專利名稱：病毒聚合酶抑制劑的制作方法
技術領域：
本發(fā)明涉及用于治療C型肝炎病毒(HCV)感染的化合物、組合物和方法。具體地，本發(fā)明提供了C型肝炎病毒NS5B聚合酶的新抑制劑，包含所述化合物的藥物組合物，以及使用這些化合物治療HCV感染的方法。

背景技術：
估計全球至少有1億3千萬人感染C型肝炎病毒(HCV)。在絕大多數(shù)情形中，急性HCV感染發(fā)展為慢性感染，并且在一些被感染的個體中，慢性感染造成嚴重的肝臟疾病如肝硬化和肝細胞癌。
目前，慢性C型肝炎感染的標準療法包括組合給藥聚乙二醇化的(pegylated)α干擾素和利巴韋林。然而，該療法在許多感染的患者中并無法有效地將HCV RNA降低至不可檢測的量，并通常伴隨著難以忍受的副作用如發(fā)燒和其他流感樣癥狀、抑郁、血小板減少和溶血性貧血。此外，一些HCV-感染的患者同時存在對該治療禁忌的癥狀。
因此，存在C型肝炎病毒感染的替代療法的需要。解決該需求的一種可能的策略為開發(fā)有效的抗病毒劑，該病毒劑可以使病毒或對病毒復制所必須的宿主細胞因子失活。
HCV為黃病毒科(Flaviviridae)族中的基因丙型肝炎病毒屬(Hepacivirus)中的包膜正鏈RNA病毒。該單鏈HCV RNA基因組長度約為9500個核苷酸，且具有單一開放閱讀框(ORF)，兩側為5’和3’非編碼區(qū)。該HCV 5’非編碼區(qū)的長度為341個核苷酸，且作為用于起始加帽-無關的轉譯的內部核糖體進入部點的功能。該開放閱讀框編碼約3000個氨基酸的單一的大的多蛋白，該多蛋白被細胞和病毒蛋白酶在多處位置裂解，產生成熟結構和非結構(NS2、NS3、NS4A、NS4B、NS5A和NS5B)蛋白。病毒NS2/3蛋白酶在NS2-NS3接合處裂解；同時病毒NS3蛋白酶介導在NS3-NS4A、NS4A-NS4B、NS4B-NS5A和NS5A-NS5B裂解位置處介導NS3的下游的裂解。NS3蛋白也顯示核苷三磷酸酶和RNA螺旋酶活性。NS4A蛋白作為NS3蛋白酶的輔因子，并有助于NS3和其他病毒復制酶成分的膜局部化。雖然NS4B和NS5A磷蛋白亦多半為復制酶的成分，但其特異角色仍未知。NS5B蛋白為具有RNA-依賴的RNA聚合酶(RdRp)活性的HCV復制酶的延長亞單元。
開發(fā)新的且特異的抗-HCV的治療為首要之務，且復制所必須的病毒-特異功能為藥物開發(fā)的最引人注目的目標。RNA依賴的RNA聚合酶不存在于哺乳動物中，且該酶似乎為病毒復制所必須的事實意味著NS5B聚合酶為抗-HCV療法的理想靶點。最近已證明破壞NS5B活性的突變會消除黑猩猩模型中RNA的感染性(Kolykhalov，A.A.；Mihalik，K.；Feinstone，S.M.；Rice，C.M.；2000；J.Virol.742046-2051)。
WO 03/004458描述了下列通式的化合物
其調控過氧化物酶體增殖子-活化受體α和/或γ的活性。類似的化合物描述于Thor，M.等人，Bioorganic & Medicinal Chemistry Letters(2002)123565-3567；

T.等人，Journal of Biological Chemistry(2004)279(39)41124-41130；和Hemalatha，R.等人，E-Journal of Chemistry(2004)1(5)243-250(摘錄于Chemical Abstracts 142190216)中。
發(fā)明概述 本發(fā)明提供一系列新的對HCV聚合酶具有抑制活性的化合物。尤其本發(fā)明的化合物通過HCV的RNA依賴性RNA聚合酶，尤其是由HCV編碼的NS5B酶來抑制RNA合成。本發(fā)明提供的化合物的另一優(yōu)點為對其他聚合酶具有低至極低或甚至無明顯的活性。本發(fā)明另一目的對于本領域的技術人員而言可由以下說明書和實施例獲悉。
本發(fā)明的一個方面是提供下式(I)化合物
其中 X選自O和S； R2為Het，其任選被1至5個R20取代基所取代，其中R20在各種情形下獨立地選自 a)鹵素、氰基或硝基； b)R7、-C(＝O)-R7、-C(＝O)-O-R7、-O-R7、-S-R7、-SO-R7、-SO2-R7、-(C1-6)亞烷基-R7、-(C1-6)亞烷基-C(＝O)-R7、-(C1-6)亞烷基-C(＝O)-O-R7、-(C1-6)亞烷基-O-R7、-(C1-6)亞烷基-S-R7、-(C1-6)亞烷基-SO-R7或-(C1-6)亞烷基-SO2-R7； 其中R7在各種情形下獨立地選自H、(C1-6)烷基、(C2-6)烯基、(C2-6)炔基、(C1-6)鹵代烷基、(C3-7)環(huán)烷基、芳基和Het； 其中(C1-6)烷基任選被1個或2個獨立地選自-OH、-O-(C1-6)烷基、氰基、COOH、-NH2、-NH(C1-4)烷基、-NH(C3-7)環(huán)烷基、-N((C1-4)烷基)(C3-7)環(huán)烷基和-N((C1-4)烷基)2的取代基所取代；且 其中芳基和Het各自任選被1至3個各自獨立地選自下列的取代基所取代 i)鹵素、氰基、氧代、硫代、亞氨基、-OH、-O-(C1-6)烷基、-O-(C1-6)鹵代烷基、(C3-7)環(huán)烷基、(C1-6)鹵代烷基、-C(＝O)-(C1-6)烷基、-SO2(C1-6)烷基-、C(＝O)-NH2、-C(＝O)-NH(C1-4)烷基、-C(＝O)-N((C1-4)烷基)2、-C(＝O)-NH(C3-7)環(huán)烷基、-C(＝O)-N((C1-4)烷基)(C3-7)環(huán)烷基、-NH2、-NH(C1-4)烷基、-N((C1-4)烷基)2、-NH(C3-7)環(huán)烷基、-N((C1-4)烷基)(C3-7)環(huán)烷基或-NH-C(＝O)(C1-4)烷基； ii)(C1-6)烷基，其任選被-OH、-O-(C1-6)鹵代烷基或-O-(C1-6)烷基所取代；和 iii)芳基或Het，其中芳基和Het各自任選被鹵素或(C1-6)烷基所取代；及 c)-N(R8)R9、-C(＝O)-N(R8)R9、-O-C(＝O)-N(R8)R9、-SO2-N(R8)R9、-(C1-6)亞烷基-N(R8)R9、-(C1-6)亞烷基-C(＝O)-N(R8)R9、-(C1-6)亞烷基-O-C(＝O)-N(R8)R9或-(C1-6)亞烷基-SO2-N(R8)R9，其中 R8在各種情形下獨立地選自H、(C1-6)烷基和(C3-7)環(huán)烷基；且 R9在各種情形下獨立地選自R7、-(C1-6)亞烷基-R7、-SO2-R7、-C(＝O)-R7、-C(＝O)OR7和-C(＝O)N(R8)R7；其中R7和R8如上所定義； R3選自H、鹵素、(C1-4)烷基、-O-(C1-4)烷基、-S-(C1-4)烷基、-NH2、-NH(C1-4)烷基、-NH(C3-7)環(huán)烷基、-N((C1-4)烷基)(C3-7)環(huán)烷基和-N((C1-4)烷基)2； R5為H、(C1-6)烷基、(C3-7)環(huán)烷基或Het；該(C1-6)烷基和Het各自任選被1至4個各自獨立地選自(C1-6)烷基、Het、-OH、-COOH、-C(＝O)-(C1-6)烷基、-C(＝O)-O-(C1-6)烷基、-SO2(C1-6)烷基和-C(＝O)-N(R51)R52的取代基所取代； 其中R51為H、(C1-6)烷基或(C3-7)環(huán)烷基；且 R52為H、(C1-6)烷基、(C3-7)環(huán)烷基、芳基、Het、芳基-(C1-3)烷基-或Het-(C1-3)烷基-； 其中(C1-6)烷基、(C3-7)環(huán)烷基、芳基、Het、芳基-(C1-3)烷基-和Het-(C1-3)烷基-各自任選被1至3個各自獨立地選自下列的取代基所取代(C1-6)烷基、(C1-6)鹵代烷基、鹵素、氧代、-OH、-O(C1-6)烷基、-NH2、-NH(C1-6)烷基、-N((C1-6)烷基)2、-NH(C3-7)環(huán)烷基、-N((C1-4)烷基)(C3-7)環(huán)烷基、-C(＝O)(C1-6)烷基和-NHC(＝O)-(C1-6)烷基； 其中(C1-6)烷基任選被OH取代； 或R51和R52與其所連接的N一起鍵聯(lián)形成4-至7-元雜環(huán)，其任選還含有1至3個獨立地選自N、O和S的雜原子，其中各S雜原子(獨立地且若可能)可以以氧化態(tài)存在，從而再與1或2個氧原子鍵結形成基團SO或SO2； 其中該雜環(huán)任選被1至3個各自獨立地選自下列的取代基所取代(C1-6)烷基、(C1-6)鹵代烷基、鹵素、氧代、-OH、-O(C1-6)烷基、-NH2、-NH(C1-6)烷基、-N((C1-6)烷基)2、NH(C3-7)環(huán)烷基、-N((C1-4)烷基)(C3-7)環(huán)烷基、-C(＝O)(C1-6)烷基和-NHC(＝O)-(C1-6)烷基； 其中該(C1-6)烷基任選被OH取代； R6為(C3-7)環(huán)烷基或芳基； 該(C3-7)環(huán)烷基和芳基各自任選被1至5個各自獨立地選自鹵素、(C1-6)烷基、(C1-6)鹵代烷基、(C3-7)環(huán)烷基、-OH、-SH、-O-(C1-4)烷基和-S-(C1-4)烷基的取代基所取代；且 Het為具有1至4個各自獨立地選自O、N和S的雜原子的4-至7-元飽和的、不飽和的或芳香的雜環(huán)，或若可能地具有1至5個各自獨立地選自O、N和S的雜原子的7-至14-元飽和的、不飽和的或芳香的雜多環(huán)；其中各N雜原子(獨立地且若可能)可以以氧化態(tài)存在，從而再與氧原子鍵結形成N-氧化物，且其中各S雜原子(獨立地且若可能)可以以氧化態(tài)存在，從而再與1或2個氧原子鍵結形成基團SO或SO2； 條件是當R2選自

和
X為O；R3為H；且R5為H時； R6不為

或者
或其鹽或其酯。
本發(fā)明另一方面是提供式(I)化合物或其可藥用鹽或酯，其用作藥物。
本發(fā)明又另一方面是提供藥物組合物，其包括治療有效量的式(I)化合物或其可藥用鹽或酯，以及一種或多種可藥用載體。
根據(jù)該方面的實施方案，本發(fā)明的藥物組合物還包含至少一種其他的抗病毒劑。
本發(fā)明也提供了如上述所述的藥物組合物在治療已經(jīng)感染或處于感染風險的哺乳動物的C型肝炎病毒感染中的用途。
本發(fā)明另一方面包括一種治療已經(jīng)感染或處于感染風險的哺乳動物的C型肝炎病毒感染的方法，該方法包括向哺乳動物給藥治療有效量的式(I)化合物、其可藥用鹽或酯，或上述的組合物。
本發(fā)明另一方面包括一種治療已經(jīng)感染或處于感染風險的哺乳動物的C型肝炎病毒感染的方法，該方法包括向哺乳動物給藥治療有效量的式(I)化合物或其可藥用鹽或酯與至少一種其他的抗病毒劑的組合；或其組合物。
如本文所述的式(I)化合物或其可藥用鹽或酯在治療已經(jīng)感染或處于感染風險中的哺乳動物的C型肝炎病毒感染中的用途也包括在本發(fā)明的范圍內。
本發(fā)明另一方面是提供如本文所述的式(I)化合物或其可藥用鹽或酯在制備用于治療已經(jīng)感染或處于感風險中的哺乳動物的C型肝炎病毒感染的藥物中的用途。
本發(fā)明另一方面涉及制品，該產品包括有效治療C型肝炎病毒感染的組合物；以及包裝材料，該包裝材料包括有指示該組合物可用于治療C型肝炎病毒感染的標簽；其中該組合物包含本發(fā)明的式(I)化合物或其可藥用鹽或酯。
本發(fā)明另一方面涉及一種抑制C型肝炎病毒復制的方法，該方法包括在C型肝炎病毒復制受抑制的條件下將病毒暴露于有效量的式(I)化合物或其鹽或其酯中。
式(I)化合物或其鹽或其酯用以抑制C型肝炎病毒復制的用途也包括在本發(fā)明的范圍內。
實施方案 定義 除非另有說明，本文在此使用下列提供的定義 除非另有說明，本文所用的術語“取代基”是指原子、原子團或基團，其可鍵結至碳原子、雜原子或可形成其分子或片段的一部分的任何其他原子，否則將與至少一個氫原子鍵結。在具體分子或其片段的范圍中提及的取代基可為那些產生化學上穩(wěn)定的化合物的取代基，如本領域技術人員所了解的那些。
本文所用的術語“(C1-n)烷基”(其中n為整數(shù))，單獨或與其他基團組合時，是指含1至n個碳原子的非環(huán)狀、直鏈或支鏈烷基?！?C1-6)烷基”包括但不限于甲基、乙基、丙基(正丙基)、丁基(正丁基)、1-甲基乙基(異丙基)、1-甲基丙基(仲丁基)、2-甲基丙基(異丁基)、1，1-二甲基乙基(叔丁基)、戊基和己基。簡寫Me代表甲基，Et代表乙基，Pr代表丙基，iPr代表1-甲基乙基，Bu代表丁基且tBu代表1，1-二甲基乙基。
本文所用的術語“(C1-n)亞烷基”(其中n為整數(shù))，單獨或與其他基團組合時，是指含有1至n個碳原子的非環(huán)狀、直鏈或支鏈二價烷基?！?C1-6)亞烷基”包括但不限于-CH2-、-CH2CH2-、

和
本文所用術語“(C2-n)烯基”(其中n為整數(shù))，單獨或與其他基團組合時，是指含2至n個碳原子且其中至少2個碳原子彼此通過雙鍵鍵結的不飽和的、非環(huán)狀的直鏈或支鏈基團。此類基團的實例包括但不限于乙烯基、1-丙烯基、2-丙烯基和1-丁烯基。除非另有說明，否則術語“(C2-n)烯基”應理解為包括可能的單個立體異構體，包括但不限于(E)和(Z)異構體，及其混合物。當(C2-n)烯基被取代時，除非另有說明，應當理解為取代在其任何碳原子(否則其會帶有氫原子)上，從而該取代會產生產生化學上穩(wěn)定的化合物，如本領域技術人員所了解的那樣。
本文所用的術語“(C2-n)炔基”(其中n為整數(shù))，當單獨或與其他基團組合時，是指含有2至n個碳原子且其至少2個碳原子彼此通過叁鍵鍵結的不飽和的、非環(huán)狀的直鏈或支鏈基團。此類基團的實例包括但不限于乙炔基、1-丙炔基、2-丙炔基和1-丁炔基。當(C2-n)炔基被取代時，除非另有說明，應當理解為取代在其任何碳原子(否則其會帶有氫原子)上，從而該取代會產生產生化學上穩(wěn)定的化合物，如本領域技術人員所了解的那樣。
本文所用的術語“(C3-m)環(huán)烷基”(其中m為整數(shù))，當單獨或與其他基團組合時，是指含有3至m個碳原子的環(huán)烷基基團，且包括但不限于環(huán)丙基、環(huán)丁基、環(huán)戊基、環(huán)己基和環(huán)庚基。
本文所用的術語“(C3-m)環(huán)烷基-(C1-n)烷基-”(其中n和m均為整數(shù))，單獨或與其他基團組合時，是指本身被如上定義的含有3至m個碳原子的環(huán)烷基取代的如上定義的具有1至n個碳原子的烷基。(C3-7)環(huán)烷基-(C1-6)烷基-的實例包括但不限于環(huán)丙基甲基、環(huán)丁基甲基、環(huán)戊基甲基、環(huán)己基甲基、1-環(huán)丙基乙基、2-環(huán)丙基乙基、1-環(huán)丁基乙基、2-環(huán)丁基乙基、1-環(huán)戊基乙基、2-環(huán)戊基乙基、1-環(huán)己基乙基和2-環(huán)己基乙基。當(C3-m)環(huán)烷基-(C1-n)烷基-基被取代時，應當理解為取代基可與其環(huán)烷基或烷基部分或二者連接，除非另有說明。
本文所用的術語“芳基”，單獨或與其他基團組合時，是指含有6個碳原子的單芳香碳環(huán)基團，其可再與第二個芳香的、飽和的或不飽和的5-或6-元碳環(huán)稠合。芳基包括但不限于芳基、茚滿基、茚基、1-萘基、2-萘基、四氫萘基和二氫萘基。
本文所用的術語“芳基-(C1-n)烷基-”(其中n為整數(shù))，單獨或與其他基團組合時，是指本身被上述定義的芳基取代的上述定義的具有1至n個碳原子的烷基。芳基-(C1-n)烷基-的實例包括但不限于苯甲基(芐基)、1-苯基乙基、2-苯基乙基和苯基丙基。當芳基-(C1-n)烷基-被取代時，應當理解為取代基可與其芳基或烷基部分或二者連接，除非另有說明。
本文所用術語“Het”，單獨或與其他基團組合時，是指具有1至4個各自獨立地選自O、N和S的雜原子的4-至7-元飽和的、不飽和的或芳香的雜環(huán)，或若可能地具有1至5個各自獨立地選自O、N和S的雜原子的7-至14-元飽和的、不飽和的或芳香的雜多環(huán)；其中各N雜原子(獨立地且若可能)可以以氧化態(tài)存在，從而再氧原子鍵結形成N-氧化物，且其中各S雜原子(獨立地且若可能)可以以氧化物態(tài)存在，從而再與1或2個氧原子鍵結形成基團SO或SO2，除非另有說明。當Het基被取代時，應當理解為取代基可與其任何碳原子或雜原子(否則其會帶有氫原子)連接，除非另有說明。
除非另有說明，本文所用的術語“Het-(C1-n)烷基-”(其中n為整數(shù))，單獨或與其他基團組合時，是指本身被上述定義的Het取代基所取代的上述定義的具有1至n個碳原子的烷基。Het-(C1-n)烷基-的實例包括但不限于噻吩基甲基、呋喃基甲基、哌啶基乙基、2-吡啶基甲基、3-吡啶基甲基、4-吡啶基甲基、喹啉基丙基等，當Het-(C1-n)烷基-被取代時，應當理解為取代基可與其Het或烷基部分或二者連接，除非另有說明。
本文所用的術語“雜原子”是指O、S或N。
除非另有說明，本文所用的術語“雜環(huán)”，單獨或與其他基團組合時，是指含有1至4個各自獨立地選自O、N和S的雜原子的4-至7-元飽和的、不飽和的或芳香的雜環(huán)；或通過從其中除去氫原子而衍生的單價基團。此類雜環(huán)的實例包括但不限于氮雜環(huán)丁烷、吡咯烷、四氫呋喃、四氫噻吩、三唑烷、噁唑烷、吡咯、噻吩、呋喃、吡唑、咪唑、異噁唑、噁唑、異噻唑、噻唑、三唑、四唑、哌啶、哌嗪、氮雜

