專利名稱：調(diào)控富含鳥嘌呤和/或富含鳥嘌呤胞嘧啶的核酸之表達的方法及藥物組合物的制作方法
調(diào)控富含鳥嘌呤和/或富含鳥嘌呤胞嘧啶的核酸之表達的
方法及藥物組合物相關的交互參考數(shù)據(jù)本案主張2007年11月22日向美國專利商標局(United States Patentand Trademark Office, USPTO)所提出的美國臨時申請案US60/989，831的優(yōu)先權。所述臨時 申請案以的內(nèi)容已并于以下內(nèi)容中供作參考。本案發(fā)明說明中將可能提及或是討論專利、專利申請案以及其它各類刊物的一些 參考文獻。這些討論和/或論述僅是用來澄清本案的說明內(nèi)容，并不代表這些參考文獻就 是本案的先前技藝。這些提及或是討論的參考文獻內(nèi)容已并于以下內(nèi)容中供作參考。發(fā)明所屬之技術領域大體上來說，本案是與調(diào)控核酸表達的方法與藥物組合物有關的申請案。進一步 地說，本案涉及了調(diào)控富含鳥嘌呤(Guanosine)和/或富含鳥嘌呤(Guanosine)胞嘧啶 (Cytosine)的核酸之表達的方法及藥物組合物。先前技術沙利度胺(thalidomide)是一個外消旋酸的化合物(racemiccompound)，其化學 名為 2-(2，6-dioxo-3-piperidinyl)-lH-iso-indole-l，3(2H)-dione。盡管具有高度致畸 型性的風險，沙利度胺仍是治療癌癥以及免疫疾病的新興藥品(Franks等人，2004)。另外， 因為具有抗血管發(fā)生(anti-angiogeneic)以及免疫調(diào)節(jié)(immunomodulatory)的活性，沙 利度胺也被認為是難治性及復發(fā)性多發(fā)性骨髓瘤(refractory multiple myeloma)有效 的藥物(Singhal等人，1999)。事實上，除了骨髓瘤(myeloma)以外，沙利度胺也已在不同 類型的癌癥治療中被廣泛地測試著，例如結(jié)腸直腸癌(colorectal cancer) (Franks等人，
2004)、骨髓增生異常綜合征(myelodysplasticsyndrome)、瓦爾登斯特倫氏巨球蛋白血 癥(Waldenstrom，s macroglobulinemia)、骨髓纖維化并發(fā)骨髓異常增生(myelofibrosis with myeloid metaplasia)、 腦 瘤(brain tumor) (Eleutherakis-Papaiakovou 等人，2004)、急性骨髓性白血病(acute myeloid leukemia)、非霍奇金淋巴瘤 (Non-Hodgkin' slymphoma)、月市癌(lung cancer)、乳癌(breast cancer)、神經(jīng)內(nèi)分泌瘤 (neuroendocrine tumors)、月干細胞癌(hepatocellular carcinoma) (Kumar 等人，2004)、 套細胞淋巴瘤(mantle cell lymphoma)、胰臟癌(pancreaticcancer) (Teo 等人，2005)、腎 細胞癌(renal cell carcinoma)、前列腺癌(prostate cancer)、卡波西肉瘤(Kaposi，s sarcoma)、黑色素瘤(melanoma) (Richardson 等人，2002)以及催乳素瘤(prolactinoma) (Mukdsi等人，2006)。一些免疫失調(diào)的臨床研究更進一步地支持沙利度胺的免疫調(diào)節(jié) 特性，例如在類風濕性關節(jié)炎(rheumatoid arthritis)、痳瘋結(jié)節(jié)性紅斑(erythema nodosum leprosum)、貝切特癥候群(Behcet，ssyndrome)、類肉瘤(Sarcoidosis) > 恩病(Crohn，s disease) (Franks 等人，2004)、口 腔潰蕩(aphthous ulcers) (Teo 等人，
