專利名稱：：可有效均勻分散在水中的癸氧喹酯混懸液制劑及其制備方法
技術(shù)領(lǐng)域：
：本發(fā)明涉及一種抗球蟲獸藥及其制備方法，特別涉及可有效均勻分散在水中的癸氧喹酯混懸液及其制備方法。
背景技術(shù)：
：雞球蟲病是由艾美耳球蟲(Eimeria)所引起的嚴(yán)重危害養(yǎng)禽業(yè)生產(chǎn)的寄生蟲疾病。寄生于雞腸道內(nèi)的艾美耳球蟲有7個種，分別是柔嫩艾美耳球蟲(E.tenella)、堆型艾美耳球蟲(E.acervulina)、毒害艾美耳球蟲(E.necatrix)、巨型艾美耳球蟲(E.maxima)、和緩艾美耳球蟲(E.mitis)、布氏艾美耳球蟲(E.brinetti)和早熟艾美耳球蟲(E.praecox)。各種球蟲在雞消化道內(nèi)寄生的部位不同，柔嫩艾美耳球蟲寄生于盲腸，堆型艾美耳球蟲寄生于十二指腸，巨型艾美耳球蟲和毒害艾美耳球蟲寄生于小腸，布氏艾美耳球蟲寄生于小腸下段和直腸。雞球蟲病是一種全世界普遍發(fā)生對養(yǎng)雞業(yè)危害十分嚴(yán)重的寄生蟲病。其造成的經(jīng)濟(jì)損失是驚人的。在諸多群發(fā)性疾病當(dāng)中，雞球蟲病的發(fā)病率最高，占1720%。雞球蟲病分布廣泛，可以說有雞的地方就有雞球蟲病，在集約化養(yǎng)雞場其發(fā)病率高達(dá)5070%;死亡率達(dá)2030%,嚴(yán)重時更可達(dá)80%。癸氧喹酯(decoquinate)是一種喹啉類類化學(xué)抗球蟲藥，其化學(xué)名稱為6-癸氧基-7-乙氧基-4-羥基喹啉-3-羧酸乙酯。目前有關(guān)合成癸氧喹酯的文獻(xiàn)和專利較少，如US3485845描述了以對硝基愈創(chuàng)木醚鉀或?qū)ο趸鶅翰璺逾c等為原料，通過氫化、還原、高溫縮合等反應(yīng)，最終合成了癸氧喹酯。癸氧喹酯在球蟲的無性繁殖階段發(fā)揮作用，給藥后的癸氧喹酯在進(jìn)入子孢子細(xì)胞后，通過干擾DNA合成而阻止其發(fā)育。癸氧喹酯吸收快，在1小時內(nèi)即可達(dá)到抗球蟲的有效濃度，3天后濃度達(dá)到高峰水平，因其在球蟲生活史的早期即開始發(fā)揮作用，從而有效避免了家禽腸道受到損害。除此之外癸氧喹酯還有抗球譜廣、抗球指數(shù)高等優(yōu)點。癸氧喹酯在臨床上對于雞的柔嫩、毒害、堆型、巨型、變位和布氏艾美耳球蟲等引起的球蟲病，有較好的防治效果。3c必o:OOC2Hs癸氧喹酯結(jié)構(gòu)式(分子式C24H35N05;分子量417.55)雖然癸氧喹酯具有很好的廣譜抗球蟲作用，但是由于存在癸氧喹酯難溶于水的缺點，因此，國內(nèi)外臨床應(yīng)用的有關(guān)癸氧喹酯的制劑只有癸氧喹酯預(yù)混劑一種劑型，癸氧喹酯預(yù)混劑只能采用拌料給藥，而無法通過飲水給藥。但在家禽飼養(yǎng)中，養(yǎng)禽場或?qū)I(yè)戶常采用飲水給藥的方式進(jìn)行禽病預(yù)防和治療，因為飲水給藥簡便、省時省力，同時可以降低或避免雞應(yīng)激反應(yīng)。