專利名稱：治療病毒感染的穿心蓮內(nèi)酯衍生物的制作方法
相關(guān)申請的交叉參考
本申請要求2004年11月8日提交的標(biāo)題為“治療黃病毒和瘟病毒屬的穿心蓮內(nèi)酯衍生物”的美國專利臨時申請?zhí)?0/626,253；2004年11月8日提交的美國專利臨時申請?zhí)?0/626,172和2005年10月21日提交的美國專利臨時申請?zhí)?0/728,978，標(biāo)題均為“治療丙型肝炎的穿心蓮內(nèi)酯衍生物”；以及2004年11月8日提交的標(biāo)題為“作為蛋白酶抑制劑的穿心蓮內(nèi)酯衍生物”的美國專利臨時申請?zhí)?0/626,329的優(yōu)先權(quán)。
發(fā)明領(lǐng)域 本發(fā)明包括穿心蓮內(nèi)酯衍生物及其藥用組合物；治療黃病毒科病毒感染、其它病毒感染和抑制病毒蛋白酶的使用方法。

背景技術(shù)：
丙肝病毒屬(HCV)、瘟病毒屬和黃病毒屬于黃病毒科病毒(Rice，C.M.，F(xiàn)laviviridaeThe viruses and their replication(黃病毒科病毒及其復(fù)制).摘自Fields Virology，EditorsFields，B.N.，Knipe，D.M.，andHowley，P.M.，Lippincott-Raven Publishers，Philadelphia，PA，第30章，931-959，1996)。
丙型肝炎病毒(HCV)是世界上慢性肝病的重要病因。已知HCV造成至少80％輸血性肝炎和很大比例的偶發(fā)性急性肝炎。初步證據(jù)還提示，HCV存在于許多“自發(fā)性”慢性肝炎、“原因不明的”肝硬化和可能與其它肝炎病毒例如乙型肝炎病毒(HBV)無關(guān)的肝細(xì)胞癌的病例中。小比例的健康人為慢性HCV攜帶者，該比例因地理和其它流行病學(xué)因素而異。HCV編碼兩種蛋白酶通過NS2-NS3區(qū)域編碼的鋅依賴性金屬蛋白酶和在NS3區(qū)域中編碼的絲氨酸蛋白酶。需要這些蛋白酶將前體多蛋白的特異性區(qū)域分裂為成熟肽。
盡管有許多化合物進(jìn)行其它抗HCV治療的臨床試驗，但目前治療HCV的標(biāo)準(zhǔn)是用干擾素或干擾素和利巴韋林聯(lián)合治療。
幾個專利公開了治療HCV的蛋白酶抑制劑。Spruce等的美國專利號6,004,933公開了一類抑制HCV的半胱氨酸蛋白酶抑制劑。Zhang等的美國專利號5,990,276公開了丙型肝炎病毒NS3蛋白酶的合成抑制劑。該抑制劑是NS3蛋白酶的底物或NS4A輔因子的底物的子序列。
植物提取物也用于治療HCV感染。例如，美國專利號6,056,961公開了用于治療HCV感染的植物貫葉連翹(Hypericum perforatum)提取物及其藥用組合物。公開治療HCV感染的植物提取物的其它美國專利包括Tsai等的美國專利號5,837,257、Omer等的美國專利號5,725,859。
瘟病毒屬包括牛病毒性腹瀉病毒(BVDV)、典型豬熱病毒(CSFV，又稱為豬瘟病毒屬)和綿羊的邊界病病毒(BDV)。Moennig V.等，Adv.Vir.Res.4153-98(1992)。在全世界，生畜(牛、豬和綿羊)瘟病毒屬感染造成重大經(jīng)濟(jì)損失(Meyers，G.and Thiel，H.-J.，Advances in VirusResearch，47，53-118，1996；Moennig V.等，Adv.Vir.Res.4153-98，1992)。
按照血清學(xué)親緣性分類，黃病毒屬包括多于68個不同種(Calisher等，J.Gen.Virol.703743，1993)。它們的臨床癥狀不同，這些癥狀包括發(fā)燒、腦炎和出血熱(Fields Virology，EditorsFields，B.N.，Knipe，D.M.，and Howley，P.M.，Lippincott-Raven Publishers，Philadelphia，PA，第31章，931-959，1996)。全球關(guān)注的與人疾病有關(guān)的黃病毒包括登革出血熱病毒(DHF)、黃熱病病毒、休克綜合征和日本腦炎病毒(Halstead，S.B.，Rev.Infect.Dis.6251-264，1984；Halstead，S.B.，Science.239476-481，1988；Monath，T.P.，New Eng.J.Med.，319641-643，1988)。
目前治療黃病毒科病毒感染的標(biāo)準(zhǔn)限于用干擾素或干擾素和利巴韋林聯(lián)合治療。
治療病毒感染的一個策略是針對病毒蛋白酶，該病毒蛋白酶是某些病毒復(fù)制中的必需成分。蛋白酶是催化蛋白水解的酶，例如胃蛋白酶或胰蛋白酶。該水解可產(chǎn)生活性蛋白或完全加工蛋白?；蛘?，蛋白酶可直接將蛋白完全降解。非限定性編碼蛋白酶的病毒目錄包括逆轉(zhuǎn)錄病毒科病毒、小RNA病毒科病毒、皰疹病毒科病毒、黃病毒科病毒、冠型病毒科病毒和披膜病毒科病毒。由于顯著有效治療病毒感染，可能最顯著的是治療病毒感染和用它們成功治療人免疫缺陷性病毒(HIV)感染，人們的關(guān)注點開始集中在病毒蛋白酶上?，F(xiàn)優(yōu)選，蛋白酶抑制劑和逆轉(zhuǎn)錄酶抑制劑聯(lián)合治療HIV感染。
蛋白酶抑制劑已在專利文獻(xiàn)中描述。例如，美國專利號6,114,312公開并要求保護(hù)通過羥基脲、核苷類似物和蛋白酶抑制劑聯(lián)合使用抑制HIV的方法。Medabalimi的美國專利號5,872,210公開并要求保護(hù)病毒蛋白酶的跨讀框肽抑制劑。Tung等的美國專利號5,945,413公開并要求保護(hù)抑制天冬氨酰蛋白酶的化合物。Tucker等的美國專利號6,100,277公開并要求保護(hù)通過給予蛋白酶抑制劑的組合治療逆轉(zhuǎn)錄病毒感染的方法。
小RNA病毒是醫(yī)學(xué)意義重大的人病原體最大家族中的一員，是人疾病例如脊髓灰質(zhì)炎、急性肝炎、心肌炎和普通感冒的主要原因(Wang，Q.M.(1999)Progress In Drug Research 52199-219)。小RNA病毒是小非包膜RNA病毒，它在單個多順反子mRNA上編碼3C蛋白酶。腸道病毒和人鼻病毒是編碼另一種蛋白酶2A蛋白酶的小RNA病毒。病毒2A和3C蛋白酶劃為半胱氨酸蛋白酶類。3C蛋白酶已是抗病毒藥物的靶，因為它存在于小RNA病毒家族的所有成員中，并在多蛋白前體上進(jìn)行多次分裂。3C蛋白酶的催化部位由His-Glu-Cys構(gòu)成。
3C蛋白酶抑制劑可以是肽或非肽類。肽類抑制劑包括肽醛和Michael受體衍生物。非肽類蛋白酶抑制劑包括含有活性羰基的小分子。非肽類蛋白酶抑制劑的實例包括β-內(nèi)酰胺、靛紅、高鄰苯二甲酰亞胺、萘并醌-內(nèi)半縮醛、醌樣桔霉素水合物、根生素和硫酸三萜酯(Wang，Q.M.(1999)Progress In Drug Research 52199-219)。除硫酸三萜酯外，所有此類抑制劑均使3C蛋白酶親核活性部位失活。已有蛋白酶抑制劑治療小RNA病毒的描述(參見Hammond等的美國專利號5,821,331，其中描述了有關(guān)化合物和使肽基-醛成為抗小RNA病毒的藥物的方法)。
皰疹病毒科的病毒成員包括巨細(xì)胞病毒(CMV)、單純皰疹病毒1型(HSV-1)和單純皰疹病毒2型(HSV-2)。皰疹病毒科成員編碼絲氨酸蛋白酶，該蛋白酶在病毒殼體成熟中起主要作用，使該蛋白酶對復(fù)制至關(guān)重要。CMV殼體蛋白酶次晶蛋白在其活性部位含有Ser-His-His。據(jù)報道，氧氮雜萘酮化合物和單環(huán)β-內(nèi)酰胺抑制次晶蛋白(Abood，N.A.等(1997)Bioorg Med Chem.Lett.72105-2108；Collier，AC.等(1996)N.Engl.J.Med 3341011-1017)。也有肽類抑制劑的報道(Patick，A.K.and K.E.Potts(1998)Clinical Microbiology Reviews 11614-627)。Abdel-MegUid等的美國專利號6,008,033和6,083,711公開了新的皰疹蛋白酶結(jié)晶結(jié)構(gòu)和鑒定這些蛋白酶抑制劑的方法。
冠形病毒科包括人呼吸冠形病毒和其它大的包膜正鏈RNA病毒。這些病毒造成人和動物的高度流行性疾病。病毒和宿主蛋白酶均加工多順反子mRNA的初級翻譯產(chǎn)物。冠形病毒傳染性支氣管炎病毒在催化中心編碼具有His和Cys殘基的胰蛋白酶樣蛋白酶(Ng，L.F.等(2000)Virology 272(1)27-39)。人冠形病毒229E(HCoV)的木瓜蛋白酶樣蛋白酶(PLlpro)是一種半胱氨酸蛋白酶，它通過將Glyl11和Asnl12之間的連接點裂解，調(diào)節(jié)復(fù)制酶多蛋白ppla和ppalab的表達(dá)，Glyl11和Asnl12位于其本身的催化殘基Cysl054的最上游(Herold，J.等(1999)J Biol Chem 274(21)14918-25)。
披膜病毒包括α病毒和風(fēng)疹病毒屬(rubiviruses)。Sinbis和Semliki森林病毒是α病毒的實例，風(fēng)疹病毒是風(fēng)疹病毒屬的唯一成員。這些病毒是包膜正型RNA病毒。其中許多可通過蚊子傳播。在α病毒中，基因組RNA用作mRNA，它被翻譯為多蛋白，多蛋白被共翻譯和翻譯后分裂，產(chǎn)生4種多肽nsP1、nsP2、nsP3和nsP4。已鑒定出nsP2含有決定該裂解的蛋白酶活性。在Sinbis病毒中，nsPs翻譯為兩種多蛋白P123和P1234。P1234在3/4部位裂解，產(chǎn)生P123和nsP4，據(jù)認(rèn)為，nsP4是啟動負(fù)鏈合成的復(fù)合物。P123裂解后產(chǎn)生nsP1、nsP2和nsP3，它們與nsP4一起形成進(jìn)行正鏈RNA合成的復(fù)合物(Schlesinger，S.and MJ.Sclesinger，TogaviridaeThe viruses andtheir replication(披膜病毒病毒及其復(fù)制)，摘自Fields Virology，EditorsFields，B.N.，Knipe，D.M.，and Howley，P.M.，Lippincott RavenPublishers，Philadelphia，PA，第27章，825-842，1996)。因此，蛋白酶活性在披膜病毒復(fù)制中至關(guān)重要。
本發(fā)明的目的是提供治療黃病毒科病毒感染的方法和組合物。
本發(fā)明的特殊目的是提供治療HCV感染的方法和組合物。
本發(fā)明的另一個目的是提供治療黃病毒和瘟病毒屬感染的方法和組合物。
本發(fā)明的另一個目的是提供抑制病毒蛋白酶的方法和組合物。
發(fā)明概述 現(xiàn)發(fā)現(xiàn)，通過給予有效量的以下結(jié)構(gòu)的穿心蓮內(nèi)酯衍生物或其順式異構(gòu)體，或其藥學(xué)上可接受的鹽、酯或前藥，人們可治療感染包括黃病毒、瘟病毒屬或丙型肝炎病毒在內(nèi)的黃病毒科病毒的宿主
其中變量在以下發(fā)明詳述中定義。在另一個實施方案中，可用本文中的任何化合物治療其它病毒感染。在又另一個實施方案中，這些化合物可用作蛋白酶抑制劑。在主要的實施方案中，這些化合物作為至少兩種本文中所述穿心蓮內(nèi)酯衍生物的混合物提供。
應(yīng)理解，這些化合物的抗病毒活性可以基于或可以不基于蛋白酶活性或可由或可以不由蛋白酶活性衍生而來。這些抗病毒化合物可通過其它病毒酶或途徑，例如通過聚合酶活性起作用。
已公認(rèn)含有穿心蓮內(nèi)酯的某些酯的穿心蓮(Andrographispaniculata)的注射用提取物對人安全，并已用于各種藥物特性。但在本發(fā)明前，穿心蓮內(nèi)酯衍生物可有效抗黃病毒、瘟病毒屬或丙型肝炎是未知的。在一個實施方案中，通過測量病毒引起的細(xì)胞殺傷減少和病毒產(chǎn)量減少，測定化合物的效力。在優(yōu)選的實施方案中，化合物的EC50小于25、15、10、5或1微摩爾濃度。在一個實施方案中，病毒蛋白酶不是HIV蛋白酶。
在另一個實施方案中，可聯(lián)合或交替給予活性化合物、另一種抗病毒、抗瘟病毒屬、抗黃病毒、抗HCV藥物或抗蛋白酶藥物。在聯(lián)合療法中，一起給予有效劑量的兩種或多種藥物，而在交替治療期間，續(xù)貫給予有效劑量的各藥物。這些劑量取決于藥物的吸收、失活和排泄速率以及本領(lǐng)域技術(shù)人員已知的其它因素。應(yīng)注意，劑量值也要隨欲緩解病癥的嚴(yán)重程度而變化。還應(yīng)理解，對于任何具體的患者，應(yīng)根據(jù)個體的需要和給藥或指導(dǎo)給予組合物的人的專業(yè)判斷，隨時調(diào)整具體的劑量方案和時間表?？膳c穿心蓮內(nèi)酯衍生物聯(lián)合使用的化合物的非限定性實例是硫辛酸和n-乙?；腚装彼?。
附圖簡述

圖1是一組線狀圖，表示牛細(xì)胞感染后，利巴韋林對BVDV細(xì)胞殺傷和對病毒產(chǎn)量的效果。按2×104個細(xì)胞/孔(0.38cm2)密度，接種NCL細(xì)胞，在培養(yǎng)板的一半接種cpBVDV(m.o.i.＝0.01)。用100-0.049μM范圍的利巴韋林處理感染和未感染細(xì)胞3日，然后進(jìn)行亞甲藍(lán)測定，測量細(xì)胞數(shù)目。細(xì)胞殺傷率(％)＝在測定第3天時，[(在未感染、未處理的對照樣品中的細(xì)胞數(shù))(用藥物處理或單獨藥物處理的BVDV感染后的細(xì)胞數(shù))]÷(在未感染、未處理的對照樣品中的細(xì)胞總數(shù))。通過用在測定第3天收集的10倍系列稀釋度的培養(yǎng)基感染新的培養(yǎng)基，測定用藥物處理感染BVDV的細(xì)胞中的病毒產(chǎn)量。在感染后第5天，通過亞甲藍(lán)測定，測量終點滴定度。所示為兩個獨立進(jìn)行的實驗結(jié)果。用峰、對數(shù)正態(tài)、4參數(shù)方程計算產(chǎn)生BVDV感染所致細(xì)胞殺傷減少最大作用的利巴韋林濃度。用S形曲線、對數(shù)、4參數(shù)方程計算殺滅50％未感染細(xì)胞的利巴韋林濃度，和減少病毒滴定度90％的藥物濃度。這些值列于可在本說明書中找到的表1中。
圖2是一組線狀圖，表示牛子宮細(xì)胞感染后，穿心蓮內(nèi)酯衍生物對BVDV細(xì)胞殺傷和病毒產(chǎn)量的作用。按2×104個細(xì)胞/孔(0.38cm2)密度，接種NCL細(xì)胞，在培養(yǎng)板的一半接種cpBVDV(m.o.i.＝0.01)。用2mg/ml-0.976μg/ml范圍的穿心蓮內(nèi)酯衍生物處理感染和未感染細(xì)胞3日，然后進(jìn)行亞甲藍(lán)測定，測量細(xì)胞數(shù)。所示為兩個獨立進(jìn)行的實驗結(jié)果。細(xì)胞殺傷率(％)＝在測定第3天時，[(在未感染、未處理的對照樣品中的細(xì)胞數(shù))(用藥物處理或單獨藥物處理BVDV感染后的細(xì)胞數(shù))]÷(在未感染、未處理的對照樣品中的細(xì)胞總數(shù))。通過用在測定第3天收集的10倍系列稀釋度的培養(yǎng)基感染新的培養(yǎng)基，測定用藥物處理BVDV感染的細(xì)胞中的病毒產(chǎn)量。在感染后第5天，通過亞甲藍(lán)測定，測量終點滴定度。用峰、對數(shù)正態(tài)、4參數(shù)方程計算產(chǎn)生BVDV感染所致細(xì)胞殺傷減少最大作用的藥物濃度。用S形曲線、對數(shù)、4參數(shù)方程計算殺傷50％未感染細(xì)胞的藥物濃度，和減少病毒滴定度90％的藥物濃度。
圖3A是線狀圖，表示牛子宮細(xì)胞感染后，穿心蓮內(nèi)酯衍生物對BVDV細(xì)胞殺傷、病毒產(chǎn)量和細(xì)胞毒性的作用。用感染BVDV的牛子宮細(xì)胞系測定實施例2中所述穿心蓮內(nèi)酯衍生物的抗病毒潛力。圖3B和圖3C是線狀圖，表示分別用相同測定方法，測定利巴韋林和α-干擾素的細(xì)胞殺傷、病毒產(chǎn)量和細(xì)胞毒性。
圖4A是線狀圖，表示穿心蓮內(nèi)酯衍生物在WCH-8細(xì)胞中對細(xì)胞殺傷、病毒產(chǎn)量和細(xì)胞毒性的作用。給WCH-8細(xì)胞接種致細(xì)胞病變的BVDV分離物。感染第5日后，在旱獺肝細(xì)胞系中明顯產(chǎn)生致細(xì)胞病變作用(CPE)。感染第3日后，在上清液中檢測到子代病毒，經(jīng)過3周，在培養(yǎng)基中產(chǎn)生1.5×105和2×106TCD/ml病毒滴定度。圖4B和4C是線狀圖，表示分別用相同測定方法，證實利巴韋林和α-干擾素的相似作用。
圖5A是線狀圖，表示穿心蓮內(nèi)酯衍生物在旱獺初級肝細(xì)胞中對細(xì)胞毒性和病毒產(chǎn)量的作用。給旱獺初級肝細(xì)胞接種致細(xì)胞病變的孤立BVDV。在旱獺初級肝細(xì)胞感染BVDV后，未觀察到明顯CPE。感染第3日后，在上清液中檢測到子代病毒，經(jīng)過3周，在培養(yǎng)基中產(chǎn)生1.5×105和2×106TCD/ml病毒滴定度。圖5B和5C是線狀圖，表示用相同測定方法，利巴韋林和α-干擾素對細(xì)胞毒性和病毒產(chǎn)量的作用。
圖6A是線狀圖，表示在作為陽性對照的BVDV測定中，利巴韋林的累積活性。圖6B是線狀圖，表示在也作為陽性對照的BVDV測定中，α-干擾素的累積活性。
圖7A是線狀圖，是關(guān)于在單一BVDV測定中，本發(fā)明穿心蓮內(nèi)酯類似物的活性。圖7B是線狀圖，表示本發(fā)明穿心蓮內(nèi)酯類似物的累積活性，將9次獨立測定的結(jié)果進(jìn)行平均。
圖8A是在軟瓊脂中進(jìn)行的人骨髓毒性的線狀圖，將重組人粒細(xì)胞/巨噬細(xì)胞集落刺激因子與穿心蓮內(nèi)酯的琥珀酸酯混合物(MTI-3；穿心蓮(Andrographis paniculata)提取物中所含穿心蓮內(nèi)酯衍生物的注射形式，來自Chuan-Hu-Ning；Yi-Bin Pharmaceuticals，Wuliangye Co.Ltd.，Yibin，Sichaun，PR China)和作為對照的AZT作對比。圖8B是在甲基纖維素基質(zhì)中進(jìn)行的人骨髓毒性的線狀圖，其中用紅細(xì)胞生成素(erythropeoetin)與MTI-3和作為對照的AZT作對比。
圖9A是顯示不同藥物對HepG2細(xì)胞中乳酸產(chǎn)量和線粒體DNA產(chǎn)量的作用的圖。圖9B是用不同藥物處理的HepG2細(xì)胞中線粒體DNA和核糖體DNA比例的柱狀圖。用DDC、扎西他濱；3TC、拉米夫定；(+)-BCH-189和DDI、去羥肌苷作對照。ΔΔCt為COXII Ct-核糖體RNA Ct-無藥物對照ΔCt。用實時-PCR測定這些比例。
圖10是MTI-3、C-021(穿心蓮內(nèi)酯的琥珀酸酯，稱為DASM(脫氫穿心蓮內(nèi)酯琥珀酸單酯))化合物的EC50、EC90和CC50的圖，2′-MeC為B-D-2′-甲基-胞苷。
發(fā)明詳述 本發(fā)明是治療感染黃病毒科病毒包括黃病毒、瘟病毒屬或丙型肝炎、其它病毒感染的宿主的方法、化合物和組合物，該方法包括給予有效量的下式穿心蓮內(nèi)酯衍生物
或其順式異構(gòu)體，或其藥學(xué)上可接受的鹽、酯、酯的鹽或以下進(jìn)一步定義的前藥。在備選實施方案中，該化合物可用于抑制蛋白酶例如病毒蛋白酶。某些穿心蓮內(nèi)酯衍生物是已知的，但其他的是新的。