2005)、口疫性口腔炎(aphthousstomatitis)、紅斑性狼疫(lupus erythematosus)、結(jié)節(jié) 性癢疹(Prurigo nodularis) (Wu 等人，2005)、僵直性脊椎炎(ankylosing spondylitis) (Scalapino 等人，2003)、慢性心臟衰竭(chronicheart failure) (GulIestad 等人，2005)以及異體骨髓與腎臟移植后所發(fā)生的移植物對抗宿主疾病(graft-versus-host disease, 簡稱GVHD) (Richardson等人，2002 ；Matthews等人，2005)等等免疫失調(diào)疾病的臨床研究上 都已支持沙利度胺的免疫調(diào)節(jié)特性。沙利度胺的抗血管發(fā)生活性也已在血管發(fā)生相關的糖 尿病(angiogenesis-associateddiabetic diseases),例如糖尿病視網(wǎng)膜病變(diabetes retinopathy) (Bosco等人，2003)中被確認。雖然這些數(shù)據(jù)已提出沙利度胺在治療上述疾 病和/或失調(diào)中具有療效，但是沙利度胺的作用機制卻仍不清楚。有些報告則指出沙利度 胺可降低血漿中堿性成纖維細胞生長因子(basicfibroblast growth factor，簡稱bFGF) 含量，以及沙利度胺在神經(jīng)膠質(zhì)瘤(glioma)與多發(fā)性骨髓瘤(multiple myeloma)的治療 中具有效果(Fine等人，2000 ;Neben等人，2001 ;Sato等人，2002)。治療過程中，血清和/ 或血漿中之堿性成纖維細胞生長因子含量變化意味著堿性成纖維細胞生長因子可能是沙 利度胺的作用標的。 堿性成纖維細胞生長因子屬于成纖維細胞生長因子(fibroblastgrowth factor, 簡稱FGF)基因家族的成員，而且是一個強力且廣泛表達的自泌(autocrine)和/或旁 泌(paracrine)分裂素(mitogen)。堿性成纖維細胞生長因子會參與許多生理機制， 例如包括刺激中胚層(mesoderm)的形成、血管發(fā)生、平滑肌細胞的增生以及調(diào)控神經(jīng) 系統(tǒng)和眼睛的發(fā)育(Bikfalvi等人，1997)。目前已知許多腫瘤疾病中都有堿性成纖維 細胞生長因子過度表達的現(xiàn)象，例如腦瘤(brain tumor)、前列腺癌(prostatecancer) (Eleutherakis-Papaiakovou 等人，2004)、催乳素瘤(prolactinoma) (Mukdsi 等人， 2006)、乳癌(breast cancer) (Fuhrmann-Benzakein 等人，2000)、頭頸部癌(head and neck cancer)(soft tissuesarcoma)、l^f 細—(renal cell carcinoma) >
結(jié)腸直腸癌(colorectalcarcinoma)、肝細胞癌(hepatocellular carcinoma)、卵巢癌 (ovariancarcinoma) > ^ f^I IMlS (endometrial carcinoma) (Poon ^ Α 2001) > Hfe^ 瘤(melanoma) (Ugurel 等人,2001)、肺癌(lung cancer) (Ueno 等人，2001 ；Iwasaki 等人， 2004) > ^ M I^I ^ (Kaposi' s sarcoma) (Samaniego 等人，1998)、月夷 (pancreatic cancer) (Yamanaka 等人，1993)，多發(fā)性骨髓瘤(multiple myeloma) (Sezer 等人，2001)、 骨髓增生異常綜合征(myelodysplastic syndrome)、白血病(leukemia) (Aguayo 等 人，2000)、非霍奇金淋巴瘤(non-Hodgkin’ s lymphoma) (Giles等人，2004)以及膀胱 癌(bladder cancer) (Nguyen等人，1994)等。