一種阿立哌唑的藥物組合物及其防治糖尿病的用圖
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001] 本發(fā)明屬于生物醫(yī)藥領(lǐng)域，涉及阿立哌唑的新用途，具體涉及一種阿立哌唑的藥 物組合物及其防治糖尿病的用途。
【背景技術(shù)】
[0002] 阿立哌唑化學(xué)名稱為7-{4-[4-(2,3-二氯苯基)-1_哌嗪基]丁氧基}-3,4_二氫-2 (1H)-喹啉酮。
[0003] 阿立哌唑是一種新型的非典型抗精神分裂癥藥物，對(duì)DA能神經(jīng)系統(tǒng)具有雙向調(diào)節(jié) 作用，是DA遞質(zhì)的穩(wěn)定劑。與D2、D3、5-HT1A和5-HT2A受體有很高的親和力。通過(guò)對(duì)D2和5-HT1A受體的部分激動(dòng)作用及對(duì)5-HT2A受體的拮抗作用來(lái)產(chǎn)生抗精神分裂癥作用的。本品口 服后血藥濃度達(dá)峰時(shí)間為3~5小時(shí)，半衰期為48~68小時(shí)。去氫阿立哌唑?yàn)橹饕钚源x 物。用于治療各類型的精神分裂癥。國(guó)外臨床試驗(yàn)表明，本品對(duì)精神分裂癥的陽(yáng)性和陰性癥 狀均有明顯療效，也能改善伴發(fā)的情感癥狀，降低精神分裂癥的復(fù)發(fā)率。
[0004] 目前，尚未見阿立哌唑及其藥物組合物與防治糖尿病的相關(guān)報(bào)道。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0005] 本發(fā)明的目的在于提供一種阿立哌唑的藥物組合物，該藥物組合物中含有阿立哌 唑和一種從何首烏中分離得到的結(jié)構(gòu)新穎的天然產(chǎn)物，阿立哌唑和該天然產(chǎn)物可以協(xié)同防 治糖尿病。
[0006] 本發(fā)明的上述目的是通過(guò)下面的技術(shù)方案得以實(shí)現(xiàn)的：
[0007] 一種具有下述結(jié)構(gòu)式的化合物（I)，

[0009] -種阿立哌唑的藥物組合物，包括阿立哌唑、如上所述的化合物（I)和藥學(xué)上可以 接受的載體。
[0010] 如上所述的化合物（I)的制備方法，包含以下操作步驟：（a)將何首烏的干燥塊根 粉碎，用75%乙醇熱回流提取，合并提取液，濃縮至無(wú)醇味，依次用石油醚、乙酸乙酯和水飽 和的正丁醇萃取，分別得到石油醚萃取物、乙酸乙酯萃取物和正丁醇萃取物；（b)步驟(a)中 正丁醇萃取物用大孔樹脂除雜，先用8%乙醇洗脫10個(gè)柱體積，再用70%乙醇洗脫12個(gè)柱體 積，收集70%洗脫液，減壓濃縮得70%乙醇洗脫濃縮物；（c)步驟(b)中70%乙醇洗脫濃縮物 用正相硅膠分離，依次用體積比為40:1、20:1、10:1和5:1的二氯甲烷-甲醇梯度洗脫得到4 個(gè)組分；（d)步驟(c)中組分4用正相硅膠進(jìn)一步分離，依次用體積比為8:1、5:1和2:1的二氯 甲烷-甲醇梯度洗脫得到3個(gè)組分；（e)步驟(d)中組分2用十八烷基硅烷鍵合的反相硅膠分 離，用體積百分濃度為75 %的甲醇水溶液等度洗脫，收集8~14個(gè)柱體積洗脫液，洗脫液減 壓濃縮得到化合物(I)。
[0011] 進(jìn)一步地，所述大孔樹脂為AB-8型大孔吸附樹脂。
[0012] 如上所述的化合物(I)在制備防治糖尿病的藥物中的應(yīng)用。
[0013] 如上所述的阿立哌唑的藥物組合物在制備防治糖尿病的藥物中的應(yīng)用。
[0014] 本發(fā)明的優(yōu)點(diǎn)：
[0015] 本發(fā)明提供的阿立哌唑的藥物組合物中含有阿立哌唑和一種從何首烏中分離得 到的結(jié)構(gòu)新穎的天然產(chǎn)物，阿立哌唑和該天然產(chǎn)物單獨(dú)作用時(shí)，防治糖尿病效果一般;二者 聯(lián)合作用時(shí)，防治糖尿病效果顯著提高，可以開發(fā)成防治糖尿病的藥物。本發(fā)明與現(xiàn)有技術(shù) 相比具有突出的實(shí)質(zhì)性特點(diǎn)和顯著的進(jìn)步。