I.穿心蓮(Andrographis paniculata)提取物的背景 穿心蓮(Andrographis paniculata)是爵床(acanthus)科中的一年生草藥，它是廣泛使用的苦補(bǔ)藥劑、解熱藥并用于腸道疾病(Glossary ofIndian Medicinal Plants.，Ed.R.N.Chopra，S.L.Nayar，I.C.Chopra，p18，1996.The usefulplants of India，Ed.By S.B.Ambasta，p39，1992)。還證實該植物可以抗血栓形成(Chinese Medical Journal 1991，104(9)，p770-775)和抑制大鼠狹窄和血管成形術(shù)后的再狹窄(Chinese MedicalJournal，1994,107(6)，p464-470)。初步結(jié)果還表明，它可明顯緩解兔中由去內(nèi)皮化(deendothelialization)和高膽固醇食物引起的動脈粥樣硬化性髂動脈狹窄和血管成形術(shù)后的再狹窄(Wang，D.W.等Chin.Med J.(Engl)107464-470，1994)。
近年來，由于它的細(xì)胞毒性、抗腫瘤發(fā)生、細(xì)胞分化誘導(dǎo)活性和抗HIV活性，穿心蓮(A.paniculata)引起了數(shù)個研究小組的明顯關(guān)注。WO 96/17605公開了穿心蓮(Andrographis paniculata)的甲醇提取物下調(diào)p34 cdc2，并起激酶抑制劑的作用。據(jù)報道，甲醇提取物通過抑制c-Mos，在體外抑制HIV-1復(fù)制。WO 96/17605公開并要求保護(hù)抑制細(xì)胞周期蛋白、c-Mos和細(xì)胞激酶的方法。
據(jù)報道，穿心蓮(Andrographis paniculata)的醇提取物在小鼠中具有免疫刺激作用(Pun，A.等J.Nat.Prod.56995-999，1993)。據(jù)報道，穿心蓮(Andrographis paniculata)提取物已成功治療腫瘤。此類提取物已用于治療絨毛膜上皮癌和絨毛膜腺瘤(Yin，J.，and Guo，L.(1993)Contemporary Traditional Chinese Medicine Xie Yuan，Beijing)。穿心蓮(A.paniculata Nees)的氣生部分的甲醇提取物證實對小鼠骨髓性白血病(M1)細(xì)胞具有有效的細(xì)胞分化誘導(dǎo)活性(Chem.Pharm.Bull.1994，42(6)1216-1225)。
還證實，該植物可用于治療某些細(xì)菌感染(Int.J.Crude Drug Res.1990，28(4)，p273-283；Drugs of the Future.1990，15(8)p809-816)。
還已知，該植物提取物及其成分具有有希望的肝保護(hù)活性(PlantaMedica，1987，53(2)，p135-140)。據(jù)報道，穿心蓮(Andrographispaniculata)的醇提取物可防止四氯化碳引起的肝損害(Rana，A.C.等Arch.Pharm.Res.1493-95，1991)。
穿心蓮(A.paniculata提取物可有效治療某些病毒感染。據(jù)報道，在中國，穿心蓮(Andrographis paniculata)提取物有效治療呼吸道感染和病毒性肺炎，并有市售(Manufacturers Product Description Guide，Yi-Bin Pharmaceuticals，Wuliangye Co.，LTD，Yibin，Sichuan，P.R.China)。還有報道稱，穿心蓮(Andrographis panieulata)提取物有效減少與普通感冒有關(guān)癥狀的流行性和強(qiáng)度(Caceres，D.D.等Phytomedicine 6217-23，1999)，并有報道稱，它具有抗瘧疾作用(Rahman，N.N.A.等J Ethnopharmacol.64249-54，1999；Kapil，A.等Biochem.Pharmacol.46182-185，1993，Int.J.Pharmacognosy.1992，30(4)，p263-274)。
在國際專利申請WO91/01742中，公開了含有一種或多種得自植物(Valeariana officinalis)和/或穿心蓮(A.paniculata)中成分的組合物具有抗病毒、抗瘤、抗菌和免疫調(diào)節(jié)活性。
還有報道稱，可能通過抑制HIV的包膜糖蛋白gp160的蛋白水解性裂解，該植物抑制前蛋白轉(zhuǎn)化酶-1、-7和弗林蛋白酶(Biochem.J.，1999，338，107-113)。但據(jù)報道，穿心蓮(Andrographis paniculata)的水性提取物對HIV-1活性作用很小或無抗病毒作用(Yao，X.J.等Virology18756-62，1992)。Yao等測試了牛蒡子(Arctium lappa)、膜莢黃芪(Astragalus membraneaceus)、穿心蓮(AndrographispaniCulata)和夏枯草(Prunella vulgaris)的粗提取物對HIV-1的抑制作用。只有夏枯草(P.vulgaris)的提取物證實具有抗HIV活性，且Yao等提示，通過阻止gp120與CD4結(jié)合，完成該抑制。
另外，據(jù)報道，穿心蓮(Andrographis pamculata)的提取物對乙型肝炎表面抗原表達(dá)作用很小或無作用(Mehrotra，R.等Indian J.Med.Res.92133-138，1990)。
Gorter首次從穿心蓮(Andrographis paniculata)中分離到穿心蓮內(nèi)酯活性成分(Rec tray.chim.，1911，30，p1S1-160)。穿心蓮內(nèi)酯是雙萜內(nèi)酯，且已知其具有以下自然存在的類似物14-表穿心蓮內(nèi)酯異穿心蓮內(nèi)酯；14-脫氧-12-甲氧基穿心蓮內(nèi)酯；12-表-14-12-甲氧基穿心蓮內(nèi)酯；14-脫氧-12-羥基anthrographolide和14-脫氧-11-羥基穿心蓮內(nèi)酯。以下說明穿心蓮內(nèi)酯的化學(xué)結(jié)構(gòu)。

穿心蓮內(nèi)酯 發(fā)現(xiàn)穿心蓮內(nèi)酯對KB和P388淋巴細(xì)胞性白血病具有顯著的細(xì)胞毒活性。但證實，穿心蓮內(nèi)酯(andrographalide)類似物14-脫氧-11，12-二脫氫穿心蓮內(nèi)酯和新穿心蓮內(nèi)酯(式IV和V)對腫瘤細(xì)胞系無細(xì)胞毒活性(J.Sci.Soc.Thailand，1992，18，187-194)。

類似地，日本專利申請JP 63-88124公開了至少兩種式VIa、VIb化合物的混合物，并描述了它們作為抗腫瘤發(fā)生藥物的活性
(R1、R2、R3、R4和R5為H或低級烷?；?。
也有報道稱，在離體制備的分離大鼠肝細(xì)胞中，穿心蓮內(nèi)酯對撲熱息痛引起的毒性有保護(hù)活性(Visen，P.K.等，J.Ethnopharmacol.40131-136，1993)。
WO 01/85709公開了穿心蓮內(nèi)酯衍生物、其立體異構(gòu)體、其多晶型、其藥學(xué)上可接受的鹽、其藥學(xué)上可接受的溶劑合物，它們可用于治療癌癥、HSV、HIV、銀屑病、再狹窄、動脈粥樣硬化和其它心血管病癥、抗病毒、抗瘧疾、抗菌、肝保護(hù)、免疫調(diào)節(jié)劑和用于治療代謝病。
美國專利5,833,994公開了芳烴受體配體和穿心蓮內(nèi)酯聯(lián)合用于治療病毒感染的用途。
發(fā)現(xiàn)，由式II穿心蓮內(nèi)酯制備的DASM(脫氫穿心蓮內(nèi)酯琥珀酸單酯)抑制HIV病毒，并在50-200ug/ml濃度下，對H9細(xì)胞無毒，在1.6-3.1pg/ml最小濃度下，抑制HIV-1(IIIB)(Chang，R.S.等Proc.Sco.Exp.Biol.Med.19759-66，1991)。Chang等報道，DASM通過干擾病毒體與細(xì)胞結(jié)合和在病毒復(fù)制周期隨后至病毒-細(xì)胞結(jié)合階段干擾，抑制HIV生長。Chang等未進(jìn)行DASM抑制HIV蛋白酶測定。Basak，A.等在Biochem.J.338107-13，1999中報道，雖然穿心蓮內(nèi)酯的琥珀?；パ苌镆种魄暗鞍邹D(zhuǎn)化酶-1、-7和弗林蛋白酶，但證實，穿心蓮內(nèi)酯本身具有相對小的酶抑制活性。
II.活性化合物 本發(fā)明是通過給予有效量的下式穿心蓮內(nèi)酯或其衍生物，或其順式異構(gòu)體，或其藥學(xué)上可接受的鹽、酯、酯的鹽或前藥，來治療感染黃病毒科病毒包括黃病毒、瘟病毒屬或丙型肝炎的宿主的方法、化合物和組合物
其中 B1、B2和B3獨立為CR1R2、C(Y1)、O、NR4、PR5、P(＝Y(jié)2)R6、P(＝Y(jié)3)2、S(＝Y(jié)4)k、間隔基或共價鍵；且k可以為0、1或2；且 W1、W2和W3獨立為CR7R8、CR9、C、C(Y5)、O、NR10、PR11、P(＝Y(jié)6)R12、P(＝Y(jié)7)2、S(＝Y(jié)8)f或共價鍵；且f可以為0、1或2；或 B1-W1、B2-W2和/或B3-W3獨立為CR3＝CR9或C≡C；且 X1、X2和X3獨立為氫、CR18R19R20、C＝R21R22、C≡R23、C≡N、C(＝Y(jié)9)R24、OR25、NR26R27、N＝NR28、P(＝Y(jié)10)d(R29)V、S(＝Y(jié)11)d(R30)i或NO2；且d可以為0、1或2；且v可以為0、1或2；且i可獨立為0或1；且 Y1、Y2、Y3、Y4、Y5、Y6、Y7、Y8、Y9、Y10和Y11獨立為O、S或NZ；且Z可獨立為氫、R13、OR14、SR15或NR16R17；且 R1、R2、R3、R4、R5、R6、R7、R8、R9、R10、R11、R12、R13、R14、R15、R16、R17、R18、R19、R20、R21、R22、R23、R24、R25、R26、R27、R28、R29、R30、R31和R32獨立為以下基團(tuán)氫、烷基、烯基、炔基、環(huán)烷基、環(huán)烯基、環(huán)炔基、芳基、烷芳基、芳基烷基、雜環(huán)基、雜芳基、?；?、醛基、脲基、烷氧基、氨基、鹵素、甲硅烷基、巰基、磺基氧基(sulfoxy)、亞磺?；?、氨磺?；?、羥基、酯基、羧酸、酰胺、硝基、氰基、膦酰基、氧膦基、磷?；Ⅴ啺?、硫代酸酯、醚、酰鹵、肟、氨基甲酸酯、硫醚、天然或合成氨基酸或碳水化合物的殘基，其中任何基團(tuán)可任選通過間隔基連接至目標(biāo)部分或氧基；或者， R1、R2、R3、R4、R5、R6、R7、R8、R9、R10、R11、R12、R13、R14、R15、R16、R17、R18、R19、R20、R21、R22、R23、R24、R25、R26、R27、R28、R29、R30、R31和R32可分別結(jié)合在一起，形成包含以下基團(tuán)的橋連化合物烷基、烯基、炔基、環(huán)烷基、環(huán)烯基、環(huán)炔基、芳基、烷芳基、芳基烷基、雜環(huán)基、雜芳基、?；?、脲基、烷氧基、氨基、鹵素、甲硅烷基、巰基、亞磺?；?、氨磺?；Ⅴセ?、酰胺、膦?；?、氧膦基、磷酰基、酰亞胺、硫代酸酯、醚、肟、氨基甲酸酯、硫醚、天然或合成氨基酸或碳水化合物的殘基，其中任何基團(tuán)可任選通過間隔基連接至目標(biāo)部分或氧基；且 各碳原子不能與兩個以上的雜原子共價結(jié)合；且其中各B、W和X不能都是雜原子部分，除非B、W和X都是氮基部分，或B和X獨立為O或N，且W為PR11、POR12、PO2、S(Y4)m，且m為1或2；且 其中各B和W，或W和X不能兩者均具有通式C(Y)、POR12、PO2、S(＝Y(jié)4)t，和t為1或2。
在一個式I的子實施方案中，B1、B2和B3獨立為CR1R2、C(Y1)、O或共價鍵；W1、W2和W3獨立為CR7R8、CR9、C、C(Y5)、O或共價鍵；且X1、X2和X3獨立為氫、CR18R19R20、C＝R21R22、C≡R23。
在一個式I的子實施方案中，B1、B2和B3中的至少一個和W1、W2和W3中的至少一個是共價鍵，且X1、X2和X3中的至少一個是氫。
在另一個式I的實施方案中，R1、R2、R3、R4、R5、R6、R7、R8、R9、R10、R11、R12、R13、R14、R15、R16、R17、R18、R19、R20、R21、R22、R23、R24、R25、R26、R27、R28、R29、R30、R31和R32中的至少一個選自脂族飽和或不飽和的烷基、烯基或炔基。在一個子實施方案中，烷基、烯基或炔基被取代，且可被鹵素取代。
在一個式I的實施方案中，R1、R2、R3、R4、R5、R6、R7、R8、R9、R10、R11、R12、R13、R14、R15、R16、R17、R18、R19、R20、R21、R22、R23、R24、R25、R26、R27、R28、R29、R30、R31和R32中的至少一個選自含包括但不限于以下基團(tuán)的羰基醛、酮、羧酸、酯基、酰胺、烯酮、酰氯或酸酐。
在一個式I的實施方案中，R1、R2、R3、R4、R5、R6、R7、R8、R9、R10、R11、R12、R13、R14、R15、R16、R17、R18、R19、R20、R21、R22、R23、R24、R25、R26、R27、R28、R29、R30、R31和R32中的至少一個選自烷基、芳基、雜芳基或雜芳環(huán)。
在一個式I的實施方案中，R1、R2、R3、R4、R5、R6、R7、R8、R9、R10、R11、R12、R13、R14、R15、R16、R17、R18、R19、R20、R21、R22、R23、R24、R25、R26、R27、R28、R29、R30、R31和R32中的至少一個獨立選自烷基或硝基。
在一個式I的實施方案中，R1、R2、R3、R4、R5、R6、R7、R8、R9、R10、R11、R12、R13、R14、R15、R16、R17、R18、R19、R20、R21、R22、R23、R24、R25、R26、R27、R28、R29、R30、R31和R32中的至少一個獨立選自磷酸酯基。
在一個式I的實施方案中，R1、R2、R3、R4、R5、R6、R7、R8、R9、R10、R11、R12、R13、R14、R15、R16、R17、R18、R19、R20、R21、R22、R23、R24、R25、R26、R27、R28、R29、R30、R31和R32中的至少一個獨立選自硫酸酯基和巰基。
在一個式I的實施方案中，R1、R2、R3、R4、R5、R6、R7、R8、R9、R10、R11、R12、R13、R14、R15、R16、R17、R18、R19、R20、R21、R22、R23、R24、R25、R26、R27、R28、R29、R30、R31和R32中的至少一個獨立選自胺基。
穿心蓮內(nèi)酯具有許多手性碳原子(即與4個不同取代基連接的碳原子)，因此可存在許多不同的立體化學(xué)構(gòu)型。如果化合物不能與其鏡像疊加，則稱其為“手性”。不可疊加鏡像的立體異構(gòu)體稱為對映體或旋光異構(gòu)體。旋光異構(gòu)體使極化光平面按相反方向旋轉(zhuǎn)。手性作用是對映體具有相反空間取向。因此，稱外消旋體的對映體具有“偏手性”，因為它們象人的一雙手。外消旋化合物是鏡像分子(對映體)的50∶50的混合物?；ゲ粸殓R像的立體異構(gòu)體稱為非對映體。
在一個實施方案中，穿心蓮內(nèi)酯衍生物具有自然中發(fā)現(xiàn)的立體化學(xué)。在其它實施方案中，穿心蓮內(nèi)酯具有非天然存在的立體化學(xué)，或以外消旋體給藥。
在一個實施方案中，本發(fā)明提供通過給予有效量的下式穿心蓮內(nèi)酯或衍生物，或其順式異構(gòu)體，或其藥學(xué)上可接受的鹽、酯、酯的鹽或前藥，來治療感染黃病毒科病毒包括黃病毒、瘟病毒屬或丙型肝炎的宿主的方法、化合物和組合物
其中R31和R32定義同上。
在另一個實施方案中，本發(fā)明提供通過給予有效量的下式穿心蓮內(nèi)酯或衍生物，或其藥學(xué)上可接受的鹽、酯、酯的鹽或前藥，來治療感染黃病毒科病毒包括黃病毒、瘟病毒屬或丙型肝炎的宿主的方法、化合物和組合物
其中取代基的定義同前。
在另一個實施方案中，本發(fā)明提供通過給予有效量的下式穿心蓮內(nèi)酯或衍生物，或其藥學(xué)上可接受的鹽、酯、酯的鹽或前藥，來治療感染黃病毒科病毒包括黃病毒、瘟病毒屬或丙型肝炎的宿主的方法、化合物和組合物
其中取代基的定義同上。
在另一個實施方案中，本發(fā)明提供治療感染黃病毒科病毒包括黃病毒、瘟病毒屬或丙型肝炎的宿主的方法、化合物和組合物，該方法包括給予有效量的下式穿心蓮內(nèi)酯或其衍生物
或其順式異構(gòu)體，或其藥學(xué)上可接受的鹽、酯、酯的鹽或前藥； 其中 B1、B2和B3獨立為CR1R2、C(Y1)、O、NR4、PR5、P(＝Y(jié)2)R6、P(＝Y(jié)3)2、S(＝Y(jié)4)k、間隔基或共價鍵；且k可以為0、1或2；且 W1、W2和W3獨立為CR7R8、CR9、C、C(Y5)、O、NR10、PR11、P(＝Y(jié)6)R12、P(＝Y(jié)7)2、S(＝Y(jié)8)f或共價鍵；且f可以為0、1或2；或 B1-W1、B2-W2和/或B3-W3獨立為CR3＝CR9或C≡C；且 X1、X2和X3獨立為氫、CR18R19R20、C＝R21R22、C≡R23、C≡N、C(＝Y(jié)9)R24、OR25、NR26R27、N＝NR28、P(＝Y(jié)10)d(R29)V、S(＝Y(jié)11)d(R30)i或NO2；且d可以為0、1或2；且v可以為0、1或2；且i可獨立為0或1；且 Y1、Y2、Y3、Y4、Y5、Y6、Y7、Y8、Y9、Y10和Y11獨立為O、S或NZ；且Z可獨立為氫、R13、OR14、SR15或NR16R17；且 R1、R2、R3、R4、R5、R6、R7、R8、R9、R10、R11、R12、R13、R14、R15、R16、R17、R18、R19、R20、R21、R22、R23、R24、R25、R26、R27、R28、R29、R30、R31和R32獨立為以下基團(tuán)氫、烷基、烯基、炔基、環(huán)烷基、環(huán)烯基、環(huán)炔基、芳基、烷芳基、芳基烷基、雜環(huán)基、雜芳基、?；?、醛基、脲基、烷氧基、氨基、鹵素、甲硅烷基、巰基、磺基氧基、亞磺?；被酋；?、羥基、酯基、羧酸、酰胺、硝基、氰基、膦?；?、氧膦基、磷酰基、酰亞胺、硫代酸酯、醚、酰鹵、肟、氨基甲酸酯、硫醚、天然或合成氨基酸或碳水化合物的殘基，其中任何基團(tuán)可任選通過間隔基連接至目標(biāo)部分或氧基；或者， R1、R2、R3、R4、R5、R6、R7、R8、R9、R10、R11、R12、R13、R14、R15、R16、R17、R18、R19、R20、R21、R22、R23、R24、R25、R26、R27、R28、R29、R30、R31和R32可分別結(jié)合在一起，形成包含以下基團(tuán)的橋連化合物烷基、烯基、炔基、環(huán)烷基、環(huán)烯基、環(huán)炔基、芳基、烷芳基、芳基烷基、雜環(huán)基、雜芳基、?；?、脲基、烷氧基、氨基、鹵素、甲硅烷基、巰基、亞磺?；?、氨磺酰基、酯基、酰胺、膦?；⒀蹯⒒?、磷酰基、酰亞胺、硫代酸酯、醚、肟、氨基甲酸酯、硫醚、天然或合成氨基酸或碳水化合物的殘基，其中任何基團(tuán)可任選通過間隔基連接至目標(biāo)部分或氧基；且 各碳原子不能與兩個以上的雜原子共價結(jié)合；且其中B、W和X不能都為雜原子部分，除非B、W和X都是氮基部分，或B和X獨立為O或N，且W為PR11、POR12、PO2、S(Y4)m，且m為1或2；且 其中B和W，或W和X不能兩者均具有通式C(Y)、POR12、PO2、S(＝Y(jié)4)t，和t為1或2。
