專(zhuān)利名稱：：用于治療與異常細(xì)胞遷移相關(guān)的諸如癌癥等疾病的具有藥學(xué)活性的肽的制作方法用于治療與異常細(xì)胞遷移相關(guān)的諸如癌癥等疾病的具有藥學(xué)活性的肽本發(fā)明涉及成鹽或未成鹽形式的線性肽及其功能等同衍生物，包含四或五個(gè)氨基酸殘基，其中至少一個(gè)是疏水性的并且至少兩個(gè)是堿性的，下文稱作"PICM"(細(xì)胞能動(dòng)性的肽抑制劑)，以及涉及包含它們作為活性成分的藥物組合物。本發(fā)明的化合物可有效治療和預(yù)防肺瘤，特別是具有高度侵襲性和/或易于轉(zhuǎn)移的那些腫瘤，并且可有效治療與新血管發(fā)生和新血管形成相關(guān)聯(lián)的病癥，以及與異常細(xì)胞能動(dòng)性相關(guān)的病癥諸如自身免疫疾病和慢性炎癥像類(lèi)風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎和牛皮癬，慢性肉芽腫，視網(wǎng)膜病，黃斑變性和水腫，Kaposi氏肉瘤和與皰滲病毒感染相關(guān)聯(lián)的疾病。
背景技術(shù)：
：目前的腫瘤治療受到高度惡性細(xì)胞類(lèi)型存在的限制，所述細(xì)胞類(lèi)型在本性上不能對(duì)常規(guī)治療起反應(yīng)(神經(jīng)膠質(zhì)瘤，肉瘤等)，或者受到發(fā)生的選擇性益處的限制，其在治療期間促進(jìn)耐受性胂瘤克隆的選擇和隨后的增殖(『o^//^"M,EC.爭(zhēng)乂，CVmcwM..J529-J537，7997)。常規(guī)的治療主要設(shè)計(jì)來(lái)抑制腫瘤的生長(zhǎng)而不是阻止其轉(zhuǎn)移擴(kuò)散，而轉(zhuǎn)移擴(kuò)散仍然是治療失敗的主要原因(57^v&丄v4爭(zhēng)人CWicw丄ert,/9S:MW)。目前腫瘤治療的一般特征是使用高度細(xì)胞毒性的化合物，盡管它們選擇性地作用于惡性細(xì)胞上，但其不可避免地對(duì)于機(jī)體具有破壞性地系統(tǒng)作用。造成的結(jié)果是，目前的治療通常包括非常高的社會(huì)、人和經(jīng)濟(jì)成本。這種總體情況表明a)對(duì)于目前不能治療的腫瘤迫切需要發(fā)展有效的治療方法；b)非常有必要減少副作用，在用目前的抗腫瘤藥物治療患者時(shí)，所述副作用使得患者的生活質(zhì)量降低到無(wú)法接受的程度，甚至能夠引發(fā)衰弱患者的死亡；c)需要通過(guò)使用既干擾腫瘤生長(zhǎng)過(guò)程也干擾腫瘤轉(zhuǎn)移擴(kuò)散6的藥物，來(lái)提高治療的效力；d)需要使腫瘤治療的成本更加令人可以接受。最近有才艮告稱源自人和鼠的肽Metastin的多種生物學(xué)作用(WO卵/2M卯，『OW/75JW，『002/S53")包括預(yù)防或治療癌癥的作用。涉及Metastin及其衍生物的^X^6/(9W499，要求保護(hù)非常寬泛的化合物系列，該化合物系列估計(jì)有超過(guò)10"種不同的結(jié)構(gòu)，包含4到54個(gè)天然或非天然的氨基酸殘基，對(duì)其報(bào)告了非常多的生物學(xué)活性，諸如抑制腫瘤的轉(zhuǎn)移擴(kuò)散和生長(zhǎng)、控制胰腺功能和預(yù)防急性和慢性胰腺炎、控制胎盤(pán)功能以及用于治療胎兒低常增生、葡萄糖代謝異常、脂代謝異常、不育癥、子宮內(nèi)膜異位癥、青春期早熟、阿爾茨海默癥、影響認(rèn)知區(qū)域的病癥、肥胖癥、高脂血癥、糖尿病II型、高血糖癥、高血壓、糖尿病性神經(jīng)病、糖尿病性腎病、糖尿病性視網(wǎng)膜病變、水腫、泌尿系統(tǒng)病癥、胰島素抗性、不穩(wěn)定型糖尿病、脂性萎縮、胰島素變應(yīng)性、動(dòng)脈粥樣硬化、血栓形成病癥、脂毒癥，以及用于提高性腺功能和刺激排卵的治療中?？紤]到這類(lèi)分子的治療應(yīng)用，這些化合物每一種都同時(shí)存在的這些不同生物學(xué)作用當(dāng)然代表了一種主要的限制，而不是益處。這種廣泛的生物學(xué)作用與Metastin及其衍生物和特異性細(xì)胞受體GPR54(也稱作Kiss-1R、Kissp印tins受體、Metastin受體、hypogonadotropin1或hOT7T175)的相互作用緊密相關(guān)(0/i似A:/7:爭(zhēng)人，7Vfl似/rW7.'6"-6J7,C7e附e"^M.A;爭(zhēng)乂，j&Zoc/^附.B/o/;/^s./e,s.CV朋w簡(jiǎn)，//駒TO,慶/;編"./.爭(zhēng)人,J.C/w附.276:2M/;M.爭(zhēng)入，/J5"/.Oe附.276:200/;S麵"婦5，.i5.爭(zhēng)入，TV.E"g/.她dJ乾./6/"627，2,;GW""磨d/.爭(zhēng)乂，7Vfl/w/^42S.'529-5J5，20^/;CW/WgeWK凡，7>rwAEw^cr/wo/.A/e似6.95S-96J，2Q^/;/fl/iweflw爭(zhēng)人，丄C7/".EwdocW/io/.S7.'2Cft2;i/wge/MD.爭(zhēng)乂，/C7zw.五wctocW"o/.Me似6.S7,.2卵2;甴iV.爭(zhēng)入，7V"《/.Jc^^.Sc/.f/.5".A/卵柳72-譜76，2,;M.爭(zhēng)乂，丄C"戲f紐C7/".。歸/.，.'必編"M爭(zhēng)入，丄CV〃"7..2J79-2n2,;^由,丄A丄爭(zhēng)入，丄('//".E"f/簡(jiǎn)Vi0/.飽W.緊/,-/《55，廁5)。關(guān)于Metastin及其衍生物的抗腫瘤活性，WW報(bào)道了一種限于實(shí)驗(yàn)動(dòng)物模型的中度活性，劑量為70-140ng/kg,其以不超過(guò)20%減少腫瘤質(zhì)量。其還表明長(zhǎng)期施用Metastin的一種類(lèi)似物Kisspeptin-54將引發(fā)大鼠性腺萎縮的副作用(五丄77^附mw爭(zhēng)乂，爿附./.發(fā)明描述發(fā)明涉及成鹽或未成鹽形式的四肽或五肽及其功能等同衍生物，其包含至少兩個(gè)堿性以及至少一個(gè)疏水性氨基酸(下文以代號(hào)PICM表示)，其在體外以aM濃度(10—18M)抑制細(xì)胞遷移，并在體內(nèi)具有強(qiáng)大的抗腫瘤作用，以低至15jig/kg的劑量將腫瘤質(zhì)量減少30-70%。它們對(duì)于所有與新血管發(fā)生和新血管形成相關(guān)聯(lián)的病癥有效，并且在比治療劑量高大約1000倍的劑量上不呈現(xiàn)任何急性或亞急性毒性。