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      用于促進(jìn)肌肉健康的橄欖汁提取物的制作方法

      文檔序號(hào):1222829閱讀:402來(lái)源:國(guó)知局
      專利名稱:用于促進(jìn)肌肉健康的橄欖汁提取物的制作方法
      用于促進(jìn)肌肉健康的橄欖汁提取物發(fā)明內(nèi)容本發(fā)明涉及橄欖提取物用于促進(jìn)肌肉健康,尤其是用于在運(yùn)動(dòng)期間保 護(hù)肌肉,用于促進(jìn)從運(yùn)動(dòng)期間的損傷中恢復(fù),用于減輕與運(yùn)動(dòng)相關(guān)的肌肉酸銜muscle soreness)的用途。 發(fā)明背景羥基酪醇(HT)已被描述用于下述組合物中,所述組合物用于從運(yùn)動(dòng)期 間遭受的損傷中保持或恢復(fù)肌肉健康。見(jiàn)WO 2006/053872 (2006年五月 26日公開(kāi))。然而,HT的來(lái)源沒(méi)有指明,并且所述作用一般歸因于HT 的抗氧化活性。相反,已經(jīng)發(fā)現(xiàn)HT的至少一些有益特性不可歸因于其抗 氧化活性。在用于人和動(dòng)物二者消耗的營(yíng)養(yǎng)制品的配制物中,通常期望使用天然 成分。根據(jù)本發(fā)明已經(jīng)發(fā)現(xiàn),在營(yíng)養(yǎng)制品的制造中所有天然的橄欖提取物 均可用作HT的代用來(lái)源,所述營(yíng)養(yǎng)制品能夠通過(guò)與抗氧化活性不直接相 關(guān)的機(jī)制促進(jìn)肌肉健康,并保護(hù)肌肉免受運(yùn)動(dòng)誘導(dǎo)的損傷。發(fā)明概述本發(fā)明因此涉及橄欖提取物用于制造促進(jìn)肌肉健康的營(yíng)養(yǎng)藥物的用 途,尤其是用于在運(yùn)動(dòng)期間保護(hù)肌肉,用于促進(jìn)從運(yùn)動(dòng)期間的損傷中恢 復(fù),和用于減輕與運(yùn)動(dòng)相關(guān)的肌肉酸痛的用途。雖然在本發(fā)明的優(yōu)選的方 面中,橄欖提取物被用作人的食物,但是本發(fā)明還適用于動(dòng)物,尤其是從 事大強(qiáng)度運(yùn)動(dòng)或工作的動(dòng)物例如賽跑動(dòng)物(犬、駱駝、馬)和牽引沉重負(fù) 荷的動(dòng)物(農(nóng)用馬、雪橇犬等等)。根據(jù)本發(fā)明己經(jīng)發(fā)現(xiàn),橄欖提取物能夠以至少兩種方式保護(hù)肌肉,所 述兩種方式并不與其抗氧化特性直接相關(guān)。3首先,橄欖提取物降低運(yùn)動(dòng)期間在血漿、體細(xì)胞和肌細(xì)胞中蓄積的乳 酸的量。這允許參與者運(yùn)動(dòng)或訓(xùn)練更長(zhǎng)的時(shí)間并進(jìn)行更大強(qiáng)度的運(yùn)動(dòng),同時(shí)最小化運(yùn)動(dòng)后的酸痛(soreness)。第二,橄欖提取物提高與運(yùn)動(dòng)相關(guān)的肌肉中谷胱甘肽的水平。這意味 著橄欖提取物除了自身作為抗氧化劑作用外,還激活身體自身的抗氧化機(jī) 制。因此,本發(fā)明的另一方面是橄欖提取物在維持肌肉健康中增強(qiáng)身體自 身的抗氧化能力的用途。本發(fā)明的另一方面是橄欖提取物促進(jìn)肌肉健康的用途,通過(guò)在運(yùn)動(dòng) 前、運(yùn)動(dòng)期間或之后不久對(duì)動(dòng)物(包括人)施用橄欖提取物,從而維持肌 肉健康和預(yù)防運(yùn)動(dòng)期間遭受的肌肉損傷。本發(fā)明還涉及包含橄欖提取物的 營(yíng)養(yǎng)藥物組合物,其在遭受運(yùn)動(dòng)后肌肉酸痛、肌肉疼痛(muscle pain)和肌 肉損傷的動(dòng)物(包括人)中有效促進(jìn)肌肉健康。


