專利名稱：：作為蛋白激酶抑制劑的吡唑并[1,5-a]嘧啶的制作方法作為蛋白激酶抑制劑的吡唑并[l，5-a]嘧啶發(fā)明領(lǐng)域本發(fā)明涉及用作蛋白激酶抑制劑、調(diào)節(jié)劑或調(diào)制劑的取代的吡唑并[l,5-a]嘧啶化合物，含有所述化合物的藥物組合物和用所述化合物和組合物治療例如以下疾病的治療方法癌癥、炎癥、關(guān)節(jié)炎、病毒性疾病、神經(jīng)變性性疾病例如阿爾茨海默病(Alzheimer'sdisease)、心血管疾病和真菌性疾病。本發(fā)明還涉及丙型肝炎病毒(HCV)復(fù)制的抑制。特別是，本發(fā)明涉及用于抑制HCVRNA-依賴性RNA聚合酶的化合物和方法。
背景技術(shù)：
：蛋白激酶是催化蛋白質(zhì)磷酸化，具體地講是蛋白質(zhì)中特定酪氨酸、絲氨酸或蘇氨酸殘基的羥基磷酸化的酶家族。蛋白激酶在調(diào)節(jié)包括代謝、細(xì)胞增殖、細(xì)胞分化和細(xì)胞存活在內(nèi)的多種細(xì)胞進(jìn)程中十分關(guān)鍵。失控增殖是癌細(xì)胞的標(biāo)志，可以表現(xiàn)為使刺激性基因過度活化或者使抑制性基因失活這兩種方式中的一種，從而使細(xì)胞分裂周期失調(diào)。蛋白激酶抑制劑、調(diào)節(jié)劑或調(diào)制劑改變例如細(xì)胞周期蛋白依賴性激酶(CDK)、促分裂原活化蛋白激酶(MAPK/ERK)、糖原合酶激酶3(GSK3(3)、限制點(diǎn)(CHK)激酶(例如CHK-1、CHK-2等)、AKT激酶等激酶的功能。蛋白激酶抑制劑的實(shí)例參見WO02/22610Al和Y.Mettey等，/C7ew.'(2003)46222-236。細(xì)胞周期蛋白依賴性激酶是絲氨酸/蘇氨酸蛋白激酶，它是細(xì)胞周期和細(xì)胞增殖的驅(qū)動(dòng)力。在許多嚴(yán)重的實(shí)體瘤中十分頻繁地發(fā)生CDK功能的錯(cuò)誤調(diào)節(jié)。各個(gè)CDK，例如CDK1、CDK2、CDK3、CDK4、CDK5、CDK6、CDK7和CDK8等，在細(xì)胞周期進(jìn)程中發(fā)揮截然不同的作用，可被分成G1期、S期或G2M期酶。CDK2和CDK4特別引人關(guān)注，因?yàn)樵诙喾N人類癌癥中，其活性常常被錯(cuò)誤調(diào)節(jié)。CDK2活性是細(xì)胞周期Gl期到S期進(jìn)程中所必需的，并且CDK2是Gl限制點(diǎn)的關(guān)鍵組分之一。限制點(diǎn)用來維持細(xì)胞周期活動(dòng)的正常順序，使細(xì)胞對(duì)刺激或增殖信號(hào)作出反應(yīng)，而癌細(xì)胞中正確限制點(diǎn)控制的喪失促使腫瘤發(fā)生。CDK2途徑在腫瘤抑制功能水平(例如p52、RB和p27)和致癌基因活化水平(細(xì)胞周期蛋白E)上影響腫瘤發(fā)生。許多報(bào)道證實(shí)CDK2的輔激活蛋白即細(xì)胞周期蛋白E以及抑制劑p27,分別在下列癌中過度表達(dá)或者表達(dá)不足乳腺癌、結(jié)腸癌、非小細(xì)胞肺癌、胃癌、前列腺癌、膀胱癌、非霍奇金淋巴瘤(non-Hodgkin，slymphoma),卵巢癌和其他癌。有報(bào)道顯示其表達(dá)的改變與增高的CDK2活性水平和低的總存活率有關(guān)。這一發(fā)現(xiàn)使CDK2及其調(diào)節(jié)途徑成為癌癥治療研發(fā)中引人注目的目標(biāo)。文獻(xiàn)中曾報(bào)道指出，許多5'-三磷酸腺苷(ATP)的竟?fàn)幮杂袡C(jī)小分子及肽為CDK抑制劑，可能用于癌癥治療。U.S.6,413,974第1欄第23行至第15欄第IO行對(duì)各種CDK及其與不同類型癌癥的關(guān)系進(jìn)行了充分地描述。黃酮吡多(見下)是一種非選擇性CDK抑制劑，目前正在進(jìn)行人類臨床實(shí)驗(yàn)，A.M.Sanderowicz等，《/.0"co/.(1998)16,2986-2999。<formula>formulaseeoriginaldocumentpage12</formula>其他已知的CDK抑制劑包括例如奧羅莫星(J.Vesely等，丄5/oc/^m.,(1994)224,771-786)和洛斯可維汀(roscovitine)(I.Meijer等，￡wr.J.說oc/2em.,(1997)243,527-536)。U.S.6,107,305描述了作為CDK抑制劑的某些吡唑并[3,4-b]吡啶化合物。'305專利中的一個(gè)示例性化合物為K.S.Kim等，J.MedCTzem.45(2002)3905-3927和WO02/10162公開了作為CDK抑制劑的某些M噻唑化合物。吡峻并嘧咬化合物廣為人知。例如W092/18504、WO02/50079、WO95/35298、WO02/40485、EP94304104.6、EP0628559(等同于美國專利5,602,136、5,602,137和5,571,813)、U.S.6,383,790、C/ew.尸/am.BW/.,(1999)47928,J.A/d.CTzew.，(1977)20，296,丄Me6/.C&w.,(1976)19517和C/ew.尸/wm2.5W/.，(1962)10620公開了各種吡唑并嘧啶化合物。其他重要的出版物包括美國專利第5,688,949號(hào)和第6,313,124號(hào)、WO98/54093、WO03/101993、WO03顏256、WO04/089416和DE10223917。其他系列的蛋白激酶是在細(xì)胞周期進(jìn)程中作為限制點(diǎn)而起重要作用的激酶。限制點(diǎn)防止不適當(dāng)時(shí)間(例如響應(yīng)DNA損傷)的細(xì)胞周期進(jìn)程，在細(xì)胞受抑制時(shí)維持細(xì)胞的代謝平衡，而且在某些情況下，當(dāng)限制點(diǎn)需要未得到滿足時(shí)，可誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡(程序性細(xì)胞死亡)。限制點(diǎn)控制可發(fā)生在期(DNA合成之前)和G2期(進(jìn)入有絲分裂前)。一系列的限制點(diǎn)監(jiān)控著基因組的完整性，在感知DNA損傷時(shí)，這些"DNA損傷限制點(diǎn)"阻斷G!期和G2期的細(xì)胞周期進(jìn)程，減緩S期的進(jìn)程。這一作用使DNA修復(fù)過程能夠在發(fā)生基因組復(fù)制以及隨后該遺傳物質(zhì)分離進(jìn)入子代細(xì)胞前，完成其修復(fù)任務(wù)。有報(bào)道顯示，CHK1的鈍化轉(zhuǎn)導(dǎo)來自DNA損傷感覺復(fù)合物(DNA-damagesensorycomplex)的信號(hào)，從而抑制細(xì)胞周期蛋白B/Cdc2激酶活化，這促進(jìn)進(jìn)入有絲分裂，消除了由抗癌藥或內(nèi)源性DNA損傷造成的DNA損傷誘導(dǎo)的G2抑制，以及導(dǎo)致優(yōu)先殺死由此而產(chǎn)生的限制點(diǎn)缺陷細(xì)胞。參見例如Peng等，&,e"ce,277,1501-1505(1997);Sanchez等，Science,277，1497-1501(1997),Nurse,Ce〃，91,865-867(1997);Weinert,Sc/e臟,277,1450-1451(1997);Walworth等，胸訓(xùn),363,368-371(1993);和AI-Khodairy等，Mo/ec.編.0〃.，5,147-160(1994)。選擇性地操縱癌細(xì)胞的限制點(diǎn)控制，可以為癌癥化學(xué)療法和放射療法方案提供廣泛用途，另外，還可提供人類癌癥"基因組不穩(wěn)定性"的通用標(biāo)志，該標(biāo)志被用來作為破壞癌細(xì)胞的選擇性基礎(chǔ)。許多因素將CHK1定位于DNA損傷限制點(diǎn)控制中的關(guān)鍵靶標(biāo)。闡明CHK1的抑制劑和功能上相關(guān)的激酶，可能為癌癥治療提供新的有價(jià)值的實(shí)質(zhì)性治療方法，所述功能上相關(guān)的激酶例如CDS1/CHK2，是最近發(fā)現(xiàn)的一種在調(diào)節(jié)S期進(jìn)程中與CHK1協(xié)同作用的激酶(參見Zeng等，iVart^e,395,507-510(1998);Matsuoka,Scze"ce,282,1893-1897(1998》。另一類激酶是酪氨酸激酶。酪氨酸激酶可以是受體型(具有胞外域、跨膜域和胞內(nèi)域)或非受體型(完全為胞內(nèi))。受體型酪氨酸激酶包括許多具有不同生物活性的跨膜受體。實(shí)際上，已經(jīng)鑒定出大約20個(gè)不同的受體型酪氨酸激酶亞家族。一個(gè)稱為HER亞家族的酪氨酸激酶亞家族包括EGFR(HER1)、HER2、HER3和HER4。迄今已被鑒定出的該受體亞家族的配體包括表皮生長因子、TGF-a、雙調(diào)蛋白、HB-EGF、(3-動(dòng)物纖維素(celMin)和調(diào)蛋白。這些受體型酪氨酸激酶的另一個(gè)亞家族是胰島素亞家族，它包括INS-R、IGF-IR、IR和IR-R。PDGF亞家族包括PDGF-a受體和PDGF-p受體、CSFIR、c-kit和FLK-II。FLK家族包括激酶插入域受體(KDR)、胎肝激酶-l(FLK-l)、胎肝激酶-4(FLK-4)和fms-樣酪氨酸激酶-l(flt-l)。有關(guān)受體型酪氨酸激酶的詳細(xì)論述，可參見Plowman等，DN&P7(6):334-339,1994。認(rèn)為至少一種非受體蛋白酪氨酸激酶(即LCK),介導(dǎo)T-細(xì)胞中來自細(xì)胞表面蛋白(Cd4)與交聯(lián)的抗Cd4抗體相互作用的信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)。非受體酪氨酸激酶的更多詳述可參見Bolen,(9wcogewe，8,2025-2031(1993)。酪氨酸激酶非受體型還包括許多亞家族，包括Src、Frk、Btk、Csk、Abl、Zap70、Fes/Fps、Fak、Jak、Ack和LIMK。這些亞家族的每一個(gè)再分為不同的受體。例如，Src亞家族是最大的亞家族之一，包括Src、Yes、Fyn、Lyn、Lck、Blk、Hck、Fgr和Yrk。已把酶的Src亞家族與腫瘤形成聯(lián)系在一起。有關(guān)非受體型酪氨酸激酶的更多詳述可參見Bolen，Oncogene,8:2025-2031(1993)。蛋白激酶除了在細(xì)胞周期控制中的作用以外，還在血管生成中起著至關(guān)重要的作用，正是該機(jī)制使得從現(xiàn)有血管形成新毛細(xì)血管。需要時(shí)，血管系統(tǒng)具有產(chǎn)生新毛細(xì)管網(wǎng)的潛力，以維持組織和器官的適當(dāng)功能。然而在成人中，血管生成相當(dāng)有限，僅發(fā)生在傷口愈合和月經(jīng)期間子宮內(nèi)膜新血管形成的過程中。另一方面，不必要的血管生成是例如視網(wǎng)膜病、牛皮癬、類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎、年齡相關(guān)性黃斑退化變性和癌癥(實(shí)體瘤)等數(shù)種疾病的標(biāo)志。被證明參與血管生成過程的蛋白激酶包括生長因子受體酪氨酸激酶家族的三個(gè)成員VEGF-R2(血管內(nèi)皮生長因子受體2，亦稱KDR(激酶插入域受體)，亦稱FLK1)、FGF-R(成纖維細(xì)胞生長因子受體)和TEK(亦稱Tie-2)。只在內(nèi)皮細(xì)胞中表達(dá)的VEGF-R2與有效的血管生成生長因子VEGF結(jié)合，通過激活其胞內(nèi)激酶活性介導(dǎo)隨后的信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)。因此，預(yù)期直接抑制VEGF-R2的激酶活性，即使在外源VEGF存在下也將導(dǎo)致血管生成減少(參見Strawn等，Ca"cwi^fearc/z,56,3540-3545(1996)),正如用無法介導(dǎo)信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)的VEGF-R2突變型所表現(xiàn)的一才羊。Millauer等，CancerResearch,56,1615-1620(1996)。此外，VEGF-R2除介導(dǎo)VEGF的血管生成活性外，似乎在成人中沒有其他功能。因此，可以預(yù)期VEGF-R2激酶活性的選擇性抑制劑幾乎沒有毒性。同樣地，F(xiàn)GFR與血管生成生長因子aFGF和bFGF結(jié)合，介導(dǎo)隨后的胞內(nèi)信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)。最近有^Ji指出，生長因子(例如bFGF)可以在已達(dá)到一定大小的實(shí)體瘤中誘導(dǎo)血管生成方面發(fā)揮關(guān)鍵作用(Yoshiji等，O"ceri^searc/j,57,3924-3928(1997)。然而，與VEGF-R2不同，F(xiàn)GF-R在遍及體內(nèi)許多不同的細(xì)胞類型中表達(dá)，在成人的其他正常生理過程中可發(fā)揮或不發(fā)揮重要作用。但是，據(jù)報(bào)道在小鼠中，系統(tǒng)性給予FGF-R激酶活性的小分子抑制劑阻斷bFGF誘導(dǎo)的血管生成而無明顯毒性(Mohammad等，五MB(9Jowma/,17,5996-5904(1998》。TEK(亦稱Tie-2)是已被證實(shí)在血管生成中起作用的只在內(nèi)皮細(xì)胞中表達(dá)的另一種受體酪氨酸激酶。與促血管生成素-1因子的結(jié)合導(dǎo)致TEK激酶域的自身磷酸化，并導(dǎo)致似乎是介導(dǎo)內(nèi)皮細(xì)胞與外周內(nèi)皮支持細(xì)胞相互作用的信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)過程，從而促進(jìn)新形成血管的成熟。另一方面，促血管生成素-2因子似乎對(duì)抗促血管生成素-1對(duì)TEK的作用并阻斷血管生成(Maisonpierre等，Science,277,55-60(1997))。Pim-l是小的絲氨SH/蘇氨酸激酶。在淋巴和骨髓惡性腫瘤中檢測出Pim-l的表達(dá)水平升高，最近Pim-l被確定為前列腺癌的預(yù)后指標(biāo)(K.Peltola，"SignalinginCancer:Pim-lKinaseanditsPartners(月中瘤信號(hào)Pim-l5敫酵及其酉己寸禺體)"，AnnalesUniversitatisTurkuensis，Sarja-Ser.DOsa-Tom.616,(2005年8月30曰),http:〃kirjasto.utu.fi/julkaisupalvelut/annaalit/2004/D616.html)。Pim-1起著細(xì)胞存活因子的作用，可防止惡性腫瘤細(xì)胞的凋亡(K.PetersenShay等，M^/ecw/arCa"cer尺，a/r/3:170-181(2005》。為了治療或預(yù)防與細(xì)胞增殖異常相關(guān)的疾病，需要蛋白激酶的有效抑制劑。此外，還需要的是，激酶抑制劑對(duì)于目標(biāo)激酶有比對(duì)于其他蛋白激酶高的親和性以及高的選擇性?？扇菀椎睾铣刹⑶沂羌?xì)胞增殖有效抑制劑的小分子化合物是例如為一種或多種蛋白激酶抑制劑的化合物，所述蛋白激酶例如CHK1、CHK2、VEGF、CDK或CDK/細(xì)胞周期蛋白復(fù)合物以及受體和非受體酪氨酸激酶。丙型肝炎病毒(HCV)為黃病毒科(Flaviviridae)的正義單鏈RNA病毒。其9.6kb基因組編碼約IO種蛋白，包括結(jié)構(gòu)衣殼和包膜蛋白，以及非結(jié)構(gòu)蛋白NS3(蛋白酶和解旋酶)和NSSB(聚合酶)。病毒的RNA依賴性RNA聚合酶(RdRp)負(fù)責(zé)產(chǎn)生中間體負(fù)鏈RNA模板和合成子代正鏈基因組RNA(Ishiietal.，Hepatology,1227(1999》。作者指出RdRp只用于RNA病毒復(fù)制并具有非常嚴(yán)格的模板特異性。因此，作者的結(jié)論為RNA依賴性RNA聚合酶，包括HCVRdRp，是抗病毒藥物的理想靶點(diǎn)。HCV為主要的人類病原體并認(rèn)為約全世界人口的3%感染了此病原體。Bressanelli等(Proc.Natl.Acad.Sci.USA,96:13034-13039(1999))認(rèn)為HCV能產(chǎn)生持續(xù)感染，該感染可引起導(dǎo)致肝硬化和肝細(xì)胞癌的慢性肝炎。HCV的現(xiàn)有療法有限，僅知少數(shù)HCVRNA依賴性RNA聚合酶抑制劑。因此，需要確定其他的HCVRdRp抑制劑，并需要確定有效HCVRdRp抑制活性所需的結(jié)構(gòu)特征。發(fā)明概述在許多實(shí)施方案中，本發(fā)明提供了取代的吡唑并[l,5-a]嘧啶化合物，制備這類化合物的方法，包含一種或多種這類化合物的藥物組合物，制備包含一種或多種這類化合物的藥物制劑的方法，以及用這類化合物或藥物組合物治療、預(yù)防、抑制或改善一種或多種與蛋白激酶相關(guān)疾病的方法。在一方面，本發(fā)明提供了結(jié)構(gòu)式(VII)所表示的化合物或式(VII)化合物的藥學(xué)上可接受的鹽、溶劑合物、酯或前藥<formula>formulaseeoriginaldocumentpage18</formula>其中W為鹵素；W為飽和或部分不飽和的雜環(huán)基團(tuán)；且W選自h、卣素、卣代烷基、烷基、烯基、炔基、芳基、芳基烷基、芳基烯基、環(huán)烷基、環(huán)烷基烷基、烯基烷基、炔基烷基、雜環(huán)基、雜環(huán)基烷基、雜芳基、雜芳基烷基、-nr8r9、-nr8cor9、<formula>formulaseeoriginaldocumentpage18</formula>其中R"的所述烷基、烯基、炔基、芳基、芳基烷基、芳基烯基、環(huán)烷基、環(huán)烷基烷基、烯基烷基、炔基烷基、雜環(huán)基、雜環(huán)基烷基、雜芳基、雜芳基烷基和正如上文所示的雜環(huán)部分各自可未取代或任選4皮一個(gè)或多個(gè)可相同或不同的部分取代，各部分獨(dú)立地選自H、卣素、烷基、三氟甲基、-OR8、-NR8R9、誦SR8、-S02R9、-CN、-S02NR8R9、國CF3和-N02;rs選自h、烷基、芳基或環(huán)烷基；W選自H、烷基、烯基、芳基、芳基烷基、芳基烯基、環(huán)烷基、雜環(huán)基、雜環(huán)基烷基、雜芳基和雜芳基烷基，其中所述烷基、烯基、芳基、芳基烷基、環(huán)烷基、雜環(huán)基、雜環(huán)基烷基、雜芳基和雜芳基烷基各自可未取代或任選被一個(gè)或多個(gè)可相同或不同的部分取代，各部分獨(dú)立地選自卣素、烷基、芳基、環(huán)烷基、雜環(huán)基烷基、-CF3、-OCF3、-CN、-OR5、-NR5R1()、-QrSrHVR9、-N(R5)Boc、-(CRSR^pOR5、-C(02)R5、-C(O)R5、-C(0)NR5R10、-S03H、-SR10、-S(02)R7、-S(02)NR5R10、-N(R5)S(02)R7、-N(R5)C(0)R7和-N(r5)C(0)NR5Ro;R選自烷基、環(huán)烷基、芳基、芳基烯基、雜芳基、芳基烷基、雜芳基烷基、雜芳基烯基和雜環(huán)基，其中所述烷基、環(huán)烷基、雜芳基烷基、芳基、芳基烯基、雜芳基、芳基烷基、雜芳基烷基、雜芳基烯基和雜環(huán)基各自可未取代或任選獨(dú)立地被一個(gè)或多個(gè)可相同或不同的部分取代，各部分獨(dú)立地選自卣素、烷基、芳基、環(huán)烷基、CF3、OCF3、CN、-OR5、-NR5R1(3、-CH2OR5、-C(02)R5、-C(0)NR5R10、-C(O)R5、-SR10、-S(02)R10、-S(02)NR5R10、-N(r5)S(o2)r10、-N(r5)C(0)r10和國N(r5)C(0)NR5r,R8選自H、-OR6、-NR5R6、-C(0)NR5R10、-S(02)NR5R10、-C(O)R7、-C(=N-CN)-NH2、-C(=NH)-NHR5、雜環(huán)基、-S(02)R7、、-0R1G、-CF3、烷基、烯基、芳基、芳基烷基、芳基烯基、環(huán)烷基、雜環(huán)基、雜環(huán)基烷基、雜芳基和雜芳基烷基，其中所述烷基、烯基、芳基、芳基烷基、環(huán)烷基、雜環(huán)基、雜環(huán)基烷基、雜芳基和雜芳基烷基各自可未取代或任選被一個(gè)或多個(gè)可相同或不同的部分取代，各部分獨(dú)立地選自卣素、烷基、芳基、環(huán)烷基、雜環(huán)基烷基、-CF3、-OCF3、-CN、-OR5、-NR5R10、畫C(R5R")p國R9、-N(R5)Boc、-(CRSR^pOR5,-C(02)R5、-C(O)R5、纖C(0)NR5R。、-S03H、-SR10、-S(02)R7、-S(O2)NR5R0、-N(R5)S(02)R7、-N(r5)C(0)R7和-N(r5)C(0)NR5r。；R9選自H、-OR6、-NR5R6、-C(0)NR5R10、-S(02)NR5R10、-C(O)R7、-C(=N-CN)-NH2、-C(-NH)-NHR5、雜環(huán)基、-S(02)R7、、-OR1Q、-CF3、烷基、烯基、芳基、芳基烷基、芳基烯基、環(huán)烷基、雜環(huán)基、雜環(huán)基烷基、雜芳基和雜芳基烷基，其中所述烷基、烯基、芳基、芳基烷基、環(huán)烷基、雜環(huán)基、雜環(huán)基烷基、雜芳基和雜芳基烷基各自可未取代或任選被一個(gè)或多個(gè)可相同或不同的部分取代，各部分獨(dú)立地選自卣素、烷基、芳基、環(huán)烷基、雜環(huán)基烷基、-CF3、-OCF3、-CN、-OR5、-NR5R10、.C(r5rU)p國R9、-N(R5)Boc、-(CRSR^pOR5、-C(02)R5、-C(O)R5、-C(0)NR5R10、-S03H、畫SR10、-S(02)R7、-S(02)NR5R10、-N(R5)S(02)R7、-N(R5)C(0)R7和扁N(r5)C(0)NR5r!。；111()選自H、烷基、烯基、芳基、芳基烷基、芳基烯基、環(huán)烷基、雜環(huán)基、雜環(huán)基烷基、雜芳基和雜芳基烷基，其中所述烷基、烯基、芳基、芳基烷基、環(huán)烷基、雜環(huán)基、雜環(huán)基烷基、雜芳基和雜芳基烷基各自可未取代或任選被一個(gè)或多個(gè)可相同或不同的部分取代，各部分獨(dú)立地選自卣素、烷基、芳基、環(huán)烷基、雜環(huán)基烷基、-CF3、-OCF3、-CN、-OR5、-NR5R11、-C^rSrHVR9、-N(R5)Boc、-(CRSR^pOR5、-C(02)R5、-C(O)R5、-C(O)NRSr11、-S03H、國SR11、國S(。2)R7、-SCC^NRSR11、-N(R5)S(02)R7、-N(R5)C(0)R7和-N(r5)C(0)NR5r11;或任選(i)在-NRSR"部分中115和R11，或(ii)在-NRSRS部分中R5和R6,可連接在一起形成環(huán)烷基或雜環(huán)基部分，所述環(huán)烷基或雜環(huán)基部分各自未取代或任選獨(dú)立地被一個(gè)或多個(gè)119基團(tuán)取代；且R"為H、卣素或烷基；m為0-4;n為1-4;和p為1-4。在另一方面，本發(fā)明提供了結(jié)構(gòu)式(viii)所表示的化合物或式(vm)化合物的藥學(xué)上可接受的鹽、溶劑合物、酯或前藥其中f為鹵素；R3為纟克基；和R"為烷基或烷氧基。式VII化合物和式VIII化合物可用作蛋白激酶抑制劑并可用于治療和預(yù)防增殖性疾病，例如癌癥、炎癥和關(guān)節(jié)炎、神經(jīng)變性性疾病(如阿爾茨海默病)、心血管疾病、病毒性疾病和真菌性疾病。本發(fā)明還提供了用于預(yù)防或治療HCV感染的化合物和方法。具體地說，本發(fā)明的實(shí)施方案提供了用于抑制HCVRNA-依賴性RNA聚合酶(RdRp)酶活性的化合物和方法。在一方面，本發(fā)明的實(shí)施例提供了作為新型HCVRdRp抑制劑的式(I)化合物或其藥學(xué)上可接受的鹽G選自-OH、氰基、誦C(0)-0H、-C(O)畫OR8、-C(0)-NR2R3、-N(R)-C(O)R8、-S(0)2NR2R3、-N(R)-S(0)2R8、雜芳基、芳基、鹵素、氨基、曱?；㈦s環(huán)基烯基(heterocyclenalkenyl)、雜環(huán)基烷基、CHCN)OH、CH(N)OR8、羥基烷基和飽和或部分不飽和的雜環(huán)基團(tuán)，其中每次出現(xiàn)時(shí)，R8獨(dú)立地選自氫、烷基、環(huán)烷基、芳基、芳烷基、雜芳基、雜芳基烷基、烷氧基羰基(carboalkoxy)烷基、烷氧基羰基(carboalkoxy)、酰氧基烷基、酰氧基烷基和飽和或部分不飽和的雜環(huán)基團(tuán)；112和113獨(dú)立地選自氫、烷基、環(huán)烷基、芳基、芳烷基、雜芳基、雜芳基烷基和飽和或部分不飽和的雜環(huán)基團(tuán)；或112和113—起形成5-或6-元雜芳環(huán)或飽和或部分不飽和的雜環(huán)；或-N1^E—起形成a-、(3-或Y-氨基酸，其中W為氫或Cl-C6烷基,W選自酰氨基烷基、二烷基氨基烷基、烷氧基烷基、羥基烷基、M、其中:芳基磺?；?、烷基磺?；?、羥基、烷氧基、-C(R6)(R6)C02H、-CH2CH2CH(R6)C02H、-CH2CH(R6)C02H、-CH(R6)C02》克基、-S02芳烷基、-S02氟烷基、-CH(R6)CONH2、-CH(R6)CH2C02H、-CH(R6)C02H、-CH(R6)CH2CH2C02H、-CH2CH(R6)CH2C02H和-CH2CH2CH(R6)C02H;其中W獨(dú)立地選自氫、烷基、環(huán)烷基、芳基、雜芳基、飽和或部分不飽和的雜環(huán)基團(tuán)、M烷基、烷硫基烷基、M甲酰基、羥基和-CH2R7,其中f選自芳基、芳烷基、環(huán)烷基、雜芳基、飽和或部分不飽和的雜環(huán)基團(tuán)、羥基、烷氧基、芳氧基、芳烷基氧基、硫基、烷石克基、芳好b基和芳烷基辟u基；G1連接在吡唑環(huán)的C3或C4位，另一位置任選被烷基、烯基、炔基、鹵素、氟烷基、羥基、烷氧基或M取代；和02獨(dú)立地選自烷基、環(huán)烷基、芳基、雜芳基、飽和或部分不飽和的雜環(huán)基團(tuán)、三氟甲基、羧基烷基氨基、烷基氨基、羧基、烯基、烷氧基烷基、雜環(huán)基烷基、環(huán)烷基烷基、芳基烷基和-W-Cy,其中W選自O(shè)、N(R)、S、C(O)、CH(R)、-O-CH(R)-、-N(R)曙CH(R)-、國S-C卿畫、-C(O)國N(R)-、國N(R)-C(O)-、鄰)2誦順、陽N(R)-S(0)2-和-N(R)-C(O)-N(R)-,其中每次出現(xiàn)時(shí)，R獨(dú)立地選自氫、烷基、環(huán)烷基、芳基、芳烷基、雜芳基、雜芳基烷基和飽和或部分不飽和的雜環(huán)基團(tuán)，Cy選自環(huán)烷基、芳基、芳烷基、雜芳基、雜芳基烷基和飽和或部分不飽和的雜環(huán)基團(tuán)；G3可不存在或獨(dú)立地選自烷基、環(huán)烷基、芳基、雜芳基、飽和或部分不飽和的雜環(huán)基團(tuán)和-W-Cy，其中W選自O(shè)、N(R)、S、C(O)、CH(R)、-O-CH(R)-、國N(R)-CH(R)-、-S-CH(R)-、-C(O)-N(R)-、-N(R)-C(O)-、鄰)2隱N(R)、-N(R)鄰)2醫(yī)和-N(R)-C(O)-N(R)-，其中每次出現(xiàn)時(shí)，R獨(dú)立地選自氫、烷基、環(huán)烷基、芳基、芳烷基、雜芳基、雜芳基烷基和飽和或部分不飽和的雜環(huán)基團(tuán)，Cy選自環(huán)烷基、芳基、芳烷基、雜芳基、雜芳基烷基和飽和或部分不飽和的雜環(huán)基團(tuán)，和。2和GS共同連接在嘧啶環(huán)的C7、C8和C9位的任何兩個(gè)位置上，剩余位置任選被烷基、烯基、炔基、卣素、氟烷基、羥基、烷氧基或氰基取代；其中在G1、G"或GS中的任何所述環(huán)烷基、芳基、芳烷基、雜芳基、雜芳基烷基或雜環(huán)基團(tuán)的環(huán)部分可任選被取代。在一方面，本發(fā)明的實(shí)施方案提供了作為新型HCVRdRp抑制劑的式(I)化合物或其藥學(xué)上可接受的鹽G!選自-OH、氰基、-C(O)國OH、-C(O)-OR、-C(0)-NR2R3、-N(R)-C(O)R、-S(0)2NR2R3、-N(R)-S(0)2R、雜芳基和飽和或部分不飽和的雜環(huán)基團(tuán)，其中每次出現(xiàn)時(shí)，R獨(dú)立地選自氫、烷基、環(huán)烷基、芳基、芳烷基、雜芳基、雜芳基烷基和飽和或部分不飽和的雜環(huán)基團(tuán)；112和113獨(dú)立地選自氫、烷基、環(huán)烷基、芳基、芳烷基、雜芳基、雜芳基烷基和飽和或部分不飽和的雜環(huán)基團(tuán)；或112和R—起形成5-或6-元雜芳環(huán)或飽和或部分不飽和的雜環(huán)；或一112113—起形成a-、P-或Y-氨基酸，其中R2為氫或Cl-C6烷基，R3選自-CH2CH(R6)C。2H、-CH(R6)CH2C02H、-CH(R6)C02H、-CH(R6)CH2CH2C02H、-CH2CH(R6)CH2C02H和-CH2CH2CH(R6)C02H;其中:其中RS選自氫、烷基、環(huán)烷基、芳基、雜芳基、飽和或部分不飽和的雜環(huán)基團(tuán)和-CH2R7，其中W選自芳基、芳烷基、環(huán)烷基、雜芳基、飽和或部分不飽和的雜環(huán)基團(tuán)、羥基、烷氧基、芳氧基、芳烷基氧基、硫基、烷硫基、芳硫基和芳烷基硫基；G1連接在吡唑環(huán)的C3位或C4位，另一位置任選被烷基、烯基、炔基、面素、氟烷基、羥基、烷氧基或氰基取代；和Ga和GS獨(dú)立地選自烷基、環(huán)烷基、芳基、雜芳基、飽和或部分不飽和的雜環(huán)基團(tuán)和-W-Cy，其中W選自O(shè)、N(R)、S、C(O)、CH(R)、畫O-CH(R)-、誦N(R)國CH(R)-、誦S-CH(R)-、-C(O)誦N(R)-、誦N(R)-C(O)-、-S(0)2-N(R)、-N(R)國S(0)2誦和-N(R)-C(O)-N(R)-，其中每次出現(xiàn)時(shí)，R獨(dú)立地選自氫、烷基、環(huán)烷基、芳基、芳烷基、雜芳基、雜芳基烷基和飽和或部分不飽和的雜環(huán)基團(tuán)，Cy選自環(huán)烷基、芳基、芳烷基、雜芳基、雜芳基烷基和飽和或部分不飽和的雜環(huán)基團(tuán)，和。2和03共同連接在嘧啶環(huán)的C7、C8和C9位的任何兩個(gè)位置上，剩余位置任選被烷基、烯基、炔基、卣素、氟烷基、羥基、烷氧基或M取代；其中在G1、GZ或GS中的任何所述環(huán)烷基、芳基、芳烷基、雜芳基、雜芳基烷基或雜環(huán)基團(tuán)的環(huán)部分可任選被取代。在一方面，本發(fā)明提供了式(V)化合物或其藥學(xué)上可接受的鹽，(V)其中W為芳基或雜芳基，所述基團(tuán)各自獨(dú)立地纟皮任選取代;R^為OH、雜芳基、NHR或NR2R3;每次出現(xiàn)時(shí)，R獨(dú)立地選自氫、烷基、環(huán)烷基、芳基、芳烷基、雜芳基、雜芳基烷基和飽和或部分不飽和的雜環(huán)基團(tuán)；和-服2113—起形成a-或(3-氨基酸，其中112為氫或C廣C6烷基，R3選自-CH2CH(R6)C02H、-CH(R6)CH2C02H和-CH(R6)C02H。在另一方面，本發(fā)明提供了式(VI)化合物或其藥學(xué)上可接受的鹽(VI)其中W為芳基或雜芳基，所述基團(tuán)各自獨(dú)立地任選被取代；R^為OH、雜芳基、NHR或NR2R3;每次出現(xiàn)時(shí)，R獨(dú)立地選自氫、烷基、環(huán)烷基、芳基、芳烷基、雜芳基、雜芳基烷基和飽和或部分不飽和的雜環(huán)基團(tuán)；和-NR2R3—起形成a-或P-氨基酸，其中R2為氬或CrC6烷基和R3選自-CH2CH(R6)C02H、-CH(R6)CH2C02H和-CH(R6)C02H。在另一方面，NR2R3—起形成a-或p-氨基酸。在另一方面，本發(fā)明的實(shí)施方案提供了包含至少一種式(I)化合物或其藥學(xué)上可接受的鹽和藥學(xué)上可接受載體、輔料或稀釋劑的藥物組合物。在再一方面，本發(fā)明的實(shí)施方案提供了一種抑制細(xì)胞中HCV復(fù)制的方法，所述方法包括用至少一種式(I)化合物或其藥學(xué)上可接受的鹽與感染HCV的細(xì)胞接觸。在再一方面，本發(fā)明的實(shí)施方案提供了至少一種式(I)化合物在制備用于預(yù)防或治療HCV感染的藥物中的用途。在再一方面，本發(fā)明的實(shí)施方案提供了一種用于預(yù)防或治療HCV感染的方法，所述方法包括給予人或動(dòng)物受試者治療有效量的至少一種式(I)化合物或其藥學(xué)上可接受的鹽。發(fā)明描述本發(fā)明提供了結(jié)構(gòu)式VII和VIII所表示的取代的吡唑并[l,5-a]嗜咬化合物，或其藥學(xué)上可接受的鹽、溶劑合物、酯或前藥，其中各部分如上定義。本發(fā)明的實(shí)施方案還提供了用于抑制HCVRNA-依賴性RNA聚合酶的酶活性的化合物和方法。本發(fā)明還提供了用于預(yù)防或治療HCV感染的組合物和方法。文中所引用的專利和科學(xué)文獻(xiàn)為本領(lǐng)域技術(shù)人員可得到的知識(shí)。文中引用的授權(quán)專利、申請(qǐng)和參考文獻(xiàn)通過引用結(jié)合在本文中，其結(jié)合程度如同待引用結(jié)合的文本其各自具體和獨(dú)立的描述。在不一致的情況中，將以本公開為主。應(yīng)當(dāng)了解的是除非另有說明，否則上文使用的下列術(shù)語在整個(gè)說明書中具有以下的含義"患者，，或"受試者"包括人和動(dòng)物。"哺乳動(dòng)物"是指人和其他哺乳動(dòng)物。術(shù)語"HCVRNA-依賴性RNA聚合酶抑制劑"、"HCVRdRp抑制劑"、"HCVRNA-依賴性RNA聚合酶的抑制劑"和"HCVRdRp的抑制劑"用于確定具有如文中定義結(jié)構(gòu)的化合物，其能與HCVRNA-依賴性RNA聚合酶相互作用并抑制其酶活性。抑制HCVRNA-依賴性RNA聚合酶的酶活性是指降低HCVRdRp將核苷酸結(jié)合進(jìn)生長的HCVRNA鏈中的能力。在一些優(yōu)選的實(shí)施方案中，這種HCVRdRp活性的降低為至少50%,更優(yōu)選至少75%和還更優(yōu)選至少90%。在其他優(yōu)選的實(shí)施方案，HCVRdRp活性降低至少95%且更優(yōu)選至少99%。優(yōu)選這種抑制為特異性的，即在低于產(chǎn)生其他無關(guān)生物學(xué)效應(yīng)所需的抑制劑濃度的濃度下，HCVRdRp抑制劑便能降低HCVRdRp將核糖核苷酸結(jié)合至生長的HCVRNA鏈的能力。優(yōu)選HCVRdRp抑制活性所需的抑制劑濃度為產(chǎn)生無關(guān)生物學(xué)效應(yīng)所需的抑制劑濃度的至多二分之一，更優(yōu)選至多五分之一，甚至更優(yōu)選至多十分之一，最優(yōu)選至多二十分之一。文中所用術(shù)語"烷基(alkyl)"、"烯基"和"炔基"是指具有1-12個(gè)、優(yōu)選1-8個(gè)碳原子、且更優(yōu)選1-6個(gè)碳原子的直鏈或支鏈脂族基團(tuán)，其可任選^皮1、2或3個(gè)取代基取代。