不像Metastin及其衍生物，本發(fā)明肽的活性并不與細(xì)胞受體GPR54相關(guān)聯(lián)，而是與它們和FPR細(xì)胞受體的特異性相互作用密切關(guān)聯(lián)。已知一些FPR受體拮抗劑(仏/w^y/s爭(zhēng)人Afo//Vmr附fl"/.6S.'它們?nèi)吭诨瘜W(xué)上都有別于PICM。因此PICM代表新的一類(lèi)活性成分，其具有比Metastin及其衍生物以及FPR受體拮抗劑的活性強(qiáng)得多并且顯著不同的生物學(xué)和藥學(xué)活性。在臨床實(shí)踐中，PICM可低劑量起作用而有效對(duì)抗大量腫瘤，并且不呈現(xiàn)任何系統(tǒng)性毒性或副作用。PICM還可有效治療與新血管發(fā)生和新血管形成相關(guān)聯(lián)的病癥，以及與異常細(xì)胞能動(dòng)性相關(guān)的病癥諸如自身免疫疾病和慢性炎癥像類(lèi)風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎和牛皮癬，慢性肉芽腫，視網(wǎng)膜病，黃斑變性和水腫，Kaposi氏肉瘤和與皰滲病毒感染相關(guān)聯(lián)的疾病。發(fā)明詳述本發(fā)明的成鹽或未成鹽形式的肽及其功能等同衍生物具有通式L廣X!-X2-X3-X4，其中L！是H或?；蛉芜x地N-?；騈-烷基化和/或Coc-烷基化的任何天然或非天然的氨基酸；優(yōu)選地，1^是H或酰基或任選地N-?；騈-烷基化和/或Coc-烷基化的Glu、Gln,任選地N-?；?或Ca-烷基化的Pro、羥基-Pro、硫代-Pro、Azt、Pip、pGlu，任選地N-?；騈-烷基化的Aib、Ac3c、Ac4c、Ac5c、Ac6c;甚至更加優(yōu)選地Lj是H或酰基，任選地N-?；騈-烷基化的Aib、Ac3c、Ac4c、Ac5c或Ac6c;&和X3是相同的或不同的，為任選地N-烷基化和/或Ca-烷基化的任何天然或非天然的堿性氨基酸；優(yōu)選地，X,和X3是任選地N-烷基化和/或Ca-烷基化的相同的或不同的氨基酸，選自任選地p瓜基化的Arg、Orn、Lys,以及在間位或?qū)ξ挥砂坊螂一〈谋奖彼?；X2是任選地N-烷基化和/或Ca-烷基化的任何天然或非天然氨基酸，前提為其并非甘氨酸或在a^原子上由1-10個(gè)碳原子的線性或環(huán)狀烷基單一取代的氨基酸，或在a^原子上由包含4-10個(gè)碳原子的線性或環(huán)狀烷基單一取代的氨基酸，或在a^原子上由包含1-8個(gè)碳原子的烷基單一取代的氨基酸，任選地由氨基甲?；?，幾基或芳基所取代；X2優(yōu)選地選自任選地N-烷基化和/或Cot-烷基化的Glu、Lys,任選地N-烷基化的Aib、Ac3c、Ac4c、Ac5c和Ac6c;更優(yōu)選地，乂2選自任選地N-烷基化的Aib、Ac3c、Ac4c、Ac5c和Ac6c;X4是任選地Ca-烷基化和/或在C末端酰胺化的任何疏水氨基酸，或任選地N，-烷基化或N，-酰基化的任何疏水性氨基醇或任何疏水性偕二胺；X4優(yōu)選地選自Phe、h-Phe、Tyr、Trp、l-Nal、2-Nal、h隱l-Nal、h-2-Nal、Cha、Chg和Phg，其任選地是Ca-烷基化的和/或在C末端酰胺化的。"天然氨基酸"指構(gòu)成活體生物的蛋白質(zhì)的氛基酸。9"非天然氨基酸"指D系列的oc-氨基酸或P-氨基酸；脫氫氨基酸；在a碳原子上由包含最多11個(gè)碳原子的烷基或芳基雙取代的氨基酸；如上所定義的天然氨基酸，在其側(cè)鏈上包含由含有1-11個(gè)碳原子的烷基、?；?、芳基或?；蓟倌芑牧u基、M或硫基；如上所定義的天然氨基酸，在其側(cè)鏈上包含由含有最多11個(gè)碳原子的伯胺或仲胺或脂族醇或芳香醇所官能化的氛基；環(huán)狀氨基酸諸如Azt、硫代-Pro、Ac3c、Ac4c、Ac5c、Ac6c和pGlu酸；高氨基酸；由環(huán)烷基或芳基取代的氨基酸，諸如0-l-萘基-丙氨酸、P-2-萘基-丙氨酸、高-P-l-萘基-丙氨酸、高-P-2-萘基-丙氨酸、環(huán)己基-丙氨酸、環(huán)己基-甘氨酸和苯基-甘氨酸。其它非天然氨基酸在"Diversityofsyntheticpeptides",Konishi等人FirstInternationalPeptideSymposium,Kyoto,Japan,1997中有才艮道。術(shù)語(yǔ)"任何堿性氨基酸"指如上所定義的任何天然或非天然氨基酸，在側(cè)鏈上包含至少一個(gè)咪唑，氨基，胍基，吡啶鐵或脲基團(tuán)。術(shù)語(yǔ)"任何疏水性氨基酸"指一系列a-、P-和脫氫氨基酸Leu、n-Leu、Ue、allo-Ile、Val、n-Val、Phe、h-Phe、Tyr、Trp、l-Nal、2-Nal、h-l-Nal、h-2-Nal、Cha、Chg和Phg;如上所定義的天然和非天然氨基酸，在其側(cè)鏈上包含由含有l(wèi)-ll個(gè)碳原子的烷基、?；?、芳基或?；蓟倌芑牧u基、氨基或硫基；如上所定義的天然和非天然氨基酸，在其側(cè)鏈上包含由含有最多11個(gè)碳原子的伯胺或仲胺或脂族醇或芳香醇所官能化的羧基；在芳香環(huán)的鄰位、間位和對(duì)位上由卣素或由烷基、O-烷基或S-烷基單和雙取代的苯丙氨酸；P-2-和P-3-噻吩基丙氨酸、P-2-和P-3-呋喃基丙氨酸；由含有最多l(xiāng)l個(gè)碳原子的烷基、?；⒎蓟蝓；蓟倌芑?,3二氨基丙酸和2，4二氨基丁酸的衍生物。術(shù)語(yǔ)"任何疏水性氨基醇"指如上所定義的"任何疏水性氨基酸"，其中羧基官能團(tuán)由OH基團(tuán)所取代。術(shù)語(yǔ)"任何疏水性偕二胺"指如上所定義的"任何疏水性氨基酸"，其中絲官能團(tuán)由NH2基團(tuán)所取代。術(shù)語(yǔ)"?；?意指包含l-9個(gè)碳原子的?；鶊F(tuán)。術(shù)語(yǔ)"N-?；?意指向末端氛基氮上導(dǎo)入如上所定義的?；?。術(shù)語(yǔ)"N-烷基化的"意指向酰胺氮上導(dǎo)入包含1-9個(gè)碳原子的烷基殘基。術(shù)語(yǔ)"酰胺化的"意指用包含總共0-14個(gè)碳原子的伯胺或仲胺酰胺化C-末端氛基。術(shù)語(yǔ)"Coc-烷基化的"意指向a碳原子上導(dǎo)入包含1-9個(gè)碳原子的烷基殘基。術(shù)語(yǔ)"功能等同衍生物"意指具有通式I的化合物的衍生物，其特征是通過(guò)在肽化學(xué)中常用的結(jié)構(gòu)修飾來(lái)調(diào)節(jié)它們的藥物動(dòng)力學(xué)或藥物代謝動(dòng)力學(xué)特性。這些包括假肽，其中一個(gè)或多個(gè)肽鍵由-CH2-NH-所取代(G〃/(力"/W(7爭(zhēng)乂,/J/o/C/m附./26057-9/995)，具有一個(gè)或多個(gè)反向肽鍵的4汙生物(CarottiA.等人，Biopolymers60，322-332，2001;Chorev,M.