      圖1是實(shí)施例1研究的時(shí)間表。圖2顯示血漿乳酸根濃度(表述為偏離基線的%改變)作為時(shí)間的函 數(shù),對(duì)8個(gè)受試者的組而言* <0.05 (羥基酪醇與安慰劑比較)。圖3在8個(gè)受試者組中比較了兩組(運(yùn)動(dòng)前值與運(yùn)動(dòng)后值比較)中 GSH (還原型谷胱甘肽)、GSSG (被氧化的谷胱甘肽(二聚體))和GR (谷胱甘肽還原酶)活性的濃度。圖4顯示與基線相比,運(yùn)動(dòng)后GSH、 GSSH和GR的增加(對(duì)8個(gè)受 試者組而言,均值士SEM)。橄欖提取物降低乳酸蓄積根據(jù)本發(fā)明己經(jīng)發(fā)現(xiàn),橄欖提取物能降低運(yùn)動(dòng)期間和運(yùn)動(dòng)后血漿中、 體內(nèi)和肌內(nèi)的乳酸/乳酸根濃度。從休息中進(jìn)入高強(qiáng)度運(yùn)動(dòng)時(shí),骨骼肌細(xì)胞 的能量消耗可提高高達(dá)100倍。該高能量需求可超出肌細(xì)胞的有氧代謝能 力,并且需要的大部分ATP必須來(lái)自于厭氧代謝。高強(qiáng)度運(yùn)動(dòng)也導(dǎo)致收縮 功能的快速減退,這已知為骨骼肌疲勞。因此,厭氧代謝的一個(gè)結(jié)果是收縮功能的減退。糖原的厭氧降解導(dǎo)致無(wú)機(jī)酸的細(xì)胞內(nèi)蓄積,在所述無(wú)機(jī)酸中乳酸在數(shù) 量上是最重要的。乳酸作為一種強(qiáng)酸,會(huì)分解為乳酸根和氫離子;乳酸根 自身成為肌細(xì)胞的能量來(lái)源。因此,肌肉的酸化降低肌肉的功率生產(chǎn),并 產(chǎn)生疲勞和肌肉疼痛。提高的乳酸根產(chǎn)生與細(xì)胞酸中毒是一致的,并且保 持為誘導(dǎo)代謝酸中毒的細(xì)胞代謝條件的良好間接標(biāo)記物。由于在較長(zhǎng)的運(yùn)動(dòng)或體力勞動(dòng)期間乳酸根和氫離子在細(xì)胞中累積, "共同運(yùn)轉(zhuǎn)(co-transporter)"系統(tǒng)將氫離子運(yùn)出肌細(xì)胞外,從而通過(guò)防止氫 離子在肌肉中蓄積保持相對(duì)良好的pH條件。耐力訓(xùn)練提高該共同轉(zhuǎn)運(yùn)系 統(tǒng)的能力。氫轉(zhuǎn)運(yùn)系統(tǒng)不是肌細(xì)胞防止運(yùn)動(dòng)期間酸累積的唯一方式。還存在 Na+ZH+交換系統(tǒng),其主要將氫離子泵出肌細(xì)胞,并帶入鈉離子代替氫離子 (乳酸根不參與該過(guò)程)。與氫運(yùn)轉(zhuǎn)系統(tǒng)相似,該交換消耗能量,并且 Na+/H+交換在運(yùn)動(dòng)期間似乎是極為重要的。在劇烈的肌肉活動(dòng)期間,細(xì)胞內(nèi)pH可降低約0.5個(gè)pH單位。存在兩 條證據(jù)主線,用于將這種pH下降和疲勞中的收縮功能障礙聯(lián)系起來(lái)。首 先,對(duì)人肌肉疲勞的研究常顯示肌肉pH下降與力量或功率生產(chǎn)的降低之 間良好的瞬時(shí)關(guān)聯(lián)。其次,對(duì)有皮的(skinned)骨骼肌纖維的研究顯示酸化 可降低等長(zhǎng)力(isometric force)和縮短速度(shortening velocity) (Hakan Westerblad et al 2002 A^m尸Ajwo/5W 17: 17-21)。迄今為止除了運(yùn)動(dòng)以外,對(duì)存在于肌肉中的氫離子如何能夠被正面影 響的了解相對(duì)較少。盡管對(duì)該機(jī)制幾乎不了解,但是發(fā)現(xiàn)骨骼肌的細(xì)胞內(nèi) pH會(huì)隨著乳酸蓄積而降低。