專利名稱：新的膽汁酸-抗肝炎病毒藥物偶合物及其醫(yī)藥用途的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及新的膽汁酸-抗肝炎病毒藥物偶合物及其非毒性的藥學(xué)上可接 受的鹽，以及含有這些化合物作為活性成分的藥物組合物，以及這些偶合物 及其非毒性的藥學(xué)上可接受的鹽以及含有這些化合物作為活性成分的藥物組
合物在制備病毒性肝炎治療藥物方面的應(yīng)用；本發(fā)明還涉及膽汁酸的核苷衍 生類物及其非毒性的藥學(xué)上可接受的鹽的制備方法。
背景技術(shù)：
病毒性肝炎是威脅人類健康的的重大疾病。全球乙型和丙型肝炎病毒感 染人數(shù)分別高達(dá)3. 6億和1. 7億，而我國(guó)分別有l(wèi). 2億和0. 4億人感染乙肝病毒 或丙肝病毒。乙型和丙型病毒性肝炎大多數(shù)將衍變?yōu)槁愿窝?，而慢性肝?的發(fā)展將導(dǎo)致肝纖維化、肝硬化或肝癌等惡性肝病。
抗病毒治療可抑制和清除肝炎病毒，改善肝功能，抑制肝組織炎癥、壞死 和纖維化病變，提高生活質(zhì)量，降低傳染性，減少或減緩肝硬化和肝癌的發(fā) 生并最終降低病死率。因此，治療病毒性肝炎的根本途徑是抗病毒治療。雖 然抗病毒治療在近十年中取得了重要進(jìn)展，但是遠(yuǎn)不能滿足臨床的需求。如 干擾素治療，療效不肯定，副作用較大；抗乙肝病毒藥物拉米夫定長(zhǎng)期用藥， 易產(chǎn)生耐藥性，用藥2年后耐藥性發(fā)生率高達(dá)40-50%,由此引發(fā)肝炎的急性 發(fā)作等嚴(yán)重后果；阿德福韋酯具有劑量限制性的腎臟毒性，在臨床安全劑量 下難以快速抑制病毒復(fù)制，起效慢。目前唯一的治療丙肝的小分子化學(xué)藥物 利巴韋林，小劑量療效不確切，大劑量可引起嚴(yán)重的毒副作用特別是血液毒 性。
通過(guò)肝靶向給藥技術(shù)將化學(xué)治療藥物選擇性的投放于肝臟，能夠減輕或 避免其全身的毒副作用。將藥物與含有半乳糖殘基的糖蛋白或寡肽偶聯(lián)，利 用肝實(shí)質(zhì)細(xì)胞上去唾液酸糖蛋白受體對(duì)半乳糖殘基特異性的識(shí)別和結(jié)合作用，可以將藥物選擇性投放于肝細(xì)胞。如將利巴韋林與乳糖化白蛋白或乳糖 化多聚賴氨酸偶聯(lián)，可以將利巴韋林選擇性投放于肝細(xì)胞，靶向藥物抑制小
鼠肝炎的有效劑量只有游離藥物的1/2-1/3;將阿德福韋與含半乳糖配基的寡 肽載體偶聯(lián)形成的偶合物，能夠?qū)⒌赂ｍf選擇性的投放于肝細(xì)胞，阿德福韋 的肝/腎濃度比由0.058提高到1.86至2.69;反義寡核苷酸與肝靶向載體半乳 糖化賴氨酸交聯(lián)形成的肝靶向反義核酸在大鼠靜脈給藥后，肝臟攝取高達(dá) 77%，而游離反義核酸的肝攝取率只有19%,肝實(shí)質(zhì)細(xì)胞的攝取率提高了 60 倍；秋水仙堿-乳糖化血清白蛋白偶合物，抗肝纖維化療效比秋水仙堿更好； 將抗肺瘤藥物阿霉素與乳糖化血清白蛋白偶聯(lián)，能夠避免其心臟副作用。
但是，以乳糖化白蛋白或乳糖化多聚賴氨酸等大分子為載體的肝靶向藥 物易被網(wǎng)狀內(nèi)皮系統(tǒng)清除、載藥量小、化學(xué)組成復(fù)雜，需注射給藥。
膽汁酸是內(nèi)源性的肝細(xì)胞特異性的天然配基，膽酸口服后通過(guò)主動(dòng)轉(zhuǎn)運(yùn)途 徑由腸道吸收進(jìn)入肝臟，具有高度的器官特異性和較高的轉(zhuǎn)運(yùn)能力；因此， 以膽酸為靶向載體，不但能夠?qū)崿F(xiàn)藥物的肝靶向性，減少毒副作用，而且能 夠提高藥物的口服生物利用度；作為內(nèi)源性的天然配基，膽酸具有較好的生 物兼容性好。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明提供由下列結(jié)構(gòu)式所示的膽汁酸-抗肝炎病毒藥物偶合物