這樣癸氧喹酯的臨床應(yīng)用受到了極大地限制，因此發(fā)明一種可以飲水的癸氧喹酯制劑這些問題就可以迎刃而解，如CN101129371A描述了癸氧喹酯溶液的組方和工藝，助溶劑80_99%使用到乙醇、N-甲基吡咯垸酮、二甲基甲酰胺等一種或幾種有機(jī)溶劑，而且要加熱到60-9(TC的條件下才能溶解，這樣就會存在以下問題或不足1、輔料成本高有機(jī)溶劑用量很大，而且相對水溶液成本很高。2、制造費(fèi)用高制造過程需要加熱，冷卻，消耗能源多，制造成本高。3、藥物穩(wěn)定性差，一般癸氧喹酯要在60-9(TC的溫度下加入有機(jī)溶劑中進(jìn)行溶解，在高溫狀態(tài)下癸氧喹酯的穩(wěn)定性較差，質(zhì)量很難得到控制。4、藥物安全性差，癸氧喹酯溶液80-9將的溶媒為有機(jī)溶劑，大量的有機(jī)溶劑會引發(fā)個體的過敏等不良反應(yīng)。
發(fā)明內(nèi)容為了解決以上問題，本發(fā)明提供了一種可有效均勻分散在水中的癸氧喹酯混懸液制劑，癸氧喹酯混懸液與癸氧喹酯預(yù)混劑和癸氧喹酯溶液相比存在如下優(yōu)勢1、癸氧喹酯混懸液使用方便，既可拌料使用，也能均勻分散到水中，兩個小時不下沉而通過飲水給藥，即時在雞群采食量大大降低的情況下也能通過飲水達(dá)到治療的功效。2、癸氧喹酯混懸液藥物安全，毒性低。因為癸氧喹酯溶液100%的溶媒為有機(jī)溶劑，大量的有機(jī)溶劑會引發(fā)個體的過敏反應(yīng)等，而癸氧喹酯混懸劑卻把有機(jī)溶劑的添加量降到20%以下。3、癸氧喹酯混懸液成本降低，和癸氧喹酯溶液相比，因為采用水做溶劑，減少了有機(jī)溶劑的用量，所以成本大大降低。4、癸氧喹酯混懸液藥物穩(wěn)定性高，如果將癸氧喹酯溶解在溶劑中制成癸氧喹酯溶液后，藥物極易氧化變質(zhì)，但是使用助懸劑將固體藥物微粒均勻的分散在溶劑中時，藥物穩(wěn)定大大提高。5、癸氧喹酯混懸液體內(nèi)溶出速率較癸氧喹酯預(yù)混劑快，癸氧喹酯混懸液制備過程中使用到了月桂醇硫酸鈉、枸櫞酸鹽等載體成分，并通過高壓均質(zhì)機(jī)進(jìn)行制備，得到lnm100um之間不同粒徑的細(xì)小微粒，在體內(nèi)迅速溶出起效。6、癸氧喹酯混懸液藥物載藥量高，可以將主藥的含量增加至30%。7、癸氧喹酯混懸液在水中分散度好、穩(wěn)定性好。本發(fā)明的癸氧喹酯混懸液制劑由以下配比的成分制成癸氧喹酯330%(W/V)潤濕劑'115%(V/V)表面活性劑0.01%2.0%(W/V)助懸劑520%/(W/V)絮凝劑12.5%(W/V)穩(wěn)定劑0.010.05%(W/V)防腐劑0.010.6%(W/V)純化水6594%(V/V)以上成分的百分比是基于混懸劑的總體積計。制備方法(1)先將絮凝劑溶入少量純化水中，再加入主藥癸氧喹酯、潤濕劑和表面活性劑，攪拌得混合物A;(2)取適量純化水，加入穩(wěn)定劑和助懸劑，攪拌得混合物B;(3)將混合物B倒入混合物A中，并加入防腐劑，攪拌混勻后，用純化水定溶至100%(V/V),得到混合物C;(4)將混合物C通過高壓均質(zhì)機(jī)進(jìn)行均質(zhì)化；(5)通過兩次循環(huán)，質(zhì)后得到癸氧喹酯混懸液。