在又一個實施方案中，本發(fā)明提供通過給予有效量的下式穿心蓮內(nèi)酯或衍生物，或其藥學(xué)上可接受的鹽、酯、酯的鹽或前藥，來治療感染黃病毒科病毒包括黃病毒、瘟病毒屬或丙型肝炎的宿主的方法、化合物和組合物
其中取代基的定義同上。
在又另一個實施方案中，本發(fā)明提供治療感染黃病毒科病毒包括黃病毒、瘟病毒屬或丙型肝炎的宿主的方法、化合物和組合物，該方法包括給予有效量的下式穿心蓮內(nèi)酯或衍生物
或其藥學(xué)上可接受的鹽、酯、酯的鹽或前藥；其中取代基的定義同前。
在另一個實施方案中，本發(fā)明提供治療感染黃病毒科病毒包括黃病毒、瘟病毒屬或丙型肝炎的宿主的方法、化合物和組合物，該方法包括給予有效量的下式穿心蓮內(nèi)酯或衍生物
或其藥學(xué)上可接受的鹽、酯、酯的鹽或前藥；其中取代基的定義同前。
在又另一個實施方案中，本發(fā)明提供治療感染黃病毒科病毒包括黃病毒、瘟病毒屬或丙型肝炎的宿主的方法、化合物和組合物，該方法包括給予有效量的下式穿心蓮內(nèi)酯或衍生物
或其順式異構(gòu)體，或其藥學(xué)上可接受的鹽、酯、酯的鹽或前藥；其中取代基的定義同前。
在又另一個實施方案中，本發(fā)明提供治療感染黃病毒科病毒包括黃病毒、瘟病毒屬或丙型肝炎的宿主的方法、化合物和組合物，該方法包括給予有效量的下式穿心蓮內(nèi)酯或衍生物
或其藥學(xué)上可接受的鹽、酯、酯的鹽或前藥；其中取代基的定義同前。
在另一個實施方案中，本發(fā)明提供治療感染黃病毒科病毒包括黃病毒、瘟病毒屬或丙型肝炎的宿主的方法、化合物和組合物，該方法包括給予有效量的下式穿心蓮內(nèi)酯或衍生物
或其藥學(xué)上可接受的鹽、酯、酯的鹽或前藥。
在另一個實施方案中，本發(fā)明提供治療感染黃病毒科病毒包括黃病毒、瘟病毒屬或丙型肝炎的宿主的方法、化合物和組合物，該方法包括給予有效量的下式穿心蓮內(nèi)酯或衍生物
或其藥學(xué)上可接受的鹽、酯、酯的鹽或前藥。
在另一個實施方案中，本發(fā)明提供治療感染黃病毒科病毒包括黃病毒、瘟病毒屬或丙型肝炎的宿主的方法、化合物和組合物，該方法包括給予有效量的下式穿心蓮內(nèi)酯或衍生物
或其順式異構(gòu)體，或其藥學(xué)上可接受的鹽、酯、酯的鹽或前藥。
在另一個實施方案中，本發(fā)明提供治療感染黃病毒科病毒包括黃病毒、瘟病毒屬或丙型肝炎的宿主的方法、化合物和組合物，該方法包括給予有效量的下式穿心蓮內(nèi)酯或衍生物
或其順式異構(gòu)體，或其藥學(xué)上可接受的鹽、酯、酯的鹽或前藥。
在另一個實施方案中，本發(fā)明提供治療感染黃病毒科病毒包括黃病毒、瘟病毒屬或丙型肝炎的宿主的方法、化合物和組合物，該方法包括給予有效量的下式穿心蓮內(nèi)酯或衍生物
或其順式異構(gòu)體，或其藥學(xué)上可接受的鹽、酯、酯的鹽或前藥。
在另一個實施方案中，本發(fā)明提供治療感染黃病毒科病毒包括黃病毒、瘟病毒屬或丙型肝炎的宿主的方法、化合物和組合物，該方法包括給予有效量的下式穿心蓮內(nèi)酯或衍生物
或其順式異構(gòu)體，或其藥學(xué)上可接受的鹽、酯、酯的鹽或前藥。
在另一個實施方案中，本發(fā)明提供治療感染黃病毒科病毒包括黃病毒、瘟病毒屬或丙型肝炎的宿主的方法、化合物和組合物，該方法包括給予有效量的下式穿心蓮內(nèi)酯或衍生物
或其順式異構(gòu)體，或其藥學(xué)上可接受的鹽、酯、酯的鹽或前藥。
在另一個實施方案中，本發(fā)明提供通過給予有效量的下式穿心蓮內(nèi)酯或衍生物，或其順式異構(gòu)體，或其藥學(xué)上可接受的鹽、酯、酯的鹽或前藥，來治療感染黃病毒科病毒包括黃病毒、瘟病毒屬或丙型肝炎的宿主的方法、化合物和組合物
在另一個實施方案中，本發(fā)明提供通過給予有效量的下式穿心蓮內(nèi)酯或衍生物，或其藥學(xué)上可接受的鹽、酯、酯的鹽或前藥，來治療感染黃病毒科病毒包括黃病毒、瘟病毒屬或丙型肝炎的宿主的方法、化合物和組合物
在另一個實施方案中，本發(fā)明提供通過給予有效量的下式穿心蓮內(nèi)酯或衍生物，或其藥學(xué)上可接受的鹽、酯、酯的鹽或前藥，來治療感染黃病毒科病毒包括黃病毒、瘟病毒屬或丙型肝炎的宿主的方法、化合物和組合物
在另一個實施方案中，本發(fā)明提供通過給予有效量的下式穿心蓮內(nèi)酯或衍生物，或其藥學(xué)上可接受的鹽、酯、酯的鹽或前藥，來治療感染黃病毒科病毒包括黃病毒、瘟病毒屬或丙型肝炎的宿主的方法、化合物知組合物
在另一個實施方案中，本發(fā)明提供通過給予有效量的下式穿心蓮內(nèi)酯或衍生物，或其藥學(xué)上可接受的鹽、酯、酯的鹽或前藥，來治療感染黃病毒科病毒包括黃病毒、瘟病毒屬或丙型肝炎的宿主的方法、化合物和組合物
在另一個實施方案中，本發(fā)明提供通過給予有效量的下式穿心蓮內(nèi)酯或衍生物，或其藥學(xué)上可接受的鹽、酯、酯的鹽或前藥，來治療感染黃病毒科病毒包括黃病毒、瘟病毒屬或丙型肝炎的宿主的方法、化合物和組合物
在另一個實施方案中，穿心蓮內(nèi)酯含至少一個含官能部分的酯基，該官能部分使化合物相對于母體穿心蓮內(nèi)酯的水溶性增加，并具有抗黃病毒科病毒或抗蛋白酶活性，包括但不限于飽和和不飽和的二羧酸及其鹽、氨基羧酸及其鹽、含醛的羧酸及其鹽、胺基、胺基的鹽、酰胺基、醛基及其鹽。在又另一個實施方案中，酯具有官能部分，該官能部分選自磺酸、磺酸酯、磷酸、磷酸酯、環(huán)狀磷酸酯、多羥基烷基、碳水化合物基團(tuán)、C(O)-間隔基-SO3H，其中間隔基為-(CH2)n-、-(CH2)n-CO-、-(CH2)n-N-、-(CH2)n-O-、-(CH2)n-S-、-(CH2O)-、-(OCH2)-、-(SCH2)-、-(CH2S-)、-(芳基-O)-、-(O-芳基)-、-(烷基-O)-、-(O-烷基)-；n為0、1、2、3、4、5、6、7、8、9或10；C(O)-間隔基-SO3M，其中M是用于形成藥學(xué)上可接受的鹽的金屬，例如鈉或鉀；C(O)-間隔基-PO3H2、C(O)-間隔基-PO3M2、C(O)-間隔基-PO3HM、C(O)-間隔基-PO4H、C(O)-間隔基-PO4M、SO3M、-PO3H2、-PO3M2、-PO3HM、環(huán)狀磷酸酯、多羥基烷基、碳水化合物基團(tuán)；C(O)-間隔基-[O(C1-3烷基)p]n，其中n定義同上，且p為1、2或3；-[O(C1-3烷基)p]n、羧基低級烷基、低級烷基羰基低級烷基、N，N-二烷基氨基低級烷基、吡啶基低級烷基、咪唑基低級烷基、嗎啉基低級烷基、吡咯烷基低級烷基、噻唑啉基低級烷基、哌啶基低級烷基、嗎啉基低級羥基烷基、N-吡咯基、哌嗪基低級烷基、N-烷基哌嗪基低級烷基、三唑基低級烷基、四唑基低級烷基、四唑基氨基低級烷基或噻唑基低級烷基。
在一個主要的實施方案中，方法包括將至少兩種本文中所述穿心蓮內(nèi)酯衍生物組合給予宿主，治療或預(yù)防包括黃病毒科病毒感染在內(nèi)的病毒感染。在某些實施方案中，給予至少3種、至少4種或至少5種穿心蓮內(nèi)酯衍生物的混合物。在某些實施方案中，穿心蓮內(nèi)酯衍生物為鹽形式。在這些實施方案中，這些衍生物可以為多種不同鹽的形式，或混合物中的某些化合物可以為某些鹽形式，而其它化合物為不同鹽形式，或不為鹽形式。在某些實施方案中，一起給予單酯和二酯。在另一個實施方案中，一起給予單酯、二酯和三酯。在又另一個實施方案中，聯(lián)合給予單酯、二酯或三酯和任何其它穿心蓮內(nèi)酯衍生物。在一個實施方案中，酯是二羧酸酯。在另一個實施方案中，酯是琥珀酸。
在另一個實施方案中，上述穿心蓮內(nèi)酯衍生物可用于抑制病毒蛋白酶。因此，提供包括給予本文中所述化合物，來抑制病毒蛋白酶的方法?？稍隗w內(nèi)或體外抑制病毒蛋白酶，但在某些實施方案中，體內(nèi)給予感染的宿主，例如感染了可通過減少病毒蛋白酶活性來抑制的病毒的宿主。
在獨立的本發(fā)明實施方案中，上述穿心蓮內(nèi)酯衍生物可用于治療非黃病毒科病毒的病毒感染。因此，在一個實施方案中，提供包括給予感染病毒或有感染病毒風(fēng)險的宿主本文中所述穿心蓮內(nèi)酯衍生物的方法，所述病毒選自逆轉(zhuǎn)錄病毒科、小RNA病毒科、皰疹病毒科、黃病毒科、冠形病毒科和披膜病毒科病毒。可用本文中所述穿心蓮內(nèi)酯衍生物治療的具體病毒是微小RNA病毒(piconavirus)、巨細(xì)胞病毒(CMV)、單純皰疹病毒1型(HSV-1)、單純皰疹病毒2型(HSV-2)、人呼吸性冠形病毒、α-病毒或風(fēng)疹病毒屬。如發(fā)明背景所述，sinbis和semliki森林病毒是α-病毒的實例，風(fēng)疹病毒是風(fēng)疹病毒屬的成員。
公認(rèn)包含某些穿心蓮內(nèi)酯的酯的穿心蓮(Andrographis paniculata)注射用提取物對人安全，已用于各種藥物性質(zhì)；但在本發(fā)明前，有效抗包括丙型肝炎病毒在內(nèi)的黃病毒科病毒的穿心蓮內(nèi)酯衍生物是未知的。在一個實施方案中，通過測量病毒引起的細(xì)胞殺傷減少和病毒產(chǎn)量減少，測定化合物的效力。在優(yōu)選的實施方案中，化合物的EC50小于25、15、10、5或1微摩爾濃度。
在另一個實施方案中，可組合或交替給予活性化合物和另一種抗黃病毒科病毒藥物，另一種抗黃病毒科病毒藥物包括抗黃病毒、抗瘟病毒屬或抗HCV藥物。在聯(lián)合療法中，一起給予有效劑量的兩種或多種藥物，而在交替治療期間，續(xù)貫給予有效劑量的各種藥物。這些劑量取決于藥物的吸收、失活和排泄速率以及本領(lǐng)域技術(shù)人員已知的其它因素。
應(yīng)注意，劑量值也隨待緩解的病癥嚴(yán)重程度而變化。還應(yīng)理解，對于任何具體的患者，應(yīng)根據(jù)個體的需要和給藥或指導(dǎo)給予組合物的人的專業(yè)判斷，隨時間調(diào)整具體的劑量方案和時間表。可與穿心蓮內(nèi)酯衍生物組合使用的化合物的非限定性實例是硫辛酸和n-乙?；腚装彼帷?br> 定義 本文中使用的術(shù)語“獨立”是指獨立應(yīng)用的變量在應(yīng)用與應(yīng)用之間獨立變化。因此，在化合物例如R″XYR″中，其中R″“獨立為碳或氮”，兩個R″可為碳；兩個R″可為氮，或一個R″可以為碳，另一個R″可為氮。
當(dāng)在本文提及范圍例如C1-C6烷基時，表示獨立指該范圍中的各成員。例如C1-C6烷基(或C1-6烷基)獨立表示C1、C2、C3、C4、C5或C6烷基。
單獨或組合的術(shù)語“烷基”表示無環(huán)飽和直鏈、支鏈的或環(huán)狀伯、仲或叔烴，包括含1-10個碳原子或1-6個碳原子的那些。所述烷基可任選被以下定義的基團(tuán)取代。術(shù)語烷基尤其包括但不限于甲基、乙基、丙基、異丙基、環(huán)丙基、丁基、異丁基、叔丁基、仲丁基、戊基、環(huán)戊基、異戊基、新戊基、己基、異己基、環(huán)己基、環(huán)己基甲基、3-甲基戊基、2，2-二甲基丁基和2，3-二甲基丁基、庚基、辛基；壬基、癸基、三氟甲基和二氟甲基。該術(shù)語包括取代的和未取代的烷基?？扇〈榛牟糠职ǖ幌抻诶缌u基、鹵基、硝基、氰基、烯基、炔基、雜芳基、雜環(huán)基、碳環(huán)基、烷氧基、氧代基、芳氧基、芳基烷氧基、環(huán)烷基、四唑基、雜芳氧基；雜芳基烷氧基、碳水化合物、氨基酸、氨基酸酯、氨基酸酰胺、糖醇、鹵代烷硫基(haloalkylthi)、鹵代烷氧基、鹵代烷基、羥基、羧基、?；ⅤＱ趸?、氨基、氨基烷基、氨基?；?、酰氨基、烷基氨基、二烷基氨基、芳基氨基、硝基、氰基、巰基、酰亞胺、磺酸、硫酸酯、磺酸酯、磺?；?、烷基磺?；被酋；?、烷基磺?；被?、鹵代烷基磺酰基、硫烷基、亞磺?；被酋；Ⅳ人狨?、羧酸、酰胺、膦?；⒀蹯⒒?、磷?；?、硫代酸酯、硫醚、肟、肼、氨基甲酸酯、膦酸、磷酸酯、膦酸酯、次膦酸酯、磺酰氨基、羧酰胺基、異羥肟酸、磺酰亞胺或任何其它需要的官能團(tuán)，所述任何其它需要的官能團(tuán)不抑制未被保護(hù)或必要時保護(hù)的該化合物的藥理活性，如本領(lǐng)域技術(shù)人員已知，例如在Greene等，Protective Groups in OrganicSynthesis，John Wiley and Sons，第3版，1999中有教授，該文獻(xiàn)通過引用結(jié)合到本文中。單獨或組合的術(shù)語“環(huán)烷基”表示飽和的或部分不飽和的具有1-10個碳原子的環(huán)狀烷基，包括但不限于單環(huán)或雙環(huán)環(huán)系統(tǒng)，例如環(huán)丙基、環(huán)丁基、環(huán)戊基、環(huán)己烯基和環(huán)己基。除另外說明外，本文中使用的術(shù)語低級烷基是指C1-C5飽和的直鏈、支鏈或在必要時指環(huán)烷基(例如環(huán)丙基)。
本文中使用的術(shù)語碳水化合物包括由碳、氫和氧組成的有機(jī)化合物的任何基團(tuán)，所述有機(jī)化合物包括糖、淀粉和纖維素。
單獨或組合的術(shù)語“烯基”表示無環(huán)直鏈、支鏈或環(huán)狀伯、仲或叔烴，包括含2-10個碳原子或2-6個碳原子的那些，其中該取代基含至少一個碳-碳雙鍵。所述烯基可任選被取代。此類基團(tuán)的實例包括但不限于亞乙基(ethylene)、甲基亞乙基和異丙叉基。
術(shù)語“炔基”是指不飽和的無環(huán)直鏈或支鏈烴基，它可含一個或多個三鍵，包括含約2-10個碳原子或具有2-6個碳原子的此類基團(tuán)。炔基可任選被本文中定義的基團(tuán)取代。合適的炔基的實例包括但不限于乙炔基、丙炔基、羥基丙炔基、丁炔-1-基、丁炔-2-基、戊炔-1-基、戊炔-2-基、4-甲氧基戊炔-2-基、3-甲基丁炔-1-基、己炔-1-基、己炔-2-基、己炔-3-基、3，3-二甲基丁炔-1-基等。
單獨或組合的術(shù)語“?；北硎竞I合至原子團(tuán)的羰基的基團(tuán)。這些原子團(tuán)可包括但不限于選自以下的那些基團(tuán)氫(hydrido)、烷基、烯基、炔基、鹵代烷基、烷氧基、烷氧基烷基、鹵代烷氧基、芳基、雜環(huán)基、雜芳基、烷基亞磺?；榛?、烷基磺?；榛?、芳烷基、環(huán)烷基、環(huán)烷基烷基、環(huán)烯基、烷硫基、芳硫基、氨基、烷基氨基、二烷基氨基、芳烷氧基、芳硫基和烷硫基烷基?！磅；钡姆窍薅ㄐ詫嵗羌柞；?、乙酰基、苯甲?；?、三氟乙酰基、鄰苯二甲?；⒈；燉；取?br> 術(shù)語“烷氧基羰基”和“烷氧羰基”交替使用。單獨或組合使用的該術(shù)語是指-C(O)OR基團(tuán)，其中R為可任選如本文中定義取代的烷基。
單獨或組合的術(shù)語“羥基”表示-OH基團(tuán)。
單獨或組合的術(shù)語“磺?；北硎?S(O)2-基團(tuán)。
術(shù)語“氧代基”是指雙鍵連接的氧(＝O)。
單獨或組合的術(shù)語“碳環(huán)”和“碳環(huán)基”表示任何穩(wěn)定的3元-7元單環(huán)或雙環(huán)或7元-14元雙環(huán)或三環(huán)，或最高達(dá)26元的多環(huán)碳環(huán)，其中任何環(huán)可為飽和、部分不飽和或芳族環(huán)。此類碳環(huán)的實例包括但不限于環(huán)丙基、環(huán)戊基、環(huán)己基、苯基、聯(lián)苯基、萘基、茚滿基、金剛烷基或四氫萘基(1，2，3，4-四氫化萘基)。
單獨或組合的術(shù)語“芳基”表示含1、2或3個環(huán)的碳環(huán)芳族系統(tǒng)，其中此類環(huán)可以側(cè)接的方式連接在一起或可稠合在一起。芳基的實例包括苯基、芐基和聯(lián)苯基。當(dāng)有可能時，“芳基”可任選被例如一個或多個部分取代，這些部分包括但不限于選自以下的那些基團(tuán)烷基、羥基、鹵基、硝基、氰基、烯基、炔基、雜芳基、雜環(huán)基、碳環(huán)基、烷氧基、氧代基、芳氧基、芳基烷氧基、環(huán)烷基、四唑基、雜芳氧基；雜芳基烷氧基、碳水化合物、氨基酸、氨基酸酯、氨基酸酰胺、糖醇、鹵代烷硫基、鹵代烷氧基、鹵代烷基、羥基、羧基、?；ⅤＱ趸?、氨基、氨基烷基、氨基?；Ⅴ０被?、烷基氨基、二烷基氨基、芳基氨基、硝基、氰基、巰基、酰亞胺、磺酸、硫酸酯、磺酸酯、磺?；?、烷基磺酰基、氨基磺?；?、烷基磺?；被?、鹵代烷基磺?；?、硫烷基、亞磺?；?、氨磺?；Ⅳ人狨?、羧酸、酰胺、膦酰基、氧膦基、磷酰基、硫代酸酯、硫醚、肟、肼、氨基甲酸酯、膦酸、磷酸酯、膦酸酯、次膦酸酯、磺酰氨基、羧酰胺基、異羥肟酸、磺酰亞胺或任何其它需要的官能團(tuán)，如本領(lǐng)域技術(shù)人員已知，所述任何其它需要的官能團(tuán)不抑制未被保護(hù)或必要時保護(hù)的該化合物的藥理活性。此外，“芳基”環(huán)上的相鄰基團(tuán)可結(jié)合形成5元-7元飽和或部分不飽和的碳環(huán)、芳環(huán)、雜芳環(huán)或雜環(huán)，它們又可如上述被取代。尤其包括在術(shù)語芳基范圍內(nèi)的是苯基；萘基；苯甲基；苯乙基；3，4，5-三羥基苯基；3，4，5-三甲氧基苯基；3，4，5-三乙氧基苯基；4-氯苯基；4-甲基苯基；3，5-二叔丁基-4-羥基苯基；4-氟苯基；4-氯-1-萘基；2-甲基-1-萘基甲基；2-萘基甲基；4-氯苯基-甲基；4-叔丁基苯基；4-叔丁基苯基甲基等。
術(shù)語芳烷基和芳基烷基是指含烷基取代基的芳基，除另外說明外，是指通過以上定義的烷基與分子連接的以上定義的芳基。術(shù)語烷芳基或烷基芳基是指含芳基取代基的烷基，除另外說明外，是指通過以上定義的芳基與分子連接的以上定義的烷基。在這些基團(tuán)的各基團(tuán)中，烷基可按上述任選被取代，芳基可任選被一個或多個在芳基定義中所述部分取代，未被保護(hù)或必要時保護(hù)，如本領(lǐng)域技術(shù)人員已知，例如在Greene等Protective Groups in Organic Synthesis，John Wiley and Sons，第二版，1991中教授。
“間隔基”可以為任何不消除分子生物活性的二價部分，包括但不限于聚合物、低聚物、烷基；烯基；炔基；烷芳基；芳烷基；芳基；雜芳基；或雜環(huán)二價部分或選自以下的二價部分-(CH2)n-、-(CH2)n-CO-；-CO-(CH2)n-；-N-(CH2)n-；-CO-(CH2)n-；-S-(CH2)n-；-(O-烷基)-；-(S-烷基)-、-(O-烷基)-、-P(O)2R4；-(O-烷基)-；-(CHOH)x(CH2)y-x(即聚氧化烯)；-(CH(烷基))x(CH2)y-x或-(CHOH)x(CH2)y-x-z(CH(烷基))z，其中x+y＝n，且其中x、y和z可以為0、1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11或1 2中的任何整數(shù)；x、y和z可在該部分中隨機(jī)分布，且其中n為0、1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11或12。間隔基可任選被一個或多個部分取代，所述部分包括但不限于選自以下的那些烷基、鹵基、鹵代烷基、羥基、羧基、酰基、酰氧基、氨基、酰氨基、羧基衍生物、烷基氨基、二烷基氨基、芳基氨基、烷氧基、芳氧基、硝基、氰基、磺酸、巰基、亞胺、磺?；⒘蛲榛?、亞磺?；被酋；?sulfamonyl)、酯基、羧酸、酰胺、膦?；⒀蹯⒒?、磷酰基、膦、硫代酸酯、硫醚、酰鹵、酸酐、肟、肼(hydrozine)、氨基甲酸酯、膦酸、膦酸酯或本領(lǐng)域技術(shù)人員已知的任何其它不抑制化合物藥理活性的活潑(viable)官能團(tuán)，它們未被保護(hù)或必要時保護(hù)，例如在Greene等，Protective Groupsin Organic Synthesis，John Wiley and Sons，第2版，1991中教授的。