iv vni
結(jié)構(gòu)式中，R代表0H (膽酸)或H (熊去氧膽酸)，A代表氨基酸，n為l
-3的整數(shù)，氨基酸的構(gòu)型為D型或L型。 D代表如下結(jié)構(gòu)本發(fā)明還提供式IV或式VHI所示的膽酸或熊去氧膽酸的核苷類衍生物及其 非毒性藥學(xué)上可接受的鹽，這些鹽可以由分子中的羧基與各種陽(yáng)離子如鈉離 子、鉀離子、氨離子、鈣離子、鋅離子、鎂離子或氨離子等形成。
本發(fā)明另一方面還提供iv或式vni所代表的膽酸或熊去氧膽酸的核苷類衍 生物及其非毒性的藥學(xué)上可接受的鹽的制備方法。
本發(fā)明另一方面還提供含有iv或式vni所代表的膽酸或熊去氧膽酸的核苷 類衍生物及其非毒性的藥學(xué)上可接受的鹽作為活性成分以及適宜的賦型劑形
成的藥物組合物。這些藥物組合物可以是溶液劑、片劑、膠嚢或注射劑；這
些藥物組合物可以通過(guò)注射途徑給藥或口服給藥。
本發(fā)明另 一方面還提供通過(guò)給于有效治療量的式iv或式vni所代表的膽酸 或熊去氧膽酸的核苷類衍生物及其非毒性的藥學(xué)上可接受的鹽及其藥物組合 物治療肝炎、肝纖維化及肝硬化等肝臟疾病的方法。
在式iv或式vni所代表的膽酸-抗病毒藥物偶合物的結(jié)構(gòu)中，以賴氨酸cx羧
基模擬膽酸或熊去氧膽酸24位羧基，最大限度地保持了膽酸的結(jié)構(gòu)特征；連 接子為天然氨基酸，具有良好的生物兼容性；抗病毒藥物以核苷單磷酸的形 式通過(guò)氨基酸與膽酸或熊去氧膽酸偶聯(lián)，進(jìn)入靶細(xì)胞后，釋放出核香單磷酸 形式的抗病毒藥物，由于核苦酸極性較大，不易擴(kuò)散到靶細(xì)胞外，產(chǎn)生非特 異性地再分布，因此能夠在細(xì)胞內(nèi)維持較高濃度和較長(zhǎng)時(shí)間，更好地發(fā)揮抗 病毒作用；熊去氧膽酸本身還具有保肝利膽的藥理活性，可以與藥物產(chǎn)生協(xié) 同作用。
6在目標(biāo)化合物的結(jié)構(gòu)中，磷酰胺鍵為控制釋放的化學(xué)鍵，磷酰胺鍵在堿
性及中性條件下比較穩(wěn)定，對(duì)酸敏感，因而在血漿近中性(pH7左右)的環(huán)境
下，磷酰胺鍵應(yīng)該比較穩(wěn)定，進(jìn)入肝細(xì)胞后，由于肝細(xì)胞的溶酶體內(nèi)存在大
量的水解酶、脂酶及溶酶體內(nèi)的低pH (溶酶體內(nèi)pH 4~5),這些因素有利于 磷酰胺鍵發(fā)生斷裂，釋放出活性藥物，發(fā)揮藥理作用。
目標(biāo)化合物的合成路線為載體先與連接子連接，再與藥物偶聯(lián)。即膽酸 的羧基先與賴氨酸a氨基形成酰胺鍵，然后脫去末端氨基的保護(hù)基，直接或 通過(guò)丙氨酸或甘氨酸與模型藥物的磷酸基形成磷酰胺鍵，得到目標(biāo)化合物。
以膽酸-單磷酸阿糖腺苷偶合物為例，式IV所代表的膽酸-抗病毒藥物偶 合物可按照如下合成路線制備
NaOH
O COOCH3 -CH-(CH2)4-NH
2 17先將賴氨酸的羧基用乙酯保護(hù)，然后將膽酸的羧基與賴氨酸CC氨基用DCC
和H0Bt復(fù)合縮合劑進(jìn)行縮合反應(yīng)，形成酰胺鍵，再用10%的鈀碳催化氫化脫 去賴氨酸s位氨基的保護(hù)基，得到膽酸-賴氨酸中間體，同時(shí)將單磷酸阿糖 腺苷與咪唑反應(yīng)制備成活潑中間體單磷酸阿糖腺苦磷酰咪唑(ara-AMPIm ), 活化后的單磷酸阿糖腺苷再與膽酸-賴氨酸反應(yīng)形成磷酰胺^:,最后皂化水 解脫去賴氨酸羧基保護(hù)基，得到目標(biāo)化合物。