根據(jù)本發(fā)明，所述的主藥癸氧喹酯用量為330%(W/V)。上述的潤濕劑包括但不限于乙醇、丙二醇中的一種或組合。但不限于月桂醇硫酸鈉、十二烷基磺酸鈉、失水山梨醇單月桂酸酯、失水山梨醇單硬脂酸酯、聚山梨酯80、失水山梨醇單油酸酯、聚氧乙烯失水山梨醇單油酸酯等的一種或組合。，上述的絮凝劑包括但不限于枸櫞酸鹽、枸櫞酸氫鹽、酒石酸鹽、酒石酸氫鹽。上述的穩(wěn)定劑為乙二胺四乙酸二鈉。上述的防腐劑包括但不限于苯酚、尼泊金甲酯、尼泊金乙酯、尼泊金丙酯等的一種或組合。本發(fā)明的目的還提供一種癸氧喹酯混懸液在治療雞球蟲病上的用途。具體實施方式實施例1:組分組分用量癸氧喹酯6.0g乙醇5.0ml月桂醇硫酸鈉0.06g甘油10.0g枸櫞酸氫鈉2.0g乙二胺四乙酸二鈉0.05g苯酚0.50g尼泊金甲酯0.03g純化水84ml配置方法(1)先將枸櫞酸氫鈉2.0g溶入10ml純化水中，再加入癸氧喹酯6.0g、乙醇3.Oml和月桂醇硫酸鈉0.06g，攪拌得混合物A。(2)再取60ml純化水，加入尼泊金甲酯0.03g，加熱溶解后放置至室溫，再加入乙二胺四乙酸二鈉0.05g和甘油8.0g，攪拌得混合物B。(3)將混合物B倒入混合物A中，并加入苯酚0.50g，攪拌混勻后，再加入純化水14ml，得到混合物C。(4)將混合物C通過高壓均質(zhì)機(jī)在100Mpa的壓力下進(jìn)行均質(zhì)化。(5)通過2次循環(huán)均質(zhì)后得到固體粒徑在5-500nm之間癸氧喹酯混懸液。實施例2:組分組分用量癸氧喹酯8.Og乙醇5.Oml月桂醇硫酸鈉0.lg甘油12.0g枸櫞酸氫鈉2.5g乙二胺四乙酸二鈉0.05g苯酚0.5g尼泊金甲酯0.03g純化水82ml配置方法(1)先將枸櫞酸氫鈉2.5g溶入10ml純化水中，再加入癸氧喹酯8.Og、乙醇5.Oml和月桂醇硫酸鈉O.lg，攪拌得混合物A。(2)取60ml純化水，加入尼泊金甲酯0.03g，加熱溶解后放置至室溫，再加入乙二胺四乙酸二鈉0.05g和甘油8.Og，攪拌得混合物B。(3)將混合物B倒入混合物A中，并加入苯酚0.5g，攪拌混勻后，再加純化水12ml，得到混合物C。(4)將混合物C通過髙壓均質(zhì)機(jī)在60Mpa的壓力下進(jìn)行均質(zhì)化。(5)通過2次循環(huán)均質(zhì)后得到固體粒徑在100-1000nm之間癸氧喹酯混懸液。實施例3:組分7組分用量癸氧喹酯30.0g乙醇5.0ml十二烷基磺酸鈉0.06g聚山梨酯80l.Og丙二醇5.Og甘油5.Og羧甲基纖維素鈉2.0g枸櫞酸氫鈉2.Og乙二胺四乙酸二鈉0.05g苯酚0.5g尼泊金甲酯0.03g純化水83ml配置方法-(1)先將枸櫞酸氫鈉2.0g溶入10ml純化水中，再加入癸氧喹酯30g、乙醇5.0ml和十二烷基磺酸鈉0.06g，攪拌得混合物A。(2)取60ml純化水，加入尼泊金甲酯0.3g，加熱溶解后放置至室溫，再加入乙二胺四乙酸二鈉0.05g、羧甲基纖維素鈉2.0g、甘油5.0g和丙二醇5.0g，攪拌得混合物B。(3)將混合物B倒入混合物A中，并加入苯酚，攪拌混勻后，再加入純化水13ml，得到混合物C。