除另外定義外，本文使用的術(shù)語“保護(hù)”是指與雜原子連接的阻止其進(jìn)一步反應(yīng)或用于其它目的的基團(tuán)。有機(jī)合成領(lǐng)域技術(shù)人員已知很多種氧和氮保護(hù)基團(tuán)。
本文使用的術(shù)語鹵基或鹵素包括氯、溴、碘和氟。
術(shù)語“烷氧基”和“烷氧基烷基”包括直鏈或支鏈含氧基團(tuán)，它們各自含有1-約10個碳原子的烷基部分，例如甲氧基。術(shù)語“烷氧基”是-OR，其中R為包括環(huán)烷基在內(nèi)的烷基。術(shù)語“烷氧基烷基”也包括含有一個或多個與烷基連接的烷氧基的烷基，即形成單烷氧基烷基和二烷氧基烷基。術(shù)語“烷氧基烷基”定義同烷基，其中氫被烷氧基置換。術(shù)語“(烷硫基)烷基”的定義與烷氧基烷基相似，不同之處在于存在硫原子而非氧原子。其它烷氧基是含有1-6個碳原子的“低級烷氧基”基團(tuán)。此類基團(tuán)的非限定性實例包括甲氧基、乙氧基、丙氧基、丁氧基和叔丁氧基烷基?！巴檠趸笨蛇M(jìn)一步被例如一個或多個鹵原子例如氟、氯或溴取代，得到“鹵代烷氧基”基團(tuán)。此類基團(tuán)的非限定性實例包括氟甲氧基、氯甲氧基、三氟甲氧基、二氟甲氧基、三氟乙氧基、氟乙氧基、四氟乙氧基、五氟乙氧基和氟丙氧基。
術(shù)語“烷基氨基”表示分別含一個或兩個與氨基連接的烷基的“單烷基氨基”和“二烷基氨基”。術(shù)語芳基氨基表示分別含一個或兩個與氨基連接的芳基的“單芳基氨基”和“二芳基氨基”。術(shù)語“芳烷基氨基”包括與氨基連接的芳烷基。術(shù)語芳烷基氨基表示分別含一個或兩個與氨基連接的芳烷基的“單芳烷基氨基”和“二芳烷基氨基”。術(shù)語芳烷基氨基還表示含一個芳烷基和一個與氨基連接的烷基的“單芳烷基單烷基氨基”。
術(shù)語“烷硫基”和“芳硫基”為-SR，其中R分別為烷基或芳基。類似地，術(shù)語“烷基亞磺酰基”為R-SO2，其中R為烷基，術(shù)語“烷基磺?；倍x為R-SO3，其中R為烷基。
本文使用的術(shù)語雜芳基或雜芳是指在芳環(huán)中包含至少一個硫、氧、氮或磷的芳族基團(tuán)。與上述芳基那樣，雜芳基可任選被取代。雜芳基可按需要部分或完全氫化。雜芳基上的氧和氮官能團(tuán)必要或期望時可保護(hù)。本領(lǐng)域技術(shù)人員熟知合適的保護(hù)基團(tuán)，它們包括但不限于三甲基甲硅烷基、二甲基己基甲硅烷基、叔丁基二甲基甲硅烷基和叔丁基二苯基甲硅烷基；三苯甲基或取代的三苯甲基；烷基；?；缫阴；捅；?、甲磺?；蛯妆交酋；?。
術(shù)語“雜環(huán)基”是指可部分(含至少一個雙鍵)或完全飽和的非芳族環(huán)狀基團(tuán)，其中環(huán)中有至少一個雜原子例如氧、硫、氮或磷。雜環(huán)基可任選被一個或多個部分取代，所述部分包括但不限于選自以下的那些烷基、鹵基、鹵代烷基、羥基、羧基、酰基、酰氧基、氨基、酰氨基、羧基衍生物、烷基氨基、二烷基氨基、芳基氨基、烷氧基、芳氧基、硝基、氰基、磺酸、巰基、亞胺、磺酰基、硫烷基、亞磺?；被酋；Ⅴセ?、羧酸、酰胺、膦?；⒀蹯⒒?、磷酰基、膦、硫代酸酯、硫醚、酰鹵、酸酐、肟、肼、氨基甲酸酯、膦酸、膦酸酯，或本領(lǐng)域技術(shù)人員已知的任何其它不抑制該化合物藥理活性的活潑官能團(tuán)，它們未被保護(hù)或必要時保護(hù)，例如在Greene等，Protective Groups in Organic Synthesis，John Wiley and Sons，第2版，1991中教授的。
雜環(huán)基和雜芳基的非限定性實例是吡咯烷基、四氫呋喃基、哌嗪基、哌啶基、嗎啉代、硫代嗎啉代、四氫吡喃基、咪唑基、吡咯啉基、吡唑啉基、二氫吲哚基、二氧戊環(huán)基或1，4-二烷基、氮丙啶基、呋喃基(furyl)、呋喃基(furanyl)、吡啶基、嘧啶基、苯并唑基、1，2，4-二唑基、1，3，4-二唑基、1，3，4-噻二唑基、吲唑基、1，3，5-三嗪基、噻吩基、異噻唑基、咪唑基、四唑基、吡嗪基、苯并呋喃基、喹啉基、異喹啉基、苯并噻吩基、異苯并呋喃基、吡唑基、吲哚基、異吲哚基、苯并咪唑基、嘌呤基、咔唑基、唑基、噻唑基、苯并噻唑基、異噻唑基、1，2，4-噻二唑基、異唑基、吡咯基、喹唑啉基、肉啉基、2，3-二氮雜萘基、黃嘌呤基、次黃嘌呤基、吡唑、咪唑、1，2，3-三唑、1，2，4-三唑、1，2，3-二唑、噻嗪、噠嗪或蝶啶基，其中所述雜芳基或雜環(huán)基可任選被一個或多個取代基取代，所述取代基選自與上述芳基所提出的相同的取代基。必要或期望時可保護(hù)雜芳基上的氧和氮官能團(tuán)。
術(shù)語氨基酸是指自然存在和合成的氨基酸，包括但不限于丙氨酰、纈氨酰、亮氨酰、異亮氨酰、脯氨酰、苯丙氨酰、色氨酰、甲硫氨酰、甘氨酰、絲氨酰、蘇氨酰、半胱氨酰、酪氨酰、門冬酰、谷氨酰、天冬酰、戊二酰、賴氨酰、精氨酰和組氨酰。
本文使用的術(shù)語“醚”是指被獨立的烷基或一起形成環(huán)或橋的兩個烷基二取代的氧。非限定性實例包括3-(咪唑-1-基)丙氧基、4-(咪唑-1-基)丁氧基、5-(咪唑-1-基)戊氧基、2-(苯并咪唑-1-基)乙氧基、3-(苯并咪唑-1-基)-丙氧基、4-(苯并咪唑-1-基)丁氧基、5-(苯并咪唑-1-基)戊氧基、2-(四氫苯并咪唑-1-基)乙氧基、3-(四氫苯并咪唑-1-基)丙氧基、4-(四氫苯并咪唑-1-基)丁氧基、5-(四氫苯并咪唑-1-基)戊氧基、乙氧基、正丙氧基或異丙氧基。醚也可任選被一個或多個部分取代，這些部分包括但不限于選自以下的那些烷基、鹵基、鹵代烷基、羥基、羧基、?；?、酰氧基、氨基、酰氨基、羧基衍生物、烷基氨基、二烷基氨基、芳基氨基、烷氧基、芳氧基、硝基、氰基、磺酸、巰基、亞胺、磺酰基、硫烷基、亞磺?；被酋；?、酯基、羧酸、酰胺、膦?；?、氧膦基、磷?；?、膦、硫代酸酯、硫醚、酰鹵、酸酐、肟、肼(hydrozine)、氨基甲酸酯、膦酸、膦酸酯，或本領(lǐng)域技術(shù)人員已知的任何其它不抑制該化合物藥理活性的活潑官能團(tuán)，它們未被保護(hù)或必要時保護(hù)，例如在Greene等，Protective Groups inOrganic Synthesis，John Wiley and Sons，第2版，1991中教授的。
本文中使用的術(shù)語“磺基氧基”是指五價硫部分。非限定性實例包括甲磺酰基氧基、乙磺?；趸?、正丙磺?；趸?、異丙磺?；趸⒄』酋；趸?、苯磺?；趸?、4-氟苯磺?；趸?、4-溴苯磺酰基氧基、4-甲基苯磺酰基氧基、4-甲氧基苯磺?；趸?，4-二氯苯磺?；趸⒈交?甲磺?；趸?、2-苯基乙磺酰基氧基或3-苯基丙磺?；趸??；腔趸部扇芜x被一個或多個部分取代，這些部分包括但不限于選自以下的那些烷基、鹵基、鹵代烷基、羥基、羧基、?；ⅤＱ趸?、氨基、酰氨基、羧基衍生物、烷基氨基、二烷基氨基、芳基氨基、烷氧基、芳氧基、硝基、氰基、磺酸、巰基、亞胺、磺?；⒘蛲榛?、亞磺酰基、氨磺?；?、酯基、羧酸、酰胺、膦酰基、氧膦基、磷?；㈧?、硫代酸酯、硫醚、酰鹵、酸酐、肟、肼、氨基甲酸酯、膦酸、膦酸酯，或本領(lǐng)域技術(shù)人員已知的任何其它不抑制該化合物藥理活性的活潑官能團(tuán)，它們未被保護(hù)或必要時保護(hù)，例如在Greene等，Protective Groups in OrganicSynthesis，John Wiley and Sons，第2版，1991中教授的。
本文中使用的術(shù)語“酰胺”是指其中由胺形成非烷基部分的羰基部分。酰胺基也可任選被一個或多個部分取代，這些部分包括但不限于選自以下的那些烷基、鹵基、鹵代烷基、羥基、羧基、?；?、酰氧基、氨基、酰氨基、羧基衍生物、烷基氨基、二烷基氨基、芳基氨基、烷氧基、芳氧基、硝基、氰基、磺酸、巰基、亞胺、磺?；?、硫烷基、亞磺?；?、氨磺?；?、酯基、羧酸、酰胺、膦酰基、氧膦基、磷?；?、膦、硫代酸酯、硫醚、酰鹵、酸酐、肟、肼、氨基甲酸酯、膦酸、膦酸酯，或本領(lǐng)域技術(shù)人員已知的任何其它不抑制該化合物藥理活性的活潑官能團(tuán)，它們未被保護(hù)或必要時保護(hù)，例如在Greene等，Protective Groups in Organic Synthesis，John Wileyand Sons，第2版，1991中教授的。
本文中使用的術(shù)語“酰亞胺”是指其中羰基碳與氮而非氧雙鍵鍵合的羰基衍生物。酰亞胺也可任選被一個或多個部分取代，這些部分包括但不限于選自以下的那些烷基、鹵基、鹵代烷基、羥基、羧基、酰基、酰氧基、氨基、酰氨基、羧基衍生物、烷基氨基、二烷基氨基、芳基氨基、烷氧基、芳氧基、硝基、氰基、磺酸、巰基、亞胺、磺酰基、硫烷基、亞磺酰基、氨磺?；?、酯基、羧酸、酰胺、膦?；⒀蹯⒒?、磷?；㈧?、硫代酸酯、硫醚、酰鹵、酸酐、肟、肼、氨基甲酸酯、膦酸、膦酸酯，或本領(lǐng)域技術(shù)人員已知的任何其它不抑制該化合物藥理活性的活潑官能團(tuán)，它們未被保護(hù)或必要時保護(hù)，例如在Greene等，Protective Groups in Organic Synthesis，JohnWiley and Sons，第2版，1991中教授的。
術(shù)語“氨磺酰基”是與至少兩個氧和氮共價結(jié)合的六價硫。氨磺酰基也可任選被一個或多個部分取代，這些部分包括但不限于選自以下的那些烷基、鹵基、鹵代烷基、羥基、羧基、?；?、酰氧基、氨基、酰氨基、羧基衍生物、烷基氨基、二烷基氨基、芳基氨基、烷氧基、芳氧基、硝基、氰基、磺酸、巰基、亞胺、磺?；?、硫烷基、亞磺?；?、氨磺?；Ⅴセ?、羧酸、酰胺、膦?；⒀蹯⒒?、磷?；㈧?、硫代酸酯、硫醚、酰鹵、酸酐、肟、肼、氨基甲酸酯、膦酸、膦酸酯，或本領(lǐng)域技術(shù)人員已知的任何其它不抑制該化合物藥理活性的活潑官能團(tuán)，它們未被保護(hù)或必要時保護(hù)，例如在Greene等，Protective Groups in Organic Synthesis，John Wiley andSons，第2版，1991中教授的。
術(shù)語“脲”是指兩側(cè)與氮連接的羰基。脲基也可任選被一個或多個部分取代，這些部分包括但不限于選自以下的那些烷基、鹵基、鹵代烷基、羥基、羧基、?；ⅤＱ趸?、氨基、酰氨基、羧基衍生物、烷基氨基、二烷基氨基、芳基氨基、烷氧基、芳氧基、硝基、氰基、磺酸、巰基、亞胺、磺?；?、硫烷基、亞磺?；?、氨磺酰基、酯基、羧酸、酰胺、膦?；?、氧膦基、磷酰基、膦、硫代酸酯、硫醚、酰鹵、酸酐、肟、肼、氨基甲酸酯、膦酸、膦酸酯，或本領(lǐng)域技術(shù)人員已知的任何其它不抑制該化合物藥理活性的活潑官能團(tuán)，它們未被保護(hù)或必要時保護(hù)，例如在Greene等，ProtectiveGroups in Organic Synthesis，John Wiley and Sons，第2版，1991中教授的。
術(shù)語“硫基(代)”是指與氫或基于碳的基團(tuán)共價結(jié)合的硫。單獨或組合的術(shù)語“巰基”表示-SH基團(tuán)。非限定性實例包括甲基巰基、乙基巰基、正丙基巰基、異丙基巰基或正丁基巰基、乙硫基、正丙硫基或異丙硫基。硫基也可任選被一個或多個部分取代，這些部分包括但不限于選自以下的那些烷基、鹵基、鹵代烷基、羥基、羧基、?；ⅤＱ趸?、氨基、酰氨基、羧基衍生物、烷基氨基、二烷基氨基、芳基氨基、烷氧基、芳氧基、硝基、氰基、磺酸、巰基、亞胺、磺?；?、硫烷基、亞磺?；被酋；?、酯基、羧酸、酰胺、膦?；⒀蹯⒒?、磷酰基、膦、硫代酸酯、硫醚、酰鹵、酸酐、肟、肼、氨基甲酸酯、膦酸、膦酸酯，或本領(lǐng)域技術(shù)人員已知的任何其它不抑制該化合物藥理活性的活潑官能團(tuán)，它們未被保護(hù)或必要時保護(hù)，例如在Greene等，Protective Groups in Organic Synthesis，JohnWiley and Sons，第2版，1991中教授的。
術(shù)語“氨酯”或“氨基甲酸酯”是指-OC(O)NR4R5，其中R4和獨立選自直鏈、支鏈或環(huán)狀烷基或低級烷基；包括甲氧基甲基在內(nèi)的烷氧基烷基；包括芐基在內(nèi)的芳烷基；芳氧基烷基例如苯氧基甲基；包括任選被鹵素取代的苯基在內(nèi)的芳基；C1-C4烷基或C1-C4烷氧基；磺酸酯例如包括甲磺?；趦?nèi)的烷基或芳烷基磺?；?；一、二或三磷酸酯；三苯甲基或一甲氧基三苯甲基；取代的芐基；三烷基甲硅烷基(例如二甲基-叔丁基甲硅烷基)或二苯基甲基甲硅烷基。脲中的芳基通常含苯基。術(shù)語“低級脲”是指其中非羰基部分是低級烷基的脲基。脲基也可任選被一個或多個部分取代，這些部分包括但不限于選自以下的那些烷基、鹵基、鹵代烷基、羥基、羧基、?；?、酰氧基、氨基、酰氨基、羧基衍生物、烷基氨基、二烷基氨基、芳基氨基、烷氧基、芳氧基、硝基、氰基、磺酸、巰基、亞胺、磺?；?、硫烷基、亞磺?；被酋；?、酯基、羧酸、酰胺、膦?；?、氧膦基、磷?；㈧?、硫代酸酯、硫醚、酰鹵、酸酐、肟、肼、氨基甲酸酯、膦酸、膦酸酯，或本領(lǐng)域技術(shù)人員已知的任何其它不抑制該化合物藥理活性的活潑官能團(tuán)，它們未被保護(hù)或必要時保護(hù)，例如在Greene等，Protective Groups in Organic Synthesis，John Wileyand Sons，第2版，1991中教授的。
本文中使用的術(shù)語“宿主”是指其中病毒可復(fù)制的單細(xì)胞或多細(xì)胞有機(jī)體，包括細(xì)胞系和動物，優(yōu)選人。或者，宿主可攜帶HCV、黃病毒或瘟病毒屬基因組的一部分，其復(fù)制或功能可被本發(fā)明化合物改變。在某些實施方案中，術(shù)語宿主尤其指感染的細(xì)胞、被所有或部分病毒基因組例如黃病毒、瘟病毒屬或HCV的基因組轉(zhuǎn)染的細(xì)胞，和動物尤其靈長類動物(包括黑猩猩)和人。在本發(fā)明的大多數(shù)動物應(yīng)用中，宿主為人類患者。但本發(fā)明預(yù)計某些適應(yīng)征治療適用于獸醫(yī)應(yīng)用。
藥學(xué)上可接受的鹽、酯和前藥 在化合物有足夠堿性或酸性形成穩(wěn)定的無毒酸或堿鹽的情況下，可能適合給予化合物的藥學(xué)上可接受的鹽。藥學(xué)上可接受的鹽或絡(luò)合物是指所述化合物的鹽或絡(luò)合物，此類鹽或絡(luò)合物保留母體化合物的所期望生物活性，既便有毒性，其有害毒性作用也是最小。藥學(xué)上可接受的鹽包括但不限于由藥學(xué)上可接受的無機(jī)或有機(jī)堿和酸衍生的那些，由堿金屬例如鉀和鈉和堿土金屬例如鈣和鎂衍生的那些。可通過例如使有足夠堿性的化合物例如胺與合適的酸反應(yīng)，得到生理上可接受的陰離子，得到藥學(xué)上可接受的鹽。
合適的鹽的非限定性實例是由無機(jī)酸(例如鹽酸、氫溴酸、硫酸、磷酸、硝酸、碳酸、重碳酸等)形成的酸加成鹽，和由例如以下有機(jī)酸形成的鹽乙酸、檸檬酸、丙二酸、草酸、酒石酸、琥珀酸、蘋果酸、抗壞血酸、苯甲酸、丹寧酸、雙羥萘酸、藻酸、聚谷氨酸、萘磺酸、萘二磺酸、甲苯磺酸、甲磺酸、α-酮戊二酸、α-甘油磷酸、聚半乳糖醛酸等；(b)由例如以下的多價金屬陽離子形成的堿加成鹽鈉、鉀、鋰、鋅、鈣、鉍、鋇、鎂、鋁、銅、鈷、鎳、鎘等，或由N，N-二芐基乙二胺、銨或乙二胺形成的有機(jī)陽離子形成的鹽；或(c)(a)和(b)的組合；例如鞣酸鋅鹽等。
活性化合物可以是穿心蓮內(nèi)酯的二酯或單酯。術(shù)語“酯”是指側(cè)面與烷氧基和基于碳的基團(tuán)連接的羰基。穿心蓮內(nèi)酯的酯由一種或多種二羧酸形成，包括但不限于油酸、丙二酸、琥珀酸、戊二酸、己二酸、辛二酸、癸二酸、壬二酸、馬來酸、富馬酸、鄰苯二甲酸、間苯二甲酸、庚二酸、乙炔二羧酸、戊烯二酸、二氫粘康酸、十二烷二酸、2，5-吡啶二羧酸、3，4-吡啶二羧酸、戊炔二酸(glutidinic acid)、煙堿二酸、吡啶二羧酸、2，3-吡啶二羧酸、5-乙基-2，3-吡啶二羧酸、吡嗪-2，3-二羧酸、吡嗪-2，5-二羧酸、吡嗪-2，6-二羧酸、呋喃-2，5-二羧酸、2-氧代四氫呋喃-4，5-二羧酸、6-氧代-1，4，5，6-四氫噠嗪-3-羧酸、反式-環(huán)己烷-1，3-二羧酸二甲酯、4，4′-均二苯乙烯二羧酸、偶氮二羧酸、吡唑-3，4-二羧酸、1，4-環(huán)己烷二羧酸、環(huán)己烷-1，1-二羧酸、萘-2，6-二羧酸、2，4，6-三甲基-3，5-吡啶二羧酸、氯菌酸、3-叔丁基己二酸、2-叔丁基己二酸、乙?；?丁二酸、(二甲氧基硫膦基)硫代丁二酸、3，4-(二甲氧基苯基)亞甲基-丙二酸、(二甲氧基氧膦基)硫代丁二酸、(2z，4z)-2，5-二甲基-2，4-己二烯二酸、三甲基丁二酸、三乙基丁二酸、苯基丙二酸、2，2，6，6-四甲基庚二酸、(四丙烯基)-丁二酸、1，4-二異癸基磺基丁二酸、3-甲基己二酸、2-甲基己二酸、(2s，4r)-4-甲基谷氨酸、二乙基丁二酸、二丁基丁二酸、二戊基丁二酸、二己基丁二酸、二庚基丁二酸、二辛基丁二酸、3，3-二甲基戊二酸、1，3-二硫代戊環(huán)-2-亞基丙二酸、4-羥基亞芐基丙二酸、二-1，4-鄰苯甲?；?酒石酸、二-1，4-鄰甲苯甲?；?酒石酸、二乙?；?酒石酸、iminoeliacteic酸、蘇糖酸、4，5-咪唑二羧酸、吡唑-3，4-二羧酸、3，5-吡唑二羧酸、2-溴-丙二酸、2-碘-丙二酸、2-氟-丙二酸、2-氯-丙二酸、環(huán)丙烷-1，1-二羧酸、環(huán)丁烷-1，1-二羧酸、環(huán)戊烷-1，1-二羧酸、環(huán)己烷-1，1-二羧酸、環(huán)庚烷-1，1-二羧酸、環(huán)辛烷-1，1-二羧酸、檸蘋酸酯、衣康酸、中康酸、草酸、二溴馬來酸、二氯馬來酸、二碘馬來酸、二氟馬來酸、二疊氮基馬來酸、二氰基馬來酸(dicyanoaleic acid)、二氨基馬來酸、四氟琥珀酸、四碘琥珀酸、四氯琥珀酸、四溴琥珀酸、二氯二溴琥珀酸、二氯二碘琥珀酸、二氯二氟琥珀酸、二溴二碘琥珀酸、二氯二氟琥珀酸、二氟二碘琥珀酸、二溴二氟琥珀酸、甲基丙二酸、乙基丙二酸、丁基丙二酸、戊基丙二酸、己基丙二酸、庚基丙二酸、辛基丙二酸、三唑二羧酸、硫羥蘋果酸、二硫羥蘋果酸、三蘋果酸(trimalic acid)、二甘酸、丙酮二羧酸、酮戊二酸、二甲基nitomalonic acid、檸檬醛丙二酸(citramalonic acid)、n-(膦酰基甲基)-亞氨基二乙酸、八氟己二酸、八碘己二酸、八溴己二酸、八氯己二酸、4，5-異唑二羧酸、二乙基偶氮二羧酸、噻二西酸(tidiacic)、4，5-咪唑二羧酸、氧化偶氮苯-4，4′-二羧酸、重氮基二羧酸、檸檬酸、(三氟乙酰氨基)琥珀酸、3，4-二甲基噻吩并(2，3-b)噻酚-2，5-二羧酸、乙酰氧基琥珀酸、acetinic酸、異檸檬酸、氫化粘康酸(hydromuconic acid)、氧代己二酸、丙三羧酸、氮三乙酸、n-乙?；於彼峄?qū)Ρ蕉姿狨セ蛩鼈兊乃帉W(xué)上可接受的鹽包括鈉或鉀鹽。在一個備選實施方案中，二羧酸酯之一與穿心蓮內(nèi)酯的兩個羥基連接，形成內(nèi)環(huán)結(jié)構(gòu)。在另一個實施方案中，給予穿心蓮內(nèi)酯的單-或二-琥珀酸酯，尤其是其中酯之一內(nèi)部環(huán)合至穿心蓮內(nèi)酯環(huán)的二琥珀酸酯。