以膽酸-單磷酸阿糖腺香偶合物為例，式vin所代表的膽酸-抗病毒藥物偶
合物可按照如下合成路線制備
<formula>formula see original document page 8</formula>
膽酸-賴氨酸分子中的氨基與Boc保護(hù)的丙氨酸或甘氨酸的羧基通過(guò)混合酸酐法縮合形成酰胺H在4N的HCl/二氧六環(huán)條件下脫去丙氨酸或甘氨酸 的Boc保護(hù)基，再與活潑中間體單磷酸阿糖腺苷磷酰咪唑反應(yīng)形成磷酰胺鍵，
最后皂化水解脫去賴氨酸羧基保護(hù)基，得到目標(biāo)化合物。如下圖
具體實(shí)施例方式
通過(guò)下面的實(shí)施例可以對(duì)本發(fā)明進(jìn)行進(jìn)一步的描述，然而，本發(fā)明的范 圍并不限于下述實(shí)施例。本領(lǐng)域的專業(yè)人員能夠理解，在不背離本發(fā)明的精 神和范圍的前提下，可以對(duì)本發(fā)明進(jìn)行各種變化和修飾。
實(shí)施例1a-膽酰-節(jié)氧羰基-賴氨酸曱酯(I )的合成
稱取1. 08g ( 5. 25mM) DCC溶于5ml四氫^^喃中，放于冰箱中冷卻。稱取 2. 04g (5mM)膽酸溶于10ml四氫呋喃中，攪拌使之溶解，冰鹽浴冷卻，0°C 以下加入0, 766g ( 5mM) HOBt， 2. 4g s -千氧羰基-賴氨酸曱酯(5mM), 0. 55ml N-曱基嗎啡啉，攪拌，保持(TC以下傾入冷的DCC的四氫呋喃溶液，維持0。C 以下攪拌2小時(shí)，撤去冰浴，室溫?cái)嚢柽^(guò)夜。濾去白色不溶固體，減壓蒸除 四氫呋喃，得黃色粘稠液體，加入乙酸乙酯溶解，依次用飽和NaHC03水溶液、 10%檸檬酸溶液、飽和NaHC03水溶液及飽和NaCl水溶液洗滌，收集有機(jī)層， 用無(wú)水Na2S04干燥。過(guò)濾除去干燥劑，減壓蒸去乙酸乙酯，加入石油醚研磨 固化，過(guò)濾，得白色固體(CA-Lys (Z) -0Et， IHl)約2.7g,產(chǎn)率76%。
TLC:展開(kāi)劑乙酸乙酯石油醚曱醇(4:4:0.5), Rf = 0. 5
實(shí)施例2 cc-膽酰-賴氨酸曱酯(II )的合成
稱取適量10%4巴碳于圓底瓶中，冰浴下(防止燃燒)加入少量無(wú)水曱醇使 其懸浮，將2gl用少量曱醇溶解，慢慢倒入把碳的曱醇溶液中，常壓催化氫 化至反應(yīng)完全，濾除鈀碳，無(wú)水曱醇洗滌，合并濾液，減壓蒸除溶劑，得淡 黃色粘稠液體，加入無(wú)水乙醚研磨使其固化，過(guò)濾，得近白色固體1.45g，產(chǎn) 率90%。TLC:展開(kāi)劑乙酸乙酯甲醇氨水(6: 4: 1滴)，Rf = 0. 4
實(shí)施例3膽酰-賴氨酸曱酯-單磷酸阿糖腺香(III)的合成
將0. 5g II溶于10ml pH 9. 50的Na2C03/NaHC03緩沖溶液，加入lg單 磷酸阿糖腺苷磷酰咪唑(ara-AMPIm) ， 4(TC下反應(yīng)48小時(shí)，減壓抽去溶劑， 得粘稠液體，加入無(wú)水乙醚研磨固化，過(guò)濾，得淡黃色固體混合物，此混合 物用27 x 33cm的薄層硅膠制備板進(jìn)行分離，每次上樣200mg，以曱醇溶解， 均勻涂于薄板下方，以異丙醇曱醇氨水(6:3:1)為展開(kāi)劑展開(kāi)，刮下Rf 0. 52處的產(chǎn)物帶，曱醇洗脫，得淡黃色固體(III)O. 3g，產(chǎn)率40%。 TLC:展開(kāi)劑異丙醇曱醇氨水(6: 3: 1 )， Rf = 0.45 MS( m/e): 894. 9 (M+l)