就本發(fā)明而言，當(dāng)連4妄脂族基團(tuán)與分子剩余部分的碳原子為飽和碳原子時(shí)，則使用術(shù)語"烷基(alkyl)"。但是，在其他碳原子上烷基可包括不飽和基團(tuán)。因此，烷基包括但不限于甲基、乙基、丙基、烯丙基、炔丙基、丁基、M、己基、2-丙炔基、2-丁炔基、3-丁烯基和3-曱基-丁烯-2-基。就式VII和VIII而言，"烷基"進(jìn)一步指鏈中包含約1個(gè)至約20個(gè)碳原子的可為直鏈或支鏈的脂族烴基。優(yōu)選的烷基在鏈中含有約1個(gè)至約12個(gè)碳原子。更優(yōu)選的烷基在鏈中含有約1個(gè)至約6個(gè)碳原子。支鏈?zhǔn)侵敢粋€(gè)或多個(gè)低級(jí)烷基(例如甲基、乙基或丙基)連接于線形烷基鏈。"低級(jí)烷基"是指鏈中具有約1個(gè)至約6個(gè)碳原子的直鏈或支鏈烷基。"烷基"可以是未取代的，或者任選被一個(gè)或多個(gè)可相同或不同的取代基取代，各取代基獨(dú)立選自鹵素、烷基、芳基、環(huán)烷基、氰基、羥基、烷氧基、烷硫基、氨基、-NH(烷基)、-NH(環(huán)烷基)、-N(烷基》、羧基和-C(O)O-烷基。合適的烷基的非限制性實(shí)例包括曱基、乙基、正丙基、異丙基和叔丁基。就本發(fā)明而言，當(dāng)連接脂族基團(tuán)與分子剩余部分的碳原子形成碳-碳雙鍵的一部分時(shí)，則使用術(shù)語"烯基"。烯基包括但不限于乙烯基、l-丙烯基、l-丁烯基、1-戊烯基和l-己烯基。就本發(fā)明而言，當(dāng)連接脂族基團(tuán)與分子剩余部分的碳原子形成碳-碳三鍵的一部分時(shí)，則使用術(shù)語"炔基"。炔基包括但不限于乙炔基、l-丙炔基、1-丁炔基、1-戊炔基和l-己炔基。就式VII和VIII而言，"烯基"進(jìn)一步指含有至少一個(gè)碳-碳雙鍵并且在鏈中包含約2個(gè)至約15個(gè)碳原子的直鏈或支鏈脂族烴基。優(yōu)選的烯基在鏈中具有約2個(gè)至約12個(gè)碳原子；且更優(yōu)選在鏈中具有約2個(gè)至約6個(gè)碳原子。支鏈?zhǔn)侵敢粋€(gè)或多個(gè)低級(jí)烷基(例如曱基、乙基或丙基)連接于線形烯基鏈。"低級(jí)烯基"是指具有約2個(gè)至約6個(gè)碳原子的直鏈或支鏈烯基。"烯基"可以是未取代的，或者任選^皮一個(gè)或多個(gè)可相同或不同的取代基取代，各取代基獨(dú)立選自卣素、烷基、芳基、環(huán)烷基、氰基、烷氧基和-S(烷基)。合適的烯基的非限制性實(shí)例包括乙烯基、丙烯基、正丁烯基、3-曱基丁-2-烯基、正戊烯基、辛烯基及癸烯基。就式VII和VIII而言，"炔基，，進(jìn)一步指含有至少一個(gè)碳-碳三鍵并且在鏈中包含約2個(gè)至約15個(gè)碳原子的直鏈或支鏈脂族烴基。優(yōu)選的炔基在鏈中具有約2個(gè)至約12個(gè),友原子；且更優(yōu)選在鏈中具有約2個(gè)至約4個(gè)碳原子。支鏈?zhǔn)侵敢粋€(gè)或多個(gè)低級(jí)烷基(例如甲基、乙基或丙基)連接于線形炔基鏈。"低級(jí)炔基"是指具有約2個(gè)至約6個(gè)碳原子的直鏈或支鏈炔基。合適的炔基的非限制性實(shí)例包括乙炔基、丙炔基、2-丁炔基、3-甲基丁炔基。"炔基"可以是未取代的，或者任選被一個(gè)或多個(gè)可相同或不同的取代基取代，各取代基獨(dú)立選自烷基、芳基和環(huán)烷基。就式VII和VIII而言，"炔基烷基"意指炔基-烷基-基團(tuán)，其中所述炔基和烷基如上所述。優(yōu)選的炔基烷基包括低級(jí)炔基和低級(jí)烷基。通過烷基連接母體部分。合適的炔基烷基的非限定性實(shí)例包括炔丙基甲基。文中所用術(shù)語"環(huán)烷基(cycloakyl)"包括具有3個(gè)至約12個(gè)碳原子、優(yōu)選3個(gè)至約8個(gè)碳原子、更優(yōu)選3個(gè)至約6個(gè)碳原子的飽和和環(huán)烷基還可任選被取代。環(huán)烷基包括但不限于環(huán)丙基、環(huán)丁基、環(huán)戊基、環(huán)戊烯基、環(huán)己基、環(huán)己烯基、環(huán)庚基和環(huán)辛基。就式VII和VIII而言，"環(huán)烷基"進(jìn)一步是指包含約3個(gè)至約IO個(gè)碳原子、優(yōu)選約5個(gè)至約IO個(gè)碳原子的非芳族單環(huán)或多環(huán)系。優(yōu)選的環(huán)烷基環(huán)包括約5個(gè)至約7個(gè)環(huán)原子。環(huán)烷基可任選被一個(gè)或多個(gè)可相同或不同的如上定義的"環(huán)系取代基"取代。合適的單環(huán)環(huán)烷基的非限制性實(shí)例包括環(huán)丙基、環(huán)戊基、環(huán)己基、環(huán)庚基等。合適的多環(huán)環(huán)烷基的非限制性實(shí)例包括l-萘烷基、降水片烷基、金剛烷基等。就式VII和VIII而言，"環(huán)烷基烷基"是指通過烷基部分(定義如上)連接至母核的上述定義的環(huán)烷基部分。合適的環(huán)烷基烷基的非限制性實(shí)例包括環(huán)己基曱基、金剛烷基曱基等。就式VII和VIII而言，"環(huán)系取代基"是指與芳族或非芳族環(huán)系連接的取代基，該取代基例如置換環(huán)系上的可用氫。環(huán)系取代基可相同或不同，各自獨(dú)立地選自烷基、烯基、炔基、芳基、雜芳基、芳烷基、烷基芳基、雜芳烷基、雜芳基烯基、雜芳基炔基、烷基雜芳基、羥基、羥基烷基、烷氧基、芳氧基、芳烷基氧基、酰基、芳?；?、鹵素、硝基、氰基、羧基、烷氧基羰基、芳氧基羰基、芳烷基氧基羰基、烷基磺?；?、芳基磺?；?、雜芳基磺酰基、烷硫基、芳硫基、雜芳硫基、芳烷基硫基、雜芳烷基硫基、環(huán)烷基、雜環(huán)基、-C(=N-CN)-NH2、-C(=NH)-NH2、-C(=NH)-NH(烷基)、YJzN-、YY2N畫烷基畫、Y,Y2NC(0)-、Y^2NS02-和-S02NY!Y2，其中Y！和丫2可相同或不同并獨(dú)立地選自氬、烷基、芳基、環(huán)烷基和芳烷基。"環(huán)系取代基"也可指同時(shí)置換環(huán)系兩個(gè)相鄰碳原子上兩個(gè)可用氫(每個(gè)碳上一個(gè)H)的單一部分。該部分的實(shí)例為形成例如以下部分的亞甲二氧基、亞乙二氧基、-0(013)2-等<formula>formulaseeoriginaldocumentpage31</formula>"芳基"為包含1-3個(gè)芳環(huán)的C6-C14芳族部分，其可任選被取代。優(yōu)選所述芳基為C6-C10芳基。芳基包括但不限于苯基、萘基、蒽基和芴基。"芳烷基"或"芳基烷基"包括與烷基共價(jià)連接的芳基，其各自可獨(dú)立地被任選取代或未取代。優(yōu)選所述芳烷基為C6-C化芳基(d-C6)烷基，包括但不限于千基、苯乙基和萘基曱基。就式VII和VIII而言，"芳基"進(jìn)一步指包含約6個(gè)至約14個(gè)碳原子的芳族單環(huán)或多環(huán)系，優(yōu)選包含約6個(gè)至約10個(gè)碳原子。芳基可任選被一個(gè)或多個(gè)可相同或不同的如本文定義的"環(huán)系取代基"取代。合適的芳基的非限制性實(shí)例包括苯基和萘基。文中所用術(shù)語"雜芳基"是指這樣的基團(tuán)具有5-14個(gè)環(huán)原子、優(yōu)選5、6、9或10個(gè)環(huán)原子的；具有環(huán)陣列共享的6、10或14個(gè)p電子；且除碳原子外具有l(wèi)-4個(gè)選自N、O和S的雜原子。雜芳基包括但不限于瘞吩基、苯并瘞哈基、呋喃基、苯并呋喃基、二苯并呋喃基、吡咯基、咪唑基、吡唑基、吡啶基、吡嗪基、嘧啶基、"l咮基、喹啉基、異喹啉基、喹喔啉基、四唑基、嚼唑基、噻唑基和異嗯唑基。"雜芳烷基"或"雜芳基烷基"包括與烷基共價(jià)連接的雜芳基，其各自可獨(dú)立地被任選取代或未取代。優(yōu)選所述雜芳烷基為CVd4雜芳基(d-C6)烷基，包括但不限于吡咬基曱基、噻唑基曱基等。就式VII和VIII而言，"雜芳基"進(jìn)一步指包含約5個(gè)至約14個(gè)環(huán)原子，優(yōu)選約5個(gè)至約10個(gè)環(huán)原子的芳族單環(huán)或多環(huán)系，其中一個(gè)或多個(gè)環(huán)原子為非碳元素，例如單獨(dú)的氮、氧或硫，或其組合。優(yōu)選的雜芳基含有約5個(gè)至約6個(gè)環(huán)原子。"雜芳基"可任選被一個(gè)或多個(gè)可相同或不同的如本文定義的"環(huán)系取代基"取代。雜芳基詞根名前的前綴氮雜、氧雜或^ii雜分別是指存在至少一個(gè)氮、氧或^e危環(huán)原子。雜芳基的氮原子可任選被氧化為相應(yīng)的N-氧化物。合適的雜芳基的非限制性實(shí)例包括吡咬基、吡嗪基、呋喃基、噻吩基、嘧咬基、吡啶酮(包括N-取代的吡啶酮)、異曙唑基、異噻唑基、嚼唑基、噻唑基、p比哇基、吹咱基、p比咯基、p比唾基、三唑基、1,2,4-p塞二唑基、吡溱基、噠口秦基、喹喔啉基、酞溱基、羥吲哚基、咪唑并[l,2-a]吡啶基、咪唑并[2,l-b]噻唑基、苯并呋咱基、吲咮基、氮雜吲咮基、苯并咪哇基、苯并遂分基、喹啉基、咪唑基、謹(jǐn)>分并吡咬基、喹唑啉基、噻吩并嘧咬基、吡咯并吡咬基、咪唑并吡咬基、異喹啉基、苯并氮雜吲哚基、1,2,4-三嗪基、苯并噻唑基等。術(shù)語"雜芳基"還指部分飽和的雜芳基部分，例如四氫異喹啉基、四氫喹啉基等。就式VII和VIII而言，"雜芳基烷基"是指上述定義的雜芳基部分通過烷基部分(定義如上)連接至母核。合適的雜芳基的非限制性實(shí)例包括2-吡"^曱基、喚啉基甲基等。文中所用術(shù)語"雜環(huán)基團(tuán)"和"雜環(huán)基"是指穩(wěn)定的5-至7-元單環(huán)或7-至10-元二環(huán)的雜環(huán)部分，該部分為飽和或部分不飽和，且除碳原子外還具有1-3個(gè)選自N、O和S的雜原子(其中氮和硫雜原子可任選被氧化和氮原子可任選被季銨化)并包括任何以上定義的雜環(huán)與苯環(huán)稠合的任何二環(huán)基團(tuán)。這些雜環(huán)可在能得到穩(wěn)定結(jié)構(gòu)的雜原子或碳原子上與其側(cè)基連接。這些飽和或部分不飽和的雜環(huán)基團(tuán)的實(shí)例包括但不限于四氫呋喃基、四氫遂吩基、吡咯烷基、吡咯烷酮基、哌咬基、吡咯啉基、四氫喚啉基、四氫異喹啉基、十氫唾啉基、嗯唑烷基、哌嗪基、二氧雜環(huán)己烷基、二氧雜環(huán)戊烷基、二氮雜環(huán)庚烯基、氧雜氮雜環(huán)庚烯基、硫雜氮雜環(huán)庚烯基和嗎啉基。就式VII和VIII而言，"雜環(huán)基"進(jìn)一步指包含約3個(gè)至約10個(gè)環(huán)原子，優(yōu)選約5個(gè)至約10個(gè)環(huán)原子的非芳族的飽和單環(huán)或多環(huán)系，環(huán)系中的一個(gè)或多個(gè)原子為非碳元素，例如單獨(dú)的氮、氧、硫或其組合。該環(huán)系中不存在任何相鄰的氧原子和/或好u原子。優(yōu)選的雜環(huán)基包括約5個(gè)至約6個(gè)環(huán)原子。雜環(huán)基詞根名前的前綴氮雜、氧雜或硫雜分別是指存在至少一個(gè)氮、氧或硫的環(huán)原子。雜環(huán)基環(huán)中的任何-NH可以是被保護(hù)的，例如-N(Boc)、-N(CBz)、-N(Tos)基團(tuán)等；這類保護(hù)也被視作本發(fā)明的一部分。雜環(huán)基可任選被一個(gè)或多個(gè)可相同或不同的如本文定義的"環(huán)系取代基"取代。雜環(huán)基的氮或硫原子可任選被氧化為相應(yīng)的N-氧化物、S-氧化物或S,S-二氧化物。合適的單環(huán)雜環(huán)基環(huán)的非限制性實(shí)例包括哌啶基、吡咯烷基、哌。秦基、嗎啉基、辟L代嗎啉基、噻唑烷基、1,4-二瞎烷基、四氪呋喃基、四i/塞吩基、內(nèi)酰胺、內(nèi)酯等?，F(xiàn)就式vn和vm而言，"雜環(huán)基烷基"是指上述定義的雜環(huán)基部分通過烷基部分(定義如上)連接至母核。合適的雜環(huán)基烷基的非限制性實(shí)例包括哌啶基甲基、哌溱基甲基等。文中所用術(shù)語"部分不飽和的"是指在環(huán)原子間包括至少一個(gè)雙鍵或三鍵的環(huán)部分。術(shù)語"部分不飽和的"意在包括含多個(gè)位置不飽和的環(huán)，但不意欲包括如文中定義的芳基或雜芳基部分。術(shù)語"部分不飽和的雜環(huán)基團(tuán)"是指穩(wěn)定的5-至7-元單環(huán)或7-至10-元二環(huán)的雜環(huán)部分，其環(huán)原子間包括至少一個(gè)雙鍵。該術(shù)語意在包括含多個(gè)位置不飽和的環(huán)，但不意欲包括文中定義的芳基或雜芳基部分。除碳原子以外，所述雜環(huán)部分還具有1-3個(gè)選自N、O和S的雜原子(其中氮和硫雜原子可任選被氧化，氮原子可任選被季銨化)并包括任何以上定義的雜環(huán)與苯環(huán)稠合的任何二環(huán)。這些雜環(huán)可在任何能得到穩(wěn)定結(jié)構(gòu)的雜原子或碳原子上與其側(cè)基連接。這些部分不飽和的雜環(huán)基團(tuán)的實(shí)例包括但不限于四氫喹啉基、四氫異喹啉基、四氫苯并p塞p分、四氫吲，，朱和四氫苯并呋喃。術(shù)語"雜環(huán)基烯基(heterocyclenalkenyl)"是指其中環(huán)碳原子和環(huán)外碳原子形成碳-碳雙^t的雜環(huán)基(例如，如文中化合物列表中化合物449所例證的)，該基團(tuán)轉(zhuǎn)而與感興趣的核心骨架連4^。式-CH(N)OH和-CH(N)OR是指碳原子和氮原子通過雙鍵連接從而分別形成肟或肟烷基醚的基團(tuán)。文中所用"取代的"環(huán)烷基芳基、芳烷基、雜芳基、雜芳基烷基或雜環(huán)基為具有l(wèi)-4個(gè)、優(yōu)選l-3個(gè)、更優(yōu)選l-2個(gè)非氫取代基的基團(tuán)。合適的取代基包括但不限于卣素、羥基、氧代基、硝基、氟烷基、烷基、烯基、炔基、環(huán)烷基、(環(huán)烷基)烷基、芳基、(芳基)烷基、雜芳基、(雜芳基)烷基、(雜芳基)烷氧基、(雜芳基)烷基氨基、(雜芳基)烷硫基、雜芳氧基、雜芳基氨基、雜芳硫基、飽和或部分不飽和的雜環(huán)基團(tuán)、(雜環(huán)基)烷基、(雜環(huán)基)氧基、(雜環(huán)基)氨基、(雜環(huán)基)硫基、(雜環(huán)基)烷氧基、(雜環(huán)基)烷硫基、氟烷氧基、環(huán)烷基烷氧基、環(huán)烷氧基、烷氧基烷基、烷氧基、(芳基)烷氧基、芳氧基、氨基、酰M、氨基甲?；被榛?、羥基烷基、烷氧基羰基(carboalkoxy)、芳氧基羰基(carboaryloxy)、羧基、烷硫基、芳硫基、芳烷基硫基、烷基亞磺?；⒎蓟鶃喕酋谢?、芳烷基亞磺?；?、烷基磺?；⒎蓟酋；?、芳烷基磺?；⑼榛酋０被?、芳基磺酰氨基、芳烷基磺酰氨基、酰基、酰氧基、氰基和脲基。文中所用術(shù)語"取代(的)"是指在指定部分上的一個(gè)或多個(gè)氫被所選的指定基團(tuán)置換，前提條件是不超過現(xiàn)有情況下指定原子的正?；蟽r(jià)，并且這種取代得到穩(wěn)定的化合物。就式vn和vm而言，術(shù)語"任選取代(的)"是指用規(guī)定基團(tuán)(group)、基團(tuán)(mdical)或部分任選取代。取代基和/或變量的組合只有在這種組合得到穩(wěn)定化合物的情況下才被允許。術(shù)語"穩(wěn)定化合物"或"穩(wěn)定結(jié)構(gòu)"是指化合物足夠穩(wěn)固，能夠從反應(yīng)混合物中分離達(dá)到可實(shí)用的純凈度，并可配制為有效的治療藥物。文中所用術(shù)語"鹵素"或"鹵是指氯、溴、氟或碘。文中所用術(shù)語"?；?是指烷基羰基或芳基羰基取代基。就式VII和VIII而言，"?；?是指H-C(O)-、烷基-C(O)-或環(huán)烷基-C(O)-，其中各種基團(tuán)如前所迷。通過羰基連接至母體部分。優(yōu)選的?；ǖ图?jí)烷基。合適的?；姆窍拗菩詫?shí)例包括曱?；?、乙酰基和丙酰基。術(shù)語"酰基氨基"和"酰氨基"是指通過氮原子連接的酰氨基團(tuán)。術(shù)語"氨基曱酰基"是指通過羰基碳原子連接的酰氨基團(tuán)。?；被虬被柞；〈牡舆€可被取代。術(shù)語"磺酰氨基(sulfonamide))"是指通過硫或氮原子連接的磺酰胺取代基。除非有明確的限制，否則術(shù)語"氨基"包括N壓、烷基氨基、二烷基氨基、芳基氨基、芳烷基氨基和環(huán)狀氨基。就式VII和VIII而言，"烷氧基"是指烷基-O-，其中烷基如前所述。合適的烷氧基的非限制性實(shí)例包括甲氧基、乙氧基、正丙氧基、異丙氧基和正丁氧基。通過醚氧連接至母體部分。現(xiàn)就式VII和VIII而言，"芳酰基"是指芳基-C(O)-，其中芳基如前所述。通過羰基連接至母體部分。合適基團(tuán)的非限制性實(shí)例包括苯甲?；蚻-萘?xí)貂；?。就式VII和VIII而言，"芳氧基"是指芳基-O-，其中芳基如前所述。合適的芳氧基的非限制性實(shí)例包括苯氧基和萘氡基。通過醚氧連接至母體部分。就式VII和VIII而言，"芳烷基氧基"是指芳烷基-O-,其中芳烷基如前所述。合適的芳烷基氧基的非限制性實(shí)例包括千氧基、1-萘?xí)跹趸?-萘甲氧基。通過醚氧連接至母體部分。就式VII和VIII而言，"烷硫基"是指烷基-S-，其中烷基如前所述。合適的烷硫基的非限制性實(shí)例包括甲硫基和乙硫基。通過硫連接至母體部分。就式VII和VIII而言，"芳石克基"是指芳基-S-，其中芳基如前所述。合適的芳硫基的非限制性實(shí)例包括苯硫基和萘硫基。通過硫連接至母體部分。就式VII和VIII而言，"芳烷基硫基"是指芳烷基-S-，其中芳烷基如前所述。合適的芳烷基硫基的非限制性實(shí)例為千硫基。通過硫連^妾至母體部分。就式VII和VIII而言，"烷氧基羰基"是指烷基-O-CO-。合適的烷氧基羰基的非限制性實(shí)例包括曱氧羰基和乙氧羰基。通過羰基連接至母體部分。就式VII和VIII而言，"芳氧基羰基"是指芳基-o-c(o)-。合適的芳氧基羰基的非限制性實(shí)例包括苯氧基羰基和萘氧基羰基。通過羰基連接至母體部分。就式VII和VIII而言，"芳烷基氧基羰基"是指芳烷基-O-C(O)-。合適的芳烷基氧基羰基的非限制性實(shí)例是千氧基羰基。通過羰基連4矣至母體部分。就式VII和VIII而言，"烷基磺?；?是指烷基-S(02)-。優(yōu)選的基團(tuán)是其中烷基是低級(jí)烷基的基團(tuán)。通過磺酰基連接至母體部分。就式VII和VIII而言，"芳基磺?；?是指芳基-S(02)-。通過磺?；B接至母體部分。就式vn和vm而言，"羥基烷基"是指HO-烷基-,其中烷基如上定義。優(yōu)選的羥基烷基包括低級(jí)烷基。合適的羥基烷基的非限定性實(shí)例包括羥基甲基和2-羥基乙基。文中所用術(shù)語"脲基"是指取代或未取代的脲部分。文中所用術(shù)語"藥學(xué)上可接受的"意指與生物系統(tǒng)如細(xì)胞、細(xì)胞培養(yǎng)物、組織或器官相容的非毒性材料。有關(guān)化合物的術(shù)語"純化(的)"、"純化形式(的)"、"分離(的)"或"分離純化形式(的)"是指所述化合物從合成過程或天然來源或其組合中分離后的物理狀態(tài)。因此，有關(guān)化合物的術(shù)語"純化(的)"、"純化形式(的)"、"分離(的)"或"分離純化形式(的)"是指所述化合物在經(jīng)過本文介紹的或本領(lǐng)域技術(shù)人員熟知的純化過程后獲得的物理狀態(tài)，有足夠的純度，使得可用本文所介紹的或本領(lǐng)域技術(shù)人員熟知的標(biāo)準(zhǔn)分析技術(shù)來表征。還應(yīng)當(dāng)注意的是，在本說明書的正文、流程、實(shí)施例及表格中出現(xiàn)未滿足化合價(jià)的任何碳原子以及雜原子時(shí)，則假定有足夠數(shù)目的氫原子來滿足化合價(jià)。如果化合物中的官能團(tuán)被稱為"保護(hù)(的)"，則這是指基團(tuán)為修飾形式，以便在化合物進(jìn)行反應(yīng)時(shí)，排除被保護(hù)位置的不期望的副反應(yīng)。合適的保護(hù)基為本領(lǐng)域普通技術(shù)人員所了解，另可參考標(biāo)準(zhǔn)教科書《列^口T.W.Greene等,i^o&c"'veG^ow;worgam.cSj^Aes/s(1991),Wiley,NewYork。任何變量(例如芳基、雜環(huán)、W等)在任何組成或在式I中出現(xiàn)不止一次時(shí)，其每次出現(xiàn)時(shí)的定義都獨(dú)立于其他各次出現(xiàn)時(shí)的定義。本文使用的術(shù)語"組合物"包括含規(guī)定量的規(guī)定成分的產(chǎn)品以及直接或間接地由規(guī)定量的規(guī)定成分組合而獲得的任何產(chǎn)品。就上式VII而言，R2選自C1、Br、F和I。在一些實(shí)施方案中，W選自四氫呋喃基、四氫瘞吩基、吡咯烷基、吡咯烷酮基、哌咬基、吡咯啉基、四氫*啉基、四氫異喹啉基、十氫喹啉基、嗨唑烷基、哌口秦基、二氧雜環(huán)己烷基、二氧雜環(huán)戊烷基、二氮雜環(huán)庚烯基、氧雜氮雜環(huán)庚烯基、^琉雜氮雜環(huán)庚烯基和嗎啉基。在一些實(shí)施方案中，W為H。在其他實(shí)施方案中，114選自Cl、Br、-OH、-SH、烷基、烯基、炔基、卣代烷基和環(huán)丙基。在其他實(shí)施方案中，！^為-NH2。在其他實(shí)施方案中，W為-OH。在其他實(shí)施方案中，W為烷l基。在其他實(shí)施方案中，W為烷石克基。此外，在其他實(shí)施方案中，W為卣素。在一些實(shí)施方案中，n為1。在一些實(shí)施方案.中，p為1。式(VII)化合物的非限制性實(shí)例包括<formula>formulaseeoriginaldocumentpage37</formula>就上式VIII而言，112選自Cl、Br、F和I。在一些實(shí)施方案中，R"為曱基或乙基。在一些實(shí)施方案中，R"為乙基。在其他實(shí)施方案中，R"為烷氧式(vm)化合物的非限定性實(shí)例包括:<formula>formulaseeoriginaldocumentpage38</formula>在一方面，本發(fā)明的實(shí)施方案提供了為新型HCVRNA-依賴性RNA聚合酶抑制劑的式(I)化合物或其藥學(xué)上可接受的鹽<formula>formulaseeoriginaldocumentpage38</formula>G選自-OH、氰基、-C(O)-OH、-C(O)-OR、-C(0)-NR2R3、國N(R)-C(O)R、-S(0)2NR2R3、-N(R)-S(0)2R、雜芳基和飽和或部分不飽和的雜環(huán)基團(tuán)，其中每次出現(xiàn)時(shí)，R獨(dú)立地選自氫、烷基、環(huán)烷基、芳基、芳烷基、雜芳基、雜芳基烷基和飽和或部分不飽和的雜環(huán)基團(tuán)；112和113獨(dú)立地選自氫、烷基、環(huán)烷基、芳基、芳烷基、雜芳基、雜芳基烷基和飽和或部分不飽和的雜環(huán)基團(tuán)；或者W和113—起形成5-或6-元雜芳環(huán)或飽和或部分不飽和的雜環(huán)；或者-服2!13—起形成01-、(3-或Y-氨基酸，其中W為氫或C廣C6烷基，R3選自-CH2CH(R6)C02H、-CH(R6)CH2C02H、-CH(R6)C02H、-CH(R6)CH2CH2C02H、-CH2CH(R6)CH2C02H和-CH2CH2CH(R6)C02H;其中W選自氫、烷基、環(huán)烷基、芳基、雜芳基、飽和或部分不飽和的雜環(huán)基團(tuán)和-CH2R7,其中W選自芳基、芳烷基、環(huán)烷基、雜其中:芳基、飽和或部分不飽和的雜環(huán)基團(tuán)、羥基、烷氧基、芳氧基、芳烷基氧基、硫基、烷硫基、芳硫基和芳烷基硫基；G1與吡唑環(huán)的C3或C4位連接，另一位置任選被烷基、烯基、炔基、卣素、氟烷基、羥基、烷氧基或氰基取代；和G"和GS獨(dú)立地選自烷基、環(huán)烷基、芳基、雜芳基、飽和或部分不飽和的雜環(huán)基團(tuán)和-W-Cy，其中W選自O(shè)、N(R)、S、C(O)、CH(R)、-O-CH(R)、-N(R)-CH(R)-、畫S-C卿-、-C(O)國N(R)-、-卿-C(O)-、畫S(0)2-N(R)-、-N(R)-S(0)2-和-N(R)-C(O)-N(R)-，其中每次出現(xiàn)時(shí)，R獨(dú)立地選自氫、烷基、環(huán)烷基、芳基、芳烷基、雜芳基、雜芳基烷基和飽和或部分不飽和的雜環(huán)基團(tuán)，Cy選自環(huán)烷基、芳基、芳烷基、雜芳基、雜芳基烷基和飽和或部分不飽和的雜環(huán)基團(tuán)，和。2和03共同地與嘧啶環(huán)的C7、C8和C9中的任意兩位置連沖矣，剩余位置任選纟支烷基、烯基、炔基、囟素、氟烷基、羥基、烷氧基或M取代；其中在G1、Ga或GS中任何所述環(huán)烷基、芳基、芳烷基、雜芳基、雜芳基烷基或雜環(huán)基團(tuán)的環(huán)部分可任選^皮取代。取代的環(huán)烷基、芳基、雜芳基或雜環(huán)基團(tuán)優(yōu)選被一個(gè)或多個(gè)選自以下的取代基取代卣素，優(yōu)選C1、Br或F;羥基；硝基；氟烷基，優(yōu)選(氟),-5(C廣C6)烷基，更優(yōu)選(氟)M(C-C6)烷基，包括如CH2F、CF3、CH2CH2F和CF2CF3;烷基，優(yōu)選C廣C6烷基，更優(yōu)選C廣C4烷基；烯基，優(yōu)選C2-Cs烯基，更優(yōu)選C2-C6烯基；炔基，優(yōu)選C2-Cs炔基，更優(yōu)選C2-C6炔基；環(huán)烷基，優(yōu)選C3-Cs環(huán)烷基，更優(yōu)選C3-C6環(huán)烷基；(環(huán)烷基)烷基，優(yōu)選C3-C8環(huán)烷基(d-C6)烷基，更優(yōu)選C3-C6環(huán)烷基-031-(:6)烷基；芳基，優(yōu)選Q-d4芳基，更優(yōu)選C6-Cu)芳基，包括例如苯基和萘基；(芳基)烷基,優(yōu)選C6-do芳基(d-C6)烷基，更優(yōu)選C6-do芳基(CrGO烷基，包括例如千基和苯乙基；雜芳基；(雜芳基)烷基，優(yōu)選雜芳基(CrC6)烷基，更優(yōu)選雜芳基(d-GO烷基；(雜芳基)烷氧基，例如(呋喃基)烷氧基、(噻吩基)烷氧基、(吡啶基)烷氧基等；(雜芳基)烷基氨基，例如(呋喃基)烷基氨基、(噻吩基)烷基氨基、(吡咬基)烷基氨基等；(雜芳基)烷硫基，例如(呋喃基)烷硫基、(噻吩基)烷硫基、(吡啶基)烷硫基等；烷基氛基，例如(CrQ)烷基氨基；雜芳氧基，例如呋喃基氧基、噻吩基氧基、吡咬基氧基等；雜芳基氨基，例如呋喃基氨基、噻吩基氨基、吡咬基氨基等；雜芳硫基，例如呋喃基硫基、噻吩基硫基、吡啶基硫基等；飽和或部分不飽和的雜環(huán)基團(tuán)；(雜環(huán)基)烷基；(雜環(huán)基)氧基；(雜環(huán)基)氨基；(雜環(huán)基)硫基；(雜環(huán)基)烷氧基；(雜環(huán)基)烷硫基；烷氧基，優(yōu)選d-C6烷氧基，包括例如甲氧基和乙氧基；(芳基)烷氧基，優(yōu)選C6-do芳基(d-C6)烷氧基，更優(yōu)選C6-do芳基(CVQ)烷I^，包括例如芐氧基；芳M,優(yōu)選Q-do芳氧基，包括例如苯氧基；氨基，包括NH2;烷基M,優(yōu)選C,-C6烷基氨基，更優(yōu)選d-C4烷基氨基，包括例如甲基氨基、乙基氨基和丙基氨基；二烷基氨基，優(yōu)選二(CrC6)烷基氨基，更優(yōu)選二(Q-C4)烷基氨基，包括例如二甲基M和二乙基氨基；芳基氨基，優(yōu)選C6-d4芳基M,更優(yōu)選C6-C1Q芳基氛基，包括例如苯基氨基；二芳基氨基，優(yōu)選二(C6-d4)芳基氨基，更優(yōu)選二(Q-C!o)芳基氨基，包括例如二苯基氨基；(芳基)烷基M,優(yōu)選CVdQ芳基(d-C6)烷基氨基，更優(yōu)選C6-do芳基(d-C4)烷基氨基，包括例如千基氨基；和二(芳基)烷基氨基，優(yōu)選二(C6-do)芳基(C廣C6)烷基氨基，更優(yōu)選二(C6-do)芳基(d-C4)烷基氨基，包括例如二千基氨基；酰氨基包括烷酰氨基，優(yōu)選d-C6烷酰氨基，更優(yōu)選d-C4烷酰氨基，包括例如乙酰氨基和丙酰氨基；芳酰氨基(areneacylamino)，優(yōu)選C6-C14芳酰氨基，更優(yōu)選C6-Ci0芳酰^J^，包括例如苯曱酰氨基；和芳基烷?；被?，優(yōu)選C6-C10芳基(C廣C6)烷?；被鼉?yōu)選C6-C化芳基(d-C4)烷?；被ɡ绫交阴t;氨基曱?；?，包括-C(0)NH2;烷基M甲?；瑑?yōu)選C-C6烷基M甲?；蚨?C廣C6)烷基氨基甲酰基，包括例如曱基氨基曱?；投趸被柞；?；芳基氨基甲?；瑑?yōu)選(C6-do)芳基氨基曱?；蚨?C6-C一芳基氨基曱酰基，包括例如苯基氨基甲?；投交被柞；缓头蓟榛被柞；?，優(yōu)選C6-do芳基(d-C6)烷基氨基甲?；蚨?C6-do)芳基(Q-Q)烷基氨基曱酰基，包括例如千基氨基曱?；投Щ被柞；籑烷基，優(yōu)選氨基(Q-C6)烷基；羥基烷基，優(yōu)選羥基(Q-C6)烷基；烷氧基羰基(carboalkoxy),優(yōu)選(C廣C6)烷氧基羰基(carbo(d-C6)alkoxy)，包括例如甲氧基羰基(carbo(C廣C6)methoxy)和乙氧基羰基(carbo(d國Q)ethoxy);芳氧基羰基(carboaryloxy),優(yōu)選(C6-Cw)芳氧基羰基(carbo(C6-Co)aryloxy),包括例如苯氧基羰基(carbo(C6-C1())phenoxy);芳烷氧基羰基(carboaralkoxy),優(yōu)選(C6-C1D)芳(C廣C6)烷氧基羰基(carbo(C6-Co)ar(C國C6)alkoxy)，包括例如芐氧基羰基(carbobenzyloxy);羧基；烷硫基，優(yōu)選d-Q烷硫基，更優(yōu)選d-C4烷硫基，包括例如曱硫基；芳硫基，優(yōu)選Q-do芳硫基，包括例如苯基硫基和甲苯基硫基；芳烷基硫基，優(yōu)選C6-CK)芳(d-Q)烷硫基，包括例如芐基硫基；烷基亞磺?；?，優(yōu)選CrQ烷基亞磺?；?，更優(yōu)選C!-C4烷基亞磺?；ɡ缂谆鶃喕酋；环蓟鶃喕酋；瑑?yōu)選C6-do芳基亞磺?；ɡ绫交鶃喕酋；蜁醣交鶃喕酋；环纪榛鶃喕酋；瑑?yōu)選C6-d。芳(CrQ)烷基亞磺?；ɡ缜Щ鶃喕酋；?；烷基磺?；?，優(yōu)選d-C6烷基磺?；?，更優(yōu)選d-C4烷基磺酰基，包括例如甲基磺酰基；芳基磺酰基，優(yōu)選C6-C^芳基磺?；?，包括例如苯基磺?；图妆交酋；?；芳烷基磺?；瑑?yōu)選C6-do芳(C!-C6)烷基磺?；?，包括例如千基磺?；?；烷基磺酰氨基，優(yōu)選Q-C6烷基磺酰氨基，更優(yōu)選d-C4烷基磺酰氨基，包括例如甲基磺酰氨基；芳基磺酰氨基，優(yōu)選C6-C1()芳基磺酰氨基，包括例如苯基磺酰氨基和甲苯基磺酰氨基；芳烷基磺酰氨基，優(yōu)選Q-dQ芳(d-C6)烷基磺酰氨基，包括例如千基磺酰氨基；?；?，包括烷?；?，優(yōu)選d-C6烷?；?，包括例如乙?；环减；?，優(yōu)選C6-do芳?；ɡ绫綍貂；缓头纪轷；瑑?yōu)選C6-C!o芳(Ci-Q)烷?；ɡ绫交阴；货Ｑ趸?，包括例如乙酰氧基；氰基；和脲基。環(huán)烷基的一個(gè)或多個(gè)碳原子或雜環(huán)基團(tuán)的一個(gè)或多個(gè)碳原子或雜原子還可任選被氧代基取代。前綴或后綴"芳"是指芳基。在一些實(shí)施方案中，G"和G"中至少一個(gè)為芳基或雜芳基，其如上所述任選^皮取代。在一些實(shí)施方案中，GZ和03中至少一個(gè)為取代的苯基。在一些實(shí)施方案中，。2和GS中至少一個(gè)為^L一個(gè)或兩個(gè)選自以下的取代基取代的苯基d-C6烷基、C6-do芳基、C6-C!o芳(d-C6)烷基、雜環(huán)基團(tuán)、鹵素、(氟)L5(Q-C6)烷基、C廣Q烷氧基、C6-d。芳氧基和C6-do芳(d-Q)烷氧基。在某些優(yōu)選實(shí)施方案中，G"和GS各自為芳基或雜芳基，其如上所述被任選取代。在一些實(shí)施方案中，當(dāng)GS和GS在C7和C9位時(shí)，優(yōu)選GS和GS均不為未取代的苯基。在其他實(shí)施方案中，當(dāng)GZ和GS在C7和C9位時(shí)，02或03中一個(gè)為取代的苯基。在其他實(shí)施方案中，當(dāng)GZ和GS在C7和C9位時(shí)，GS和G3均獨(dú)立地為取代的苯基。在一些實(shí)施方案中，G"和G3中至少一個(gè)為-W-Cy,其中Cy選自環(huán)烷基、芳基、芳烷基、雜芳基、雜芳基烷基和飽和或部分不飽和的雜環(huán)基團(tuán)，任一以上基團(tuán)可如上所述被任選取代。在某些實(shí)施方案中，Cy為芳基，優(yōu)選C6-do芳基，其可未取代或任選被取代。在一些優(yōu)選實(shí)施方案中，Cy為未取代苯基或^皮一個(gè)或兩個(gè)選自以下取代基取代的苯基C畫C6烷基、CVdo芳基、C6-Co芳(d-C6)烷基、雜環(huán)基團(tuán)、鹵素、(氟V5(C廣Q)烷基、d-Q烷氧基、C6-C!o芳氧基和Q-do芳(d-C6)烷氧基。在某些其他實(shí)施方案中，Cy為環(huán)烷基，優(yōu)選Cs-C6環(huán)烷基，其中所述環(huán)烷基可未取代或任選^皮取代。在一些優(yōu)選實(shí)施方案中，Cy為未取代的C5-C6環(huán)烷基或?yàn)楸灰粋€(gè)或兩個(gè)選自以下取代基取代的CrC6環(huán)烷基:C廣C6烷基、C6-Co芳基、C6-Co芳(C廣C6)烷基、雜環(huán)基團(tuán)、鹵素、(氟)w(d-Q)烷基、d-Q烷氧基、C6-C10芳氧基和C6-C10芳(C廣Q)烷氧基。在一些實(shí)施方案中，G1中的雜環(huán)基如上所述被任選取代。在一些實(shí)施方案中，GS或GS中的雜環(huán)基如上所述被任選取代。在另一實(shí)施方案中，Cy為芳烷基，優(yōu)選C6-Qo芳(d-C6)烷基，其中芳烷基的芳基部分可如上所述被任選取代。在一些優(yōu)選實(shí)施方案中，Cy為芐基或苯乙基，或取代的芐基或苯乙基，其中苯基環(huán)被一個(gè)或兩個(gè)選自以下取代基取代C廣C6烷基、C6-C!o芳基、CVdo芳(d畫C6)烷基、雜環(huán)基團(tuán)、鹵素、(氟)W(C廣C6)烷基、C廣C6烷氧基、C6-C10芳氧基和C6-Qo芳(d-C6)烷lL^。在上述對(duì)于Cy的各實(shí)施方案中，W選自O(shè)、N(R)、S、C(O)、CH(R)、-O國CH(R)國、陽N(R)-CH(R)隱、-S-CH(R)-、-C(O)-N(R)-、-N(R)-C(O)-、-S(0)2-N(R)-、-:^(11)-3(0)2-和->1(11)-(^(0)->^(11)-，其中每次出現(xiàn)時(shí)，R獨(dú)立地選自氫、烷基、環(huán)烷基、芳基、芳烷基、雜芳基、雜芳基烷基和飽和或部分不飽和的雜環(huán)基團(tuán)。在一些優(yōu)選實(shí)施方案中，W為N(R),其中R為氫或C廣C6-烷基。在一些優(yōu)選實(shí)施方案中，W為NH或NCH3。在一些實(shí)施方案中，。1選自O(shè)H、-C(O)OH和雜芳基。所述雜芳基優(yōu)選為酸性的雜芳基，包括例如四唑基。在一些其他實(shí)施方案中，G1為-C(0)NR2113，其中-NT^RS—起形成a-、P-或？氨基酸。