等人Science204，1210—12121979;Pallai，P.等人Biochemistry24，1933—1941.1985;RodriguezM.E.等人J.Med.Chem.30，758—7631987),P-肽衍生物(HomeW.S.等人J.Am.Chem.Soc.1294178-41802007)，其中一個(gè)或多個(gè)肽鍵由至少一個(gè)P-氨基酸形成，以及包含一個(gè)或多個(gè)脫氫氨基酸的衍生物(BusettiV.等人，Int.J.Biol.Macromol.14，23-281992)。具有從N-末端側(cè)鏈延長(zhǎng)的鏈的衍生物也是功能等同衍生物。下列是一些非天然氨基酸的常用縮寫(xiě)，這些非天然氨基酸可以包括在根據(jù)本發(fā)明的肽的通式中Azt=雜氮環(huán)丁酸，Aib=a-氨基-異丁酸，Ac3e=1-氨基環(huán)丙烷-l-羧酸，Ac4c=l-氨基環(huán)丁烷-l-羧酸，Ac5c-l-氨基環(huán)戊烷-l-羧酸，Ac6c=l-氨基環(huán)己烷-l-羧酸，Abu=a-氨基-正丁酸，n-Leu=正亮氨酸，n-Val-正纈氨酸，h-Phe=高苯丙氨酸，1-Nal=P-l-萘基-丙氨酸，2-Nal=P-2-萘基-丙氨酸，h-l-Nal=高-0-1-萘基-丙氨酸，h-2-Nal=高—P-2-萘基-丙氨酸，Cha=環(huán)己基-丙氨酸，Chg=環(huán)己基-甘氨酸，Phg=苯基-甘氨酸，pGlu-焦谷氨酸，Dap=2,3二氨基-丙酸，Dab=2,4二氨基丁酸，N(Me)Arg^N-甲基-精氨酸，ot(Me)Phe=C-ot-甲基-苯丙氨酸。優(yōu)選地，Ll是乙?；?、Glu、pGlu、乙?；?Aib,X！是Arg或N(Me)Arg，X2是Glu、Aib、Ac5c，乂3是Arg、IN(Me)Arg，而X4APhe-NH2、Tyr-NH2、Trp-NH2、oc(Me)Phe-NH2、Phe-OH、Tyr-OH、Trp-OH。根據(jù)本發(fā)明特別優(yōu)選的肽選自Ace-Arg-Glu-Arg-Phe-NH2;Ace-Arg-Glu-N(Me)Arg-Phe-NH2;Ace-Arg-Aib-Arg-Phe-NH2;Ace畫(huà)Arg-Aib-N(Me)Arg-Phe-NH2;Ace-Arg-Ac5c-Arg-Phe-NH2;Ace-Arg-Ac5c-N(Me)Arg-Phe-NH2;Ace-N(Me)Arg-Aib-Arg-Phe-NH2;Ace誦N(Me)Arg-Aib-N(Me)Arg-Phe-NH2;Ace-Arg-Aib-N(Me)Arg-Phe-NH2;Ace-Arg國(guó)Aib-Arg-a(Me)Phe-NH2;Ace-N(Me)Arg-Aib-Arg-a(Me)Phe-NH2;Ace-N(Me)Arg-Aib-N(Me)Arg-a(Me)Phe-NH2;Ace-Arg-Aib-N(Me)Arg-oc(Me)Phe-NH2。本發(fā)明的肽可以用文獻(xiàn)中報(bào)道的各種技術(shù)合成；參見(jiàn)例如，Schroeder等人"ThePeptides"vol1，AcademicPress,1965;Bodanszky等人"PeptideSynthesis"IntersciencePublisher,1966;Barany&Merrifield，"ThePeptides;Analysis,Synthesis,Biology"，2，第一章，AcademicPress,1980。這些技術(shù)包括固相肽合成，溶液中的肽合成，有機(jī)化學(xué)合成方法，或其任意組合。所選的合成方法顯然將取決于特定肽的組成。優(yōu)選地，所用的方法將基于固相技術(shù)和經(jīng)典溶液中方法的適當(dāng)結(jié)合，其生產(chǎn)成本低，特別是在工業(yè)M^莫上。詳細(xì)地，這些方法包括i)在溶液中合成肽鏈片段，通過(guò)將適當(dāng)活化的N-保護(hù)氨基酸連續(xù)偶聯(lián)到氨基酸或C-保護(hù)的肽鏈上，分離中間產(chǎn)物，隨后對(duì)所述片段的N和C末端進(jìn)行選擇性去保護(hù)，必要時(shí)對(duì)側(cè)鏈去保護(hù)來(lái)進(jìn)行合成，直到獲得所需肽；ii)在不可溶的多聚物介質(zhì)上從C-末端到N-末端固相合成肽鏈。在合適清除劑存在的情況下，通過(guò)用無(wú)水氫氟酸或三氟乙酸水解將肽從樹(shù)脂上除去。本發(fā)明的肽可有效作用于許多類(lèi)型的人和動(dòng)物腫瘤，阻止其生長(zhǎng)和轉(zhuǎn)移擴(kuò)散。關(guān)于抗腫瘤效果和有效劑量，本發(fā)明的化合物是有益的，特別是與12Metastin和在WO06/001499中報(bào)道的有關(guān)肽相比。在較低的濃度下，本發(fā)明的肽在減弱肺瘤方面誘導(dǎo)有效得多的反應(yīng)(Metastin衍生物減弱20%，本發(fā)明產(chǎn)物減弱70。/。)。對(duì)于推薦的治療用途，根據(jù)本發(fā)明的肽可以以其本身，或以鹽的形式配制成口服、胃腸外、局部、噴霧或經(jīng)皮給藥用的藥物組合物，也可以結(jié)合其它活性成分。人用單位劑量可以在很大范圍內(nèi)變化，一般從每劑O.l照到每劑lg，優(yōu)選地為每劑O.lmg到每劑100mg，其可以由本領(lǐng)域技術(shù)人員根據(jù)待治療的病癥、其嚴(yán)重程度和患者的體重、性別和年齡容易地確定。下列實(shí)施例更加詳細(xì)地闡明了本發(fā)明。實(shí)施例1通式I的化合物PICM1的制備，其中Lj是Ace,X，和X3是Arg，X2是Glu，且X4是Phe-NH2。所以PICM1的％式為Ace-Arg-Glu-Arg-Phe-NH2。使用自動(dòng)肽合成儀進(jìn)行合成，以相當(dāng)于0.5mmol胺基的2.5gRink-酰胺樹(shù)脂(0.2meq/g)起始。用30%哌啶的DMF溶液將Fmoc基團(tuán)在兩個(gè)連續(xù)的相中進(jìn)行水解3min和7min。然后以列出的順序?qū)ο铝谢衔镞M(jìn)行反應(yīng)Fmoc-Phe-OH(0.581g)，F(xiàn)moc-Arg(Pbf)-OH(0.974g),Fmoc-Glu(OtBu)-OH(0.638g)，F(xiàn)moc-Arg(Pbf)-OH(0.974g)和乙酸(0.090g)。酰基化作用的持續(xù)時(shí)間是lh;隨后洗滌樹(shù)脂并以Kaiser茚三酮測(cè)定法測(cè)試反應(yīng)。如果反應(yīng)是陰性的，則在下一個(gè)氨基酸偶聯(lián)之前將Fmoc基團(tuán)按如上所述進(jìn)行水解。