【具體實(shí)施方式】
[0016] 下面結(jié)合實(shí)施例進(jìn)一步說(shuō)明本發(fā)明的實(shí)質(zhì)性內(nèi)容，但并不以此限定本發(fā)明保護(hù)范 圍。盡管參照較佳實(shí)施例對(duì)本發(fā)明作了詳細(xì)說(shuō)明，本領(lǐng)域的普通技術(shù)人員應(yīng)當(dāng)理解，可以對(duì) 本發(fā)明的技術(shù)方案進(jìn)行修改或者等同替換，而不脫離本發(fā)明技術(shù)方案的實(shí)質(zhì)和范圍。
[0017] 實(shí)施例1:化合物(I)分離制備及結(jié)構(gòu)確證
[0018] 分離方法：（a)將何首烏的干燥塊根（5kg)粉碎，用75 %乙醇熱回流提取（20L X 3 次），合并提取液，濃縮至無(wú)醇味(4L)，依次用石油醚(4LX3次）、乙酸乙酯(4LX3次)和水飽 和的正丁醇(4LX3次)萃取，分別得到石油醚萃取物、乙酸乙酯萃取物和正丁醇萃取物；（b) 步驟(a)中正丁醇萃取物用AB-8型大孔樹脂除雜，先用8%乙醇洗脫10個(gè)柱體積，再用70% 乙醇洗脫12個(gè)柱體積，收集70%洗脫液，減壓濃縮得70%乙醇洗脫濃縮物；（c)步驟(b)中 70 %乙醇洗脫濃縮物用正相硅膠分離，依次用體積比為40:1 (8個(gè)柱體積）、20 :1 (8個(gè)柱體 積）、10:1(8個(gè)柱體積)和5:1(10個(gè)柱體積）的二氯甲烷-甲醇梯度洗脫得到4個(gè)組分；（d)步 驟(c)中組分4用正相硅膠進(jìn)一步分離，依次用體積比為8:1(8個(gè)柱體積）、5:1(10個(gè)柱體積） 和2:1(5個(gè)柱體積）的二氯甲烷-甲醇梯度洗脫得到3個(gè)組分；（e)步驟(d)中組分2用十八烷 基硅烷鍵合的反相硅膠分離，用體積百分濃度為75 %的甲醇水溶液等度洗脫，收集8~14個(gè) 柱體積洗脫液，洗脫液減壓濃縮得到化合物（I) (195mg，HPLC歸一化純度大于98% )。
[0019] 結(jié)構(gòu)確證:無(wú)色結(jié)晶，冊(cè)431-1^顯示[1?1]+為111/2 333.2027，結(jié)合核磁特征可得 分子式為〇2〇1128〇4，不飽和度為7。核磁共振氫譜數(shù)據(jù)5[1(口口11145^1(1；[116-(15,500102):11-2& (3.66，dd，J=16.4，11.2Hz)，H-2b(3.33，ddd，J=16.4,5.5，l. 1Hz)，H-3(6.99，m)，H-5a (3.23，d，J= 15.6Hz)，H-5b(2.98，dd，J=15.6,9.3Hz)，H-6(5.06，dd，J = 9.3，1.4Hz)，H-7 (1.89，m)，H-8(1.48，m)，H-9a(2.26，dd，J=16.5,2.4Hz)，H-9b(1.58，ddd，J=16.5,7.6， 4.2Hz)，H-10(3.16，m)，H-ll(1.80，m)，H-12(0.93，d，J = 5.7Hz)，H-13(1.07，d，J = 6.6Hz)， H-14(l .13，d，J = 5.7Hz)，H-3'（7.01，m)，H-4'（l .65，d，J = 7.3Hz)，H-5'（1.84，s);核磁共 振碳譜數(shù)據(jù) Sc(ppm，pyridine-d5，125MHz): 207.8(C，1-C)，42.6(CH2,2-C) 130.9(CH，3-C)， 132.4(C，4-C)，28.3(CH2,5-C)，77.4(CH，6-C)，52.7(CH，7-C)，22.4(CH，8-C)，34.8(CH 2,9-C)，59.9(CH，10-C)，26.4(CH，11-C)，22.1(CH3，12-C)，23.8(CH 3，13-C)，18.4(CH3，14-C)， 171.2(C，15-C)，200.1(C，1'-C)，129.3(C，2'-C)，138.2(CH，3'-C)，14.5(CH3,4'-C)，13.1 (CH 3，5 ' -C)。