在另一個實施方案中，穿心蓮內(nèi)酯是藥學(xué)上可接受的酯形式，以例如使該化合物相對于其穿心蓮內(nèi)酯母核水溶性增加，并具有HCV活性。此類藥學(xué)上可接受的酯包括但不限于飽和和不飽和的二羧酸及其鹽、氨基羧酸及其鹽、含醛的羧酸及其鹽、胺基、胺基的鹽、酰胺基、醛基及其鹽。在又另一個實施方案中，酯具有選自以下的官能部分磺酸、磺酸酯、磷酸、磷酸酯、環(huán)狀磷酸酯、多羥基烷基、碳水化合物基團(tuán)、C(O)-間隔基-SO3H，其中間隔基是-(CH2)n-、-(CH2)n-CO-、-(CH2)n-N-、-(CH2)n-O-、-(CH2)n-S-、-(CH2O)-、-(OCH2)-、-(SCH2)-、-(CH2S)-、-(芳基-O)-、-(O-芳基)-、-(烷基-O)-、-(O-烷基)-；n為0、1、2、3、4、5、6、7、8、9或10；C(O)-間隔基-SO3M，其中M為用于形成藥學(xué)上可接受鹽的金屬例如鈉或鉀；C(O)-間隔基-PO3H2、C(O)-間隔基-PO3M2、C(O)-間隔基-PO3HM、C(O)-間隔基-PO4H、C(O)-間隔基-PO4M、SO3M、-PO3H2-PO3M2、-PO3HM、環(huán)狀磷酸酯、多羥基烷基、碳水化合物基團(tuán)；C(O)-間隔基-[O(C1-3烷基)p]n，其中n定義同上，p為1、2或3；-[O(C1-3烷基)p]n、羧基低級烷基、低級烷基羰基低級烷基、N，N-二烷基氨基低級烷基、吡啶基低級烷基、咪唑基低級烷基、嗎啉基低級烷基、吡咯烷基低級烷基、噻唑啉基低級烷基、哌啶基低級烷基、嗎啉基低級羥基烷基、N-吡咯基、哌嗪基低級烷基、N-烷基哌嗪基低級烷基、三唑基低級烷基、四唑基低級烷基、四唑基氨基低級烷基或噻唑基低級烷基。
藥學(xué)上可接受的前藥是指在宿主中代謝例如水解(在藥學(xué)上可接受的酯情況下)或氧化，形成本發(fā)明化合物的化合物。Hardma等(Eds.)在Goodman and Gilman′s The Pharmacological Basis of Therapeutics，第9版，第11-16頁(1996)中對前藥設(shè)計進(jìn)行了一般性論述。Higuchi等在Prodrugs as Novel Delivery Systems，第14卷，ASCD SymposiumSeries和在Roche(ed.)，Bioreversible Carriers in Drug Design，AmericanPharmaceutical Association and Pergamon Press(1987)中還提供詳細(xì)的論述。通常，給藥后，藥物在身體中消除或進(jìn)行某種生物轉(zhuǎn)化，由此藥物的生物活性降低或消除。或者，生物轉(zhuǎn)化過程可產(chǎn)生代謝副產(chǎn)物，它的活性大于或等于初始給予藥物的活性。因此，前藥包括通過某些方式轉(zhuǎn)化為藥理活性代謝物的化合物?？稍O(shè)計與內(nèi)源性化合物反應(yīng)，形成水溶性軛合物的前藥，該軛合物進(jìn)一步提高化合物的藥理性質(zhì)，例如循環(huán)半衰期增加?；蛘?，可設(shè)計經(jīng)過在官能團(tuán)上用例如葡糖醛酸、硫酸酯、谷胱甘肽、氨基酸或乙酸酯共價修飾的前藥。得到的軛合物可失活和在尿中排泄，或被賦予比母體化合物更強(qiáng)的活性。高分子量的軛合物還可排泄到膽汁中，經(jīng)過酶裂解，釋放，返回循環(huán)，由此有效增加最初給藥化合物的生物半衰期。
前藥的典型實例包括在活性化合物的官能部分上具有生物不穩(wěn)定保護(hù)基團(tuán)的化合物。前藥包括可經(jīng)氧化、還原、胺化、去胺化、羥基化，脫羥基化、水解、脫水、烷基化、脫烷基化、?；?、脫?；?、磷酰化、脫磷?；蟮玫交钚曰衔锏幕衔铩１景l(fā)明化合物具有抗黃病毒、瘟病毒屬或HCV的抗病毒活性，或代謝為具有這種活性的化合物。
聯(lián)合和/或交替療法 人們已認(rèn)識到，用抗病毒藥物長時間治療后，可出現(xiàn)包括HCV在內(nèi)的耐藥性病毒變種。編碼用于病毒復(fù)制的酶的基因突變，最典型地引起耐藥產(chǎn)生。另外，某些HCV基因型具有賦予干擾素抗性的干擾素-敏感性決定區(qū)域。可通過聯(lián)合或交替給予化合物、第二種和可能第三種抗病毒化合物，延長、增加或恢復(fù)抗病毒感染藥物的效力，包括抑制病毒蛋白酶，所述抗病毒化合物引起與主藥產(chǎn)生的突變不同的突變。因為耐藥基因可能已經(jīng)存在，聯(lián)合療法可允許一種藥物靶向復(fù)制所必需的不同組的病毒基因?；蛘撸赏ㄟ^這種聯(lián)合或交替療法，改變藥物的藥代動力學(xué)、生物分布或其它參數(shù)。一般而言，在聯(lián)合療法和交替療法中，通常優(yōu)選聯(lián)合療法，因為它引起對病毒多種同時發(fā)生的壓力。
發(fā)明背景中所述的任何病毒治療可用于與本說明書中所述化合物的聯(lián)合或交替療法。
例如，可聯(lián)合或交替給予化合物和干擾素基療法(參見例如Battaglia，A.M.等，Ann.Pharmacother.34487-494，2000)；Berenguer，M.等，Antivir.Ther.3(Suppl.3)125-136，1998)。此外，許多專利公開了用干擾素基療法的治療。例如，Blatt等的美國專利號5,980,884公開了用共有序列干擾素再治療HCV感染患者的方法。Bazer等的美國專利號5,942,223公開了用綿羊或牛干擾素-τ的抗HCV療法。Alber等的美國專利號5,928,636公開了用白介素-12和干擾素-α聯(lián)合療法治療包括HCV在內(nèi)的傳染病。Glue等的美國專利號5,908,621公開了聚乙二醇修飾的干擾素治療HCV的用途。Chretien等的美國專利號5,849,696公開了單獨的胸腺素或胸腺素與干擾素的組合治療HCV的用途。Valtuena等的美國專利號5,830,455公開了用干擾素和自由基清除劑的聯(lián)合HCV療法。Imakawa的美國專利號5,738,845公開了人干擾素τ蛋白治療HCV的用途。在Testa等的美國專利號5,676,942、Blatt等的美國專利號5,372,808和美國專利號5,849,696中公開了治療HCV的其它干擾素基療法。
Idenix Pharmaceuticals，Ltd在美國專利號6,812,219、6,914,054、美國專利公布號2003/0050229 A1和美國專利公布號2003/0060400 A1中公開了支鏈核苷及其在治療HCV、黃病毒和瘟病毒屬中的用途；美國專利公布號2003/0050229 A1和美國專利公布號2003/0060400 A1對應(yīng)于國際公布號WO 01/90121和WO 01/92282。治療人和其它宿主動物丙型肝炎(和黃病毒及瘟病毒屬)感染的方法在Idenix公報中公開，該方法包括單獨或聯(lián)合給予有效量的生物活性成分1′，2′，3′或4′-支鏈β-D或β-L核苷或其藥學(xué)上可接受的鹽或前藥，任選用藥學(xué)上可接受的載體。也參見美國專利公布號2004/0006002和2004/0006007、WO 03/026589和WO 03/026675。IdenixPharmaceuticals，Ltd.還在美國專利公布號2004/0077587中公開了藥學(xué)上可接受的支鏈核苷前藥及其在治療HCV、黃病毒和瘟病毒屬中的用途。還參見PCT公布號WO 04/002422、WO 04/002999和WO04/003000。
Biota Inc.在國際專利公布號WO 03/072757和美國專利公布號2004/0059104中公開了包括1′，2′，3′或4′-支鏈β-D或β-L核苷在內(nèi)的各種核苷的磷酸酯衍生物，用于治療丙型肝炎感染。
Emory大學(xué)和University of Georgia Research Foundation，Inc.(UGARF)在美國專利號6,348,587中公開了2′-氟核苷治療HCV的用途。還參見美國專利號6,911,424和國際專利公布WO 99/43691。
BioChem Pharma Inc.(現(xiàn)為Shire Biochem，Inc.)在美國專利號6,566,365中公開了各種1，3-二氧戊環(huán)核苷治療黃病毒科(Flaviviridae)病毒感染的用途。也參見美國專利號6,340,690和6,605,614；美國專利公布號2002/0099072和2003/0225037；以及國際專利公布號WO01/32153和WO 00/50424。
BioChem Pharma Inc.(現(xiàn)為Shire Biochem，Inc.)還在美國專利公布號2002/0019363和國際專利公布號WO 01/60315(PCT/CA01/00197；2001年2月19日提交)中，公開了治療黃病毒科(Flaviviridae)病毒感染的各種其它2′-鹵素、2′-羥基和2′-烷氧基核苷。
由F.Hoffmann-La Roche AG提交的美國專利號6,660,721；美國專利公布號2003/083307 A1、2003/008841 A1和2004/0110718；以及國際專利公布號WO 02/18404；WO 02/100415、WO 02/094289和WO 04/043159公開了治療HCV RNA復(fù)制的各種核苷類似物。
ICN Pharmaceuticals，Inc.在美國專利號6,495,677和6,573,248中公開了可用于調(diào)節(jié)免疫反應(yīng)的各種核苷類似物。還參見WO98/16184、WO 01/68663和WO 02/03997，以及美國專利公布號2002-0095033。
Pharmasset Limited在美國專利公布號2003/0087873、2004/0067877、2004/0082574、2004/0067877、2004/002479、2003/0225029、2004/0002476和2002/00555483；以及國際專利公布號WO 02/32920、WO 01/79246、WO 02/48165、WO 03/068162、WO03/068164、WO 04/009020和WO 04/013298中，公開了治療包括黃病毒科(Flaviviridae)病毒，尤其HCV在內(nèi)的各種病毒的各種核苷和抗代謝物。
Merck & Co.，Inc.和Isis Pharmaceuticals在美國專利號6,777,395、美國專利公布號2002/0147160、2004/0072788、2004/0067901和2004/0110717；以及相應(yīng)的國際專利公布號WO 02/057425(PCT/US02/01531)和WO 02/057287(PCT/US 02/03086)中，公開了治療其復(fù)制取決于RNA-依賴性RNA聚合酶的病毒包括黃病毒科病毒，尤其HCV的各種核苷，尤其幾個吡咯并嘧啶核苷。也參見WO 2004/000858、WO 2004/003138、WO 2004/007512和WO 2004/009020。
由Ribapharm提交的美國專利公布號2003/028013和2004/0023921以及國際專利公布號WO 03/051899、WO 03/061576、WO 03/062255、WO 03/062256、WO 03/062257和WO 03/061385也涉及某些核苷類似物治療丙型肝炎病毒的用途。
Genelabs Technologies在美國專利公布號2004/0063658和國際專利公布號WO 03/093290、WO 04/028481、美國專利公布號2004/0147464和2005/0119200中，公開了治療丙型肝炎感染的各種堿修飾的核苷衍生物，包括1′、2′、3′或4′-支鏈β-D或β-L核苷。
開發(fā)用于治療丙型肝炎病毒的其它化合物目前在臨床的包括例如Schering-Plough的白介素-10、Interneuron的IP-501、Vertex的Merimebodib VX-497、Endo Labs Solvay 的AMANTADINE(Symmetrel)、RPI的HEPTAZYME、Idun Pharma.的DN-6556、XTL.的XTL-002、Chiron的HCV/MF59、NABI的CIVACIR、ICN的LEVOVIRIN、ICN的VIRAMIDINE、Sci Clone的ZADAXIN(胸腺素α-1)、Maxim的CEPLENE(二鹽酸組胺)、Vertex/Eli Lilly的VX950/LY 570310、Isis Pharmaceutical/Elan的ISIS 14803、IdunPharmaceuticals，Inc.的IDN-6556和AKROS Pharma的JTK 003。
一些專利公開了治療HCV的蛋白酶抑制劑。例如，Spruce等的美國專利號6,004,933公開了一類抑制HCV的半胱氨酸蛋白酶抑制劑。Zhang等的美國專利號5,990,276公開了丙型肝炎病毒NS3蛋白酶的合成抑制劑。該抑制劑是NS3蛋白酶底物或NS4A輔因子底物的結(jié)果。其它基于底物的NS3蛋白酶抑制劑見前述(參見例如Attwood等，Antiviral peptide derivatives(抗病毒肽衍生物)，PCT WO 98/22496，1998；Attwood等，Antiviral Chemistry and Chemotherapy 1999，10，259-273；Attwood等，Preparation and use of amino acid derivatives as anti-viral agents(作為抗病毒藥物的氨基酸衍生物的制備及其用途)，德國專利公布DE 19914474；Tung等，Inhibitors of serine proteases，particularly hepatitis C virus NS3 proteases(絲氨酸蛋白酶，尤其丙型肝炎病毒NS3蛋白酶抑制劑)，PCT WO 98/17679)，包括α-酮酰胺和肼基脲，和用親電體例如硼酸或膦酸酯終止的抑制劑(參見，例如Llinas-Brunet等，Hepatitis C inhibitor peptide analogues(丙型肝炎抑制劑肽類似物)，PCT WO 99/07734)。還包括選擇性NS3抑制劑，例如基于從水蛭中分離的大分子elgin c的那些(參見，例如Qasim M.A.等，Biochemistry，1997，36，1598-1607)； Eder等的美國專利號5,972,347和Bona等的5,969,109公開了治療HCV的疫苗。Morris-Natschke等的美國專利號6,030,960公開了某些烷基脂質(zhì)抑制肝炎-誘導(dǎo)的抗原產(chǎn)生的用途，包括由HCV病毒產(chǎn)生的那些抗原。
Elsherbi等的美國專利號5,858,389公開了角鯊烯治療丙型肝炎的用途。
Smith等的美國專利號5,849,800公開了金剛烷胺治療丙型肝炎的用途。
Blough等的美國專利號5,491,135公開了N-(膦酰基乙?；?-L-天冬氨酸治療黃病毒例如HCV的用途。
美國專利號6,027,729公開并要求保護(hù)HCV基因組編碼的多肽。Han等的美國專利號5,922,857公開了對應(yīng)于控制HCV翻譯的瘟病毒屬同源箱IV區(qū)域序列的核酸。在Barber等的美國專利號6,043,077、Draper等的美國專利號5,869,253和5,610,054中公開了核酶治療HCV的用途。PCT申請WO 99/29350公開了治療丙型肝炎感染的組合物和方法，所述方法包括給予可與HCV-RNA雜交和互補(bǔ)的反義寡核苷酸。類似地，美國專利號6,001,990公開了反義寡核苷酸和用這些反義寡核苷酸抑制HCV-RNA翻譯的方法。
美國專利號5,128,458公開了作為抗病毒藥物的β-D-2′，3′-二脫氧-4′-硫代核苷。美國專利號5,446,029公開了2′，3′-二脫氧-3′-氟代核苷具有抗肝炎活性。
其它治療黃病毒科病毒感染的化合物也有描述。例如，美國專利號5,891,874公開了一系列苯并咪唑化合物和用此類化合物抑制包括丙型肝炎病毒在內(nèi)的黃病毒科病毒的方法。美國專利號6,001,799公開了治療對干擾素?zé)o應(yīng)答的丙型肝炎的方法，該方法包括給予至少一種胸腺素。
其它化合物包括基于非底物的抑制劑，例如2，4，6-三羥基-3-硝基-苯甲酰胺衍生物(參見例如Sudo K.等，Biochemical and BiophysicalResearch Communications，1997，238，643-647；Sudo K.等AntiviralChemistry and Chemotherapy，1998，9，186)，包括RD3-4082和RD3-4078，前者在酰胺上被14碳鏈取代，后者處理對苯氧基苯基； 用NS3/4A融合蛋白和NS5A/5B底物，在反相HPLC測定中已鑒定出例如具有相關(guān)抑制活性的噻唑烷衍生物(參見例如Sudo K.等，Antiviral Research，1996，32，9-18)，尤其具有被長烷基鏈取代的稠合肉桂?；糠值幕衔颮D-1-6250；RD4 6205和RD4 6193。
例如在Kakiuchi N.等J.EBS Letters 421，217-220；在Takeshita N.等Analytical Biochemistry，1997，247，242-246中鑒別了其它噻唑烷和N-苯甲酰苯胺。
據(jù)描述，在SDS-PAGE和放射自顯影測定中，菲醌具有抗蛋白酶活性，例如從鏈霉菌屬(Streptomyces sp.)發(fā)酵肉湯培養(yǎng)基分離的Sch68631(參見例如Chu M.等，Tetrahedron Letters，1996，37，7229-7232)；從真菌灰黃青霉(Penicillium griseofulyum)分離的Sch 351633在閃爍親近測定中證實有活性(參見例如Chu M.等，Bioorganic and MedicinalChemistry Letters 9，1949-1952)； 已有解旋酶抑制劑的描述(參見例如Diana G.D.等，Compounds，compositions and methods for treatment of hepatitis C(治療丙型肝炎的化合物、組合物和方法)，美國專利號5,633,358；Diana G.D.等，Piperidine derivatives，pharmaceutical compositions there of and their usein the treatment of hepatitis C(哌啶衍生物、其藥用組合物和它們治療丙型肝炎的用途)，PCT WO 97/36554)。還有依賴于IRES翻譯的抑制劑的描述(參見例如Ikeda N等，Agent for the prevention and treatment ofhepatitis C(預(yù)防和治療丙型肝炎的藥物)，日本專利公報JP-08268890；Kai Y.等 Prevention and treatment of viral diseases(預(yù)防和治療病毒性疾病)，日本專利公報JP-10101591)。
已描述可潛在用于治療病毒感染的聚合酶抑制劑包括核苷酸類似物例如膠霉毒素(參見例如Ferrari R.等Journal of Virology，1999，73，1649-1654)；天然產(chǎn)物淺藍(lán)菌素(參見例如Lohmann V.等，Virology，1998，249，108-118)；和非核苷聚合酶抑制劑，包括例如化合物R803(參見例如均為Rigel Pharmaceuticals，Inc.的WO 04/018463 A2和WO03/040112 A1)；取代的二胺嘧啶(參見例如Rigel Pharmaceuticals，Inc.的WO 03/063794 A2)；苯并咪唑衍生物(參見例如Bioorg.Med. Chem.Lett，2004，14119-124和Bioorg.Med.Chem.Lett.，2004，14967-971，均屬Boehringer Ingelheim Corporation)；N，N-二取代的苯基丙氨酸(參見例如J.Biol.Chem.，2003，2789495-98和J.Med. Chem.，2003，131283-85，均屬Shire Biochem，Inc.)；取代的噻吩-2-羧酸(參見例如Bioorg.Med.Chem.Lett.，2004，14793-796和Bioorg.Med.Chem.Lett，2004，14797-800，均屬Shire Biochem，Inc.)；α，γ-二酮酸(參見例如J.Med.Chem.，2004，14-17和WO 00/006529 A1，均屬Merck&Co.，Inc.)；和袂康酸衍生物(參見例如Bioorg.Med.Chem.Lett，2004，3257-3261、WO 02/006246 A1和WO 03/062211 A1，均屬IRBM Merck&Co.，Inc.)。