通過(guò)將1.5mmo1氨基酸溶解于4mlDMF中，并與活化劑混合物一起加入到去保護(hù)的樹(shù)脂中而偶聯(lián)所有氨基酸，所述混合物由含0.780gPyBop的2mlDMF溶液、含0.230gHOBT的2mlDMF溶液和250mlDIEA溶液組成。為了將肽從樹(shù)脂上分離并同時(shí)將側(cè)鏈去保護(hù)，將干燥樹(shù)脂置于反應(yīng)器中，向所述反應(yīng)器中加入重量比為9:0.5:0.3:0.2的TFA,笨琉基甲烷，巰基乙醇和茴香醚的溶液20ml。將反應(yīng)混合物在13攪動(dòng)下放置2h。將過(guò)濾物減少到小體積并通過(guò)用醚沉淀抽提肽。將沉淀物溶于水并凍干。最后，通過(guò)反相色語(yǔ)純化肽并通過(guò)分析型HPLC進(jìn)行表征，使用VydacC180.46x25cm柱，在35min內(nèi)，以lml/min的流速，相對(duì)于0.1。/o(v/v)水性三氟乙酸(相A)，用包含0.1。/。(v/v)三氟乙酸的乙腈(B相)的從5到70%的線性梯度進(jìn)行洗脫，在210nm用UV檢測(cè)。停留時(shí)間(Rt)=11.8min.;色諳純度>99%。FAB畫(huà)MS:(MH)+=650。實(shí)施例2式I的化合物PICM2的制備，其中Ll是pGlu，Xi和X3是Arg，X2是Glu和乂4是Tyr。所以PICM2的％式為pGhi-Arg-Glu-Arg-Tyr-OH。使用自動(dòng)肽合成4義進(jìn)行合成，以相當(dāng)于0.5mmo1胺基的2.5gFmoc-Tyr(tBu)-Novasyn-TGA樹(shù)脂(0.2m叫/g)起始。用30%哌啶的DMF溶液將Fmoc基團(tuán)在兩個(gè)連續(xù)的相中進(jìn)行水解3min和7min。然后以列出的順序?qū)ο铝邪被徇M(jìn)行反應(yīng)Fmoc-Arg(Pbf)-OH(0.974g),Fmoc-Glu(OtBu)-OH(0'638g)，F(xiàn)moc-Arg(Pbf)畫(huà)OH(0.974g)和Fmoc畫(huà)pGlu-OH(0.638g)。?；饔玫某掷m(xù)時(shí)間是lh;隨后洗滌樹(shù)脂并以Kaiser茚三酮測(cè)定法測(cè)試反應(yīng)。如果反應(yīng)是陰性的，則在下一個(gè)氬基酸偶聯(lián)之前將Fmoc基團(tuán)按如上所述進(jìn)行水解。通過(guò)將1.5mmo1氨基酸溶解于4mlDMF中，并與活化劑混合物一起加入到去保護(hù)的樹(shù)脂中而偶聯(lián)所有氨基酸，所述混合物由含0.780gPyBop的2mlDMF溶液，含0.230gHOBT的2mlDMF溶液和250mlDIEA溶液組成。為了將肽從樹(shù)脂上分離并將側(cè)鏈同時(shí)去保護(hù)，將干燥樹(shù)脂置于反應(yīng)器中，向所述反應(yīng)器中加入重量比為9:0.5:0.3:0.2的TFA，苯石危基甲烷，巰基乙醇和茴香醚的溶液20ml。將反應(yīng)混合物在攪動(dòng)下放置2h。將過(guò)濾物減少到小體積并通過(guò)用醚沉淀抽提肽。將沉淀物溶于水并凍干。最后，通過(guò)反相色譜純化肽并通過(guò)分析性HPLC進(jìn)行表征，使用VydacC180.46x25cm柱，在35min內(nèi)，以lml/min的流速，相對(duì)于0.1%(v/v)水性三氟乙酸(相A)，用包含0.1%(v/v)三氟乙酸的乙腈(B14相)的從5到70。/。的線性梯度進(jìn)行洗脫，在B中，在210nm用UV檢測(cè)。停留時(shí)間(Rt)-12.8min;色譜純度>99%。FAB-MS:(MH)+=589。實(shí)施例3用實(shí)施例1和2中所述的方法合成的肽的序列和特征數(shù)據(jù)。表1顯示用實(shí)施例1中所述的方法合成的一系列肽的序列和特征數(shù)據(jù)，所述肽由PICM3到PICM39和PICM54到PICM67組成，以及用實(shí)施例2中所述的方法合成的一系列肽的序列和特征數(shù)據(jù)，所述肽由PICM40到PICM53組成，才艮據(jù)常用肽合成方法適當(dāng)?shù)卣{(diào)整以用于特異性序列合成。表1—根據(jù)本發(fā)明的肽序歹i的例子及其特征<table>tableseeoriginaldocumentpage15</column></row><table>AceArgAibN(Me)ArgPhe-NH218.3620PICM20AccArgAibN(Me)ArgTyr-NH218.1636PICM21AceArgAibN(Me)ArgTrp-NH219.3659PICM22pGluArgAibN(Me)ArgPhe-NH214.5688PICM23pGluArgAibN(Me)ArgTyr-NH214.2704PICM24pGluArgAibN(Me)ArgTrp-NH216.0727PICM25pGluArgAibArgPhe-NH215.4674(續(xù))PICM26pGluArgAibArgTyr-NH215.26卯PICM27pGluArgAibArgTrp-NH216.6713PICM28AccArgAc5cArgPhe-NH218.5632PICM29AceArgAc5cArgTyr-NH218.2648PICM30AceArgAc5cArgTrp-NH219.4671PICM31AccArgAc5cN(Me)ArgPhe-NH219.3646PICM32AceArgAc5cN(Me)ArgTyr-NH219.1662PICM33AceArgAc5cN(Me)ArgTrp-NH220.7685PICM34pGluArgAc5cN(Me)ArgPhe-NH217.6714PICM35pGluArgAe5cN(Me)ArgTyr-NH217.4730PICM36pGluArgAc5cN(Me)ArgTrp-NH218.4753PICM37pGluArgAc5cArgPhe-NH216.2700PICM38pGluArgAc5cArgTyr-NH216.0716PICM39pGluArgAc5cArgTrp-NH217.1739PICM40AccArgGluArgPhe-OH11.7651PICM41AceArgGluArgTyr-OH11.5667PICM42AceArgGluArgTrp國(guó)OH12.66卯PICM43AccArgGluArg(Me)Tyr-OH12.3681PICM44pGluArgGluArg(Me)Phe-OH12.9733<table>tableseeoriginaldocumentpage17</column></row><table>實(shí)施例4PICM57對(duì)細(xì)胞遷移表現(xiàn)出的劑量依賴型抑制。