紅外波譜中的1756cm-1吸收帶與UV譜中的236nm吸收帶表明該化合物含有a，f3-不飽和內(nèi)酯結(jié)構(gòu)，紅外波譜中的1715CHT 1與1680CHT1吸收帶表明結(jié)構(gòu)中存在酮基與雙鍵片 段。13C-匪R、DEPT和HSQC譜中顯示有20個(gè)碳信號(hào)，包括五個(gè)甲基，三個(gè)亞甲基，七個(gè)次甲基 (一個(gè)連氧碳和兩個(gè)烯烴碳），以及五個(gè)季碳(三個(gè)羰基碳和兩個(gè)烯烴碳），以上功能結(jié)構(gòu)再 結(jié)合不飽和數(shù)表明該化合物為雙環(huán)結(jié)構(gòu)。匪R譜結(jié)合HSQC譜顯示五個(gè)甲基質(zhì)子信號(hào)S H 0.93(3H，d，J = 5.7Hz)、1.07(3H，d，J = 6.6Hz)、l. 13(3H，d，J = 5.7Hz)、l .65(3H，d，J = 7.3他）、1.84(311，8)，兩個(gè)烯烴質(zhì)子信號(hào)知6.99(111，111)與7.01(111，111)，一個(gè)連氧次甲基質(zhì) 子信號(hào)知5.06(111，(1(1，1 = 9.3，1.4泡），三組亞甲基質(zhì)子信號(hào)知3.33(111，(1(1(1，1=16.4， 5.5，1.1他）與3.66(111，(1(1，了=16.4，11.2他）、3.23(111，(1，了=15.61^)與2.98(111，(1(1，了 = 15.6,9.3泡）、2.26(111，(1(1，了=16.5,2.41^)與1.58(111，(1(1(1，了=16.5,7.6,4.2抱），四個(gè)次 甲基質(zhì)子信號(hào)Sh COSY譜中存在 H2-2/H-3、H2-5/H-6/H-7/H-8/H2-9/H-10、H-7/H-ll/H3-12 以及 H-ll/H3-13、H-8/H3-14 相關(guān) 信號(hào)，結(jié)合HMBC譜中顯示的H2-2、H2-9和H-10與C-1以及H2-2、H 2-5和H-6與C-4相關(guān)信號(hào)可以 構(gòu)建吉馬烷型倍半萜骨架。而1H-咕⑶SY譜中H 3-5 '/H-3 '/H3-4'相關(guān)信號(hào)以及HMBC譜中H-3'與C-2'、C-4'和C-5'相關(guān)信號(hào)可以構(gòu)建另一部分片段，同時(shí)HMBC譜中H-10與C-1'的相關(guān) 性表明這一片段與吉馬烷型倍半萜骨架連接的位置。另外HMBC譜中H-3、H 2-5和H-6與C-15 相關(guān)信號(hào)暗示C-6與C-15之間存在一個(gè)內(nèi)酯環(huán)結(jié)構(gòu)。N0ESY譜中，假設(shè)H-8為0構(gòu)型，那么H-8 與H-10的相關(guān)性表明H-10也為樹勾型，因此，0-2'-甲基_2'_丁烯酮基應(yīng)該為a構(gòu)型。此外，H-9b與H-8存在相關(guān)信號(hào)，所以H_9a與H_2a以及H_9a與H_5a的相關(guān)性表明H-2a、H-5a、H_9a皆 為a構(gòu)型，同時(shí)H_2a與H_5a的相關(guān)信號(hào)表明A 3(4)雙鍵為E構(gòu)型。綜合氫譜、碳譜、HMBC譜和 N0ESY譜，以及文獻(xiàn)關(guān)于相關(guān)類型核磁數(shù)據(jù)，可基本確定該化合物如下所示，立體構(gòu)型進(jìn)一 步通過(guò)ECD試驗(yàn)確定，理論值與實(shí)驗(yàn)值基本一致。該化合物化學(xué)結(jié)構(gòu)式及碳原子編號(hào)如下：