另外，堿性成纖維細胞生長因子也與睡 目民失調(diào)(sleep disorder) (Okumura 等人，1996)、免疫失調(diào)(immunological disorder) 以及血管發(fā)生相關疾病有關，例如類風濕性關節(jié)炎(rheumatoid arthritis)、骨關節(jié)炎 (osteoarthritis) (Nakashima 等人，1994)、克羅恩病(Crohn's disease) (Di Sabatino 等 人，2004)、貝切特病(Behcet' s disease) (Erdem 等人，2005)、全身性硬化癥(systemic sclerosis) (Lawrence 等人，2006)、結(jié)節(jié)性多動脈炎(polyarteritis nodosa) (Kikuchi 等人，2005)、春季角膜結(jié)膜炎(vernalkeratoconjunctivitis) (Leonardi 等人，2000)、 牛皮癬(psoriasis) (Andrys等人，2007)、增殖性糖尿病視網(wǎng)膜病變(proliferative diabeticretinopathy) (Boulton 等人，1997)、年齡相關的黃斑退行性改變(age-related macular degeneration) (Frank, 1997)、哮喘(asthma) (Hoshinoet al.,2001)以及月市動脈 高血壓(pulmonary arterial hypertension) (Benist等人，2004)。過去也有報導指出血管 異生(neoangiogenesis)是慢性發(fā)炎疾病(chronic inflammatory diseases),例如類風濕性關節(jié)炎 (rheumatoid arthritis)牛皮癬(psoriasis)以及視網(wǎng)膜病變(retinopathy)
(Andrys等人，2007)的免疫致病效應(immunopathogenesis)中不可或缺的一部份。堿性 成纖維細胞生長因子的分泌與傳統(tǒng)通過內(nèi)質(zhì)網(wǎng)-高基氏體(endoplasmic reticulum(簡稱 ER)-Golgi)來分泌的方式并不相同(Mignatti等人，1992)。除了分泌形式外，堿性成纖維 細胞生長因子還存在有另外四種核標的形式(nuclear-target-forms)，這四種形式是以上 游序列相同閱讀框架(inframe)中的不同胞嘧啶-尿嘧啶-鳥嘌呤密碼子(CUG codon)藉 由內(nèi)源性核醣體結(jié)合位置有關的機制(internalribosome entry site (IRES) -dependent mechanism)來轉(zhuǎn)譯。內(nèi)源性核醣體結(jié)合位置的結(jié)構(gòu)是由堿性成纖維細胞生長因子轉(zhuǎn)錄子 富含鳥嘌呤(G-rich bFGF transcripts)的氨基端(amino-terminal，簡稱 N-terminal) 所形成(Florkiewicz等人，1989 ；Vagner等人，1995)。低分子量堿性成纖維細胞生長因子 (low molecular weight bFGF，簡稱LMW bFGF)是通過使用堿性成纖維細胞生長因子轉(zhuǎn)錄 子的第一個腺嘌呤-尿嘧啶-鳥嘌呤密碼子(AUG codon)來轉(zhuǎn)譯；而高分子量堿性成纖維 細胞生長因子(high molecular weight bFGF，簡稱HMW bFGF)是通過使用上游的CUG密 碼子(CUG codons)來轉(zhuǎn)譯。雖然低分子量和高分子量堿性成纖維細胞生長因子的羧基端 (carboxyl-terminal，簡稱C-terminal)部分是一樣的，但是因為在細胞內(nèi)的分布不同，以 及高分子量堿性成纖維細胞生長因子的氨基端延伸(N-terminal extension)，因此目前相 信兩者的功用并不相同(Quarto等人，2005)。目前已知堿性成纖維細胞生長因子在細胞核 內(nèi)的堆積，或是高分子量堿性成纖維細胞生長因子對低分子量堿性成纖維細胞生長因子的 比例增加，都是腫瘤進程(tumorprogression)的指標(Fukui等人，2003)。在癌細胞中的 堿性成纖維細胞生長因子過度表達與晚期腫瘤(advanced tumor stage)相關，另外，堿性 成纖維細胞生長因子的過度表達也與胰臟癌的預后較差(poorprognosis)相關(Yamanaka 等人，1993)。 