測(cè)試實(shí)施例3中所述PICM57對(duì)于人纖維肉瘤HT1080細(xì)胞的細(xì)胞遷移的作用。如文獻(xiàn)中所報(bào)道的，使用裝備了聚碳酸酯濾器的Boyden小室，該濾器具有直徑8pm(Nucle叩ore)的孔，不含聚乙烯吡咯烷酮，并涂布了5ng/ml的玻連蛋白(Promega)(Owr/ew爭(zhēng)入，Omcc/d59,5^7,/999)。將無(wú)血清DMEM(DulbeccoModifiedEagleMedium)中的3x104細(xì)胞留存于Boyden小室的上室中。在不斷提高濃度的PICM57存在下，將下室充滿包含10%FBS(胎牛血清，作為趨化劑的來(lái)源)的DMEM。將細(xì)胞于3"C在包含5。/。C02的加濕空氣中孵育4h。孵育后，機(jī)械去除附于濾器上表面的細(xì)胞，并將附于濾器下表面的遷移細(xì)胞固定在乙醇中，用蘇木精染色，并于200倍》文大下隨機(jī)選擇計(jì)數(shù)每個(gè)濾器的10個(gè)視野。將在缺少PICM57的情況下響應(yīng)于FBS的定向性遷移取作100%，以百分比的形式評(píng)估PICM57對(duì)于細(xì)胞遷移的作用。數(shù)據(jù)代表三次獨(dú)立實(shí)驗(yàn)的平均數(shù)，每次實(shí)驗(yàn)一式兩份。PICM57對(duì)HT1080細(xì)胞趨向FBS的遷移的拮抗作用是劑量依賴型的(表2)。它開(kāi)始于laM的濃度，于lfM的濃度達(dá)到其最大值的50%,并于10fM的濃度達(dá)到最大值(66%的抑制)。在相同實(shí)驗(yàn)條件下評(píng)估了在Metastin[45-54存在時(shí)FBS誘導(dǎo)的遷移(表3)。數(shù)據(jù)表明需要比PICM57大1000倍的Metastin[45-54]濃度(10nMMetastin[45-54]對(duì)10fMPICM57),以4更獲得對(duì)趨向FBS的定向性遷移的相當(dāng)水平的抑制。表2-PICM57對(duì)于由10。/。FBS誘導(dǎo)的人纖維肉瘤HT1080細(xì)胞的定向性遷移的抑制作用，計(jì)算為趨向單獨(dú)10%FBS(視為100。/。)的遷移細(xì)胞的百分比。<table>tableseeoriginaldocumentpage18</column></row><table>表3-PICM57,PICM1和Metastin[45-54]對(duì)于由10%FBS誘導(dǎo)的HT1080細(xì)胞的定向性遷移的抑制作用比較，表示為與對(duì)照(10。/。FBS)相比遷移細(xì)胞的百分比.濃度Metastin[45-54PICM1PICM570100100100laM100997010aM83705410fM73563910pM53463610nM563532實(shí)施例5PICM1誘導(dǎo)的對(duì)細(xì)胞能動(dòng)性不依賴于細(xì)胞系物種或組織發(fā)生起源的抑制。采用實(shí)施例4中所述的Boyden小室，并使用10%FBS作為趨化劑來(lái)源，在100pMPICMl存在/缺失的情況下，將源自各種組織的人或鼠起源的細(xì)胞系進(jìn)行體外定向性遷移測(cè)試。將在缺少PICM1的情況下響應(yīng)于FBS的方向性遷移取作100%，將PICM1對(duì)于細(xì)另包遷移的作用評(píng)估為所述值的百分比。數(shù)據(jù)代表兩次獨(dú)立實(shí)驗(yàn)的平均數(shù)，每次實(shí)驗(yàn)一式兩份。在所有測(cè)試的細(xì)胞系中，觀察PICM1對(duì)于細(xì)胞遷移的抑制作用(表4)。盡管抑制程度在所用的細(xì)胞系之間有所不同，但它從未小于50%，并且在不對(duì)Metastin響應(yīng)的鼠黑素瘤B16細(xì)胞(Ohtaki，T.等人(2001)Nature411，613-617)中也觀察到抑制作用。表4-PICM1肽對(duì)于由10%FBS誘導(dǎo)的人或鼠起源的多種腫瘤細(xì)胞系的能動(dòng)性的抑制作用，表示為與對(duì)照(10%FBS)相比遷移細(xì)胞的百分比。19起源細(xì)胞系名稱組織發(fā)生10%FBS100pMPICM1人MCF-7乳腺癌37人MDA-MB-231乳腺癌47人A431皮膚癌49人HeLa宮頸腺癌48人U937單核細(xì)胞白血病39人M14黑素瘤59人HT1080纖維肉瘤34人Saos2骨肉瘤43鼠B16黑素瘤50實(shí)施例6用PICM57預(yù)孵育的細(xì)胞的能動(dòng)性抑制。將人纖維肉瘤HT1080細(xì)胞與DMEM,或與包含100pMPICM57的DMEM—起孵育0、15、30、60或120min。將該細(xì)胞a)用PBS洗滌(磷酸緩沖鹽溶液)；b)于23。C用50mM甘氨酸-HCl緩沖液(pH3.0)洗滌5分鐘以<更從細(xì)胞表面除去肽(C"rWera.爭(zhēng)人C7/".S，"99-A^S"997)，隨后用PBS洗滌。將細(xì)胞重懸于DMEM中并如實(shí)施例4中所述在Boyden小室中進(jìn)行細(xì)胞遷移測(cè)試，使用10%FBS作為趨化劑。結(jié)果(表5)表示為在缺失FBS(基礎(chǔ)遷移，取作100%)情況下遷移的細(xì)胞的百分比。數(shù)據(jù)代表兩次獨(dú)立實(shí)驗(yàn)的平均數(shù)，每次實(shí)驗(yàn)一式兩份。細(xì)胞與PICM57的簡(jiǎn)單預(yù)孵育顯著降低了它們趨向于FBS遷移的能力。15分鐘的接觸足以使抑制與實(shí)施例4中所述的抑制相當(dāng)。在細(xì)胞與100pMPICM57接觸后酸處理15或30min完全消除了PICM57對(duì)于細(xì)胞能動(dòng)性的抑制作用。20表5-肽PICM57對(duì)于用PICM57預(yù)孵育過(guò)并接觸過(guò)10%FBS梯度的人纖維肉瘤HT1080細(xì)胞能動(dòng)性的抑制作用預(yù)孵育細(xì)胞遷移(min)Ci^出遷移的y。)無(wú)酸洗滌有酸洗滌0100100039336215983673010335060112ND120120ND實(shí)施例7P1CM57表現(xiàn)出的對(duì)細(xì)胞能動(dòng)性的抑制作用是由FPR介導(dǎo)的，F(xiàn)PR是對(duì)于fMLP具有高親和性的受體。利用缺少對(duì)于細(xì)菌源fMLP(N-甲?；?Met-Leu-Phe)的甲?；木哂懈哂H和性的受體的大鼠嗜堿性白血病細(xì)胞RBL-2H3，如實(shí)施例4中所述在Boyden小室中測(cè)試肽PICM57對(duì)于細(xì)胞遷移的作用(丄。