、二氮雜

、吡喃、1，4-二噁烷、4-嗎啉、4-硫嗎啉、吡啶、吡啶-N-氧化物、噠嗪、嘧啶，以及下列的雜環(huán)

和

及其飽和的、不飽和的和芳香的衍生物。
除非另有說明，本文所用的術語“雜多環(huán)”，單獨或與其他基團組合時，是指與一或多個其他環(huán)(包括碳環(huán)、雜環(huán)或任何其他環(huán))稠合的上述定義的雜環(huán)；或通過從其中除去氫原子而衍生的單價基團。此列雜多環(huán)的實例包括但不限于吲哚、異吲哚、苯并咪唑、苯并噻吩、苯并呋喃、苯并二氧雜環(huán)戊烯、苯并噻唑、喹啉、異喹啉、二氮雜萘，以及下列的雜多環(huán)

和

及其飽和的、不飽和的和芳香的衍生物。
本文所用的術語“鹵素”是指選自氟、氯、溴或碘的鹵素取代基。
本文所用的術語“(C1-n)鹵代烷基”(其中n為整數(shù))，單獨或與其他基團組合時，是指其中一個或多個氫原子各自被鹵素取代基置換的上述定義的具有1至n個碳原子的烷基。(C1-n)鹵代烷基的實例包括但不限于氯甲基、氯乙基、二氯乙基、溴甲基、溴乙基、二溴乙基、氟甲基、二氟甲基、三氟甲基、氟乙基和二氟乙基。
本文可互換使用的術語“-O-(C1-n)烷基”或“(C1-n)烷氧基”(其中n為整數(shù))，單獨或與其他基團組合時，是指氧原子鍵結至如上所定義的具有1至n個碳原子的烷基。-O-(C1-n)烷基的實例包括但不限于甲氧基(CH3O-)、乙氧基(CH3CH2O-)、丙氧基(CH3CH2CH2O-)、1-甲基乙氧基(異-丙氧基；(CH3)2CH-O-)和1，1-二甲基乙氧基(叔丁氧基；(CH3)3C-O-)。當-O-(C1-n)烷基被取代時，應當理解為在其(C1-n)烷基部分上取代。
本文可互換使用的術語“-S-(C1-n)烷基”或“(C1-n)烷硫基”(其中n為整數(shù))，單獨或與其他基團組合時，是硫原子鍵結至如上所定義的具有1至n個碳原子的烷基。-S-(C1-n)烷基的實例包括但不限于甲硫基(CH3S-)、乙硫基(CH3CH2S-)、丙硫基(CH3CH2CH2S-)、1-甲基乙基硫基(異丙基硫基；(CH3)2CH-S-)和1，1-二甲基乙基硫基(叔丁基硫基；(CH3)3C-S-)。當-S-(C1-n)烷基或其氧化的衍生物(如-SO-(C1-n)烷基或-SO2-(C1-n)烷基)被取代時，應當理解為在其(C1-n)烷基部分上取代。
本文所用的術語“氧代基團(oxo)”是指通過雙鍵與碳原子連接作為取代基的氧原子(＝O)。
本文所用的術語“硫代基團(thioxo)”是指通過雙鍵與碳原子連接作為取代基的硫原子(＝S)。
本文所用的術語“亞氨基”是指通過雙鍵與碳原子連接作為取代基的NH基團(＝NH)。
本文所用的術語“COOH”是指羧基(-C(＝O)-OH)。本領域的技術人員熟知的是該羧基可被等價官能團所替代。本發(fā)明所包括的等價官能團的實例包括但不限于酯、酰胺、酰亞胺、硼酸、膦酸、磷酸、四唑、三唑、N-?；酋０?RCONHSO2NR2)和N-酰基氨磺酰(RCONHSO2R)。
本文所用的術語“等價官能團(functional group equivalent)”是指可置換另一個具有類似電子、雜化或結合性質的原子或基團的原子或基團。
本文所用的術語“保護基”是指可在合成轉化期間使用的保護基，包括但不限于列于Greene的“Protective Groups in Organic Chemistry”，John Wiley& Sons，New York(1981)和其最近版本中的實例，在此引入作為參考。
下列符號

用于子-式中表示與所定義的分子的其余部分連接的化學鍵。
本文所用的術語“其鹽”是指本發(fā)明化合物的任何酸和/或堿加成鹽，包括但不限于其可藥用鹽。
本文所用的術語“可藥用鹽”是指本發(fā)明化合物的鹽，其在合理的醫(yī)學判斷范圍內適于與人和低等動物的組織接觸而不會有過度毒性、刺激性、過敏反應等，并具有合理的效益/風險比，通常為水或油可溶或可分散的，且對其預期的用途有效。該術語包括可藥用酸加成鹽和可藥用堿加成鹽。適宜的鹽列示于例如S.M.Birge等人，J.Pharm.Sci.，1977，66，pp.1-19中。
本文所用的術語“可藥用酸加成鹽”是指那些保持游離堿的生物效力和性質且不為生物學上或者其他不需要的與無機酸或有機酸形成的鹽，無機酸包括但不限于鹽酸、氫溴酸、硫酸、氨磺酸、硝酸、磷酸等，有機酸包括但不限于乙酸、三氟乙酸、己二酸、抗壞血酸、天門冬氨酸、苯磺酸、苯甲酸、丁酸、樟腦酸、樟腦磺酸、肉桂酸、檸檬酸、二葡糖酸、乙磺酸、谷氨酸、乙醇酸、甘油磷酸(glycerophosphoric acid)、半硫酸(hemisulfic acid)、己酸、甲酸、富馬酸、2-羥基乙磺酸(羥乙磺酸)、乳酸、羧基馬來酸、蘋果酸、丙二酸、扁桃酸、均三甲基苯磺酸、甲磺酸、萘磺酸、煙酸、2-萘磺酸、草酸、雙羥萘甲酸(pamoic acid)、果膠酸(pectinic acid)、苯基乙酸、3-苯基丙酸、新戊酸、丙酸、丙酮酸、水楊酸、硬脂酸、琥珀酸、氨磺酸、酒石酸、對-甲苯磺酸、十一烷酸等。
本文所用的術語“可藥用堿加成鹽”是指那些保持游離酸的生物效力和性質且不為生物學上或者其他不需要的與無機堿形成的鹽，該無機堿包括但不限于氨、或銨或金屬陽離子如鈉、鉀、鋰、鈣、鎂、鐵、鋅、銅、錳、鋁等的氫氧化物、碳酸鹽或碳酸氫鹽。尤其優(yōu)選的為銨、鉀、鈉、鈣和鎂鹽。由可藥用有機無毒性堿衍生的鹽包括但不限于與下列的堿所形成鹽伯胺、仲胺和叔胺、季胺化合物、取代的胺包含天然存在的取代的胺、環(huán)狀胺和堿性離子交換樹脂，如甲胺、二甲胺、三甲胺、乙胺、二乙胺、三乙胺、異丙胺、三丙胺、三丁胺、乙醇胺、二乙醇胺、2-二甲基氨基乙醇、2-二乙基氨基乙醇、二環(huán)己基胺、賴氨酸、精胺酸、組胺酸、咖啡因、海巴胺(hydrabamine)、膽堿、甜菜堿、乙二胺、葡糖胺、葡甲胺、可可堿、嘌呤、哌嗪、哌啶、N-乙基哌啶、四甲基銨化合物、四乙基銨化合物、吡啶、N，N-二甲基苯胺、N-甲基哌啶、N-甲基嗎啉、二環(huán)己基胺、二芐基胺、N，N-二芐基苯乙胺、二苯羥甲胺(1-ephenamine)、N，N’-二芐基乙二胺、聚胺樹脂等。特別優(yōu)選的有機無毒性堿為異丙基胺、二乙胺、乙醇胺、三甲胺、二環(huán)己胺、膽堿和咖啡因。
本文所用的術語“其酯”是指本發(fā)明化合物的任一酯，在分子中任一-COOH取代基被-COOR取代基所置換，其中酯的R部分為形成穩(wěn)定酯基團的任何含碳基團，包括但不限于烷基、烯基、炔基、環(huán)烷基、環(huán)烷基烷基、芳基、芳基烷基、雜環(huán)基、雜環(huán)基烷基，其各自任選進一步被取代。術語“其酯”包括但不限于其可藥用酯。
本文所用的術語“可藥用酯”是指本發(fā)明化合物的酯，其中分子的任一-COOH取代基被-COOR取代基所置換，其中酯的R部分選自烷基(包括但不限于甲基、乙基、丙基、1-甲基乙基、1，1-二甲基乙基、丁基)；烷氧基烷基(包括但不限于甲氧基甲基)；酰氧基烷基(包括但不限于乙酰氧基甲基)；芳烷基(包括但不限于芐基)；芳氧基烷基(包括但不限于苯氧基甲基)；和任選被鹵素、(C1-4)烷基或(C1-4)烷氧基取代的芳基(包括但不限于苯基)。其他適宜的酯可見于Design of Prodrugs，Bundgaard，H.Ed.Elsevier(1985)中，在此引入作為參考。此類可藥用酯當注射到哺乳動物內時通常會于體內水解，且轉化為酸形式的本發(fā)明化合物。關于上述的酯，除非另有說明，否則存在的任一烷基基團優(yōu)選含有1至16個碳原子，更優(yōu)選1至6個碳原子。此類酯中存在的任何芳基基團優(yōu)選包括苯基。尤其是酯可為(C1-16)烷酯、未取代的芐基酯或被至少一個鹵素、(C1-6)烷基、(C1-6)烷氧基、硝基或三氟甲基取代的芐基酯。
本文所用的術語“哺乳動物”包括人以及容易感染C型肝炎病毒的非人哺乳動物。非人哺乳動物包括但不限于飼養(yǎng)動物如牛、豬、馬、狗、貓、兔子、大鼠和小鼠，以及非飼養(yǎng)動物。
本文所用的“治療”是指給藥本發(fā)明的化合物或組合物，以減輕或消除C型肝炎病毒疾病的癥狀和/或降低病患的病毒負荷。術語“治療”也包括對暴露于病毒后但在出現(xiàn)疾病癥狀前，和/或在血液中檢測到病毒之前向個體給藥本發(fā)明的化合物或組合物，以避免出現(xiàn)疾病的癥狀和/或避免病毒在血液中達到可檢測的量。
“治療有效量”是指當向有此需要的患者給藥時，對使用本發(fā)明化合物足以治療疾病狀態(tài)、病癥或障礙的量。此類量會足以引起由研究人員或醫(yī)師所尋求的組織系統(tǒng)或患者的生物學的或醫(yī)學的相應。構成治療有效量的本發(fā)明的化合物的量會隨著以下因素而變化化合物及其生理學活性、用于給藥的組合物、給藥時間、給藥途徑、化合物的排泄速度、治療持續(xù)的時間、要治療的疾病狀態(tài)或障礙的類型及其嚴重程度，以及患者的年齡、體重、健康狀況、性別和飲食。此類治療有效量可通常由本領域的技術人員考慮他們自己的知識、現(xiàn)有技術的現(xiàn)狀和本公開來確定。
本文所用的術語“抗病毒劑”是指有效抑制哺乳動物中的病毒的形成和/或復制的藥劑，包括但不限于干擾哺乳動物中病毒的形成和/或復制所需的宿主或病毒機制的藥劑。
優(yōu)選實施方案 下列優(yōu)選實施方案中，詳細描述本發(fā)明化合物的基團和取代基。
X X-A在一個實施方案中，X為O。
X-B在另一個實施方案中，X為S。
如本文所示X的任一以及各個定義可與本文所示的R2、R3、R5和R6的任一以及各個定義組合。
R2 Het-A在一個實施方案中，R2為Het，其中Het為含有1至3個各自獨立地選自O、N和S的雜原子的5-或6-元雜環(huán)，或含有1至3個各自獨立地選自O、N和S的雜原子的9-或10-元雙環(huán)雜多環(huán)；其中Het任選被1至5個R20取代基所取代，其中R20如本文所定義。
Het-B在另一個實施方案中，R2為Het，其中Het為含有1個或2個N雜原子的5-或6-元芳香雜環(huán)，或含有1個或2個N雜原子的9-或10-元雙環(huán)雜多環(huán)，其中Het任選被1至3個R20取代基所取代，其中R20如本文所定義。
Het-C在另一個實施方案中，R2為選自下列的Het


和
其中Het任選被1至3個R20取代基所取代，其中R20如本文所定義。
Het-D在另一個實施方案中，R2為下式的Het
其中Het任選被1至3個R20取代基所取代，其中R20如本文所定義。
Het-E另一個實施方案中，R2為下式的基團
其中R23為本文所定義的R20。
R20-A在一個實施方案中，R20選自 a)鹵素、氰基或硝基； b)R7、-(C1-6)亞烷基-R7、-C(＝O)-R7、-O-R7、-C(＝O)-O-R7、-(C1-6)亞烷基-O-R7、-S-R7、-SO2-R7、-(C1-6)亞烷基-S-R7或-(C1-6)亞烷基-SO2-R7； 其中R7在各種情形下獨立地選自H、(C1-6)烷基、(C2-6)烯基、(C1-6)鹵代烷基、(C3-7)環(huán)烷基、芳基和Het； 其中Het為含有1至4個各自獨立地選自N、O和S的雜原子的5-或6-元雜環(huán)，或Het為含有1至4個各自獨立地選自N、O和S的雜原子的9-或10-元雜多環(huán)；其中各N雜原子(獨立地且若可能)可以以氧化態(tài)存在，從而再與氧原子鍵結形成N-氧化物，且其中各S雜原子(獨立地且若可能)可以以氧化態(tài)存在，從而再與1個或2個氧原子鍵結形成基團SO或SO2；且 其中(C1-6)烷基任選被1個或2個各自獨立地選自-OH、-O-(C1-6)烷基和COOH的取代基所取代；且 其中芳基和Het各自任選被1至3個各自獨立地選自鹵素、氰基、氧代、亞氨基、-OH、-O-(C1-6)烷基、-NH2、-NH(C1-4)烷基、-N((C1-4)烷基)2、-NH-C(＝O)(C1-4)烷基、(C1-6)烷基和Het的取代基所取代，其中Het為含1至4個各自獨立地選自N、O和S的雜原子的5-或6-元雜環(huán)；和 c)-N(R8)R9、-(C1-6)亞烷基-N(R8)R9或-(C1-6)亞烷基-C(＝O)-N(R8)R9，其中 R8在各種情形下獨立地選自H和(C1-6)烷基；且 R9在各種情形下獨立地選自R7、-SO2-R7、-C(＝O)-R7、-C(＝O)OR7和-C(＝O)N(R8)R7；其中R7和R8定義如上。
R20-B另一個實施方案中，R20選自 a)鹵素或氰基； b)R7、-(C1-6)亞烷基-R7、-C(＝O)-R7、-(C1-6)亞烷基-O-R7、-SO2-R7、-(C1-6)亞烷基-S-R7或-(C1-6)亞烷基-SO2-R7； 其中R7在各種情形下獨立地選自H、(C1-6)烷基、(C2-6)烯基、(C1-6)鹵代烷基、(C3-7)環(huán)烷基、芳基和Het； 其中Het為含有1至4個各自獨立地選自N、O和S的雜原子的5-或6-元雜環(huán)，或Het為含有1至4個各自獨立地選自N、O和S的雜原子的9-或10-元雜多環(huán)；其中各N雜原子(獨立地且若可能)可以以氧化態(tài)存在，從而再與氧原子鍵結形成N-氧化物，且其中各S雜原子(獨立地且若可能)可以以氧化態(tài)存在，從而再與1個或2個氧原子鍵結形成基團SO或SO2；且 其中(C1-6)烷基任選被1個或2個各自獨立地選自-OH、-O-(C1-6)烷基和COOH的取代基所取代；且 其中芳基和Het各自任選被1至3個各自獨立地選自鹵素、氰基、氧代、亞氨基、-OH、-O-(C1-6)烷基、-NH2、-NH(C1-4)烷基、-N((C1-4)烷基)2、-NH-C(＝O)(C1-4)烷基、(C1-6)烷基和Het的取代基所取代，其中Het為含1至4個各自獨立地選自N、O和S的雜原子的5-或6-元雜環(huán)；和 c)-(C1-6)亞烷基-N(R8)R9或-(C1-6)亞烷基-C(＝O)-N(R8)R9，其中R8在各種情形下獨立地選自H和(C1-6)烷基；且 R9在各種情形下獨立地選自R7、-SO2-R7、-C(＝O)-R7、-C(＝O)OR7和-C(＝O)N(R8)R7；其中R7和R8定義如上。
R20-C另一個實施方案中，R20選自 a)鹵素或氰基； b)R7、-CH2-R7、-C(＝O)-R7、-CH2-O-R7、-SO2-R7、-CH2-S-R7或-CH2-SO2-R7； 其中R7在各種情形下獨立地選自H、(C1-6)烷基、(C2-6)烯基、(C1-6)鹵代烷基、(C3-7)環(huán)烷基、苯基和Het；其中Het選自


和

和 其中(C1-6)烷基任選被1個或2個各自獨立地選自-OH、-O-(C1-6)烷基和COOH的取代基所取代；且 其中苯基和Het各自任選被1至3個各自獨立地選自鹵素、氰基、氧代、亞氨基、-OH、-O-(C1-6)烷基、-NH2、-NH(C1-4)烷基、-N((C1-4)烷基)2、-NH-C(＝O)(C1-4)烷基、(C1-6)烷基和