實(shí)施例4膽酰-賴氨酰-單磷酸阿糖腺香(CA-Lys-ara-AMP, IV！)的合成
將0. 3g III溶于10ml曱醇中，加入1. 2ml (約2倍過(guò)量)1N的NaOH, 室溫反應(yīng)，TLC監(jiān)測(cè)，至原料點(diǎn)消失后，停止反應(yīng)，濾去少量不溶物，減壓濃 縮，無(wú)水乙醚固化，再利用薄層硅膠制備板同上的方法對(duì)產(chǎn)物分離純化，得 淡黃色目標(biāo)化合物IV的鈉鹽固體O. 24g,熔點(diǎn)240-242匸，產(chǎn)率85%。 TLC:展開(kāi)劑異丙醇曱醇氨水(4: 4: 2 ), Rf = 0. 5 MS( m/e): 866. 8 (M+l)
1H-NMR5(ppm, DMS0-d6) : 8. 26 (s, 1H, Ar-H) ; , 8. 12 (s, 1H， Ar-H); 7. 23-7. 14(m, 4H) ; 6. 23-6. 20 (d， 1H) ; 5. 34-5. 30 (t, 2H) ; 4. 20(s，2H); 4. 10-4. 06(t， 1H) ; 3. 90—3. 70 (br m， 5H) ; 3. 60 (br s， 1H) ; 2. 60—2. 55 ((br m, 2H); 2. 45-0. 73 (br m， steroidal CH2 and CH); 0. 57(s,3H)
元素分析(C40H64N7O12P) 理^侖值％ C 55. 48 H 7. 45 N 11. 32
實(shí)驗(yàn)值％ C 55.45 H 7. 50 N 11.42
10實(shí)施例5熊去氧膽酰-賴氨酰-單磷酸阿糖腺苷(UDCA-Lys-ara-AMP, IV2) 的合成
參照實(shí)施例1-4的方法，將膽酸換成熊去氧膽酸，得到淡黃色固體IV2 0. 35g，產(chǎn)率45°/。。
TLC:展開(kāi)劑異丙醇曱醇氨水(6: 3: 1 )， Rf = 0.45 MS( m/e): 851. 1 (M+l)
1H-NMR 5 (卯m, DMS0-d6) : 8. 28 (s， 1H, Ar-H) ; 8. 12 (s, 1H, Ar-H); 7. 24(s,lH) ; 7. 18-7. 16 (d, 1H) ; 6. 24-6. 21 (d， 1H) ; 4. 34 (br s, 1H); 4. 12-4. 03 (br t， 1H); 3. 90-3. 70 (br m， 5H); 3. 17 (s， 1H); 2, 70-2. 60 (br t， 2H); 2.30-0.80 (br m， steroidal CH2 and CH); 0. 60(s,3H)
實(shí)施例6oc -膽酰-s -Boc-丙氨酰-賴氨酸曱酯(V )的合成
稱耳又2g Boc-Ala-OH溶于40ml四氫吹喃中，冰鹽浴冷卻至-10。C以下， 加入1. 2ml N-曱基嗎啡啉，再加入1. 4ml氯曱酸異丁酯，攪拌5分鐘，加入 6glI的DMF溶液，水鹽浴反應(yīng)2小時(shí)，撤去冰浴，室溫反應(yīng)2小時(shí)，濾去不 溶物，減壓濃縮，殘留物用柱層析進(jìn)行分離純化，以石油醚乙酸乙酯曱 醇為洗脫劑，收集第二個(gè)組分，得白色固體(V)5.4g,產(chǎn)率70°/。，熔點(diǎn)120-122 °C。
TLC:展開(kāi)劑乙酸乙酯石油醚曱醇(4:3:1)， Rf = 0.53 MS( m/e): 736. 8 (M+l)
實(shí)施例7 cc-膽酰-￡ -丙氨酰-賴氨酸乙酯(VI)的合成