堿性成纖維細胞生長因子轉(zhuǎn)錄子的表達是受到富含鳥嘌呤的啟動子(G-rich promoter)所控制，所述富含鳥嘌呤的啟動子可形成二級結(jié)構(gòu)，例如鳥嘌呤-四聯(lián)體 (G-quadruplexes)，所述鳥嘌呤-四聯(lián)體會與某些脫氧核醣核酸(deoxyribonucleic acid，簡稱DNA)結(jié)合藥作用，進而改變所述啟動子的活性(Hurley等人，2000)。目前已 知有多種基因具有富含鳥嘌呤(G-rich)和/或富含鳥嘌呤胞嘧啶(GC-rich)的區(qū)，例 如血管內(nèi)皮生長因子(vascular endothelial growth factor，簡稱VEGF)基因、血小板 衍生生長因子-A (platelet-derived growth factor-A，簡稱PDGF-A)基因、缺氧誘導 因子-1 α (hypoxia-inducible factor-1 α，簡稱 HIF-1 α)基因、B 細胞淋巴瘤 / 白血 病-2(B-cell CLL/lymphoma 2，簡稱Bcl_2)基因、鳥類骨髓母細胞增多癥病毒致癌基 因同源物(avian myeloblastosis viraloncogene homolog(v-myb)，簡禾爾 c_Myb)、哈迪 氏-祖克曼氏4貓科肉瘤病毒致癌基因同源物(Hardy-Zuckerman 4 feline sarcoma viraloncogene homolog (v-kit)，c-Kit) Nil Ifi^ (retinoblastoma, Rb)基因、ret原癌基因(ret proto-oncogene，簡稱Ret)、鳥類骨髓細胞增多癥病毒癌 基因同源物(avianmyelocytomatosis viral oncogene homolog,簡禾爾 c_MYC)、克斯汀氏 鼠肉瘤-2 病毒致癌基因同源物(Kirsten rat sarcoma-2 viral (v-Ki-ras 2) oncogene homolog，簡稱 KRAS) (Qin 等人，2008)、II 型腫瘤壞死因子受體(type II tumor necrosis factor (簡稱TNF)receptor)基因(Bethea等人，1997)、胰島素樣生長因子 1 (insulin-likegrowth factor-1，簡稱IGF-1)、胰島素樣生長因子1受體(簡稱IGF-1 receptor)基因、 整聯(lián)蛋白(integrin)基因、四次跨膜蛋白(tetraspanins)基因與人類端粒酶反轉(zhuǎn)錄酶 (human telomerase reverse transcriptase,簡禾爾hTERT)基因(Drucker 等人，2003)。除了 富含鳥嘌呤的啟動子(G-rich promoter)的轉(zhuǎn)錄調(diào)控以外，堿性成纖維細胞生長因子轉(zhuǎn)錄 子的氨基端延伸(N-terminalextension)也是富含鳥嘌呤(G_rich)的，它們可以調(diào)控不同 堿性成纖維細胞生長因子的異構(gòu)體(isoform)的轉(zhuǎn)譯。核醣核酸轉(zhuǎn)錄子(ribonucleicacid transcript，簡稱RNA transcript)的富含鳥嘌呤(G_rich)的區(qū)可做為一些脫氧核醣核酸 (DNA)結(jié)合藥的作用標的，在與結(jié)合藥作用后可調(diào)控異構(gòu)體(isoform)的表達。導致沙利度胺的致畸形性原因，推測在于其會與胎兒的脫氧核醣核酸(DNA)和核 醣核酸(RNA)結(jié)合，不論是通過口服投藥或是非經(jīng)腸胃的(parenteral)方式投藥，而且沙 利度胺的戊二酰亞胺部分(thalidomide glutarimide moiety)與脫氧核醣核酸(DNA)結(jié) 合時可能會改變所結(jié)合的脫氧核醣核酸(DNA)的二級結(jié)構(gòu)(Bakay等人，1968 ；Huang等人， 1990 ；Huang等人，1999 ；Nicholls, 1966)。Drucker等人則指出沙利度胺可以在濃度超過 12. 5微克/毫升的較高濃度下通過富含鳥嘌呤胞嘧啶的啟動子(GC-rich promoter)來降 低轉(zhuǎn)錄子量(Drucker等人，2003)。此外，一些美國專利也已指出沙利度胺可以用來治療免疫疾病以及癌癥， 另外還有一些美國專利指出沙利度胺可用來抑制血管發(fā)生，例如美國專利U. S. Pat. No. 6，124，322、U. S. Pat. No. 6，235，756、U. S. Pat. No. 6，617，354、U. S. Pat. No. 6，914，067、 U. S. Pat. No. 7，230，012、以及 U. S. Pat. No. 7，435，726 等等。