的取代基所取代；和 c)-CH2-N(R8)R9或-CH2-C(＝O)-N(R8)R9，其中 R8在各種情形下獨立地選自H和(C1-6)烷基；且 R9在各種情形下獨立地選自R7、-SO2-R7、-C(＝O)-R7、-C(＝O)OR7和-C(＝O)N(R8)R7；其中R7和R8定義如上。
R20-D在另一個實施方案中，R20選自 b)-(C1-3)亞烷基-R7、-(C1-3)亞烷基-O-R7、-(C1-3)亞烷基-S-R7或-(C1-3)亞烷基-SO2-R7； 其中R7為Het；其中Het為含有1至4個各自獨立地選自N、O和S的雜原子的5-或6-元雜環(huán)，或Het為含有1至4個各自獨立地選自N、O和S的雜原子的9-或10-元雜多環(huán)；其中各N雜原子(獨立地且若可能)可以以氧化態(tài)存在，從而再與氧原子鍵結形成N-氧化物，且其中各S雜原子(獨立地且若可能)可以以氧化態(tài)存在，從而再與1個或2個氧原子鍵結形成基團SO或SO2； 其中Het任選被1至3個各自獨立地選自鹵素、氰基、氧代、亞氨基、-OH、-O-(C1-6)烷基、-O-(C1-6)鹵代烷基、(C3-7)環(huán)烷基、-NH2、-NH(C1-4)烷基、-NH(C3-7)環(huán)烷基、-N((C1-4)烷基)(C3-7)環(huán)烷基、-N((C1-4)烷基)2，-NH-C(＝O)(C1-4)烷基、(C1-6)烷基和Het的取代基所取代，其中Het為含1至4個各自獨立地選自N、O和S的雜原子的5-或6-元雜環(huán)；和 c)-(C1-3)亞烷基-N(R8)R9，其中 R8在各種情形下獨立地選自H、(C1-6)烷基和(C3-7)環(huán)烷基；且 R9為R7，其中R7定義如上。
R20-E在另一個實施方案中，R20選自 b)-CH2-R7、-CH2CH2-R7、-CH2-O-R7、-CH2-S-R7或-CH2-SO2-R7； 其中R7為Het；其中Het選自



和

以及 其中Het任選被1至3個各自獨立地選自鹵素、氰基、氧代、亞氨基、-OH、-O-(C1-6)烷基、-NH2、-NH(C1-4)烷基、-N((C1-4)烷基)2、-NH-C(＝O)(C1-4)烷基、(C1-6)烷基和

的取代基所取代；和 c)-CH2-N(R8)R9，其中 R8在各種情形下獨立地選自H和(C1-6)烷基；且 R9為R7，其中R7定義如上。
因此，R2實施方案的實例列于下表中，其中各取代基是依上述定義加以定義 R2-J在另一個實施方案中，R2選自



和
或R2是為下式的基團
其中R23選自 H、I、-CN、CH3CH2-、CH2＝CH-、




CH3C(＝O)-、-CH2OH、CH3CH(OH)-、




和
本文所示的R2任一以及各個定義可與本文所列的X、R3、R5和R6的任一以及各個定義組合。
R3 R3-A在一個實施方案中，R3選自H、鹵素、(C1-4)烷基、-O-(C1-4)烷基和-N((C1-4)烷基)2。
R3-B在另一個實施方案中，R3選自H和鹵素。
R3-C在另一個實施方案中，R3為H或F。
R3-D在另一個實施方案中，R3為H。
本文所示的R3任一以及各個定義可與本文所列的X、R2、R5和R6的任一以及各個定義組合。
R5 R5-A在一個實施方案中，R5為(C1-6)烷基。
R5-B在另一個實施方案中，R5為甲基或1-甲基乙基。
R5-C在另一個實施方案中，R5為1-甲基乙基。
R5-D在另一個實施方案中，R5為被Het、-COOH或-C(＝O)-N(R51)R52取代的(C1-4)烷基，其中該Het為含有1至4個N雜原子的5-或6-元雜環(huán)，或Het為含有1至4個N雜原子的9-或10-元雙環(huán)雜多環(huán)； 且其中R51為H或(C1-6)烷基，且R52選自H、(C1-6)烷基、(C3-7)環(huán)烷基、Het和Het-(C1-3)烷基-； 其中(C1-6)烷基任選被1個或2個各自獨立地選自-O(C1-6)烷基和-N((C1-6)烷基)2的取代基所取代； 且其中該Het和Het-(C1-3)烷基-的Het部分各自獨立為含有1至3個各自獨立地選自N、O和S的雜原子的5-或6-元雜環(huán)，其中該Het和Het-(C1-6)烷基-各自任選被1至3個各自獨立地選自鹵素、氧代、-OH、(C1-6)烷基、(C1-6)鹵代烷基、-(C＝O)(C1-6)烷基、-N((C1-6)烷基)2和-NH(C＝O)(C1-6)烷基的取代基所取代， 其中該(C1-6)烷基任選被OH取代； 或R51和R52與其所連接的N一起鍵聯(lián)形成4-至7-元雜環(huán)，其任選還含有1至3個各自獨立地選自N、O和S的雜原子，其中各S雜原子(獨立地且若可能)可以以氧化態(tài)存在，從而再與1個或2個氧原子鍵結形成基團SO或SO2； 其中雜環(huán)任選被1至3個各自獨立地選自鹵素、氧代、-OH、-(C1-6)烷基、-(C1-6)鹵代烷基、-(C＝O)(C1-6)烷基、-N((C1-6)烷基)2和-NH(C＝O)(C1-6)烷基的取代基所取代； 其中該(C1-6)烷基任選被OH取代。
R5-E在另一個實施方案中，R5為被Het、-COOH或-C(＝O)-N(R51)R52取代的(C1-2)烷基，其中該Het選自
且其中R51為H或(C1-6)烷基且R52選自H、(C1-4)烷基、(C3-6)環(huán)烷基、Het和Het-(C1-3)烷基； 其中該(C1-6)烷基任選被1個或2個獨立地選自-O(C1-4)烷基和-N((C1-4)烷基)2的取代基所取代； 且其中該Het和Het-(C1-3)烷基-的Het部分各自獨立地選自

和
其中該Het和Het-(C1-3)烷基-各自任選被1至3個各自獨立地選自鹵素、氧代、-OH、(C1-6)烷基、(C1-6)鹵代烷基、-(C＝O)(C1-6)烷基、-N((C1-6)烷基)2和-NH(C＝O)(C1-6)烷基的取代基所取代， 其中該(C1-6)烷基任選被OH取代； 或R51和R52與其所連接的N一起鍵聯(lián)形成選自下列的雜環(huán)

和
其中該雜環(huán)任選被1至3個各自獨立地選自鹵素、氧代、-OH、-(C1-6)烷基、-(C1-6)鹵代烷基、-(C＝O)(C1-6)烷基、-N((C1-6)烷基)2和-NH(C＝O)(C1-6)烷基的取代基所取代； 其中該(C1-6)烷基任選被OH取代。
R5-F在另一實施方案中，R5為-CH2-C(＝O)-N(R51)R52； 其中R51為H或(C1-6)烷基，且R52選自H、(C1-6)烷基、(C3-7)環(huán)烷基、Het和Het-(C1-3)烷基； 其中該(C1-6)烷基任選被1個或2個獨立地選自-O(C1-6)烷基和-N((C1-6)烷基)2的取代基所取代； 且其中該Het和Het-(C1-3)烷基-的Het部分各自獨立為含有1至3個獨立地選自N、O和S的雜原子的5-或6-元雜環(huán)，其中該Het和Het-(C1-3)烷基-各自任選被1至3個各自獨立地選自鹵素、氧代、-OH、(C1-6)烷基、(C1-6)鹵代烷基、-(C＝O)(C1-6)烷基、-N((C1-6)烷基)2及-NH(C＝O)(C1-6)烷基的取代基所取代， 其中該(C1-6)烷基任選被OH取代； 或R51和R52與其所連接的N一起鍵聯(lián)形成5-或6-元雜環(huán)，其任選還含有1至3個各自獨立地選自N、O和S的雜原子的，其中各S雜原子(獨立地且若可能)可以以氧化態(tài)存在，從而再與1或2個氧原子鍵結形成基團SO或基SO2； 其中該雜環(huán)任選被1至3個各自獨立地選自鹵素、氧代、-OH、(C1-6)烷基、(C1-6)鹵代烷基、-(C＝O)(C1-6)烷基、-N((C1-6)烷基)2和-NH(C＝O)(C1-6)烷基的取代基所取代； 其中該(C1-6)烷基任選被OH取代。
R5-G在另一個實施方案中，R5為-CH2-C(＝O)-N(R51)R52；其中R51為H或(C1-6)烷基且R52為H或(C1-6)烷基。
R5-H在另一個實施方案中，R5為Het，其任選被1至4個各自獨立地選自(C1-6)烷基、-OH、-COOH、-C(＝O)-(C1-6)烷基、-C(＝O)-O-(C1-6)烷基、-C(＝O)-NH-(C1-6)烷基、-C(＝O)-N((C1-6)烷基)2、-C(＝O)-NH(C3-7)環(huán)烷基、-C(＝O)-N((C1-4)烷基)(C3-7)環(huán)烷基和-SO2(C1-6)烷基的取代基所取代。
R5-I在另一個實施方案中，R5為含有1至3個各自獨立地選自O、N和S的雜原子的5-或6-元飽和雜環(huán)，該雜環(huán)任選被1至4個各自獨立地選自(C1-4)烷基、-C(＝O)-(C1-4)烷基、-C(＝O)-O-(C1-4)烷基、-C(＝O)-NH-(C1-4)烷基、-C(＝O)-N((C1-4)烷基)2、-C(＝O)-NH(C3-7)環(huán)烷基、-C(＝O)-N((C1-4)烷基)(C3-7)環(huán)烷基和-SO2(C1-4)烷基的取代基所取代。
R5-J在另一個實施方案中，R5選自H、甲基、乙基、丙基、1-甲基乙基、



和
如本文所示的R5的任一以及各個定義可與本文所示的X、R2、R3和R6的任一以及各個定義組合。
R6 R6-A在一個實施方案中，R6為(C3-7)環(huán)烷基，其任選被1至5個各自獨立地選自鹵素、(C1-6)烷基、(C1-6)鹵代烷基、(C3-7)環(huán)烷基、-OH、-SH、-O-(C1-4)烷基和-S-(C1-4)烷基的取代基所取代。
R6-B在另一個實施方案中，R6為環(huán)己基，其任選被1至3個各自獨立地選自-OH和(C1-4)烷基的取代基所取代。
R6-C在另一個實施方案中，R6選自

和
R6-D在另一個實施方案中，R6為
R6-E另一個實施方案中，R6為芳基，其任選被1至5個各自獨立地選自鹵素、(C1-6)烷基、(C1-6)鹵代烷基、(C3-7)環(huán)烷基、-OH、-SH、-O-(C1-4)烷基和-S-(C1-4)烷基的取代基所取代； 條件是當R2選自

和
X為O；R3為H；且R5為H時； R6不為

或者
R6-F在另一實施方案中，R6為苯基，其任選被1或3個各自獨立地選自鹵素、(C1-4)烷基、(C3-7)環(huán)烷基和-S-(C1-4)烷基的取代基所取代； 條件是當R2選自下列

和
X為O；R3為H；且R5為H時； R6不為

或者
R6-G在另一個實施方案中，R6為苯基，其任選被1至3個各自獨立地選自F、Cl、Br、甲基、乙基、環(huán)丙基和-S-CH3的取代基所取代； 條件是當R2選自