[0021 ]實(shí)施例2:對(duì)2型糖尿病大鼠血糖的影響 [0022] 1、材料與方法
[0023] 1.1動(dòng)物
[0024] 選用健康清潔級(jí)雄性Wistar大鼠100只，約2月齡，體重150~180g(湖北省防疫 站），標(biāo)準(zhǔn)飼料(華中科技大學(xué)同濟(jì)醫(yī)學(xué)院實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心）。
[0025] 1.2試劑及儀器
[0026] 阿立哌唑購(gòu)自中國(guó)藥品生物制品檢定所?；衔铮↖)自制，制備方法見實(shí)例1。二甲 雙胍(常州亞邦生物試劑公司，純度99.3% );鏈脲佐菌素(STZ，Sigma公司），血糖試劑盒(南 京建成生物有限公司），血脂試劑盒(浙江東甌生物工程有限公司）。血清胰島素（INS)放免 試劑盒（中國(guó)人民解放軍總醫(yī)院科技開發(fā)中心放免研究所）。檢測(cè)儀器為中國(guó)山東彩虹分析 儀器廠GF-D 800型半自動(dòng)化生化分析儀;美國(guó)ELx800酶標(biāo)儀。
[0027] 1.3動(dòng)物模型的建立和分組
[0028] 大鼠標(biāo)準(zhǔn)飼料適應(yīng)性喂養(yǎng)2周后，隨機(jī)選出10只大鼠標(biāo)準(zhǔn)飼料喂養(yǎng)，自由進(jìn)食、進(jìn) 水作為正常組。剩下的90只大鼠給予高脂、高糖飲食(蔗糖-豬油-奶粉-雞蛋-普通飼料=30 :20:4: 2: 63)喂養(yǎng)8周之后，大鼠按25mg ? kg<劑量尾靜脈注射鏈脲佐菌素，喂養(yǎng)2周后作 0GTT實(shí)驗(yàn)，篩選糖耐量異常者50只進(jìn)行隨機(jī)分組：模型對(duì)照組、陽(yáng)性對(duì)照組（二甲雙胍組， 50mg ? kg-3、阿立哌唑組（280mg ? kg-3、化合物（I)組（280mg ? kg-4、阿立哌唑與化合物 (I)組合物組，總共5組，每組10只。
[0029] 1.4動(dòng)物處理
[0030] 阿立哌唑組每日以280mg ? kg-1阿立哌唑灌胃；化合物（I)組每日以280mg ? kg-1化 合物（I)灌胃；阿立哌唑與化合物（I)組合物組每日以140mg ? kg-1阿立哌唑+140mg ? kg-1化 合物（I)灌胃；陽(yáng)性對(duì)照組每日以50mg ? kg^1二甲雙胍灌胃；正常對(duì)照組和模型對(duì)照組每日 以等量0.9 %生理鹽水灌胃。
[0031] 1.50GIT 實(shí)驗(yàn)
[0032]大鼠模型篩選及治療6周后均實(shí)行0GTT實(shí)驗(yàn)。動(dòng)物禁食12h后，以25%葡萄糖水按 2.5g ? kg^1劑量灌胃。分別于灌胃前及灌胃后60、120min剪尾取血，采用葡萄糖氧化酶法測(cè) 定各時(shí)間點(diǎn)血糖(BG)。
[0033] 1.6指標(biāo)測(cè)定
[0034]大鼠治療6周后，動(dòng)物禁食12h后用水合氯醛腹腔注射麻醉，腹主動(dòng)脈取血并處死 動(dòng)物，按試劑盒上的說(shuō)明加樣檢測(cè)。血糖值用葡萄糖氧化酶法測(cè)定。
[0035] 1.7統(tǒng)計(jì)學(xué)方法
[0036]計(jì)量資料用x±s表示，采用SPSS19.0軟件，多組間比較用方差分析，兩兩間比較用 q檢驗(yàn)，治療前后比較采用配對(duì)t檢驗(yàn)，P〈0.05為有顯著性差異。
[0037] 2、實(shí)驗(yàn)結(jié)果
[0038]藥物干預(yù)6周后各組血糖水平的比較