(4)將混合物C通過高壓均質(zhì)機(jī)60MPa進(jìn)行均質(zhì)化。(5)通過2次循環(huán)均質(zhì)后得到固體粒徑在100-1000nm之間癸氧喹酯混懸液。實施例4:穩(wěn)定性試驗結(jié)果1.加速實驗為了測定本制劑的穩(wěn)定性，根據(jù)《獸藥穩(wěn)定性試驗技術(shù)規(guī)范》的要求，特設(shè)定如下條件下的加速試驗，對實施例l、實施例2、實施例3的產(chǎn)品進(jìn)行試驗，試驗條件將實施例l、實施例2、實施例3的三種癸氧喹酯混懸液樣品放入溫度為40攝氏度、相對濕度為75%的恒溫箱內(nèi)，于第l、2、3、6個月分別取樣，并分別觀察性狀并測定含量，實驗結(jié)果如下表1實施例1的癸氧喹酯混懸液加速穩(wěn)定試驗結(jié)果8<table>tableseeoriginaldocumentpage9</column></row><table>從檢驗結(jié)果看，$施例1、實施例2、實施例3的癸氧喹酯混懸液在加速穩(wěn)定性試驗期內(nèi)，性狀均沒有發(fā)生變化，沉降比均大于0.9，說明分散性很好，含量沒有顯著變化，各項指標(biāo)均符合要求，說明本品穩(wěn)定性好。實施例5:臨床療效試驗臨床療效試驗1材料1.1藥物實施例1(癸氧喹酯混懸液)；癸氧喹酯預(yù)混劑(含量為6%)，由國內(nèi)生產(chǎn)廠家提供。1.2動物l日齡黃金褐蛋公雛200只，飼養(yǎng)于消毒嚴(yán)格的網(wǎng)上，自由采食和飲水，常規(guī)飼養(yǎng)。詞養(yǎng)至10日齡，采集糞便檢查，確定無球蟲感染。1.3球蟲株柔嫩艾美耳球蟲豪頓株(￡z^7eL3H0ughtonstrain)，由南京農(nóng)業(yè)大學(xué)提供。1.4試劑與器材用于球蟲培養(yǎng)、計數(shù)的常規(guī)試劑和器材。2方法2.1預(yù)備試驗通過預(yù)試驗，確定每只雞感染球蟲卵囊數(shù)。預(yù)試結(jié)果為每只雞感染5X104個卵囊。2.2試驗分組選擇體重均勻、健康的雞180只，分成I、II、III、IV、V、VI六組，每組30只雞，設(shè)3個重復(fù)，每個重復(fù)10只雞，均飼養(yǎng)在無球蟲的條件下。6個組分別為健康對照組(不感染不給藥組)、陽性對照組(感染不給藥組)、癸氧喹酯預(yù)混劑對照組(30mg/kg)和低劑量癸氧喹酯混懸液組(20mg/kg飼料)，中劑量癸氧喹酯混懸液組(30mg/kg飼料)，高劑量癸氧喹酯混懸液組(40mg/kg飼料)。在整個試驗過程中，所有組的飼料及用具均嚴(yán)格分開，以防健康對照組受球蟲感染。試驗采用混詞法給藥。連續(xù)飼喂至試驗結(jié)束。除健康對照組外，其他各組雞只在14日齡時用滴管經(jīng)口滴服柔嫩艾美耳球蟲卵囊(5X104個/只)。2.3臨床觀察與記錄感染后，每日3次觀察雞只的健康狀況、飲水和采食情況，記錄各組雞的發(fā)病和死亡情況，并進(jìn)行血便記分。于感染后第7天，全部剖殺試驗雞，觀察并記錄各組雞只的盲腸病變，并計算病變值。