pH的降低或乳酸的存在可被感受為肌肉疲 勞。對(duì)該現(xiàn)象可能的解釋可以是,低pH或乳酸的存在抑制在肌肉能量供 應(yīng)的維持中起作用的酶,例如果糖磷酸激酶。 一些文章將低pH或乳酸存 在與降低的肌肉性能(如輸出力)之間聯(lián)系在一起。根據(jù)本發(fā)明已驚人地發(fā)現(xiàn),橄欖提取物形式的羥基酪醇攝取降低了血 漿內(nèi)、體內(nèi)和肌細(xì)胞內(nèi)的乳酸含量。橄欖提取物降低與肌肉中髙乳酸根含量相關(guān)的肌肉疲勞和肌肉疼痛以及運(yùn)動(dòng)后肌肉酸痛。因此,本發(fā)明的一個(gè)方面是包含羥基酪醇的橄欖提取 物用于預(yù)防或減輕肌肉疲勞,用于預(yù)防或減輕與運(yùn)動(dòng)相關(guān)的肌肉疼痛,和 用于允許從肌肉疲勞、肌肉疼痛或運(yùn)動(dòng)后肌肉酸痛中更快恢復(fù)的用途。體力運(yùn)動(dòng)后可存在由乳酸累積引起的運(yùn)動(dòng)后肌肉疲勞、肌肉疼痛和肌 肉酸痛。通過(guò)預(yù)防肌細(xì)胞中pH降低的作用,含羥基酪醇的橄欖提取物的 使用通過(guò)減輕肌肉疲勞導(dǎo)致改善的肌肉健康,從而賦予改善的肌肉性能。 后一作用對(duì)長(zhǎng)期的體力或體育運(yùn)動(dòng)是特別可觀的,因此在運(yùn)動(dòng)消耗0.5到8小時(shí),優(yōu)選地0.5到2小時(shí)之間時(shí)間的情況下是優(yōu)選的。我們注意到,優(yōu)選地在運(yùn)動(dòng)前或運(yùn)動(dòng)期間攝入含羥基酪醇的橄欖提取物。羥基酪醇優(yōu)選地被口服消耗,但是不是口香糖。在一項(xiàng)試驗(yàn)中,在運(yùn)動(dòng)前10分鐘到1小時(shí)消耗羥基酪醇,觀察到與使用安慰劑的參考實(shí)驗(yàn)相比,血漿中的乳酸根水平在運(yùn)動(dòng)期間和運(yùn)動(dòng)后降低。根據(jù)本發(fā)明的另一方面,含羥基酪醇的橄欖提取物被用于減輕和預(yù)防 肌肉痛性痙攣(cramping),并用于從肌肉痛性痙攣中更快恢復(fù)。該痛性痙 攣可由身體應(yīng)激(例如運(yùn)動(dòng))、精神應(yīng)激(例如工作或考試的壓力)或應(yīng) 激相關(guān)的疾病如重復(fù)勞損(RSI)引起。RSI指大范圍的肌肉骨骼損傷,例如腕管綜合征、滑囊炎或腱炎。其 還涵蓋工作相關(guān)的上肢病癥(Work-related Upper Limb Disorders)、職業(yè)超量 "(吏用損4勞(Occupational Overuse Injuries)或累禾只倉(cāng)lK勞病癥(Cumulative Trauma Disorders)。這些損傷可例如發(fā)生在從事繁重計(jì)算機(jī)鍵盤使用的雇員中。有 時(shí)用于這類損傷類型的另一術(shù)語(yǔ)是重復(fù)活動(dòng)病癥(RMI), 一種與肢體功能 喪失相關(guān)的過(guò)度使用綜合征,所述肢體功能喪失由重復(fù)的活動(dòng)或持久的靜 載荷(static loading)弓l起。本發(fā)明有利地提供了含羥基酪醇的橄欖提取物用于制造營(yíng)養(yǎng)藥物(優(yōu) 選地為藥物)的用途,所述營(yíng)養(yǎng)藥物(優(yōu)選地為藥物)用于降低血漿、肌 肉或體內(nèi)的乳酸根水平和/或用于預(yù)防或減輕肌肉疲勞、肌肉疼痛、肌肉酸 痛或肌肉痛性痙攣,或用于從運(yùn)動(dòng)后肌肉疲勞、肌肉疼痛、肌肉酸痛或肌肉痛性痙攣中更快恢復(fù)。在下述情況下本發(fā)明的橄欖提取物是有幫助的6優(yōu)秀運(yùn)動(dòng)員的表現(xiàn)以及運(yùn)動(dòng)后或較未受到良好訓(xùn)練的人的表現(xiàn)。 谷胱甘肽水平