[0039]與正常對(duì)照組比較，模型對(duì)照組血糖顯著升高(P〈0.05)，證明造模成功;與模型對(duì) 照組比較，阿立哌唑組、化合物（I)組血糖顯著降低(P〈〇. 05);與模型對(duì)照組比較，阿立哌唑 與化合物（I)組合物組血糖顯著降低(P〈〇.01)，接近于陽(yáng)性藥降糖效果。結(jié)果見表1。
[0040] 表1藥物干預(yù)后各組血糖水平比較.mmol ? 土s


[0042]上述結(jié)果表明，阿立哌唑和本發(fā)明提供的化合物（I)單獨(dú)作用時(shí)，對(duì)糖尿病大鼠的 血糖具有降低作用;阿立哌唑和本發(fā)明提供的化合物(I)聯(lián)合作用時(shí)，對(duì)糖尿病大鼠的降血 糖作用更為明顯，比阿立哌唑或化合物（I)單獨(dú)作用時(shí)效果更好，可以開發(fā)成防治糖尿病的 藥物。
[0043]上述實(shí)施例的作用在于說(shuō)明本發(fā)明的實(shí)質(zhì)性內(nèi)容，但并不以此限定本發(fā)明的保護(hù) 范圍。本領(lǐng)域的普通技術(shù)人員應(yīng)當(dāng)理解，可以對(duì)本發(fā)明的技術(shù)方案進(jìn)行修改或者等同替換， 而不脫離本發(fā)明技術(shù)方案的實(shí)質(zhì)和保護(hù)范圍。
【主權(quán)項(xiàng)】
1. 一種具有下述結(jié)構(gòu)式的化合物α)，2. -種阿立哌唑的藥物組合物，其特征在于:包括阿立哌唑、如權(quán)利要求1所述的化合 物(I)和藥學(xué)上可以接受的載體。3. 權(quán)利要求1所述的化合物（I)的制備方法，其特征在于，包含以下操作步驟：（a)將何 首烏的干燥塊根粉碎，用75%乙醇熱回流提取，合并提取液，濃縮至無(wú)醇味，依次用石油醚、 乙酸乙酯和水飽和的正丁醇萃取，分別得到石油醚萃取物、乙酸乙酯萃取物和正丁醇萃取 物；（b)步驟(a)中正丁醇萃取物用大孔樹脂除雜，先用8%乙醇洗脫10個(gè)柱體積，再用70% 乙醇洗脫12個(gè)柱體積，收集70%洗脫液，減壓濃縮得70%乙醇洗脫濃縮物；（c)步驟(b)中 70 %乙醇洗脫濃縮物用正相硅膠分離，依次用體積比為40:1、20:1、10:1和5:1的二氯甲烷-甲醇梯度洗脫得到4個(gè)組分；（d)步驟(c)中組分4用正相硅膠進(jìn)一步分離，依次用體積比為 8:1、5:1和2:1的二氯甲烷-甲醇梯度洗脫得到3個(gè)組分；（e)步驟(d)中組分2用十八烷基硅 烷鍵合的反相硅膠分離，用體積百分濃度為75 %的甲醇水溶液等度洗脫，收集8~14個(gè)柱體 積洗脫液，洗脫液減壓濃縮得到化合物(I)。4. 根據(jù)權(quán)利要求3所述的化合物（I)的制備方法，其特征在于:所述大孔樹脂為AB-8型 大孔吸附樹脂。5. 權(quán)利要求1所述的化合物（I)在制備防治糖尿病的藥物中的應(yīng)用。6. 權(quán)利要求2所述的阿立哌唑的藥物組合物在制備防治糖尿病的藥物中的應(yīng)用。
【專利摘要】本發(fā)明公開了一種阿立哌唑的藥物組合物及其防治糖尿病的用途，本發(fā)明提供的阿立哌唑的藥物組合物中含有阿立哌唑和一種從何首烏的干燥塊根中分離得到的結(jié)構(gòu)新穎的天然產(chǎn)物化合物(Ⅰ)，阿立哌唑和該天然產(chǎn)物單獨(dú)作用時(shí)，防治糖尿病效果一般；二者聯(lián)合作用時(shí)，防治糖尿病效果顯著提高，可以開發(fā)成防治糖尿病的藥物。本發(fā)明與現(xiàn)有技術(shù)相比具有突出的實(shí)質(zhì)性特點(diǎn)和顯著的進(jìn)步。
【IPC分類】A61K31/343, C07D307/00, A61P3/10, A61K31/496
【公開號(hào)】CN105712957
【申請(qǐng)?zhí)枴緾N201610167477
【發(fā)明人】李晨露
【申請(qǐng)人】李晨露