在這些實(shí)施方案中，R"為氫或CVC6烷基，R3選自-CH2CH(R6)C02H、-CH(R6)CH2C02H、-CH(R6)C02H、-CH(R6)CH2CH2C02H、-CH2CH(R6)CH2C02H和-CH2CH2CH(R6)C02H，其中116選自氫、烷基、環(huán)烷基、芳基、雜芳基、飽和或部分不飽和的雜環(huán)基團(tuán)和-CH2R7，W選自芳基、芳烷基、環(huán)烷基、雜芳基、飽和或部分不飽和的雜環(huán)基團(tuán)、羥基、烷氧基、芳氧基、芳烷基氧基、硫基、烷硫基、芳硫基和芳烷基硫基。取代基RS可為(R)或(S)構(gòu)型。在一些實(shí)施方案中，-服2113—起形成天然存在的氨基酸。在一些其他實(shí)施方案中，-服2113—起形成非天然存在的氨基酸。應(yīng)理解的是，在與環(huán)氮原子相鄰位帶有羥基取代基的雜芳環(huán)可以羥基或酮互變異構(gòu)體形式存在，或可以兩者的混合物的形式存在。例如，在C3具有羥基取代基的式(I)化合物可以羥基互變異構(gòu)體(1)或酮互變異構(gòu)體(2)存在<formula>formulaseeoriginaldocumentpage44</formula>1<formula>formulaseeoriginaldocumentpage44</formula>2類似地，在C7上具有羥基取代基的式(I)化合物可以羥基互變異構(gòu)體(3)或酮互變異構(gòu)體(4)存在<formula>formulaseeoriginaldocumentpage44</formula>3<formula>formulaseeoriginaldocumentpage44</formula>4應(yīng)理解的是，式(I)化合物的所有互變異構(gòu)體，以及以任何比例存在的所有可能的其混合物都包括在本發(fā)明范圍內(nèi)，這點(diǎn)將在下文中描述。此外，應(yīng)理解的是本發(fā)明還包括式(I)化合物的所有水合形式、脫水形式、溶劑化形式。在一些實(shí)施方案中，^連接在C3上，且。2和GS分別連4矣在C9和C7上。因此，這些實(shí)施方案化合物具有式(II):其中G1、02和03如上所述，114和115獨(dú)立地選自氫、烷基、面素、氟烷基、羥基、烷氧基和氰基。在一些優(yōu)選實(shí)施方案中，R"和W均為氫。在另一些其他實(shí)施方案中，^連接在C3上，Ga和GS分別連接在C8和C7上。因此，這些實(shí)施方案的式(HI)化合物具有下式其中G1、GS和GS如上所述，114和115獨(dú)立地選自氫、烷基、鹵素、氟烷基、羥基、烷氧基和氰基。在一些優(yōu)選實(shí)施方案中，R"和R5均為氫。在又一些實(shí)施方案中，^連接在C4上，GZ和GS分別連接在C9和C8上。因此，這些實(shí)施方案的化合物具有式(IV):其中G1、GS和GS如上所述，114和115獨(dú)立地選自氫、烷基、鹵素、氟烷基、羥基、烷氧基和氰基。在一些優(yōu)選實(shí)施方案中，R"和W均為氫。式(n)-(i)闡述了某些優(yōu)選的實(shí)施方案。但是，其他區(qū)域異構(gòu)體也是可能的并包括在本發(fā)明范圍內(nèi)。術(shù)語"任選取代(的)"是指用規(guī)定基團(tuán)、基團(tuán)或部分任選取代。本文使用的術(shù)語"組合物"包括含規(guī)定量的規(guī)定成分的產(chǎn)品，以及直接或間接地由規(guī)定量的規(guī)定成分組合而獲得的任何產(chǎn)品。本發(fā)明還包括本發(fā)明化合物的前藥及溶劑合物。文中所用術(shù)語"前藥"是指為藥物前體的化合物，該化合物在給予受試者后通過代謝或化學(xué)過程進(jìn)行化學(xué)轉(zhuǎn)化得到式(I)化合物或其鹽和/或溶劑合物。有關(guān)前藥的論述參見T.Higuchi和V.Stella,/Vo-drwgsas7V0ve/De/z'vewSy^ews(作為新型遞藥體系的前藥)(1987),A.C.S.專題論文系歹寸第14巻；和B/oreveraA/eCan7'eMz力Z>wgDew'g(藥物i殳計(jì)中的可生物轉(zhuǎn)化的載體)，(1987)EdwardB.Roche編輯，AmericanPharmaceuticalAssociationandPergamonPress,兩者均通過引用結(jié)合至本文中。"溶劑合物"是指本發(fā)明化合物與一種或多種溶劑分子的物理締合。這種物理締合包括不同程度的離子鍵結(jié)合和共價(jià)鍵結(jié)合(包括氫鍵結(jié)合)。在某些情況下，例如當(dāng)一個(gè)或多個(gè)溶劑分子摻到結(jié)晶固體的晶格中時(shí)，能夠分離出溶劑合物。"溶劑合物"既包括溶液相又包括可分離的溶劑合物。合適的溶劑合物的非限制性實(shí)例包括乙醇化物、曱醇化物等。"水合物"是指其中溶子是水的溶劑合物。式I-VIII化合物可以非溶劑化形式以及與藥學(xué)上可接受的溶劑如水、乙醇等形成的溶劑化形式存在，并且本發(fā)明同時(shí)包括溶劑化和非溶劑化形式。本發(fā)明的一種或多種化合物可以溶劑合物存在，或任選轉(zhuǎn)化為溶劑合物。溶劑合物的制備方法廣為人知。因此，例如M.Caira等，乂尸/w雇cewto/93(3),601-611(2004)描述了抗真菌藥氟康唑的乙酸乙酯溶劑合物以及氟康唑水合物的制備。溶劑合物、半溶劑合物、水合物等的類似制備法可參見E.C.vanTonder等，A4尸S尸/wm&,rec/2.,5(1),第12篇論文(2004)和A.L.Bingham等，C7zem.Comm朋.，603-604(2001)。一個(gè)典型的非限制性方法包括在高于環(huán)境溫度的溫度下，將本發(fā)明的化合物溶于所需量的所需溶劑(有機(jī)溶劑或水或其混合物)中，用足以形成晶體的速度使溶液冷卻，然后用標(biāo)準(zhǔn)方法分離出晶體。分析技術(shù)(例如紅外光譜法)顯示，作為溶劑合物(或水合物)的晶體中存在溶劑(或水)。"有效量(的)"或"治療有效量(的)"是指本發(fā)明的化合物或組合物有效地抑制上述疾病，從而產(chǎn)生所需的治療、改善、抑制或預(yù)防效果的量。式i-vm化合物形成的鹽(例如藥學(xué)上可接受的鹽)也包括在本發(fā)明范圍內(nèi)。就文中式i-vm化合物而言，應(yīng)理解的是除非另有說明，否則其包括其鹽。本文使用的術(shù)語"鹽"是指與無機(jī)酸和/或有機(jī)酸形成的酸加成鹽以及與無機(jī)堿和/或有機(jī)堿形成的堿加成鹽。此外，部分(例如但不限于羧酸)時(shí)，則可以形成兩性離子("內(nèi)鹽")，這些鹽也包括在本文使用的術(shù)語"鹽"中。盡管其他的鹽也是有用的，但是優(yōu)選藥學(xué)上可接受的(即無毒的生理上可接受的)鹽。例如，式i-vm化合物的鹽可以如下形成使式i-vm化合物與一定量(例如i當(dāng)量)的酸或堿在介質(zhì)(例如鹽在其中析出的介質(zhì))中反應(yīng)，或者在水性介質(zhì)中反應(yīng)后冷凍干燥。酸加成鹽的實(shí)例包括乙酸鹽、己二酸鹽、海藻酸鹽、抗壞血酸鹽、天冬氨酸鹽、苯甲酸鹽、苯磺酸鹽、硫酸氫鹽、硼酸鹽、丁酸鹽、檸檬酸鹽、樟腦酸鹽、樟腦石黃酸鹽、環(huán)戊烷丙酸鹽、digluconates、十二烷基硫酸鹽、乙磺酸鹽、延胡索酸鹽、葡庚糖酸鹽(glucoheptanoates)、甘油磷酸鹽、半硫酸鹽、庚酸鹽、己酸鹽、鹽酸鹽、氫溴酸鹽、氫碘酸鹽、2-羥基乙磺酸鹽、乳酸鹽、馬來酸鹽、甲磺酸鹽、2-萘磺酸鹽、煙酸鹽、硝酸鹽、草酸鹽、樸酸鹽(即1,l-亞甲基-雙-(2-羥基-3-萘甲酸鹽》、果膠酸鹽(pectinate)、過硫酸鹽、3-苯基丙酸鹽、磷酸鹽、苦味酸鹽、新戊酸鹽、丙酸鹽、水楊酸鹽、琥珀酸鹽、硫酸鹽、磺酸鹽(如文中所述的那些磺酸鹽)、酒石酸鹽、硫氰酸鹽、甲苯磺酸鹽(還稱為甲苯磺酸鹽)、十一烷酸鹽等。此外，多個(gè)文獻(xiàn)中論述了通常認(rèn)為適于與堿性藥物化合物形成藥學(xué)上可用鹽的酸，例如S.Berge等，/ownia/o/尸/wr謹(jǐn)cew"ca/Sc/ewces(1977)66(1)1-19;P.Gould,/w&r"(^/o"a/丄o/T^arwacewf/cs(1986)33201-217;Anderson爭,772e尸rac"ce。/她血/"cf/C7柳旨y(1996),AcademicPress,NewYork;77e(9raf"geSoo/:(Food&DrugAdministration,Washington,D.C的網(wǎng)頁)禾口ie/m'"gto":77eS"'ewce/V"c"ceo/尸/2"n2"c;/,第20片反，A.Gennaro編輯，LippincottWilliams&Wilkins,2000。這些文獻(xiàn)的內(nèi)容都通過引用結(jié)合到本文中。堿加成鹽的實(shí)例包括銨鹽、堿金屬鹽(如鈉、鋰或鉀鹽)、堿土金屬鹽(如鈣鹽和鎂鹽)、與有機(jī)堿(例如有機(jī)胺)如芐星(benzathines)、二環(huán)己基胺、海巴明(用N，N-二(脫氫樅酸基)乙二胺形成)、N-曱基-D-葡萄糖胺、N-曱基-D-葡萄糖胺(glucamide)、叔丁基胺形成的鹽和與氨基酸(如精氨酸、賴氨酸等)形成的鹽。堿性含氮基團(tuán)可用試劑如低級(jí)烷基卣化物(例如甲基、乙基、丙基和丁基的氯化物、溴化物和碘化物)、硫酸二烷基酯(例如硫酸二甲酯、硫酸二乙酯、硫酸二丁酯和硫酸二戊酯)、長鏈卣化物(例如癸基、月桂基、肉豆蔻基和硬脂基的氯化物、溴化物和碘化物)、芳烷基鹵化物(例如芐基和苯乙基的溴化物)和其他進(jìn)行季銨化。所有這些酸加成鹽及堿加成鹽都是本發(fā)明范圍內(nèi)的藥學(xué)上可接受的鹽，對(duì)于本發(fā)明而言，所有的酸式鹽及堿式鹽均被視為等同于相應(yīng)化合物的游離形式。本發(fā)明化合物的藥學(xué)上可接受的酯包括以下類型(1)由羥基酯化所獲得的羧酸酯，其中酯基團(tuán)羧酸部分的非羰基部分選自直鏈或支鏈烷基(例如乙酰基、正丙基、叔丁基或正丁基)、烷氧基烷基(例如甲氧基曱基)、芳烷基(例如芐基)、芳氧基烷基(例如苯氧基甲基)、芳基(例如任選被例如卣素、CM烷基或Cw烷氧基或氨基取代的苯基)；(2)磺酸酯，例如烷基磺酰酯或芳烷基磺酰酯(例如甲磺酸酯)；(3)氨基酸西旨(例如L-纈氨?；騆-異亮氨酰)；(4)膦酸酯和(5)單磷酸酯、二磷酸酯或三璘酸酯。磷酸酯可進(jìn)一步用例如Cwo醇或其反應(yīng)衍生物或者用2，3-二(C6,24)?；视王セ?。式i-vin化合物及其鹽、溶劑合物和前藥可以其互變異構(gòu)形式(例如為酰胺或亞氨基醚)存在。所有這些互變異構(gòu)體都包括在本文中作為本發(fā)明的部分。同樣，本發(fā)明還包括例如化合物的所有酮-烯醇形式和亞胺-烯胺形式。本發(fā)明的范圍包括本發(fā)明化合物(包括化合物的鹽、溶劑合物和前藥以及前藥的鹽和溶劑合物)所有的立體異構(gòu)體(例如幾何異構(gòu)體、旋光異構(gòu)體等)，例如由各種取代基上的不對(duì)稱碳所致而存在的立體異構(gòu)體，包括對(duì)映異構(gòu)體(甚至在沒有不對(duì)稱碳的情況下也可能存在)、旋轉(zhuǎn)異構(gòu)體、阻轉(zhuǎn)異構(gòu)體和非對(duì)映異構(gòu)體。例如，本發(fā)明化合物的各個(gè)立體異構(gòu)體可以基本上不含其他異構(gòu)體，或者可以是混合物，例如為外消旋物、與所有其他立體異構(gòu)體的混合物或與所選的其他立體異構(gòu)體的混合物。本發(fā)明的手性中心可具有IUPAC1974Recommendations定義的S構(gòu)型或R構(gòu)型。所使用的"鹽"、"溶劑合物"、"酯"、"前藥"等術(shù)語同樣適用于本發(fā)明化合物的對(duì)映異構(gòu)體、立體異構(gòu)體、旋轉(zhuǎn)異構(gòu)體、互變異構(gòu)體、外消旋物或前藥的鹽、溶劑合物和前藥。本發(fā)明還包括本發(fā)明化合物的前藥及溶劑合物。有關(guān)前藥的論述參見T.Higuchi和V.Stella,/Vo-^n^sosiVove/Z)e/z've^y5y^ews(1987),A.C.S.專題論文系列第14巻；AmericanPharmaceuticalAssociationandPergamonPress,EdwardB.Roche編豐尋的5Zorevera/We0mem力Dn/gZ)M,g2(1987)。術(shù)語"前藥"是指例如為藥物前體的化合物，它在體內(nèi)轉(zhuǎn)化為式(I)化合物或該化合物的藥學(xué)上可接受的鹽、水合物或溶劑合物?？赏ㄟ^不同的機(jī)制(例如代謝過程或化學(xué)過程)產(chǎn)生這種轉(zhuǎn)化，例如通過血液中的水解。前藥用途的論述參見T.Higuchi禾口'W.Stella6勺_Pro-<in/g^<^A^ove/De"ve/^SyWems(1987)，A.C.S.專題論文系歹1第14巻；AmericanPharmaceuticalAssociationandPergamonPress,EdwardB.Roche編輯的腸revera力/eQm'eraz'"Drwg腸.gw,1987。例如，如果式i-vin化合物或該化合物的藥學(xué)上可接受的鹽、水合物或溶劑合物含有羧酸官能團(tuán)，則前藥可包含該&緣團(tuán)的氫原子被例如以下基團(tuán)置換所形成的酯(C廣Cs)烷基、(C2-Cu)烷酰氧基曱基、具有4-9個(gè)碳原子的l-(烷酰氧基)乙基、具有5-10個(gè)碳原子的1-甲基-l-(烷跣氧基)-乙基、具有3-6個(gè)碳原子的烷氧基羰基氧基曱基、具有4-7個(gè)碳原子的l-(烷氧基羰基氧基)乙基、具有5-8個(gè)碳原子的1-曱基-l-(烷氧基羰基氧基)乙基、具有3-9個(gè)碳原子的N-(烷氧基羰基)氨基曱基、具有4-10個(gè)碳原子的l-(N-(烷氧基羰基)氨基)乙基、3-酞基、4-巴豆酸內(nèi)酯基、，丁內(nèi)酯-4-基、二-N,N-(C廣C2)烷基氨基(C2-C3)烷基(例如P-二甲M乙基)、氨基曱?；?(C廣C2)烷基、N,N-二(C廣C2)烷基氨基甲?；?(C!-C2)烷基和哌啶子基-、吡咯烷子基-或嗎啉代((32-。3)烷基等。同樣地，如果式I-VIII化合物含有醇官能團(tuán)，則可通過用例如以下的基團(tuán)置換醇基的氫原子來形成前藥(C廣C6)烷酰氧基甲基、l-((d-C6)烷酰氧基)乙基、l-曱基-l-((Q-C6)烷酰氧基)乙基、(C廣C6)烷氧基羰基氧基曱基、N-(d-C6)烷氧基羰基氨基甲基、琥珀酰基、(C,-C6)烷酰基、a-氨基(d-C4)烷基、芳基?；蚢-氨?；騩t-氨?；?a-氨酰基，其中各ot-氨?；?dú)立選自天然存在的L-氨基酸、p(o)(OH)2、^(0)(0(<:1-(:6)烷基)2或糖基(由半縮醛形式的糖去掉一個(gè)羥基產(chǎn)生的基團(tuán))等。如果式i-vin化合物含有胺基官能團(tuán)，則可通過用例如以下基團(tuán)置換胺基的氫原子來形成前藥R-羰基、RO-羰基、NRR'-羰基(其中R和R，各自獨(dú)立地為(d-CK))烷基、(CVC7)環(huán)烷基、千基，或者R-羰基為天然的ot-氨?；蛱烊坏膐t-氨酰基)、-0:(011)0:0)0丫1(其中Y為H、(C廣C6)烷基或芐基)、-C(OY2)Y3(^中Y2為(C!-C4)烷基，Y3為(d國C6)烷基、羧基(C廠C6)烷基、氨基(C廣C4)烷基、單-N-(C廣C6)烷基氨基烷基或二-N,N-(Q-C6)烷基氨基烷基)、-0^4)丫5(其中Y4為H或甲基，Y5為單-N-(d-C6)烷基氨基嗎啉代、二-N,N-(C-C6)烷基氨基嗎啉代、哌啶-1-基或吡咯烷-l-基)等。式I-VIII化合物可含有不對(duì)稱中心或手性中心，因此存在不同的立體異構(gòu)型。式I-VIII化合物的所有立體異構(gòu)型及其混合物，包括外消旋混合物組成本發(fā)明的一部分。另外，本發(fā)明包括所有的幾何異構(gòu)體和位置異構(gòu)體。例如，如果式i-vm化合物含有雙鍵或稠環(huán)，則順式和反式以及混合物都包括在本發(fā)明范圍內(nèi)?？梢酝ㄟ^本領(lǐng)域技術(shù)人員熟知的方法(例如色譜法和/或分級(jí)結(jié)晶法)，根據(jù)非對(duì)映體的理化差異，將非對(duì)映體混合物分離成各個(gè)非對(duì)映體?？砂匆韵路椒ǚ蛛x對(duì)映體使對(duì)映體混合物與合適的旋光化合物(例如手性醇或Mosher酰氯等手性助劑)反應(yīng)，將對(duì)映體混合物轉(zhuǎn)化成非對(duì)映體混合物后，分離非對(duì)映體，并將各個(gè)非對(duì)映體轉(zhuǎn)化(例如水解)成相應(yīng)的純對(duì)映體。同樣，一些式I-VIII化合物可以是阻轉(zhuǎn)異構(gòu)體(例如取代二芳基)，被視為本發(fā)明的部分。還可使用手性HPLC柱分離對(duì)映體。本發(fā)明還包括同位素標(biāo)記的本發(fā)明化合物，該化合物與本文所述化合物相同，只是一個(gè)或多個(gè)原子^f皮原子質(zhì)量或質(zhì)量數(shù)不同于天然存在的原子質(zhì)量或質(zhì)量數(shù)的原子置換。可摻入到本發(fā)明化合物的同位素的實(shí)例包括氫、碳、氮、氧、磷、氟和氯的同位素，例如分別為2H、3H、13C、14C、15N、180、170、31P、32P、35S、"F和36C1。某些同位素標(biāo)記的式i-vm化合物(例如用^和"c標(biāo)記的化合物)用于化合物和/或底物組織分布測定。氚化(即3印和碳-14(即"C)同位素因其易于制備并具有可檢測性，故是特別優(yōu)選的。此外，用較重同位素例如氘(即2印取代，由于更高的代謝穩(wěn)定性(例如體內(nèi)半衰期延長或劑量需求減少)，從而可提供某些治療優(yōu)勢(shì)，因此在某些情況下可能是優(yōu)選的。通?？筛鶕?jù)類似于本文以下流程和/或?qū)嵤├兴_的方法，用合適的同位素標(biāo)記的試劑置換非同位素標(biāo)記的試劑，來制備同位素標(biāo)記的式i-vni化合物。式i-vni化合物的多晶型物以及式i-vm化合物的鹽、溶劑合物、酯和前藥的多晶型物也包括在本發(fā)明范圍內(nèi)。在其他實(shí)施方案中，化合物(包括其鹽、前藥、組合物和方法)為下式化合物，其中變量如文中定義<formula>formulaseeoriginaldocumentpage52</formula>在另一方面，本發(fā)明的實(shí)施方案提供了藥物組合物，所述藥物組合物包含式(I)-(IV)中任一個(gè)的HCVRNA-依賴性RNA聚合酶抑制劑和藥學(xué)上可接受的載體、賦形劑或稀釋劑。G1、G2、G3、W、Cy、R、R2、R3、R4和R5的優(yōu)選值如本發(fā)明第一方面所述?？赏ㄟ^本領(lǐng)域熟知的方法將本發(fā)明化合物制成制劑并可制備成適合于任何途徑給予，包括但不限于胃腸外、口服、舌下、經(jīng)皮、局部或直腸內(nèi)給予。在一些實(shí)施方案中，優(yōu)選口月良給予。載體的特征將取決于給予的途徑。除HCVRdRp抑制劑以外，本發(fā)明的組合物還可包括稀釋劑、填充劑、緩沖鹽、穩(wěn)定劑、助溶劑和本領(lǐng)域熟知的其他材料，前提條件是這些材料不影響活性成分的生物活性。該組合物可為任何合適的形式，這取決于預(yù)期給藥的途徑，包括例如用于口服給予的片劑、膠嚢或液體形式，或用于胃腸道外給予的溶液或混懸劑。藥學(xué)上可接受的制劑的制備如Remington:TheScienceandPracticeofPharmacy，第20版,A.Ge皿aro編輯，LippincottWilliams&Wilkins,2000所述。在一些實(shí)施方案中，本發(fā)明的藥物組合物還包括一種或多種用于治療病毒性感染的其他藥物，包括例如抗病毒藥或免疫調(diào)節(jié)劑。在某些實(shí)施方案中，其他的藥物為HCVRdRp、HCV解旋酶、HCV蛋白酶或其他HCV靶蛋白的抑制劑。在某些其他實(shí)施方案中，所述其他藥物為廣譜抗病毒藥或免疫調(diào)節(jié)劑，例如利巴韋林、干擾素或其衍生物。在又一方面，本發(fā)明的實(shí)施方案提供了抑制細(xì)胞中HCV復(fù)制的方法。所述方法包括使感染HCV的細(xì)胞與本發(fā)明化合物或組合物接觸。在一些實(shí)施方案中，所迷細(xì)胞為肝細(xì)胞。但是，HCV能在不同于肝細(xì)胞的細(xì)胞類型中復(fù)制，從而本發(fā)明的方法還可在這些其他細(xì)月包類型中有效。在某些實(shí)施方案中，所述細(xì)胞為能夠支持HCV復(fù)制的培養(yǎng)細(xì)胞。支持HCV復(fù)制的細(xì)胞培養(yǎng)體系可通過原代細(xì)胞培養(yǎng)物或細(xì)胞系的感染或慢性感染哺乳動(dòng)物的原代細(xì)胞的培養(yǎng)來制備。這種HCV復(fù)制體體系的實(shí)例可見例如Lohmann爭，Sc/e"ce285:110-113(1999),Blight爭.，290:1972(2000)和Barenschlager和Lohmann，Ge".P7ro/ogy81:8631-1648(2000)中的描述。在某些其他實(shí)施方案中，所述細(xì)胞存在于人或動(dòng)物受試者中。優(yōu)選所述動(dòng)物為哺乳動(dòng)物。一些實(shí)施方案中，所述動(dòng)物為靈長類動(dòng)物。在再一方面，本發(fā)明的實(shí)施方案提供了至少一種式(I)化合物在制備用于預(yù)防或治療HCV感染的藥物中的用途。在再一方面，本發(fā)明的實(shí)施方案提供了用于治療或預(yù)防與HCV感染有關(guān)的疾病或病癥的方法，所述方法包括給予感染HCV的人或動(dòng)物受試者治療或預(yù)防有效量的至少一種本發(fā)明的化合物或組合物。"與HCV感染有關(guān)的疾病或病癥"是指因感染HCV直接或間接引起的任何疾病或病癥。優(yōu)選所述動(dòng)物為哺乳動(dòng)物。在一些實(shí)施方案中，所述動(dòng)物為靈長類動(dòng)物。HCV的特征在于明顯的基因組可變性，HCV復(fù)制導(dǎo)致病毒變體的快速產(chǎn)生。Holland爭,Cw/rew〖M.crc^'o/。gyartd/mmw"o/ogy176:1-20(1992)認(rèn)為，甚至在個(gè)體患者中，HCV作為一群微變體(microvariant)存在，作者將該現(xiàn)象稱為準(zhǔn)種(quasispecies)。因此，本文使用的術(shù)語"丙型肝炎病毒"和"HCV"意在指任何這種病毒變體或其混合物。文中所用術(shù)語"治療有效量的"是指足以對(duì)受試者有益的量或足以引起與HCV感染有關(guān)的任何癥狀或標(biāo)記(marker)產(chǎn)生任何有益變化的量。"與HCV感染有關(guān)的標(biāo)記"是指與HCV感染有關(guān)和/或預(yù)期臨床預(yù)后的任何生物度量標(biāo)準(zhǔn)。這些標(biāo)記包括但不限于活性病毒和病毒抗原。文中所用術(shù)語"預(yù)防有效量"是指足以阻止或降低暴露于HCV或受HCV感染的人或動(dòng)物受試者的HCV癥狀嚴(yán)重程度的量。在一些實(shí)施方案中，預(yù)防性治療包括給予人或動(dòng)物受試者本發(fā)明化合物或組合物，所述人或動(dòng)物受試者一皮發(fā)現(xiàn)攜帶有HCV但不表現(xiàn)出丙型肝炎癥狀。預(yù)防型治療還包括給予人或動(dòng)物受試者本發(fā)明化合物或組合物，所述人或動(dòng)物受試者表現(xiàn)出改善的疾病狀態(tài)但仍然攜帶有HCV并有癥狀性疾病復(fù)發(fā)的風(fēng)險(xiǎn)。所給HCVRdRp抑制劑有效量(例如治療或預(yù)防有效量)將根據(jù)經(jīng)驗(yàn)確定并將基于以下考慮所用具體的抑制劑、個(gè)體年齡、體重和狀況、所需治療效果、給予途徑等。預(yù)期一般劑量范圍將為每劑量約0.1mg/kg至約100mg/kg，可將其分成每天一次至數(shù)次給予。在一些實(shí)施方案中，根據(jù)本發(fā)明該方面的方法進(jìn)一步包括給予一種或多種其他用于治療病毒性感染的藥物，例如抗病毒藥或免疫調(diào)節(jié)齊寸。在某些實(shí)施方案中，其他藥物為HCVRdRp、HCV解旋酶、HCV蛋白酶或其他HCV靶蛋白的抑制劑。在某些其他實(shí)施方案中，所述其他藥物為廣譜抗病毒藥或免疫調(diào)節(jié)劑，例如利巴韋林、干擾素或其衍生物。其他一種或多種藥物可與HCVRdRp抑制劑同時(shí)給予，或可在不同時(shí)間給予。序貫或交替治療方案也包括在本發(fā)明范圍內(nèi)。本發(fā)明的化合物可具有藥理性質(zhì)，具體地講，式vn-vm化合物可以是蛋白激酶的抑制劑、調(diào)節(jié)劑或調(diào)制劑?？杀灰种?、調(diào)節(jié)或調(diào)制的蛋白激酶的非限制性實(shí)例包括細(xì)胞周期蛋白依賴性激酶(CDK)(例如CDK1、CDK2、CDK3、CDK4、CDK5、CDK6、CDK7和CDK8)、促分裂原活化蛋白激酶(MAPK/ERK)、糖原合酶激酶3(GSK3f3)、Chk激酶(例如Chkl和Chk2)、Pim-l激酶、酪氨酸激酶(例如包括如EGFR(HER1)、HER2、HER3和HER4在內(nèi)的HER亞家族)、胰島素亞家族(包括例如INS-R、IGF-IR、IR和IR-R)、PDGF亞家族(包括例如PDGF-ot受體、PDGF-p受體、CSFIR、c-kit和FLK-II)、FLK家族(包括例如激酶插入域受體(KDR)、胎肝激酶-l(FLK-l)、胎肝激酶-4(FLK-4)和fms樣酪氨酸激酶-l(flt-l》、非受體蛋白酪氨酸激酶(例如LCK、Src、Frk、Btk、Csk、Abl、Zap70、Fes/Fps、Fak、Jak、Ack和LIMK)、生長因子受體酪氨酸激酶(例如VEGF-R2、FGF-R、TEK、Akt激酶)等。式VII-VIII化合物可以是蛋白激酶的抑制劑，例如Chkl、Chk2等限制點(diǎn)激酶的抑制劑。優(yōu)選化合物的IC5G值小于約25pm，優(yōu)選約O.OOl至約l.(Him，更優(yōu)選約0.001至約0.1^im。在下面公開的實(shí)施例中介紹了測定方法。式VII-VIII化合物可以是蛋白激酶抑制劑，蛋白激酶例如CDK1、CDK2、CDK3、CDK4、CDK5、CDK6、CDK7和CDK8等細(xì)胞周期蛋白依賴性激酶。表1所示化合物的CDK2抑制活性(ICso)約為0.0001pM至〉約5juM。測定方法見下面的實(shí)施例。表1<formula>formulaseeoriginaldocumentpage56</formula>式VII-VIII化合物可用于治療增殖性疾病(例如癌癥)、自身免疫病、病毒性疾病、真菌性疾病、神經(jīng)疾病/神經(jīng)變性性疾病、關(guān)節(jié)炎、炎癥、抗增殖(例如視網(wǎng)膜病)、神經(jīng)元疾病、脫發(fā)病和心血管疾病。許多這類疾病和病癥可參見之前引用的U.S.6,413,974,該專利通過引用結(jié)合到本文中。更具體地講，式VII-VIII化合物可用于治療多種癌癥，包括(但不限于)癌，包括膀胱癌、乳腺癌、結(jié)腸癌、腎癌、肝癌、肺癌(包括小細(xì)胞肺癌、非小細(xì)胞肺癌)、頭頸部癌、食道癌、膽嚢癌、卵巢癌、胰腺癌、胃癌、宮頸癌、甲狀腺癌、前列腺癌、皮膚癌(包括鱗狀細(xì)胞癌)；淋巴系造血系統(tǒng)腫瘤，包括白血病、急性淋巴細(xì)胞白血病、急性成淋巴細(xì)胞白血病、B-細(xì)胞淋巴瘤、T-細(xì)胞淋巴瘤、霍奇金淋巴瘤(Hodgkinslymphoma),非霍奇金淋巴瘤、毛細(xì)胞淋巴瘤、套細(xì)胞淋巴瘤、骨髓瘤和伯基特淋巴瘤(Burkett'slymphoma);髓系造血系統(tǒng)腫瘤，包括急性髓細(xì)胞性白血病、慢性髓細(xì)胞性白血病、骨髓增生異常綜合征和前髓細(xì)月包白血??；間充質(zhì)源肺瘤，包括纖維肉瘤和橫紋肌肉瘤；中樞神經(jīng)系統(tǒng)和外周神經(jīng)系統(tǒng)腫瘤，包括星形細(xì)胞瘤、成神經(jīng)細(xì)胞瘤、神經(jīng)膠質(zhì)瘤和神經(jīng)鞘瘤；和其他腫瘤，包括黑素瘤、精原細(xì)胞瘤、畸胎癌、骨肉瘤、著色性干皮病、角化棘皮瘤、曱狀腺濾泡癌和卡波西肉瘤(Kaposi'ssarcoma)。由于CDK在整體調(diào)節(jié)細(xì)胞增殖中的關(guān)鍵作用，其抑制劑可用作可逆的細(xì)胞抑制劑，可用于治療以細(xì)胞增殖異常為特征的任何疾病過程，例如良性前列腺增生、家族性腺瘤性息肉病、神經(jīng)纖維瘤病、動(dòng)脈粥樣硬化、肺纖維變性、關(guān)節(jié)炎、牛皮癬、腎小球性腎炎、血管成形術(shù)或血管手術(shù)后的再狹窄、肥厚性瘢痕形成、炎性腸病、移植排斥、內(nèi)毒素休克和真菌感染。式VII-VIII化合物還可用于治療阿爾茨海默病，正如最近發(fā)現(xiàn)CDK5參與t蛋白磷酸化所提示的一樣(丄S/oc/^w，(1995)117,741-749)。式vii-vm化合物可誘導(dǎo)或抑制細(xì)胞凋亡。在多種人類疾病中凋亡反應(yīng)失常。作為細(xì)胞凋亡調(diào)諧劑的式i化合物可用于治療癌癥(包括但不限于上述癌癥類型)、病毒感染(包括但不限于皰疹病毒、痘病毒、EB病毒、新培斯病毒和腺病毒)、防止受HIV感染個(gè)體的AIDS發(fā)展、自身免疫病(包括但不限于系統(tǒng)性紅斑性狼瘡、自身免疫介導(dǎo)的腎小球性腎炎、類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎、牛皮癬、炎性腸病和自身免疫性糖尿病)、神經(jīng)變性性疾病(包括但不限于阿爾茨海默病、AIDS相關(guān)性癡呆、帕金森病(Parkinson'sdisease)、肌萎縮性側(cè)索硬化、視網(wǎng)膜色素變性、脊髓性肌萎縮和小腦變性)、骨髓增生異常綜合征、再生障礙性貧血、與心肌梗塞、中風(fēng)和再灌注損傷相關(guān)的缺血損傷、心律不齊、動(dòng)脈粥樣硬化、毒素誘導(dǎo)性肝病、酒精性肝病、血液病(包括但不限于慢性貧血和再生障礙性貧血)、肌肉骨骼系統(tǒng)變性疾病(包括但不限于骨質(zhì)疏松癥和關(guān)節(jié)炎)、阿司匹林敏感性鼻竇炎、嚢性纖維變性、多發(fā)性石更化、腎病和癌癥疼痛。作為cdk抑制劑的式vn-vni化合物可以調(diào)節(jié)細(xì)胞rna和DNA合成的水平。因此，這些物質(zhì)可用于治療病毒感染(包括但不限于HIV、人乳頭瘤病毒、皰滲病毒、痘病毒、EB病毒、新培斯病毒和腺病毒)。式vii-vm化合物還可用于癌癥的化學(xué)預(yù)防。化學(xué)預(yù)防的定義是通過阻斷誘變活動(dòng)的啟動(dòng)或者通過阻斷已遭攻擊的惡化前細(xì)胞的進(jìn)程，抑制侵襲性癌的發(fā)展或者抑制腫瘤復(fù)發(fā)。式vn-vm化合物還可用于抑制腫瘤血管生成和轉(zhuǎn)移。式vii-vm化合物還可用作其他蛋白激酶的抑制劑，例如蛋白激酶C、her2、rafl、MEK1、MAP激酶、EGF受體、PDGF受體、IGF受體、PI3激酶、weel激酶、Src、Abl,周此有效用于治療與所述其他蛋白激酶相關(guān)的疾病。本發(fā)明另一方面是治療患有與CDK相關(guān)疾病或病癥的哺乳動(dòng)物(例如人)的方法，該方法通過給予哺乳動(dòng)物治療有效量的至少一種式vn-vin化合物或該化合物藥學(xué)上可接受的鹽、溶劑合物、酯或前藥。優(yōu)選的劑量約為0.001-500mg/kg體重/天的式VII-VIII化合物。尤其優(yōu)選的劑量約為0.01-25mg/kg體重/天的式VII-Vin化合物或該化合物的藥學(xué)上可接受的鹽、溶劑合物、酯或前藥。本發(fā)明的化合物還可與一種或多種抗癌癥治療(例如》丈射療法)，和/或一種或多種不同于式(I)化合物的抗癌藥聯(lián)用(同時(shí)或序貫給藥)。本發(fā)明的化合物可存在于與所述抗癌藥相同的同一劑量單位中或存在于單獨(dú)的劑量單位中。本發(fā)明另一方面是治療一種或多種細(xì)胞周期蛋白依賴性激酶相關(guān)疾病的方法，該方法包括給予有這種治療需要的哺乳動(dòng)物一定量的第一化合物，該化合物為式VII-VIII化合物或其藥學(xué)上可接受的鹽、溶劑合物、酯或前藥；和一定量的至少一種第二化合物，該第二化合物為不同于式VII-VIII化合物的抗癌藥，其中第一化合物和第二化合物的量產(chǎn)生治療效果。合適的抗癌藥的非限制性實(shí)例包括細(xì)胞生長抑制劑、細(xì)胞毒藥物(例如但不限于DNA相互作用劑(例如順鉑或多柔比星))；紫杉烷類(taxanes)(例如泰索帝、泰素)；拓樸異構(gòu)酶II抑制劑(例如依托泊苦)；拓樸異構(gòu)酶I抑制劑(例如伊立替康(或CPT-11)、Camptostar(鹽酸伊立替康和山梨醇注射劑)或托泊替康)；微管蛋白相互作用劑(例如紫杉醇、多西他賽或埃坡霉素)；激素藥物(例如他莫昔芬)；胸苦酸合成酶抑制劑(例如5-氟尿嘧啶)；抗代謝藥(例如甲氨蝶呤)；烷化劑(例如替莫唑胺(TEMODARTM，得自Schering-Plough7>司，Kenilworth，NewJersey)、環(huán)磷酰胺)；法尼基蛋白轉(zhuǎn)移酶抑制劑(例如SARASAR(4國[2-[4-[(llR)-3,10-二溴-8-氯-6，ll-二氫-5H-苯并[5,6]環(huán)庚[l,2-b]吡啶-11_基_]_1_咮咬基]_2-氧代乙基]-1-哌啶曱酰胺或SCH66336，得自Schering-Plough7>司Kenilworth、NewJersey))、^^匹法尼(Zarnestra⑧或R15777，得自JanssenPharmaceuticals)、L778，123(法尼基蛋白轉(zhuǎn)移酶抑制劑，得自Merck&Company,WhitehouseStation,NewJersey)、BMS214662(法尼基蛋白轉(zhuǎn)移酶抑制劑，得自BristoL-MyersSquibbPharmaceuticals，Princeton，NewJersey);信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)抑制劑(例如易瑞沙(得自AstraZenecaPharmaceuticals,England)、它賽瓦(EGFR激酶抑制劑)、抗EGFR抗體(例如C225)、GLEEVECTM(C-abl激酶抑制劑，4尋自NovartisPharmaceuticals,EastHanover,NewJersey);干4尤素例如甘樂能(得自Schering-Plough公司)、Peg-甘樂能(得自Schering-Plough公司)；激素療法組合；芳香酶組合；阿糖胞苷、阿霉素、環(huán)磷酰胺制劑和吉西他濱。其他抗癌(亦稱抗腫瘤)藥包括但不限于烏拉莫司汀、氮齊、異環(huán)磷酰胺、美法侖、苯丁酸氮芥、哌泊溴烷、曲他胺、三亞乙基硫代磷酰胺(triethylenethiophosphoramine)、白消安、卡莫司汀、洛莫司汀、鏈佐星、達(dá)卡巴嗪、氟尿苷、阿糖胞苷、6-巰基嘌呤、6-硫鳥嘌呤、磷酸氟達(dá)拉濱、奧沙利鉑、亞葉酸、奧沙利鉑(ELOXATINTM,得自Sanofi-SynthelaboPharmaceuticals,France)、噴司他丁、長春堿、長春新堿、長春地辛、博來霉素、放線菌素D、柔紅霉素、多柔比星、表柔比星、伊達(dá)比星、普卡霉素、脫氧考福霉素、絲裂霉素-C、L-天冬酰胺酶、替尼泊苷、17a-炔雌醇、己烯雌酚、睪酮、潑尼松、氟甲睪酮、丙酸屈他雄酮、睪內(nèi)酯、醋酸甲地孕酮、甲潑尼龍、曱睪酮、潑尼松龍、曲安西龍、氯烯雌醚、羥孕酮、氨魯米特、雌莫司汀、醋酸甲羥孕酮、亮丙立德、氟他胺、托瑞米芬、戈舍瑞林、順鉑、卡鉑、羥基脲、安吖啶、丙卡巴肼、米托坦、米托蒽醌、左旋咪唑、諾維本(Navelbene)、阿那曲唑、來曲唑(Letrazole)、卡培他濱、瑞羅沙吩(Reloxafine)、屈洛昔芬、六甲蜜胺(Hexamethylmelamine)、阿瓦斯丁(Avastin)、赫賽汀、貝克薩(Bexxar)(Bexxar)、萬珂(Velcade)、吉維林(Zevalin)、三仙諾(Trisenox)、希羅達(dá)、長春瑞濱、卟吩姆(Porfimer)、愛必妥、Liposomal,塞替派、六甲蜜胺(Altretamine)、美法侖、群司珠單抗、列若唑(Lerozole)、氟維司群、依西美坦、異環(huán)磷酰胺、利妥昔單抗、C225和阿侖珠單抗。