)明藥物組合物和陽(yáng)性對(duì)照藥二甲雙胍在給糖前和給糖后30、60、90、120min的血糖均明顯低于模型組P＜0.01。
4、胰島素耐量實(shí)驗(yàn)鏈脲霉素致糖尿病大鼠經(jīng)藥物治療四周后胰島素耐量情況 **與模型組比較有極顯著差異P＜0.01結(jié)果表明模型組給予胰島素后血糖水平在30分鐘出現(xiàn)下降，60-120分鐘之間變化不明顯。治療組本發(fā)明藥物組合物和陽(yáng)性對(duì)照藥二甲雙胍各時(shí)間點(diǎn)血糖水平明顯低于模型組，有極顯著差異P＜0.01，而且2-4小時(shí)之間治療組血糖水平漸趨平穩(wěn)，這與正常組的表現(xiàn)相似。
5、對(duì)體重的影響鏈脲霉素致糖尿病大鼠經(jīng)藥物治療四周后體重情況

**與模型組比較有極顯著差異P＜0.01結(jié)果表明鏈脲霉素導(dǎo)致大鼠空腹體重下降，與正常組相比有極顯著差異；經(jīng)用本發(fā)明藥物組合物和陽(yáng)性對(duì)照藥鹽酸二甲雙胍治療四周后，體重較模型組明顯恢復(fù)(P＜0.01)。
權(quán)利要求
1.一種用于治療糖尿病或糖尿病腎病的藥物組合物，由中藥黃柏，知母和肉桂的提取物為有效藥用組分配伍組成，各有效藥用組分提取物以相當(dāng)于其提取所用的藥材重量比為黃柏2份，知母1-8份，肉桂0.1-1份。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的治療糖尿病或糖尿病腎病的藥物組合物，其特征在于所述的各有效藥用組分提取物以相當(dāng)于其提取所用的藥材重量比為黃柏2份，知母2份，肉桂0.3份。
3.根據(jù)權(quán)利要求1和/或2所述的治療糖尿病或糖尿病腎病的藥物組合物，其特征在于其中含以下一種或多種有效成分黃柏總生物堿含量≥10％[其中的小檗堿(Berberine)或鹽酸小檗堿(Berberine Hydrochloride)含量≥1％]；知母總苷含量≥8％[其中知母皂苷A3(TimosaponinA3)含量≥0.3％；知母寧(Mangiferin)含量≥0.1％]；肉桂揮發(fā)油含量≥0.1％[其中肉桂醛(cinnamicaldehyde)含量≥0.05％]，多元酚類(lèi)成分含量≥1％[其中原花青素(procyanidins)含量≥0.05％]。
4.如權(quán)利要求1、2或3所述的治療糖尿病或糖尿病腎病的藥物組合物的制備方法，其特征在于由黃柏、知母和肉桂單味藥材分別提取后以相當(dāng)于其提取所用的藥材重量比為黃柏2份，知母1-8份，肉桂0.1-1份，或黃柏2份，知母2份，肉桂0.3份配伍而成；或?qū)ⅫS柏和知母兩味藥材合并提取后再與肉桂揮發(fā)油及多元酚類(lèi)提取物配伍而成；或?qū)ⅫS柏、知母和肉桂三味藥材合并提取后再與肉桂揮發(fā)油配伍而成。
5.如權(quán)利要求4所述的治療糖尿病或糖尿病腎病的藥物組合物的制備方法，其特征在于黃柏和知母兩味藥材合并提取取黃柏2份，知母1-8份，或黃柏2份，知母2份，合并粉碎，用50-90％乙醇回流(或滲漉)提取，過(guò)濾(或離心)，濾液(或上清液)回收乙醇，藥液用大孔樹(shù)脂吸附，用水洗脫雜質(zhì)，再用60-80％乙醇洗脫，洗脫液回收乙醇，濃縮，干燥，即得含黃柏生物堿類(lèi)成分和知母苷類(lèi)成分的提取物；該提取物與肉桂揮發(fā)油和多元酚類(lèi)提取物配伍混合，即可制成本發(fā)明藥物組合物。
6.如權(quán)利要求4所述的治療糖尿病或糖尿病腎病的藥物組合物的制備方法，其特征在于黃柏、知母和肉桂三味藥材合并提取取黃柏2份，知母1-8份，肉桂0.1-1份，或黃柏2份，知母2份，肉桂0.3份，合并粉碎，用50-90％乙醇冷浸或滲漉提取，過(guò)濾或離心，濾液或上清液回收乙醇，藥液用大孔樹(shù)脂吸附，用水洗脫雜質(zhì)，再用60-80％乙醇洗脫，洗脫液回收乙醇，濃縮，干燥，即得含黃柏生物堿類(lèi)、知母苷類(lèi)和肉桂多元酚類(lèi)成分的提取物；該提取物與肉桂揮發(fā)油提取物配伍混合，即可制成本發(fā)明藥物組合物。
7.根據(jù)權(quán)利要求1、2、3或4所述的治療糖尿病或糖尿病腎病的藥物組合物，其特征在于該組合物可與如片劑、膠囊劑、滴丸劑、緩釋控釋制劑，顆粒劑、口服液、皮下給藥及注射給藥劑型的藥劑輔料配制成相應(yīng)的藥物制劑。
8.如權(quán)利要求1所述的治療糖尿病或糖尿病腎病的藥物組合物的用途，在制備治療糖尿病及糖尿病腎病的藥物中應(yīng)用。
全文摘要
本發(fā)明公開(kāi)一種治療糖尿病或糖尿病腎病的藥物組合物及其制備方法。該藥物組合物以中藥黃柏，知母和肉桂的提取物為有效藥用組分配伍而成。其中含黃柏生物堿成分，知母苷類(lèi)成分和肉桂揮發(fā)油及多元酚類(lèi)成分。本發(fā)明的藥物組合物既可由黃柏、知母和肉桂單味藥材分別提取后配伍混合，也可將藥材合并提取。制備方法包括乙醇提取，大孔樹(shù)脂吸附，洗脫，濃縮，干燥等步驟。
文檔編號(hào)A61K9/00GK1814149SQ20051011076
公開(kāi)日2006年8月9日 申請(qǐng)日期2005年11月25日 優(yōu)先權(quán)日2005年11月25日
發(fā)明者黃成鋼, 趙昊龍, 朱海燕, 范明松, 趙維民, 馬春輝, 唐意紅, 付榮杰, 李志雄, 孫兆林, 王輝 申請(qǐng)人:中國(guó)科學(xué)院上海藥物研究所