K，『"T^flw》/f丄，7Y/附fl朋v,A，iVef/as/7flS0VjA.iS/^rt^MK，D朋/op，/.A^wms".Z，/C7"，2卵7)。使用50pg/ml纖連蛋白或10nMfMLP作為趨化劑。結(jié)果表示為在缺失FBS(基礎(chǔ)遷移，取作100%)情況下遷移的細(xì)胞的百分比。數(shù)據(jù)代表兩次獨(dú)立實(shí)驗(yàn)的平均數(shù)，每次實(shí)驗(yàn)一式兩份。與文獻(xiàn)中報(bào)道的結(jié)果一致，RBL-2H3細(xì)胞趨向纖連蛋白遷移但不趨向fMLP遷移。向趨化性梯度中加入100pMPICM57并未減弱纖連蛋白-依賴21型的細(xì)胞遷移(表6)。相反地，用FPR的cDNA(RBL-2H3/ETFR)穩(wěn)定轉(zhuǎn)染的RBL-2H3細(xì)胞獲得了在由10nMfMLP構(gòu)成的梯度中遷移的能力。向趨化性梯度中加入100pMPICM57并未減弱纖連蛋白依賴型的細(xì)胞遷移，但是將趨向fMLP的細(xì)胞遷移減弱到基礎(chǔ)水平(表6)。確定的結(jié)論即PICM57的靶標(biāo)是FPR源自于以下觀察結(jié)果，即在結(jié)合測(cè)定中，熒光標(biāo)記的肽甲酰基-Nle-Leu-Phe-Nle-Tyr-Lys(分子探針)結(jié)合到RBL-2H3/ETFR細(xì)胞的表面由細(xì)l包與10nMPICM57預(yù)酵育特異性減弱了60%。細(xì)胞與10|iMMetastin45-54]預(yù)孵育并不改變熒光標(biāo)記的f斤生物甲?；?Nle-Leu-Phe-Me-Tyr-Lys肽與RBL-2H3/ETFR細(xì)胞表面的結(jié)合。表6-PICM57表現(xiàn)出的對(duì)RBL-2H3/ETFR細(xì)胞的fMLP-依賴型細(xì)胞能動(dòng)性的抑制作用。細(xì)月包遷移(J^出遷移的％)趨化性RBL-2H3RBL-2H3PICM57RBL-2H3/ETFRRBL-2H3/ETFRPICM57____10010010010010nMfMLP1031022709950ng/ml纖連蛋白272275220215實(shí)施例8PICM57對(duì)細(xì)月包增殖的作用。利用96孑L板在100pM或100nMPICM57存在/缺失的情況下，將人纖維肉瘤HT1080細(xì)胞(lx103細(xì)胞/孑L)接種在舍10%FBS的DMEM中。在24、48、72或96h，除去未附著的細(xì)胞，在用PBS反復(fù)漂洗后，固定附著到板上的細(xì)胞并隨后用包含lmg/mlMTT(3-(4，5-二曱基噻唑基-2)-2，5-二苯基四唑溴化物，Sigma)的無(wú)菌溶液于37。C染色4h。隨后用lOOpl二甲基亞砜除去染色并于540nm通過(guò)分光光度計(jì)讀取相應(yīng)的光學(xué)22密度。在檢查的任何時(shí)間兩種濃度上PICM57的存在都沒(méi)有改變HT1080細(xì)胞的增殖指數(shù)(復(fù)制時(shí)間大約18h)(表7)。當(dāng)連續(xù)4天每天除去培養(yǎng)基并向細(xì)胞中加入新鮮10%FBS/PICM57溶液時(shí)，在并行的實(shí)驗(yàn)中獲得相同結(jié)果。表7-肽PCM57對(duì)于人纖維肉瘤HT1080細(xì)胞的FBS依賴型增殖的作用，通過(guò)分光光度計(jì)光學(xué)密度讀數(shù)來(lái)評(píng)估(入:540nm)。時(shí)間1FBSFBS/100pMFBS/100pMPICM57FBS/100nMFBS畫(huà)nMPICM57i(h)(OD)PICM57(OD)每2化達(dá)到的(OD)PICM57(OD)每24h達(dá)到的(OD):4810.50.450.510.530.56i720.940.921,071.05111(962.12.022.32.182.2實(shí)施例9PICM1和PICM57對(duì)于人纖維肉瘤HT1080細(xì)胞侵襲性的作用。用Boyden小室進(jìn)行體外細(xì)胞侵襲測(cè)試，所述Boyden小室使用無(wú)聚乙烯吡咯烷酮的濾器，具有直徑8nm(Nucleopore)的孑L，涂布有罰ng/濾器的基質(zhì)膠和包含作為趨化劑的10%FBS的DMEM(Silvestri等人Int.，T.Cancer102，562-571，2002)。將人纖維肉瘤HT1080細(xì)胞(2x105細(xì)胞/樣品)留存在Boyden小室的上室的無(wú)血清培養(yǎng)基中。所述小室的下室包含I)MEM，所述DMEM加入10%FBS作為趨化劑的來(lái)源，并且包含于指定濃度進(jìn)行測(cè)試的待測(cè)定肽。將由此裝配的所述小室于37。C置于包含5%C02的加濕環(huán)境中。18hr后，將已經(jīng)穿過(guò)基質(zhì)膠并附于濾器下表面的細(xì)胞固定，染色并計(jì)數(shù)。數(shù)據(jù)代表兩次獨(dú)立實(shí)驗(yàn)的平均數(shù)，每次實(shí)驗(yàn)一式兩份。在表8中給出的結(jié)果，表示為在存在FBS但缺失肽的情況下(100%)侵襲基質(zhì)膠的細(xì)力包百分比。PICM1和PICM57對(duì)于HT1080細(xì)胞/f曼襲性的抑制作用是劑量依賴型的。23表8-PICMl和PICM57對(duì)由10。/。FBS"i秀導(dǎo)的人纖維肉瘤HT1080細(xì)胞侵襲的劑量響應(yīng)性抑制作用。趨向于10%FBS的細(xì)胞侵襲(％)肽濃度PICM1PICM5701001001aM1006910aM1015910fM624110pM553710nM4431實(shí)施例10體外PICM1和PICM57對(duì)于新血管發(fā)生的抑制作用。通過(guò)利用內(nèi)皮細(xì)胞在原血管發(fā)生因子存在的情況下形成索狀組織的能力來(lái)進(jìn)行體外新血管發(fā)生測(cè)試，所述索狀組織在多聚化的基質(zhì)膠層上延伸形成孩l管網(wǎng)絡(luò)。對(duì)于這種類(lèi)型的測(cè)定，將5xi04HUVEC細(xì)胞(HumanUmbilicalVeinEndothelialCells,人臍帶靜脈內(nèi)皮細(xì)胞)接種在24-孔板中，其中留有300pl基質(zhì)膠在用作原血管發(fā)生劑的40ng/mlVEGF(血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子)，以及不同濃度的指定的肽存在時(shí)聚合。在5%C02中于37。C孵育18小時(shí)后，通過(guò)用倒置顯微鏡在隨機(jī)選擇的至少5個(gè)視野中計(jì)數(shù)微管結(jié)構(gòu)的數(shù)目來(lái)評(píng)估微管形成。