如果配制成固定劑量，則這些組合產(chǎn)品采用本文所述劑量范圍內(nèi)的本發(fā)明化合物和其他在劑量范圍內(nèi)的藥用活性成分或治療。例如，曾發(fā)現(xiàn)CDC2抑制劑奧羅莫星與已知的細(xì)胞毒藥物在誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡中協(xié)同作用(乂CW/&/.，(1995)108，2897)。當(dāng)組合劑型不適宜時(shí)，式VII-VIII化合物還可與已知的抗癌藥或細(xì)胞毒藥物一起序貫給予。本發(fā)明不限制給藥順序，可以在已知的抗癌藥或細(xì)胞毒藥物給藥前或給藥后給予式VII-VIII化合物。例如，細(xì)胞周期蛋白依賴性激酶抑制劑flavopiridol的細(xì)胞毒活性受抗癌藥給藥順序的影響(C朋cer尺ewan:/7,(1997)57,3375)。這些技術(shù)為本領(lǐng)域技術(shù)人員以及主治醫(yī)師所掌握。因此，一方面，本發(fā)明包括包含一定量的至少一種式VII-VIII化合物或其藥學(xué)上可接受的鹽、溶劑合物、酯或前藥與一定量的一種或多種上述抗癌治療和抗癌藥的組合，其中所述化合物/治療的量產(chǎn)生所需的治療效果。本發(fā)明另一方面是抑制有這種需要的患者體內(nèi)的一種或多種與限制點(diǎn)激酶的方法，該方法包括給予患者治療有效量的至少一種式vn-vin化合物或其藥學(xué)上可接受的鹽、溶劑合物、酯或前藥。本發(fā)明另一方面是治療有這種需要的患者體內(nèi)的與一種或多種與限制點(diǎn)激酶相關(guān)疾病或減緩該疾病進(jìn)程的方法，該方法包括給予治療有效量的至少一種式vn-vm化合物或其藥學(xué)上可接受的鹽、溶劑合物、酯或前藥。本發(fā)明又一方面是治療一種或多種與限制點(diǎn)激酶相關(guān)疾病的方法，該方法包括給予有這種治療需要的哺乳動(dòng)物一定量的第一化合物，該化合物為式vii-vm化合物或其藥學(xué)上可接受的鹽、溶劑合物、酯或前藥；及一定量的至少一種第二化合物，第二化合物是抗癌藥，其中第一化合物和第二化合物的量產(chǎn)生治療效果。本發(fā)明另一方面是治療有這種需要的患者體內(nèi)的與一種或多種限制點(diǎn)激酶相關(guān)疾病或減緩該疾病進(jìn)程的方法，該方法包括給予治療有效量的藥物組合物，該藥物組合物包含至少一種藥學(xué)上可接受的載體和至少一種式vii-vni化合物或其藥學(xué)上可接受的鹽、溶劑合物、酯或前藥。上述方法中，將被抑制的限制點(diǎn)激酶可為Chkl和/或Chk2。本發(fā)明另一方面是抑制有這種需要的患者體內(nèi)的一種或多種酪氨酸激酶的方法，該方法包括給予患者治療有效量的至少一種式vn-vni化合物或其藥學(xué)上可接受的鹽、溶劑合物、酯或前藥。本發(fā)明又一方面是治療有這種需要的患者的與Akt激酶、Aurora激酶和酪氨酸激酶中一種或多種相關(guān)的疾病或減緩該疾病進(jìn)程的方法，該方法包括給予治療有效量的至少一種式VII-VIII化合物或其藥學(xué)上可接受的鹽、溶劑合物、酯或前藥。本發(fā)明另一方面是治療一種或多種與Akt激酶、Aurora激酶和/或酪氨酸激酶相關(guān)疾病的方法，該方法包括給予有這種治療需要的哺乳動(dòng)物一定量的第一化合物，該化合物為式vn-vin化合物或其藥學(xué)上可接受的鹽、溶劑合物、酯或前藥；及一定量的至少一種第二化合物，第二化合物是抗癌藥，其中第一化合物和第二化合物的量產(chǎn)生治療效果。本發(fā)明另一方面是治療有這種需要的患者的與Akt激酶、Aurora激酶和酪氨酸激酶中一種或多種相關(guān)的疾病或減緩該疾病進(jìn)程的方法，該方法包括給予治療有效量的藥物組合物，該藥物組合物包含至少一種藥學(xué)上可接受的載體與至少一種式VII-VIII化合物或其藥學(xué)上可接受的鹽、溶劑合物、酯或前藥。上迷方法中，酪氨酸激酶可為VEGFR、EGFR、HER2、SRC、JAK和/或TEK。本發(fā)明又一方面是治療有這種需要的患者的與Pim-l激酶相關(guān)疾病或減緩該疾病的進(jìn)程的方法，該方法包括給予治療有效量的至少—種式VII-VIII化合物或其藥學(xué)上可接受的鹽、溶劑合物、酯或前藥。本發(fā)明另一方面是治療一種或多種與Pim-l激酶相關(guān)疾病的方法，該方法包括給予有這種治療需要的哺乳動(dòng)物一定量的第一化合物，該化合物為式vii-vm化合物或其藥學(xué)上可接受的鹽、溶劑合物、酯或前藥；及一定量的至少一種第二化合物，笫二化合物是抗癌藥，其中第一化合物和第二化合物的量產(chǎn)生治療效果。本發(fā)明另一方面是治療有這種需要的患者的Pim-l激酶相關(guān)疾病或減緩該疾病的進(jìn)程的方法，該方法包括給予治療有效量的藥物組合物，該藥物組合物包含至少一種藥學(xué)上可接受的載體與至少一種式vn-vm化合物或其藥學(xué)上可接受的鹽、溶劑合物、酯或前藥。本發(fā)明化合物的藥理性質(zhì)可通過許多藥理實(shí)驗(yàn)予以證實(shí)。已經(jīng)對(duì)本發(fā)明的化合物及其鹽進(jìn)行了下述示例性的藥理實(shí)驗(yàn)。本發(fā)明還涉及藥物組合物，該組合物包含至少一種式vn-vni化合物或該化合物的藥學(xué)上可接受的鹽、溶劑合物、酯或前藥及至少一種藥學(xué)上可接受的載體。對(duì)于由本發(fā)明所迷化合物制備藥物組合物，藥學(xué)上可接受的惰性載體可為固體或液體。固體形式的制劑包括散劑、片劑、可分散顆粒劑、膠嚢劑、扁嚢劑和栓劑。散劑和片劑可包括約5%至約95%的活性成分。合適的固體載體為本領(lǐng)域所知，例如碳酸鎂、硬脂酸鎂、滑石粉、糖或乳糖。片劑、散劑、扁嚢劑和膠嚢劑可用作適于口服給藥的固體劑型。藥學(xué)上可接受的載體和各種組合物制備方法的實(shí)例可參見A.Gennaro(主編)，iemz'贈(zèng)o"、尸/2W謹(jǐn)cew"ca/5"c/e"ces,第18版，(1990)，MackPublishingCo.，Easton,Pennsylvania。液體形式的制劑包括溶液劑、混懸劑和乳劑?？赡芴峒暗膶?shí)例是用于胃腸外注射劑的水或水-丙二醇溶液或者用于口服溶液劑、混懸劑和乳劑而添加的甜味劑和遮光劑。液體形式的制劑還可包括用于鼻內(nèi)給藥的溶液劑。適于吸入的氣霧劑可包括溶液劑和粉末形式的固體劑，該固體劑可與藥學(xué)上可接受的載體(例如氮?dú)獾榷栊詨嚎s氣體)聯(lián)用。所包括的還有在臨用前轉(zhuǎn)化成適于口服或胃腸外給藥的液體制劑的固體制劑。這些液體形式包括溶液劑、混懸劑和乳劑。本發(fā)明化合物還可以經(jīng)皮遞藥。透皮組合物可呈乳膏劑、洗劑、氣霧劑和/或乳劑的形式，并且可包入骨架型或貯庫型的透皮貼劑中，正如本領(lǐng)域此目的的常》見作法一樣。本發(fā)明化合物還可以皮下遞藥。優(yōu)選化合物經(jīng)口服或靜脈內(nèi)給藥。優(yōu)選藥物制劑為單位劑型。在這種劑型中，制劑被分成大小適宜的單位劑量，其中含有合適劑量(例如達(dá)到所需目的的有效量)的活性組分。制劑的單位劑量中，活性化合物的含量可根據(jù)具體應(yīng)用，在約lmg至約100mg、優(yōu)選約lmg至約50mg、更優(yōu)選約lmg至約25mg間變動(dòng)或調(diào)整。所使用的實(shí)際劑量可根據(jù)患者需求和待治療疾病的嚴(yán)重程度而變化。本領(lǐng)域技術(shù)人員掌握如何確定特殊情況下的合適劑量方案。為方便起見，總?cè)談┝靠刹鸱植葱枰谝惶靸?nèi)分次給予。本發(fā)明的化合物和/或其藥學(xué)上可接受的鹽的給藥量和給藥頻率，將根據(jù)主治臨床醫(yī)師對(duì)患者的年齡、狀況和體重以及待治療癥狀的嚴(yán)重程度等因素的判斷進(jìn)行調(diào)整。對(duì)于口服給藥，一般推薦的日劑量方案可介于約lmg/天至約500mg/天、優(yōu)選lmg/天至200mg/天之間，按2-4次分劑給予。本發(fā)明另一方面為藥劑盒，該藥劑盒包括治療有效量的至少一種式vn-vm化合物或該化合物的藥學(xué)上可接受的鹽、溶劑合物、酯或前藥以及藥學(xué)上可接受的載體、溶Jf某或稀釋劑。本發(fā)明再一方面為藥劑盒，該藥劑盒包括一定量的至少一種式vii-vm化合物或該化合物的藥學(xué)上可接受的鹽、溶劑合物、酯或前藥以及一定量的至少一種上述抗癌療法和/或抗癌藥，其中兩種或更多種成分的量產(chǎn)生所需的治療效果。下面的制備方法和實(shí)施例用來示例性地說明本發(fā)明所公開的內(nèi)容，這些方法和實(shí)施例不能解釋為是對(duì)本發(fā)明公開內(nèi)容的限制。備選的機(jī)制途徑和類似結(jié)構(gòu)對(duì)本領(lǐng)域技術(shù)人員而言是顯而易見的。如果提供NMR數(shù)據(jù)，則&譜用VarianVXR-200(200MHz,!H)、VarianGemini誦300(300MHz)或XL-400(400MHz)獲得，以距Me4Si的ppm低磁場表示，括號(hào)內(nèi)表明質(zhì)子數(shù)、峰裂數(shù)和耦合常數(shù)(赫茲)。如果提供LC/MS數(shù)據(jù)，則用AppliedBiosystemsAPI-100質(zhì)譜儀和ShimadzuSCL-10ALC柱Altech柏C18,3微米，33mmx7mm內(nèi)徑；梯度流0分鐘-10%CH3CN，5分鐘-95%CH3CN，7分鐘-95%CH3CN,7.5分鐘-10。/。CH3CN，9分鐘-終止。給出保留時(shí)間和所觀察到的母離子。下列溶劑和試劑可使用其縮寫詞薄層色譜法TLC二氯甲烷CH2C12乙酸乙酯AcOEt或EtOAc甲醇MeOH三氟乙酸TFA三乙胺EtsN或TEA丁氧基羰基n-Boc或Boc核磁共振譜法NMR液相色譜-質(zhì)譜法LCMS高分辨質(zhì)譜法HRMS毫升mL毫摩爾mmol微升vil克g毫克mg室溫或rt(環(huán)境溫度)約25。C二甲氧基乙烷DME一般而言，可以通過以下流程1a和2a所示的通用路線來制備本發(fā)明所述化合物。流程laooH2N、R3一丫、0'1N、R2PhC回流R2R7R2H3,N丫R3O3Ra-NiEtOHPOCI，N,N-二曱基苯胺R2,N、乂R3H—CI4MeSNaR2THFN、一R3SCH3或者，當(dāng)W為取代的氨基時(shí)，可使用流程2a所示方法，從丙二酸7開始?？s合并二氯化，得到類型9的化合物。隨后3-和7-位氯被置換，隨后通過Ra-Ni還原，得到類型ll的化合物。流程2aci31.MeSNa2.R7R8N制備實(shí)施例和實(shí)施例-第A組(SETA)制備實(shí)施例1:OH將3-氨基吡唑(4.80g,57.8mmol)和2-乙基乙酰乙酸乙酯(10.96g，69.4mmol)在AcOH(25mL)中的混合物攪拌并在N2下回流18小時(shí)。將該混合物冷卻至25°C,將固體濾出，在濾器上用AcOH(20mL)、Et2O(50mL)洗滌并真空千燥。得到白色固體(7.70g，35%)。制備實(shí)施例1.5:<formula>formulaseeoriginaldocumentpage67</formula>在氮?dú)鈿夥障?，?-氨基吡唑(8.30g，O.lOOmol)和乙?；晁岫阴?23.0g,O.lOlmol)在PhCH3(100mL)中的混合物攪拌并回流18小時(shí)。將該混合物冷卻至25。C，將固體濾出，在濾器上用PhCH3(2x100mL)、Et2O(2xl00mL)洗涂并真空千燥。得到淺黃色晶狀固體(18.3g，78%)。LC-MS:236[M+H]。制備實(shí)施例2:OHCl在氮?dú)鈿夥障拢瑢⒅苽鋵?shí)施例1的產(chǎn)物(5.95g,33.6mmo1)、N,N-二甲基苯胺(6.09g，50.0mmol)和POCl3(30.0mL)的混合物回流3小時(shí)。將該混合物冷卻至25°C，將其傾入500g壓碎的冰中并用EtOAc/CH2Cl2(20:l，3xl00mL)萃取。該萃取物用H2O(2x200mL),鹽水(100mL)洗滌，經(jīng)Na2S04干燥，過濾并蒸去溶劑。殘余物經(jīng)硅膠柱層析純化(洗脫液CH2Cl2/EtOAc=10:l)。得到淺黃色油狀物(2.51g，38%)。制備實(shí)施例2.5:<formula>formulaseeoriginaldocumentpage67</formula>在25。C下，將制備實(shí)施例1.5的產(chǎn)物(12.0g，51.Ommo1)、N,N-二甲基苯胺(10.0mL)和POCl3(46mL)的混合物攪拌3天。蒸去過量的P0C13并將殘余物傾入飽和NaHC03水溶液(500mL)中。該混合物用CH2C12(3x200mL)萃取，合并的萃取物經(jīng)Na2S04干燥，過濾并將溶劑蒸發(fā)。殘余物經(jīng)硅膠柱層析純化(洗脫液CH2Cl2/EtOAc=4:l)。得到淺黃色油狀物(緩慢固化)(10.2g，79%)。制備實(shí)施例3:<formula>formulaseeoriginaldocumentpage68</formula>在氮?dú)鈿夥障?，往攪拌的制備?shí)施例2的產(chǎn)物(2.00g,10.2mmol)在無水CH3CN(10mL)中的溶液中加入NBS(1.82g,10.2mmol)在無水CH3CN(20mL)中的溶液。將該混合物攪拌18小時(shí)，蒸去溶劑，隨后殘余物經(jīng)硅膠柱層析純化(洗脫液CH2Cl2/EtOAc=30:l)。得到淺黃色固體(2.71g，96%)。LC-MS:254[M+]。制備實(shí)施例3.5:通過與制備實(shí)施例3中所述基本上相同的方法，制備以下化合物(由制備實(shí)施例2.5的化合物起始)。制備實(shí)施例4:<formula>formulaseeoriginaldocumentpage68</formula>在25。C、氮?dú)鈿夥障?，將制備?shí)施例3的產(chǎn)物(1.00g，3.64mmo1)和甲硫醇鈉(308mg,4.40mmol)在THF(10mL)中的混合物攪拌24小時(shí)。蒸去溶劑，殘余物經(jīng)硅膠柱色譜純化(洗脫液己烷/EtOAc=10:1)。得到淺黃色固體(890mg,85°/。)。LC-MS:286[M+]。制備實(shí)施例4.5:<formula>formulaseeoriginaldocumentpage68</formula>在25。C、氮?dú)鈿夥障拢瑢⒅苽鋵?shí)施例3.5的產(chǎn)物(3.32g，10.0mmo1)和甲醇鈉(800mg,14.8mmol)在MeOH(60mL)中的混合物攪拌3小時(shí)。蒸去溶劑，殘余物經(jīng)硅膠柱層析純化(洗脫液己烷/EtOAc-20:l)。得到白色固體(1.95g，62%)。LC-MS:314[M+]。實(shí)施例1:<formula>formulaseeoriginaldocumentpage69</formula>在5(TC、氮?dú)鈿夥障拢瑢⒅苽鋵?shí)施例4的產(chǎn)物(600mg，2.10mmo1)和50%拉尼鎳在H2O(2.0g)中的漿狀物在EtOH(10mL)中的混合物攪拌24小時(shí)。隨后繼續(xù)加入拉尼鎳(2.0g)并在50。C、氮?dú)鈿夥障吕^續(xù)攪拌24小時(shí)。加入CH2Cl2(20mL),該混合物經(jīng)Celite硅藻土過濾，隨后將溶劑蒸發(fā)。殘余物經(jīng)硅膠柱層析純化(洗脫液己烷/EtOAc-6:l)。得到白色固體(36mg，7%)。LC-MS:240[M+〗。Mp=120-122°C。實(shí)施例2-3:<formula>formulaseeoriginaldocumentpage69</formula>在0°C、氮?dú)鈿夥障?，往攪拌的制備?shí)施例4.5的產(chǎn)物(1.00g，3.20mmol)在無水THF(20mL)中的溶液中加入在THF中的1.0MLiAlH4(1.60mL，1.60mmol)。在0°C下將該反應(yīng)混合物攪拌45分鐘，隨后用MeOH(4mL)猝滅。殘余物經(jīng)硅膠制備TLC純化(洗脫液EtOAc)。將兩產(chǎn)物分離得到的第一種產(chǎn)物為淺黃色固體(54mg，6%)(LC-MS:286[M+]，Mp=l18-120。C)，得到的第二種產(chǎn)物為淺黃色固體(55mg,7%)(LC-MS:256[M+]，Mp=131-133°C)。制備實(shí)施例6:<formula>formulaseeoriginaldocumentpage69</formula>根據(jù)Shiota在Chem.Pharm.Bull.1999,47(7),928-938中所示方法制備標(biāo)題化合物。A。制備實(shí)施例6.1-6.3:通過與制備實(shí)施例6中所述類似的方法可制備表6.1中所示的化合物，不同之處僅在于用適當(dāng)?shù)谋狨ゴ?。?.1制備實(shí)施例化合物<formula>formulaseeoriginaldocumentpage70</formula>制備實(shí)施例7:<formula>formulaseeoriginaldocumentpage70</formula>ClSMe往制備實(shí)施例6的二氯化物(3.0g，16.0mmol)在THF(25mL)中的溶液中一次性加入NaSMe(l.lg，16.0mmo1)。在室溫下將得到的混合物攪拌12小時(shí)，隨后減壓濃縮。使粗品在EtOAc(150mL)和H2O(30mL)間分配并分離各層。有機(jī)層依次用H2O(2x30mL)和鹽水(lx30mL)洗滌。將有機(jī)層干燥(Na2S04)，過濾，隨后減壓濃縮，得到3.0g棕褐色固體(產(chǎn)率為94%)。LC-MS:200.1[M+H]，純度為99%。制備實(shí)施例7.1-7.3:采用與實(shí)施例7所述類似的方法可制備表7.1第3欄所示化合物，不同之處僅在于用表7.1第2欄所示化合物代替。表7.1<table>tableseeoriginaldocumentpage71</column></row><table>制備實(shí)施例7.5:<formula>formulaseeoriginaldocumentpage71</formula>在氮?dú)鈿夥障?，往攪拌的制備?shí)施例6的產(chǎn)物(3.74g,20.0mmol)在無水CH3CN(30mL)中的溶液中加入NBS(3.56g，20.0mmol)在無水CH3CN(40mL)中的溶液。將該混合物攪拌20小時(shí)，將溶劑蒸去，殘余物經(jīng)硅膠柱色譜純化(洗脫液CH2C12)。得到淺黃色固體(5.10g，96%)。LC-MS:267[M+]。制備實(shí)施例7.6-7.8:采用與實(shí)施例7.5所述類似的方法可制備表7.6第3欄所示化合物，不同之處僅在于用表7.6第2欄所示化合物代替。表7.6<table>tableseeoriginaldocumentpage72</column></row><table>采用制備實(shí)施例7中所示方法制備，不同之處在于用制備實(shí)施例7.5的二氯化物(7.4g,27.7mmol)和NaSMe(2.1g，30.5mmol)作為原料，得到7.4g(產(chǎn)率為96%)淺橙色固體狀的標(biāo)題化合物。LC-MS:278.1[M+H],純度為95°/。。制備實(shí)施例9:在100。C、氮?dú)鈿夥障?，將制備?shí)施例8的產(chǎn)物(2.00g，7.18mmo1)、氨基醇(l.21g，9.34mmol)和DIPEA(5.88mL，35.9mmol)在二嗯烷(30mL)中的混合物攪拌3天。將溶劑蒸去，殘余物經(jīng)硅膠柱層析純化(洗脫液己烷/EtOAc-l:4)。得到淺黃色固體(0.90g，34%)。LC-MS:371[M+〗。制備實(shí)施例9.1-9.5:采用與實(shí)施例9所述類似的方法可制備表9第3欄所示化合物，不同之處僅在于用表9第2欄所示化合物代替。表9制備實(shí)施例第2欄第3欄9<table>tableseeoriginaldocumentpage73</column></row><table>SMe在25。C、氮?dú)鈿夥障拢瑢⒅苽鋵?shí)施例9的產(chǎn)物(80mg,0.22mmo1)和50%拉尼鎳在H2O(0.20g)中的漿狀物在EtOH(3mL)中的混合物攪拌24小時(shí)。加入CH2Cl2(10mL)，該混合物經(jīng)Celite硅藻土過濾，隨后蒸去溶劑。殘余物經(jīng)硅膠制備TLC純化(洗脫液CH2Cl2/MeOH=20:1)。得到無色固體(19mg，27%)。LC-MS:325[M+]。Mp=81-84°C。實(shí)施例5-9:采用與實(shí)施例4所述類似的方法可制備表10第3欄所示化合物，不同之處僅在于用表10第2欄所示化合物代替。表10<table>tableseeoriginaldocumentpage74</column></row><table>測定CHK1SPA測定用在桿狀病毒表達(dá)系統(tǒng)中表達(dá)的重組His-CHK1為酶源，基于CDC25C的生物素化肽作為底物(生物素-RSGLYRSPSMPENLNRPR)，研發(fā)了體外測定。原料與試劑1)CDC25CSer216C-端生物素化肽底物(25mg)，保存于-20。C，委托ResearchGenetics合成生物素-RSGLYRSPSMPENLNRPR2595.4MW2)His-CHK1內(nèi)部批號(hào)P976，235|ag/ml,保存于-80。C。3)D-PBS(不含CaCl和MgCI):GIBCO，目錄號(hào)141卯畫1444)SPA微珠Amersham，目錄號(hào)SPQ0032:500mg/小并EL將10mlD-PBS加到500mgSPA微珠中使工作濃度達(dá)50mg/ml。保存于4。C。水合后兩周內(nèi)使用。5)帶有結(jié)合的GF/B濾膜的96孔白色微量培養(yǎng)板Packard,目錄號(hào)60051776)TopSeal-A96孔粘膜PerkinElmer,目錄號(hào)60051857)96孔非結(jié)合的白色聚苯乙烯板Coming,目錄號(hào)60051778)MgCl2:Sigma，目錄號(hào)M-82669)DTT:Promega，目錄號(hào)V315510)ATP，保存于4。C:Sigma,目錄號(hào)A-539411)733P-ATP,1000-3000Ci/mMol:Amersham，目錄號(hào)AH996812)NaCl:FisherScientific,目錄號(hào)BP358-21213)H3PO485%Fisher,目錄號(hào)A242-50014)Tris-HCLpH8.0:Bio畫Whittaker，目錄號(hào)16-015V15)Staurosporine,lOOpg:CALBIOCHEM，目錄號(hào)56939716)Hypure細(xì)胞培養(yǎng)級(jí)水，500ml:HyClone，目錄號(hào)SH30529.0275反應(yīng)混合物1)激酶緩沖液50mMTrispH8.0;10mMMgCl2;lmMDTT2)His-CHK1，內(nèi)部批號(hào)P976，MW30KDa，保存于-80。C。需要6nM產(chǎn)生5,000CPM的陽性對(duì)照。對(duì)于1塊板(IOOrxn):將8pl235jug/ml(7.83pM)儲(chǔ)備液稀釋于2ml激酶緩沖液中。得到31nM混合物。力Q20pl/孔。使最終反應(yīng)濃度達(dá)6nM。3)CDC25C生物素化肽。將CDC25C稀釋成lmg/ml(385^M)儲(chǔ)備液，保存于-2(TC。對(duì)于1塊板(IOOrxn):將10|illmg/ml肽儲(chǔ)備液稀釋于2mi激酶緩沖液。得到1.925|uM混合物。加20jil/rxn。使最終反應(yīng)濃度達(dá)385nM。4)ATP混合物對(duì)于1塊板(IOOrxn):將10^1lmMATP(冷)儲(chǔ)備液和2pl新配的P33-ATP(20nCi)稀釋于5ml激酶緩沖液。得到2|iiMATP(冷)溶液；加50inI/孔開始反應(yīng)。終體積為100|xl/rxn,使得最終反應(yīng)濃度達(dá)lpMATP(冷)和0.2|iCi/rxn。5)終止溶液對(duì)于1塊板向10ml洗滌緩沖液2(2MNaCl1%H3PO4)加入lmlSPA微珠漿(50mg);力。100pl/孔6)洗滌緩沖液l:2MNaCl7)洗滌緩沖液2:2MNaCl，1%H3P04測定方法:<table>tableseeoriginaldocumentpage76</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage77</column></row><table>*測定的總反應(yīng)體積。**反應(yīng)終止時(shí)的最終反應(yīng)體積(加入終止溶液后)。1)用水/10%DMSO將化合物稀釋至所需濃度，得到1。/。/rxn的最終DMSO濃度。將10)Lil/rxn分配至合適孔中。將lOjil10%DMSO加至陽性(CHK1+CDC25C+ATP)對(duì)照孔和陰性(僅CHK1+ATP)對(duì)照孔。2)使酶在水浴中融化，用激酶緩沖液(參見反應(yīng)混合物)將酶稀釋至合適濃度，并將20nl分配至各孔中。3)使生物素化底物在冰浴中融化，用激酶緩沖液(參見反應(yīng)混合物)稀釋。力。20)Lil/孔，陰性對(duì)照孔除外。而向陰性對(duì)照孔加入20jLi1激酶緩沖液。4)用激酶緩沖液(參見反應(yīng)混合物)稀釋ATP(冷)和P33-ATP。加50^1/孔開始反應(yīng)。5)在室溫下使反應(yīng)進(jìn)行2小時(shí)。6)加入100^1的SPA微珠/終止溶液(參見反應(yīng)混合物)終止反應(yīng)，收獲前放置溫育15分鐘。7)將空白PackardGF/B濾膜板放入真空過濾裝置(Packard板收獲器)中，抽吸200ml水以濕潤系統(tǒng)。8)取出空白板，放入PackardGF/B濾膜板。9)通過濾纟反抽吸反應(yīng)物。10)洗滌每次洗滌200ml;2MNaCl—次；2MNaC1/1%H3PO4一次。11)使濾板干燥15分鐘。12)將T叩Seal-A粘性物(adhesive)放在濾板頂部。13)將濾板在T叩Count中進(jìn)行操作設(shè)置數(shù)據(jù)模式CPM》丈射性核素手動(dòng)SPA:P33閃爍劑Liq/plast能量范圍低CDK2測定桿狀病毒構(gòu)建經(jīng)PCR將細(xì)胞周期蛋白A和細(xì)胞周期蛋白E克隆至pFASTBAC(Invitrogen),將GluTAG序列(EYMPME)加至氨基端，以便在抗GluTAG親和柱上進(jìn)行純化。所表達(dá)的蛋白質(zhì)大小約為46kDa(細(xì)胞周期蛋白E)和50kDa(細(xì)胞周期蛋白A)。也經(jīng)PCR將CDK2克隆至pFASTBAC，將血細(xì)胞凝集素附加表位加至羧基端(YDVPDYAS)。所表達(dá)的蛋白質(zhì)大小約為34kDa。酶的制備用表達(dá)細(xì)胞周期蛋白A、E和CDK2的重組桿狀病毒感染SF9細(xì)胞48小時(shí)，感染復(fù)數(shù)(MOI)為5。在1000RPM下離心10分鐘收獲細(xì)胞。將含有細(xì)胞周期蛋白(E或A)的沉淀與含有CDK2的細(xì)胞沉淀合并，冰浴中，在沉淀體積5倍的裂解緩沖液中裂解30分鐘，裂解緩沖液含有50mMTris(pH8,0)、0.5%NP40、lmMDTT和蛋白酶/石岸酸酶承卩制劑(RocheDiagnosticsGmbH，Mannheim，Germany)。將混合物攪拌30-60分鐘，以促進(jìn)細(xì)胞周期蛋白-CDK2復(fù)合物形成。然后將混合的裂解物在15000RPM下離心10分鐘，保留上清液。之后用5ml抗GluTAG微珠(對(duì)于1升SF9細(xì)胞)俘獲細(xì)胞周期蛋白-CDK2復(fù)合物。結(jié)合的微珠用裂解緩沖液洗滌3次。蛋白質(zhì)用含有100-200jig/mlGluTAG肽的裂解緩沖液進(jìn)行竟?fàn)幮韵疵?。洗脫液?升激酶緩沖液透析過夜，激酶緩沖液^^有50mMTris(pH8.0)、lmMDTT、10mMMgCl2、IOO(liM原釩酸鈉和20%甘油。將酶等分并保存于-7(TC下。體外激酶測定用蛋白質(zhì)結(jié)合低的％孔板(Corninglnc，Corning,NewYork)進(jìn)行CDK2激酶測定(細(xì)胞周期蛋白A或細(xì)胞周期蛋白E-依賴性激酶)。用含有50mMTris(pH8.0)、10mMMgCl2、ImMDTT和O.lmM原釩酸鈉的激酶緩沖液將酶稀釋至終濃度50pg/ml。這些反應(yīng)中所用的底物是衍生自組蛋白HI(得自Amersham，UK)的生物素化肽。使底物在水浴中融化，用激酶緩沖液稀釋至2pM?；衔镉?0%DMSO稀釋至所需濃度。對(duì)于每個(gè)激酶反應(yīng)，將20nl50)Lig/ml的酶溶液(l叫酶)與20nllpM的底物溶液混勻后，與10ixl經(jīng)稀釋的化合物在各孔中混合用于測定。加入50|xl4^MATP和1juCi33P-ATP(得自Amersham，UK)后開始激酶反應(yīng)。使反應(yīng)在室溫下進(jìn)行1小時(shí)。通過加入200pl舍有0.1%TritonX-IOO、ImMATP、5mMEDTA和.5mg/ml鏈霉抗生物素包被的SPA微珠(得自Amersham，UK)的終止鄉(xiāng)爰沖液15分鐘，終止反應(yīng)。然后用Filtermate通用收獲器(Packard/PerkinElmerLifeSciences),將SPA微珠俘獲在96孔GF/B濾膜板(Packard/PerkinElmerLifeSciences)上。通過將微珠用2MNaCl洗滌2次后再用含有1%磷酸的2MNaCl洗滌2次，消除非特異性信號(hào)。然后用TopCount96孔液體閃爍計(jì)數(shù)器(得自Packard/PerkinElmerLifeSciences)，測定放射強(qiáng)度信號(hào)。ICso測定由所產(chǎn)生的抑制數(shù)據(jù)繪制劑量-反應(yīng)曲線，各測定一式兩份，數(shù)據(jù)得自抑制化合物8個(gè)點(diǎn)的連續(xù)稀釋。將處理樣品的CPM除以未處理樣品的CPM計(jì)算出。/o激酶活性，以化合物濃度對(duì)％激酶活性作圖。為了得出ICso值，劑量-反應(yīng)曲線進(jìn)而用標(biāo)準(zhǔn)S形曲線擬合，通過非線形回歸分析推出ICso值。由此而得的本發(fā)明所選化合物的ICso值見上表l。這些激酶活性是用上述測定得出的。上述測定值所證實(shí)，本發(fā)明化合物可具有良好的Chkl抑制性質(zhì)。實(shí)施例-第B組(SETB)化學(xué)合成NMR"i普由Mercuryplus400MHzNMRSpectrometer(Varian)4f到，使用CDC13或DMSO-d6作為溶劑。使用Agilent1100SeriesLC/MSD(四極，API-ES(常壓界面電噴霧))得到LC-MS數(shù)據(jù)，毛細(xì)管電壓設(shè)定為3500V并以正模式進(jìn)行。經(jīng)反相色譜進(jìn)行純化，純化條件如下C18反相柱、洗脫梯度為0.1%三氟乙酸/水至乙腈/水(95:5)，流速20mL/分鐘。使用UV(Gilson,254nm)或質(zhì)譜(Agilent1100SeriesLC/MSDmodelSL)收集樣品信號(hào)。用Biotage儀器使用QuadUVSystem(P/N07052)完成的正相硅膠色譜(使用KP-SIL32-63um柱，60A帶有快速注射筒(cartridge)12+M或25+M)。在實(shí)施例中使用的縮寫<table>tableseeoriginaldocumentpage80</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage81</column></row><table>\根據(jù)流程l中所列合成路線制備式(I)的代表性化合物，其中G為-C(O)隱OH。流程1<formula>formulaseeoriginaldocumentpage82</formula>2.水解.酯實(shí)施例1:7-聯(lián)苯基-4-基-5-(4-氯苯基)吡唑[l,5a]嘧啶-2-曱酸乙酯步驟1:5-(4-氯苯基)-7-氧代-4,7-二氫吡唑并[l,5a]嘧啶-2-甲酸乙HOAc,厶，60%Et02C'將4-氯苯甲酰基乙酸甲酯(2.13g，10mmol)與5-氨基-3』比峻甲酸乙酯(1.55g,10mmol)在冰醋酸中的混合物加熱至回流保持20小時(shí)。在反應(yīng)過程中形成有光澤的沉淀。將該反應(yīng)混合物冷卻，用乙酸乙酯稀釋并過濾。沉淀用乙酸乙酯洗滌，得到灰白色有光澤的固體(1.92g，60%)。1HNMR(400MHz,DMSO-d6)612、8(bs,1H),7.87(d,2H,J=6.4Hz),7.67(d,2H，J-6,4Hz),6.55(s,1H〉，6.21(s,1H)，4.34(q,2H,J-6.8Hz),1,35(t，3H,J=6.8Hz).C15H13C1N303:MS計(jì)算值318.057[M+H]+;MS實(shí)測值318.0。步驟2:7-氯-5-(4-氯苯基)吡唑并[l，5a]嘧啶-2-甲酸乙酯往5-(4-氯-苯基)-7-氧代-4,7-二氫-吡唑并[l,5a]嘧啶-2-甲酸乙酯(1.92g，6.04mmol)和N,N-二乙基苯胺(2.4mL,15.1mmol)的懸浮液中加入磷酰氯(6mL)。將該反應(yīng)混合物加熱至回流保持3小時(shí)。將該反應(yīng)混合物冷卻固化。將該反應(yīng)混合物溶解在二氯甲烷中并濃縮。將該固體溶解在二氯甲烷中并依次用冷水(3xl00mL)、飽和碳酸氫鈉溶液(lxlOOmL)和鹽水洗滌。有機(jī)層經(jīng)硫酸鈉干燥并濃縮。經(jīng)柱層析純化(Si02,1%乙酸乙酯/二氯甲烷)，得到黃色固體(1.53g，75%)。7.51(d,2H,J=8.8Hz),7.33(s,1H),4.53(q,2H,J=7,2Hz),1.49(t，3H,J=6.8Hz).C]5H]2C12N302:MS計(jì)算值336.023[M+H]+;MS實(shí)測值336.0。步驟3:7-聯(lián)苯基-4-基-5-(4-氯苯基)吡唑并[l，5a]嘧啶-2-甲酸乙酯<formula>formulaseeoriginaldocumentpage83</formula>往裝有7-氯-5-(4-氯-苯基)-吡唑并卩,5a]嘧啶-2-曱酸乙酯(50mg，0.15mmol)、4-(苯基)苯基硼酸(36mg，0.18mmol)、碳酸鈉(35mg，0.33mmol)和四(三苯基膦)合鈀(O)(l7mg，0.015mmol)的反應(yīng)管中加入曱苯(5mL)和水(lmL)。將反應(yīng)管抽真空并用氬氣吹掃。將該反應(yīng)混合物加熱至回流過夜。在冷卻后，該反應(yīng)混合物用乙酸乙酯(10mL)和水(15mL)稀釋。