計算糞便中卵囊排出量，計算盲腸內(nèi)容物卵囊數(shù)，并計算卵囊值，最后計WK^HWWB^WWM效。2.4藥效指標(biāo)2.4.1相對增重率相對增重率(％)=感染投藥組的平均增重/不感染不投藥組的平均增重X讓。2.4.2存活率存活率(％)=存活只數(shù)/參試雞數(shù)乂100%2.4.3血便記分按0分表示100%的糞便不帶血，+1表示25%的糞便帶血，+2表示50%的糞便帶血，+3表示75%^糞便帶血，+4表示100%的糞便帶血。2.4.4病變值按Reid等的記分標(biāo)準(zhǔn)對盲腸病變記分。病變值-每組平均病變記分XlO。為0011時，卵囊值為0;當(dāng)OPG值為011110時，卵囊值為l;當(dāng)OPG值為210510時，卵囊值為10;當(dāng)0PG值為6101010時，卵囊值為20;當(dāng)0PG值》1110時，卵囊值為40。2.4.6抗球蟲指數(shù)(ACI)ACI=(增重率+存活率)-(病變值+卵囊值)。當(dāng)抗球指數(shù)M80者為高效；160180為中效；〈160者為低效；〈120者為無效。3結(jié)果與分析3.1抗球蟲效果由表1可知，中劑量癸氧喹酯混懸液組(V組)的ACI值為199.6，比癸氧喹酯預(yù)混劑組(III組)高了31.80%。高劑量癸氧喹酯混懸液組(VI組)的ACI值為200.8，比癸氧喹酯預(yù)混劑組(ni組)高了33.00%。3.2增重效果由表1可知，中劑量癸氧喹酯混懸液組(V組)的相對增重率比癸氧喹酯預(yù)混劑組(III組)高了9.3%;高劑量癸氧喹酯混懸液組(VI組)的相對增重率比癸氧喹酯預(yù)混劑組(ni組)高了10.4%。3.3分析相同劑量的癸氧喹酯混懸液和癸氧喹酯預(yù)混劑相比，癸氧喹酯混懸液不論在抗球蟲效果和增重效果上都要比癸氧喹酯預(yù)混劑效果有很大提升。表l對雛雞人工感染球蟲卵囊的藥效試驗組別始重/&只—1末重/g-只—1增重/&只—1增重率/%存活率％病變值卵囊值血便記分ACII60.2±3.0144.2±12.284.0±6.7100.0100.0000200.0II59.7±2.4116.7±14.957.0±7.667.963.334.242.03.355.0III59.6±2.9136.4±13.176.8±6.991.493.34.912.00,6167.8IV58.7±2.6134,5±12.775.7±7.690.2卯.O6.714.01.1159.9V59.2±2.5143.8±14.684.6±8.3跳7100.01.000.1199.6VI58.9±2.9144.4±15.785.5±7.2101.8跳01.000200.81權(quán)利要求1、一種可有效均勻分散在水中的癸氧喹酯混懸液，其特征是本制劑是以癸氧喹酯為主藥，并加以適當(dāng)?shù)乃幬镙o料，制成的混懸劑。2、根據(jù)權(quán)利要求1所述的混懸劑，其特征是由以下組分混合配制而成癸氧喹酯含量為330%(W/V)，潤濕劑115%(V/V)、表面活性劑0.01°/。