和
X為O；R3為H；且R5為H時； R6不為

或者
R6-H在另一個實施方案中，R6選自


和
條件是當R2選自

和
X為O；R3為H；且R5為H時； R6不為
如本文所示的R6的任一以及各個定義可與本文所示的X、R2、R3和R5的任一以及各個定義組合。
本發(fā)明優(yōu)選的亞實施方案的實例列于下表中，其中各實施方案的各取代基依據(jù)上述定義加以定義。
本發(fā)明最優(yōu)選的化合物的實例為表1和2中所列的各單個化合物。
總體而言，本發(fā)明包括所有的互變異構體形式和異構體形式，及其混合物，例如單個幾何異構體、立體異構體、對映異構體、非對映異構體、外消旋體、立體異構體的消旋或非消旋混合物、非對映異構體的混合物，或任一前述形式的化學結構或化合物的混合物，除非在化合物名稱或結構中具有說明特定的立體化學或異構形式。
本領域中已知化合物的生物和藥物活性對于化合物的立體化學相當敏感。因此，例如對映異構體經(jīng)常呈現(xiàn)出明顯不同的生物學活性，包括藥物動力學的差異，包括代謝、蛋白結合等，以及藥理學性質的差異，包括顯示活性的種類，活性、毒性等的程度的差異。因此，本領域的技術人員會認識到當相對于其他對映異構體為富集或自其他對映異構體分離時，一種對映異構體可能更具活性或可能呈現(xiàn)有利的效果。此外，本領域的技術人員從本發(fā)明所公開的內容和現(xiàn)有技術的知識，會直到如何分離、富集或選擇性制備本發(fā)明化合物的對映異構體。
制備純的立體異構體(例如對映異構體和非對映異構體)，或所需的對映異構體過量(ee)或對映異構體純度的混合物可通過一種或多種下列的方法達到(a)對映異構體的分離或拆分，或(b)本領域技術人員所熟知的對映選擇性合成，或其組合。這些拆分方法通常依賴對手性的辨識，并包括例如使用手性固定相的色譜、對映選擇性主體-客體的絡合、使用手性助劑的拆分或合成、對映選擇性合成、酶和非酶動力學拆分，或自發(fā)性對映選擇性結晶。此類方法總的描述于Chiral Separation TechniquesA Practical Approach(2ndEd.)，G.Subramanian(ed.)，Wiley-VCH，2000；T.E.Beesley和R.P.W.Scott，Chiral Chromatography，John Wiley & Sons，1999；和Satinder Ahuja，ChiralSeparations by Chromatography，Am.Chem.Soc.，2000中。此外，對映異構體過量或純度定量方法均為悉知方法，例如GC、HPLC、CE或NMR，以及絕對構型和構象的確認，例如CD ORD、X-射線晶體法或NMR。
本發(fā)明的化合物為C型肝炎病毒NS5B RNA-依賴的RNA聚合酶的抑制劑，并因此可用于抑制C型肝炎病毒RNA的復制。
本發(fā)明化合物也可用作實驗用試劑或研究試劑。例如，本發(fā)明的化合物可作為陽性對照組以驗證測試，包括但不限于代用細胞為主的測試(surrogatecell-based assays)以及體外或體內病毒復制測試。
本發(fā)明化合物也可用作探針以研究C型肝炎病毒NS5B聚合酶，包括但不限于聚合酶的作用機制、通過聚合酶在各種條件下經(jīng)歷的構象改變，以及與與該聚合酶結合或者相互作用的實體的相互作用。
用作探針的本發(fā)明化合物可用標記物標記，該標記物使得該化合物直接或間接地識別，從而其能被檢測、測量并定量。用于本發(fā)明化合物的標記物包括但不限于熒光標記物、化學發(fā)光標記物、比色(colorimetric)標記物、酶標記物、放射活性同位素、親合性標簽物(tags)、以及光敏基團。
用作探針的本發(fā)明化合物也可用親合性標簽物標記，該標記物的對于受體的強親合性可用于從溶液中萃取該配體連接的實體。親合性標簽物包括但不限于生物素或其衍生物、組氨酸多肽、聚精氨酸、直鏈淀粉糖基團或可由特定抗體識別的限定的表位。
此外，用作探針的本發(fā)明化合物可用光敏基團標記，該光敏基團在光活化時會從惰性基團轉化成活性基團基，如自由基。光敏基團包括但不限于光親合性標記物，如二苯甲酮和疊氮基。
此外，本發(fā)明化合物可用于處理或預防物質的病毒污染，因此可降低與物質(例如血液、組織、手術設備及衣服、實驗設備及衣服，以及血液收集裝置及材料)接觸的實驗室人員或醫(yī)學人員或患者感染病毒的風險。
藥物組合物 本發(fā)明的化合物可作為藥物組合物給藥于需要治療C型肝炎病毒感染的哺乳動物，該藥物組合物包含治療有效量的本發(fā)明化合物或其可藥用鹽或酯；以及一種或多種已知的無毒性可藥用載體、助劑或溶媒。組合物的具體制劑由化合物的溶解度和化學性質、選用的給藥路徑以及標準藥物實踐所決定的。本發(fā)明的藥物組合物可口服給藥或全身性給藥。
就口服給藥而言，可將化合物或其可藥用鹽或酯配制為任何口服可接受的劑型，包括但不限于水性懸浮液及溶液、膠囊或片劑。就全身性給藥而言，包括但不限于皮下、皮內、靜脈內、肌肉內、骨關節(jié)內、滑膜內、胸骨內、鞘膜內內和眼瞼內(intralesional)注射或輸注技術，優(yōu)選使用含化合物或其可藥用鹽于可藥用無菌水性載體中的溶液。
可藥用載體、助劑、溶媒、賦形劑和添加劑，以及配制各種給藥模式用的藥物組合物的方法為本領域技術人員所熟知的，且秒述于藥物文獻如雷明頓RemingtonThe Science and Practice of Pharmacy，21st版，LippincottWilliams & Wilkins，2005；和L.V.Allen，N.G.Popovish and H.C.Ansel，Pharmaceutical Dosage Forms and Drug Delivery Systems，8th版，LippincottWilliams & Wilkins，2004中。
給藥劑量取決于已知因素，包括但不限于所用具體化合物的活性及藥理動力學性質，以及給藥的模式、時間和途徑；接受者的年齡、飲食、性別、體重和總的健康狀況；癥狀的性質和程度；感染的嚴重性及經(jīng)過；同時治療的種類；治療頻度；所需的效果；以及處置醫(yī)師的判斷?？傮w而言，最希望以通?？色@得抗病毒上有效的結果而不會造成任何有害或不良副作用的劑量給藥。
活性成分的日劑量可為每千克體重約0.01至約200毫克，優(yōu)選劑量為約0.1至約50毫克/千克。通常，本發(fā)明的藥物組合物每天給藥約1至約5次，或者連續(xù)輸注。此類給藥可用作慢性或急性治療?？膳c載體物質組合以產生單一劑型的活性成分量將隨著治療的宿主以及具體的給藥途徑而變化。典型的制劑含有約5％至約95％的活性化合物(w/w)。優(yōu)選地，制劑含有約20％至約80％的活性化合物。
組合治療 組合治療(combination therapy)是指本發(fā)明化合物或其可藥用鹽或酯與至少一種其他的抗病毒劑共同給藥(co-administer)。其他的藥物可與本發(fā)明化合物組合以形成單一劑型。或者這些其他的藥物可以作為多劑型的一部分而分開、同時或依序給藥。
當本發(fā)明的藥物組合物包含本發(fā)明化合物或其可藥用鹽或酯與一種或多種其他的抗病毒劑的組合時，該化合物和該其他的藥物均應以單一療程正常給藥劑量的約10至100％，并優(yōu)選約10至80％的劑量存在。就本發(fā)明化合物與其他抗病毒劑或藥劑間的協(xié)同作用而言，相比于以單一療程正常給藥的劑量，可降低該組合中的任一或全部活性藥劑的劑量。
在此類組合治療中使用的抗病毒劑包括于哺乳動物中有效抑制病毒形成和/或復制的藥物(化合物或生物制劑)，包括但不限于干擾哺乳動物中的病毒形成和/或復制所需的宿主或病毒機制的藥物。此類藥物可選自其他的抗-HCV藥物；HIV抑制劑；HAV抑制劑；和HBV抑制劑。
其他抗-HCV藥包括那些有效消除或預防C型肝炎相關的癥狀或疾病的發(fā)展的藥物。此類藥物包括但不限于免疫調節(jié)劑、HCV NS3蛋白酶抑制劑、其他的HCV聚合酶抑制劑、HCV生命周期中其他靶點的抑制劑以及其他的抗-HCV藥物，包括但不限于利巴韋林、金剛烷胺、左偉靈(levovirin)和威咪啶(viramidine)。
免疫調節(jié)劑包括那些效增進或強化哺乳動物的免疫系統(tǒng)反應的藥物(化合物或生物制劑)。免疫調節(jié)劑包括但不限于肌苷單磷酸酯脫氫酶抑制劑如VX-497(美利美普代(merimepodib)，Vertex Pharmaceuticals)、第I類干擾素、第II類干擾素、共有擾素、asialo-干擾素聚乙二醇化干擾素及共軛干擾素，包括但不限于與其他蛋白包括但不限于人類白蛋白共軛的干擾素。第I類干擾素為均與第I類受體結合的干擾素，包括天然和合成產生的第I類干擾素，而第II類干擾素均與第II類受體結合。第1類干擾素的實例包括但不限于α-、β-、δ-、(ω)-及τ-干擾素，而第II類干擾素的實例包括但不限于γ-干擾素。
HCV NS3蛋白酶的抑制劑包括那些有效抑制哺乳動物的HCV NS3蛋白酶功能的藥物(化合物或生物制劑)。HCV NS3蛋白酶的抑制劑包括但不限于WO 99/07733、WO 99/07734、WO 00/09558、WO 00/09543、WO 00/59929、WO 03/064416、WO 03/064455、WO 03/064456、WO 2004/030670、WO2004/037855、WO 2004/039833、WO 2004/101602、WO 2004/101605、WO2004/103996、WO 2005/028501、WO 2005/070955、WO 2006/000085、WO2006/007700、WO 2006/007708(均由Boehringer Ingelheim申請)、WO02/060926、WO 03/053349、WO 03/099274、WO 03/099316、WO 2004/032827、WO 2004/043339、WO 2004/094452、WO 2005/046712、W O2005/051410、WO 2005/054430(均由BMS申請)、WO 2004/072243、WO 2004/093798、WO 2004/113365、WO 2005/010029(均由Enanta申請)、WO 2005/037214(Intermune)、WO 01/77113、WO 01/81325、WO 02/08187、WO 02/08198、WO 02/08244、WO 02/08256、WO 02/48172、WO 03/062228、WO 03/062265、WO 2005/021584、WO 2005/030796、WO 2005/058821、WO 2005/051980、WO 2005/085197、WO 2005/085242、WO 2005/085275、WO 2005/087721、WO 2005/087725、WO 2005/087730、WO 2005/087731、WO 2005/107745及WO 2005/113581(均由Schering申請)中的化合物；和候選藥物VX-950、ITMN-191和SCH-503034。
HCV聚合酶的抑制劑包括那些有效抑制HCV聚合酶功能的藥物(化合物或生物制劑)。該抑制劑包括但不限于HCV NS5B聚合酶的非-核苷和核苷抑制劑。HCV聚合酶的抑制劑實例包括但不限于下列中的化合物WO02/04425、WO 03/007945、WO 03/010140、WO 03/010141、WO 2004/064925、WO 2004/065367、WO 2005/080388、WO 2006/007693(均由BoehringerIngelheim申請)、WO 01/47883(Japan Tobacco)、WO 03/000254(JapanTobacco)、WO 03/026587(BMS)、WO 03/101993(Neogenesis)、WO2004/087714(IRBM)、WO 2005/012288(Genelabs)、WO 2005/014543(JapanTobacco)、WO 2005/049622(Japan Tobacco)和WO 2005/121132(Shionogi)；以及候選藥物XTL-2125、HCV796、R-1626、R-7128、NM283、VCH-759、GSK625433和PF868554。
HCV生命周期中其他靶點的抑制劑包括那些有效抑制HCV的形成和/或復制而非抑制HCV NS3蛋白酶或HCV聚合酶功能的藥物(化合物或生物制劑)。此類藥物可干擾HCV形成和/或復制所需的宿主或HCV病毒機制。HCV生命周期中其他靶點的抑制劑包括但不限于進入(entry)抑制劑、抑制選自螺旋酶、NS2/3蛋白酶和內部核糖體進入位點(IRSE)的靶點的藥物，以及干擾其他病毒靶點的藥物包括但不限于NS5A蛋白和NS4B蛋白。
可能發(fā)生患者同時感染C型肝炎病毒和一種或多種其他病毒，包括但不限于人類免疫缺陷病毒(HIV)、A型肝炎病毒(HAV)和B型肝炎病毒(HBV)。因此也包括共同給藥本發(fā)明化合物以及至少一種HIV抑制劑、HAV抑制劑和HBV抑制劑以治療此類同時感染的組合治療。
HIV抑制劑包括那些有效抑制HIV形成和/或復制的藥劑(化合物或生物制劑)。其包括但不限于干擾哺乳動物中的HIV形成和/或復制所需的宿主或病毒機制的藥物。HIV抑制劑包括但不限于 ●NRTIs(核苷或核苷酸反轉錄酶抑制劑；包括但不限于齊多夫定、去羥肌苷、扎西他濱、司他夫定、拉米夫定、恩曲他濱、阿巴卡韋和替諾福韋)； ●NNRTIs(非核苷反轉錄酶抑制劑；包括但不限于奈韋拉平、地拉韋啶、依法韋侖、依塔韋侖(etravirine)、利吡韋侖(rilpivirine)和BILR355)； ●蛋白酶抑制劑(包括但不限于利托那韋、替拉那韋、沙奎那韋、那非那韋、茚地那韋、安潑那韋、福沙那韋、阿坦那韋(atazanavir)、洛匹那韋、道盧那韋(darunavir)和貝卡那韋(brecanavir))； ●進入抑制劑包括但不限于

CCR5拮抗劑(包括但不限于馬雷明克(maraviroc)(UK-427，857)和TAK-652)，

CXCR4拮抗劑(包括但不限于AMD-11070)，

融合抑制劑(包括但不限于伊呋凡替(enfuvirtide)(T-20))，和

其他(包括但不限于BMS-488043)； ●整合酶抑制劑(包括但不限于MK-0518、c-1605、BMS-538158和GS9137)； ●TAT抑制劑； ●成熟抑制劑(包括但不限于貝凡里脈(bevirimat)(PA-457))；和 ●免疫調節(jié)劑(包括但不限于左旋咪唑)。
HAV抑制劑包括有效抑制HAV形成和/或復制的藥物(化合物或生物制劑)。其包括但不限于干擾哺乳動物中的HAV形成和/或復制所需宿主或病毒機制的藥物。HAV抑制劑包括但不限于A型肝炎疫苗。
HBV抑制劑包括有效抑制哺乳動物中的HBV形成和/或復制有效的藥物(化合物或生物制劑)。其包括但不限于干擾哺乳動物中的HBV形成和/或復制所需宿主或病毒機制的藥物。HBV抑制劑包括但不限于抑制HBV病毒DNA聚合酶的藥物和HBV疫苗。
因此，根據(jù)一個實施方案，本發(fā)明的藥物組合物還包含治療有效量的一種或多種抗病毒劑。
本發(fā)明的其他實施方案提供了藥物組合物，其中所述一種或多種抗病毒劑包括至少一種其他的抗-HCV藥劑。
根據(jù)本發(fā)明藥物組合物的更具體的實施方案，所述至少一種其他抗-HCV劑包括至少一種免疫調節(jié)劑。
根據(jù)本發(fā)明藥物組合物的另一更具體的實施方案，所述至少一種其他抗-HCV劑包括至少一種HCV聚合酶的其他抑制劑。
根據(jù)本發(fā)明藥物組合物的另一更具體的實施方案，所述至少一種其他抗-HCV藥劑包括至少一種HCV NS3蛋白酶的抑制劑。
根據(jù)本發(fā)明藥物組合物的另一更具體的實施方案，所述至少一種其他抗-HCV藥劑包括至少一種HCV生命周期中其他靶點的抑制劑。
本說明書中所引用的所有出版物，在此將它們引入作為參考，就像它們每個單獨地在此被引用。此外，應當認識到，在本發(fā)明的上述教導中，本領域的技術人員能夠對本發(fā)明作出變化和改良，并且這些等價物仍應當包括在本發(fā)明的權利要求書所限定的范圍內。
方法和合成 本發(fā)明式(I)化合物的合成按照以下方案1和2中所示的通用步驟來實現(xiàn)，其中R2、X、R3、R5和R6如本文所定義?？梢灾苽浔景l(fā)明化合物的其他步驟為本領域中所熟知的或在下述實施例中闡述。
方案1
式(II)的中間體(其中R3a為本文定義的R3，或為可轉化成本文定義的R3的前體基團，R為酯保護基團如甲基或乙基，且LG為離去基團如F或Cl)是商購可得的，或可通過本領域中已知的步驟或如下列實施例中所示的步驟制備。對本領域的技術人員顯而易見的是，當基團R3a為前體基團時，可在形成式(I)化合物之前通過本領域中已知的或如下列實施例中所示的步驟，在方案中的任何化學上適宜的中間體階段轉化為R3。
使用本領域中已知的或如下列實施例中所示的反應條件，使中間體(II)與式R2X-H(其中R2和X如本文所定義)的試劑偶合，得到式(III)的中間體。該反應條件包括但不限于SNAr反應條件和Ullman偶合條件。本領域技術人員會了解到，本發(fā)明化合物的R2基團的取代方式不同，并且包括一種R2基可通過本領域中已知的或下列實施例中所示的步驟，在方案中的任何化學適宜的中間體階段轉化為另一中R2基團。
將中間體(III)的硝基在已知條件下用酸如鹽酸還原成氨基，得到式(IV)的中間體或其鹽。R5基團可通過本領域的技術人員已知的任何適宜反應包括(但不限于)烷基化和還原胺化加至式(IV)中間體的氨基上，得到式(V)的中間體。該還原胺化反應依據(jù)Abdel-Magid，A.F.；Carson，K.G.；Harris，B.D.；Maryanoff,C.A.；Shah，R.D.J.Org.Chem.1996，61，3849，通過將式(IV)的中間體與適宜的取代的醛或酮或其適宜的衍生物反應，接著用三乙酰氧基硼氫化鈉處理而方便地地進行。醛和酮的適宜衍生物為本領域中所公知，且包括但不限于烯醇醚等。醛、酮或其適宜衍生物為商購可得的或可通過本領域匯中已知的或下列實施例中所示的步驟制備。將中間體(V)用商購可得的或可通過本領域中已知的或下列實施例中所示的步驟制備的酰化劑進行?；?。接著通過本領域中已知的或下列實施例中所示的步驟將酯保護基R水解，得到式(I)化合物。
或者，可將式(IV)中間體的氨基如前所述進行?；玫绞?VI)的中間體。通過本領域中已知的或下列實施例中所示的步驟將式(VI)中間體的酰胺氮原子烷基化，接著將酯保護基水解，得到式(I)化合物。
本領域的技術人員會了解到，本發(fā)明化合物的R5和R6基團取代方式不同，并且包括通過本領域中已知的或下列實施例中所示的步驟，在方案中的任何化學上適宜的中間體階段將一種R5基團轉化成另一種R5基團，或將一種R6基團轉化成另一種R6基團。
或者，式(I)化合物的制備可通過下列方案2中所示的步驟實現(xiàn)，其中R2、X、R3、R5和R6如本文所定義，R為酯保護基團如甲基或乙基，且PG為本領域技術人員已知的XH官能團的適宜保護基，包括但不限于芐基。
方案2
式VII的中間體為商購可得的或可通過本領域中已知的或下列實施例中所示的步驟制備。如上所描述將硝基還原為氨基，并引入R5和-C(＝O)R6基團，得到式(XI)的中間體。式(XI)的中間體通過本領域中已知的或下列實施例中所示的步驟將XH基脫保護，并使用本領域中已知的或下列實施例中所示的步驟，將所得的游離酚或硫醇與式R2-LG(其中LG為離去基團如F或Cl)偶合，轉化為式(I)化合物。此類步驟包括但不限于SNAr反應和Ullman偶合反應。最后，如前述通過水解將酯脫保護。
實施例 本發(fā)明的其他特點從下列非限制性實例將變得顯而易見，該實例通過實施例示例性地說明了本發(fā)明的原理。正如本領域技術人員所熟知的，為了使反應成分免受空氣或濕氣影響，反應依需要在惰性氣體(包括但不限于氮氣或氬氣)中進行。溫度為攝氏溫度(℃)。溶液百分比和比例表示體積對體積關系，除非另有說明?？焖賹游鲈诠枘z(SiO2)上根據(jù)W.C.Still等人，J.Org.Chem.，(1978)，43，2923的步驟進行。質譜分析使用電噴霧質譜儀記錄。分析型HPLC在標準條件下使用CombiscreenTM ODS-AQ C18反相柱，YMC，50×4.6mmi.d.，5μM，120