已有與例如在病毒的5′非編碼域(NCR)中延伸序列互補(bǔ)的反義硫代磷酸酯寡脫氧核苷酸(S-ODN)的描述(參見例如Alt M.等，Hepatology，1995，22，707-717)，或與含NCR的3′端的核苷酸326-348和位于HCV RNA核心編碼區(qū)域的核苷酸371-388互補(bǔ)的反義硫代磷酸酯寡脫氧核苷酸(S-ODN)的描述(參見例如Alt M.等Archives ofVirology，1997，142，589-599；Galderisi U.等，Journal of CellularPhysiology，1999，181，251-257)。
其它化合物包括核酸酶抗性核酶(參見例如Maccjak，D.J.等，Hepatology 1999，30，摘要995)。
已開發(fā)出治療黃病毒科病毒感染的核苷類似物的其它實例包括硫辛酸或n-乙?；腚装彼峄蚱淝八幓蛩帉W(xué)上可接受的鹽。
其它各種化合物包括1-氨基-烷基環(huán)己烷(例如Gold等的美國專利號6,034,134)、烷基脂質(zhì)(例如Chojkier等的美國專利號5,922,757)、維生素E和其它抗氧劑(例如Chojkier等的美國專利號5,922,757)、角鯊烯、金剛烷胺、膽汁酸(例如Ozeki等的美國專利號5,846,964)、N-(膦酰基乙?；?-L-天冬氨酸(例如Diana等的美國專利號5,830,905)、苯二甲酰胺(例如Diana等的美國專利號5,633,388)、多腺苷酸衍生物(例如Wang等的美國專利號5,496,546)、2′，3′-二脫氧肌苷(例如Yarchoan等的美國專利號5,026,687)和苯并咪唑(例如Colacino等的美國專利號5,891,874)。
藥用組合物 可將所述穿心蓮內(nèi)酯衍生物配制為藥用組合物，按多種適合選擇的給予途徑的形式給予感染包括HCV在內(nèi)的黃病毒科病毒的宿主，包括人，這些途徑包括全身例如口服或腸胃外，通過靜脈內(nèi)、肌內(nèi)、局部、透皮或皮下途徑。
以足以釋放給患者治療有效量的化合物，以減少其體內(nèi)黃病毒科病毒感染或癥狀而不對所治療的患者造成嚴(yán)重毒性作用的量，將穿心蓮內(nèi)酯衍生物(或其前藥)包括在藥學(xué)上可接受的載體或稀釋劑中。
用于所有上述病癥的優(yōu)選的穿心蓮內(nèi)酯衍生物的劑量范圍為每日約1-75mg/kg，優(yōu)選1-20mg/kg體重，更通常為每日0.1-約100mg/千克接受者體重?？苫诖尫诺哪阁w衍生物的重量，計算前藥的有效劑量范圍。
按任何合適的單位劑型給予穿心蓮內(nèi)酯衍生物，較為方便，包括但不限于含7-3000mg的單位劑型，優(yōu)選每單位劑型70-1400mg活性成分。通常50-1000mg口服劑量較為適宜，更典型的為50-500mg。
理想的是，給予的穿心蓮內(nèi)酯衍生物應(yīng)達(dá)到約0.2-70μM，優(yōu)選約1.0-10μM活性化合物的峰血漿濃度?？赏ㄟ^例如靜脈內(nèi)注射任選為鹽水溶液的合適濃度的活性成分，或給予一次性大劑量濃度(bolus)活性成分來達(dá)到該峰血漿濃度。
在藥物組合物中的穿心蓮內(nèi)酯衍生物濃度取決于提取物的吸收、滅活和排泄速率和本領(lǐng)域技術(shù)人員已知的其它因素。應(yīng)注意，劑量值也因欲緩解的病癥的嚴(yán)重性而變化。還應(yīng)理解，對于任何具體的患者，應(yīng)根據(jù)個體需要和給藥或負(fù)責(zé)給予組合物的人的專業(yè)判斷，隨時間調(diào)整具體的劑量方案，本文中列舉的濃度范圍僅為示例性的，無意限制要求保護(hù)組合物的范圍或?qū)嵤??？梢淮涡越o予穿心蓮內(nèi)酯衍生物，或可分成多個更小劑量，在不同的時間間隔給藥。
優(yōu)選的穿心蓮內(nèi)酯衍生物給藥方式是口服。口服組合物通常包括惰性稀釋劑或可食用部分?？蓪⑺鼈冄b入明膠膠囊或壓制成片劑。為了口服治療給藥的目的，可使活性化合物與賦形劑混合，按片劑、錠劑或膠囊的形式使用。可作為組合物一部分包含可與藥物配伍的粘合劑和/或助劑物質(zhì)。
片劑、丸劑、膠囊劑、錠劑等可含有任何以下成分或相似性質(zhì)的化合物粘合劑例如微晶纖維素、黃芪膠或明膠；賦形劑例如淀粉或乳糖；崩解劑例如藻酸、羧甲基淀粉鈉或玉米淀粉；潤滑劑例如硬脂酸鎂或Sterotes；助流劑例如膠體二氧化硅；甜味劑例如蔗糖或糖精；或矯味劑例如歐薄荷、水楊酸甲酯或橙調(diào)味劑。當(dāng)劑量單位形式是膠囊時，除以上種類的物質(zhì)外，它還可含有液體載體例如脂肪油。另外，劑量單位形式可含有使劑量單位物理形式變性的各種其它物質(zhì)，例如糖、蟲膠的包衣劑或其它腸溶衣劑。
可作為酏劑、混懸劑、糖漿、糯米紙囊劑、口香糖等的成分，給予穿心蓮內(nèi)酯衍生物。除活性化合物外，糖漿還可含有蔗糖甜味劑和某些防腐劑、染料、著色劑和調(diào)味劑。穿心蓮內(nèi)酯衍生物也可與其它不損害需要的作用的活性物質(zhì)混合，或與增加需要的作用的物質(zhì)例如抗生素、抗真菌劑、抗炎藥或包括抗HIV核苷化合物在內(nèi)的其它抗病毒藥物混合。用于腸胃外、皮內(nèi)、皮下或局部施用的溶液或混懸液可包括以下組分無菌稀釋劑例如注射用水、鹽水溶液、不揮發(fā)油、聚乙二醇、甘油、丙二醇或其它合成溶劑；抗菌劑例如苯甲醇或尼泊金甲酯；抗氧劑例如抗壞血酸或亞硫酸氫鈉；鰲合劑例如乙二胺四乙酸；緩沖劑例如乙酸鹽、檸檬酸鹽或磷酸鹽；和等滲調(diào)節(jié)劑例如氯化鈉或葡萄糖?？蓪⒛c胃外制劑封入安瓿、一次性注射器或由玻璃或塑料制成的多劑量瓶。
如果靜脈內(nèi)給藥，優(yōu)選的載體是生理鹽水或磷酸緩沖鹽水溶液(PBS)。
在另一個實施方案中，穿心蓮內(nèi)酯衍生物與防止衍生物在體內(nèi)快速消除的載體一起制備，例如包括植入劑和微囊化遞藥系統(tǒng)的控釋制劑?？墒褂每缮锝到?、生物相容的聚合物，例如乙烯乙酸乙烯酯、聚酐、聚羥基乙酸、膠原、聚原酸酯和聚乳酸。此類制劑的制備方法對本領(lǐng)域技術(shù)人員而言是顯而易見的。
還優(yōu)選脂質(zhì)體混懸液(包含靶向感染細(xì)胞的含病毒抗原的單克隆抗體的脂質(zhì)體)作為藥學(xué)上可接受的載體。這些可按照本領(lǐng)域技術(shù)人員已知的方法例如美國專利號4,522,811中所述方法(通過引用整體結(jié)合到本文中)制備。例如，可通過將適當(dāng)?shù)闹|(zhì)(例如硬脂?；字；掖及贰⒂仓；字Ｄ憠A、二十烷?；?arachadoyl)磷脂酰膽堿和膽固醇)溶于無機(jī)溶劑，然后蒸發(fā)，在容器表面上留下干燥脂質(zhì)薄膜后，制備脂質(zhì)體制劑；然后將活性化合物或其單磷酸酯、二磷酸酯和/或三磷酸酯衍生物的水溶液引入容器；然后用手旋轉(zhuǎn)該容器，使脂質(zhì)物質(zhì)與容器壁分離和使脂質(zhì)聚集體分散，從而形成脂質(zhì)體混懸液。
活性化合物的修飾可影響活性成分的生物利用度和代謝速度，從而提供對活性成分釋放的控制。另外，修飾可影響化合物的抗病毒活性，在某些情況下，比母體化合物增加了活性。這可按照本文中所述方法或本領(lǐng)域技術(shù)人員已知的其它方法，通過制備衍生物和測試其抗病毒活性，容易地評價。
實施例 生物活性 可在體外，按照公開的篩選方法，篩選具有抑制黃病毒、瘟病毒屬或HCV活性或抑制病毒蛋白酶的能力的化合物。在一個實施方案中，通過測量病毒引起的細(xì)胞殺傷減少和病毒產(chǎn)量減少，測定抗病毒化合物的效力。在一個實施方案中，有效濃度為約5μM-105μM。在優(yōu)選的實施方案中，化合物的EC50小于15或10微摩爾濃度。在另一個實施方案中，可通過測量病毒蛋白酶抑制和病毒產(chǎn)量減少，測定蛋白酶抑制劑的效力。或者，可用公開的動物模型測試這些化合物。
在全部實施例中，化合物1、1a或MTI-1是干擾素；化合物2、2b或MTI-2是利巴韋林；化合物3、3c或MTI-3是包含在穿心蓮(Andrographis paniculata)提取物中的穿心蓮內(nèi)酯衍生物注射形式(來自Chuan-Hu-Ning；Yi-Bin Pharmaceuticals，Wuliangye Co.Ltd.，Yibin，Sichaun，PR China)，為穿心蓮內(nèi)酯的琥珀酸酯包括其鉀鹽的混合物，按20mg/ml溶液提供；化合物4、4d或MTI-4是水性溶媒對照。
實施例1人骨髓細(xì)胞毒性測定 骨髓毒性是與多種抗病毒藥物有關(guān)的主要的劑量-限制性毒性(Sommadossi JP and Carlisle R Antimicrob Agents Chemother 31452-454，1987；Sommadossi等Biochem.Pharmacol.441921-1925，1992)。用骨髓祖代的集落形成測定作為體外模型系統(tǒng)的鑰匙，評價體內(nèi)對化療藥物反應(yīng)的潛力(Sommadossi JP and Carlisle R.Antimicrob AgentsChemother 31452-454，1987；Sommadossi等Biochem.Pharmacol.441921-1925，1992)。因此，通常在體外評價候選抗病毒化合物的造血系統(tǒng)毒性的潛力。
初始人骨髓單核細(xì)胞得自Cambrex Bioscience(Walkersville，MD)。在50單位/mL人重組粒細(xì)胞/巨噬細(xì)胞集落刺激因子存在下，用雙層軟瓊脂進(jìn)行CFU-GM測定，而BFU-E測定使用含1單位/mL紅細(xì)胞生成素的甲基纖維素基質(zhì)(Sommadossi JP and Carlisle RAntimicrob Agents Chemother 31452-454，1987)。在37℃下，在5％CO2中，在化合物存在下，將細(xì)胞溫育14-18日，用倒置顯微鏡計數(shù)50個細(xì)胞以上的集落，測定IC50(Sommadossi等Biochem.Pharmacol.441921-1925，1992)。各實驗用3個不同供體的細(xì)胞，一式兩份平行進(jìn)行。用3′-疊氮基-3′-脫氧胸苷(AZT)作陽性對照。
實施例2BVDV測定 分離活性化合物 用反相高效液相色譜(HPLC)和凝膠滲透HPLC純化穿心蓮內(nèi)酯衍生物。使此類衍生物通過C18 Sep-Pak柱預(yù)過濾，用甲醇洗脫。將產(chǎn)物通過反相HPLC進(jìn)一步純化。通過UV254nm監(jiān)測樣品，收集幾個峰組分，分析其生物活性。將具有生物活性的提取物的峰組分通過凝膠滲透HPLC進(jìn)一步純化，其分子量約為532-570。
穿心蓮內(nèi)酯衍生物對BVDV致細(xì)胞病變分離物的抗病毒活性 用體外測定法，在任意牛子宮細(xì)胞系中測量穿心蓮內(nèi)酯衍生物對BVDV致細(xì)胞病變分離物的抗病毒潛力。
通過觀察細(xì)胞病變作用、測定非結(jié)構(gòu)蛋白表達(dá)和通過測量接種后病毒滴定度的增加，證實產(chǎn)生無限增殖化牛子宮細(xì)胞系，它們允許BVDV感染和復(fù)制。在BVDV組織培養(yǎng)模型中評價了抗病毒化合物，包括目前用于治療人慢性黃病毒或瘟病毒屬感染的利巴韋林和干擾素-α(Houghton，M.，Hepatitis viruses，InFields Virology，編輯Fields，B.N.，Knipe，D.M.，and Howley，P.M.，Lippincott-RavenPublishers，Philadelphia，PA，第32章，1035-1058，1996)。體外測量減少BVDV復(fù)制的化合物有效性的能力，為臨床前評價治療病毒感染的潛在藥物和分析可能的作用機(jī)理提供了系統(tǒng)。
細(xì)胞系 用前述方法(Jacob，J.R.等，Experimental Cell Research，212，42-48(1994)；Dobrinski，L等，Theriogenology.52(5)，875-885(1999)，通過用SV40大T抗原癌基因(pSV3neo；ATCC分類#37150)使初級牛子宮細(xì)胞無限增殖，產(chǎn)生稱為NCL的牛子宮細(xì)胞系。通過觀察致細(xì)胞病變作用、檢測非結(jié)構(gòu)蛋白表達(dá)和通過測量接種后病毒滴定度增加，證實NCL細(xì)胞系允許BVDV感染和復(fù)制。將細(xì)胞系維持在補(bǔ)充10 mMHEPES、gentimicin(50μg/ml)、鏈霉素和青霉素(Life Technologies)的含10％牛血清(Atlantic Biologies，Norcross，GA)的MEM-E培養(yǎng)基(LifeTechnologies，Grand Island，NY)中，該培養(yǎng)基經(jīng)γ射線輻照，無BVDV污染，測試對BVDV抗體呈陰性反應(yīng)。將細(xì)胞系在潮濕的5％CO2氣氛中，在37℃下溫育。通過用胰蛋白酶-EDTA溶液(LifeTechnologies)將單層離解，使細(xì)胞傳代，用培養(yǎng)基稀釋，按1∶5分開，加入新的培養(yǎng)瓶中。
BVDV病毒分離物 Diagnostic Laboratory，College of Veterinary Medicine，Cornell大學(xué)已表征了幾種BVDV分離物(Ridpath，J.R.等，Virology，205，66-74(1994)。該分離物致使允許性細(xì)胞細(xì)胞病變(cp)或非細(xì)胞病變(ncp)感染(Meyers，G.and Thiel，H.-J.，Advances in Virus Research，47，53-118(1996)。在該測定中使用稱為NADL的cpBVDV分離物(ATCC#VR-534)。通過接種cpBVDV后，使含NCL細(xì)胞的75cm2瓶冷凍-解凍3日，制備病毒儲備液。
亞甲藍(lán)測定 測量可見細(xì)胞數(shù)目的方法涉及用亞甲藍(lán)(Sigma，St.Louis，MO)染色，從細(xì)胞洗脫后，讀取溶液中染料的吸光度。簡而言之，將細(xì)胞感染BVDV 3天后，用磷酸緩沖鹽水溶液(PBS；Life Technologies)沖洗培養(yǎng)基，然后在37℃，在含1.25％戊二醛(Fisher Scientific，F(xiàn)air Lawn，NJ)和0.06％亞甲藍(lán)(Sigma)的Hanks平衡鹽溶液(HBSS；LifeTechnologies)中固定化1小時。將培養(yǎng)基中的亞甲藍(lán)染色液除去，用數(shù)體積的H2O沖洗培養(yǎng)板。將培養(yǎng)板涼干；然后通過在控制的室溫下，攪拌下，在PBS/50％乙醇和1％乙酸溶液中溫育1小時，將固定化細(xì)胞中的亞甲藍(lán)染料洗脫。在630nm處，通過ELISA板讀出器(EL311型；Bio-Tek Instruments，Inc.，Winooski，VT)測量亞甲藍(lán)染料溶液的吸光度。在所有所述實驗中，各實驗數(shù)據(jù)點的細(xì)胞數(shù)計算按每次實驗處理3孔(稀釋度、滴定度或抗病毒濃度)的平均值表示。
抗病毒 在該測定中，用利巴韋林和干擾素-α(IFN-α)作為建立抗病毒潛力參數(shù)的原型化合物。將利巴韋林(VirazoleR，Viratek，Inc.，Covina，CA)溶于H2O，得到100mM濃度的儲備液，試驗前，用培養(yǎng)基在0.049-100μM范圍連續(xù)稀釋，在NCL細(xì)胞系中，評價細(xì)胞毒性和抗病毒作用。在以前的實驗中，EC90為5.83μM，CC50為5.13μM，SI為0.88。
MTI-3是包含在穿心蓮(Andrographis paniculata)提取物中的穿心蓮內(nèi)酯衍生物注射形式(Chuan-Hu-Ning；Yi-Bin Pharmaceuticals，Wuliangye Co.Ltd.，Yibin，Sichaun，PR China)，認(rèn)為是穿心蓮內(nèi)酯的琥珀酸酯包括其鉀鹽的混合物，按20mg/ml溶液提供，試驗前，將該溶液在0.001-2mg/ml范圍用培養(yǎng)基連續(xù)稀釋2倍，在NCL細(xì)胞系中評價細(xì)胞毒性和抗病毒作用。
抗病毒測定 使NCL細(xì)胞系生長至融合，按2×104細(xì)胞/孔密度(0.34cm2)，接種到96孔微量滴定板(MicrotestTM96；Becton Dickinson Labware，F(xiàn)ranklin Lakes，NJ)中，溫育1小時，讓細(xì)胞貼壁。貼壁后，將各微量滴定板中的一半細(xì)胞接種稀釋至得到0.01 TCD50感染復(fù)數(shù)(m.o.i.)的cpBVDV儲備液，溫育3-6小時，讓病毒貼壁和滲透。該溫育期后，除去接種物，用新鮮生長培養(yǎng)基替換。
在抗病毒化合物存在下，使3/4的cpBVDV感染和未感染的細(xì)胞生長。微量測定板的剩余1/4用作陽性(cpVDV感染的)和陰性(未感染的)對照孔。每日更換培養(yǎng)基，感染BVDV 3日后，通過亞甲藍(lán)測定試驗測量細(xì)胞殺傷率。
在感染后第3日，收集培養(yǎng)基，抗病毒處理后，測定病毒產(chǎn)量減少。將從實驗孔中收集的上清液連續(xù)稀釋10倍，用于感染新制備的NCL細(xì)胞，按相似的96孔模式，用亞甲藍(lán)測定實驗，通過測定感染5日后的細(xì)胞殺傷率，測定終點滴定度，即顯示細(xì)胞殺傷完全時的最終稀釋濃度。
該測定允許測定1)化合物抑制50％的cpBVDV引起的細(xì)胞殺傷的有效濃度(ckEC50)，2)使子代病毒產(chǎn)量釋放減少90％的有效濃度(tEC90)，3)化合物對正常未感染細(xì)胞的50％細(xì)胞毒性濃度(CC50)。
統(tǒng)計 計算各實驗數(shù)據(jù)點因病毒感染或藥物細(xì)胞毒性導(dǎo)致的細(xì)胞殺傷，并制圖。采用最佳擬合收集數(shù)據(jù)的Regression Wizard library方程，用SigmaPlot4.0(Jandel Sci，San Rafael，CA)進(jìn)行回歸分析(曲線擬合)。
實施例2A 利巴韋林 在該細(xì)胞培養(yǎng)測定中，利巴韋林是用于測試的原型化合物，用作陽性對照化合物。
實驗數(shù)據(jù)得自兩個獨立的測定試驗。將細(xì)胞殺傷率歸一化至100％對照孔，以便在各實驗之間進(jìn)行對比。圖1中曲線所示為利巴韋林在各測定中的抗病毒作用、細(xì)胞毒性和病毒產(chǎn)量減少。在該測定中，利巴韋林未顯示抑制50％以上的病毒引起的細(xì)胞殺傷的有效濃度(EC50)。在回歸分析中，用峰、對數(shù)正態(tài)、4參數(shù)方程計算抗細(xì)胞殺傷的最大有效抗病毒濃度(EC利巴韋林)。用S形、對數(shù)、4參數(shù)方程計算細(xì)胞毒性濃度(CC50；即殺傷50％未感染NCL細(xì)胞的藥物濃度)和減少病毒產(chǎn)量的有效濃度(EC90；即減少病毒滴定度90％的藥物濃度)。這些值列于表1。按CC50/EC90比率計算的選擇性指數(shù)(SI)0.69與利巴韋林的先前實驗相比無統(tǒng)計學(xué)差異。