將lg V溶于50ml新鮮處理的1,4-二氧六環(huán)中，攪拌3分鐘，滴加15ml 的4NHCl/二氧六環(huán)溶液，逐漸有白色固體析出，并漸漸粘于瓶壁上，滴加完 畢后，繼續(xù)反應(yīng)40分鐘，停止攪拌，將反應(yīng)液靜置一段時(shí)間，傾出液體部分, 固體產(chǎn)物留于瓶壁上，迅速加入無(wú)水乙醚，蒸帶三次，過(guò)濾，得鹽酸鹽白色固體0. 7g,產(chǎn)率85°/。。
TLC:展開(kāi)劑乙酸乙酯曱醇氨水(6: 4: 2滴)，Rf = 0. 6
實(shí)施例8 膽酰-賴氨酰-丙氨酰-單磷酸阿糖腺苷(VII)的合成
將0. 5g VI溶于20ml曱醇中，加入等摩爾的三乙氨中和HC1,再加入0. 5g V(約1.5倍過(guò)量)，4(TC下反應(yīng)48小時(shí)，減壓濃縮，得粘稠液體，無(wú)水乙醚 固化，得淡黃色疏松混合物，此混合物用27 x 33cm的薄層硅膠制備板進(jìn)行分 離，每次上樣200mg,以曱醇溶解，均勻涂于薄板下方，以異丙醇曱醇氨 水(6:3:1)為展開(kāi)劑展開(kāi)，刮下Rf 0. 52處的產(chǎn)物帶，甲醇洗脫，得淡黃色 固體約0. 3g，產(chǎn)率40%。
TLC:展開(kāi)劑異丙醇曱醇氨水(6: 3: 1 )， Rf = 0.45 MS( m/e): 965. 8 (M+l)
實(shí)施例9膽酸-賴氨酸-丙氨酸-單磷酸阿糖腺苷(V恥)的合成
將0. 3g VII溶于10ml曱醇中，加入1. 2ml (約2倍過(guò)量)1N的NaOH，
室溫反應(yīng)，TLC監(jiān)測(cè)，至原料點(diǎn)消失后，停止反應(yīng)，濾去少量不溶物，減壓濃
縮，無(wú)水乙醚固化，再利用薄層硅膠制備板同上的方法對(duì)產(chǎn)物分離純化，得
淡黃色目標(biāo)化合物0. 24g,熔點(diǎn)240-242°C,產(chǎn)率85°/。。
TLC:展開(kāi)劑異丙醇曱醇氨水(4: 4: 2 ), Rf = 0. 5 MS( m/e): 937.9 (M+l)
1H-NMR 5 (卯m, DMSO-d6): 8. 24 (s, 1H, Ar-H); 8. 12 (s, 1H, Ar-H); 7. 35 (br s，lH); 7. 27(s,lH); 6. 26-6. 20 (d, 1H); 6. 09(s,lH); 4. 40—4. 00 (br m， 3H); 4. 40—4. OO(br m， 3H) ; 4. 00-3. 80 (br d, 2H) ; 3. 78(s,lH); 3.60(s，lH); 3. 22-2.88 (br m, 2H) ; 2. 30-2, 08 (br m, 2H) ; 2. 05-1.85 (br m， 1H); 1.90—0. 70 (br m， steroidal CH2 and CH); 0. 57(s,2H)實(shí)施例io熊去氧膽酸-賴氨酸-丙氨酸-單磷酸阿糖腺苦(vni2)的合成
參照實(shí)施例6-9的方法，將膽酸換成熊去氧膽酸，制得VHl2,熔點(diǎn)242-244°c。
MS(m/e): 944.1 (M+Na) , 921.9 (M+l)
1H-NMR 5 (ppm, DMS0-d6) : 8, 28 (br s, 1H) ; 8. 25 (s, 1H， Ar-H); 8, 12(s, 1H， Ar-H); 7. 40-7. 20 (br d, 2H);6. 25—6. 23 (d, 1H); 6. 09(s，lH); 4. 30-4. 10(br m， 3H); 4. 00-3. 80 (br m， 4H);2. 20-0. 80 (br m, steroidal CH2 and CH); 0. 59 (s， 3H)