，在220nM處，使用下表中所述的線性梯度(溶劑A為0.06％TFA的H2O溶液，溶劑B為0.06％ TFA的CH3CN溶液)洗脫； 本文所用的簡寫和符號包括 Ac 乙?；?； AcCl乙酰氯； AcOH乙酸； Ac2O乙酸酐； BINAP 2，2’-雙(二苯基膦)-1，1’-聯(lián)萘； Bn 芐基(苯基甲基)； BnBr溴芐； BOC或Boc叔丁氧基羰基； Bu 丁基； n-BuOAc 乙酸正丁酯； DBU 1，8-二氮雜雙環(huán)[5.4.0]十一碳-7-烯； DCE 二氯乙烷； DCM 二氯甲烷； DIEA二異丙基乙基胺； DMAP4-二甲氨基吡啶； DME 二甲氧基乙烷； DMF N，N-二甲基甲酰胺； DMSO二甲基亞砜； EC50 50％有效濃度； EEDQ 2-乙氧基-1-乙氧基羰基-1，2-二氫喹啉； eq.摩爾當量； Et 乙基； Et3N 三乙胺； Et2O 乙醚； EtOAc 乙酸乙酯； EtOH 乙醇； HPLC 高效液相色譜； IC50 50％抑制濃度； iPr或i-Pr 1-甲基乙基(異丙基)； Me 甲基； MeCN 乙腈； MeI碘甲烷； MeOH 甲醇； MS 質譜(MALDI-TOF基質輔助激光解吸離子-時間飛行質譜，F(xiàn)AB快速原子轟擊)； NISN-碘代琥珀酰亞胺； NMPN-甲基吡咯烷酮； NMR核磁共振光譜； Ph 苯基； PG 保護基團； Pr 丙基； RT 室溫(約18℃至25℃)； TBTU O-苯并三唑-1-基-N，N，N’，N’-四甲基脲鎓四氟硼酸鹽； 叔丁基或t-丁基1，1-二甲基乙基； TFA三氟乙酸； THF四氫呋喃； TLC薄層層析。
實施例1A 中間體1a9的制備
步驟1 經(jīng)約30分鐘，向5-羥基-2-硝基苯甲酸1a1(50克，0.273毫摩爾)在MeOH(500毫升)中的混合物中滴加SOCl2(40毫升，65.2克，0.55摩爾)，并將該混合物加熱回流2小時。小心添加過量SOCl2(20毫升，32.6克，0.27摩爾)，并在回流下持續(xù)加熱過夜。再添加SOCl2(20毫升，32.6克，0.27摩爾)，并在回流下持續(xù)加熱1小時。將反應混合物冷卻至室溫，并減壓濃縮。殘余物用EtOAc(600毫升)稀釋，用飽和NaHCO3水溶液和鹽水洗滌，用MgSO4干燥，過濾并濃縮至干。從CH2Cl2和己烷中回收甲酯1a2。
步驟2 將化合物1a2(51.2克，0.26摩爾)，無水K2CO3(150克，1.09摩爾)和PhCH2Br(39毫升，56克，0.33摩爾)在丙酮(500毫升)中的混合物在室溫下攪拌過夜。過濾混合物，并濃縮濾液，用EtOAc(1.5升)稀釋，用水和鹽水洗滌，用MgSO4干燥，過濾并濃縮至干。從EtOAc和己烷中回收化合物1a3。
步驟3 向化合物1a3(68.4克，0.24摩爾)于乙醇(1.2升)中的攪拌混合物中添加Fe粉(150克，2.7摩爾)，接著添加AcOH(65毫升)。將該混合物加熱回流4小時，接著再添加Fe粉(75克，1.3摩爾)和AcOH(30毫升)，并在回流下持續(xù)加熱1.5小時。過濾混合物，并分別處理固體和濾液。
將固體與飽和NaHCO3水溶液和EtOAc混合，添加固體NaHCO3直到達到堿性pH為止?；旌衔锿ㄟ^CeliteTM過濾，并用EtOAc洗滌。水層用EtOAc(2×1升)萃取兩次，并合并有機層。
減壓濃縮濾液，用EtOAc(1升)稀釋殘余物，并添加飽和NaHCO3水溶液。向混合物中添加固體NaHCO3直到pH為堿性為止。混合物通過CeliteTM過濾，并用EtOAc洗滌。
合并處理固體獲得的有機相及上述濾液部分，接著用鹽水洗滌，用MgSO4干燥，并濃縮至干，從CH2Cl2和己烷中回收殘余物。向回收的殘余物(46.7克，0.18摩爾)在Et2O(400毫升)中的攪拌混合物中添加2M HCl的Et2O溶液(180毫升，0.38摩爾)。將該混合物在室溫下攪拌2小時，并過濾收集化合物1a4。
步驟4 所用步驟采自Abdel-Magid，A.F.；Carson，K.G.；Harris，B.D.；Maryanoff，C.A.；Shah，R.D.J.Org.Chem.1996，61，3849。向化合物1a4(30克，0.1摩爾)和CH2Cl2(600毫升)的混合物中添加2-甲氧基丙烯(36毫升，27克，0.38摩爾)，接著添加NaBH(OAc)3(43.2克，0.2摩爾)。將該混合物在室溫下攪拌7小時，用EtOAc稀釋，用飽和NaHCO3水溶液和鹽水洗滌，用MgSO4干燥，過濾并濃縮至干。從EtOAc和己烷中回收化合物1a5。
步驟5 在Ar氣和室溫下，經(jīng)1小時，向化合物1a6(43.4克，305毫摩爾)和無水CH2Cl2(400毫升)的混合物中滴加于CH2Cl2(305毫升)中的(COCl)2(53.2毫升，610毫摩爾)。將該混合物在室溫下攪拌1小時，并滴加無水DMF(1毫升)。將該混合物在室溫下攪拌過夜，并減壓濃縮。殘余物用戊烷稀釋，過濾。減壓濃縮濾液兩次，用戊烷稀釋，過濾，接著減壓濃縮，得到酰氯1a7。
步驟6 向化合物1a5(99.6克，0.32摩爾)于無水吡啶(1.5升)中的混合物中添加化合物1a7(100毫升，100克，0.62摩爾)和DMAP(3.8克，0.03摩爾)。將該混合物在60℃下攪拌過夜，并減壓濃縮。殘余物用EtOAc(3升)稀釋，用2M HCl水溶液(4×1升)、飽和NaHCO3水溶液(6×500毫升)和鹽水洗滌，用MgSO4干燥，過濾并濃縮至干，得到化合物1a8。
步驟7 在Ar下，向化合物1a8(130克，0.3摩爾)，MeOH(0.6升)和EtOAc(1.5升)的混合物中小心地添加10％ Pd/C(15克)。在攪拌下將氬氣通入混合物中鼓泡10分鐘，接著將H2鼓泡于混合物中，并在室溫繼續(xù)攪拌8小時?；旌衔锿ㄟ^CeliteTM過濾，并減壓濃縮濾液。從己烷中收集化合物1a9。
實施例1B 中間體1b3的制備
步驟1 向化合物1a4(實施例1A)(2.0克，6.8毫摩爾)在無水吡啶(35毫升)中的混合物中添加化合物1a7(實施例1A)(1.65毫升，10.2毫摩爾)和DMAP(82毫克，0.67毫摩爾)。將混合物在50℃下攪拌1小時，并減壓濃縮。殘余物用EtOAc(300毫升)稀釋，用2M HCl水溶液(5×200毫升)、飽和NaHCO3水溶液(6×200毫升)和鹽水(200毫升)洗滌，用MgSO4干燥，過濾并濃縮。從DCM/己烷中回收化合物1b1。
步驟2 向冰浴冷卻的化合物1b1(2.0克，5.24毫摩爾)和無水DMF(30毫升)的混合物中添加NaH(60％，0.25克，10.5毫摩爾)，并將該混合物攪拌40分鐘。添加CH3I(0.9毫升，14.5毫摩爾，2.8當量)，并將該混合物在室溫下攪拌過夜?；旌衔镉肊tOAc(600毫升)稀釋，用飽和NH4Cl水溶液(3×300毫升)、飽和NaHCO3水溶液(300毫升)和鹽水(300毫升)洗滌，用MgSO4干燥，過濾并濃縮。粗產物通過ISCO CombiFlash柱(SiO2，己烷/EtOAc10/0至5/5)純化，得到化合物1b2。
步驟3 在Ar氣向，將化合物1b2(2.07克，5.24毫摩爾)在無水MeOH(33毫升)和無水EtOAc(83毫升)中的混合物小心地添加至Pd/C(10％，0.23克)中。在室溫和攪拌下，將Ar氣通入混合物鼓泡2分鐘，接著將H2通入混合物鼓泡中2.5小時?；旌衔锿ㄟ^CeliteTM過濾，并濃縮濾液。從乙醚/己烷混合物(1/9，100毫升)中得到固體苯酚1b3。
中間體1b3可使用下列實施例的方法轉化為式(I)化合物。
實施例2A 化合物1001的制備(表1)
將苯酚1a9(實施例1A)(20毫克，0.06毫摩爾)與4-羥基四氫吡喃(0.08毫摩爾)和三苯基膦(20毫克，0.08毫摩爾)在THF(1毫升)中混合。添加偶氮二甲酸二異丙酯(0.02毫升，0.10毫摩爾)，并將該混合物在環(huán)境溫度下攪拌過夜。添加NaOH水溶液(10N，0.06毫升，0.6毫摩爾)、水(0.06毫升)和甲醇(0.4毫升)，將混合物溫熱至50℃，并攪拌2.5小時。通過制備型HPLC純化，得到化合物1001(表1)。
實施例2B 化合物1003的制備(表1)
將苯酚1a9(實施例1A)(20毫升，0.06毫摩爾)與3-三氟甲基-4-氯吡啶(16毫克，0.07毫摩爾)和K2CO3(31毫克，0.22毫摩爾)在DMSO(0.5毫升)中混合。將該混合物加熱至100℃，并攪拌24小時。添加NaOH水溶液(5N，0.12毫升，0.6毫摩爾)，并將該混合物溫熱至55℃，并攪拌1小時?；旌衔镉肁cOH酸化，并通過制備型PHLC純化，得到化合物1003(表1)。
實施例2C 化合物1031的制備(表1)
將苯酚1a9(實施例1A)(60毫克，0.18毫摩爾)、3-噻吩硼酸(46毫克，0.36毫摩爾)、Cu(OAc)2(33毫克，0.18毫摩爾)、Et3N(0.13毫升，0.90毫摩爾)和4

分子篩(50毫克)在DCM中的混合物敞開下攪拌20小時。混合物用EtOAc稀釋，且用0.2N HCl水溶液、飽和NaHCO3水溶液和鹽水洗滌。有機相用MgSO4干燥，過濾并濃縮。將殘余物溶于DMSO(4毫升)中，并添加NaOH水溶液(2.5N，1.0毫升，2.5毫摩爾)。將混合物在環(huán)境溫度下攪拌2小時，接著用AcOH酸化，并通過制備型HPLC純化，分離出化合物1031(表1)。
實施例2D 化合物2011的制備(表2)
步驟1 在Ar下，向化合物2d1(39.01克，239毫摩爾)和無水DMF(800毫升)的混合物中添加N-碘代琥珀酰亞胺(4.89克，244毫摩爾)和無水K2CO3(33.72克，244毫摩爾)，并將該混合物在60℃下攪拌3小時。將該混合物冷卻至環(huán)境溫度，過濾，并減壓濃縮。將殘余物溶于DCM(1升)中，并用鹽水洗滌有機相。通過添加2M HCl將水相調節(jié)至pH4，接著用DCM(1升)萃取。合并的有機萃取液用鹽水(2升)洗滌，并用Na2SO4干燥。將混合物濃縮至約300毫升，并在冰箱中冷卻過夜。過濾移除沉淀的固體并干燥，得到芳基碘化物2d2。
步驟2 在N2下，將化合物2d2(115.7克，400毫摩爾)和PhPOCl2(668.6克，343毫摩爾)的混合物在136℃下攪拌過夜，接著冷卻至室溫，并緩慢添加至3升碎冰中。將含水混合物調節(jié)至pH 6，并過濾。用DCM(3升)萃取水性濾液，接著用飽和NaHCO3和鹽水洗滌有機相，用Na2SO4干燥，過濾并濃縮，得到化合物2d3。
步驟3 將化合物1a9(實施例1A)(62.7克，0.19摩爾)、化合物2d3(66.7克，0.22摩爾)、無水K2CO3(65克，0.47摩爾)和無水DMSO(250毫升)的混合物在100℃下加熱2小時。將該混合物冷卻至室溫，過濾，并用EtOAc洗滌固體。濾液用EtOAc(4升)稀釋，用飽和NH4Cl和鹽水洗滌，用MgSO4干燥，并濃縮。殘余物在硅膠(95:5己烷/EtOAc至7:3己烷/EtOAc)上快速層析純化，得到二芳基醚2d4。
步驟4 在0℃下，向化合物2d4(125毫克，0.21毫摩爾)、THF(6.0毫升)、MeOH(3.0毫升)和H2O(1.0毫升)的混合物中添加LiOH(5N，300微升，1.5毫摩爾)。將混合物在0℃下反應15分鐘，接著在室溫下攪拌過夜?；旌衔镉肊tOAc稀釋，用1N HCl酸化，并用水和鹽水洗滌有機萃取液，干燥(MgSO4)，并濃縮，得到化合物2011。
實施例2E 化合物1008的制備(表1)
步驟1 將化合物2e1(64毫克，0.30毫摩爾)、嗎啉(0.027毫升，0.31毫摩爾)和三乙胺(0.050毫升，0.36毫摩爾)在DMF(1毫升)中的混合物在環(huán)境溫度下攪拌過夜。接著用EtOAc稀釋混合物，并依序用水(4×)和鹽水洗滌。有機相用MgSO4干燥，過濾并濃縮，得到中間體2e2。
步驟2 使用實施例2B的步驟將中間體2e2和苯酚1a9(實施例1A)偶合，合成化合物1008(表1)。
實施例2F 化合物1010的制備(表1)
步驟1 將化合物2e1(實施例2E)(32毫克，0.15毫摩爾)、4-吡啶基硼酸(18毫克，0.15毫摩爾)、Cs2CO3(72毫克，0.22毫摩爾)和Pd(PPh3)4(9毫克，0.01毫摩爾)在DMF(1毫升)中的混合物除氣，并在100℃下加熱過夜。將混合物倒入水中，并用EtOAc萃取三次。合并的有機萃取液用水(4×)和鹽水洗滌，用MgSO4干燥，再通過短的硅膠柱，用過量EtOAc洗脫。濃縮后，粗產物通過快速層析(15至50％ EtOAc-己烷)純化，得到化合物2f1。
步驟2 使用實施例2B的步驟，將中間體2f1和苯酚1a9(實施例1A)偶合，合成化合物1010(表1)。
實施例3A 化合物1028的制備(表1)
將苯酚1a9(實施例1A)(60毫克，0.18毫摩爾)、化合物3a1(22毫克，0.15毫摩爾)和K2CO3(50毫克，0.36毫摩爾)在DMSO(1毫升)中的混合物在100℃下攪拌20小時。添加嗎啉(0.031毫升，0.36毫摩爾)，并將該混合物在100℃下再攪拌20小時。將該混合物冷卻至50℃，并添加NaOH水溶液(2.5N，0.72毫升，1.8毫摩爾)。1小時后，用TFA將該混合物酸化，并通過制備型HPLC純化，得到化合物1028(表1)。
實施例3B 化合物1007的制備(表1)
步驟1 將苯酚1a9(實施例1A)(200毫克，0.60毫摩爾)和化合物3b1(90毫克，0.72毫摩爾)在DMSO(2毫升)中混合。添加無水K2CO3(200毫克，1.5毫摩爾)，并將該混合物在100℃下攪拌1小時。再添加化合物3b1(50毫克，0.4毫摩爾)，并在100℃下繼續(xù)攪拌45分鐘。將該混合物冷卻至環(huán)境溫度，用EtOAc稀釋，并用水(×2)和鹽水(×2)洗滌。有機相用NaCl和Na2SO4干燥，過濾，并真空濃縮。通過快速層析(2:3 EtOAc/己烷)純化，得到中間體3b2。
步驟2 向醛3b2(160毫克，0.36毫摩爾)、DeoxofluorTM(0.12毫升，0.65毫摩爾)和無水DCM(1毫升)的混合物中添加無水MeOH(3微升，0.07毫摩爾，0.2當量)，并將該混合物在環(huán)境溫度下攪拌30小時。用DCM稀釋混合物，并用飽和NaHCO3水溶液小心地洗滌。有機層用NaCl/Na2SO4干燥，過濾，并真空濃縮。殘余物通過快速層析(2:3 EtOAc/己烷)純化，并將部分經(jīng)純化的殘余物(60毫克，0.1毫摩爾)在DMSO(1毫升)中與NaOH水溶液(2.5M，0.28毫升，0.7毫摩爾)混合。將該混合物在環(huán)境溫度下攪拌1小時，接著用水(5毫升)稀釋，并添加至快速攪拌的1N HCl水溶液(100毫升)中。得到的固體通過用45微米過濾薄膜抽濾來收集，并真空干燥，得到抑制劑1007(表1)。
實施例3C 化合物1029的制備(表1)
步驟1 向化合物3c1(38毫克，0.16毫摩爾)和無水DMSO(1毫升)的混合物中依次添加K2CO3(55毫克，0.4毫摩爾)和苯酚1a9(實施例1A)(53毫克，0.16毫摩爾)。將反應混合物在55℃下攪拌1小時15分鐘，并接著在70℃下攪拌16小時。將反應混合物倒入水中，并用EtOAc(3×)萃取。合并的有機萃取液依序用水(4×)和鹽水洗滌，用MgSO4干燥，過濾并濃縮，得到中間體3c2。
步驟2 將化合物3c2(83毫克，0.15毫摩爾)和10％鈀/碳(25毫克)在EtOAc(4毫升)中的混合物在環(huán)境溫度下并在1atm H2中攪拌過夜。過濾混合物，并濃縮，得到化合物3c3。
步驟3 向二苯胺3c3(39毫克，0.08毫摩爾)和DMF(1毫升)的混合物中依次添加DIPEA(0.040毫升，0.23毫摩爾)、2-甲氧基乙酸(0.006毫升，0.08毫摩爾)和HATU(35毫克，0.09毫摩爾)。將混合物在環(huán)境溫度下攪拌過夜，接著用EtOAc稀釋，并依次用10％檸檬酸水溶液、水、飽和NaHCO3水溶液、水和鹽水洗滌。有機相用MgSO4干燥，過濾并濃縮，得到中間體3c4。
步驟4 將化合物3c4(45毫克，0.08毫升)、甲醇(1毫升)和4N HCl/二噁烷(1毫升)的混合物在75℃下加熱1小時。濃縮混合物，并將殘余物溶于DMSO中。添加NaOH水溶液(5N，0.16毫升，0.78毫摩爾)，并將該混合物在55℃下攪拌30分鐘，接著添加AcOH(300微升)?；旌衔锿ㄟ^制備型HPCL純化，分離化合物1029(表1)。
實施例3D 化合物1035的制備(表1)
步驟1 向化合物3d1(508毫克，2.3毫摩爾)和無水DMSO(3毫升)的混合物中依次添加CH3NH2·HCl(305毫克，4.5毫摩爾)和Et3N(0.79毫升，5.6毫摩爾)。將反應混合物在環(huán)境溫度下攪拌3.5小時，并接著在70℃下攪拌過夜。將混合物倒入水中，并用EtOAc(3×)萃取。合并的有機層用水(4×)和鹽水洗滌，用MgSO4干燥，過濾并濃縮。通過快速層析(2％ EtOAc-己烷)純化，得到化合物3d2。
步驟2 將溴(0.012毫升，0.24毫摩爾)添加至苯胺3d2(53毫克，0.24毫摩爾)和冰醋酸(0.5毫升)的混合物中。將該混合物加熱至70℃，并攪拌5小時。添加過量Br2(5微升，0.1毫摩爾)，并在70℃下繼續(xù)攪拌1小時。濃縮混合物，得到化合物3d3。
步驟3 向化合物3d3(72毫克，0.24毫摩爾)和無水MeOH的混合物中添加SnCl2·2H2O(540毫克，2.4毫摩爾)，并將該混合物在回流下加熱3小時，接著濃縮。將殘余物溶于EtOAc中，并倒入飽和NH4Cl水溶液中。水層用EtOAc萃取兩次以上，并將合并的有機萃取液通過短的CeliteTM柱過濾。有機相用水和鹽水洗滌，用MgSO4干燥，過濾并濃縮，得到化合物3d4。
步驟4 向化合物3d4(60毫克，0.22毫摩爾)和DMF(1毫升)的混合物中依次添加DIPEA(0.12毫升，0.67毫摩爾)、2-甲氧基乙酸(0.021毫升，0.27毫摩爾)和HATU(100毫克，0.27毫摩爾)。將反應混合物在環(huán)境溫度下攪拌6小時，接著用EtOAc稀釋，并依次用10％檸檬酸水溶液、水、飽和NaHCO3水溶液、水和鹽水洗滌。有機相用MgSO4干燥，過濾并濃縮，得到化合物3d5。
步驟5 將化合物3d5(76毫克，0.22毫摩爾)和冰醋酸(2毫升)的混合物在

軌道式振搖器(設定為250rpm)上并在60℃下加熱6小時。濃縮混合物，殘余物通過快速層析(1:1至2:1 EtOAc/Hex)純化，得到苯并咪唑3d6。
步驟6 下列步驟采自Elizabeth Buck，E.；Song，Z.J.Organic Syntheses 82，2005，69。
在經(jīng)N2除氣的螺栓蓋反應容器中，將溴苯并咪唑3d6(41毫克，0.13毫摩爾)、苯酚1a9(實施例1A)(42毫克，0.13毫摩爾)、CuCl(3毫克，0.03毫摩爾)、Cs2CO3(83毫克，0.25毫摩爾)和2，2，6，6-四甲基庚烷-3，5-二酮(0.003毫升，0.01毫摩爾)在無水NMP(1毫升)中的混合物在