表1 利巴韋林 穿心蓮內(nèi)酯衍生物 半純化的穿心蓮內(nèi)酯衍生物注射液稱為Chung-Hu-Ning，由Yi-Bin Pharmaceuticals(Yibin，Sichuan，PRC)提供。在體外測定系統(tǒng)中，測試Chuan-Hu-Ning溶液在BVDV中的抗病毒潛力。
由兩個獨立的用利巴韋林作對照的測定試驗得到實驗數(shù)據(jù)。將細(xì)胞殺傷率歸一化至100％對照孔，以便在測定之間進(jìn)行對比。圖2中曲線所示為穿心蓮內(nèi)酯衍生物在兩種測定中的抗病毒作用、細(xì)胞毒性和病毒產(chǎn)量減少。穿心蓮內(nèi)酯衍生物顯示抑制50％病毒引起的細(xì)胞殺傷的有效濃度(EC50)為0.031mg/ml，在3日處理期結(jié)束時，在上清液中回收的病毒減少90％的有效濃度(EC90)和殺傷50％細(xì)胞的細(xì)胞毒性濃度(CC50)為0.27mg/ml。按CC50/EC90比率計算，選擇性指數(shù)(SI)為4.8(表2)。
表2 穿心蓮內(nèi)酯衍生物(化合物3) 在該測定中，利巴韋林的選擇性指數(shù)(SI)為0.69。穿心蓮內(nèi)酯衍生物具有以下抗病毒曲線；CC50 0.27mg/ml、EC50 0.031mg/ml和EC900.056mg/ml，得到的SI為4.8。其它用BVDV的體外測定表明可用于檢驗核苷類似物、天然或重組蛋白和合成聚合物的抗病毒作用(Zitzmann，N.等，Proceedings of the National Academy of Science，96(12)，11878-11882，1999)。一般BVDV測定的性質(zhì)允許進(jìn)一步描述成各化合物產(chǎn)生抗病毒作用的特定模式。
實施例2B 用病毒測定分析幾種草藥制劑、純化學(xué)品和在Schuppan等Hepatology 301099-1104，1999中所述多種推定的純抗病毒化合物。按照已知方法所述制備草藥提取物。幾種草藥提取物和穿心蓮內(nèi)酯衍生物顯示可減少子代病毒產(chǎn)量，病毒產(chǎn)量與提取物的細(xì)胞毒性有關(guān)，該細(xì)胞毒性致使細(xì)胞完全殺傷且不是劑量依賴性的。(表3) 表3 穿心蓮內(nèi)酯衍生物顯示對BVDV具有有效的抗病毒活性(圖3A)。在32-250μg/ml濃度范圍內(nèi)，具有確定的劑量依賴性子代病毒產(chǎn)量減少，經(jīng)計算，tEC90＝59μg/ml。另外，在8-125μg/ml范圍內(nèi)，病毒引起的細(xì)胞殺傷減少，經(jīng)計算，ckEC50＝33μg/ml，在125μg/ml下，接近減少90％。穿心蓮內(nèi)酯衍生物減少7個數(shù)量級(logs)的病毒產(chǎn)量，無明顯細(xì)胞毒性。在150μg/ml以上的濃度，發(fā)現(xiàn)與衍生物有關(guān)的細(xì)胞毒性，經(jīng)計算，CC50＝226μg/ml。
在對比中，利巴韋林在0.76-12μg/ml范圍內(nèi)減少病毒產(chǎn)量，經(jīng)計算，tEC50＝0.76μg/ml(圖3B)。但是，病毒引起的細(xì)胞殺傷最大減少僅為40％，外推法得到ckEC50＝1.3μg/ml。該值接近藥物細(xì)胞毒性的中點，經(jīng)計算，CC50＝1.1μg/ml。IFN-α對病毒產(chǎn)量減少僅顯示極小有效性，經(jīng)計算，tEC90＝0.15μg/ml(圖3C)。在0.1-1000ng/ml范圍內(nèi)，顯著減少病毒引起的細(xì)胞殺傷，經(jīng)計算，ckEC50＝0.0074mg/ml，在測試濃度范圍內(nèi)，未出現(xiàn)細(xì)胞毒性。在這些測試化合物中，證實穿心蓮內(nèi)酯衍生物的選擇性指數(shù)(CC50/EC90＝3.8)比利巴韋林(.0.85)高，盡管比IFN-α(6667)小(表4)。
表4 穿心蓮內(nèi)酯衍生物顯示對病毒引起的細(xì)胞殺傷最大減少為90％(ckEC50＝33μg/ml)，它大于利巴韋林的40％減少(ckEC650＝0.76μg/ml)。盡管在更寬范圍內(nèi)，IFN-α顯示對病毒引起的細(xì)胞殺傷減少為80％(ckEC50＝0.0074ng/ml)，但證明它僅減少2個數(shù)量級(log)的病毒產(chǎn)量。從藥物細(xì)胞毒性中減去穿心蓮內(nèi)酯衍生物減少7個數(shù)量級(log)的子代病毒產(chǎn)量的有效濃度(S.I.＝3.8)。利巴韋林減少病毒產(chǎn)量的有效濃度幾乎與藥物細(xì)胞毒性重疊(S.I.＝0.85)。IFN-α對病毒產(chǎn)量顯示很弱的減少，但顯示對病毒引起的細(xì)胞殺傷有寬的作用(S.I.＝6667)。這些結(jié)果提示，穿心蓮內(nèi)酯衍生物可對持續(xù)的BVDV感染的小牛發(fā)揮抗病毒作用。
實施例3旱獺肝細(xì)胞模型 在旱獺肝細(xì)胞中研究穿心蓮內(nèi)酯衍生物(認(rèn)為包括琥珀酸酯的混合物)抑制BVDV復(fù)制的機(jī)制。給旱獺初級肝細(xì)胞培養(yǎng)物和肝細(xì)胞系接種BVDV的致細(xì)胞病變分離物。旱獺肝細(xì)胞系感染5天后，致細(xì)胞病變作用(CPE)很明顯。但是，旱獺初級肝細(xì)胞感染BVDV后，未發(fā)現(xiàn)明顯的CPE。在感染3天后，在上清液中檢測到子代病毒，3星期后，在旱獺初級肝細(xì)胞培養(yǎng)物和肝細(xì)胞系中分別產(chǎn)生1.5×105病毒滴定度和2×106TCID/ml。在有或無CPE的感染BVDV的旱獺細(xì)胞培養(yǎng)物勻漿中，檢測到與BVDV致細(xì)胞病變株復(fù)制有關(guān)的非結(jié)構(gòu)蛋白p80(NS3)的表達(dá)，但在對照培養(yǎng)物中未檢測到。在感染的旱獺肝細(xì)胞的RNA提取物中檢測到全長病毒基因組。
對穿心蓮內(nèi)酯衍生物(化合物3)、利巴韋林和IFN-α對感染BVDV的旱獺初級肝細(xì)胞和肝細(xì)胞系的抗病毒活性進(jìn)行測試。通過類似于實施例1和2中所述方法，評價有效濃度和細(xì)胞毒性濃度。
穿心蓮內(nèi)酯衍生物(化合物3)和利巴韋林及IFN-α在旱獺肝細(xì)胞(WCH-8)和初級肝細(xì)胞培養(yǎng)物中，證實對BVDV具有抗病毒活性。在WCH-8細(xì)胞中，在穿心蓮內(nèi)酯衍生物減少病毒產(chǎn)量的有效抗病毒濃度(tEC90＝3.8μg/ml)和減少病毒引起的細(xì)胞殺傷的有效抗病毒濃度(ckEC50＝6μg/ml)與細(xì)胞毒性(CC50＝878μg/ml)之間具有顯著的距離(圖4A)。用利巴韋林對WCH-8細(xì)胞進(jìn)行相同的處理，表明病毒產(chǎn)量減少(tEC90＝0.38μg/ml)、病毒引起的細(xì)胞殺傷減少(ckEC50＝0.27μg/ml)及其細(xì)胞毒性(CC50＝0.35μg/ml)之間出現(xiàn)重疊(圖4B)。在用IFN-α處理的WCH-8細(xì)胞中，在測試藥物濃度的高端，發(fā)現(xiàn)對病毒產(chǎn)量(tEC90＝64ng/ml)和病毒引起的細(xì)胞殺傷(ckEC50＝288ng/ml)的抗病毒作用。在高達(dá)1000ng/ml劑量下，未發(fā)現(xiàn)細(xì)胞毒性(圖4C)。這些實驗的結(jié)果列于表5，經(jīng)計算，穿心蓮內(nèi)酯衍生物、利巴韋林和INF-α的選擇性指數(shù)分別為232、9.2和15.6。
表5 在用穿心蓮內(nèi)酯衍生物處理的旱獺初級肝細(xì)胞中，發(fā)現(xiàn)減少病毒產(chǎn)量的濃度(tEC90＝35μg/ml)小于藥物細(xì)胞毒性的濃度(CC50＝1000)(圖5A)。在旱獺初級肝細(xì)胞中，BVDV引起的細(xì)胞殺傷不明顯。在約等于藥物細(xì)胞毒性的濃度(CC50＝4μg/ml)下，用利巴韋林處理的相同初級肝細(xì)胞培養(yǎng)物中出現(xiàn)病毒產(chǎn)量減少(tEC90＝2.9μg/ml)(圖5B)。盡管在測試濃度范圍內(nèi)未發(fā)現(xiàn)細(xì)胞毒性，但用IFN-α處理感染BVDV的肝細(xì)胞具有最小的減少病毒產(chǎn)量的作用(tEC90＝825ng/ml)(圖5C)。這些實驗的結(jié)果列于表6，在該測定中，經(jīng)計算，穿心蓮內(nèi)酯衍生物、利巴韋林和IFN-α的選擇性指數(shù)分別為29、1.4和1.1。
表6 *ND-未檢測到。在初級肝細(xì)胞中，BVDV引起的細(xì)胞殺傷不明顯。
與利巴韋林(S.I.1.4)和IFN-α(S.I.1.1)的抗病毒潛力相比，穿心蓮內(nèi)酯衍生物在感染BVDV的旱獺初級肝細(xì)胞和肝細(xì)胞系中顯示具有抗病毒潛力(S.I.29)。病毒復(fù)制減少與因藥物殺傷細(xì)胞導(dǎo)致活細(xì)胞損失近似。
實施例4牛子宮內(nèi)膜細(xì)胞測定 按照BVDV測定方法，在96孔板中，用通過用SV40大T抗原使初級牛子宮內(nèi)膜細(xì)胞無限增殖化產(chǎn)生的牛細(xì)胞系，評價測試化合物的抗病毒活性。這些細(xì)胞系允許致細(xì)胞病變BVDV分離物(Singer和NADL)感染。將該測定優(yōu)化，以便在感染3天內(nèi)(moi＜1)，測量＞90％的BVDV引起的細(xì)胞殺傷。每天用新鮮的藥物處理，連續(xù)3天，測定化合物抑制50％的BVDV引起的細(xì)胞殺傷的有效濃度(EC50)和測定因藥物細(xì)胞毒性作用而殺傷50％的正常未感染細(xì)胞的濃度(CC50)。在藥物處理第3天，在新鮮子宮內(nèi)膜細(xì)胞培養(yǎng)物上滴定收集的培養(yǎng)基中的BVDV，測定子代病毒產(chǎn)量減少90％的濃度(EC90)。用線性回歸方程確定有效濃度(Sigmaplot8.0；SPSS Scientific，Chicago，IL)。用利巴韋林(Virazole；Viratek，Inc.，Covina，CA)和IFN-α(rHuB/DIFN；Novartis，Basel，Switzerland)作為陽性抗病毒對照。
圖6A和6B是利巴韋林和IFN-α的BVDV測定結(jié)果總結(jié)，它們分別用作陽性對照。圖7A和7B是MTI-3的BVDV測定結(jié)果總結(jié)。EC90為約2.5μg/mL，在50μg/mL濃度下，毒性可忽略不計，50μg/mL是檢測穿心蓮內(nèi)酯的琥珀酸酯混合物的最高濃度。
實施例5線粒體DNA水平 用線粒體DNA與核糖體DNA的相對比例測量線粒體毒性。這些用通過實時PCR測量的COXII核糖體RNA的比例測量。將Hep G2細(xì)胞暴露在10、1和0.1ug/ml的MTI-3或10或1000uM濃度的對照藥物(DDC、3TC、(+)-BCH-189或ddI)下，保持14天。結(jié)果見圖9B所示。還在這些細(xì)胞中測量了作為毒性副產(chǎn)物的乳酸的產(chǎn)量。結(jié)果見圖9A所示。
實施例6SEAP測定 以前描述了HCV復(fù)制子-SEAP(分泌型堿性磷酸酯酶)細(xì)胞系。冷凍(-160℃)保存的細(xì)胞系的低傳代細(xì)胞儲備液用于該測定。由初始儲備液制備系列稀釋度的測試化合物，將各個濃度的化合物加入96孔板。然后用胰蛋白酶消化含有低傳代HCV復(fù)制子的細(xì)胞，計數(shù)并接種到孔中。在37℃下，將這些板在CO2培養(yǎng)箱中溫育4天。然后除去各孔中培養(yǎng)物上清液，在65℃下加熱滅活30min。通過對比存在于藥物處理和未處理孔中的SEAP，測量SEAP活性，計算EC50值。在溫育期結(jié)束時，通過MTT測定，評價篩選期間化合物產(chǎn)生的細(xì)胞毒性。
從HCV復(fù)制子細(xì)胞培養(yǎng)物中分離總RNA，量基于在RT-PCR中測得的GAPDH水平。從各孔中吸取生長培養(yǎng)基，然后加入溶胞液，然后劇烈吸取、放回。用DNA酶I處理各溶胞產(chǎn)物。將總RNA洗脫到不含有機(jī)碳的水中，經(jīng)酶作用，轉(zhuǎn)化為cDNA。用HCV引物進(jìn)行實時PCR反應(yīng)，HCV的引物設(shè)計用于識別所有HCV基因型共有的5′-非翻譯區(qū)域的保留區(qū)域。設(shè)計人GAPDH的引物，使兩個靶按多種方式進(jìn)行共擴(kuò)增(Bourne N，Pyles RB，Yi M，Veselenak RL，DavisMM，Lemon SM Screening for hepatitis C virus antiviral activity with acell-based secreted alkaline phosphatase reporter replicon system(用細(xì)胞-基分泌型堿性磷酸酯酶報道基因復(fù)制子系統(tǒng)篩選抗丙型肝炎病毒的抗病毒活性).Antiviral Res.2005；6776-82。這些測定結(jié)果見表5所示。
表5用SEAP報道基因法測定化合物的抗HCV作用 SEAP/MTT初級篩選 亞基因組1b株N SEAP，EC50 MTT，IC50SI 2’-MeC25.1μM＞100.0μM ＞3.9 MTI-3 8.5μg/ml ＞100.0μg/ml＞11.7 提取物*＞100.0μg/ml ＞100.0μg/ml- Intron 6.3I.U.＞500.0I.U. ＞79.2 SEAP/MTT初級篩選 亞基因組1a SEAP，EC50MTT，IC50 SI 2’-MeC 61.6μM ＞100.0μM＞1.6 MTI-3 17.4μg/ml＞100.0μg/ml ＞5.7 提取物* ＞100.0μg/ml ＞100.0μg/ml - Intron 14.4I.U. ＞500.0I.U. ＞34.6 實施例7在復(fù)制子轉(zhuǎn)染的Huh-7細(xì)胞系中，化合物的抗HCV活性 使含HCV-復(fù)制子RNA的Huh-7細(xì)胞(Apath，LLC，St.Louis，Mo.)維持指數(shù)生長。將細(xì)胞接種在96孔板中，接種后，加入測試化合物。溫育96h后，分離總細(xì)胞RNA，用一步多次逆轉(zhuǎn)錄-PCR方案，擴(kuò)增HCV復(fù)制子RNA和內(nèi)部控制器。在溫育結(jié)束時，測量對Huh-7和HepG2細(xì)胞的細(xì)胞毒性，測定導(dǎo)致細(xì)胞生長減少50％的濃度(CC50)。S(Stuyver LJ，McBrayer TR，Whitaker T，Thamish PM，RameshM，Lostia S，Cartee L L，Shi J，Hobbs A，Schinazi RF，Watanabe KA，Otto MJ.Antimicrob Agents Chemother.2004；48651-4。這些測定的結(jié)果見圖10所示。
結(jié)合其優(yōu)選的實施方案描述了本發(fā)明。根據(jù)前述本發(fā)明的詳細(xì)描述，本發(fā)明的變化和修改對本領(lǐng)域技術(shù)人員而言是顯而易見的。
權(quán)利要求
1.一種治療感染黃病毒科病毒的宿主的方法，所述方法包括給予所述宿主任選在藥學(xué)上可接受的載體中的有效量的下式穿心蓮內(nèi)酯衍生物
或其順式異構(gòu)體，或其藥學(xué)上可接受的鹽、酯、酯的鹽或前藥，
其中
B1、B2和B3獨立為CR1R2、C(Y1)、O、NR4、PR5、P(＝Y(jié)2)R6、P(＝Y(jié)3)2、S(＝Y(jié)4)k、間隔基或共價鍵；且k可以為0、1或2；且
W1、W2和W3獨立為CR7R8、CR9、C、C(Y5)、O、NR10、PR11、P(＝Y(jié)6)R12、P(＝Y(jié)7)2、S(＝Y(jié)8)f或共價鍵；且f可以為0、1或2；或
B1-W1、B2-W2和/或B3-W3獨立為CR3＝CR9或C≡C；且
X1、X2和X3獨立為氫、CR18R19R20、C＝R21R22、C≡R23、C≡N、C(＝Y(jié)9)R24、OR25、NR26R27、N＝NR28、P(＝Y(jié)10)d(R29)V、S(＝Y(jié)11)d(R30)i或NO2；且d可以為0、1或2；且v可以為0、1或2；且i可獨立為0或1；且
Y1、Y2、Y3、Y4、Y5、Y6、Y7、Y8、Y9、Y10和Y11獨立為O、S或NZ；且Z可獨立為氫、R13、OR14、SR15或NR16R17；且
R1、R2、R3、R4、R5、R6、R7、R8、R9、R10、R11、R12、R13、R14、R15、R16、R17、R18、R19、R20、R21、R22、R23、R24、R25、R26、R27、R28、R29、R30、R31和R32獨立為以下基團(tuán)氫、烷基、烯基、炔基、環(huán)烷基、環(huán)烯基、環(huán)炔基、芳基、烷芳基、芳基烷基、雜環(huán)基、雜芳基、?；?、醛基、脲基、烷氧基、氨基、鹵素、甲硅烷基、巰基、磺基氧基、亞磺?；?、氨磺?；?、羥基、酯基、羧酸、酰胺、硝基、氰基、膦?；?、氧膦基、磷?；?、酰亞胺、硫代酸酯、醚、酰鹵、肟、氨基甲酸酯、硫醚、天然或合成氨基酸或碳水化合物的殘基，其中所述任何基團(tuán)可任選通過間隔基與目標(biāo)部分或氧基連接；或者，
R1、R2、R3、R4、R5、R6、R7、R8、R9、R10、R11、R12、R13、R14、R15、R16、R17、R18、R19、R20、R21、R22、R23、R24、R25、R26、R27、R28、R29、R30、R31和R32可分別結(jié)合在一起，形成包含以下基團(tuán)的橋連化合物烷基、烯基、炔基、環(huán)烷基、環(huán)烯基、環(huán)炔基、芳基、烷芳基、芳基烷基、雜環(huán)基、雜芳基、?；㈦寤?、烷氧基、氨基、鹵素、甲硅烷基、巰基、亞磺?；被酋；?、酯基、酰胺、膦?；?、氧膦基、磷?；Ⅴ啺?、硫代酸酯、醚、肟、氨基甲酸酯、硫醚、天然或合成氨基酸或碳水化合物的殘基，其中所述任何基團(tuán)可任選通過間隔基與目標(biāo)部分或氧基連接；且
各碳原子不能與兩個以上的雜原子共價結(jié)合；且其中B、W和X不能都為雜原子部分，除非B、W和X均為氮基部分，或B和X獨立為O或N，且W為PR11、POR12、PO2、S(Y4)m，且m為1或2；且
其中B和W，或W和X不能兩者均具有通式C(Y)、POR12、PO2、S(＝Y(jié)4)t，和t為1或2。
2.權(quán)利要求1的方法，其中B1、B2和B3獨立為CR1R2、C(Y1)、O或共價鍵；W1、W2和W3獨立為CR7R8、CR9、C、C(Y5)、O或共價鍵；且X1、X2和X3獨立為氫、CR18R19R20、C＝R21R22、C≡R23。
3.權(quán)利要求1的方法，其中B1、B2和B3中的至少一個及W1、W2和W3中的至少一個為共價鍵，且X1、X2和X3中的至少一個為氫。
4.權(quán)利要求1的方法，其中所述化合物具有下式
或其順式異構(gòu)體，或其藥學(xué)上可接受的鹽、酯、酯的鹽或前藥。
5.權(quán)利要求1的方法，其中所述化合物選自下式化合物
或其藥學(xué)上可接受的鹽、酯、酯的鹽或前藥。
6.一種治療感染黃病毒科病毒的宿主的方法，所述方法包括給予任選在藥學(xué)上可接受的載體中的有效量的下式穿心蓮內(nèi)酯或其衍生物
或其順式異構(gòu)體，或其藥學(xué)上可接受的鹽、酯、酯的鹽或前藥；
其中
B1、B2和B3獨立為CR1R2、C(Y1)、O、NR4、PR5、P(＝Y(jié)2)R6、P(＝Y(jié)3)2、S(＝Y(jié)4)k、間隔基或共價鍵；且k可以為0、1或2；且