將有機(jī)層分離，用飽和氯化鈉溶液洗滌，經(jīng)>琉酸鈉干燥并濃縮。經(jīng)柱層析純化(Si02，二氯曱烷)，得到淺黃色固體(53mg,78%)。-6.4Hz),8.12(d,2H，J=6.8Hz),7.81(d,2H,J=6.4Hz),7.68(d,2H,J=7,2Hz),7.55-7.40(m,8H),7.31(s,1H),6.90(d,1H,J=8.8Hz)，4.49(q,2H,J=7.2Hz),1.47(t,3H,J-6.8Hz).C27H21C,2:MS計(jì)算值454.12[M+H]+;MS實(shí)測值454.0。實(shí)施例2:5-(4-氯苯基-7-(2-氯苯基)吡唑并[l,5a]嘧啶-2-甲酸乙酯往裝有7-氯-5-(4-氯-苯基)-吡唑并[l,5a]嘧啶-2-曱酸乙酯(50mg，0.15mmol)和在二曱基甲酰胺(2mL)中的四(三苯基膦)合鈀(O)(l7mg,0.015mmol)的反應(yīng)管中加入在THF(0.38mL,0.19mmol)中的0.5M2-氯苯基碘化鋅。將反應(yīng)管抽真空并用氬氣吹掃。將該反應(yīng)混合物加熱至60。C過夜。在冷卻后，該反應(yīng)混合物用乙酸乙酯(10mL)和飽和氯化銨溶液(10mL)稀釋。將有機(jī)層分離，用水和飽和氯化鈉溶液洗滌，經(jīng)硫酸鈉干燥并濃縮。經(jīng)柱層析純化(Si02,二氯曱烷)，得到淺黃色固體(51mg,66%),純度為80%。HNMR(400MHz,CDCI3)S8.23(d，2H.J(Ph3P)4Pd,DMF,60。C,66%~^84，HNMR(400MHz,CDCI3)58.08(d,2H,J-8.8Hz)'7.70-7.45(m'6H),7.40(s,1H)7.30(s，1H),4.45(q,2H，J-6,8Hz),1.43(t,3H，J=6.8Hz).C21H16C12N302:MS計(jì)算值412.05[M+H]+;MS實(shí)測值412.0。實(shí)施例3:5-(4-氯苯基-7-(2-氯苯基)吡唑并[l,5a]嘧啶-2-曱酸BnNMe3OH,THF54%N-N、/;室溫下，往在四氫呋喃(3mL)中的5-(4-氯-苯基-7-(2-氯-苯基)-吡唑并[l，5a]嘧啶-2-甲酸乙酯(50mg,0.12mmol)中加入氫氧化芐基三甲基銨(2.2M，在曱醇中，222pL，0.49mmo1)。在加入對(duì)曱苯磺酸樹脂(275mg，約4.5當(dāng)量)前，將該反應(yīng)混合物攪拌1.5小時(shí)。將該反應(yīng)混合物攪拌l小時(shí)。將該混合物過濾并濃縮。經(jīng)制備HPLC層析純化，得到灰白色固體(25mg，54%)。該化合物對(duì)應(yīng)表1中編號(hào)106的化合物。1HNMR(400MHz,DMSO-d6)513.45(bs,1H),8.33(d'2H,J=6.4Hz),7.99(s,1H),7.80-7.6(m,6H),7,25(s,1H).C19H12C12N302:MS計(jì)算值384.02[M+H]+;MS實(shí)測值384.0。實(shí)施例4:合成吡唑并[l,5a]嘧咬基氨基衍生物步驟1:在60。C下，將在DMF(1.5mL)中的7-氯吡唑并[l,5a]嘧啶(0.05mmo1)、胺(0.05mmol)和碳酸鉀(0.1mmol)的混合物攪拌16小時(shí)。讓該反應(yīng)冷卻至室溫，隨后用乙酸乙酯(10mL)稀釋。得到的混合物用水(x2)和飽和的鹽水萃取。乙酸乙酯層經(jīng)無水硫酸鈉干燥并濃縮。C23H21C1N402:MS(+,30V)計(jì)算值421.14[M+H〗+;MS(+，30V)實(shí)測值421.2。步驟2:往在THF(1.5mL)和水(0.5mL)中的吡唑并[l,5a]嘧啶氨基化合物(0.05mmol)中加入1MLiOH(20(Hd，0.2mmol)并在室溫下攪拌16小時(shí)。該反應(yīng)用乙酸乙酯(10mL)稀釋并酸化至pH為2，將其轉(zhuǎn)移至分液漏斗中并分層。有機(jī)層用飽和鹽水洗滌，經(jīng)無水硫酸鈉干燥并濃縮。對(duì)于以上氨基為DL-a-曱基芐基胺的情況(編號(hào)78的化合物)C21H17C,2:MS(+,30V)計(jì)算值393.10[M+H〗+;MS(+,30V)實(shí)測值393.0。實(shí)施例5:合成氨基和苯胺基吡唑并[l,5a]嘧咬衍生物步驟1:<formula>formulaseeoriginaldocumentpage87</formula>在6(TC下，將在DMF(1.5mL)中的7-氯吡唑并[1,5a]嘧咬(0.05mmo1)、苯胺(0.05mmol)和碳酸鉀(0.1mmol)的混合物攪拌16小時(shí)。讓該反應(yīng)冷卻至室溫，隨后用乙酸乙酯(10mL)稀釋。得到的混合物用水(x2)和飽和鹽水萃取。乙酸乙酯層經(jīng)無水硫酸鈉干燥并濃縮。C21H17C1N402:MS(+,30V)計(jì)算值393.10[M+H]+;MS(+,30V)實(shí)測值393.0。步驟2:<formula>formulaseeoriginaldocumentpage87</formula>對(duì)于X-H(編號(hào)76的化合物)C19H13C1N402:MS(+,30V)計(jì)算值365.07[M+H]MS(+,30V)實(shí)測值365.0。在室溫、氬氣氣氛下，往節(jié)基4-氯苯基酮(230mg，lmmol)在無水甲苯(10mL)中的溶液中滴力。N,N-二曱基曱酰胺二甲基縮醛(DMFDMA)(l59^il,1,2mmo1)。在12小時(shí)后，加入DMFDMA(4pl，0.03mmol)并將該混合物繼續(xù)加熱24小時(shí)。隨后在5天中，每天加入DMFDMA(4nl，0.03mmol)并每天將溫度升高約15°C。在第五天，當(dāng)反應(yīng)完成(TLC監(jiān)測)，除去溶劑，得到紅色/褐色油狀的烯氨基酮(285mg,100%)。1HNMR(CDCI3,400MHz):57.35{s,1H),7.38(m,2H),7.25(m,6H),7.16(m,2H),2.8(s,6H).C17H16C1N0:MS(+，30V)計(jì)算值286.09[M+H]+;MS(+，30V)實(shí)測值286.05。步驟2:往在乙酸(10mL)中的烯^J^酮化合物(285mg,lmmol)中力口入3-氨基-5-甲氧基羰基(carbemethoxy)-p比唑(141mg，lmmol)。將該反應(yīng)加熱至118。C并在118。C下攪拌16小時(shí)。將該反應(yīng)混合物濃縮。吡唑并買施例6:合成6,7-二芳基吡唑并[l,5a]嗜咬曱酸類化合物步驟1:嘧啶產(chǎn)物經(jīng)柱層析純化(Si02,5。/。乙酸乙酯/DCM),得到白色固體(335mg，89%)。broad為寬峰。1H國R(CDCI3,400MHz):58.66(sbroad,1H),7.44(m,2H),7.35(m,6H),7.17(m,2H),3.98(s,3H〉.MS(+,30V)C20H14ClN3O2:計(jì)算值364.08[M+H]+;實(shí)測值364.05。步驟3:往在THF(5mL)中的7-(4-氯-苯基)-6-苯基-吡唑并[l,5]嘧啶-2-甲酸甲酯(98mg,0.27mmol)中加入氫氧化千基三甲基銨(在甲醇中，40重量。/。溶液)(491pl，l.lmmol)并將該混合物于室溫下攪拌16小時(shí)。TLC(DCM/MeOH/AcOH-90:10:l)表明反應(yīng)完成。該反應(yīng)混合物用乙酸乙酯(10mL)稀釋并用1NHC1酸化至pH為2。轉(zhuǎn)移至分液漏斗并將層分離，有機(jī)層用鹽水(xl)洗滌，經(jīng)硫酸鈉干燥并濃縮。吡唑并嘧啶產(chǎn)物經(jīng)PREP-LC純化，得到淺黃色固體(46mg，49%)。該化合物對(duì)應(yīng)表l中編號(hào)236的化合物。1HNMR(DMSO'400MHz):58.74(s,1H),7.49(s,4H),7,28(m'6H).MS(+,30V)計(jì)算值350.08[M+H]+;實(shí)測值350.05。實(shí)施例7:合成6,7-二芳基吡唑并[l,5a]嘧。定四唑步驟1:<formula>formulaseeoriginaldocumentpage90</formula>在室溫、氬氣氣氛下，往千基3-苯氧基苯基酮(523mg,1.8mmo1)在無水甲苯(5mL)中的溶液中滴加叔丁氧基雙(二甲基氨基)甲烷(524fil，2.54mmo)。將該反應(yīng)混合物加熱至60。C保持16小時(shí)。TLC表明反應(yīng)完全。除去溶劑，得到紅色/褐色油狀的烯氨基酮(enaminoketone)(617mg,100%)。1HNMR(CDCIs,400MHz):57.39(s,1H〉，7.25(m，12H),6.99(dd,2H),2.75(sbroad,6H).C23H2lN02:MS(+,30V)計(jì)算值344.16[M+H]+;MS(+,30V)實(shí)測值344.05。步驟2:<formula>formulaseeoriginaldocumentpage90</formula>往在乙酸(5mL)中的烯氨基酮化合物(l50mg,0.44mmo1)中加入3-氨基吡唑-4-曱腈(48mg,0.44mmol)。將該反應(yīng)加熱至118。C并在118。C下攪拌16小時(shí)。將該反應(yīng)混合物濃縮。吡唑并嘧啶產(chǎn)物經(jīng)柱層析純化(Si。2,5。/。乙酸乙酯/DCM)，得到白色固體(117mg,68%)。1HNMR(CDGI3,400MHz):88.82(s,1H)，8,38(s,1H),7.45(m,4H),7.31(m，3H),7.15《m，4H),6.85(t,1H),6.78(dd,2H).C25H16N40:MS(+,30V)計(jì)算值389.13[M+H]+;MS(+,30V)實(shí)測值389.05。步驟3:<formula>formulaseeoriginaldocumentpage91</formula>往在二曱苯(5mL)中的吡唑并嘧啶曱腈(l02mg，0.26mmo1)中加入疊氮三丁基錫(144pl，0.52mmo1)。在氬氣氣氛下，將得到的混合物加熱至ll(TC保持60小時(shí)。在60小時(shí)后，將溶劑蒸去，加入乙腈(10mL)并用己烷(8xlOmL)洗滌該溶液。乙腈相經(jīng)無水硫酸鈉干燥并濃縮，得到黃色膠狀的所需吡唑嘧啶錫保護(hù)的四唑(187mg，98%)。往甲醇(5mL)中加入該黃色膠狀物。往得到的溶液中加入氯化氫(l.OM溶液，在乙醚中)(lmL,lmmol)并在室溫下攪拌3小時(shí)。該反應(yīng)混合物用乙酸乙酯(10mL)稀釋并用飽和的碳酸氫鈉水溶液(x2)和鹽水(xl)洗滌。有機(jī)層經(jīng)疏酸鈉干燥并濃縮。殘余物用己烷研磨，得到黃色固體狀的游離四唑產(chǎn)物(10.7mg，10%)。該產(chǎn)物對(duì)應(yīng)表1中編號(hào)250的化合物。1HNMR(CDCI3,400MHz):S8.85(s,1H),8.75(s,1H),7,4(m,6H)，7.28(m，1H),7.15(m,5H)，6.95(t,1H),6.82(dd，2H).C23H17N70:MS(+,30V)計(jì)算值432.15[M+H]+;MS(+,30V)實(shí)測值432.05。實(shí)施例8:合成5-氨基-lH-吡唑-3-曱酸甲酯<formula>formulaseeoriginaldocumentpage92</formula>往25.8g(164mmol)5-硝基-lH-吡唑-3-曱酸在250mL無水曱醇(MeOH)中的溶液中滴加10.3mL(141mmol)亞硫酰氯，并將得到的混合物加熱至回流過夜，隨后冷卻至室溫，濃縮，得到27.6g(產(chǎn)率為98%)固體狀的5-硝基-lH-吡唑-3-甲酸甲酯。1HNMR(CDCI3).S6.0.8s,1H),3.91(s,3H).將10.25g(60mmol)5-硝基-lH-吡唑-3-甲酸甲酯溶解在75mL乙酸(AcOH)和75mL四氫呋喃(THF)中。在真空和氬氣循環(huán)后，加入2.05g(20o/o重量)4巴碳(Pd/C，10重量％)，再將該混合物脫氣并由氣嚢充入氫氣。在室溫、氫氣氣氛下，將該反應(yīng)混合物攪拌2天。通過薄層層析分析(TLC)表明起始原料完全轉(zhuǎn)化為產(chǎn)物。隨后將該混合物濃縮，往300mL乙醚中加入得到的紫色油狀物，濾除細(xì)小分散的紫色雜質(zhì)，隨后將乙醚濾液蒸發(fā)，得到7.23g(產(chǎn)率為85%)灰白色固體狀的5-氨基-lH-吡唑-3-曱酸曱酯，如HNMR所示；使用HNMR確定其結(jié)構(gòu)。實(shí)施例9:合成2-{[5-(4-氯-苯基)-7-(4-苯氧基-苯基)-吡唑并[1,5-3]嘧啶-2-羰基]-氨基}-3-羥基-丙酸往10mg(0,023mmol)5-(4-氯-苯基)-7-(4-苯氧基-苯基)-吡唑并[1,5-a]嘧啶-2-甲酸在lmL二甲基甲酰胺(DMF)中的溶液中加入0,016mL(0.068mmol)二異丙基乙基胺(DIEA)、6.3mg(0.025mmol)L-絲氨酸-(tBu)OtBu'鹽酸鹽、少量的二曱基氨基吡啶(DMAP催化劑)晶體，隨后加入10.3mg(0.027mmol)HATU，并將得到的混合物于室溫下攪拌3小時(shí)。隨后該反應(yīng)混合物用乙酸乙酯稀釋，用0.1N氬氧化鈉溶液、水和鹽水洗滌。有機(jī)層經(jīng)-危酸鈉干燥并濃縮，得到3-叔丁氧基-2-{[5-(4-氯-苯基)-7-(4-苯氧基-苯基)-吡唑并[1,5^]嘧啶-2-羰基]-氨基}-丙酸叔丁酯，其無需進(jìn)一步純化用于下一步驟。3-叔丁氧基-2-U5-(4-氯-苯基)-7-(4-苯氧基-苯基)-p比唑并[l,5-a]嘧啶-2-羰基]-氨基}-丙酸叔丁酯的樣品用lmL三氟乙酸(TFA):H20(95:5)處理，并將得到的溶液于室溫下攪拌1.5小時(shí)，在這之后通過加入2mL乙腈水(l:l)使其猝滅。隨后將該混合物濃縮并低壓凍干，得到11.2mg(經(jīng)兩步驟產(chǎn)率為93%)固體狀的所需的2-{[5-(4-氯-苯基)-7-(4-苯氧基-苯基)-吡唑并[1,5-3]嘧啶-2-羰基]-氨基}-3-羥基-丙酸，其'HNMR諳與其結(jié)構(gòu)一致。對(duì)于編號(hào)260的化合物C28H21C,5:LC-MS計(jì)算值529.12[M+H+;LC-MS實(shí)測值529.1。實(shí)施例10:合成7-氧代-5-苯基-4,7-二氫-吡唑并[l,5-a]嘧啶-2-曱酸和5-(2-氯-苯基)-7-氧代-4,7-二氫-吡唑并[l,5-a]嘧啶-3-曱酸將0.56mL(3.22mmol)3-氧代-3-苯基-丙酸乙酯和0.50g(3.22mmol)5-絲-2H-吡唑-3-曱酸乙酯在4mL乙酸(HOAc)中的溶液加熱回流4小時(shí)，在這期間形成沉淀。將沉淀濾出，用乙酸乙酯洗滌并干燥，得到0.51g(產(chǎn)率為56%)固體狀的7-氧代-5-苯基-4,7-二氫-吡唑并[l,5-a]嘧啶-2-曱酸乙酯，如'HNMR所示；C15H13N303:LC-MS計(jì)算值284.1[M++H]+;LC-MS實(shí)測值284.1。往5011^(0.1811111101)7-氧代-5-苯基-4,7-二氬-吡唑并[1，5^]嘧咬-2-曱酸乙酯在4mL乙醇(EtOH)中的溶液中加入26mg(0.40mmol)氬氧化鉀(KOH)并將得到的混合物加熱回流60小時(shí)。隨后該反應(yīng)混合物用在二嗯烷中的4MHC1溶液酸化，并用乙酸乙酯稀釋。有機(jī)萃取物用水和鹽水洗滌，經(jīng)硫酸鈉干燥并濃縮，得到所需7-氧代-5-苯基-4,7-二氬-吡唑并[l,5-a]嘧啶-2-曱酸，如下所示；C13H9N303:LC-MS計(jì)算值256.06[M++H]+;實(shí)測值256.1。該產(chǎn)物對(duì)應(yīng)編號(hào)619的化合物。采用相同的合成順序由3-(2-氯-苯基)-3-氧代-丙酸乙酯開始，并與5-氨基-lH-吡唑-4-甲酸乙酯環(huán)化，合成5-(2-氯-苯基)-7-氧代-4,7-二氬-吡唑并[l,5-a]嘧啶-3-甲酸(編號(hào)620的化合物)。實(shí)施例11:合成6-(4-芐氧基-苯基H-異丁基-3-(lH-四唑-5-基)-吡唑并[l,5-a]嘧咬如上所述經(jīng)過在文中其他地方描述的用于類似結(jié)構(gòu)化合物的轉(zhuǎn)化完成6-(4-千氧基-苯基)-7-異丁基-3-(lH-四唑-5-基)-吡唑并[l,5-a]嘧啶(410)的合成。以相同的方法合成在7位經(jīng)纟務(wù)飾的其他化合物。實(shí)施例12:合成7-異丙基-6-甲基-3-(lH-四唑-5-基)-吡唑并[l,5-a]嘧咬采用前述用于類似結(jié)構(gòu)化合物的已知轉(zhuǎn)化方法，如上所述完成7-異丙基-6-甲基-3-(lH-四唑-5-基)-吡唑并[l,5-a]嘧啶(390)的合成，由市售的2-曱基-戊-3-酮作為原料。采用相同合成順序制備7-乙基-3-(lH-四唑-5-基)-吡唑并[l,5-a]嘧啶(392)、7-環(huán)己基-6-甲基-3-(lH-四唑-5-基)-吡唑并[l，5-a]嘧啶(391)和7-環(huán)己基-6-甲基-吡唑并[l,5-a]嘧啶-3-曱酸(394)。實(shí)施例13:合成6-(4-芐氧基-苯基)-7-(四氫-噻喃-4-基)-3-(lH-W唑-5-基)-吡唑并[I,5-a]嘧啶根據(jù)經(jīng)改動(dòng)的文獻(xiàn)方法(Helv.Chim.Acta1997,80,1528)，往水冷卻的在1OOmL1,2-二甲氧基乙烷(DME)中的2.0g(l7.2mmol)四氫-噻喃-4-酮和3.69g(18.9mmol)l-異氰基甲磺?；?4-甲基-苯中加入34.4mL(34.4mmol)叔丁醇鉀(在叔丁醇中的1M溶液)，并將得到的混合物于室溫下攪拌3小時(shí)。該反應(yīng)混合物用乙醚稀釋，用飽和的碳酸氪鈉溶液洗滌，經(jīng)硫酸鈉干燥并濃縮，得到2.05g(產(chǎn)率為93%)所需四氫-瘞喃-4-曱腈，如iHNMR所示。往6.2g(155mmol)氫氧化鈉(NaOH)在30mLEtOH和15mL水中的溶液中加入1.97g(15.5mmol)四氫-噻喃-4-甲腈在5mL乙醇(EtOH)中的溶液，并將得到的混合物加熱回流4小時(shí)。將該反應(yīng)混合物在水浴中冷卻，用濃鹽酸酸化至pH為2，隨后濃縮，得到沉淀，過濾，得到1.36g(60。/。)所需四氫-噻喃-4-曱酸，為褐色晶狀固體，如HNMR所示。往冰冷卻的1.36g(9.32mmol)四氫-噻喃-4-曱酸在25mL二氯曱烷(DCM)中的溶液中滴加1.1mL(12.6mmol)草酰氯，并將得到的混合物于0。C下攪拌2小時(shí)。隨后加入2L二曱基曱酰胺(DMF，催化劑)，并將該反應(yīng)混合物于室溫下攪拌2小時(shí)，隨后濃縮，得到1.43g(93。/。)褐色油狀的所需四氬-噻喃-4-曱酰氯，如'HNMR所示。該產(chǎn)物無需進(jìn)一步純化直接用于下一步驟來制備6-(4-千氧基-苯基)-7-(四氫-噻喃一4-基)-3-(lH-四唑-5-基)-吡唑并[l,5-a]嘧啶(以下編號(hào)375的化合物)。<formula>formulaseeoriginaldocumentpage97</formula>實(shí)施例14:合成6-(4-芐氡基-苯基)-7-(四氫-吡喃-4-基)-3-(lH-四峻-5-基)-吡唑并[1，5-a]嘧咬使用相同的實(shí)驗(yàn)方法，合成6-(4-芐氧基-苯基)-7-(四氫-吡喃-4-基》3-(lH-四唑_5_基)-吡唑并[1,Sa]嘧啶。<formula>formulaseeoriginaldocumentpage97</formula>-苯基)-7-嗎啉-4-基-3-(111-四唑-5-基)-吡唑并[l,5-a]嘧啶往15g(90.3mmol)4-羥基笨基乙酸曱酯在25mL二甲基甲酰胺(DMF)中的溶液中加入32.4g(99.3mmo1)碳酸銫，隨后加入13.4mL(112.9mmol)千基氯(BnBr)，并將得到的非均質(zhì)混合物于室溫下攪拌72小時(shí)。將該反應(yīng)混合物過濾，固體用乙酸乙酯洗滌，隨后將合并的有機(jī)萃取物濃縮，得到殘余物，其經(jīng)硅膠層析純化(在二氯甲烷中的25%己烷)，得到19.1g(產(chǎn)率為83%)所需(4-千氧基-苯基)-乙酸甲酯，i一HNMR所示；Ci6H6〇3:LC-MS計(jì)算值257.11[M++H]+;LC-MS實(shí)測值257.2。根據(jù)經(jīng)改動(dòng)的文獻(xiàn)方法(Wasserman,H.H.;Ives，J.L.J.Org.Chem.1985,50,3573-3580),用氬氣吹掃1.0g(3.9mmol)(4-芐氧基-苯基)-乙酸甲酯在4mL甲苯中的溶液。往該溶液中加入0.842mLg(5.5mmol)甲氧基雙(二甲基氨基)甲烷，并在65'C、氬氣氣氛下將得到的混合物攪拌過夜。將該反應(yīng)混合物濃縮，得到1.21g所需2-(4-千氧基-苯基)-3-二甲基氨基-丙烯酸曱酯，如！HNMR所示(含痕量的原料)。產(chǎn)物無需進(jìn)一步純化用于下一步驟。在回流下，將1.21g(3.9mmol)2-(4-千氧基-苯基)-3-二曱基氨基-丙烯酸甲酯和0.422g(3.9mmol)5-氨基-lH-吡唑-4-甲腈在5mL乙酸(HOAc)中的溶液加熱過夜，在這期間形成沉淀。將該反應(yīng)混合物冷卻至室溫，用20%乙酸乙酯(在己烷溶液中)稀釋，隨后過濾，得到0.86g(經(jīng)兩步驟產(chǎn)率為65%)6-(4-節(jié)氧基-苯基)-7-氧代-4,7-二氫-吡唑并[l,5-a]嘧啶-3-甲腈，其為棕褐色固體，如1HNMR所示；C20H14N4O2:LC-MS計(jì)算值343.11[M++H]+;98LC-MS實(shí)測值343.1。將0.86g(2,5mmol)6-(4-芐氡基-苯基)-7-氧代-4，7-二氫-吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-曱腈、1.0mL(6.3mmol)N,N-二乙基苯胺和2mL(21.5mmo1)^疇酰氯(POCl3)的漿狀物加熱回流7小時(shí)，在這期間該反應(yīng)混合物變成橄欖色。將該混合物冷卻至室溫，傾入水中，隨后用二氯甲烷/氯仿萃取。合并的萃取物用水(3次)、飽和的碳酸氪鈉溶液(2次)、鹽水洗滌，經(jīng)硫酸鈉千燥并蒸發(fā)，得到殘余物，其經(jīng)硅膠層析純化(二氯甲烷)，得到0.637(產(chǎn)率為70。/。)6-(4-芐氧基-苯基)-7-氯-p比唑并[l,5-a]嘧咬-3-甲腈，如HNMR所示；C20H13ClN4O:LC-MS計(jì)算值361.07[M++H]+;LC-MS實(shí)測值361.1。在5mL微波管中，往500^(0.13811111101)6-(4-千氧基-苯基)-7-氯-吡唑并[l,5-a]嘧啶-3-甲腈在2mL二曱基曱酰胺中的溶液中加入25mg(0.18mmol)碳酸鉀，隨后加入15mg(0.166mmol)嗎啉，并在160。C的微波合成器(Emryssystem,得自PersonalChemistry,300W)中將該混合物加熱5分鐘。由于LC-MS分析表明產(chǎn)物形成，該反應(yīng)混合物用乙酸乙酯稀釋，用鹽水(2次)洗滌，經(jīng)硫酸鈉干燥并濃縮，得到的殘余物使用Gilson經(jīng)反相層^f純化，(在低壓凍干后)得到所需6-(4-芐氧基-苯基)-7-嗎啉-4-基-吡唑并[l,5-a]嘧啶-3-甲腈(純度為90%)，如'HNMR所示；C24H21N502:LC-MS計(jì)算值412.17[M++H]+;LC畫MS實(shí)測值412.1。沖艮據(jù)經(jīng)改動(dòng)的文獻(xiàn)方法(Herr,R.J.Bioorg.Med.Chem.2002,10,3379-3393)，往35mg(0.085mmol)6-(4-千氧基-苯基)-7-嗎啉-4-基-吡唑并[l,5力]嘧啶-3-曱腈在1.5mL甲苯和0.5mL二甲基甲酰胺中的溶液中加入7mg(0.513mmol)三乙胺'鹽酸鹽(Et3N畫HCl)和33mg(0.513mmo1)200680045664.3說明書第90/241頁疊氮化鈉，隨后得到的非均質(zhì)混合物加熱回流72小時(shí)，在這期間每24個(gè)小時(shí)后往該反應(yīng)混合物中加入71mg(0.513mmol)三乙胺.鹽酸鹽(Et3N-HCl)和33mg(0.513mmol)疊氮化鈉。隨后將該混合物冷卻至室溫，過濾，隨后濃縮得到殘余物，其經(jīng)反相層析純化，(在低壓凍干后)得到15mg(產(chǎn)率為38%)固體狀的6-(4-芐氧基-苯基)-7-嗎啉-4-基-3-(lH-四唑-5-基)-吡唑并[l,5-a]嘧啶(370)，如！HNMR所示。(C24H22N802:LC-MS計(jì)算值455.18[M++H]+;LC-MS實(shí)測值455.2。)實(shí)施例16:合成7-環(huán)己基-6-(4-碘-苯基)-吡唑并[l，5-a]嘧啶-3-曱腈HOOC、、MeOOC.、nBuLi/THF、LiPr2NHr"、poOMez、、SOQ2r,'、:、廠、I、乂丄、一、MaCi,OMSO,、、,MeOH-O、人-一6卜、，I-780C->rt1、往5g(19mmol)(4-碘-苯基)-乙酸在50mL甲醇(MeOH)中的溶液中滴加3.5mL(48mmol)亞硫酰氯(SOCl2)，并將得到的混合物于室溫下攪拌36小時(shí)，在這之后薄層層析分析(TLC)表明產(chǎn)物形成。將該混合物濃縮，得到4.5g(產(chǎn)率為86%)淺米色油狀的(4"典-苯基)-乙酸甲酯，如用氬氣吹掃2.88mL(20.5mmol)二異丙基胺(iPr2NH)在50mL四氫呋喃(THF)中的溶液并冷卻至-WC。往該溶液中滴加8.2mL(20.;5mmo1)正丁基鋰(nBuLi)(在己烷中，2.5M溶液)，并在-78。C下將得到的混合物攪拌20分鐘，在這之后滴加4.5g(16.3mmol)(4-碘-苯基)-乙酸甲酯在25mLTHF中的溶液。讓該混合物升至室溫保持40分鐘，隨后將H2NCOOEtH2NpN或HNNOHOAC,Z70QC甲苯其重新冷卻至-78。C，并滴加2.62mL(19.6mmol)環(huán)己烷甲酰氯，隨后讓得到的混合物升至室溫，并在室溫、氬氣氣氛下攪拌過夜。通過加入飽和氯化銨溶液使該反應(yīng)混合物在水上幹滅，隨后用乙酸乙酯萃取。合并的有機(jī)萃取物用水、鹽水洗滌，經(jīng)硫酸鈉干燥并濃縮，得到7g深酒紅色的油狀物，其經(jīng)硅月交層析純化(Biotage;在己烷中的10%乙酸乙酯)，得到5.06g(產(chǎn)率為80%)淺黃色固體狀的所需3-環(huán)己基_2-(4-碘-苯基)-3-氧代-丙酸甲酯，如"HNMR所示(酮烯醇比例為1:2.6)。Ci6H19IO3:LC-MS計(jì)算值387,04[M++H]+;LC-MS實(shí)測值387.0。根據(jù)經(jīng)改動(dòng)的文獻(xiàn)方法(Collins,I等，J.Med.Chem.2002，45,1887-1900),往5.06g(l3.1mmol)3-環(huán)己基-2-(4-捵-苯基)-3-氧代-丙酸曱酯在80rnL二甲基亞砜(DMSO)中的溶液中加入1.53g(26.2mmol)氯化鈉(NaCl)在5.8mL水(^20)中的溶液，并將得到的混合物于15CTC下加熱3小時(shí)，在這期間形成白色固體。將該反應(yīng)混合物冷卻至室溫，將其傾入500mL水中，隨后用乙酸乙酯充分萃取。合并的有機(jī)萃取物用水(3次)、鹽水洗滌，經(jīng)硫酸鈉干燥并濃縮，得到4.13g(產(chǎn)率為96%)黃色固體狀的所需l-環(huán)己基-2-(4-碘-苯基)-乙酮，如'HNMR所示(含痕量雜質(zhì))。產(chǎn)物無需進(jìn)一步純化用于下一步驟。根據(jù)經(jīng)改動(dòng)的文獻(xiàn)方法(Wasserman,H.H.;Ives,J.L.J.Org.Chem.1985,50,3573-3580)，用氬氣吹掃4.13g(12.6mmol)l-環(huán)己基一2-(4-碘-苯基)-乙酮在20mL曱苯中的溶液。往該溶液中加入2.7mL(17.6mmol)甲氧基雙(二甲基氨基)曱烷，并在70°C、氬氣氣氛下將得到的混合物攪拌過夜。將該反應(yīng)混合物濃縮，得到5.07g粗制的l-環(huán)己基-3-二甲基氨基-2-(4-碘-苯基)-丙烯酮，如HNMR所示(含痕量的起始原料)。產(chǎn)物無需進(jìn)一步純化用于下一步驟。將2.55g(最多6.32mmol)粗制的1-環(huán)己基-3-二曱基氨基-2-(4-碘-苯基)-丙烯酮和0.98g(6.32mmol)5-氨基-lH-吡唑-4-甲酸乙酯在30mL乙酸(HOAc)中的溶液加熱回流66小時(shí)，在這期間形成沉淀。將沉淀濾出并丟棄，隨后將乙酸濾液濃縮成固體殘余物，其用乙酸乙酯己烷(l:l)洗滌，干燥，得到1.67g(產(chǎn)率為55%)淺黃色固體狀的7-環(huán)己基_6-(4-碘-苯基)-吡唑并[1,5-3]。密熒-3-甲酸乙酯。1HNMR(CDCIa).S8.57s，1H),8,53s,1H),7.86"7.83(d,J=8.4Hz,2H),7.1-7.06(d,J=8.4Hz,2H),4.46(q，2H，J-7.2Hz),3.31-3.21(m，1H),2.62-2.41(m，2H)，1,87-1.82(m,2H),1.74-1.66(m'3H),1.44(t,3H,J=7.2Hz),1.41-1.21(m,3H).將1.66g(最多4.1mmol)粗制的1-環(huán)己基-3-二曱基M-2-(4-碘-苯基)-丙烯酮和0.44g(4.1mmol)5-M-lH-吡唑-4-曱腈在20mL乙酸(HOAc)中的溶液加熱回流66小時(shí)，在這期間形成細(xì)小分散的沉淀。由于所有試圖濾出沉淀的嘗試均不成功，因此將該反應(yīng)混合物濃縮，得到褐色殘余物，其經(jīng)硅膠層析純化(Biotage;二氯曱烷中的2%乙酸乙酯)，得到1.09g(產(chǎn)率為62%)黃色固體狀的7-環(huán)己基-6-(4-碘-苯基)-吡唑并[l，5-a]嘧啶-3-曱腈。1H,R(CDCI3)鄰.4躬1H)，8.39s,1H),7.88-7.86(d,J-8.4Hz,2H)，7.07-7.05(d,J-8.4Hz,2H),4.13(q,2H,J-7.2Hz),3.28-3.21(m,1H),2.59-2,47(m,2H)，1.87-1.84(m,2H),1.751.65(m,3H),1.28(t，3H,J=7.2Hz),1.39-1.20(m,3H).實(shí)施例17:合成7-環(huán)己基-6-(3'-甲氧基-聯(lián)苯基-4-基)-吡唑并[1，5-a]嘧啶-3-甲酸、7-環(huán)己基-6-(4'-甲磺?；?聯(lián)苯基-4-基)-3-(1H-四唑-5-基)-吡唑并[l,5-a]嘧啶和6-(4-芐基-苯基)-7-環(huán)己基-吡唑并[l，5-a〗嘧咬-3-甲酸將60mg(0.126mmol)7-環(huán)己基-6-(4-碘-苯基)-吡唑并[l，5-a]嘧啶-3-甲酸乙酯、29mg(0.19mmo1,1.5當(dāng)量)3-甲氧基苯基硼酸、5mg(0.0063mmo1,5mol。/。)鈀催化劑和80mg(0.378mmo1，3當(dāng)量)磷酸鉀的混合物置于盤管(carouseltube)中。在真空和氬氣循環(huán)后,加入1,4-二嗨烷(3mL)，并在8(TC、氬氣氣氛下將得到的混合物加熱14小時(shí)，由于LC-MS分析表明仍存在未反應(yīng)的起始原料，加入29mg(0.19mmo1，1.5當(dāng)量)3-曱氧基苯基硼酸、10mg(0.012mmo1，10mol。/o)釔催化劑和80mg(0.378mmo1，3當(dāng)量)磷酸鉀并繼續(xù)加熱24小時(shí)。隨后該反應(yīng)混合物用乙酸乙酯稀釋，經(jīng)小Celite硅藻土墊過濾，經(jīng)^琉酸鈉干燥并蒸發(fā)，得到褐色殘余物(粗制偶合產(chǎn)物)，其經(jīng)硅膠層析純化(Biotage;梯度洗脫2%至5%的乙酸乙酯/二氯甲烷)，得到47mg(產(chǎn)率為82%)所需7-環(huán)己基-6-(3'-甲氧基-聯(lián)苯基-4-基)-吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酸乙酯，如11^1^所示；C28H29N3O3:LC-MS計(jì)算值456.22[M++H]+;1,4-二螺坑8。'C/,氬2)LiOHn"HF/65'C1)(HO)2BPdCI2(dpp0.CH2Cl2/K3PO41,4-二嗯烷80'C/,氬2)Et3N-HCI,NaN3申苯/DMFLC-MS實(shí)測值456.2。往47mg(0.103mmol)7-環(huán)己基-6-(3'-曱氧基-聯(lián)苯基-4-基)-吡唑并卩,5-a]嘧啶-3-甲酸乙酯在3mL四氫呋喃中的溶液中加入0.62mL(0.62mmol)lMLiOH溶液，并將得到的混合物加熱回流過夜。隨后該反應(yīng)混合物用1MHC1溶液酸化至pH為2，隨后用乙酸乙酯萃取。合并的有機(jī)萃取物經(jīng)硫酸鈉干燥并濃縮，得到殘余物，其經(jīng)反相層析純化，(在低壓凍干后)得到15mg(產(chǎn)率為34%)固體狀的7-環(huán)己基-6-(3'-曱氧基-聯(lián)苯基-4-基)-吡唑并[l,5-a]嘧啶-3-甲酸(446)(純度90%),如ifiNMR所示；C26H25N303:LC-MS計(jì)算值428.19[M++H]+;LC-MS實(shí)測值428.2。將65mg(0.15mmol)7-環(huán)己基-6-(4-碘-苯基)-吡唑并[l,5-a〗嘧啶-3-曱腈、45mg(0.225mmo1，1.5當(dāng)量)4-(甲磺?；?苯基硼酸、6mg(0.0075mmo1,5moP/。)釔催化劑和95mg(0.45mmo1，3當(dāng)量)磷酸鉀的混合物置于盤管中。在真空和氬氣循環(huán)后，加入1,4-二嗯烷(3mL),并在80。C、氬氣氣氛下將得到的混合物加熱14小時(shí)，由于LC-MS分析表明仍存在未反應(yīng)的起始原料，因此加入45mg(0.225mmo1,1.5當(dāng)量)4-(甲磺?；?苯基硼酸、12mg(0.015mmo1，10mom)鉭催化劑和95mg(0.45mmo1，3當(dāng)量)磷酸鉀并繼續(xù)加熱24小時(shí)。隨后該反應(yīng)混合物用乙酸乙酯稀釋，經(jīng)小Celite硅藻土墊過濾，經(jīng)硫酸鈉干燥并蒸發(fā)，得到褐色殘余物(粗制偶合產(chǎn)物)，其經(jīng)硅膠層析純化(Biotage;梯度洗脫二氯曱烷中的2%乙酸乙酯至二氯曱烷中的10%乙酸乙酯)，得到42mg(產(chǎn)率為62%)所需7-環(huán)己基-6-(4'-曱磺酰基-聯(lián)苯基-4-基)-吡唑并[l,5-a]嘧啶-3-甲腈，如HNMR所示；C26H24N402S:LC-MS計(jì)算值457.16[M++H]+;LC-MS實(shí)測值457.1。往42mg(0.092mmol)7-環(huán)己基-6-(4'-甲磺?；?聯(lián)苯基-4-基)-吡唑并[1，5-a]嘧啶-3-曱腈在1mL曱笨和1.2mL二曱基曱酰胺(DMF)中的溶液中力。入76mg(0.55mmo1)三乙胺鹽酸鹽(Et3N-HCl)和36mg(0.55mmo1)疊氮化鈉并將纟尋到的非均質(zhì)混合物于12(TC下加熱72小時(shí)，在這期間每24小時(shí)后往該反應(yīng)混合物中加入76mg(0.55mmo1)三乙胺'鹽酸鹽(Et3N-HCl)和36mg(0.55mmol)疊氮化鈉。