軌道式振搖器(270rpm)上并在120℃下?lián)u動合計20小時。用AcOH將該混合物酸化，并通過制備型HPLC純化，得到化合物1035(表1)。
實施例3E 化合物1036的制備(表1)
步驟1 向化合物3e1(100毫克，0.45毫摩爾)和無水DMF(2毫升)的混合物中依次添加Cs2CO3(218毫克，0.67毫摩爾)和CH3I(0.042毫升，0.67毫摩爾)。將混合物在環(huán)境溫度下攪拌1小時，倒入水中，并用EtOAc萃取。有機萃取液用水(4×)和鹽水洗滌，用MgSO4干燥，過濾并濃縮，得到化合物3e2。
步驟2 使用實施例3D、步驟3-6的步驟，將化合物3e2轉化成化合物1036(表1)。
實施例4A 化合物2010的制備(表2)
向化合物2011(實施例2D)(40毫克，0.07毫摩爾)和無水DMF(2毫升)的混合物中添加Zn(CN)2(16毫克，0.14毫摩爾)和Pd(PPh3)4(8.1毫克，0.01毫摩爾)。用Ar將該混合物除氣，并在110℃下攪拌過夜。用TFA將該混合物酸化，并通過制備型HPLC純化，分離化合物2010(表2)。
實施例4B 化合物2003的制備(表2)
將消旋的BINAP(7.5毫克，0.012毫摩爾)和Pd(OAc)2(2.7毫克，0.012毫摩爾)的混合物在無水甲苯(1.5毫升)中超聲10分鐘。將該混合物與化合物2d4(實施例2D)(75毫克，0.12毫摩爾)、嗎啉(13.9毫克，0.16毫摩爾)和Cs2CO3(0.20克，0.62毫摩爾)在無水甲苯(2毫升)中的混合物混合，并將所得的混合物在105℃下攪拌3.5小時。將該混合物冷卻至環(huán)境溫度，用EtOAc稀釋，用水、飽和NaHCO3水溶液和鹽水洗滌，干燥(MgSO4)并過濾。減壓濃縮濾液，將殘余物與THF(3.0毫升)、MeOH(1.5毫升)和H2O(0.5毫升)混合。在0℃下添加LiOH水溶液(5N，0.40毫升，2.0毫摩爾)，并將該混合物在環(huán)境溫度下攪拌過夜。用TFA將該混合物酸化，并通過制備型HPLC純化，得到化合物2003(表2)。
實施例4C 化合物2069的制備(表2)
步驟1 下列步驟采自參考文獻Takagi，K.Chem.Lett.1985，1307。
向碘芳烴(iodoarene)2d4(實施例2D)(270毫克，0.45毫摩爾)在無水DMF(2毫升)中的混合物中添加硫脲(54毫克，0.71毫摩爾)、NiBr2(11毫克，0.05毫摩爾)和NaBH3CN(4.5毫克，0.07毫摩爾)。將該混合物于微波中加熱至120℃，持續(xù)15分鐘，冷卻至環(huán)境溫度，并用DMF(3毫升)稀釋。緩慢添加NaOH水溶液(0.5N，3毫升)，并將該混合物劇烈攪拌15分鐘，并分配在1N HCl水溶液和EtOAc中。有機相用水和鹽水洗滌，用MgSO4干燥，過濾，并減壓濃縮，得到化合物4c1。
步驟2 將化合物4c1(205毫克，0.4毫摩爾)、DBU(0.090毫升，0.6毫摩爾)和MeI(0.038毫升，0.6毫摩爾)在MeCN(4毫升)中的混合物在環(huán)境溫度下攪拌過夜。將該混合物用EtOAc(50毫升)稀釋，并用1N HCl水溶液、水、1NNaOH水溶液、水、硫代硫酸鹽水溶液和鹽水洗滌。有機相用MgSO4干燥，過濾，并減壓濃縮，得到化合物4c2。
步驟3 將LiOH水溶液(5N，0.18毫升，0.9毫摩爾)添加至甲硫醚4c2(95毫克，0.18毫摩爾)在THF(4毫升)、MeOH(2毫升)和水(0.1毫升)中的混合物中。將混合物在環(huán)境溫度下攪拌4小時，接著加熱至50℃，持續(xù)5小時，冷卻至環(huán)境溫度?；旌衔镉?N HCl酸化，用EtOAc稀釋，并用水和鹽水洗滌。有機相用MgSO4干燥，過濾，并減壓濃縮。將殘余物溶于丙酮和水(5:2，7毫升)的混合物中，添加OxoneTM(572毫克，0.93毫摩爾)，并將該混合物在環(huán)境溫度下攪拌2.5天?；旌衔镌儆肊tOAc和乙醚(3:2)稀釋，并用1N HCl水溶液、水和鹽水洗滌。有機相用MgSO4干燥，過濾，并減壓濃縮。將殘余物溶于DMSO中，并通過制備型HPLC純化，得到化合物2069(表2)。
實施例5A 化合物2002的制備(表2)
向化合物2011(實施例2D)(110毫克，0.19毫摩爾)在無水DMF(3毫升)中的混合物中添加1-乙氧基乙烯基三正丁基鋰(0.085毫升，0.25毫摩爾)和雙(三-叔丁基膦)鈀(O)(9.7毫克，0.02毫摩爾)。用Ar將該混合物除氣，并在100℃下攪拌45分鐘。將該混合物冷卻至環(huán)境溫度，添加MeCN(4毫升)和1N HCl(4毫升)，并在環(huán)境溫度下繼續(xù)攪拌15分鐘。減壓濃縮混合物，并向所得的殘余物中添加DMSO(4毫升)。過濾混合物，并通過制備型HPLC純化，分離出化合物2002(表2)。
實施例5B 化合物2004的制備(表2)
步驟1 利用實施例5A中所述的步驟，從化合物2d4(實施例2D)制備中間體5b1。
步驟2 將NaBH4(9.1毫克，0.24毫摩爾)緩慢添加于化合物5b1(50毫克，0.10毫摩爾)和MeOH(6毫升)的混合物中，并將該混合物在環(huán)境溫度下攪拌過夜。混合物用EtOAc稀釋，并用1N HCl、水、飽和NaHCO3水溶液和鹽水洗滌，用MgSO4干燥，過濾，并減壓濃縮。殘余物與THF(2毫升)、MeOH(1毫升)和水(0.5毫升)混合，添加LiOH水溶液(5N，0.20毫升，1.0毫摩爾)。將混合物在環(huán)境溫度下攪拌過夜，接著用TFA酸化，并濃縮。向殘余物中添加DMSO(2毫升)，混合物通過制備型HPLC純化，得到化合物2004(表2)。
實施例5C 化合物2154的制備(表2)
將化合物5b1(實施例5B)(48毫克，0.09毫摩爾)、NaBH4(5.3毫克，0.14毫摩爾)、AcOH(0.050毫升，0.88毫摩爾)和嗎啉(0.010毫升，0.11毫摩爾)在EtOH(1毫升)中的混合物在60℃下加熱20小時。添加過量的NaBH4(2毫克，0.05毫摩爾)和嗎啉(0.017毫升，0.18毫摩爾)，并在下60℃再繼續(xù)攪拌20小時。添加NaOH水溶液(2.5N，0.60毫升，1.5毫摩爾)，并將該混合物在50℃下攪拌1小時。用AcOH酸化后，混合物通過制備型HPLC純化，分離出化合物2154(表2)。
實施例6A 化合物2103的制備(表2)
步驟1 該步驟采用下列文獻中所述的方法Hennessy，E.J.；Buchwald，S.L.Org.Lett.2002，4，269。
用Ar將化合物2d4(實施例2D)(2.0克，3.3毫摩爾)、丙二酸二芐酯(2.5克，9.9毫摩爾)、CuI(76毫克，0.4毫摩爾)、2-苯基苯酚(68毫克，0.4毫摩爾)、Cs2CO3(4.1克，12.5毫摩爾)在無水THF(30毫升)中的混合物除氣15分鐘，接著在70℃下攪拌16小時。添加過量CuI(76毫克，0.4毫摩爾)和2-苯基苯酚(68毫克，0.4毫摩爾)，并將該混合物在70℃下再繼續(xù)攪拌20小時?；旌衔镉肊tOAc稀釋，用飽和NH4Cl水溶液和鹽水洗滌，并濃縮。將殘余物溶于EtOH(20毫升)中，并添加10％ Pd/C(0.4克)。將混合物在1atmH2中并在環(huán)境溫度下攪拌2小時，通過CeliteTM過濾。將濾液在80℃下攪拌1小時，冷卻至環(huán)境溫度，并減壓濃縮。殘余物通過快速層析(1:1EtOAc/Hex)純化，得到化合物6a1。
步驟2 向化合物6a1(900毫克，1.7毫摩爾)在CH2Cl2(24毫升)中的混合物中添加草酰氯(0.21毫升，2.4毫摩爾)和DMF(0.060毫升，0.8毫摩爾)，并將該混合物在室溫下攪拌1小時。濃縮混合物，將殘余物溶于CH2Cl2(30毫升)中。在攪拌下滴加CH2N2(0.35M的Et2O溶液，46毫升，16毫摩爾)，并繼續(xù)攪拌30分鐘。減壓濃縮混合物，將殘余物溶于THF(24毫升)中。添加48％HBr水溶液(1.8毫升，16毫摩爾)，并將該混合物攪拌20分鐘。減壓濃縮混合物，并用EtOAc稀釋。有機相用水、飽和NaHCO3水溶液和鹽水洗滌，用MgSO4干燥，過濾，并減壓濃縮，得到化合物6a2。
步驟3 將溴酮6a2(60毫克，0.1毫摩爾)和硫代乙酰胺(14毫克，0.19毫摩爾)的i-PrOH混合物在70℃下攪拌1小時。將該混合物冷卻至環(huán)境溫度，并添加NaOH(2.5N，0.18毫升，0.44毫摩爾)。將混合物在40℃下攪拌5小時，接著用水稀釋，并用HCl酸化。過濾收集固體，且用過量水洗滌，接著溶于DMSO中，并通過制備型HPLC純化，得到化合物2103(表2)。
實施例7A 中間體7a5的制備
步驟1 向化合物2d4(實施例2D)(40克，66.2毫摩爾)在無水THF(280毫升)中的混合物中添加乙烯基三丁基錫(23毫升，25克，78.8毫摩爾)和PdCl2(PPh3)2(4.8克，6.8毫摩爾)。用Ar將該混合物除氣5分鐘，接著在回流下加熱4-6小時。減壓移除溶劑，殘余物通過快速層析(從19:1至3:2己烷/EtOAc的梯度溶液)純化，得到中間體7a1。
步驟2 向烯烴7a1(40.3克，79.9毫摩爾)在丙酮(710毫升)中的溶液中添加叔丁醇(176毫升)、水(88毫升)、4-N-甲基嗎啉氧化物單水合物(60％的水溶液，21毫升，120毫摩爾)和OsO4(2.5wt％，于t-BuOH中，13.3毫升，1.06毫摩爾)。將混合物在環(huán)境溫度下攪拌過夜，接著濃縮，并溶于EtOAc(4升)中。有機相用2M HCl(2×1升)、水、飽和NaHCO3水溶液(1升)和鹽水洗滌。向有機相中添加活性碳和Na2SO4，并將該混合物攪拌10分鐘?；旌衔锿ㄟ^CeliteTM墊過濾，再濃縮，得到中間體7a2。
步驟3 將高碘酸鈉(25克，116.9毫摩爾)添加至二醇7a2(40.6克，75.4毫摩爾)在THF(710毫升)和水(270毫升)中的冰冷(0℃)混合物中。將混合物在0℃下靜置5分鐘，接著在室溫下繼續(xù)攪拌4小時。再添加高碘酸鈉(3.3克，15.4毫摩爾，0.2當量)，并繼續(xù)攪拌2小時?；旌衔镉靡颐?EtOAc(1.8升/3.6升)稀釋，接著用水和鹽水洗滌，用Na2SO4干燥，過濾，并減壓濃縮。殘余物通過快速層析純化，得到中間體7a3。
步驟4 將硼氫化鈉(4.4克，116毫摩爾，2當量)緩慢添加至醛7a3(30.7克，60.6毫摩爾)和MeOH(300毫升)的混合物中。將混合物在環(huán)境溫度下攪拌2小時，接著用EtOAc稀釋，并用1N HCl、飽和NaHCO3水溶液和鹽水小心地洗滌。有機相用Na2SO4干燥，過濾，并減壓濃縮，得到中間體7a4。
步驟5 將亞硫酰氯(5.5毫升，8.1毫摩爾)緩慢添加至醇7a4(19克，37.4毫摩爾)、無水CH2Cl2(450毫升)和DMF(9毫升)的混合物中。將混合物在環(huán)境溫度下攪拌30分鐘，接著用EtOAc(1.5升)稀釋，并用飽和NaHCO3水溶液和鹽水洗滌。有機相用Na2SO4干燥，過濾并濃縮，得到中間體7a5。
實施例8A 化合物2005的制備(表2)
將重氮甲烷的乙醚溶液(4毫升)緩慢添加至烯烴7a1(實施例7A)(26毫克，0.05毫摩爾)于乙醚(2毫升)中的冰冷(0℃)混合物中。添加Pd(OAc)2(2毫克，0.01毫摩爾)，并將該混合物在環(huán)境溫度下攪拌1.5小時。減壓濃縮混合物，并向殘余物中添加THF(2毫升)、MeOH(1毫升)和水(0.2毫升)，接著添加LiOH水溶液(5N，0.6毫升，3.0毫摩爾)。將混合物在環(huán)境溫度下攪拌2.5天。添加DMSO(1.5毫升)和過量LiOH水溶液(5N，0.3毫升，1.5毫摩爾)，并在環(huán)境溫度下繼續(xù)攪拌過夜。用TFA將該混合物酸化，并減壓濃縮。殘余物通過制備型HPLC純化，分離出化合物2005(表2)。
實施例8B 化合物2007的制備(表2)
向烯烴7a1(實施例7A)(23毫克，0.05毫摩爾)在MeOH(2毫升)和EtOAc(4毫升)中的混合物中添加10％鈀/碳(2毫克)。將混合物在H2(約1atm)中攪拌2.5天，接著過濾，并濃縮至干。將殘余物溶于THF(2毫升)、MeOH(1毫升)和水(0.2毫升)中。添加LiOH水溶液(5N，0.4毫升，2.0毫摩爾)，并將該混合物在環(huán)境溫度下攪拌過夜。添加DMSO(1.0毫升)和過量LiOH水溶液(5N，0.2毫升，1.0毫摩爾)，并在50℃下繼續(xù)攪拌3小時。用TFA將該混合物酸化，并減壓濃縮。殘余物通過制備型HPLC純化，分離出化合物2007(表2)。
實施例9A 化合物2120的制備(表2)
將醛7a3(實施例7A)(50毫克，0.1毫摩爾)和2-氨基吡嗪(38毫克，0.4毫摩爾)在AcOH(0.5毫升)中的混合物在80℃下攪拌2小時。將該混合物冷卻至環(huán)境溫度，添加NaCNBH3(7.9毫克，0.13毫摩爾)，并將該混合物攪拌15分鐘，接著在N2流中濃縮。向殘余物中添加NaOH水溶液(2.5N，0.60毫升，1.5毫摩爾)，并將該混合物在50℃下攪拌2小時，接著通過制備型HPLC純化，分離出化合物2120(表2)。
實施例10A 化合物2026的制備(表2)
將中間體7a5(實施例7A)(25毫克，0.05毫摩爾)、吲哚(8.2毫克，0.07毫摩爾)、Cs2CO3(23毫克，0.07毫摩爾)和KI(3毫克，0.02毫摩爾)在DMF(1毫升)中的混合物在

軌道式振搖器(250rpm)上，在70℃下振動過夜。添加DMSO(0.5毫升)，接著添加LiOH水溶液(5N，0.10毫升，0.5毫摩爾)，并將混合物在55℃下攪拌1小時。用AcOH將該混合物酸化，接著通過制備型HPLC純化，分離出化合物2026(表2)。
實施例10B 化合物2047和2057的制備(表2)
步驟1 將化合物7a5(實施例7A)(25毫克，0.05毫摩爾)、3-吡咯烷酮(0.006毫升，0.07毫摩爾)和Et3N(0.010毫升，0.07毫摩爾)在THF(1毫升)中的混合物在

軌道式振搖器(250rpm)上在70℃下振動過夜。在N2流中濃縮混合物，接著溶于DMSO(0.5毫升)中。添加NaOH水溶液(5N，0.10毫升，0.5毫摩爾)，并將該混合物在55℃下攪拌1小時。用AcOH將該混合物酸化，并通過制備型HPLC純化，分離出化合物2047(表2)。
步驟2 將化合物2047(12毫克，0.02毫摩爾)和Dess-Martin高碘烷(periodinane)(7.6毫克，0.02毫摩爾)在DCM/CH3CN(1:1，1毫升)中的混合物在環(huán)境溫度下攪拌20小時。再添加Dess-Martin高碘烷(7.6毫克，0.02毫摩爾)，并繼續(xù)攪拌20小時。減壓濃縮混合物，殘余物通過制備型HPLC純化，得到化合物2057(表2)。
實施例10C 化合物2163的制備(表2)
步驟1 將化合物7a5(實施例7A)(9.5克，18.5毫摩爾)、NaN3(2.16克，33.4毫摩爾)和60％(v/v)丙酮-水(90毫升)的混合物在Ar中并在回流下攪拌過夜。減壓濃縮混合物，并用EtOAc(1升)萃取殘余物，并用水(4×)洗滌。有機相用MgSO4干燥，過濾，并減壓濃縮，得到化合物10c1。
步驟2 將氬氣通入化合物10c1(9.68克，18.14毫摩爾)在甲醇(100毫升)中的混合物中鼓泡10分鐘，并在Ar下將混合物添加至Pd/C(10％，1克)中。將H2通入攪拌的混合物中鼓泡2.5小時。混合物通過CeliteTM過濾，并用MeOH洗滌。濾液濃縮至干，殘余物通過快速柱層析(SiO2，MeOH/DCM5/95)純化，分離出游離胺。將胺和2M HCl的Et2O溶液(30毫升)的混合物在室溫下攪拌1小時。過濾收集鹽酸鹽10c2，用乙醚洗滌，并空氣干燥。
步驟3 向化合物10c2(25毫克，0.049毫摩爾)和DMF(0.50毫升)的混合物中添加環(huán)丙烷磺酰氯(6.3微升，0.058毫摩爾)和Et3N(16.9微升，0.121毫摩爾)。將混合物在軌道式振搖器(350rpm)上并在室溫下振動過夜。添加NaOH(5N，100微升，0.50毫摩爾)，將混合物在50℃下加熱1小時，接著用AcOH酸化，并通過制備型HPLC純化，得到化合物2153(表2)。
實施例10D 化合物2159的制備(表2)
向化合物10c2(實施例10C)(25毫克，0.046毫摩爾，1當量)在DMF(0.5毫升)中的混合物中添加(CH3)2CH-NCO(1.3當量)。將混合物在室溫下攪拌，通過HPLC分析反應完全為止。添加5N NaOH(0.1毫升，10當量)，并將該混合物加熱至50℃，持續(xù)1小時，接著用AcOH酸化。通過反相HPLC純化，得到化合物2159(表2)。
實施例10E 化合物2161的制備(表2)
向化合物10c2(實施例10C)(25毫克，0.046毫摩爾，1當量)在THF(0.5毫升)中的混合物中添加DIEA(12微升，1.5當量)，接著添加氯甲酸乙酯(5.3微升，1.2當量)。將混合物在室溫下攪拌過夜，接著減壓濃縮。將殘余物與DMSO(0.5毫升)混合，添加5N NaOH(0.1毫升，11當量)，并將該混合物在50℃下加熱45分鐘。使用AcOH將該混合物酸化，并通過反相HPLC純化，得到化合物2161(表2)。
實施例10F 化合物2188的制備(表2)
向化合物10c2(實施例10C)(50毫克，0.091毫摩爾)和DCM(1毫升)的混合物中添加氯甲酸乙酯(12微升，0.126毫摩爾)，接著添加Et3N(40微升，0.287毫摩爾)。將反應混合物在室溫下攪拌過夜，在氬氣流中濃縮，將殘余物與DMF(1毫升)混合。將一半的混合物添加至含NaH(60％油分散液，6毫克，3.3當量)的小瓶中，并將該混合物在室溫下攪拌5分鐘。添加碘甲烷(10微升，3.5當量)，并在室溫繼續(xù)攪拌5小時。添加5N NaOH(10當量)，并將該混合物在室溫再攪拌14小時，并通過制備型HPLC純化，得到化合物2188(表2)。
實施例11A 化合物2039的制備(表2)
將中間體7a5(實施例7A)(25毫克，0.05毫升)、2-巰基咪唑(7.0毫克，0.07毫摩爾)、Cs2CO3(23毫克，0.07毫摩爾)和DMF(1毫升)的混合物在