實(shí)施例11膽酸-賴氨酸-甘氨酸-單磷酸阿糖腺苷(CA-Lys-Gly-ara-AMP， 肌)的合成
參照實(shí)施例6-9的方法，丙氨酸換成甘氨酸，制得VHl3，熔點(diǎn)237-239。C。 MS( m/e): 923. 9 (M+l)
1H-NMR 5 (ppm, DMSO-d6) : 8. 28 (s， 1H, Ar-H) ; 8. 12 (s， 1H, Ar-H); 7. 30—7. 20 (br m, 2H) ; 6. 35 (br s, 1H) ;6. 28—6. 20 (d, 1H) ;4, 40—3. 70 (br m, 10H); 3. 60(s,lH); 3. 28—2. 95 (br m， 5H) ; 2. 30—2. 05 ( br m， 2H); 2. 02-0. 78 (br m, steroidal CH2 and CH); 0. 57(s,2H)
實(shí)施例12熊去氧膽酸-賴氨酸-甘氨酸-單磷酸阿糖腺苷(UDCA-Lys-Gly-ara-AMP, V1II4)的合成
參照實(shí)施例6-9的方法，膽酸換成熊去氧膽酸，丙氨酸換成甘氨酸，制得 V1I14,熔點(diǎn)238-240°C。
MS(m/e): 930.0 (M+Na) ， 907.8 (M+l)
1H-NMR 5 (卯m, DMSO-d6 ): 8. 27 (s， 1H, Ar-H) ; 8. 12 (s, 1H， Ar-H); 7. 23(s，2H); m, 2H ); 6. 35 (br s, 1H) ;6. 27-6. 20 (d, 1H) ;4.47-4. 23 (br m, 2H); 3. 95-3. 82 (br m, 2H) ; 2,30-2,05 ( br m, 2H); 2. 02-0. 81 (br
13m， steroidal CH2 and CH); 0. 60(s,2H) 初步評(píng)價(jià)結(jié)果
用HPLC法測(cè)定了單磷酸阿糖腺苷(ara-AMP)-膽酸偶合物在血漿和肝勻
漿中穩(wěn)定性，結(jié)果表明
(1) 偶合物樣品在pH7. 20的緩沖液中37。C保溫24小時(shí)后，峰面積均沒(méi) 有發(fā)生明顯變化，也沒(méi)有出現(xiàn)明顯的解離物峰，因此，偶合物在pH 7.20的 緩沖液中比較穩(wěn)定，不解離出游離藥物。偶合物在接近溶酶體內(nèi)的酸性(pH 4. 60)條件下能夠解離釋放出藥物，隨著時(shí)間延長(zhǎng)，偶合物峰面積不斷減少， 游離藥物ara-AMP的峰面積不斷增力口，保溫24小時(shí)后，偶合物解離了 19 ~25%, 通過(guò)二肽橋結(jié)構(gòu)連接的偶合物解離速率略高于直接通過(guò)賴氨酸連接的偶合 物，且從色i普?qǐng)D觀察，解離物峰與ara-AMP峰保留時(shí)間(tR) —致，說(shuō)明解 離物幾乎都為游離ara-AMP，未見(jiàn)其它明顯解離物吸收峰。
(2) 偶合物樣品在血漿中保溫24小時(shí)后，峰面積均沒(méi)有明顯變化，也未 見(jiàn)其它明顯解離物峰，可見(jiàn)，偶合物在血漿中都比較穩(wěn)定。
(3) 偶合物在肝勾漿中能充分解離，解離速率隨連接子結(jié)構(gòu)的不同而變 化，通過(guò)賴氨酸直接連接的偶合物解離速率稍慢，保溫lmin左右解離16%, 2小時(shí)后，檢測(cè)不到偶合物，解離完全；通過(guò)二肽橋結(jié)構(gòu)連接的偶合物解離速 率較快，保溫lmin左右即可解離60 - 70%, 20min后檢測(cè)不到偶合物，解離 完全。從色譜圖觀察，隨著偶合物峰面積減少，解離物峰面積不斷增加，解 離物峰與ara-AMP峰保留時(shí)間(tR)—致，i兌明解離物幾乎都為游離ara-AMP, 未見(jiàn)其它明顯解離物吸收峰。