W1、W2和W3獨立為CR7R8、CR9、C、C(Y5)、O、NR10、PR11、P(＝Y(jié)6)R12、P(＝Y(jié)7)2、S(＝Y(jié)8)f或共價鍵；且f可以為0、1或2；或
B1-W1、B2-W2和/或B3-W3獨立為CR3＝CR9或C≡C；且
X1、X2和X3獨立為氫、CR18R19R20、C＝R21R22、C≡R23、C≡N、C(＝Y(jié)9)R24、OR25、NR26R27、N＝NR28、P(＝Y(jié)10)d(R29)V、S(＝Y(jié)11)d(R30)i或NO2；且d可以為0、1或2；且v可以為0、1或2；且i可獨立為0或1；且
Y1、Y2、Y3、Y4、Y5、Y6、Y7、Y8、Y9、Y10和Y11獨立為O、S或NZ；且Z可獨立為氫、R13、OR14、SR15或NR16R17；且
R1、R2、R3、R4、R5、R6、R7、R8、R9、R10、R11、R12、R13、R14、R15、R16、R17、R18、R19、R20、R21、R22、R23、R24、R25、R26、R27、R28、R29、R30、R31和R32獨立為以下基團(tuán)氫、烷基、烯基、炔基、環(huán)烷基、環(huán)烯基、環(huán)炔基、芳基、烷芳基、芳基烷基、雜環(huán)基、雜芳基、?；?、醛基、脲基、烷氧基、氨基、鹵素、甲硅烷基、巰基、磺基氧基、亞磺酰基、氨磺?；⒘u基、酯基、羧酸、酰胺、硝基、氰基、膦酰基、氧膦基、磷?；Ⅴ啺?、硫代酸酯、醚、酰鹵、肟、氨基甲酸酯、硫醚、天然或合成氨基酸或碳水化合物的殘基，其中所述任何基團(tuán)可任選通過間隔基與目標(biāo)部分或氧基連接；或者，
R1、R2、R3、R4、R5、R6、R7、R8、R9、R10、R11、R12、R13、R14、R15、R16、R17、R18、R19、R20、R21、R22、R23、R24、R25、R26、R27、R28、R29、R30、R31和R32可分別結(jié)合在一起，形成包含以下基團(tuán)的橋連化合物烷基、烯基、炔基、環(huán)烷基、環(huán)烯基、環(huán)炔基、芳基、烷芳基、芳基烷基、雜環(huán)基、雜芳基、?；?、脲基、烷氧基、氨基、鹵素、甲硅烷基、巰基、亞磺?；被酋；?、酯基、酰胺、膦?；?、氧膦基、磷酰基、酰亞胺、硫代酸酯、醚、肟、氨基甲酸酯、硫醚、天然或合成氨基酸或碳水化合物的殘基，其中所述任何基團(tuán)可任選通過間隔基與目標(biāo)部分或氧基連接；且
各碳原子不能與兩個以上的雜原子共價結(jié)合；且其中B、W和X不能都為雜原子部分，除非B、W和X均為氮基部分，或B和X獨立為O或N，且W為PR11、POR12、PO2、S(Y4)m，且m為1或2；且
其中B和W，或W和X不能兩者均具有通式C(Y)、POR12、PO2、S(＝Y(jié)4)t，和t為1或2。
7.權(quán)利要求6的方法，其中所述化合物選自下式化合物
或其藥學(xué)上可接受的鹽、酯、酯的鹽或前藥。
8.一種治療感染黃病毒科病毒的宿主的方法，所述方法包括給予任選在藥學(xué)上可接受的載體中的有效量的下式穿心蓮內(nèi)酯或衍生物
或其順式異構(gòu)體，或其藥學(xué)上可接受的鹽、酯、酯的鹽或前藥；
其中
B1、B2和B3獨立為CR1R2、C(Y1)、O、NR4、PR5、P(＝Y(jié)2)R6、P(＝Y(jié)3)2、S(＝Y(jié)4)k、間隔基或共價鍵；且k可以為0、1或2；且
W1、W2和W3獨立為CR7R8、CR9、C、C(Y5)、O、NR10、PR11、P(＝Y(jié)6)R12、P(＝Y(jié)7)2、S(＝Y(jié)8)f或共價鍵；且f可以為0、1或2；或
B1-W1、B2-W2和/或B3-W3獨立為CR3＝CR9或C≡C；且
X1、X2和X3獨立為氫、CR18R19R20、C＝R21R22、C≡R23、C≡N、C(＝Y(jié)9)R24、OR25、NR26R27、N＝NR28、P(＝Y(jié)10)d(R29)V、S(＝Y(jié)11)d(R30)i或NO2；且d可以為0、1或2；且v可以為0、1或2；且i可獨立為0或1；且
Y1、Y2、Y3、Y4、Y5、Y6、Y7、Y8、Y9、Y10和Y11獨立為O、S或NZ；且Z可獨立為氫、R13、OR14、SR15或NR16R17；且
R1、R2、R3、R4、R5、R6、R7、R8、R9、R10、R11、R12、R13、R14、R15、R16、R17、R18、R19、R20、R21、R22、R23、R24、R25、R26、R27、R28、R29、R30、R31和R32獨立為以下基團(tuán)氫、烷基、烯基、炔基、環(huán)烷基、環(huán)烯基、環(huán)炔基、芳基、烷芳基、芳基烷基、雜環(huán)基、雜芳基、?；?、醛基、脲基、烷氧基、氨基、鹵素、甲硅烷基、巰基、磺基氧基、亞磺?；?、氨磺?；?、羥基、酯基、羧酸、酰胺、硝基、氰基、膦酰基、氧膦基、磷?；Ⅴ啺?、硫代酸酯、醚、酰鹵、肟、氨基甲酸酯、硫醚、天然或合成氨基酸或碳水化合物的殘基，其中所述任何基團(tuán)可任選通過間隔基與目標(biāo)部分或氧基連接；或者，
R1、R2、R3、R4、R5、R6、R7、R8、R9、R10、R11、R12、R13、R14、R15、R16、R17、R18、R19、R20、R21、R22、R23、R24、R25、R26、R27、R28、R29、R30、R31和R32可分別結(jié)合在一起，形成包含以下基團(tuán)的橋連化合物烷基、烯基、炔基、環(huán)烷基、環(huán)烯基、環(huán)炔基、芳基、烷芳基、芳基烷基、雜環(huán)基、雜芳基、酰基、脲基、烷氧基、氨基、鹵素、甲硅烷基、巰基、亞磺?；?、氨磺?；Ⅴセ?、酰胺、膦?；?、氧膦基、磷?；?、酰亞胺、硫代酸酯、醚、肟、氨基甲酸酯、硫醚、天然或合成氨基酸或碳水化合物的殘基，其中所述任何基團(tuán)可任選通過間隔基與目標(biāo)部分或氧基連接；且
各碳原子不能與兩個以上的雜原子共價結(jié)合；且其中B、W和X不能都為雜原子部分，除非B、W和X均為氮基部分，或B和X獨立為O或N，且W為PR11、POR12、PO2、S(Y4)m，且m為1或2；且
其中B和W，或W和X不能兩者均具有通式C(Y)、POR12、PO2、S(＝Y(jié)4)t，和t為1或2。
9.權(quán)利要求8的方法，其中所述化合物為下式化合物
或其藥學(xué)上可接受的鹽、酯、酯的鹽或前藥。
10.權(quán)利要求1的方法，其中所述化合物選自以下化合物
或其順式異構(gòu)體，或其藥學(xué)上可接受的鹽、酯、酯的鹽或前藥。
11.權(quán)利要求6的方法，其中所述化合物為
或其藥學(xué)上可接受的鹽、酯、酯的鹽或前藥。
12.權(quán)利要求8的方法，其中所述化合物選自以下化合物
或其藥學(xué)上可接受的鹽、酯、酯的鹽或前藥。
13.一種藥用組合物，所述組合物包含任選在藥學(xué)上可接受的載體中的下式穿心蓮內(nèi)酯衍生物
或其順式異構(gòu)體，或其藥學(xué)上可接受的鹽、酯、酯的鹽或前藥，和組合應(yīng)用的至少一種第二抗病毒藥物，
其中
B1、B2和B3獨立為CR1R2、C(Y1)、O、NR4、PR5、P(＝Y(jié)2)R6、P(＝Y(jié)3)2、S(＝Y(jié)4)k、間隔基或共價鍵；且k可以為0、1或2；且
W1、W2和W3獨立為CR7R8、CR9、C、C(Y5)、O、NR10、PR11、P(＝Y(jié)6)R12、P(＝Y(jié)7)2、S(＝Y(jié)8)f或共價鍵；且f可以為0、1或2；或
B1-W1、B2-W2和/或B3-W3獨立為CR3＝CR9或C≡C；且
X1、X2和X3獨立為氫、CR18R19R20、C＝R21R22、C≡R23、C≡N、C(＝Y(jié)9)R24、OR25、NR26R27、N＝NR28、P(＝Y(jié)10)d(R29)V、S(＝Y(jié)11)d(R30)i或NO2；且d可以為0、1或2；且v可以為0、1或2；且i可獨立為0或1；且
Y1、Y2、Y3、Y4、Y5、Y6、Y7、Y8、Y9、Y10和Y11獨立為O、S或NZ；且Z可獨立為氫、R13、OR14、SR15或NR16R17；且
R1、R2、R3、R4、R5、R6、R7、R8、R9、R10、R11、R12、R13、R14、R15、R16、R17、R18、R19、R20、R21、R22、R23、R24、R25、R26、R27、R28、R29、R30、R31和R32獨立為以下基團(tuán)氫、烷基、烯基、炔基、環(huán)烷基、環(huán)烯基、環(huán)炔基、芳基、烷芳基、芳基烷基、雜環(huán)基、雜芳基、?；⑷┗?、脲基、烷氧基、氨基、鹵素、甲硅烷基、巰基、磺基氧基、亞磺酰基、氨磺酰基、羥基、酯基、羧酸、酰胺、硝基、氰基、膦酰基、氧膦基、磷?；Ⅴ啺?、硫代酸酯、醚、酰鹵、肟、氨基甲酸酯、硫醚、天然或合成氨基酸或碳水化合物的殘基，其中所述任何基團(tuán)可任選通過間隔基與目標(biāo)部分或氧基連接；或者，
R1、R2、R3、R4、R5、R6、R7、R8、R9、R10、R11、R12、R13、R14、R15、R16、R17、R18、R19、R20、R21、R22、R23、R24、R25、R26、R27、R28、R29、R30、R31和R32可分別結(jié)合在一起，形成包含以下基團(tuán)的橋連化合物烷基、烯基、炔基、環(huán)烷基、環(huán)烯基、環(huán)炔基、芳基、烷芳基、芳基烷基、雜環(huán)基、雜芳基、?；?、脲基、烷氧基、氨基、鹵素、甲硅烷基、巰基、亞磺酰基、氨磺?；?、酯基、酰胺、膦?；⒀蹯⒒?、磷酰基、酰亞胺、硫代酸酯、醚、肟、氨基甲酸酯、硫醚、天然或合成氨基酸或碳水化合物的殘基，其中所述任何基團(tuán)可任選通過間隔基與目標(biāo)部分或氧基連接；且
各碳原子不能與兩個以上的雜原子共價結(jié)合；且其中B、W和X不能都為雜原子部分，除非B、W和X均為氮基部分，或B和X獨立為O或N，且W為PR11、POR12、PO2、S(Y4)m，且m為1或2；且
其中B和W，或W和X不能兩者均具有通式C(Y)、POR12、PO2、S(＝Y(jié)4)t，和t為1或2。
14.權(quán)利要求13的組合物，其中B1、B2和B3獨立為CR1R2、C(Y1)、O或共價鍵；W1、W2和W3獨立為CR7R8、CR9、C、C(Y5)、O或共價鍵；且X1、X2和X3獨立為氫、CR18R19R20、C＝R21R22、C≡R23。
15.權(quán)利要求13的組合物，其中B1、B2和B3中的至少一個及W1、W2和W3中的至少一個為共價鍵，且X1、X2和X3中的至少一個為氫。
16.權(quán)利要求13的組合物，其中所述化合物具有下式
或其順式異構(gòu)體，或其藥學(xué)上可接受的鹽、酯、酯的鹽或前藥。
17.權(quán)利要求13的組合物，其中所述化合物選自下式化合物
或其藥學(xué)上可接受的鹽、酯、酯的鹽或前藥。
18.一種藥用組合物，所述組合物包含任選在藥學(xué)上可接受的載體中的下式穿心蓮內(nèi)酯衍生物
或其順式異構(gòu)體，或其藥學(xué)上可接受的鹽、酯、酯的鹽或前藥，和組合應(yīng)用的至少一種第二抗病毒藥物；
其中
B1、B2和B3獨立為CR1R2、C(Y1)、O、NR4、PR5、P(＝Y(jié)2)R6、P(＝Y(jié)3)2、S(＝Y(jié)4)k、間隔基或共價鍵；且k可以為0、1或2；且
W1、W2和W3獨立為CR7R8、CR9、C、C(Y5)、O、NR10、PR11、P(＝Y(jié)6)R12、P(＝Y(jié)7)2、S(＝Y(jié)8)f或共價鍵；且f可以為0、1或2；或
B1-W1、B2-W2和/或B3-W3獨立為CR3＝CR9或C≡C；且
X1、X2和X3獨立為氫、CR18R19R20、C＝R21R22、C≡R23、C≡N、C(＝Y(jié)9)R24、OR25、NR26R27、N＝NR28、P(＝Y(jié)10)d(R29)V、S(＝Y(jié)11)d(R30)i或NO2；且d可以為0、1或2；且v可以為0、1或2；且i可獨立為0或1；且
Y1、Y2、Y3、Y4、Y5、Y6、Y7、Y8、Y9、Y10和Y11獨立為O、S或NZ；且Z可獨立為氫、R13、OR14、SR15或NR16R17；且
R1、R2、R3、R4、R5、R6、R7、R8、R9、R10、R11、R12、R13、R14、R15、R16、R17、R18、R19、R20、R21、R22、R23、R24、R25、R26、R27、R28、R29、R30、R31和R32獨立為以下基團(tuán)氫、烷基、烯基、炔基、環(huán)烷基、環(huán)烯基、環(huán)炔基、芳基、烷芳基、芳基烷基、雜環(huán)基、雜芳基、?；⑷┗?、脲基、烷氧基、氨基、鹵素、甲硅烷基、巰基、磺基氧基、亞磺酰基、氨磺?；?、羥基、酯基、羧酸、酰胺、硝基、氰基、膦?；?、氧膦基、磷?；Ⅴ啺?、硫代酸酯、醚、酰鹵、肟、氨基甲酸酯、硫醚、天然或合成氨基酸或碳水化合物的殘基，其中所述任何基團(tuán)可任選通過間隔基與目標(biāo)部分或氧基連接；或者，
R1、R2、R3、R4、R5、R6、R7、R8、R9、R10、R11、R12、R13、R14、R15、R16、R17、R18、R19、R20、R21、R22、R23、R24、R25、R26、R27、R28、R29、R30、R31和R32可分別結(jié)合在一起，形成包含以下基團(tuán)的橋連化合物烷基、烯基、炔基、環(huán)烷基、環(huán)烯基、環(huán)炔基、芳基、烷芳基、芳基烷基、雜環(huán)基、雜芳基、?；㈦寤?、烷氧基、氨基、鹵素、甲硅烷基、巰基、亞磺?；被酋；Ⅴセ?、酰胺、膦?；?、氧膦基、磷?；Ⅴ啺?、硫代酸酯、醚、肟、氨基甲酸酯、硫醚、天然或合成氨基酸或碳水化合物的殘基，其中所述任何基團(tuán)可任選通過間隔基與目標(biāo)部分或氧基連接；且
各碳原子不能與兩個以上的雜原子共價結(jié)合；且其中B、W和X不能都為雜原子部分，除非B、W和X均為氮基部分，或B和X獨立為O或N，且W為PR11、POR12、PO2、S(Y4)m，且m為1或2；且
其中B和W，或W和X不能兩者均具有通式C(Y)、POR12、PO2、S(＝Y(jié)4)t，和t為1或2。
19.權(quán)利要求18的組合物，其中所述化合物選自下式化合物
或其藥學(xué)上可接受的鹽、酯、酯的鹽或前藥。
20.一種藥用組合物，所述組合物包含任選在藥學(xué)上可接受的載體中的下式穿心蓮內(nèi)酯衍生物
或其順式異構(gòu)體，或其藥學(xué)上可接受的鹽、酯、酯的鹽或前藥，和組合應(yīng)用的至少一種第二抗病毒藥物；
其中
B1、B2和B3獨立為CR1R2、C(Y1)、O、NR4、PR5、P(＝Y(jié)2)R6、P(＝Y(jié)3)2、S(＝Y(jié)4)k、間隔基或共價鍵；且k可以為0、1或2；且
W1、W2和W3獨立為CR7R8、CR9、C、C(Y5)、O、NR10、PR11、P(＝Y(jié)6)R12、P(＝Y(jié)7)2、S(＝Y(jié)8)f或共價鍵；且f可以為0、1或2；或
B1-W1、B2-W2和/或B3-W3獨立為CR3＝CR9或C≡C；且
X1、X2和X3獨立為氫、CR18R19R20、C＝R21R22、C≡R23、C≡N、C(＝Y(jié)9)R24、OR25、NR26R27、N＝NR28、P(＝Y(jié)10)d(R29)V、S(＝Y(jié)11)d(R30)i或NO2；且d可以為0、1或2；且v可以為0、1或2；且i可獨立為0或1；且
Y1、Y2、Y3、Y4、Y5、Y6、Y7、Y8、Y9、Y10和Y11獨立為O、S或NZ；且Z可獨立為氫、R13、OR14、SR15或NR16R17；且
R1、R2、R3、R4、R5、R6、R7、R8、R9、R10、R11、R12、R13、R14、R15、R16、R17、R18、R19、R20、R21、R22、R23、R24、R25、R26、R27、R28、R29、R30、R31和R32獨立為以下基團(tuán)氫、烷基、烯基、炔基、環(huán)烷基、環(huán)烯基、環(huán)炔基、芳基、烷芳基、芳基烷基、雜環(huán)基、雜芳基、?；?、醛基、脲基、烷氧基、氨基、鹵素、甲硅烷基、巰基、磺基氧基、亞磺?；被酋；?、羥基、酯基、羧酸、酰胺、硝基、氰基、膦?；⒀蹯⒒?、磷?；?、酰亞胺、硫代酸酯、醚、酰鹵、肟、氨基甲酸酯、硫醚、天然或合成氨基酸或碳水化合物的殘基，其中所述任何基團(tuán)可任選通過間隔基與目標(biāo)部分或氧基連接；或者，
R1、R2、R3、R4、R5、R6、R7、R8、R9、R10、R11、R12、R13、R14、R15、R16、R17、R18、R19、R20、R21、R22、R23、R24、R25、R26、R27、R28、R29、R30、R31和R32可分別結(jié)合在一起，形成包含以下基團(tuán)的橋連化合物烷基、烯基、炔基、環(huán)烷基、環(huán)烯基、環(huán)炔基、芳基、烷芳基、芳基烷基、雜環(huán)基、雜芳基、?；?、脲基、烷氧基、氨基、鹵素、甲硅烷基、巰基、亞磺?；?、氨磺?；?、酯基、酰胺、膦?；⒀蹯⒒?、磷?；?、酰亞胺、硫代酸酯、醚、肟、氨基甲酸酯、硫醚、天然或合成氨基酸或碳水化合物的殘基，其中所述任何基團(tuán)可任選通過間隔基與目標(biāo)部分或氧基連接；且
各碳原子不能與兩個以上的雜原子共價結(jié)合；且其中B、W和X不能都為雜原子部分，除非B、W和X均為氮基部分，或B和X獨立為O或N，且W為PR11、POR12、PO2、S(Y4)m，且m為1或2；且
其中B和W，或W和X不能兩者均具有通式C(Y)、POR12、PO2、S(＝Y(jié)4)t，和t為1或2。
21.權(quán)利要求20的組合物，其中所述化合物為下式化合物
或其藥學(xué)上可接受的鹽、酯、酯的鹽或前藥。
22.權(quán)利要求13的組合物，其中所述化合物選自以下化合物
或其順式異構(gòu)體，或其藥學(xué)上可接受的鹽、酯、酯的鹽或前藥。
23.權(quán)利要求18的組合物，其中所述化合物為
或其藥學(xué)上可接受的鹽、酯、酯的鹽或前藥。
24.權(quán)利要求20的組合物，其中所述化合物選自以下化合物
或其藥學(xué)上可接受的鹽、酯、酯的鹽或前藥。
25.權(quán)利要求1、6或8中任一項的方法，其中聯(lián)合或交替給予所述衍生物和第二種抗病毒藥物。
26.權(quán)利要求1、6或8中任一項的方法，其中所述黃病毒科病毒為HCV。
27.權(quán)利要求1、6或8中任一項的方法，其中所述黃病毒科病毒為黃病毒。
28.權(quán)利要求1、6或8中任一項的方法，其中所述黃病毒科病毒為瘟病毒屬病毒。
29.權(quán)利要求1、6或8中任一項的方法，其中所述黃病毒科病毒為瘟病毒屬病毒。
30.權(quán)利要求13、18或20中任一項的組合物，所述組合物適用于口服給藥。
31.權(quán)利要求13、18或20中任一項的組合物，所述組合物為劑量單位形式。
32.權(quán)利要求3 1的組合物，其中所述劑量單位為片劑。
33.權(quán)利要求13-24中任一項的組合物在治療感染黃病毒科病毒的宿主中的用途。
34.權(quán)利要求13-24中任一項的組合物在制備藥物中的用途，該藥物用于治療感染黃病毒科病毒的宿主。
全文摘要
本發(fā)明提供治療被病毒感染，尤其包括丙型肝炎感染在內(nèi)的黃病毒科病毒感染的宿主的方法和組合物，該方法包括單獨或聯(lián)合或交替給予有效抗病毒量的穿心蓮內(nèi)酯衍生物和另一種抗病毒化合物。
文檔編號A61K31/34GK101098691SQ200580046253
公開日2008年1月2日 申請日期2005年11月8日 優(yōu)先權(quán)日2004年11月8日
發(fā)明者R·H·劉, J·R·雅各布, B·C·滕南特 申請人:康乃爾研究基金會有限公司