軌道式振搖器(250rpm)上并在70℃下振動過夜。添加DMSO(0.5毫升)，接著添加NaOH水溶液(5N，0.10毫升，0.5毫摩爾)，并將該混合物在55℃下攪拌1小時。用AcOH將該混合物酸化，接著通過制備型HPLC純化，分離出化合物2039(表2)。
實施例11B 化合物2071的制備(表2)
步驟1 將中間體7a5(實施例7A)(55毫克，0.1毫摩爾)、KI(3毫克，0.02毫摩爾)、NaSMe(11毫克，0.16毫摩爾)和Et3N(0.031毫升，0.23毫摩爾)在無水DMF(1.5毫升)中的混合物在70℃攪拌1.5小時，接著冷卻至環(huán)境溫度。混合物用EtOAc稀釋，并用1N HCl水溶液、水、飽和NaHCO3水溶液和鹽水洗，用MgSO4干燥，過濾，并在減壓下濃縮，得到化合物11b1。
步驟2 將OxoneTM(298毫克，0.49毫摩爾)加入化合物11b1(52毫克，0.1毫摩爾)在乙腈/水(3:1；8毫升)中的混合物中。將該混合物在環(huán)境溫度下攪拌2小時，接著用EtOAc稀釋，并用水和鹽水洗滌。有機相用MgSO4干燥，過濾，并在減壓下濃縮。將殘余物溶于DMSO(2毫升)、MeOH(1毫升)和水(0.2毫升)的混合物中。添加LiOH水溶液(5N，0.20毫升，1.0毫摩爾)，混合物在環(huán)境溫度下攪拌過夜，接著在50℃下攪拌4小時。將該混合物冷卻至環(huán)境溫度，再用TFA酸化，濃縮，并通過制備型HPLC純化，分離出化合物2071(表2)。
實施例12A 化合物2084的制備(表2)
步驟1 在微波中將化合物7a5(實施例7A)(30毫克，0.06毫摩爾)、FeCl3(9.7毫克，0.06毫摩爾)和苯甲醚(6.1毫克，0.06毫摩爾)在CH2Cl2(2毫升)中的混合物在100℃下加熱15分鐘。濃縮混合物，接著溶于DMSO中，并通過制備型HPLC純化，分離出中間體12a1。
步驟2 將化合物12a1(6毫克，0.01毫摩爾)、化合物1a7(實施例1A)(13毫克，0.08毫摩爾)和吡啶(0.3毫升)的混合物在微波中加熱至180℃，持續(xù)12分鐘?；旌衔锿ㄟ^制備型HPLC純化，分離出化合物2084(表2)。
實施例13A 化合物2056的制備(表2)
步驟1 使用的步驟采自Abdel-Magid，A.F.；Carson，K.G.；Harris，B.D.；Maryanoff，C.A.；Shah，R.D.J.Org.Chem.1996，61，3849。向化合物13a1(10.0克，36毫摩爾)和CH2Cl2(212毫升)的混合物中添加2-甲氧基丙烯(13.8毫升，144毫摩爾)，接著添加NaBH(OAc)3(15.3克，72毫摩爾)和AcOH(8.2毫升，144毫摩爾)。將混合物在環(huán)境溫度下攪拌過夜，接著用EtOAc稀釋，并用NaHCO3和鹽水洗滌。有機相用MgSO4干燥，過濾，并減壓濃縮。殘余物進行快速層析(1:9 EtOAc/Hex)，分離出化合物13a2。
步驟2 向化合物13a2(10.2克，32毫摩爾)在無水吡啶(160毫升)中的混合物中添加化合物1a7(實施例1A)(11.3克，70毫摩爾)和DMAP(約0.44克)。將混合物在80℃下攪拌2天，接著用EtOAc(250毫升)稀釋，并用1N HCl、水、飽和NaHCO3水溶液和鹽水洗滌。有機相用MgSO4干燥，過濾，并減壓濃縮。粗產物通過快速層析(1:4 EtOAc/Hex)純化，得到酰胺13a3。
步驟3 所用的步驟采自Takagi，K.Chem.Lett.(1985)，141307。在微波中將化合物13a3(100毫克，0.23毫摩爾)、NiBr2(5.7毫克，0.03毫摩爾)、硫脲(27毫克，0.35毫摩爾)和NaCNBH3(2.2毫克，0.04毫摩爾)在DMF(2毫升)中的混合物在120℃下加熱15分鐘。添加NaOH水溶液(2.5N，2.0毫升，1.0毫摩爾)，并將該混合物攪拌15分鐘。用EtOAc稀釋混合物，并用1N HCl水溶液和鹽水洗滌。有機相用MgSO4干燥，過濾，并減壓濃縮，得到化合物13a4。
步驟4 將化合物13a4(40毫克，0.11毫摩爾)、2-氟-3-三氟甲基吡啶(21毫克，0.13毫摩爾)和K2CO3(55毫克，0.40毫摩爾)在DMSO(1.0毫升)中的混合物在100℃下攪拌20小時。將該混合物冷卻至室溫，并添加NaOH(2.5N，300微升，0.75毫摩爾)。將混合物在40℃下攪拌1小時，用AcOH酸化，并通過制備型HPLC純化，得到化合物2056(表2)。
實施例14A 化合物1004的制備(表1)
參考文獻Tanaka，K.；Suzuki，T.；Maeno，S.；Mitsuhashi，K.J.Heterocycl.Chem.1986，23，1537。
步驟1 將化合物14a1(500毫克，4.62毫摩爾)和1-乙氧基-2，2，2-三氟乙醇(667毫克，4.63毫摩爾)的混合物在80℃下加熱2小時，接著冷卻，并用Et2O稀釋。用1N HCl、水和鹽水洗滌混合物，將有機萃取液干燥(MgSO4)、過濾并濃縮，得到化合物14a2。
步驟2 將乙二醛水溶液(40％，2.0克，13.8毫摩爾)和n-BuOAc(10毫升)的混合物用MgSO4干燥并過濾。向濾液中添加化合物14a2(853毫克，4.5毫摩爾)、AcOH(50微升)和MgSO4(462毫克，3.8毫摩爾)，并將該混合物在120℃下加熱6小時。再添加乙二醛(通過用EtOAc萃取乙二醛水溶液(40％，27克，186毫摩爾)，用MgSO4干燥EtOAc萃取液，添加n-BuOAc(10毫升)，并減壓濃縮該溶液而制備)，并在120℃下再繼續(xù)加熱3.5小時。過濾混合物，并濃縮，將殘余物與1N NaOH混合，并用CH2Cl2洗滌。水相用濃HCl酸化成pH 2，并用CH2Cl2萃取三次。合并的有機萃取液用水和鹽水洗滌，干燥(MgSO4)、過濾并濃縮。殘余物通過快速層析純化，得到化合物14a3。
步驟3 在N2氣下，將化合物13a3(實施例13A)(39毫克，0.088毫摩爾)、化合物14a3(20毫克，0.088毫摩爾)、Cs2CO3(57毫克，0.18毫摩爾)、2，2，6，6-四甲基庚烷-3，5-二酮(2.0微升，0.01毫摩爾)和CuCl(4.4毫克，0.044毫摩爾)在NMP(1.0毫升)中的混合物在

軌道式振搖器(275rpm)上并在120℃加熱7小時。添加NaOH水溶液(5N，176微升，0.88毫摩爾)，并將該混合物在50℃下加熱30分鐘。添加AcOH至總體積為1.5毫升，并過濾混合物，并通過制備型HPLC純化，得到化合物1004(表1)。
實施例15A 化合物2196的制備(表2)
步驟1 將羧酸15a1(5.0克，27毫摩爾)和濃H2SO4(4毫升)在MeOH(80毫升)中的混合物在回流下攪拌12小時。減壓濃縮混合物，并倒入冰和飽和NaHCO3水溶液的混合物中。水性混合物用檸檬酸酸化，并用EtOAc萃取兩次。合并的有機萃取液用水和鹽水洗滌，用MgSO4干燥，過濾，并減壓濃縮。通過快速層析(3:7 EtOAc/己烷)純化，得到酯15a2。
步驟2 在氬氣下并在室溫下，將化合物15a2(10克，51毫摩爾)、2-氟-3-三氟甲基吡啶(10克，61毫摩爾)和K2CO3(8.4克，61毫摩爾)在無水DMSO(150毫升)中混合。將混合物在100℃下攪拌過夜，冷卻至室溫，并用EtOAc(3升)稀釋。有機相用飽和NH4Cl溶液和鹽水洗滌，用MgSO4干燥，過濾，并減壓濃縮。向殘余物中添加Et2O和己烷，得到化合物15a3；濃縮濾液，殘余物通過快速層析純化，又得到了化合物15a3。
步驟3 將化合物15a3(12.5克，37毫摩爾)、MeOH(600毫升)和Pd/C(1.4克)的混合物在室溫下和在H2(1atm)中攪拌3.5小時?；旌衔锿ㄟ^CeliteTM過濾，并用MeOH洗滌。濃縮濾液，殘余物通過快速層析(梯度1/4至2/3 EtOAc/己烷)純化。將所得的游離苯胺與CH2Cl2(250毫升)的混合物冷卻至0℃，并添加2M HCl的Et2O溶液(50毫升)。將混合物在室溫下攪拌1小時，并過濾收集鹽酸鹽15a4，用Et2O洗滌，并空氣干燥。
步驟4 向化合物15a4(2.1克，5.9毫摩爾)和2-甲氧基丙烯(2.3毫升，24毫摩爾)在CH2Cl2中的混合物中滴加NaBH(OAc)3(2.5克，12毫摩爾)。將混合物在環(huán)境溫度下攪拌30分鐘，接著用EtOAc稀釋，并用飽和NaHCO3水溶液和鹽水洗滌。有機相用MgSO4干燥，過濾，并減壓濃縮。將殘余物在己烷/乙醚中研制，接著過濾，洗滌(己烷)并干燥，得到化合物15a5。
步驟5 將草酰氯(2M的DCM溶液，0.16毫升，0.32毫摩爾)緩慢添加至4-氯-3-甲基苯甲酸(27毫克，0.16毫摩爾)在DCM(1毫升)中的混合物中。添加DMF(1滴)，將混合物在環(huán)境溫度下攪拌30分鐘，并減壓濃縮。將殘余物與吡啶(0.5毫升)混合，添加化合物15a5(30毫克，0.08毫摩爾)，并將該混合物在60℃下攪拌過夜。添加NaOH水溶液(10N，0.096毫升，0.96毫摩爾)和水(0.2毫升)，并將該混合物在環(huán)境溫度下攪拌過夜，接著用EtOAc稀釋，并用1N HCl和鹽水洗滌。有機相用MgSO4干燥，過濾，并減壓濃縮。通過制備型HPLC純化，得到化合物2196(表2)。
實施例16A 化合物2124的制備(表2)
步驟1 將化合物15a4(實施例15A)(2.0克，5.8毫摩爾)、溴乙酸叔丁酯(4.3毫升，29毫摩爾)和DIPEA(3.0毫升，17毫摩爾)在DMF(20毫升)中的混合物在80℃下攪拌過夜。用EtOAc稀釋混合物，并用0.5N KHSO4水溶液、飽和NaHCO3水溶液和鹽水洗滌。有機相用MgSO4干燥，經(jīng)過濾，并減壓濃縮。殘余物通過快速層析(梯度1:9至1:1 EtOAc/Hex)純化，得到化合物16a1。
步驟2 向16a1(1.6克，3.7毫摩爾)和DMAP(0.45克，3.7毫摩爾)在無水吡啶(20毫升)中的混合物中添加化合物1a7(實施例1A)(0.90克，5.6毫摩爾)。將混合物在70℃下攪拌過夜，接著用EtOAc稀釋，并用1N HCl、飽和NaHCO3水溶液和鹽水洗滌。有機相用MgSO4干燥，過濾，并減壓濃縮。用1:9 EtOAc/Hex研制，得到酰胺16a2。
步驟3 在0℃下，將三氟乙酸(5毫升)緩慢添加至化合物16a2(1.5克，2.8毫摩爾)和DCM(20毫升)的混合物中。將該混合物溫熱至環(huán)境溫度，并攪拌過夜，接著減壓濃縮。將殘余物與DCM混合，并濃縮兩次，接著從水和乙腈中凍干，得到酸16a3。
步驟4 向化合物16a3(25毫克，0.05毫摩爾)和HATU(23毫克，0.06毫摩爾)在DMF(0.5毫升)中的混合物中添加吡咯烷(0.005毫升，0.06毫摩爾)，接著添加Et3N(0.030毫升，0.22毫摩爾)。將混合物在

軌道式振搖器(250rpm)上并在環(huán)境溫度下振動1小時。添加NaOH水溶液(5N，0.10毫升，0.5毫摩爾)，并在環(huán)境溫度下繼續(xù)振動過夜。用AcOH(0.1毫升)將該混合物酸化，用DMSO(1毫升)稀釋，并通過制備型HPLC純化，得到化合物2124(表2)。
實施例16B 化合物2149的制備(表2)
向酸16a3(實施例16A)(50毫克，0.1毫摩爾)在DMF中的混合物中添加HATU(51毫克，0.14毫摩爾)、苯二胺(11毫克，0.11毫摩爾)和Et3N(0.063毫升，0.45毫摩爾)。將混合物在環(huán)境溫度下攪拌過夜，接著用EtOAc稀釋，并用10％檸檬酸水溶液、水、飽和NaHCO3水溶液和鹽水洗滌。有機相用MgSO4干燥，過濾，并減壓濃縮。接著將殘余物與AcOH(1毫升)混合，并在100℃下攪拌1小時。冷卻至環(huán)境溫度后，用EtOAc稀釋混合物，并用飽和NaHCO3水溶液、水和鹽水洗滌。有機相用MgSO4干燥，過濾，并減壓濃縮。將殘余物(55毫克，0.1毫摩爾)與DMSO(2毫升)、MeOH(1毫升)和水(0.15毫升)混合。添加NaOH水溶液(10N，0.097毫升，0.10毫摩爾)，并將該混合物在環(huán)境溫度下攪拌過夜。用TFA將該混合物酸化，并通過制備型HPLC純化，分離出化合物2149(表2)。
實施例17 NS5B RNA依賴的RNA聚合酶活性的抑制 根據(jù)以下所述方案，測試本發(fā)明代表性化合物對C型肝炎病毒RNA依賴性聚合酶(NS5B)的抑制活性。
HCV His-NS5BΔ21聚合酶[SEQ ID NO.1]缺乏C-端21個氨基酸，并用利用基于PET的載體在大腸桿菌(E.coli)菌株JM109(DE3)中表達為帶有N-端六-組氨酸標簽物并且純化，如McKercher等人，(2004)Nucleic Acids Res.32422-431中所述。將均質酶制劑在-20℃下儲存于儲存緩沖液(25mMTris/HCl pH 7.5、300mM NaCl、5mM DTT、1M EDTA和30％(v/v)甘油)中。
將已純化的His-NS5BΔ21聚合酶在測試中重構，該測試測量退火至均聚Poly(A)模板的生物素-寡-(U)12RNA引物延長期間摻入的3H-UTP。首先添加測試化合物，接著添加底物，然后添加酶。反應結束時，添加鏈親和素親近閃爍測試(SPA)珠粒，并在TopCount設備(Packard)定量捕獲的雙鏈RNA的放射活性。
測試反應的成份為20mM Tris-HCl pH 7.5、1mM TCEP、1mM EDTA、5mM MgCl2、0.01％ w/v BSA、5％ v/v DMSO、10μg/mL Poly(A)、1μg/mL生物素-寡-(U)12、333nM UTP、0.01mCi/mL、(300nM)3H-UTP、80單位/毫升Rnasin、12.5nM His-NS5BΔ21聚合酶，以及大的濃度范圍內連續(xù)稀釋的測試抑制劑化合物。該測試按如下進行在384-孔板中在22℃培育1.5小時，接著用0.5M EDTA溶液終止，并用包被鏈親和素的珠粒捕獲產物。接著向各孔底部添加6M CsCl，將該板在室溫下靜置90分鐘，然后在TopCount上計數(shù)60秒。接著使用計算的％抑制值，通過SAS的非線性回歸程序NLIN步驟確定IC50、斜率因子(n)和最大的抑制(Imax)。
實施例18 NS5B RNA依賴性RNA聚合酶抑制的特異性 如McKercher等人，(2004)Nucleic Acids Res.32422-431中所述，測試本發(fā)明代表性化合物對脊髓灰質炎病毒RNA依賴性RNA聚合酶和小牛胸腺DNA依賴性RNA聚合酶II的抑制活性。
實施例19 基于細胞的螢光素酶報道子HCV RNA復制測試 使用WO 2005/028501中所述的測試，在表達穩(wěn)定的亞基因組HCV復制子的細胞中，試驗本發(fā)明的代表性化合物作為C型肝炎病毒RNA復制的抑制劑的活性。
化合物表列 下表列示出了本發(fā)明的代表性化合物。下表1和2中所列的代表性化合物在實施例17的NS5B聚合酶活性抑制測試中進行了測試，并發(fā)現(xiàn)IC50值小于30μM。
各化合物的保留時間(tR)使用實施例中所述的標準分析型HPLC條件測得的。如本領域技術人員所熟知的，保留時間值對穩(wěn)定的測量條件敏感。因此，即使使用相同的溶劑、流速、線性梯度等條件，在例如不同的HPLC設備上測量時的保留時間值也可能不同。即使在相同的設備上測量，當使用例如不同的個別HPLC柱時測量的值也可能不同，或在相同設備上以及相同的個別柱上測量，該值可能因不同時機而在個別測量間有所不同。
表1