隨后將該混合物冷卻至室溫，過濾，隨后濃縮得到殘余物，其經(jīng)反相層析純化，(在低壓凍干后)得到7mg(產(chǎn)率為15%)白色固體狀的7-環(huán)己基-6-(4'-甲磺醜基-聯(lián)苯基-4-基)-3-(lH-四唑-5-基)-吡唑并[l,5-a]嘧啶(90。/。純度，編號(hào)443的化合物)，如JHNMR所示；C26H25N702S:LC-MS計(jì)算值500.18[M++H]+;LC-MS實(shí)測值500.2。根據(jù)經(jīng)改動(dòng)的文獻(xiàn)方法(Suzuki,A.等TetrahedronLett.1986,27,6369-6372)，將57mg(0.12mmol)7-環(huán)己基-6-(4-碘-苯基)國吡唑并[l,5-a]嘧啶-3-甲酸乙酯和5mg(0.006mmo1，5moiy。)4巴催化劑的混合物置于盤管中。在真空和氬氣循環(huán)后，加入四氫呋喃(THF)(2mL)，隨后加入0.29mL(0.144mmo1,1.2當(dāng)量)B-芐基-9-BBN(0.5M溶液，在THF中)和0.12mL(0.36mmo1，3當(dāng)量)3NNaOH溶液，隨后在回流、氬氣氣氛下將得到的混合物加熱過夜。由于LC-MS分析表明仍存在未反應(yīng)的起始原料，因此力口入0.12mL(0.06mmol)B-千基-9-BBN、5mg(0.006mmo1，5molo/o)把催化劑和0.12mL(0.36mmol)3NNaOH溶液并繼續(xù)加熱24小時(shí)。隨后該反應(yīng)混合物用乙酸乙酯稀釋，用水洗滌，經(jīng)硫酸鈉干燥，經(jīng)小Cdite硅藻土墊過濾，隨后蒸發(fā)，得到褐色殘余物(粗制偶合產(chǎn)物)，其經(jīng)石圭膠層析純化(Biotage;二氯甲烷中的2%乙酸乙酯)，得到36mg(產(chǎn)率為68%)所需6-(4-千基-苯基)-7-環(huán)己基-吡唑并[l,5-a]嘧啶-3-曱酸乙酯，如iHNMR所示(含痕量雜質(zhì))；C28H29N302:LC-MS計(jì)算值440.23[M++H]+;LC-MS實(shí)測值440,2。往36mg(0.082mmoI)6-(4-千基-苯基)-7-環(huán)己基-吡唑并[l,5-a]嘧啶-3-曱酸乙酯在3mL四氬呋喃中的溶液中加入0.5mL(0.5mmol)lMLiOH溶液，并將得到的混合物加熱回流過夜。隨后將該反應(yīng)混合物用1MHC1溶液酸化至pH為2，并用乙酸乙酯萃取。合并的有機(jī)萃取物經(jīng)硫酸鈉千燥并濃縮，得到殘余物，其經(jīng)反相層析純化，(在低壓凍干后)得到7mg(產(chǎn)率為21%)固體狀的6-(4-千基-苯基)-7-環(huán)己基-吡唑并[l,5-a]嘧啶-3-甲酸(純度90。/。，編號(hào)444的化合物)，如HNMR所示；C26H25N302:LC-MS計(jì)算值412.19[M++H]+;LC-MS實(shí)測值412.3。實(shí)施例18:合成7-環(huán)己基-6-(4-呋喃-3-基-苯基)-吡唑并[l，5-a]嘧。定-3-甲酸根據(jù)經(jīng)改動(dòng)的文獻(xiàn)方法(SavarinC.;Liebeskind，L.S.Org.Lett.2001,3,2149-2152)，將24mg(0.05mmol)7-環(huán)己基-6-(4-碘-苯基)-吡唑并[l,5-a]嘧啶-3-曱酸乙酯、7mg(0.06mmo1，1.2當(dāng)量)3-呋喃基硼酸、3mg(0.0025mmo1，5mol%)Pd(PPh3)4和12mg(0.06mmo1，1.2當(dāng)量)噻吩-2-曱酸銅(I)(CuTC)的混合物置于Schlenk燒瓶中。在真空和氬氣循環(huán)后，加入四氫呋喃(1.2mL)，并在室溫、氬氣氣氛下將得到的混合物攪拌過夜。該反應(yīng)混合物用水稀釋并用乙酸乙酯萃取。合并的乙酸1乙酯萃取物用鹽水洗滌，經(jīng)小Celite硅藻土墊過濾，經(jīng)硫酸鈉千燥并蒸發(fā)，得到28mg黃色油狀物(;組制偶合產(chǎn)物)，其無需進(jìn)一步純化用于下一步驟；C25H25N303:LC-MS計(jì)算值416.19[M++H]+;LC畫MS實(shí)測值416.2。將以上殘余物置于四氫呋喃(2mL)中并加入0.3mL(0.3mmo1,5當(dāng)量)lMLiOH溶液，隨后在回流下將得到的混合物加熱過夜。隨后該反應(yīng)混合物用乙酸乙酯稀釋，并用INHC1溶液酸化至pH為2。有機(jī)萃取物用鹽水洗滌，經(jīng)硫酸鈉干燥并蒸發(fā)，得到殘余物，其經(jīng)反相層析純化，(在低壓凍干后)得到4mg(產(chǎn)率為20%)白色固體狀的7-環(huán)己基-6-(4-呋喃-3-基-苯基)-吡唑并[l,5-a]嘧啶-3-甲酸(445)(90。/。純度)，如巾-NMR所示；C23H21N303:LC-MS計(jì)算值388.16[M++H]+;LC畫MS實(shí)測值388.1。實(shí)施例19:合成7-環(huán)己基-6-[4-(3-甲氧基-苯氧基)-苯基]-3-(lH-四唑-5-基)-吡唑并[l,5-a]嘧咬<formula>formulaseeoriginaldocumentpage107</formula>采用與用于制備相關(guān)中間體(其中芐氧基(OBn)被碘(I)代替)相同的實(shí)驗(yàn)方法，以該順序合成起始原料。將800mg(1.95mmol)6-(4-卡氧基-苯基)-7-環(huán)己基-吡唑并[l，5-a〗嘧啶-3-甲腈在5mL二氯甲烷(DCVI)中的溶液冷卻至-78。C。往以上冷溶液中加入2.93mL三氯化硼(BCl3)(2.93mmo1,1M的DCM溶液)并在-78。C下將得到的混合物攪拌90分鐘。由于薄層層析分析(TLC)表明仍存在起始原料，因此加入過量的三氯化硼(BCl3)(3當(dāng)量)，隨后在-78。C下該反應(yīng)用5mL曱醇猝滅。讓該混合物升至室溫，加入飽和的碳酸氫鈉溶液，隨后該混合物用DCM萃取。合并的有機(jī)萃取物用水、鹽水洗滌，經(jīng)硫酸鈉干燥，隨后蒸發(fā)，得到754mg灰白色固體，其經(jīng)硅月交層析純化(在DCM中的5%乙酸乙酯)，得到560mg(產(chǎn)率為90%)白色固體狀的所需7-環(huán)己基-6-(4-羥基-苯基)-吡唑并[l，5-a]嘧啶-3-曱腈。C19H18N40:LC-MS計(jì)算值319.15[M++H]+;實(shí)測值319.1。1HNMR(CDCl3)沐53s，1H),8取1H),7.20-7.18(d,J-8.4Hz,2H),7,00-6.98(d,J-8.4HZ,2H),5.43(s,1H,OH),3.34-3.28(m,1H),2.58-2.44(m,2H),1.86-1.82(m,2H),1.74-1.68(m,3H),1.4".18(m,3H〉.將50mg(0.157mmol)7-環(huán)己基-6-(4-羥基-苯基)-吡唑并[l,5-a]嘧啶-3誦曱腈、43mg(0.235mmol)醋酸銅(II)(Cu(OAc)2)、48mg(0.314mmol)3-曱氧基苯基硼酸、0.025mL(0.31mmol)吡啶(pyr)和5mLDCM的水綠色混合物于室溫下攪拌68小時(shí)，同時(shí)暴露在空氣中。該反應(yīng)混合物經(jīng)Celite硅藻土過濾，同時(shí)用乙酸乙酯和氯仿沖洗硅藻土墊。將合并的有機(jī)濾液濃縮成綠色固體殘余物，使其在乙酸乙酯和水間分配，隨后用乙酸乙酯萃取。合并的有機(jī)萃取物用水(3次)、鹽水洗滌，經(jīng)硫酸鈉干燥并蒸發(fā)，得到74mg褐色殘余物，其經(jīng)硅膠層析純化(Biotage;DCM)，得到38mg(產(chǎn)率為58%)無色油狀的所需7-環(huán)己基-6-[4-(3-曱氧基-苯氧基)-苯基]-吡唑并[l,5-a]嘧啶-3-甲腈，如^-NMR所示；C26H24N402:LC-MS計(jì)算值425.19[M++H]+;LC-MS實(shí)測值425.1。通過該文獻(xiàn)其他地方描述的實(shí)驗(yàn)方法，將7-環(huán)己基-6-[4-(3-曱氧基-苯氧基)-苯基]-吡唑并[l,5-a]嘧啶-3-甲腈轉(zhuǎn)化為相應(yīng)的四唑7-環(huán)己基-6-[4-(3-甲氧基-苯氧基)-苯基]-3-(lH-四唑-5-基)-p比唑并[l,5-a]嘧啶(301)。實(shí)施例20:合成7-環(huán)己基-6-[4-(2,4-二曱基-嗥唑-5-基曱氧基)-苯基]-3-(lH-四唑-5-基)-吡唑并[l,5-a]嘧啶<formula>formulaseeoriginaldocumentpage109</formula>往水冷卻的40mg(0.13mmol)7-環(huán)己基-6-(4-羥基-苯基)-吡唑并[1,5力]嘧啶-3-甲腈在3mL四氫呋喃(THF)中的混合物中加入74mg(0.52mmol)(2,4-二甲基-噻唑-5-基)-甲醇、136mg(0.52mmol)三苯基膦(PPh3),隨后加入0.102mL(0.52mmol)偶氮二甲酸二異丙酯(DIAD)并讓該混合物升至室溫并在室溫下攪拌過夜。隨后將該反應(yīng)混合物濃縮，殘余物經(jīng)硅膠層析純化(Biotage;在DCM中的10%乙酸乙酯)，得到所需7-環(huán)己基-6-[4-(2,4-二曱基-噻唑-5-基甲氧基)-苯基]-吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-曱腈，如^-NMR所示；C25H25N5OS:LC-MS計(jì)算值444.18[M++H]+;LC-MS實(shí)測值444.2。通過其他地方描述的方法，將7-環(huán)己基-6-[4-(2,4-二甲基-"塞唑-5-a]嘧咬-3-曱腈轉(zhuǎn)化為相應(yīng)的四唑7-環(huán)己基-6-[4-(2,4-二曱基-噻唑-5-基甲氧基)-苯基]-3-(lH-四唑-5-基)-吡唑并[1,5-a]嘧啶(358)。實(shí)施例21:合成7-環(huán)己基-3-(lH-四唑-5-基)-6-[4-(3-三氟甲基-千氧基)-苯基]-吡唑并[l,5-a]嘧啶往53mg(0.17mmol)7-環(huán)己基-6-(4-羥基-苯基)-吡唑并[l，5-a]嘧啶-3國甲腈在3mL二曱基甲酰胺(DMF)中的溶液中加入72mg(0.22mmo1)碳酸銫(CS2C03)，隨后加入0.034mL(0.22mmol)3-(三氟曱基)-千基溴，得到的非均質(zhì)混合物于室溫下攪拌過夜。該反應(yīng)混合物用水稀釋并用乙酸乙酯萃取，隨后將合并的有機(jī)萃取物濃縮，得到殘余物，其經(jīng)硅膠層析純化(Biotage;DCM),得到65mg(產(chǎn)率為80%)所需7-環(huán)己基_6-[4-(3-三氟甲基-千氧基)-苯基]-吡唑并[1，5-a]嘧啶-3-曱腈，如'HNMR所示；C27H23F3N40:LC-MS計(jì)算值477.18[M++H]+;LC-MS實(shí)測值477.1。通過該文獻(xiàn)其他地方描述的方法，將7-環(huán)己基-6-[4-(3-三氟甲基-卡氧基)-苯基]-吡唑并[l,5-a]嘧啶-3-甲腈轉(zhuǎn)化成相應(yīng)的四唑7-環(huán)己基-3-(11^-四唑-5-基)-6-[4-(3-三氟甲基-芐氧基)-苯基]-吡唑并[1,5-3]嘧啶則。實(shí)施例22:合成6-溴-7-環(huán)己基-吡唑并[l,5-a]嘧啶-3-甲酸乙酯在6CTC下，將3.0g(23.8mmol)環(huán)己基甲基酮和4.56g(26.2mmo1)叔丁氧基雙(二曱基氨基)甲烷(Bredereck，s試劑)的混合物攪拌過夜。隨后將該反應(yīng)混合物濃縮，得到4.0g(產(chǎn)率為93%)橙色油狀的1-環(huán)己基-3-二甲基氨基-丙烯酮，如'HNMR所示。該產(chǎn)物無需進(jìn)一步純化直接用于下一步驟。經(jīng)加料漏斗往冰冷卻的1.18§(6.5111111101)1-環(huán)己基-3-二曱基氨基-丙烯酮在8mL二氯甲烷中的溶液中滴加1.04g(6.51mmol)溴。在0'C下，將該反應(yīng)混合物攪拌0.5小時(shí)，隨后滴加在10mL乙醚中的0.9mL(6.51mmol)三乙胺。在0。C下，將該混合物攪拌1小時(shí)并讓其升至室溫。從該溶液中沉淀出淺黃色固體，隨后通過過濾將其分離。隨后將該濾液濃縮，得到1.69g褐色固體狀的2-溴-l-環(huán)己基-3-二曱基氨基-丙烯酮，如'HNMR所示。該產(chǎn)物無需進(jìn)一步純化直接用于下一步驟。往1.69g(6.50mmol)2-溴-l-環(huán)己基-3-二曱基氨基-丙烯酮和1.01g(6.50mmol)3-氨基-lH-吡唑-4-曱酸乙酯在6mL乙醇中的混合物中加入l.OmL在乙酸溶液中的30%溴化氫，并將得到的混合物加熱回流1小時(shí)。隨后將該反應(yīng)混合物冷卻至室溫并濃縮，得到殘余物，其經(jīng)硅膠層析純化(梯度洗脫二氣曱烷至25%乙酸乙酯/二氯曱烷)，得到620mg(經(jīng)兩步驟產(chǎn)率為27%)6-溴-7-環(huán)己基-他唑并[1，5-3]嗜啶誦3誦甲酸乙酯，1^1^所示。NMR〔58.7Ps，lH8.4.9s，1H),4.44(q,J==6.8Hz,2H),2.70-2.57(b，1H).1.98-1.90(m，2H),1.87-1.78(m,2H),1.78-1.69(m,2H)，1.59-1.42(m,4H),1.43(t,J-6.8Hz,3H));Cl5H18BrN302:LC-MS計(jì)算值352.06[M++H]+;LC腸MS實(shí)測值352.0。實(shí)施例23:合成7-環(huán)己基-6-(4-甲硫基-苯基)-吡唑并[l,5-a]嘧啶_3-甲酸和7-環(huán)己基-6-呋喃-3-基-吡唑并[l,5-a]嘧啶-3-甲酸2)LiOH/THF/55。C將14mg(0.085mmol)4-甲硫基-苯基硼酸、2mg(0.0028mmol)鈀催化劑和45mg(0.213mmol)磷酸鉀的混合物置于4mL瓶中。往該混合物中加入在1.5mL1,4-二噁烷中的25mg(0.077mmol)6-溴-7-環(huán)己基-吡唑并[l,5-a]嘧啶-3-曱酸乙酯，得到的混合物用氬氣吹掃并于S0。C(油浴)下攪拌過夜。隨后該反應(yīng)混合物用乙酸乙酯稀釋，經(jīng)小Celite硅藻土墊過濾，隨后蒸發(fā)(savant)，得到殘余物(粗制偶合產(chǎn)物)。將該殘余物溶解在lmL四氫呋喃(THF)中，用0.5mL(0.5mmol)lMLiOH溶液處理，隨后將得到的混合物于室溫下攪拌過夜。由于薄層層析分析(TLC)表明反應(yīng)未完全，隨后將該混合物于55。C(沙浴)下振搖15小時(shí)。該反應(yīng)混合物用乙酸乙酯稀釋，并用1MHC1溶液酸化至pH為2。將有機(jī)層分離并濃縮(savant)，得到殘余物，其經(jīng)反相層析純化(使用Gilson)，(在低壓凍干后)得到14mg(總產(chǎn)率為56%)固體狀的7_環(huán)己基一6-(4國甲硫基-苯基)-吡唑并[l，5-a嘧啶國3-甲酸(472)，如HNMR所示；C20H21N3O2S:LC-MS計(jì)算值368.14[M++H]+;LC-MS實(shí)測值368.2。使用相同的實(shí)驗(yàn)方法合成得到固體狀的7-環(huán)己基-6-呋喃-3-基-吡唑并[l,5-a]嘧啶-3-曱酸(465)，如！HNMR所示；C17H17N303:LC-MS計(jì)算值312.13[M++H]+;LC-MS實(shí)測值312.1。實(shí)施例24:合成7-環(huán)己基-6-(4-甲磺?；?苯基)-吡唑并[l,5-a]嘧啶-3-曱酸和7-環(huán)己基-6-(4-甲亞磺?；?苯基)-吡唑并[l，5-a]嘧咬-3-甲酸往14mg(0.038mmol)7-環(huán)己基-6-(4-甲硫基-苯基)-吡唑并[l,5-a]嘧啶-3-甲酸在2mL氯仿中的渾濁溶液中加入9mg(1.5當(dāng)量)間氯過氧苯甲酸(mCPBA),隨后渾濁的溶液變得澄清。在室溫?cái)嚢?分鐘后TLC表明起始原料耗盡，將該混合物濃縮得到殘余物，其經(jīng)反相層析純化(使用Gilson)，(在低壓凍干后)得到10mg(產(chǎn)率為69%)固體狀的7-環(huán)己基-6-(4-甲亞磺?；?苯基)-吡唑并[l，5-a]嘧啶-3-甲酸(491)，如LC-MS所示。C20H21N3O3S:LC-MS計(jì)算值384.13[M++H]+;LC-MS實(shí)測值384.2。注意用2.2當(dāng)量mCPBA進(jìn)行相同的實(shí)驗(yàn)方法，得到7-環(huán)己基_6-(4-曱磺酰基-苯基)-吡唑并[1,5-&]嘧啶-3-甲酸(493)。實(shí)施例25:2-([7-環(huán)己基-6-(4-氟-苯基)-吡唑并[l,5-a]嘧啶-3-羰基]-氨基}-3-(4-羥基-苯基)-丙酸(HO)2B'PdCI2(dppf).CH2CI2/K3P041，4-二嚼烷80。C/氬$2)LiOH/THF/55。C通過如先前其他部分所述的Suzuki反應(yīng)得到7-環(huán)己基-6-(4-氟-苯基)-吡唑并[l，5-a]嗜啶-3-甲酸(461)。以下給出該化合物的分析數(shù)據(jù)。.SCDC138.66(s,1H>,8.51(s,1H),7.30-7.27(m,2H),7.26-7.21(m，2H),3.26(m,1H),2.59-2.53<m.2H),1.87-1,84(m,2H),1,75-1.68(m,3H),1.40-122(m,3H).TFWH20FHATU,DIEA,DMF,DMAPR-NH2C19H18FN302:LC-MS計(jì)算值340.15[M++H]+;LC-MS實(shí)測值340.1。往15.0mg(0.044mmol)7-環(huán)己基-6-(4-氟-苯基)-吡唑并[l，5-a]嘧咬-3-甲酸在2mL二曱基甲酰胺(DMF)中的溶液中加入0.019mL(0.132mmol)二異丙基乙基胺(DIEA)、少量的二甲基氨基咬咬(DMAP催化劑)晶體、17.4mg(0.053mmol)H-Tyr(tBu)-OtBu.HCl，隨后加入20mg(0.053mmol)HATU,并將得到的混合物于室溫下攪拌過夜。該反應(yīng)混合物用乙酸乙酯稀釋，用0.1N氬氧化鈉溶液(2次)和鹽水洗滌。分離的有機(jī)層經(jīng)硫酸鈉干燥并濃縮，得到3-(4-叔丁氧基-苯基)-2-{[7-環(huán)己基-6-(4-氟-苯基)-吡唑并卩,5力]嘧啶-3-羰基]-氨基}-丙酸叔丁酯，其無需進(jìn)一步純化用于下一步驟。粗制的3-(4-叔丁氧基-苯基)-2-{[7-環(huán)己基-6-(4-氟-苯基)-吡唑并[1，5-3]嘧啶-3-羰基]-氨基}-丙酸叔丁酯的樣品用lmL三氟乙酸(TFA):H20(95:5)處理并將得到的溶液于室溫下攪拌1小時(shí)。隨后該反應(yīng)混合物用2mL乙腈水(l:l)猝滅，濃縮，殘余物經(jīng)反相層析純化，(在低壓凍千后)得到10mg(經(jīng)兩步驟產(chǎn)率為45%)固體狀的所需2-{[7-環(huán)己基-6—(4-氟-苯基p比唑并[l,5-a]嘧啶-3-羰基]-氨基)-3-(4-羥基-苯基)-丙酸(505)，如HNMR所示；C28H27FN404:LC-MS計(jì)算值503.2[M++H]+;LC-MS實(shí)測值503.2。注意在甲基或乙基酯用于第二脫保護(hù)步驟的情況中，典型的LiOH水溶液介導(dǎo)的急化用于產(chǎn)生所需甲酸。實(shí)施例26:合成N-[7-環(huán)己基-6-(4-氟-苯基)-吡唑并[l，5-a]嘧咬-3-羰基]-C-苯基-甲磺酰胺往20mg(0.059mmol)7-環(huán)己基-6-(4-氟-苯基)-吡唑并[l,5-a]嗜啶-3-甲酸在2mL二氯甲烷(DCM)中的溶液中加入少量的DMAP(催化劑)晶體、12mg(0.071mmol)曱苯磺酰胺，隨后加入在DCM中的0.071mL(0.071mmol)lM二環(huán)己基石友二亞胺(DCC)溶液。將該反應(yīng)混合物于室溫下攪拌過夜，濃縮，隨后得到的殘余物經(jīng)反相層析純化(Gilson)，(在低壓凍干后)得到1Smg(產(chǎn)率為51%)固體狀的所需N-[7-環(huán)己基-6-(4-氟-苯基)-吡唑并[l,5-a]嘧啶-3-羰基]-C-苯基-甲磺酰胺(533)，^JHNMR所示；C26H25FN403S:LC-MS計(jì)算值493.16[M++H]+;LC-MS實(shí)測值493.1。實(shí)施例27:合成6-(4-芐氡基-苯基)-3-溴-7-環(huán)己基-吡唑并[1,5-3]嘧啶-2-曱酸將0.718g(1.97mmol)2-(4-千錄-苯基)-l-環(huán)己基-3-二甲基氨基-丙烯酮和0.28g(1.97mmoI)5-氛基-lH-吡唑-3-曱酸甲酯在20mL乙酸(HOAc)中的溶液加熱回流過夜。該反應(yīng)混合物冷卻至室溫并濃縮，得到殘余物，其經(jīng)硅膠層析純化(二氯甲烷中的5%乙酸乙酯)，得到0.643g(產(chǎn)率為74%)米色固體狀的6-(4-千氧基-苯基)-7-環(huán)己基-吡唑并[1,5-a]嘧啶-2-甲酸甲酯，如JHNMR所示。往水冷卻的50mg(0.113mmol)6-(4-卡氧基-苯基)-7-環(huán)己基-吡唑并[l，5-a]嘧啶-2-甲酸甲酯在2mL二氯甲烷(DCM)中的溶液中加入21mg(0.118mmol)N-溴代琥珀酰亞胺(NBS)在lmLDCM中的溶液并讓得到的混合物升至室溫,隨后于室溫下攪拌過夜。將該反應(yīng)混合物濃縮，得到殘佘物，其經(jīng)硅膠層析純化(二氯甲烷中的5%乙酸乙酯)，得到7mg(產(chǎn)率為11%)無色油狀的6-(4-千氧基-苯基)-3-溴-7-環(huán)己基-吡唑并[l,5-a]嘧啶-2-甲酸甲酯，如iHNMR所示(純度90%);C27H26BrN303:LC國MS計(jì)算值520.12[M++H]+;LC-MS實(shí)測值520.0。使用前述方法，將6-(4-千氧基-苯基)-3-溴-7-環(huán)己基-吡唑并[l,5-a]嘧啶-2-曱酸甲酯皂化成甲酸(477)。實(shí)施例28:合成[6-(4-千氧基-苯基)-7-環(huán)己基-吡唑并[l,5-a]嘧啶-3畫基〗-曱醇將4.37g(12mmol)2-(4-千氧基-苯基)-l-環(huán)己基-3-二甲基氨基-丙烯酮和1.0g(12mmol)lH-吡唑-3-基胺在40mL乙酸(HOAc)中的溶液加熱回流過夜。將該反應(yīng)混合物冷卻至室溫并濃縮，得到米色固體狀殘余物，其經(jīng)硅膠層析純化(二氯甲烷中的2%乙酸乙酯)，得到3.38g(產(chǎn)率為74%)白色固體狀的6-(4-千氧基-苯基)-7-環(huán)己基-吡唑并[l,5-a]嘧咬，如〗HNMR所示。往冰冷卻的300mg(0.78mmol)6-(4-千氧基-苯基)-7-環(huán)己基-吡唑并[l,5-a]嘧啶在2mL二甲基甲酰胺(DMF)和lmL二氯甲烷(DCM)中的溶液中加入0.085mL(0.9mmol)磷酰氯(POCl3)并讓得到的混合物升至室溫，隨后于室溫下攪拌4小時(shí)，此時(shí)薄層層析(TLC)分析表明起始原料完全轉(zhuǎn)化為產(chǎn)物。將該反應(yīng)混合物傾入水-水中，并用乙酸乙酯萃取。合并的有機(jī)萃取物用鹽水洗滌，經(jīng)石充酸鈉干燥，隨后蒸發(fā)，得到335mg米色固體狀的6-(4-千氧基-苯基)-7-環(huán)己基-吡唑并[l,5-a]嘧。定-3-甲醛(436)，如JHNMR所示；C26H25N302:LC-MS計(jì)算值412.19[M++H〗+;LC-MS實(shí)測值412.1。往攪拌的4.4mg(0.115mmol)硼氫化鈉(NaBH4)在2mL甲醇(MeOH)中的溶液中加入35mg(0.104mmol)6-(4-千氧基-苯基)-7-環(huán)己基-吡唑并卩,5-a]嘧啶-3-曱醛在3mL四氫呋喃(THF)中的溶液并將得到的混合物于室溫下攪拌30分鐘，此時(shí)薄層層析(TLC)分析表明起始原料完全轉(zhuǎn)化為產(chǎn)物。通過加入飽和的氯化銨溶液使該反應(yīng)混合物猝滅，隨后用乙酸乙酯萃取。合并的有機(jī)萃取物用鹽水洗滌，經(jīng)硫酸鈉干燥并蒸發(fā)，(在低壓凍干后)得到20mg(產(chǎn)率為47%)白色固體狀的〖6-(4-節(jié)氧基-苯基)-7-環(huán)己基-p比唑并[l,5-a]嘧啶-3-基]-曱醇(479)(850/0純度)，如HNMR所示(含痕量的起始原料)；C26H27N3O2:LC-MS計(jì)算值414.21[M++H]+;LC-MS實(shí)測值414.2。實(shí)施例29:合成N-[6-(4-芐氧基-苯基)-7-環(huán)己基-吡唑并[l,5-a]嘧啶-3-基]-環(huán)丙烷甲酰胺和N-[6-(4-芐氧基-苯基)-7-環(huán)己基-吡唑并[1，5-a]嘧啶-3-基]-乙磺酰胺<formula>formulaseeoriginaldocumentpage119</formula>在35。C下，往25mg(0.109mmo1)硝酸銅(II)二水合物(Cu(N03)2-2.5H20)在1.5mL乙酸和3mL乙酸酐中的混合物中分批(經(jīng)15分鐘)加入40mg(0.104mmol)6-(4-千氧基-苯基)-7-環(huán)己基-吡唑并[1,5-a]嘧啶并在35。C下將得到的混合物攪拌過夜。該反應(yīng)混合物用二氯甲烷稀釋，隨后用0.1N氬氧化鈉溶液、水和鹽水洗滌。有機(jī)萃取物經(jīng)硫酸鈉干燥并蒸發(fā)，得到43mg紫色殘余物，其經(jīng)硅膠層析純化(Biotage;二氯甲烷)，得到18mg(41。/。)6-(4-千錄-苯基)-7-環(huán)己基-3-硝基-吡唑并[l,5-a]嘧啶，其為灰白色殘余物(純度90%)，如HNMR所示；C25H24N403:LC-MS計(jì)算值429.18[M++H]+;LC-MS實(shí)測值429.2。往18mg(0.042mmol)6-(4-芐氧基-苯基)-7-環(huán)己基-3-硝基-吡唑并[1,5-a]嘧啶在3mL乙酸乙酉旨(EtOAc)中的溶液中加入40mg(0.21mmo1)二氯化錫(II)(SnCl2)并在8CTC、氬氣氣氛下將得到的混合物攪拌8小時(shí)，此時(shí)TLC分析表明僅75%的起始原料完全轉(zhuǎn)化為產(chǎn)物。此后，加入40mg(0.21mmol)二氯化錫(II)(SnCl2)，在80°C下將該反應(yīng)混合物加熱8小時(shí)，此時(shí)薄層層析(TLC)分析表明起始原料完全轉(zhuǎn)化為產(chǎn)物。該混合物用乙酸乙酯稀釋，用^1:包和碳酸氫鈉溶液、水、鹽水洗滌，經(jīng)硫酸鈉千燥并蒸發(fā)，(在低壓凍干后)得到6mg(產(chǎn)率為36%)黃色固體狀的6-(4-節(jié)氧基-苯基)-7-環(huán)己基-吡唑并[l,5-a]嘧啶-3-基胺，如'HNMR所示；C25H26N40:LC-MS計(jì)算值399.21[M++H]+;LC-MS實(shí)測值399.2。往30mg(0.075mmol)6-(4-芐氧基-苯基)-7-環(huán)己基-吡唑并[l,5-a]嘧啶-3-基胺在2mL乙腈(CH3CN)中的溶液中加入0.018mL(0.225mmo1)吡啶(pyr)，隨后加入16mg(0.2mmol)環(huán)丙基甲酰氯或19mg(0.15mmo1)乙磺酰氯和lmg二曱基氨基吡啶(DMAP)并在60。C下將得到的混合物攪拌過夜。LC-MS分析表明產(chǎn)物形成，將該反應(yīng)混合物濃縮，得到殘余物，其經(jīng)反相層析純化，(在低壓凍干后)得到17mg(產(chǎn)率為49%)黃色固體狀的N-[6-(4-千氧基-苯基)-7-環(huán)己基-他唑并[1,5-3]嘧啶-3-基]-環(huán)丙烷甲酰胺(415)或17mg(產(chǎn)率為46%)黃色固體狀的N-[6-(4-節(jié)氧基-苯基)-7-環(huán)己基-吡唑并[l,5-a]嘧啶-3-基]-乙磺酰胺(421)如下所示C29H30N4O2:LC-MS計(jì)算值467.24[M++H]+;LC-MS實(shí)測值467.2;C27H30N4O3S:LC-MS計(jì)算值491.2[M++H]+;LC-MS實(shí)測值491.2。實(shí)施例30:合成2-U7-環(huán)己基-6-(4-氟-苯基)-2-曱基-吡唑并[l,5-a]嘧啶-3-羰基]-氨基}-3-(4-羥基-苯基)-丙酸往1.04(4mmol)2-溴-1-環(huán)己基-3-二甲基氨基-丙烯酮和0.676g(4mmol)5-氨基-3-甲基-lH-吡唑-4-曱酸乙酯在10mL乙醇中的溶液中加入0.65mL在乙酸溶液中的30%溴化氫并將得到的混合物加熱回流1小時(shí)。將該反應(yīng)混合物冷卻至室溫并濃縮，得到褐色殘余物，其用在己烷中的30%乙酸乙酯超聲處理，得到沉淀，將其濾出，隨后用乙酸乙酯洗滌兩次。將合并的有機(jī)萃取物蒸發(fā)，得到1.32g橙色固體，其經(jīng)硅膠層析純化(梯度洗脫二氯甲烷，隨后用2%乙酸乙酯/二氯甲烷至10%乙酸乙酯/二氯甲烷)，得到0.756g(52。/。)黃色固體狀的6-溴-7-環(huán)己基-2-曱基-吡唑并[l,5-a]嘧啶-3-甲酸乙酯，如)HNMR所示；C16H20BrN3O2:LC-MS計(jì)算值366.07[Nf+H]+;LC-MS實(shí)測值366.1。將187mg(0.5mmol)6-溴-7-環(huán)己基-2-甲基-吡唑并[l,5-a〗嘧啶-3-曱酸乙酯、105mg(0.75mmo1，1.5當(dāng)量)4-氟苯基硼酸、20mg(0.025mmo1,5mol。/o)把催化劑和318mg(1.5mmo1，3當(dāng)量)磷酸鉀的混合物置于盤管中。在真空和氬氣循環(huán)后，加入1，4-二喊烷(7mL)，隨后在80。C、氬氣氣氛下將得到的混合物加熱14小時(shí)。該反應(yīng)混合物用乙酸乙酯稀釋，經(jīng)小Celite硅藻土墊過濾，經(jīng)疏酸鈉干燥并蒸發(fā)，得到褐色殘余物，其經(jīng)硅膠層析純化(梯度洗脫二氯甲烷中的2%、5%至10%乙酸乙酯)，得到CU78g(94。/。)灰白色固體狀的7-環(huán)己基-6-(4-氟-苯基)-2-甲基-吡唑并[l，5-a]嘧啶-3-曱酸乙酯，如iHNMR所示；C22H24FN3O2:LC-MS計(jì)算值382.19[M++H]+;LC-MS實(shí)測值382丄往178mg(0.46mmol)7-環(huán)己基-6-(4-氟-苯基)-2-甲基-吡唑并[l,5-a〗嘧啶-3-甲酸乙酯在9mL四氫呋喃中的溶液中加入2.8mL(2.8mmol)lMLiOH溶液，并將該混合物加熱回流15小時(shí)。此時(shí)TLC分析表明起始原料仍然存在，加入2.8mL(2.8mmol)lMLiOH溶液，并持續(xù)回流60小時(shí)。隨后將該反應(yīng)混合物冷卻至室溫，濃縮，用水稀釋，用10%HC1溶液酸化至pH為2，隨后用乙酸乙酯萃取。合并的有機(jī)萃取物經(jīng)硫酸鈉干燥，隨后蒸發(fā)，得到156mg(產(chǎn)率為96%,90%純度)淺褐色固體狀的7-環(huán)己基-6-(4-氟-苯基)-2-曱基-吡唑并[l,5-a]嘧啶-3-甲酸(515)，如HNMR所示；C20H20FN3O2:LC-MS計(jì)算值354.15[M"+H]+;LC-MS實(shí)測值354.2。在0。C下將36mg(0.1mmol)7-環(huán)己基-6-(4-氟-苯基)-2-甲基-吡唑并[l,5-a]嘧啶-3-甲酸在2mL二甲基甲酰胺中的溶液冷卻。往以上冷卻的溶液中加入0.053mL(0.3mmol)N,N-二異丙基乙基胺(DIEA)，隨后加入38mg(0.1mmol)HATU和37mg(0.1lmmol)2-^J^國3-(4-叔丁氧基畫苯基)-丙酸叔丁酯和少量的4-二甲基氨基吡啶(DMAP)晶體，隨后讓得到的混合物升至室溫，在室溫下攪拌過夜。隨后該反應(yīng)混合物用乙酸乙酯稀釋，用0.1NNaOH溶液、水和鹽水洗滌，經(jīng)硫酸鈉干燥，隨后蒸發(fā)，得到殘余物，其用2mL三氟乙酸(TFA):水(95:5)處理，隨后在室溫下攪拌2.5小時(shí)。通過加入10mL乙腈水(l:l)溶液使該混合物猝滅，隨后濃縮，得到殘余物，其經(jīng)反相層析純化(使用Gilson)，(在低壓凍干后)得到8mg(經(jīng)兩步驟產(chǎn)率為16%)白色固體狀的2-{[7-環(huán)己基-6-(4-氟-苯基)-2-曱基-吡唑并[1，5力]嘧啶-3-羰基]-氨基}-3-(4-羥基-苯基)-丙酸(純度92%,編號(hào)517的化合物)，如'H-NMR所示。(C29H29FN404:LC-MS計(jì)算值517.22[M+H]+;實(shí)測值517.2[M+H;T)。實(shí)施例31:合成4'-氯-2-(4-[7-環(huán)己基-3-(lH-四唑-5-基)-吡唑并[1，5-a]嘧啶-6-基]-苯絲甲基}-聯(lián)苯基-4-甲酸用氬氣吹掃250mg(l.09mmol)4-溴-3-甲基-苯甲酸甲酯、204mg(l.31mmol)4-氯苯基硼酸、1.06g(3.27mmol)碳酸銫(Cs2C03)和PdCb(dppf)催化劑(5mol。/o)的混合物。往該混合物中加入3mL1,4-二嗯烷并將該反應(yīng)混合物加熱至8crc過夜。隨后將該混合物冷卻至室溫，經(jīng)Celite硅藻土墊過濾，同時(shí)用乙酸乙酯沖洗該墊。該濾液用鹽水洗滌，經(jīng)硫酸鈉干燥并濃縮，得到殘余物，其經(jīng)硅膠層析純化(己烷中的5%乙酸乙酯)，得到191mg(67。/o)油狀的所需4'-氯-2-甲基-聯(lián)苯基-4-曱酸甲酯，如iHNMR所示；C15H13C102:LC-MS計(jì)算值261.07[M++H]+;LC-MS實(shí)測值261.1。往191mg(0.73mmol)4'-氯-2-甲基-聯(lián)苯基-4-甲酸甲酯在4mL四氯化碳(CCLt)中的溶液中加入9.7mg(0.04mmol)過氧化苯甲酰，隨后加入124mg(0.696mmol)N-溴代琥珀酰亞胺(NBS)，并將該反應(yīng)混合物加熱回流6小時(shí)。將該混合物冷卻至室溫，用二氯甲烷稀釋，隨后用水和鹽水洗滌。有機(jī)層經(jīng)硫酸鈉千燥并濃縮，得到132mg(53。/。)油狀的2-溴曱基-4'-氯-聯(lián)苯基-4-曱酸曱酯，其無需進(jìn)一步純化用于下一步驟。1HNMR.8CDCI38.10(s,1H),7.91-7.89(d，J-8.0Hz,1H),7.37-7.35(d,J-8.3Hz,2H),7.30-7J8(d,J-8.7Hz,2H),7.22-7.20(d，J-8.0Hz,1H),4.30(s,2H),3.87(s,3H).使用碳酸銫并按照前述實(shí)驗(yàn)方法，在二甲基甲酰胺(DMF)中用2-溴曱基-4'-氯-聯(lián)苯基-4-甲酸曱酯進(jìn)行7-環(huán)己基-6-(4-羥基-苯基)-吡唑并[l，5-a]嘧啶-3-曱腈的烷化，得到4'-氯-2-[4-(3-氰基-7-環(huán)己基-吡唑并[1，5-a]嘧啶-6-基)-苯氧基甲基]-聯(lián)苯基-4-甲酸甲酯。通過前述方法，將該化合物轉(zhuǎn)化為相應(yīng)的四唑4'-氯-2-(4-[7-環(huán)己基-3-(lH-四唑-5-基)-吡唑并[1，5-a]嘧啶-6-基]-苯氧基甲基}-聯(lián)苯基-4-曱酸甲酯(475)。最后，采用標(biāo)準(zhǔn)的LiOH皂化方法得到4'-氯-2-{4-[7-環(huán)己基-3-(1^四唑-5_基)-吡唑并[l，5-a]嘧咬-6-基]-苯氧基曱基}-聯(lián)苯基-4-曱酸(490)。實(shí)施例32:合成5-(4-芐氧基-苯基)-6-環(huán)己基-7-氧代-4,7-二氫-吡峻并[l,5-a]嘧p定-2-曱酸往5.0g(21.9mmol)4-千氧基-苯甲酸在25mL二氯甲烷(DCM)中的混合物中滴加10mL(114mmol)草酰氯，隨后加入5口L二甲基曱敗胺(DMF催化劑)并將該反應(yīng)混合物加熱回流3小時(shí)，隨后濃縮，得到5.32g(98。