      本發(fā)明還涉及含羥基酪醇的橄欖提取物在運(yùn)動(dòng)期間和運(yùn)動(dòng)后提高存在 于血漿中、體內(nèi)和肌肉內(nèi)的谷胱甘肽水平的用途。
      谷胱甘肽是在肝中主要由半胱氨酸生產(chǎn)的三肽氨基酸。其通過(guò)抑制自 由基增殖發(fā)揮細(xì)胞抗氧化劑的作用??寡趸瘎┮远喾N方式作用,以降低肌 細(xì)胞中自由基的作用。它們可通過(guò)如下方式發(fā)揮作用降低自由基引起的 損傷,終止自由基開(kāi)始形成,或通過(guò)與自由基接合將其氧化,和通過(guò)穩(wěn)定 化中和自由基的有害作用??寡趸瘎┑臄z入可直接影響肌肉中的自由基。 谷胱甘肽是一種細(xì)胞內(nèi)抗氧化劑,其已顯示對(duì)肌肉中的自由基反應(yīng)并已存 在于體內(nèi)。其主要以還原形式谷胱甘肽(GSH)存在。谷胱甘肽循環(huán)在由 GSH過(guò)氧化物酶催化的反應(yīng)中消除H202 (過(guò)氧化氫)
      2 GSH + H202 — GSSG (氧化形式)+ 2 H20 該防御系統(tǒng)功能的缺失或降低使得肌細(xì)胞易氧化應(yīng)激損傷。 "常規(guī)運(yùn)動(dòng)(regular exercise)",即不如優(yōu)秀運(yùn)動(dòng)員或職業(yè)運(yùn)動(dòng)員那樣 劇烈的運(yùn)動(dòng),可伴隨著抵抗自由基損傷的細(xì)胞防御的代償提高。這些防御 涉及若干種機(jī)制,如增強(qiáng)的抗氧化酶活性和保護(hù)性免疫應(yīng)答中的改變。這 些抗氧化酶在體內(nèi)合成,并包括某些硫醇、谷胱甘肽和泛醌。體內(nèi)不能合 成的重要的抗氧化劑必須來(lái)自于膳食。這些抗氧化劑包括維生素C、 E和 /3-胡蘿卜素。橫向(cross sectional)研究表明,運(yùn)動(dòng)員具有比久坐個(gè)體更 高的抗氧化酶水平。如果這是真的則可得出結(jié)論有體力活性的個(gè)體可能 的確對(duì)自由基損傷更有抗性。訓(xùn)練研究也證實(shí)了每周訓(xùn)練距離和抗氧化能 力之間似乎存在關(guān)系。個(gè)體受到的訓(xùn)練越多,他們更可能能夠抵抗運(yùn)動(dòng)產(chǎn) 生的自由基增加。僅僅在有的時(shí)候激烈運(yùn)動(dòng)的"周末戰(zhàn)士 (weekend warrio)"可能最多處于細(xì)胞氧化損傷的風(fēng)險(xiǎn)下。營(yíng)養(yǎng)學(xué)家要理解的關(guān)鍵信 息是,因?yàn)榧ち疫\(yùn)動(dòng)可耗盡抗氧化維生素的庫(kù)存,所以必須專注于膳食的 營(yíng)養(yǎng)密度和品質(zhì),從而保護(hù)這些維生素的充足用量。不能認(rèn)為正常的平衡 膳食始終足以提供充足的抗氧化水平。
      根據(jù)本發(fā)明已經(jīng)發(fā)現(xiàn),含羥基酪醇的橄欖提取物的攝入影響血漿、體內(nèi)和肌肉組織中的谷胱甘肽系統(tǒng)。進(jìn)一步更驚人的是,含羥基酪醇的橄欖 提取物能在運(yùn)動(dòng)期間和運(yùn)動(dòng)后上調(diào)血漿中、體內(nèi)和肌肉組織中的谷胱甘肽 系統(tǒng),導(dǎo)致提高的谷胱甘肽水平。谷胱甘肽水平的提高導(dǎo)致血槳和肌肉中 總抗氧化水平的提高。作為一種可能的后果,肌肉組織中存在的過(guò)氧化物 量會(huì)被降低,這會(huì)導(dǎo)致提高的肌肉性能。
      本發(fā)明還涉及含羥基酪醇的橄欖提取物用于制造營(yíng)養(yǎng)藥物(優(yōu)選地為 藥物)的用途,所述營(yíng)養(yǎng)藥物(優(yōu)選地為藥物)用于與不使用羥基酪醇時(shí) 的水平相比,提高血漿、肌肉或體內(nèi)的谷胱甘肽水平和/或肌肉性能。