2.0%'(W/V)、助懸劑520%(W/V)、絮凝劑12.5%(W/V)和穩(wěn)定劑0.010.05%(W/V)、防腐劑0.010.6%(W/V)、純化水6594%(V/V)組成。3、根據(jù)權(quán)利要求1或2，濕潤劑包括乙醇、丙二醇中的一種或組合，用量為115%(V/V)。4、根據(jù)權(quán)利要求1或2，表面活性劑包括月桂醇硫酸鈉、十二烷基磺酸鈉、失水山梨醇單月桂酸酯、失水山梨醇單硬脂酸酯、聚山梨酯80、失水山梨醇單油酸酯、聚氧乙烯失水山梨醇單油酸酯等的一種或組合。用量為0.0線2.0%(W/V)，最佳用量為0.051.5%(W/V)。5、根據(jù)權(quán)利要求1或2，助懸劑包括甘油、山梨醇、海藻酸鈉、羧甲基纖維素、羧甲基纖維素鈉等的一種或組合，最佳為甘油，用量為520%(W/V)。.6、根據(jù)權(quán)利要求1或2，絮凝劑包括枸櫞酸鹽、枸櫞酸氫鹽、酒石酸鹽、酒石酸氫鹽，最佳選擇為枸櫞酸氫鈉；用量為12.5%(W/V)，最佳用量為22.5%(W/V)。，7、根據(jù)權(quán)利要求1或2，穩(wěn)定劑為乙二胺四乙酸二鈉0.010.05%(W/V);防腐劑為苯酚、尼泊金甲酯、尼泊金乙酯、尼泊金丙酯等的一種或組合，用量為0.010.6%(W/V)。8、根據(jù)權(quán)利要求17，一種可有效均勻分散在水中的癸氧喹酯混懸液的制備方法其特征在于它包括以下步驟(1)先將絮凝劑22.5%(W/V)溶入少量純化水中，再加入主藥癸氧喹酯330%(W/V)、潤濕劑115%(V/V)和表面活性劑0.01%2.0%，攪拌得混合物A;(2)取適量純化水，加入穩(wěn)定劑0.010.05%(W/V)和助懸劑520%(W/V)，攪拌得混合物B;'(3)將混合物B倒入混合物A中，并加入防腐劑0.010.6%(W/V)，攪拌混勾后，用純化水定溶至100%(V/V)，得到混合物C;(4)將混合物C通過高壓均質(zhì)機(jī)進(jìn)行均質(zhì)化；(5)通過兩次循環(huán)均質(zhì)后得到癸氧喹酯混懸液。9、根據(jù)權(quán)利要求18任一項的癸氧喹酯混懸液在制備治療雞球蟲病的藥物中的用途。全文摘要本發(fā)明涉及一種可有效分散在水中的癸氧喹酯混懸液及其制備方法，所述混懸劑包含癸氧喹酯3～30％(W/V)，潤濕劑1～15％(V/V)、表面活性劑0.01％～2.0％(W/V)、助懸劑5～20％(W/V)、絮凝劑1～2.5％(W/V)和穩(wěn)定劑0.01～0.05％(W/V)、防腐劑0.01-0.6％(W/V)。本發(fā)明所述的藥物原液可均勻穩(wěn)定的分散在水中，實現(xiàn)家禽群體給藥，不但解決了方便給藥、藥物穩(wěn)定、減少浪費(fèi)、確保劑量的問題，而且還擁有了藥物成本低、藥物的載藥量增加、不堵塞飲水器等新的特性。使得癸氧喹酯在治療雞球蟲病時能夠充分的發(fā)揮藥物作用。文檔編號A61K9/10GK101496786SQ20081015439公開日2009年8月5日申請日期2008年12月24日優(yōu)先權(quán)日2008年12月24日發(fā)明者劉愛玲,李旭東申請人:天津瑞普生物技術(shù)股份有限公司