/。)黃色固體狀的所需4-芐氧基-苯曱酰氯，如iHNMR所示。產(chǎn)物無需進(jìn)一步純化用于下一步驟。用氬氣吹掃0.35mL(2.5mmol)二異丙基胺(iPr2NH)在7mL四氫呋喃(THF)中的溶液中并冷卻至-78。C。往該溶液中滴加lmL(2.5mmo1)正丁基鋰(nBuLi，2.5M溶液，在己烷中)，隨后在-78。C下將得到的混合物攪拌20分鐘，在這之后滴加0.33mL(2mmol)環(huán)己基乙酸曱酯。讓該混合物升至室溫保持40分鐘，隨后將其再冷卻至-78。C，并滴加0.592g(2.4mmol)4-千氧基-苯曱酰氯在8mLTHF中的溶液，并讓得到的混合物升至室溫，隨后在室溫、氬氣氣氛下攪拌下過夜。在冰上，通過加入飽和氯化銨溶液使該反應(yīng)混合物猝滅，隨后用乙酸乙酯萃取。合并的有機(jī)萃取物用水、鹽水洗滌，經(jīng)硫酸鈉干燥并濃縮，得到0.83g黃色固體狀的殘余物，其經(jīng)硅膠層析純化(Biotage;在二氯曱烷中的25%己烷)，得到0.306g(產(chǎn)率為42%)白色固體狀的所需3-(4-節(jié)氧基-苯基)-2-環(huán)己基-3-氧代-丙酸甲酯，如HNMR所示；Q23H26O4:LC-MS計(jì)算值367.18[M++H]+;LC國MS實(shí)測值367.2。將274mg(0.747mmol)3-(4-^氧基-苯基)-2-環(huán)己基-3-氧代-丙酸甲酯、106mg(0.747mmol)5-氨基-lH-吡唑-3-甲酸曱酯、15mg(10%mol)對(duì)甲苯磺酸一水合物(PTSA)和10mL甲苯的混合物加熱回流88小時(shí)。隨后將該反應(yīng)混合物濃縮得到殘余物，其經(jīng)硅膠層析純化(Biotage;梯度洗脫在二氯曱烷中的2%至20%乙酸乙酯)，得到55mg(產(chǎn)率為16%)固體狀的所需5-(4-芐氧基-苯基)-6-環(huán)己基-7-氧代-4，7-二氫-吡唑并[l，5-a]嘧啶-2-曱酸甲酯，如)HNMR所示；C27H27N304:LC-MS計(jì)算值458.2[M++H]+;LC-MS實(shí)測值458.2。然后通過眾所周知的LiOH皂化方法，將該原料轉(zhuǎn)化為5-(4-芐氧基-苯基)-6-環(huán)己基-7-氣代-4，7-二氫-吡唑并[l,5-a]嘧啶-2-曱酸(產(chǎn)率為55%，編號(hào)538的化合物)；C26H25N304:LC-MS計(jì)算值444.18[M+H]+;LC-MS實(shí)測值444.2。實(shí)施例33:合成5-(4-芐氧基-苯基)-6-環(huán)己基-2-(lH-四唑.基)-4H-吡唑并[1，5-a]嘧啶-7-酮嚴(yán)OMeCONH2dNH3/MeOH——7H2"N'N*，人》HHCONH2S，乂7l、」l、3廣"—，Hff"T丫倫IIJ,一"ONH2在密封管中，1.0g(7mmol)5-氨基-lH-吡唑-3-甲酸曱酯在10mL甲醇(MeOH)中的溶液用氨(NH3)飽和，隨后在室溫下將密封管中的混合物攪拌過夜。由于薄層層析分析(TLC)表明反應(yīng)未完全，隨后將該混合物加熱至8(TC保持1天。隨后將該反應(yīng)混合物冷卻，打開該密封管，將溶劑蒸去，得到0.9g所需5-氨基-lH-吡唾-3-甲酰胺，如'HNMR所示；(34關(guān)40:LC-MS計(jì)算值127.05〖M++H]+;LC-MS實(shí)測值127.2。在該文獻(xiàn)其他地方描述了3-(4-節(jié)氧基-苯基)-2-環(huán)己基-3-氧代-丙酸甲酯的制備。將1.0g(2.7mmol)3-(4-千氧基-苯基)-2-環(huán)己基-3-氧代-丙酸曱酯、34011^(2.711111101)5-氨基-111-吡唑-3-甲酰胺、51mg(10molo/o)對(duì)甲苯磺酸一水合物(PTSA)和15mL甲苯的混合物加熱回流72小時(shí)。隨后將BnO、(CF;jCO)20Et3N:DCM,、』〔>T-CNEt3N-HCI,關(guān)3甲苯必HN、fo/乂，/丁\\,、\,.,,/該反應(yīng)混合物濃縮得到殘余物，其經(jīng)硅膠層析純化(Biotage;梯度洗脫在二氯曱烷中的15%乙酸乙酯至在二氯甲烷中的6%曱醇)，得到殘余物，其經(jīng)反相層析進(jìn)一步純化(Gilson)，(在低壓凍干后)得到22mg(產(chǎn)率為2%)所需5-(4-千氧基-苯基)-6-環(huán)己基-7-氧代-4,7-二氫-吡唑并[l,5-a]嘧啶-2-曱酰胺，如H-NMR所示；C26H26N403:LC-MS計(jì)算值443.2[M++H]+;LC-MS實(shí)測值443.2。往22mg(0.05mmol)5-(4-千氧基-苯基)-6-環(huán)己基-7-氧代-4,7-二氬誦吡唑并[l,5-a]嘧啶-2-甲酰胺在lmL二氯曱烷(DCM)中的混合物中加入0.04mL(0.3mmol)三乙胺(Et3N),并將得到的混合物在冷浴中冷卻。隨后加入0.021mL(0.15mmol)三氟乙酸肝((CF3CO)20)，在這期間該混合物變?yōu)榫?，隨后攪拌2.5小時(shí)。通過加入水使該反應(yīng)混合物猝滅，隨后濃縮得到殘余物，其經(jīng)反相層析純化，(在低壓凍干后)得到3mg(產(chǎn)率為14%)所需5-(4-芐氧基-苯基)-6-環(huán)己基-7-氧代-4,7-二氬-吡唑并[l,5-a]嘧啶-2-曱腈，如下所示C26H24N4O2:LC-MS計(jì)算值425.19[M++H]+;LC-MS實(shí)測值425.2。隨后通過前述實(shí)驗(yàn)方法(疊氮化鈉，三乙胺'鹽酸鹽)，將該材料轉(zhuǎn)化為相應(yīng)的四唑5-(4-千氧基-苯基)-6-環(huán)己基-2-(lH-四唑-5-基)-4H-吡唑并[l,5-a]嘧啶-7-酮(551)(產(chǎn)率為54%);C26H25N702:LC-MS計(jì)算值468.21[M++H]+;LC-MS實(shí)測值468.2。實(shí)施例34:合成5-(4-千氧基-苯基)-6-環(huán)己基-7-甲氧基-吡唑并[1,5-a]嘧啶-2-曱酸<formula>formulaseeoriginaldocumentpage129</formula>往水冷卻的22mg(0.048mmol)5-(4-千氧基-苯基)-6-環(huán)己基-7-氧代-4,7-二氫-吡唑并[l,5-a]嘧啶-2-曱酸甲酯在3mL四氫呋喃(THF)中的混合物中加入0.008mL(0.192mmol)甲醇(MeOH)、50mg(0.192mmo1)三苯基膦(PPh3)，隨后加入0.038mL(0.192mmol)偶氮二曱酸二異丙酯(DIAD)，隨后讓該混合物升至室溫并在室溫下攪拌2小時(shí)，此時(shí)薄層層析(TLC)分析表明起始原料完全消耗。隨后將該反應(yīng)混合物濃縮，殘佘物經(jīng)硅膠層析純化(Biotage;梯度洗脫二氯甲烷(DCM)至在DCM中的10%乙酸乙酯)，得到24mg所需5-(4-芐氧基-苯基)-6-環(huán)己基-7-曱氧基-吡唑并[l,5-a]嘧啶-2-甲酸甲酯，如、H-NMR所示(含痕量雜質(zhì))。注意使用烷化方法(危酸二甲酯，用乙腈作為溶劑)，還得到5-(4-芐氧基-苯基)-6-環(huán)己基-7-甲氧基-吡唑并[1,5力]嘧咬-2-甲酸曱酯。經(jīng)眾所周知的LiOH皂化方法將5-(4-芐氧基-苯基)-6-環(huán)己基-7-曱氧基-吡唑并[l，5-a]嘧啶-2-曱酸曱酯轉(zhuǎn)化成相應(yīng)的酸5-(4-千氧基-苯基)-6-環(huán)己基-7-曱氧基-吡唑并[1，5^]嘧啶-2-甲酸(329);C27H27N304:LC-MS計(jì)算值458.2[M++H]+;LC畫MS實(shí)測值458.2。實(shí)施例35:合成2-{[5-(4-千氧基-苯基)-6-環(huán)己基-7-氧代-4,7-二氫-吡唑并[l,5-a]嘧啶-2-羰基]-氨基)-3-羥基-丙酸<formula>formulaseeoriginaldocumentpage130</formula>2)95:5TFA:H20往71mg(0.16mmol)5-(4-千氧基-苯基)-6-環(huán)己基-7-氧代-4,7-二氫-"比唑并[l,5-a]嘧啶-2-曱酸在4mL二甲基甲酰胺(DMF)中的溶液中加入0.053mL(0.48mmol)4國甲基-嗎啉、14mg(0.164mmol)5國氨基四唑，隨后加入100mg(0.192mmol)PYBOP,這時(shí)該溶液變黃，隨后將得到的混合物于室溫下攪拌41小時(shí)。將該反應(yīng)混合物濃縮，得到殘余物其經(jīng)反相層析純化，得到29mg(產(chǎn)率為35%)固體狀的所需N-(lH-四唑-5-基)-5-(4-千氧基-苯基)-6-環(huán)己基-7-氧代-4,7-二氫-吡唑并[1,5力]嘧咬-2-甲酰胺(540),如^-NMR所示；C27H26N8O3:LC-MS計(jì)算值511.21[M++H]+;LC-MS實(shí)測值511.1。往67mg(0.15mmol)5-(4-千氧基-苯基)-6-環(huán)己基-7-氧代-4,7-二氫國吡唑并[1,5-a]嘧啶-2-曱酸在3mLDMF中的溶液中加入0.13mL(0.75mmol)二異丙基乙基胺(DIEA)、少量的二甲基氨基吡啶(DMAP催化劑)晶體、50mg(0.195mmol)2-氨基-3-叔丁氧基-丙酸叔丁酯.鹽酸鹽，隨后加入74mg(0.195mmol)HATU，并將得到的混合物于室溫下攪拌過夜。該反應(yīng)混合物用乙酸乙酯稀釋，用0.1N氫氧化鈉溶液(2次)和鹽水洗滌。分離的有機(jī)層經(jīng)硫酸鈉干燥并濃縮，得到殘余物，其用3mL三氟乙酸(TFA):水(95:5)處理，在室溫下攪拌2小時(shí)，隨后通過加入乙腈水(l:l)猝滅。將得到的混合物濃縮，得到殘余物，其經(jīng)反相層析純化，(在低壓凍干后)得到14mg(17。/。)白色固體狀的所需2-{[5-(4-千氧基-苯基)-6-環(huán)己基-7-氧代-4,7-二氫-吡唑并[1,5"]嘧啶-2-羰基]-氨基}-3-羥基-丙酸(544)，如〗H-NMR所示；C29H30N4O6:LC-MS計(jì)算值531.22[M++H]+;LC-MS實(shí)測值531.2。實(shí)施例36:合成5-(4-千氧基-苯基)-6-(2_環(huán)己基-乙基)-7-氧代-4,7-二氫-吡唑并卩,5-a]嘧啶-2-曱酸和6-(2-環(huán)己基-乙基)-5-呋喃-3-基-7-氧代-4,7-二氫-吡唑并[1,5-&]嘧啶-2-甲酸經(jīng)加料漏斗往回流的7.0g(175mmol)氫化鈉(NaH，60%，分散在礦物油中)和10.45g(88.5mmol)碳酸二乙酯(CO(OEt)2)在100mL曱苯中的混合物中滴加10g(44.3mmol)l-(4-卡氧基-苯基)-乙酮在20mL甲苯中的混合物，隨后在回流、氬氣氣氛下將得到的混合物加熱1小時(shí)。隨后將該反應(yīng)混合物冷卻至0°C,通過加入40mL乙酸猝滅，在這期間形成黃色沉淀，隨后加入水使沉淀溶解。分離的有機(jī)層用飽和的碳酸氫鈉溶液、水和鹽水洗滌，經(jīng)硫酸鈉干燥并濃縮，得到殘余物，其經(jīng)硅膠層析純化(在二氯曱烷中的10%己烷)，得到9.2g(產(chǎn)率為70%)所需3-(4-千氧基-苯基)-3-氧代-丙酸乙酯，如！HNMR所示。往2g(6.7mmol)3-(4-千氧基-苯基)-3-氧代-丙酸乙酯在12mL乙醇中的溶液(略微加熱使其完全溶解)中滴力。7mL(7mmol)叔丁醇鉀(KOtBu,1M'溶液，在叔丁醇中)，在這期間形成沉淀。將該反應(yīng)混合物于室溫下攪拌20分鐘，隨后加入乙醚，通過過濾收集沉淀，用乙醚洗滌并干燥，得到2.2g(產(chǎn)率為98%)所需3-(4-千氡基-苯基)-3-氧代-丙酸乙酯的鉀鹽，如110^411所示。在80°C沙浴、4mL管中，將100mg(0.3mmol)3-(4-千氧基-苯基)-3畫氧代-丙酸乙酯的鉀鹽、86mg(0.45mmol)2-環(huán)己基乙基溴和17mg(0.1mmol)碘化鉀(KI)在lmL二甲基甲酰胺(DMF)的混合物振搖過夜。隨后將該混合物濃縮，得到殘余物，其經(jīng)反相層析純化(Gilson),(在低壓凍干后)得到85mg(產(chǎn)率為70%)固體狀的2-(4-芐氧基-苯曱?；?-4-環(huán)己基-丁酸乙酯，如下所示C26H32O2:LC-MS計(jì)算值409.23[M++H]+;LC-MS實(shí)測值409.2。將71mg(0.171mmol)2-(4-千氧基-苯甲?；?-4-環(huán)己基-丁酸乙酯、24mg(0.171mmol)5-氨基-lH-吡唑-3-曱酸甲酯、7mg(20mol。/o)對(duì)曱苯磺酸一水合物(PTSA)和3mL氯苯的混合物于120。C下加熱過夜。隨后將該反應(yīng)混合物濃縮得到殘余物，其經(jīng)反相層析純化(Gilson),(在低壓凍干后)得到固體狀的所需5-(4-芐氧基-苯基)-6-(2-環(huán)己基-乙基)-7-氧代-4,7-二氫-吡唑并[1，5-a]嘧啶-2-曱酸曱酯，如下所示C29H3N304:LC-MS計(jì)算值486.23[M++H]+;LC-MS實(shí)測值486.2。隨后通過眾所周知的LiOH皂化方法將該材料轉(zhuǎn)化為5-(4-芐氧基-苯基)-6-(2-環(huán)己基-乙基)-7-氧代-4,7-二氫-吡唑并[l,5-a]嘧啶-2-甲酸(559)(經(jīng)兩步驟產(chǎn)率為10%);C28H29N3O4:LC-MS計(jì)算值472.22[M++H]+;LC-MS實(shí)測值472.2。注意使用市售的上述3-呋喃-3-基-3-氧代-丙酸乙酯進(jìn)行相同的合成步驟，得到6-(2-環(huán)己基-乙基)-5-呋喃-3-基-7-氧代-4,7-二氫-吡唑并[l,5-a]嘧啶-2-甲酸(612)。買施例37:合成4-(3-三氟曱基-苯氧基)-苯甲酸<formula>formulaseeoriginaldocumentpage133</formula>根據(jù)經(jīng)改動(dòng)的又獻(xiàn)方法(J.Org.Chem.2002,67,1699-1702),將2.74g(18mmol)4-羥基-笨甲酸甲酯、4.9g(27mmo1)醋酸銅(H)(Cu(OAc)2)、6.84g(36mmol)3-三氟曱基-苯氧基-硼酸、2.92mL(36mmol)吡咬(pyr)和120mLDCM的水綠色混合物于室溫下攪拌68小時(shí)，同時(shí)暴露在空氣中。該反應(yīng)混合物經(jīng)Celite硅藻土過濾，同時(shí)用乙酸乙酯和氯仿沖洗硅藻土墊。將合并的有機(jī)濾液濃縮成綠色固體殘余物，將其在乙酸乙酯和水間分配并用乙酸乙酯萃取。合并的有機(jī)萃取物用水(3次)、鹽水洗滌，經(jīng)硫酸鈉干燥，隨后蒸發(fā)，得到4.6g褐色殘余物，其經(jīng)硅膠層析純化(Biotage;1:1的己烷DCM)，得到3.56(產(chǎn)率為67%)淺黃色油狀的所需4-(3-三氟甲基-苯氧基)-苯甲酸甲酯如iH-NMR和19F-NMR所示；C15HuF303:LC-MS計(jì)算值297.07[M++H]+;LC-MS實(shí)測值297.1。在5(TC下，將3.56g(12mmol)4-(3-三氟甲基-苯氧基)-苯曱酸甲酯和在45mL四氫呋喃(THF)和15mL甲醇(MeOH)中的15mL(60mmol)4N氫氧化鈉(NaOH)溶液的混合物加熱25小時(shí)，此時(shí)薄層層析分析表明起始原料完全轉(zhuǎn)化為產(chǎn)物。將該反應(yīng)混合物濃縮，隨后用2NHC1溶液酸化，同時(shí)將燒瓶保持在冰浴中，此時(shí)形成白色沉淀。將該固體過濾并干燥，得到3.02g(89Q/。)白色固體狀的所需4-(3-三氟甲基-苯氧基)-苯甲酸，如'HNMR和"F-NMR所示。如以上流程描述完成6-環(huán)己基-7-氧代-5-[4-(3-三氟甲基-苯氧基)-苯基]-4,7-二氬-吡唑并[l,5-a]嘧啶-2-甲酸(543)的合成，通過所述用于合成5-(4-芐氧基-苯基)-6-環(huán)己基-7-氧代-4,7-二氫-吡唑并[l,5-a]嘧啶-2-甲酸(538)的轉(zhuǎn)化方法由4-(3-三氟甲基-苯氧基)-苯甲酸開始。對(duì)于編號(hào)543的化合物C26H22F3N304:LC-MS計(jì)算值498.16[M++H〗+;LC-MS實(shí)測值498.1。實(shí)施例38:合成6-環(huán)己基-7-氧代-5-[4-(3-三氟甲基-芐氧基)-苯基]-4,7-二氫-吡唑并[1，5-a]嘧啶-2-曱酸<formula>formulaseeoriginaldocumentpage135</formula>往2.28g(15mmol)4-羥基-苯曱酸甲酯在30rnL二曱基甲酰胺(DMF)中的溶液中加5.38g(16.5mmol)碳酸銫(Cs2C03)，隨后加入2.75mL(l8mmol)3-(三氟甲基)-千基溴，并將得到的非均質(zhì)混合物于室溫下攪拌過夜。將該反應(yīng)混合物過濾并濃縮，用水稀釋并用乙酸乙酯萃取，隨后合并的有機(jī)萃取物用水和鹽水洗滌，隨后濃縮，得到4.75g所需4-(3-三氟甲基-千氧基)-苯甲酸曱酯，如'HNMR和19F-NMR所示(含痕量殘余的3-(三氟甲基)-芐基溴)。該產(chǎn)物無需進(jìn)一步純化用于合成6-環(huán)己基-7-氧代-5-[4-(3-三氟曱基-芐氧基)-苯基]-4,7-二氫-吡唑并[l,5-a]嘧啶-2-甲酸(545),其如以上流程所述完成，通過前述用于合成5-(4-卡氧基-苯基)-6-環(huán)己基-7-氧代-4，7-二氬-吡唑并[l,5-a]嘧啶-2-甲酸的標(biāo)準(zhǔn)轉(zhuǎn)化。實(shí)施例39:合成6-環(huán)己基-5-[4-(3,5-二曱基-異嗯唑-4-基)-苯基]-7-氧代-4,7-二氫-吡唑并[l,5-a]嘧啶-2-曱酸、5-(4-千基-苯基)-6-環(huán)己基-7-氧代-4,7-二氫-吡唑并[l，5-a]嘧啶-2-曱酸和5-(4-(3-三氟甲氧基苯基)-苯基)-6-環(huán)己基-7-氧代-4,7-二氫-吡唑并[1，5-a]嘧啶-2-曱酸<formula>formulaseeoriginaldocumentpage136</formula>氯苯采用與用于制備其中4-溴-苯基由2-呋喃基代替的相關(guān)中間體相同的實(shí)驗(yàn)方法，合成以上順序的產(chǎn)物。該芳基溴化合物用作合成中間體，使用一些以下代表性的反應(yīng)將其轉(zhuǎn)化。<formula>formulaseeoriginaldocumentpage136</formula>在95°C、沙浴中，將42mg(0.1mmol)5國(4-溴-苯基)-6-環(huán)己基-7國氧代-4,7-二氬-吡唑并[l，5-a]嘧啶-2-甲酸甲酯、21mg(0.15mmol)3,5-二曱基-異嚼唑硼酸、7.3mg(0.01mmol)鈀催化劑和63mg(0.3mmol)磷酸鉀在lmL1,4-二嗯烷的混合物振搖過夜。隨后將該反應(yīng)混合物用二氯甲烷稀釋，經(jīng)小Celite硅藻土墊過濾，經(jīng)硫酸鈉干燥并蒸發(fā)，得到殘余物，其經(jīng)反相層析純化(Gilson)，得到固體狀的所需6-環(huán)己基-5-[4-(3,5-二甲基-異嗯唑-4-基)-苯基-7-氧代-4,7-二氫-吡唑并[1,5-3〗嘧啶-2-曱酸甲酯如所示C25H26N404:LC-MS計(jì)算值447.19[M++H]+;LC-MS實(shí)測值447.3。隨后通過眾所周知的LiOH皂化方案將該材料轉(zhuǎn)化為6-環(huán)己基-5-[4-(3,5-二甲基-異嗯唑-4-基)-苯基]-7-氧代-4，7-二氫-吡唑并[l,5-a]嘧啶-2-甲酸(591)(經(jīng)兩步驟產(chǎn)率為37%);C24H24N4O4:LC-MS計(jì)算值433,18[M++H]+;LC-MS實(shí)測值433.1。根據(jù)經(jīng)改動(dòng)的文獻(xiàn)方法(Suzuki,A.等，TetrahedronLett.1986,27,6369-6372)，用氬氣吹掃43mg(0.1mmol)5-(4-溴-苯基)-6-環(huán)己基-7-氧代-4，7-二氫-吡唑并[l,5-a]嘧啶-2-甲酸曱酯、7.3mg(0.01mmol)鈀催化劑、0.4mL(0.2mmol)B國卡基陽9畫BBN溶液(0.5M，在THF中)和63mg(0.3mmol)磷酸鉀的混合物，加入lmL1,4-二嗯烷，并在80°C、沙浴中將得到的混合物振搖過夜。隨后該反應(yīng)混合物用二氯甲烷稀釋，經(jīng)小Celite硅藻土墊過濾，經(jīng)硫酸鈉千燥，隨后蒸發(fā)，得到殘余物，其經(jīng)反相層析純化(Gilson)，得到固體狀的所需5-(4-千基-苯基)-6-環(huán)己基-7-氧代-4,7-二氫-吡唑并[l,5-a]嘧啶-2-甲酸甲酯，如下所示C27H27N303:LC-MS計(jì)算值442.21[M++H]+;LC-MS實(shí)測值442.2。隨后通過LiOH皂化，將該材料轉(zhuǎn)化為5-(4-芐基-苯基)-6-環(huán)己基-7-氧代-4,7-二氫-吡唑并[l,5-a]嘧啶-2-甲酸(581)(經(jīng)兩步驟產(chǎn)率為33%);C26H25N303:LC-MS計(jì)算值428.19[M++H]+;LC-MS實(shí)測值428.2。實(shí)施例40:合成6-環(huán)己基-5-呋喃-2-基-7-氧代-4,7-二氫-吡唑并[1，5-a]嘧啶-2-曱酸和6-環(huán)己基-5-(3-氟-苯基)-7-氧代-4,7-二氫-吡唑并[1,5-a]嘧啶-2-甲酸<formula>formulaseeoriginaldocumentpage138</formula>往冰冷卻的0.92g(23mmol)氬化鈉(NaH,60%，分散在礦物油中)(預(yù)先用己烷洗滌并真空干燥)在25mL1,2-二曱氧基乙烷(DME)的懸浮液中加入0.9g(5.76mmol)環(huán)己基乙酸甲酯，并在0。C下將得到的混合物攪拌20分鐘。隨后加入1.2g(8.56mmol)2-糠酸乙酯，并將該反應(yīng)混合物加熱回流過夜。隨后〗寄該混合物冷卻至0'C,通過加入1MHC1溶液猝滅(pH為3)，隨后用乙酸乙酯萃取。合并的有機(jī)萃取物用鹽水洗滌，經(jīng)硫酸鈉干燥并濃縮，得到褐色油狀物，其經(jīng)硅膠層析純化(Biotage;在二氯甲烷中的10%己烷)，得到l.lg(產(chǎn)率為76%)所需2-環(huán)己基-3-呋喃-2-基-3-氧代-丙酸甲酯，如'HNMR所示。在120。C下，將1.1g(4.4mmol)2-環(huán)己基-3-呋喃-2-基-3-氧代-丙酸甲酯、0.592g(4.2mmol)5-氨基-lH-吡唑-3-曱酸甲酯、76mg(0.4mmo1，100/omol)對(duì)甲苯磺酸一水合物(PTSA)和50mL氯苯的混合物加熱過夜。隨后將該反應(yīng)混合物濃縮得到殘余物，其經(jīng)硅膠層析純化(在二氯甲烷中的7%甲醇)，得到0.46g(產(chǎn)率為32%)所需6-環(huán)己基-5-呋喃國2-基-7-氧代-4,7-二氫-吡唑并[l,5-a]嘧啶-2-甲酸甲酯，如JHNMR所示；C8H19N304:LC-MS計(jì)算值342.14[M++H]+;LC-MS實(shí)測值342.3。隨后通過眾所周知的LiOH皂化方案將6-環(huán)己基-5-呔喃-2-基-7-氧代-4,7-二氫-吡唑并[l，5-a]嘧啶-2-甲酸曱酯轉(zhuǎn)化為6-環(huán)己基-5-呋喃-2-基-7-氧代-4,7-二氫-吡唑并[1,5-&]嘧啶-2-甲酸(595)，產(chǎn)率為77%。Ci7H17N304:LC-MS計(jì)算值328.13[M++H〗+;LC-MS實(shí)測值328.1。H'id6.99-6.98(d，J-3.6Hz,1H)，6.80-6.78(dofd,J-3.6Hz,J=2Hz,1H),6.39s,1H),2.79-2.71(m,1H),2.25-2.16(m,2H),1.77-1.75(m,2H),1.66^1.65(m,1H),1.59-1,55(m,2H),1.25-1.20(m,3H).注意釆用上述與用于3-氟-苯曱酸曱酯相同的合成方案，得到6-環(huán)己基-5-(3-氟-苯基)-7-氧代-4,7-二氫-吡唑并[l，5-a]嘧啶-2-甲酸(598);該環(huán)化反應(yīng)產(chǎn)率略微提高(54%)。實(shí)施例41:合成2-[(6-環(huán)己基-5-呋喃-2-基-7-氧代-4,7-二氫-吡唑并[l,5-a]嘧啶-2-羰基)-氨基]-3-(lH-吲哚-2-基)-丙酸<formula>formulaseeoriginaldocumentpage139</formula>往8.2mg(0.025mmol)6-環(huán)己基-5-呋喃-2-基-7-氧代-4,7-二氫-吡唑并[l,5-a]嘧啶-2-曱酸在2mL二甲基甲酰胺(DMF)中的溶液中加入0.009mL(0.05mmol)二異丙基乙基胺(DIEA)、少量的二曱基氨基吡啶(DMAP催化劑)晶體、7mg(0.027mmol)L-色氨酸曱酯.鹽酸鹽，隨后加入llmg(0.03mmol)HATU,并將得到的混合物于室溫下攪拌過夜。該反應(yīng)混合物用乙酸乙酯稀釋，用0.1N氬氧化鈉溶液(2次)和鹽水洗滌。分離的有機(jī)層經(jīng)硫酸鈉干燥并濃縮，得到殘余物，其經(jīng)反相層析純化HNMR(DMSO-d6).58.06-8.0.5d,J-2(Gilson)，得到所需2-[(6-環(huán)己基-5-呋喃-2-基-7-氧代-4,7-二氬-吡唑并[1,5-a]嘧啶-2-羰基)-氨基]-3-(lH-吲哚-2-基)-丙酸曱酯(606)。隨后通過眾所周知的LiOH皂化方法將該化合物轉(zhuǎn)化為2-[(6-環(huán)己基-5,夫喃-2-基-7-氧代-4,7-二氬-吡唑并[1，5-3]嘧啶-2-羰基)-^基]-3-(111-吲哚-2-基)-丙酸(599)(經(jīng)兩步驟產(chǎn)率為39%);C28H27N505:LC-MS計(jì)算值514.2[M++H]+;LC-MS實(shí)測值514.2。注意雖然在該方案用于該系列的大多數(shù)酰胺，但是在一些情況中為了方便使用以下不同的酰胺化方案往該酸在四氫呋喃(THF)中的溶液中加4當(dāng)量胺(R-NH2),隨后加入2當(dāng)量l-羥基苯并三唑(HOBt)和4當(dāng)量PS-碳二亞胺樹脂，隨后將得到的混合物于室溫下攪拌過夜。隨后該反應(yīng)混合物用4當(dāng)量MP-碳酸酯樹脂和4.8當(dāng)量PS-TsOH樹脂處理，并在室溫下持續(xù)攪拌4小時(shí)。隨后將該混合物過濾并用THF洗滌，將合并的THF萃取物濃縮，得到粗制的偶合產(chǎn)物。在第二步中(脫保護(hù))，典型的LiOH水溶液介導(dǎo)的皂化用于含曱基或乙基酯的胺構(gòu)造單元，和用于含^又丁基酯或醚的胺構(gòu)造單元，通常采用TFA與水(95:5)的脫保護(hù)方案。實(shí)施例42:合成N-(6-環(huán)己基-5-呋喃-2-基-7-氧代-4,7-二氫-吡唑并[l,5-3]嘧啶-2-羰基)-(3-苯基-甲磺酰胺往20mg(0.06mmol)6-環(huán)己基-5-呋喃-2-基-7-氧代-4,7-二氫-吡唑并[l,5-a]嘧啶-2-甲酸在2mL二氯甲烷(DCM)中的溶液中加入少量的DMAP(催化劑)晶體、12mg(0.071mmol)曱苯磺酰胺，隨后加入在DCM中的0.071mL(0.071mmol)lM二環(huán)己基碳二亞胺(DCC)溶液。將該反應(yīng)混合物于室溫下攪拌過夜，濃縮，隨后得到的殘余物經(jīng)反相層析純化(Gilson)，(在低壓凍干后)得到5mg(產(chǎn)率為17%)固體狀的所需N-(6-環(huán)己基-5-呋喃-2-基-7-氧代-4，7-二氫-吡唑并[l,5-a]嘧啶-2-羰基)-C-苯基-甲磺酰胺(616)，如下所示，C24H24N405S:LC-MS計(jì)算值481.15[M++H]+;LC-MS實(shí)測值481.1。注意還使用該方案合成N-(6-環(huán)己基-5-呋喃-2-基-7-氧代-4,7-二氫-吡唑并[l,5-a]嘧啶-2-羰基)-C,C,C-三氟-甲磺酰胺(617)。實(shí)施例43:HCVRNA-依賴性RNA聚合酶活性測定綜述使用與生物素化oligoG12引物綴合的RNA均聚物(polyC),通過閃爍親近測定法(SPA)測定HCVRNA-依賴性RNA聚合酶(RdRp)。不經(jīng)變性和退火過程該引物可直接加入模板。該測定特異性地測定結(jié)合至PolyG中的卩H]標(biāo)記的GTP。生物素化Gi2能通過涂有鏈親和素的SPA微珠俘獲fH]標(biāo)記的產(chǎn)物。通過從含21個(gè)氨基酸疏水域的C-端除去55個(gè)氨基酸部分來修飾在該測定中使用的HCVNS5BRdRp。將HCVNS5BRdRp蛋白純化為在大腸桿菌(ECO/Z)中表達(dá)的多組氨酸(HiS6)融合蛋白和通過特異性蛋白水解作用除去His標(biāo)簽(His-tag)。該測定在室溫(22。C)、96孔板中進(jìn)行50分鐘。不需要預(yù)孵化。在存在或不存在試驗(yàn)化合物下，通過往RND底物中加入酶啟動(dòng)反應(yīng)。為使反應(yīng)停止，往各孔中加入50ji1補(bǔ)充有100mMEDTA的10mg/mL涂有鏈親和素的SPA微珠，隨后在室溫下將板在振搖下溫育15分鐘。在經(jīng)過濾收獲和洗滌后，使用T叩Count閃爍計(jì)數(shù)器/發(fā)光計(jì)數(shù)器對(duì)每孔的放射性活度進(jìn)行計(jì)數(shù)。測定條件是將5(Hd的反應(yīng)體積在室溫下溫育50分鐘，該反應(yīng)體積中含20mMHepes(pH7.3)、7.5mMDTT、20單位/mLRnasin、0.5ug/mLoligo(G)12、5pg/mLPoly(C)、0.5^MGTP、ljiCi/mL3H-GTP、10mMMgCl2、60mMNaCl、100pg/mLBSA、6nMNS5BCT55酶。材料緩沖液IX1升Hepes(pH7.3)20rnM20rnL1MMgCl210mMlOmL1MNaCl60rnM12mL5MBSAlOO^g/mLlOOmg無核糖核酸酶水至l升經(jīng)無菌濾器，緩沖液于4。C下保存。RNA模板在20mMHepes(pH7.3)中制備5mg/mL的儲(chǔ)備液。往5mg多聚胞苷酸[Sigma,目錄號(hào)P4903]中加入緩沖液(4mL)并在OD26Q下檢查該溶液吸光度和使用下式進(jìn)行量的轉(zhuǎn)換1OD26Q=40|_ig/mL。隨后將該溶液校正至5mg/mL(在緩沖液中)，隨后等分并于-8(TC下保存。RNA引物在20mMH印es(pH7.3)中制備0.5mg/mL引物的儲(chǔ)備液。在OD260下檢查該溶液吸收度和使用下式進(jìn)行量的轉(zhuǎn)換1OD26G=32pg/mL，隨后等分并于-80。C下保存。GTP底物在20mMH叩es(pH7.3)中制備儲(chǔ)備溶液(2mM)，隨后等分并在-80匸下保存。NS5BACT55RdRp:將HCVNS5B厶CT55(獲自lbBK菌林)純化成在大腸桿菌(E.coli.)中表達(dá)的多組氨酸(His6)融合蛋白。通過從含21個(gè)氨基酸疏水域的C-端除去55個(gè)氨基酸部分并在C-端將His6標(biāo)簽融合至該蛋白中來修飾該蛋白。在純化后，通過特異性蛋白水解將His標(biāo)簽除去。該蛋白的分子量為60323。對(duì)于工作儲(chǔ)備液，將酶稀釋10倍由53nM稀釋至5.4^M，隨后等分并于-80。C下保存。各反應(yīng)需要6nM酶。酶貯存緩沖液25mMHepes(pH7.5)、5mMDTT、0.6MNaCl、15%丙三醇、0.1%辛基葡糖苷、2mg/L亮抑酶肽、100pMPMSF。該緩沖液于-2(TC下保存。醋酸鋅對(duì)照抑制劑醋酸鋅的50X儲(chǔ)備液配制成在100%DMSO中的16、8、4和2mM的溶液。儲(chǔ)備液于4'C下保存。濾板洗滌緩沖液200mL20XSSC緩沖液和80mLHepes(lM,pH7.3)用milli-QR水稀釋至4升。該溶液于室溫下保存。儀器和輔助材料TopCount.NXT微量培養(yǎng)板讀板器[Packard,A"U00]Mach3UHarvester96[TomTec,%-3]微量測試用U形底組織培養(yǎng)板[Falcon，353077]Unifilter-96,GF/B白色微量培養(yǎng)板[Packard,6005177]Nunc聚丙烯微量培養(yǎng)板[Nunc,442587]TopSeal-A:96孔微量培養(yǎng)板密封膜[Packard,60O5185]迷你定軌振蕩器(MiniOrbitalShaker)[Bellco，7744-08096〗化學(xué)試劑RNA均聚物/Poly(C)[Sigma,目錄號(hào)P4903]生物素-01igo(G)！2未標(biāo)記的GTPpH]標(biāo)記的GTP1MHepes(pH7.3)0.5MEDTA(pH8.0)[Novagen,69176-1][Amersham，TRK314][USB,16924][GibcoBRL，15575-012〗DTT[二硫蘇糖醇〗[GibcoBRL,15508-013]MgCl2[Sigma，M1028]BSA(FractionV)[BoehringerMannheim,100350]RNaseIN[P腿ega,N2515]亮抑酶肽[Sigma,L9783]正辛基葡糖苷[BoehringerMannheim，1359088]PMSF[Sigma,76265MNaCl[GibcoBRL,24740-011]丙三醇[GibcoBRL，15514-011]涂有鏈親和素的SPA微珠〖Amersham,RPNQ0007]PBS(w/oMg十+和Ca抖)[GibcoBRL，14190-144]DMSO[Sigma,D5879]ZnOAc[Sigma，Z0625]無核糖核酸酶水[USB，US70783]20XSSC緩沖液[GibcoBRL,15557-044]測定方法試驗(yàn)化合物的稀釋將儲(chǔ)備液制備成濃度為lmg/mL(在100y。DMSO)的溶液。使用多通道移液管將化合物在96孔聚丙烯微量培養(yǎng)板[Nunc]中如下進(jìn)行一系列稀釋(1)往B、E和H排中加入15(ilDMSO;往C、D、F和G排中加入2(HdDMSO。往A排中加入未經(jīng)稀釋的12個(gè)化合物，隨后將5nl各化合物由A排轉(zhuǎn)移至B排，研磨10-12次以便混合。隨后從B排中轉(zhuǎn)移5pl至C排，如此法轉(zhuǎn)移直至H排，產(chǎn)生儲(chǔ)備液的7個(gè)系列的稀釋液。(2)如下所述將1^1各稀釋液(50x)轉(zhuǎn)移至測定板，使最終濃度為20、5、1、0.2、0.05、0.01、0.002和0細(xì)5ng/mL。測定設(shè)定l板酶/RNA混合物(總計(jì)700nl,5pl/反應(yīng))660WIX緩沖液7|iil5mg/mL模板polyC7^10.5mg/mL引物oligorG123.5^140U1RNAsin,11MDTT8|il5.3nM酶(10X最終為6nM)核苷酸混合物(總計(jì)2mL，20^U/反應(yīng))2.0mLIX緩沖液30^1DTT(IM)5nllmCi/mL[3H]曙GTP1，2mM冷GTP反應(yīng)混合物24pl1X緩沖液20pl核苷酸混合物1^1化合物5^1酶方案(1)將24^1IX緩沖液置于％孔板(微量試驗(yàn)用U形底組織培養(yǎng)板，得自Falcon)的各板中。(2)將IX緩沖液、DTT、未標(biāo)記GTP和3H-GTP按順序加入并混合。往各板中加入在IX緩沖液中的20^1該核香酸混合物。(3)往除酶/RNA和僅RNA對(duì)照孔外的各孔中加入1^1各試驗(yàn)化合物的稀釋液，一式三份。