      配制物
      根據(jù)本發(fā)明的含羥基酪醇的橄欖提取物可以任何合適的形式使用,例 如作為食物或飲料,作為用于特別營(yíng)養(yǎng)用途的食物,作為膳食補(bǔ)劑,作為 營(yíng)養(yǎng)藥物或甚至在飼料或?qū)櫸镲暳现惺褂谩?br> 含羥基酪醇的橄欖提取物可在這些制品的正常工藝期間任何階段添 加。合適的食物制品包括例如谷物棒、烘焙物如蛋糕和曲奇,還有液體食 物如湯或湯粉。合適的飲料包括無(wú)醇飲品和醇飲品,以及要添加進(jìn)飲用水 和液體食物中的液體制劑。無(wú)醇飲品優(yōu)選地為礦物質(zhì)水、運(yùn)動(dòng)飲品、接近 水的飲品、果汁、檸檬水、茶和濃縮飲品如小杯裝的(shot)。運(yùn)動(dòng)飲品可以 是低滲、高滲或等滲的。運(yùn)動(dòng)飲品可作為液體形式、作為濃縮物或粉末 (要溶于液體中,例如溶于水中)獲得。用于特殊營(yíng)養(yǎng)用途的食物的例子 包括運(yùn)動(dòng)食物、減肥食物、嬰兒配方和臨床食物的范疇。
      本文使用的術(shù)語(yǔ)"膳食補(bǔ)劑"表示通過(guò)嘴攝取的制品,其含有意欲被 添加進(jìn)膳食中的化合物或化合物的混合物。這些制品中的化合物或化合物
      的混合物可包括維生素、礦物質(zhì)、草本(herbs)或其他植物(botanicals)和 氨基酸。膳食補(bǔ)劑也可以是提取物或濃縮物,并可以以許多形式存在,例 如片劑、膠囊、軟明膠膠囊(softgds)、軟膠囊(gelcaps)、液體或粉末。
      本文使用的術(shù)語(yǔ)營(yíng)養(yǎng)藥物表示在營(yíng)養(yǎng)學(xué)和藥物應(yīng)用領(lǐng)域二者中的有用 性。根據(jù)本發(fā)明的營(yíng)養(yǎng)藥物組合物可以是適合施用給動(dòng)物體(包括人體) 的任何形式,特別是常規(guī)用于口服施用的任何形式,例如固體形式,如食 物或飼料、食物或飼料預(yù)混物、片劑、丸劑、顆粒劑、錠劑、膠囊和泡騰劑配制物如粉末和片劑(其中的添加劑/補(bǔ)劑),或?yàn)橐后w形式,如溶液、 乳劑或懸浮液,例如飲料、膏劑和油性懸浮液。摻入有本發(fā)明的含羥基酪 醇的橄欖提取物的受控(延遲)釋放配制物也組成了本發(fā)明的部分。另 外,可向本發(fā)明的營(yíng)養(yǎng)藥物組合物添加多種維生素和礦物質(zhì)補(bǔ)劑,以獲得 在一些膳食中缺失的足量必需營(yíng)養(yǎng)。多種維生素和礦物質(zhì)補(bǔ)劑也適用于疾 病預(yù)防和防護(hù)生活方式造成的營(yíng)養(yǎng)喪失和不足。營(yíng)養(yǎng)藥物可進(jìn)一步包含常 用添加劑,例如甜味劑、調(diào)味劑、糖、脂肪、乳化劑、防腐劑。營(yíng)養(yǎng)品也
      可包含其他活性組分,例如如WO02/45524中所述的(經(jīng)水解的)蛋白 質(zhì)。營(yíng)養(yǎng)品中還可以存在其他抗氧化劑,例如黃酮、類胡蘿卜素、泛醌、 蘆丁、硫辛酸、過(guò)氧化氫酶、谷胱甘肽(GSH)和維生素,例如維生素C和 E及其前體。
      羥基酪醇有利地以有效量存在于橄欖提取物中。通常,每份橄欖提取 物中1 mg到約500 mg之間的羥基酪醇是有效于達(dá)成一定作用的。優(yōu)選 地,橄欖提取物中存在1 mg和250 mg之間的羥基酪醇,進(jìn)一步更優(yōu)選 地,橄欖提取物中使用lmg和100mg之間的羥基酪醇。
      包含含羥基酪醇的橄欖提取物的營(yíng)養(yǎng)藥物可在運(yùn)動(dòng)前、運(yùn)動(dòng)期間或運(yùn) 動(dòng)后消耗。在運(yùn)動(dòng)前使用的情況下,優(yōu)選地在運(yùn)動(dòng)前約20分鐘消耗。在 運(yùn)動(dòng)后使用的情況下,優(yōu)選地在運(yùn)動(dòng)后1小時(shí)內(nèi),更優(yōu)選地在運(yùn)動(dòng)后立即 消耗。