結(jié)果表明，偶合物在血漿中均較穩(wěn)定，但是在肝勻漿中能充分解離，解 離物以游離單磷酸阿糖腺苷為主；連接子結(jié)構(gòu)不同，解離速率不同，膽酸通 過(guò)二肽連接子與藥物連接的偶合物解離速率明顯快于膽酸通過(guò)賴氨酸直接與 藥物連接的偶合物。可見(jiàn)，通過(guò)調(diào)節(jié)連接子的結(jié)構(gòu)，能夠控制藥物釋放的速率，為進(jìn)一步優(yōu)化載體與藥物間的偶聯(lián)方式提供依據(jù)。
權(quán)利要求
1、由下列結(jié)構(gòu)式所示的膽汁酸-抗肝炎病毒藥物偶合物及其非毒性的藥學(xué)上可接受的鹽，以及它們的制備方法，以及含有這些化合物的藥物組成，以及通過(guò)給于有效治療量的膽汁酸的核苷類衍生物及其非毒性的藥學(xué)上可接受的鹽治療肝臟疾病的方法。結(jié)構(gòu)式中，R代表OH(膽酸)或H(熊去氧膽酸)，A代表氨基酸，n為1-3的整數(shù)，氨基酸的構(gòu)型為D型或L型。D代表如下結(jié)構(gòu)利巴韋林單磷酸酯 阿德福韋 阿糖腺苷單磷酸酯
2、 根據(jù)權(quán)利要求1的膽汁酸-抗肝炎病毒藥物偶合物及其非毒性 的藥學(xué)上可接受的鹽，其中的膽汁酸為膽酸。
3、 根據(jù)權(quán)利要求1的膽汁酸-抗肝炎病毒藥物偶合物及其非毒性 的藥學(xué)上可接受的鹽，其中的膽汁酸為熊去氧膽酸。
4、 根據(jù)權(quán)利要求1的膽汁酸-抗肝炎病毒藥物偶合物及其非毒性 的藥學(xué)上可接受的鹽，其中的抗病毒藥物為利巴韋林單磷酸酯、阿糖 腺苷單磷酸酯、阿德福韋。
5、 根據(jù)權(quán)利要求1 - 4的膽酸(或熊去氧膽酸)-抗肝炎病毒藥物 偶合物的非毒性藥學(xué)上可接受的鹽，這些鹽可以由分子中的羧基與各種陽(yáng)離子如鈉離子、鉀離子、氨離子、鈣離子、鋅離子、鎂離子或氨 離子等形成。
6、 根據(jù)權(quán)利要求1 - 4的膽酸(或熊去氧膽酸) -抗肝炎病毒藥物 偶合物及其非毒性的藥學(xué)上可接受的鹽的制備方法。
7、 根據(jù)權(quán)利要求1 - 4的膽酸(或熊去氧膽酸)-抗肝炎病毒藥物 偶合物及其非毒性的藥學(xué)上可接受的鹽作為活性成分以及適宜的賦型 劑形成的藥物組合物。這些藥物組合物可以是溶液劑、片劑、膠囊或 注射劑；這些藥物組合物可以通過(guò)注射途徑給藥或口服給藥。
8、 根據(jù)權(quán)利要求1-4的膽酸(或熊去氧膽酸)-抗肝炎病毒藥物 偶合物及其非毒性的藥學(xué)上可接受的鹽及其藥物組合物治療肝炎、肝 纖維化及肝硬化等肝臟疾病的方法。
全文摘要
由下式所示的膽汁酸-抗肝炎病毒藥物偶合物及其非毒性藥學(xué)上可接受的鹽，制備方法以及含有這些化合物的藥物組成及用途。如圖(Ⅰ)結(jié)構(gòu)式中，R代表OH(膽酸)或H(熊去氧膽酸)，A代表氨基酸，n為1-3的整數(shù)，氨基酸的構(gòu)型為D型或L型。D代表如上結(jié)構(gòu)(Ⅱ)。
文檔編號(hào)A61K47/28GK101439187SQ20071018796
公開(kāi)日2009年5月27日 申請(qǐng)日期2007年11月19日 優(yōu)先權(quán)日2007年11月19日
發(fā)明者仲伯華, 河 劉, 牛俊奇, 文 王, 陳蘭福, 靳雪源 申請(qǐng)人:中國(guó)人民解放軍軍事醫(yī)學(xué)科學(xué)院毒物藥物研究所