往對(duì)照孔中加入lnll00。/。DMSO。(4)往孔中加入1W醋酸鋅對(duì)照抑制劑的各儲(chǔ)備液，一式兩份。所用50X醋酸鋅儲(chǔ)備液為16、8、4和2mM，稀釋為最終濃度為320、160、80和40pM。(5)將1X緩沖液、DTT、RNasin、生物素-01igo(G)2和polyC按順序加入并混合并在室溫下溫育15分鐘。加入酶，混合，往除僅RNA對(duì)照孔外各孔中加入5|iil酶/RNA/緩沖液混合物。往僅RNA對(duì)照孔中加入5^1RNA/1X緩沖液混合物。(6)將板在迷你定軌振蕩器(Bellco)上振搖1分鐘來充分混合反應(yīng)組分。將板在室溫(22。C)下培養(yǎng)50分鐘。(7)通過往各孔中加入50nl涂有鏈親和素的SPA微珠(10mg/mL，在補(bǔ)充有100mMEDTA的PBSw/oMg""+和Ca^中)使反應(yīng)停止。隨后如(5)中在室溫下將該板再振搖15分鐘來混合微珠。(8)隨后使用收獲器(Tomtec)對(duì)板進(jìn)行收獲并通過轉(zhuǎn)移至濾板(Unifilter-96GF/B白色微量培養(yǎng)板，得自Packard)用濾板洗滌緩沖液洗滌。讓板在37。C下干燥30分鐘。在干燥后，粘性襯帶(adhesivebackingtape)(生產(chǎn)商提供)用于Unifilter板底部。上部用TopSeal微量培養(yǎng)板密封膜覆蓋。(9)使用TopCount閃爍計(jì)數(shù)器/發(fā)光計(jì)數(shù)器計(jì)數(shù)各孔放射強(qiáng)度。本發(fā)明的HCVRdRp抑制劑的代表性數(shù)據(jù)如表1所示。實(shí)施例43:HCVNS5BRNA-依賴性RNA聚合酶的高通量測定使用與生物素化oligoG12引物復(fù)合的RNA均聚物(polyC)開發(fā)出用于HCVNS5BRdRp測定的閃爍親近分析法(SPA)。無需變性和退火過程該引物可直接加入模板中。該測定特異性地測定結(jié)合至PolyG中的卩H]標(biāo)記的GTP。生物素化G!2能通過涂有鏈親和素的SPA微珠俘獲卩H]標(biāo)記的產(chǎn)物。將在該測定中使用的NS5B酶、NS5BCT21-His和NS5BCT55純化為在大腸桿菌(五co/,)中表達(dá)的多組氨酸(His6)融合蛋白。通過從C-端除去21個(gè)M酸疏水域來》務(wù)飾NS5BCT21-His蛋白。His標(biāo)簽融合至該蛋白的C-端，代替刪除的疏水域。通過從含21個(gè)氨基酸疏水域的C-端除去55個(gè)氨基酸部分并將His6標(biāo)簽融合至該蛋白的N-端來修飾NS5BCT55。在純化后，通過特異性蛋白水解將His標(biāo)簽除去。該測定的底物為與生物素化的引物(oligoG12)復(fù)合的RNA均聚物模板(polyC)。將[3H]-GTPs聚合成與PolyC模板互補(bǔ)的polyG。該測定在室溫(22。C)、96孔板中進(jìn)行3小時(shí)。不需要預(yù)孵化。加入EDTA使最終濃度為50mM，來使反應(yīng)停止。隨后往各孔中加入涂有鏈親和素的SPA微珠(0.5mg)。在收獲并經(jīng)過濾洗滌后，使用TopCount閃爍計(jì)數(shù)器/發(fā)光計(jì)數(shù)器計(jì)數(shù)各孔放射強(qiáng)度。測定條件為在室溫下，50^1反應(yīng)體積，在20mMHepes(pH7.3)、7.5mMDTT、10mMMgCl2、121mMNaCl、100pg/mlBSA、2%DMSO、0.05%丙三醇、5nMGTP、l.O(iCi[3H]-GTP、0.25^gpoly(C)/0.025pg。ligo(G)12、1單位RNaseIN和0.05fiMNS5BDCT21-His或NS5BDCT55中反應(yīng)3小時(shí)。材料酶緩沖液Hepes(pH7.3)MgCl2NaClIX20mM10mM120mM1.25X25mM12.5mM150mM5X儲(chǔ)備液lOOmM50mM600mM反應(yīng)緩沖液Hepes(pH7.3)MgCl2BSAIX20mM10mM畫ng/ml1.25X25mM12.5mM125pg/ml5X儲(chǔ)備液lOOmM50mM500貼/ml緩沖液于4'C下保存，底物和酶于-8(TC下保存'NS5BCT21-His酶儲(chǔ)存緩沖液50mMHepes(pH7.3)、5mMDTT、0.5MNaCl、20。/。丙三醇、200ng/ml抗蛋白酶、100ng/ml亮抑酶肽、50nMPMSF。緩沖液于-2(TC下保存。NS5BCT55酶儲(chǔ)存緩沖液25mMHepes(pH7,5)、10mM口-巰基乙醇、0.6MNaCl、15%丙三醇、0.1%辛基葡糖普、2mg/L亮抑酶肽、,MPMSF。緩沖液于-2(TC下保存。測定方法(1)將9nl無核糖核酸酶水置于96孔板(微量試驗(yàn)用U形底組織培養(yǎng)板，得自Falcon)的每個(gè)孔中。(2)將無水核糖核酸酶、5X反應(yīng)緩沖液(含BSA)、DTT、冷GTP和3H-GTP按順序加入并混合。往各孔中加入在1.25x反應(yīng)緩沖液中的20nl該核苷酸混合物。(3)將無核糖核酸酶水、5X酶緩沖液(含NaCl)、DTT、RNaseIN、01igo(G),2和polyC按順序加入并混合并在室溫下溫育15分鐘。加入酶，混合并往除僅RNA對(duì)照孔外的各孔中加入在1.25x酶緩沖液中的酶/RNA混合物。往僅RNA對(duì)照孔中加入在1.25x酶緩沖液的20^1酶貯存緩沖液/RNA混合物。(4)往除酶/RNA和僅RNA對(duì)照孔外的各孔中加入1^1各試驗(yàn)化合物[100%DMSO、100pg/ml]。對(duì)照孔中加入l^il100%DMSO。(5)在迷你定軌振蕩器(Bellco)上輕搖該板1分鐘來完全混合反應(yīng)組分，隨后在室溫下溫育3小時(shí)。(6)通過往各孔中加入50nl涂有鏈親和素的SPA微珠(0.5mg,重新懸浮在補(bǔ)充有100mMEDTA的PBSw/oMg"^和Ca—中)使反應(yīng)停止。如上在振搖該板來混合微珠并在室溫下溫育15分鐘。(7)隨后使用收獲器(Tomtec)對(duì)板進(jìn)行收獲，洗滌并轉(zhuǎn)移至濾板上。使用T(DpCount閃爍計(jì)數(shù)器/發(fā)光計(jì)數(shù)器計(jì)數(shù)各板放射強(qiáng)度。表1.HCVRdRp'的抑制<table>tableseeoriginaldocumentpage149</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage150</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage151</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage152</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage153</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage154</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage155</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage156</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage157</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage158</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage159</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage160</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage161</column></row><table><formula>formulaseeoriginaldocumentpage162</formula><table>tableseeoriginaldocumentpage163</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage164</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage165</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage166</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage167</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage168</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage169</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage170</column></row><table>說明書第161/241頁<table>tableseeoriginaldocumentpage172</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage173</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage174</column></row><table><formula>formulaseeoriginaldocumentpage175</formula><table>tableseeoriginaldocumentpage176</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage177</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage178</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage179</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage180</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage181</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage182</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage183</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage184</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage185</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage186</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage187</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage188</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage189</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage190</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage191</column></row><table><formula>formulaseeoriginaldocumentpage192</formula><table>tableseeoriginaldocumentpage193</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage194</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage195</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage196</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage197</column></row><table>2942訴。"2訴297》乂》298HO、299StBBBBBB<table>tableseeoriginaldocumentpage199</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage200</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage201</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage202</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage203</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage204</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage205</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage206</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage207</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage208</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage209</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage210</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage211</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage212</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage213</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage214</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage215</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage216</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage217</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage218</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage219</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage220</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage221</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage222</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage223</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage224</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage225</column></row><table>9rrF46204630464廠\<H"。廣o465廠\|MHO乂04660Y^Y、4670BBAAABBAABB<table>tableseeoriginaldocumentpage227</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage228</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage229</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage230</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage231</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage232</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage233</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage234</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage235</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage236</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage237</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage238</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage239</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage240</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage241</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage242</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage243</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage244</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage245</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage246</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage247</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage248</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage249</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage250</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage251</column></row><table>權(quán)利要求1.結(jié)構(gòu)式(VII)所表示的化合物或式(VII)化合物的藥學(xué)上可接受的鹽、溶劑合物、酯或前藥其中R2為鹵素；R3為飽和或部分不飽和的雜環(huán)基團(tuán)；且R4選自H、鹵素、鹵代烷基、烷基、烯基、炔基、芳基、芳基烷基、芳基烯基、環(huán)烷基、環(huán)烷基烷基、烯基烷基、炔基烷基、雜環(huán)基、雜環(huán)基烷基、雜芳基、雜芳基烷基、-NR8R9、-NR8COR9、-NR8SO2R9、-COR8、-CO2R8、-CONR8R9、-CH2OR8、-OR8、-SR8、-SO2R8、-S(O2)NR8R9、-S(O2)芳基、-S(O2)雜芳基、-C(O)OR9、-C(O)芳基、-C(O)雜芳基、-(CHR5)n-芳基、-(CHR5)n-雜芳基、其中R4的所述烷基、烯基、炔基、芳基、芳基烷基、芳基烯基、環(huán)烷基、環(huán)烷基烷基、烯基烷基、炔基烷基、雜環(huán)基、雜環(huán)基烷基、雜芳基、雜芳基烷基和正如上文所示的雜環(huán)部分各自可未取代或任選被一個(gè)或多個(gè)可相同或不同的部分取代，各部分獨(dú)立地選自H、鹵素、烷基、三氟甲基、-OR8、-NR8R9、-SR8、-SO2R9、-CN、-SO2NR8R9、-CF3和-NO2；R5選自H、烷基、芳基或環(huán)烷基；R6選自H、烷基、烯基、芳基、芳基烷基、芳基烯基、環(huán)烷基、雜環(huán)基、雜環(huán)基烷基、雜芳基和雜芳基烷基，其中所述烷基、烯基、芳基、芳基烷基、環(huán)烷基、雜環(huán)基、雜環(huán)基烷基、雜芳基和雜芳基烷基各自可未取代或任選被一個(gè)或多個(gè)可相同或不同的部分取代，各部分獨(dú)立地選自鹵素、烷基、芳基、環(huán)烷基、雜環(huán)基烷基、-CF3、-OCF3、-CN、-OR5、-NR5R10、-C(R5R11)p-R9、-N(R5)Boc、-(CR5R11)pOR5、-C(O2)R5、-C(O)R5、-C(O)NR5R10、-SO3H、-SR10、-S(O2)R7、-S(O2)NR5R10、-N(R5)S(O2)R7、-N(R5)C(O)R7和-N(R5)C(O)NR5R10；R7選自烷基、環(huán)烷基、芳基、芳基烯基、雜芳基、芳基烷基、雜芳基烷基、雜芳基烯基和雜環(huán)基，其中所述烷基、環(huán)烷基、雜芳基烷基、芳基、芳基烯基、雜芳基、芳基烷基、雜芳基烷基、雜芳基烯基和雜環(huán)基各自可未取代或任選獨(dú)立地被一個(gè)或多個(gè)可相同或不同的部分取代，各部分獨(dú)立地選自鹵素、烷基、芳基、環(huán)烷基、CF3、OCF3、CN、-OR5、-NR5R10、-CH2OR5、-C(O2)R5、-C(O)NR5R10、-C(O)R5、-SR10、-S(O2)R10、-S(O2)NR5R10、-N(R5)S(O2)R10、-N(R5)C(O)R10和-N(R5)C(O)NR5R10；R8選自H、-OR6、-NR5R6、-C(O)NR5R10、-S(O2)NR5R10、-C(O)R7、-C(＝N-CN)-NH2、-C(＝NH)-NHR5、雜環(huán)基、-S(O2)R7、id="icf0004"file="A2006800456640004C1.tif"wi="33"he="28"top="79"left="23"img-content="drawing"img-format="tif"orientation="portrait"inline="yes"/>-OR10、-CF3、烷基、烯基、芳基、芳基烷基、芳基烯基、環(huán)烷基、雜環(huán)基、雜環(huán)基烷基、雜芳基和雜芳基烷基，其中所述烷基、烯基、芳基、芳基烷基、環(huán)烷基、雜環(huán)基、雜環(huán)基烷基、雜芳基和雜芳基烷基各自可未取代或任選被一個(gè)或多個(gè)可相同或不同的部分取代，各部分獨(dú)立地選自鹵素、烷基、芳基、環(huán)烷基、雜環(huán)基烷基、-CF3、-OCF3、-CN、-OR5、-NR5R10、-C(R5R11)p-R9、-N(R5)Boc、-(CR5R11)pOR5、-C(O2)R5、-C(O)R5、-C(O)NR5R10、-SO3H、-SR10、-S(O2)R7、-S(O2)NR5R10、-N(R5)S(O2)R7、-N(R5)C(O)R7和-N(R5)C(O)NR5R10；R9選自H、-OR6、-NR5R6、-C(O)NR5R10、-S(O2)NR5R10、-C(O)R7、-C(＝N-CN)-NH2、-C(＝NH)-NHR5、雜環(huán)基、-S(O2)R7、id="icf0005"file="A2006800456640004C2.tif"wi="33"he="28"top="195"left="24"img-content="drawing"img-format="tif"orientation="portrait"inline="yes"/>-OR10、-CF3、烷基、烯基、芳基、芳基烷基、芳基烯基、環(huán)烷基、雜環(huán)基、雜環(huán)基烷基、雜芳基和雜芳基烷基，其中所述烷基、烯基、芳基、芳基烷基、環(huán)烷基、雜環(huán)基、雜環(huán)基烷基、雜芳基和雜芳基烷基各自可未取代或任選被一個(gè)或多個(gè)可相同或不同的部分取代，各部分獨(dú)立地選自鹵素、烷基、芳基、環(huán)烷基、雜環(huán)基烷基、-CF3、-OCF3、-CN、-OR5、-NR5R10、-C(R5R11)p-R9、-N(R5)Boc、-(CR5R11)pOR5、-C(O2)R5、-C(O)R5、-C(O)NR5R10、-SO3H、-SR10、-S(O2)R7、-S(O2)NR5R10、-N(R5)S(O2)R7、-N(R5)C(O)R7和-N(R5)C(O)NR5R10；R10選自H、烷基、烯基、芳基、芳基烷基、芳基烯基、環(huán)烷基、雜環(huán)基、雜環(huán)基烷基、雜芳基和雜芳基烷基，其中所述烷基、烯基、芳基、芳基烷基、環(huán)烷基、雜環(huán)基、雜環(huán)基烷基、雜芳基和雜芳基烷基各自可未取代或任選被一個(gè)或多個(gè)可相同或不同的部分取代，各部分獨(dú)立地選自鹵素、烷基、芳基、環(huán)烷基、雜環(huán)基烷基、-CF3、-OCF3、-CN、-OR5、-NR5R11、-C(R5R11)p-R9、-N(R5)Boc、-(CR5R11)pOR5、-C(O2)R5、-C(O)R5、-C(O)NR5R11、-SO3H、-SR11、-S(O2)R7、-S(O2)NR5R11、-N(R5)S(O2)R7、-N(R5)C(O)R7和-N(R5)C(O)NR5R11；或任選(i)在-NR5R11部分中R5和R11，或(ii)在-NR5R6部分中R5和R6，可連接在一起形成環(huán)烷基或雜環(huán)基部分，所述環(huán)烷基或雜環(huán)基部分各自未取代或任選獨(dú)立地被一個(gè)或多個(gè)R9基團(tuán)取代；且R11為H、鹵素或烷基；m為0-4；n為1-4；和p為1-4。2.權(quán)利要求1的化合物，其中RS選自C1、Br、F和I。3.權(quán)利要求1的化合物，其中113選自四氫呋喃基、四氫漆吩基、吡咯烷基、吡咯烷酮基、哌啶基、吡咯啉基、四氬喚啉基、四氫異壹啉基、十氫喹啉基、嗯唑烷基、哌嗪基、二氧雜環(huán)己烷基、二氧雜環(huán)戊烷基、二氮雜環(huán)庚烯基、氧雜氮雜環(huán)庚烯基、硫雜氮雜環(huán)庚烯基和嗎啉基。4.權(quán)利要求1的化合物，其中W為H。5.權(quán)利要求1的化合物，其中W選自Cl、Br、-OH、-SH、烷基、烯基、炔基、卣代烷基和環(huán)丙基。6.權(quán)利要求1的化合物，其中R"為-NH2。7.權(quán)利要求1的化合物,其中R"為-OH。8.權(quán)利要求1的化合物，其中W為烷f^。9.權(quán)利要求1的化合物，其中R"為烷硫基。10.權(quán)利要求1的化合物，其中W為鹵素。11.權(quán)利要求1的化合物，其中n為1。12.權(quán)利要求1的化合物，其中p為1。13.權(quán)利要求1的化合物，其中所述化合物為14.結(jié)構(gòu)式(vm)所表示的化合物或式(vm)化合物的藥學(xué)上可接受的鹽、溶劑合物、酯或前藥R'其中:W為鹵素；W為烷基；且R"為烷基或烷氧基。15.權(quán)利要求14的化合物，其中W為Br。16.權(quán)利要求14的化合物，其中W為甲基。17.權(quán)利要求14的化合物，其中R"為乙基。18.權(quán)利要求14的化合物，其中R"為乙絲。19.權(quán)利要求14的化合物，其中所述化合物為20.權(quán)利要求1或14中任一項(xiàng)的化合物或其藥學(xué)上可接受的鹽、溶劑合物、酯或前藥，其為純化形式。21.權(quán)利要求1或14中任一項(xiàng)的化合物或其藥學(xué)上可接受的鹽、溶劑合物、酯或前藥，其為分離形式。22.—種藥物組合物，所述組合物包含治療有效量的至少一種權(quán)利要求1或14中任一項(xiàng)的化合物或其藥學(xué)上可接受的鹽、溶劑合物、酯或前藥以及至少一種藥學(xué)上可接受的載體。23.權(quán)利要求22的藥物組合物，所述藥物組合物還包括一種或多種不同于權(quán)利要求1或14中任一項(xiàng)化合物的抗癌藥。24.權(quán)利要求22的藥物組合物，其中所述一種或多種抗癌藥選自細(xì)胞生長抑制劑、順鉑、多柔比星、泰索帝、泰素、依托泊苷、CPT-ll、伊立替康、Camptostar、托泊替康、紫杉醇、多西他賽、埃坡霉素、他莫昔芬、5-氟尿嘧啶、曱氨蝶呤、5FU、替莫唑胺、環(huán)磷酰胺、SCH66336、R115777、L778,123、BMS214662、易瑞沙、它賽瓦、抗EGFR抗體、格列衛(wèi)、甘樂能、阿糖胞苷、阿霉素、環(huán)磷酰胺制劑、吉西他濱、烏拉莫司汀、氮芥、異環(huán)磷酰胺、美法侖、苯丁酸氮芥、哌泊溴烷、曲他胺、三亞乙基硫代磷酰胺、白消安、卡莫司汀、洛莫司汀、鏈佐星、達(dá)卡巴。秦、氟尿苷、阿糖胞苷、6-巰基噪呤、6-硫鳥噪呤、磷酸氟達(dá)拉濱、噴司他丁、長春堿、長春新堿、長春地辛、博來霉素、放線菌素D、柔紅霉素、多柔比星、表柔比星、伊達(dá)比星、普卡霉素、脫氧考福霉素、絲裂霉素-C、L-天冬酰胺酶、替尼泊苷、17a-炔雌醇、己烯雌酚、睪酮、潑尼松、氟甲睪酮、丙酸屈他雄酮、睪內(nèi)酯、醋酸曱地孕酮、甲潑尼龍、甲睪酮、潑尼松龍、曲安西龍、氯烯雌醚、羥孕酮、氨魯米特、雌莫司汀、醋酸甲羥孕酮、亮丙立德、氟他胺、托瑞米芬、戈舍瑞林、順鉑、卡鉑、羥基脲、安吖啶、丙卡巴肼、米托坦、米托蒽醌、左i走咪唑、諾維本、CPT-ll、阿那曲唑、來曲唑、卡培他濱、瑞羅沙。分、屈洛昔芬、六曱蜜胺、阿瓦斯丁、赫賽汀、貝克薩、萬珂、吉維林、三仙諾、希羅達(dá)、長春瑞濱、卟吩姆、愛必妥、Liposomal,塞替派、六甲蜜胺、美法侖、群司珠單抗、列若唑、氟維司群、依西美坦、異環(huán)磷酰胺、.利妥昔單抗、C225和阿侖珠單抗。25.權(quán)利要求1或14中任一項(xiàng)的化合物或其藥學(xué)上可接受的鹽、溶劑合物、酯或前藥在抑制一種或多種細(xì)胞周期蛋白依賴性激酶中的用途。26.權(quán)利要求1或14中任一項(xiàng)的化合物或其藥學(xué)上可接受的鹽、溶劑合物、酯或前藥在治療一種或多種與細(xì)胞周期蛋白依賴性激酶有關(guān)疾病中的用途。27.(i)權(quán)利要求1或14中任一項(xiàng)的化合物或其藥學(xué)上可接受的鹽、溶劑合物、酯或前藥；和(ii)一定量的至少一種笫二種化合物，所述第二種化合物為不同于權(quán)利要求1或14中任一項(xiàng)化合物的抗癌藥；在治療一種或多種與細(xì)胞周期蛋白依賴性激酶有關(guān)的疾病中的用途。28.權(quán)利要求25、26或27中任一項(xiàng)的用途，其中所述細(xì)胞周期蛋白依賴性激酶為CDK1。29.權(quán)利要求25、26或27中任一項(xiàng)的用途，其中所述細(xì)胞周期蛋白依賴性激酶為CDK2。30.權(quán)利要求26或27中任一項(xiàng)的用途，其中所述疾病選自膀胱癌、乳腺癌、結(jié)腸癌、腎癌、肝癌、肺癌、小細(xì)胞肺癌、非小細(xì)胞肺癌、頭頸部癌、食道癌、膽嚢癌、卯巢癌、胰腺癌、胃癌、宮頸癌、甲狀腺癌、前列腺癌和包括鱗狀細(xì)胞癌在內(nèi)的皮^^癌；白血病、急性淋巴細(xì)胞白血病、慢性淋巴細(xì)胞白血病、急性成淋巴細(xì)胞白血病、B-細(xì)胞淋巴瘤、T-細(xì)胞淋巴瘤、霍奇金淋巴瘤、非霍奇金淋巴瘤、毛細(xì)胞淋巴瘤、套細(xì)胞淋巴瘤、骨髓瘤和伯基特淋巴瘤；急性髓細(xì)胞性白血病、慢性髓細(xì)胞性白血病，骨髓增生異常綜合征和前髓細(xì)胞白血??；纖維肉瘤、橫紋肌肉瘤；星形細(xì)胞瘤、成神經(jīng)細(xì)胞瘤、神經(jīng)膠質(zhì)瘤和神經(jīng)鞘瘤；黑素瘤、精原細(xì)胞瘤、畸胎癌、骨肉瘤、著色性千皮病、角化棘皮瘤、甲狀腺濾泡癌和卡波西肉瘤。31.權(quán)利要求25、26或27中任一項(xiàng)的用途，所述用途ii包括》文療。32.權(quán)利要求27的用途，其中所述抗癌藥選自細(xì)胞生長抑制劑、順鉑、多柔比星、泰索帝、泰素、依托泊苷、CPT-ll、伊立替康、Camptostar、托泊替康、紫杉醇、多西他賽、埃坡霉素、他莫昔芬、5-氟尿嘧啶、曱氨蝶呤、5FU、替莫唑胺、環(huán)磷酰胺、SCH66336、R115777,L778,123、BMS214662、易瑞沙、它賽瓦、抗EGFR抗體、格列衛(wèi)、甘樂能、阿糖胞苷、阿霉素、環(huán)磷酰胺制劑、吉西他濱、烏拉莫司汀、氮齊、異環(huán)磷酰胺、美法侖、苯丁酸氮芥、哌泊溴烷、曲他胺、三亞乙基硫代磷酰胺、白消安、卡莫司汀、洛莫司汀、鏈佐星、達(dá)卡巴嗪、氟尿苷、阿糖胞苷、6-巰基嘌呤、6-硫鳥嘌呤、磷酸氟達(dá)拉濱、奧沙利鉑、亞葉酸、ELOXATINtm、噴司他丁、長春堿、長春新堿、長春地辛、博來霉素、放線菌素D、柔紅霉素、多柔比星、表柔比星、伊達(dá)比星、普卡霉素、脫氧考福霉素、絲裂霉素-C、L-天冬酰胺酶、替尼泊苷、17oc-炔雌醇、己烯雌酚、睪酮、潑尼松、氟曱睪酮、丙酸屈他雄酮、睪內(nèi)酯、醋酸甲地孕酮、甲潑尼龍、甲睪酮、潑尼松龍、曲安西龍、氯烯雌醚、羥孕酮、氨魯米特、雌莫司汀、醋酸甲羥孕酮、亮丙立德、氟他胺、托瑞米芬、戈舍瑞林、順鉑、卡鉑、羥基脲、安吖啶、丙卡巴肼、米托坦、米托蒽醌、左旋咪唑、諾維本、CPT-ll、阿那曲唑、來曲唑、卡培他濱、瑞羅沙吩、屈洛昔芬、六曱蜜胺、阿瓦斯丁、赫賽汀、貝克薩、萬珂、吉維林、三仙諾、希羅達(dá)、長春瑞濱、卟吩姆、愛必妥、Liposomal、塞替派、六曱蜜胺、美法侖、群司珠單抗、列若唑、氟維司群、依西美坦、異環(huán)磷酰胺、利妥昔單抗、C225和阿侖珠單抗。全文摘要在許多實(shí)施方案中，本發(fā)明提供了作為蛋白和/或限制點(diǎn)激酶抑制劑的新型吡唑并[1，5-a]嘧啶化合物，制備這些化合物的方法，包含一種或多種這類化合物的藥物組合物，制備包括一種或多種這類化合物的藥物制劑的方法，以及使用這類化合物或藥物組合物治療、預(yù)防、抑制或改善一種或多種蛋白和/或限制點(diǎn)激酶相關(guān)疾病的方法。文檔編號(hào)A61P35/00GK101321763SQ200680045664公開日2008年12月10日申請(qǐng)日期2006年10月4日優(yōu)先權(quán)日2005年10月6日發(fā)明者G·W·小什普斯,K·帕契,M·P·德耶,T·J·古茲申請(qǐng)人:先靈公司