      除了適用于人消耗的營(yíng)養(yǎng)藥物制品外,還可能在用于動(dòng)物的飼料(包 括寵物食物)中使用羥基酪醇。因而所述飼料特別適用于動(dòng)物,其被用于 提高動(dòng)物例如(賽)馬或犬(即賽跑犬和雪橇犬)的肌肉力。
      提出以下的非限制性實(shí)施例闡述本發(fā)明。
      實(shí)施例1
      受試者
      募集八位健康的雄性志愿者進(jìn)行本研究,他們均沒(méi)有參與任何常規(guī)運(yùn) 動(dòng)的歷史。受試者的特征在下表1中顯示。在獲得受試者的書(shū)面同意書(shū)之 前,預(yù)先通知所有的受試者實(shí)驗(yàn)步驟的性質(zhì)和可能的風(fēng)險(xiǎn)。該研究由荷蘭
      9測(cè)試前膳食和活動(dòng)的標(biāo)準(zhǔn)化
      指示受試者在測(cè)試前三天和測(cè)試日當(dāng)天期間不要消耗橄欖、橄欖油、 橄欖制品、果汁、蔬菜汁、酒、多于兩杯的茶、多于一片的水果、多于兩
      服務(wù)勺(serving spoon)的蔬菜、巧克力和含抗氧化劑的補(bǔ)劑。志愿者在測(cè)試 曰前的傍晚消耗標(biāo)準(zhǔn)膳食(低抗氧化劑)。要求受試者在整個(gè)測(cè)試周期中 記錄他們的食物攝取。指示所有的受試者在整個(gè)周期中除了抗阻運(yùn)動(dòng)周期 (resistance exercise session)夕卜避免任何禾中類的重體力運(yùn)云力。 研究
      在兩個(gè)不同的時(shí)期研究所有的受試者。通過(guò)隨機(jī)化的交叉設(shè)計(jì),受試 者接受橄欖提取物或安慰劑之任一。在測(cè)試前的傍晚(8.00 pm)和開(kāi)始運(yùn)動(dòng) 前30分鐘共攝取飲料兩次(圖1)。橄欖提取物(DSM Food Specialties, Ddft,荷蘭)含有200 mg羥基酪醇。安慰劑在口味和顏色上是類似的。
      抗阻運(yùn)云力(resistance exercise)
      在該研究中,使用與Koopman et al. 2005 Eur JAppl Physiol 94: 180-187
      所述相同的運(yùn)動(dòng)方案。受試者在8:00 am到達(dá)實(shí)驗(yàn)室,處于禁食過(guò)夜的狀 態(tài)。受試者使用Stairmaster (Jimsa Benelux BV, Rotterdam,荷蘭)進(jìn)行5分鐘 的一般熱身。之后抗阻運(yùn)動(dòng)周期靶向腿部,在水平蹬腿機(jī)(leg press machine) (Technogym BV, Rotterdam,荷蘭)上進(jìn)行8組IO個(gè)重復(fù)并在腿伸 展機(jī)(Technogym)上進(jìn)行8組10個(gè)重復(fù)。兩種運(yùn)動(dòng)均在75%受試者的個(gè)體 1RM下完成,組之間有2分鐘的休息間隔,總計(jì)需要約40分鐘完成。在 測(cè)試期間語(yǔ)言鼓勵(lì)所有的受試者完成整個(gè)方案。未測(cè)量運(yùn)動(dòng)周期中的能量 消耗。根據(jù)類似的抗阻運(yùn)動(dòng)方案期間的間接量熱法的測(cè)量結(jié)果,其他人顯 示范圍在14禾P 27 kJ min"之間的能量消耗(Bailor " a/. Am J Clin Nutr (1988) 47: 19-25和Burleson " a/. Med Sci Sports Exerc (1998) 30: 518-522)。
      取血樣