肽對(duì)于VEGF依賴型微管形成活性的作用計(jì)算為在VEGF存在時(shí)計(jì)數(shù)的微管結(jié)構(gòu)的數(shù)目(取作100%)的百分比。數(shù)據(jù)(表9)代表兩次實(shí)驗(yàn)的平均數(shù)，每次實(shí)驗(yàn)一式兩份。體外PICM1和PICM57對(duì)于新血管發(fā)生的拮抗作用是劑量依賴型的。這種作用起始于濃度aM并于pM濃度達(dá)到峰值(計(jì)數(shù)的微管結(jié)構(gòu)數(shù)目的20%);于fM濃度達(dá)到最大作用的50%。通過(guò)比較的方式顯示了由50nM內(nèi)皮他汀表現(xiàn)的抗血管發(fā)生作用以及由metastin[45-54]表現(xiàn)的低抑制作用。表9-PICM1和PICM57對(duì)于HUVEC內(nèi)皮細(xì)胞的VEGF依賴型微24管形成活性的劑量依賴型抑制作用。VEGF-依賴型孩克管形成活性(％)肽濃度PICM57PICM1內(nèi)皮他汀Metastin45-540100100ND1001aM96104NDND10aM7577NDND10fM5365ND卯10pM2330ND6310nM19223065實(shí)施例11PICM57的毒性PICM57對(duì)小鼠的急性毒性測(cè)試表明LD50為30mg/Kg,集中在28mg/Kg(所有動(dòng)物存活)和32mg/Kg(所有動(dòng)物死亡)的區(qū)間。PICM57對(duì)大鼠的急性毒性測(cè)試表明LD50為65mg/Kg，集中在58mg/Kg(所有動(dòng)物存活)和70mg/Kg(所有動(dòng)物死亡)的區(qū)間。實(shí)施例12體內(nèi)抗轉(zhuǎn)移作用在動(dòng)物才莫型上評(píng)估PICM1的抗轉(zhuǎn)移效力。將在實(shí)驗(yàn)才莫型中引發(fā)肺部轉(zhuǎn)移的2x106人纖維肉瘤HT1080細(xì)胞(SchwdnitzA等人，丄Biol.Chem.279:33613，2004),懸浮在生理鹽水溶液中并注射入20只7周齡的CD1棵小鼠尾部靜脈中。接種肺瘤細(xì)胞24小時(shí)后，每48h緩慢注射溶于100|i1生理鹽水溶液中的3mg/KgPICM1來(lái)處理10只動(dòng)物的組，動(dòng)物固定不動(dòng)。IO只對(duì)照動(dòng)物接受相同的注射處理，但是只用生理鹽水溶液注射。每天對(duì)每只動(dòng)物稱重并觀察呼吸困難情況。22天后對(duì)照動(dòng)物顯示明顯的呼吸困難癥狀。處死所有處理的和對(duì)照動(dòng)物，并進(jìn)行尸體解剖。將肺、肝、腎、脾25和心臟進(jìn)行肉眼和顯微分析。除了肺部以外，對(duì)照或經(jīng)處理動(dòng)物的器官?zèng)]有檢查出任何組織形態(tài)學(xué)變化。不過(guò)，肺部的肉眼分析顯示在對(duì)照動(dòng)物中有大量的胸膜下新生物，經(jīng)常伴隨有壞死和出血特征，這在經(jīng)處理的動(dòng)物中未觀察到。在顯微水平上，對(duì)照動(dòng)物的肺部解剖的連續(xù)切片顯示平均45。/。的實(shí)質(zhì)區(qū)域由轉(zhuǎn)移性節(jié)結(jié)所占據(jù)，經(jīng)常是血管周邊，有中心壞死區(qū)域。相反地，在顯孩i水平上觀察發(fā)現(xiàn)用3mg/KgPICMl處理的動(dòng)物沒(méi)有顯示轉(zhuǎn)移的出現(xiàn)。權(quán)利要求1.成鹽或未成鹽形式的肽及其功能等同衍生物，具有通式L1-X1-X2-X3-X4，其中L1是H或?；蛉芜x地N-?；?、N-烷基化和/或Cα-烷基化的任何天然或非天然的氨基酸；X1和X3是相同的或不同的，任選地N-烷基化和/或Cα-烷基化的任何天然或非天然的堿性氨基酸；X2是任選地N-烷基化和/或Cα-烷基化的任何天然或非天然的氨基酸，前提是其并非為甘氨酸或在α碳原子上由1-10個(gè)碳原子的線性或環(huán)狀烷基單一取代的氨基酸，或在α碳原子上由包含4-10個(gè)碳原子的線性或環(huán)狀烷基單一取代的氨基酸，或在α碳原子上由包含1-8個(gè)碳原子的烷基單一取代的氨基酸，任選地由氨基甲?；?、羥基或芳基所取代；X4是任選地Cα-烷基化和/或在C末端酰胺化的任何天然或非天然疏水性氨基酸，或任選地N’-烷基化或N’-酰基化的任何疏水性氨基醇或疏水性偕二胺。2.如權(quán)利要求1中所述肽，其中U是H或?；?，或任選地N-酰基化或N-烷基化和/或Ca-烷基化的Glu、Gln;任選地N-?；?或Cct-烷基化的Pro、羥基-Pro、Azt、Pip、pGlu;任選地N-?；騈-烷基化的Aib、Ac3c、Ac4c、Ac5c、Ac6c;Xl5X2,X3和X4如權(quán)利要求1所定義。3.如權(quán)利要求1或2所述肽，其中如權(quán)利要求1或2所定義；Xj和X3是任選地N-烷基化和/或Ca-烷基化的相同或不同氨基酸，選自任選地p瓜基化的Arg、Orn和Lys,以及在間位或?qū)ξ挥砂坊螂一〈谋奖彼?；X2和X4如權(quán)利要求1所定義。4.如權(quán)利要求1所述肽，其中Ll5Xi，X3和X4如權(quán)利要求l-3的任何一項(xiàng)所定義；X2選自任選地N-烷基化和/或Ca-烷基化的Glu、Lys，任選地N-烷基化的Aib、Ac3c、Ac4c、Ac5c和Ac6c。5.如權(quán)利要求1所述肽，其中L！,X！,X2和X3如權(quán)利要求1-4中任何一項(xiàng)所定義；X4選自任選地酰胺化和/或Ca-烷基化的Phe、h-Phe、Tyr、Trp、l-Nal、2-Nal、h-l-Nal、h-2-Nal、Cha、Chg和Phg。6.如在前權(quán)利要求的任何一項(xiàng)所述肽，其中是H或?；蛉芜x地N-酰基化或N-烷基化的Aib、Ac3c、Ac4c、Ac5c或Ac6c;Xi，X2，X3和X4如權(quán)利要求l-5的任何一項(xiàng)所定義。7.如權(quán)利要求1中所述肽，其中X2選自任選地N-烷基化的Aib、Ac3c、Ac4c、Ac5c和Ac6c;LpX，，X3和X4如權(quán)利要求1-6的任何一項(xiàng)所定義。8.如權(quán)利要求1-7所述肽，其中進(jìn)行?；屯榛臍埢?到9個(gè)碳原子，進(jìn)行酰胺化C-末端的殘基包含O到14個(gè)碳原子，并且進(jìn)行Ca-烷基化的殘基包含1到9個(gè)碳原子。9.如權(quán)利要求1-8中所述肽，其中進(jìn)行?；屯榛臍埢?或2個(gè)碳原子，并且進(jìn)行酰胺化C-末端的殘基包含0到5個(gè)碳原子。10.