表2
























權利要求
1.式(I)化合物，或其鹽或其酯
其中
X選自O和S；
R2為Het，其任選被1至5個R20取代基所取代，其中R20在各種情形下獨立地選自
a)鹵素、氰基或硝基；
b)R7、-C(＝O)-R7、-C(＝O)-O-R7、-O-R7、-S-R7、-SO-R7、-SO2-R7、-(C1-6)亞烷基-R7、-(C1-6)亞烷基-C(＝O)-R7、-(C1-6)亞烷基-C(＝O)-O-R7、-(C1-6)亞烷基-O-R7、-(C1-6)亞烷基-S-R7、-(C1-6)亞烷基-SO-R7或-(C1-6)亞烷基-SO2-R7；
其中R7在各種情形下獨立地選自H、(C1-6)烷基、(C2-6)烯基、(C2-6)炔基、(C1-6)鹵代烷基、(C3-7)環(huán)烷基、芳基和Het；
其中(C1-6)烷基任選被1個或2個獨立地選自-OH、-O-(C1-6)烷基、氰基、COOH、-NH2、-NH(C1-4)烷基、-NH(C3-7)環(huán)烷基、-N((C1-4)烷基)(C3-7)環(huán)烷基和-N((C1-4)烷基)2的取代基所取代；且
其中芳基和Het各自任選被1至3個各自獨立地選自下列的取代基所取代
i)鹵素、氰基、氧代、硫代、亞氨基、-OH、-O-(C1-6)烷基、-O-(C1-6)鹵代烷基、(C3-7)環(huán)烷基、(C1-6)鹵代烷基、-C(＝O)-(C1-6)烷基、-SO2(C1-6)烷基、-C(＝O)-NH2、-C(＝O)-NH(C1-4)烷基、-C(＝O)-N((C1-4)烷基)2、-C(＝O)-NH(C3-7)環(huán)烷基、-C(＝O)-N((C1-4)烷基)(C3-7)環(huán)烷基、-NH2、-NH(C1-4)烷基、-N((C1-4)烷基)2、-NH(C3-7)環(huán)烷基、-N((C1-4)烷基)(C3-7)環(huán)烷基或-NH-C(＝O)(C1-4)烷基；
ii)(C1-6)烷基，其任選被-OH、-O-(C1-6)鹵代烷基或-O-(C1-6)烷基取代；和
iii)芳基或Het，其中芳基和Het各自任選被鹵素或(C1-6)烷基取代；和
c)-N(R8)R9、-C(＝O)-N(R8)R9、-O-C(＝O)-N(R8)R9、-SO2-N(R8)R9、-(C1-6)亞烷基-N(R8)R9、-(C1-6)亞烷基-C(＝O)-N(R8)R9、-(C1-6)亞烷基-O-C(＝O)-N(R8)R9或-(C1-6)亞烷基-SO2-N(R8)R9，其中
R8在各種情形下獨立地選自H、(C1-6)烷基和(C3-7)環(huán)烷基；和
R9在各種情形下獨立地選自R7、-(C1-6)亞烷基-R7、-SO2-R7、-C(＝O)-R7、-C(＝O)OR7和-C(＝O)N(R8)R7；其中R7和R8如上所定義；
R3選自H、鹵素、(C1-4)烷基、-O-(C1-4)烷基、-S-(C1-4)烷基、-NH2、-NH(C1-4)烷基、-NH(C3-7)環(huán)烷基、-N((C1-4)烷基)(C3-7)環(huán)烷基和-N((C1-4)烷基)2；
R5為H、(C1-6)烷基、(C3-7)環(huán)烷基或Het；該(C1-6)烷基和Het各自任選被1至4個各自獨立地選自(C1-6)烷基、Het、-OH、-COOH、-C(＝O)-(C1-6)烷基、-C(＝O)-O-(C1-6)烷基、-SO2(C1-6)烷基和-C(＝O)-N(R51)R52的取代基所取代；
其中R51為H、(C1-6)烷基或(C3-7)環(huán)烷基；且
R52為H、(C1-6)烷基、(C3-7)環(huán)烷基、芳基、Het、芳基-(C1-3)烷基-或Het-(C1-3)烷基-；
其中所述(C1-6)烷基、(C3-7)環(huán)烷基、芳基、Het、芳基-(C1-3)烷基-和Het-(C1-3)烷基-各自任選被1至3個各自獨立地選自(C1-6)烷基、(C1-6)鹵代烷基、鹵素、氧代、-OH、-O(C1-6)烷基、-NH2、-NH(C1-6)烷基、-N((C1-6)烷基)2、-NH(C3-7)環(huán)烷基、-N((C1-4)烷基)(C3-7)環(huán)烷基、-C(＝O)(C1-6)烷基和-NHC(＝O)-(C1-6)烷基的取代基所取代；
其中(C1-6)烷基任選被OH取代；
或R51和R52與其所連接的N一起鍵聯(lián)形成4-至7-元雜環(huán)，其任選還含有1至3個各自獨立地選自N、O和S的雜原子，其中各S雜原子獨立地且若可能可以以氧化態(tài)存在，從而再與1個或2個氧原子鍵結形成基團SO或SO2；
其中該雜環(huán)任選被1至3個各自獨立地選自(C1-6)烷基、(C1-6)鹵代烷基、鹵素、氧代、-OH、-O(C1-6)烷基、-NH2、-NH(C1-6)烷基、-N((C1-6)烷基)2，-NH(C3-7)環(huán)烷基、-N((C1-4)烷基)(C3-7)環(huán)烷基、-C(＝O)(C1-6)烷基和-NHC(＝O)-(C1-6)烷基的取代基所取代；
其中該(C1-6)烷基任選被OH取代；
R6為(C3-7)環(huán)烷基或芳基；
該(C3-7)環(huán)烷基和芳基各自任選被1至5個各自獨立地選自鹵素、(C1-6)烷基、(C1-6)鹵代烷基、(C3-7)環(huán)烷基、-OH、-SH、-O-(C1-4)烷基和-S-(C1-4)烷基的取代基所取代；和
Het為具有1至4個各自獨立地選自O、N和S的雜原子的4-至7-元飽和的、不飽和的或芳香的雜環(huán)，或若可能地具有1至5個各自獨立地選自O、N和S的雜原子的7-至14-元飽和的、不飽和的或芳香的雜多環(huán)；其中各N雜原子獨立地且若可能可以以氧化態(tài)存在，從而再與氧原子鍵結形成N-氧化物，且其中各S雜原子獨立地且若可能可以以氧化態(tài)存在，從而再與1或2個氧原子鍵結形成基團SO或SO2；
條件是當R2選自
和
X為O；R3為H；且R5為H時；
R6不為
或者
2.權利要求1的化合物，其中X為O。
3.權利要求1的化合物，其中X為S。
4.權利要求1至3之一項或多項的化合物，其中R2為Het，其中Het為含有1至3個各自獨立地選自O、N和S的雜原子的5-或6-元雜環(huán)，或含有1至3個各自獨立地選自O、N和S的雜原子的9-或10-元雙環(huán)雜多環(huán)；
其中Het任選被1至5個R20取代基所取代，其中R20如權利要求1所定義。
5.權利要求4的化合物，其中R2為選自下式的Het
和
其中Het任選被1至3個R20取代基所取代，其中R20如權利要求1所定義。
6.權利要求5的化合物，其中R2為下式的Het
其中Het任選被1至3個R20取代基所取代；
其中R20選自
a)鹵素或氰基；
b)R7、-(C1-6)亞烷基-R7、-C(＝O)-R7、-(C1-6)亞烷基-O-R7、-SO2-R7、-(C1-6)亞烷基-S-R7或-(C1-6)亞烷基-SO2-R7；
其中R7在各種情形下獨立地選自H、(C1-6)烷基、(C2-6)烯基、(C1-6)鹵代烷基、(C3-7)環(huán)烷基、芳基和Het；
其中Het為含有1至4個各自獨立地選自N、O和S的雜原子的5-或6-元雜環(huán)，或Het為含有1至4個各自獨立地選自N、O和S的雜原子的9-或10-元雜多環(huán)；其中各N雜原子獨立地且若可能可以以氧化態(tài)存在，從而再與氧原子鍵結形成N-氧化物，且其中各S雜原子獨立地且若可能可以以氧化態(tài)存在，從而再與1個或2個氧原子鍵結形成基團SO或SO2；
其中(C1-6)烷基任選被1個或2個各自獨立地選自-OH、-O-(C1-6)烷基和COOH的取代基所取代；
其中芳基和Het各自任選被1至3個各自獨立地選自鹵素、氰基、氧代、亞氨基、-OH、-O-(C1-6)烷基、-NH2、-NH(C1-4)烷基、-N((C1-4)烷基)2、-NH-C(＝O)(C1-4)烷基、(C1-6)烷基和Het的取代基所取代，其中Het為含1至4個各自獨立地選自N、O和S的雜原子的5-或6-元雜環(huán)；和
c)-(C1-6)亞烷基-N(R8)R9或-(C1-6)亞烷基-C(＝O)-N(R8)R9，其中
R8在各種情形下獨立地選自H和(C1-6)烷基；和
R9在各種情形下獨立地選自R7、-SO2-R7、-C(＝O)-R7、-C(＝O)OR7
和-C(＝O)N(R8)R7；其中R7和R8如上所定義。
7.權利要求1的化合物，其中R2為下式的基團
其中R23為R20；且
R20如權利要求1所定義。
8.權利要求6的化合物，其中R2為下式的基團
其中R23為R20；且
R20選自
a)鹵素或氰基；
b)R7、-CH2-R7、-C(＝O)-R7、-CH2-O-R7、-SO2-R7、-CH2-S-R7或-CH2-SO2-R7；
其中R7在各種情形下獨立地選自H、(C1-6)烷基、(C2-6)烯基、(C1-6)鹵代烷基、(C3-7)環(huán)烷基、苯基和Het；其中Het選自
和
其中(C1-6)烷基任選被1個或2個各自獨立地選自-OH、-O-(C1-6)烷基和COOH的取代基所取代；和
其中苯基和Het各自任選被1至3個各自獨立地選自鹵素、氰基、氧代、亞氨基、-OH、-O-(C1-6)烷基、-NH2、-NH(C1-4)烷基、-N((C1-4)烷基)2、-NH-C(＝O)(C1-4)烷基、(C1-6)烷基和
的取代基所取代；和
c)-CH2-N(R8)R9或-CH2-C(＝O)-N(R8)R9，其中
R8在各種情形下獨立地選自H和(C1-6)烷基；且
R9在各種情形下獨立地選自R7、-SO2-R7、-C(＝O)-R7、-C(＝O)OR7和-C(＝O)N(R8)R7；其中R7和R8如上所定義。
9.權利要求6的化合物，其中R2為下式的基團
其中R23為R20；且
R20選自
b)-CH2-R7、-CH2CH2-R7、-CH2-O-R7、-CH2-S-R7或-CH2-SO2-R7；
其中R7為Het；其中Het選自
和
且
其中Het任選被1至3個各自獨立地選自鹵素、氰基、氧代、亞氨基、-OH、-O-(C1-6)烷基、-NH2、-NH(C1-4)烷基、-N((C1-4)烷基)2、-NH-C(＝O)(C1-4)烷基、(C1-6)烷基和
的取代基所取代；和
c)-CH2-N(R8)R9，其中
R8在各種情形下獨立地選自H和(C1-6)烷基；且
R9為R7，其中R7如上所定義。
10.權利要求1至9之一項或多項的化合物，其中R3選自H和鹵素。
11.權利要求10的化合物，其中R3為H。
12.權利要求1至11之一項或多項的化合物，其中R5為(C1-6)烷基。
13.權利要求12的化合物，其中R5為1-甲基乙基。
14.權利要求1至11之一項或多項的化合物，其中R5為被Het、-COOH或-C(＝O)-N(R51)R52取代的(C1-4)烷基，其中該Het為含有1至4個N雜原子的5-或6-元雜環(huán)，或Het為含有1至4個N雜原子的9-或10-元雙環(huán)雜多環(huán)；
其中R51為H或(C1-6)烷基，且R52選自H、(C1-6)烷基、(C3-7)環(huán)烷基、Het和Het-(C1-3)烷基-；
其中該(C1-6)烷基任選被1個或2個各自獨立地選自-O(C1-6)烷基和-N((C1-6)烷基)2的取代基所取代；且
其中該Het和Het-(C1-3)烷基-的Het部分各自獨立為含1至3個各自獨立地選自N、O和S的雜原子的5-或6-元雜環(huán)，其中該Het和Het-(C1-3)烷基-各自任選被1至3個各自獨立地選自鹵素、氧代、-OH、(C1-6)烷基、(C1-6)鹵代烷基、-(C＝O)(C1-6)烷基、-N((C1-6)烷基)2和-NH(C＝O)(C1-6)烷基的取代基所取代，
其中該(C1-6)烷基任選被OH取代；
或R51和R52與其所連接的N一起鍵聯(lián)形成4-至7-元雜環(huán)，其任選還含有1至3個各自獨立地選自N、O和S的雜原子，其中各S雜原子獨立地且若可能可以以氧化態(tài)存在，從而再與1個或2個氧原子鍵結形成基團SO或SO2
其中雜環(huán)任選被1至3個各自獨立地選自鹵素、氧代、-OH、(C1-6)烷基、(C1-6)鹵代烷基、-(C＝O)(C1-6)烷基、-N((C1-6)烷基)2和-NH(C＝O)(C1-6)烷基的取代基所取代；
其中該(C1-6)烷基任選被OH取代。
15.權利要求1至14之一項或多項的化合物，其中R6為(C3-7)環(huán)烷基，其任選被1至5個獨立地選自鹵素、(C1-6)烷基、(C1-6)鹵代烷基、(C3-7)環(huán)烷基、-OH、-SH、-O-(C1-4)烷基和-S-(C1-4)烷基的取代基所取代。
16.權利要求15的化合物，其中R6為
17.權利要求1至14之一項或多項的化合物，其中R6為芳基，其任選被1至5個獨立地選自鹵素、(C1-6)烷基、(C1-6)鹵代烷基、(C3-7)環(huán)烷基、-OH、-SH、-O-(C1-4)烷基和-S-(C1-4)烷基的取代基所取代；
條件是當R2選自
和
X為O；R3為H；且R5為H時；
R6不為
或者
18.權利要求17的化合物，其中R6為苯基，其任選被1至3個各自獨立地選自鹵素、(C1-4)烷基、(C3-7)環(huán)烷基和-S-(C1-4)烷基的取代基所取代；
條件是當R2選自
和
X為O；R3為H；且R5為H時；
R6不為
或者
19.權利要求1至18之一項或多項的化合物或其可藥用鹽或酯，其用作藥物。
20.藥物組合物，其包含治療有效量的權利要求1至18之一項或多項的化合物或其可藥用鹽或酯；以及一種或多種可藥用載體。
21.權利要求20的藥物組合物，其還包含至少一種其他的抗病毒劑。
22.權利要求20或21之一項或多項的組合物在治療已經(jīng)感染或處于感染風險的哺乳動物的C型肝炎病毒感染中的用途。
23.一種治療已經(jīng)感染或處于感染風險的哺乳動物的C型肝炎病毒感染的方法，該方法包括向哺乳動物給藥治療有效量的權利要求1至18之一項或多項的化合物，其可藥用鹽或酯，或其組合物。
24.一種治療已經(jīng)感染或處于感染風險的哺乳動物的C型肝炎病毒感染的方法，該方法包括向哺乳動物給藥治療有效量的權利要求1至18之一項或多項的化合物或其可藥用鹽或酯與至少一種其他抗病毒劑的組合，或其組合物。
25.權利要求1至18之一項或多項的化合物或其可藥用鹽或酯在治療已經(jīng)感染或處于感染風險的哺乳動物的C型肝炎病毒感染中的用途。
26.權利要求1至18之一項或多項的化合物或其可藥用鹽或酯在制備用于治療已經(jīng)感染或處于感染風險的哺乳動物的C型肝炎病毒感染的藥物中的用途。
27.制品，其包括有效治療C型肝炎病毒感染的組合物；以及包裝材料，該包裝材料包括指示該組合物可用于治療C型肝炎病毒感染的標簽；其中該組合物包含權利要求1至18之一項或多項的化合物或其可藥用鹽或酯。
28.一種抑制C型肝炎病毒復制的方法，該方法包括在抑制C型肝炎病毒復制的條件下，將病毒暴露于有效量的權利要求1至18之一項或多項的化合物或其鹽或其酯中。
29.權利要求1至18之一項或多項的化合物或其鹽或其酯在抑制C型肝炎病毒復制中的用途。
全文摘要
式(I)化合物可用作C型肝炎病毒NS5B聚合酶抑制劑，其中X、R2、R3、R5和R6如本文所定義。
文檔編號A61K31/351GK101506167SQ200780030622
公開日2009年8月12日 申請日期2007年8月6日 優(yōu)先權日2006年8月17日
發(fā)明者皮埃爾·L·博利厄, 勒內·庫洛姆比, 古爾雷茲·法扎爾, 西爾維·古勒特, 馬丁·波伊里爾, 瓊·蘭考特, 蒂莫西·斯坦默斯, 邦克哈姆·薩沃內卡姆 申請人:貝林格爾.英格海姆國際有限公司