      在開(kāi)始運(yùn)動(dòng)前、運(yùn)動(dòng)期間和運(yùn)動(dòng)后至多兩個(gè)半小時(shí)收集血樣(圖 1)。將血樣收集在含有肝素的管中并置于冰上。在1000g和4'C離心5分鐘后,將血漿的小份式樣儲(chǔ)存于-80。C下直至分析。針對(duì)損傷和炎癥標(biāo)記物 以及抗氧化劑水平進(jìn)行血液分析。損傷標(biāo)記物為丙二醛和羰基化蛋白質(zhì)
      (protein carbonyls),炎癥標(biāo)記物為NF-/c/3、 IL-6、 IL-10禾口 TNFa (用LPS 刺激血后)。測(cè)量了若干種抗氧化劑水平Trolox當(dāng)量抗氧化能力(Trolox Equivalent Antioxidant Capacity, TEAC)、尿酸、維生素E、維生素C、谷胱 甘肽(GSH和GSSH)、超氧化物岐化酶、谷胱甘肽過(guò)氧化物酶和羥基酪 醇。另外,測(cè)定了血漿中的乳酸根水平。 肌肉活檢
      在開(kāi)始運(yùn)動(dòng)前30分鐘和運(yùn)動(dòng)后30分鐘采取肌肉活檢樣品。第二份肌 肉活檢取自雙側(cè)腿。使用經(jīng)皮針穿刺活檢技術(shù)(Bergstrom1975 ^"m//Of" LflZ 35: 518- 522),從股外側(cè)肌的中部區(qū)域(髕骨上方15 cm)獲得
      肌肉活檢并在約下方3 cm處通過(guò)筋膜進(jìn)入。小心解剖肌肉樣品使其不含 任何可見(jiàn)的非肌肉材料,并在液氮中迅速冷凍。將小部分肌肉活檢包埋在 Tissue-Tek (Sakura Finetek, Zoeterwoude,荷蘭)中并在液氮冷卻的異戊烷中 迅速冷凍。肌肉活檢儲(chǔ)存于-8(TC下直至分析。
      在肌肉活檢中測(cè)量以下參數(shù)谷胱甘肽(GSH和GSSG)、尿酸、超 氧化物歧化酶、谷胱甘肽還原酶和谷胱甘肽S-轉(zhuǎn)移酶(Gosker et al. 2005 Respir Med 99(1): 118-125)。
      尿收集
      在測(cè)試日和測(cè)試日第二天收集晨尿。將尿的小份式樣冷凍于-8(TC下直 至分析8-異前列烷和肌酸酐。 統(tǒng)計(jì)學(xué)
      所有的數(shù)據(jù)表述為均值± SEM。使用成對(duì)的t-檢驗(yàn)比較現(xiàn)有補(bǔ)劑與橄 欖提取物和安慰劑之間的差異。統(tǒng)計(jì)學(xué)顯著性設(shè)定為P<0.05。
      表l:受試者特征
      均值± SEM
      年齡(歲)22.0 ± 1.9
      體重(kg)75.4 ±3.3
      身高Cm;i1.82 士0 1.02BMI (kg-m-2)22.7 ±0.8
      1 RM蹬腿(kg)197 ± 10
      lRM腿伸展(kg)117±6
      實(shí)施例2:乳酸根蓄積 通過(guò)肌肉中的厭氧能量生產(chǎn)產(chǎn)生乳酸根。劇烈運(yùn)動(dòng)期間乳酸根在肌肉 和血中蓄積,這降低了運(yùn)動(dòng)性能。在我們的研究中顯示,運(yùn)動(dòng)期間血漿中
      的乳酸根濃度可觀地提高(圖2)。如在運(yùn)動(dòng)開(kāi)始后30分鐘和60分鐘分 別測(cè)量的,運(yùn)動(dòng)期間血漿中的乳酸根濃度提高14.8倍。攝取羥基酪醇后, 運(yùn)動(dòng)期間血漿中的乳酸根濃度僅提高12.8倍(圖2)。羥基酪醇降低了運(yùn) 動(dòng)期間乳酸根的血漿峰濃度(圖2)。
      實(shí)施例3:肌肉中的谷胱甘肽系統(tǒng) 谷胱甘肽是抗氧化網(wǎng)絡(luò)中的一個(gè)重要元件。谷胱甘肽主要以其還原形 式(GSH)存在。谷胱甘肽還原酶能夠?qū)⒈谎趸墓入赘孰?GSSG)轉(zhuǎn)化為 GSH。