如權(quán)利要求1-9中所述肽，其序列為Ace-Arg-Glu-Arg-Phe-NH2;pGlu-Arg-Glu-Arg-Tyr-OH;Glu-Arg-Glu-Arg-Phe-NH2;Ace-Arg-Glu-Arg-Tyr-NH2;Ace-Arg-Glu-Arg-Trp-NH2;Ace-Arg國(guó)Glu-N(Me)Arg-Phe-NH2;Ace-Arg-Glu-N(Me)Arg-Tyr-NH2;Ace-Arg-Glu-N(Me)Arg-Trp-NH2;pGlu-Arg-Glu-N(Me)Arg-Phe-NH2;pGlu-Arg曙Glu-N(Me)Arg-Tyr-NH2;pGlu-Arg-Glu-N(Me)Arg-Trp-NH2;pGlu-Arg誦Glu-Arg-Phe-NH2;pGlu-Arg-GIu-Arg-Tyr-NH2;pGlu-Arg-Glu-Arg-Trp-NH2;Ace匪Arg-Aib-Arg-Phe-NH2;Ace-Arg-Aib-Arg-Tyr-NH2;Ace-Arg-Aib-Arg-Trp-NH2;Ace-Aib-Arg-Aib-Arg-Phe-NH2;Ace-Arg-Aib-N(Me)Arg-Phe-NH2;Ace-Arg-Aib-N(Me)Arg-Tyr-NH2;Ace-Arg-Aib-N(Me)Arg-Trp-NH2;pGlu-Arg-Aib-N(Me)Arg-Phe-NH2;Glu-Arg-Aib-N(Me)Arg-Tyr-NH2;pGlu-Arg-Aib-N(Me)Arg-Trp-NH2;pGlu-Arg-Aib-Arg-Phe-NH2;pGlu-Arg-Aib-Arg-Tyr-NH2;pGlu-Arg-Aib-Arg-Trp-NH2;Ace-Arg-Ac5c-Arg-Phe-NH2;Ace-Arg-Ac5c-Arg-Tyr畫(huà)NH2;Ace-Arg-Ac5c-Arg-Trp-NH2;Ace-Arg-Ac5c-N(Me)Arg-Phe-NH2;Ace-Arg-Ac5c-N(Me)Arg-Tyr-NH2;Ace-Arg-Ac5c-N(Me)Arg-Trp-NH2;pGlu-Arg-Ac5c-N(Me)Arg-Phe-NH2;pGlu-Arg-Ac5c-N(Me)Arg-Tyr-NH2;pGlu-Arg-Ac5c-N(Me)Arg-Trp-NH2;pGlu-Arg-Ac5c-Arg-Phe-NH2;pGlu-Arg-Ac5c-Arg-Tyr-NH2;pGlu-Arg-Ac5c-Arg-Trp-NH2;Ace-Arg-Glu-Arg-Phe-OH;Ace-Arg-Glu-Arg-Tyr-OH;Ace-Arg-Glu-Arg-Trp曙OH;Ace-Arg-Glu-N(Me)Arg-Tyr畫(huà)OH;pGlu-Arg-Glu-N(Me)Arg-Phe-OH;pGlu-Arg-Glu-Arg-Trp隱OH;Ace畫(huà)Arg-Aib-Arg-Phe-OH;Ace-Arg-Aib-N(Me)Arg-Phe-OH;pGlu畫(huà)Arg-Aib-N(Me)Arg畫(huà)Tyr-OH;pGlu-Arg畫(huà)Aib-Arg-Trp畫(huà)OH;Ace-Arg-Ac5c-Arg-Phe-OH;Ace-Arg-Ac5c-N(Me)Arg-Tyr-OH;pGlu-Arg-Ac5c-N(Me)Arg-Trp-OH;pGlu-Arg-Ac5c-Arg-Trp-OH;Ace-N(Me)Arg-Aib-Arg-Phe-NH2;Ace-N(Me)Arg-Aib-N(Me)Arg-Phe-NH2;Ace-Arg國(guó)Aib-N(Me)Arg-Phe-NH2;Ace-Arg-Aib-Arg-a(Me)Phe-NH2;Ace-N(Me)Arg-Aib-Arg-a(Me)Phe-NH2;Ace-N(Me)Arg-Aib-N(Me)Arg-oc(Me)Phe-NH2;Ace-Arg-Aib-N(Me)Arg-a(Me)Phe-NH2;Ace-Aib-N(Me)Arg-Aib-Arg-Phe-NH2;Ace-Aib-N(Me)Arg-Aib-N(Me)Arg-Phe-NH2;Ace-Aib畫(huà)Arg-Aib-N(Me)Arg-Phe-NH2;Ace-Aib-Arg-Aib-Arg-a(Me)Phe-NH2;Ace畫(huà)Aib-N(Me)Arg陽(yáng)Aib-Arg-a(Me)Phe-NH2;Ace-Aib-N(Me)Arg-Aib-N(Me)Arg-a(Me)Phe-NH2;Ace-Aib-Arg-Aib-N(Me)Arg-a(Me)Phe-NH2。11.包含權(quán)利要求1-10中所述化合物之一的藥物組合物，所述化合物與合適的載體或賦形劑相組合。12.權(quán)利要求1-10中所述化合物在制備用于預(yù)防和治療與異常細(xì)胞遷移相關(guān)聯(lián)病癥的藥物產(chǎn)品中的用途。13.如權(quán)利要求12中所述用途，用于預(yù)防和治療惡性胂瘤引起的局部和轉(zhuǎn)移性侵襲。14.如權(quán)利要求12所述用途，用于預(yù)防和治療與新血管發(fā)生相關(guān)聯(lián)的病癥，包括視網(wǎng)膜血管病，視網(wǎng)膜病，黃斑變性和水腫，以及Kaposi氏肉瘤。15.如權(quán)利要求12所述用途，用于預(yù)防和治療由細(xì)胞遷移支持并與慢性炎癥相關(guān)聯(lián)的病癥，包括自身免疫疾病，類(lèi)風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎，牛皮癬，和慢性肉芽腫病癥。16.如權(quán)利要求12所述用途，用于預(yù)防和治療與皰滲病毒感染相關(guān)聯(lián)的疾病。全文摘要成鹽或未成鹽形式的肽及其功能等同衍生物，具有通式L₁-X₁-X₂-X₃-X₄，其中L₁是H或?；蛉芜x地N-?；騈-烷基化和/或Cα-烷基化的任何天然或非天然的氨基酸；X₁和X₃是相同的或不同的，為任選地N-烷基化和/或Cα-烷基化的任何天然或非天然的堿性氨基酸；X₂是任選地N-烷基化和/或Cα-烷基化的任何天然或非天然的氨基酸，前提為其并非甘氨酸或在α碳原子上由1-10個(gè)碳原子的線性或環(huán)狀烷基單一取代的氨基酸，在α碳原子上由包含4-10個(gè)碳原子的線性或環(huán)狀烷基單一取代的氨基酸，或在α碳原子上由包含1-8個(gè)碳原子的烷基單一取代的氨基酸，任選地由氨基甲?；u基或芳基所取代；X₄是任選地Cα-烷基化和/或在C末端酰胺化的任何天然或非天然疏水性氨基酸，或任選地N’-烷基化或N’-酰基化的任何疏水性氨基醇或疏水性偕二胺。文檔編號(hào)A61K38/03GK101501060SQ200780029266公開(kāi)日2009年8月5日申請(qǐng)日期2007年7月19日優(yōu)先權(quán)日2006年8月9日發(fā)明者溫琴佐·帕沃納,瑪麗亞·溫琴扎·卡列羅,馬里奧·德羅薩申請(qǐng)人:瑪麗亞·溫琴扎·卡列羅;馬里奧·德羅薩;溫琴佐·帕沃納