      羥基酪醇增強(qiáng)機(jī)頭中的谷胱甘肽抗氧化系統(tǒng),即羥基酪醇通過(guò)提高的 GCH水平幫助維持最佳細(xì)胞功能,并保護(hù)細(xì)胞免受竭力運(yùn)動(dòng)的損傷,從而 導(dǎo)致更高的GSH/GSSG比例。
      與施用了安慰劑的受試者相比,在施用了羥基酪醇的受試者中運(yùn)動(dòng)后 肌肉中的GSH濃度被提高(圖3和圖4)。與安慰劑相比,羥基酪醇組中 肌肉中GSSG濃度提高得更少(圖3)。羥基酪醇提高了運(yùn)動(dòng)后谷胱甘肽 還原酶的活性(圖3和4)。谷胱甘肽還原酶的活性在安慰劑攝取后被提 高得更少。
      1權(quán)利要求
      1. 包含橄欖提取物的營(yíng)養(yǎng)藥物組合物,所述營(yíng)養(yǎng)藥物組合物能在由于乳酸蓄積而遭受運(yùn)動(dòng)后肌肉酸痛、肌肉疼痛或肌肉損傷的動(dòng)物中有效促進(jìn)肌肉健康,所述動(dòng)物包括人。
      2. 根據(jù)權(quán)利要求1的營(yíng)養(yǎng)藥物組合物,其適用于人消耗。
      3. 根據(jù)權(quán)利要求1的營(yíng)養(yǎng)藥物組合物,其適用于動(dòng)物消耗。
      4. 減少肌肉中由運(yùn)動(dòng)導(dǎo)致的乳酸蓄積的方法,包括施用包含橄欖提取 物的營(yíng)養(yǎng)藥物組合物。
      5. 橄欖提取物在制造下述營(yíng)養(yǎng)藥物中的用途,所述營(yíng)養(yǎng)藥物能在由于 乳酸蓄積遭受運(yùn)動(dòng)后肌肉酸痛、肌肉疼痛或肌肉損傷的動(dòng)物中有效促進(jìn)肌 肉健康,所述動(dòng)物包括人。
      6. 包含橄欖提取物的營(yíng)養(yǎng)藥物組合物,所述營(yíng)養(yǎng)藥物組合物能在運(yùn)動(dòng) 期間遭受肌肉中谷胱甘肽水平降低的動(dòng)物中有效促進(jìn)肌肉健康,所述動(dòng)物 包括人。
      7. 根據(jù)權(quán)利要求6的營(yíng)養(yǎng)藥物組合物,其適用于人消耗。
      8. 根據(jù)權(quán)利要求6的營(yíng)養(yǎng)藥物組合物,其適用于動(dòng)物消耗。
      9. 減少肌肉中由運(yùn)動(dòng)導(dǎo)致的谷胱甘肽蓄積的方法,所述方法包括施用 包含橄欖提取物的營(yíng)養(yǎng)藥物組合物。
      10. 橄欖提取物在制造營(yíng)養(yǎng)藥物中的用途,所述營(yíng)養(yǎng)藥物在由于運(yùn)動(dòng) 遭受肌肉中谷胱甘肽水平降低的動(dòng)物中有效促進(jìn)肌肉健康,所述動(dòng)物包括 人。
      全文摘要
      在遭受由于運(yùn)動(dòng)導(dǎo)致的肌肉酸痛和肌肉損傷、肌肉疼痛的動(dòng)物和人中,包含羥基酪醇的橄欖提取物均能有效促進(jìn)肌肉健康。橄欖提取物能夠減少運(yùn)動(dòng)后出現(xiàn)的乳酸的蓄積,還能夠通過(guò)維持谷胱甘肽水平發(fā)揮作用。
      文檔編號(hào)A61K31/045GK101522182SQ200780037408
      公開(kāi)日2009年9月2日 申請(qǐng)日期2007年10月5日 優(yōu)先權(quán)日2006年10月5日
      發(fā)明者盧卡斯·希瑞爾·杰勒德·海丹·范德, 蓋德·瑞勃圖斯·米歇爾·馬莉亞·哈恩, 薩斯卡·約翰內(nèi)斯·瑞提基斯, 阿爾特·巴斯特 申請(qǐng)人:帝斯曼知識(shí)產(chǎn)權(quán)資產(chǎn)管理有限公司
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