美國專利U. S. Pat. No. 6，124，322的標題為“用于治療免疫疾病的沙利度胺靜脈 注身寸形式(Intravenous form of thalidomide for treatingimmunological diseases)"， 其涉及一種水性沙利度胺溶液，所述水性沙利度胺溶液適合做為一種通過非經(jīng)腸胃的形 式來使用沙利度胺的方式，進一步地說，該專利案是與沙利度胺的靜脈注射形式有關。美 國專利U. S. Pat. No. 6，235756的標題為“通過沙利度胺來抑制血管發(fā)生的方法與組成物 (Methods and compositions for inhibition of angiogenesisby thalidomide)，，，其 涉及一種通過服用沙利度胺以及相關化合物以避免多余的血管發(fā)生的方法，特別是一種 用于與血管發(fā)生或是與血管發(fā)生有關連的疾病中而通過服用沙利度胺以及相關化合物來 避免多余的血管發(fā)生的方法。美國專利U. S. Pat. No. 6，423，321的標題為“用于治療聽力 喪失白勺細—素 齊Ll (Cytokine antagonists for the treatment ofsensorineural hearing loss) ”，其與一種抑制腫瘤壞死因子(TNF)和/或介白素-1 (interleukin-1，簡 稱IL-1)拮抗劑的作用以便治療人體聽力喪失的方法有關，所述方法是通過服用腫瘤壞死 因子(TNF)和/或介白素_1(簡稱IL-1)拮抗劑來減少會對所述人體的聽覺器官產(chǎn)生影 響的發(fā)炎反應，或是通過對所述人體投以具有療效的腫瘤壞死因子(TNF)拮抗劑和/或介 白素-I(IL-I)拮抗劑來調(diào)控會影響所述人體的聽覺器官的免疫反應。美國專利U. S. Pat. No. 6，617354的標題為“用于穩(wěn)定抗血管發(fā)生物質(zhì)的作用以及讓抗血管發(fā)生物質(zhì)有作用 白勺方^去(Method ofstabilizing and potentiating the action of anti-angiogenic substances) ”，其涉及在治療細胞增生失調(diào)中所使用的抗血管發(fā)生試劑，所述細胞增生失 調(diào)包含癌癥以及其它因無法控制的體內(nèi)血管發(fā)生活性所造成的失調(diào)。美國專利U. S. Pat. No. 6，914，067的標題為“用于治療結(jié)腸直腸癌的組合物與方法(Compositions andmethods for the treatment of colorectalcancer)，，，其與包含沙利度胺以及愛萊諾 迪肯(irinotecan)的藥物組合物有關，也與治療結(jié)腸直腸癌的方法有關，并且與減少或 是避免愛萊諾迪肯副作用的方法有關。美國專利U. S. Pat. No. 7，230，012的標題為“沙 利度胺的藥物組合物與劑量形式(Pharmaceutical compositionsand dosage forms of thalidomide)”，其與包含沙利度胺與藥物可接受地前驅(qū)藥物、鹽類、溶劑、水合物以及 其籠形包合物(clathrates)的藥物組合物與劑量形式有關。此外，美國專利U. S. Pat. No. 7，435，726的標題為“治療癌癥的組合物與方法(Compositions and methods for thetreatment of cancer) ”，其與包含沙利度胺以及抗癌劑(特別是拓樸異構(gòu)酶抑制劑 (topoisomerase inhibitor))的藥物組合物有關，也和治療癌癥的方法有關，并且也和減 少或是避免與抗癌劑(例如拓樸異構(gòu)酶抑制劑)副作用的方法有關。雖然沙利度胺已被用來治療癌癥與免疫疾病，以及抑制血管發(fā)生，但是它的作用 機制卻仍然不清楚；因此找出沙利度胺的作用機制對用于癌癥、免疫失調(diào)以及血管發(fā)生相 關疾病的方法和/或藥物組合物而言將是有幫助的。

發(fā)明內(nèi)容就本案的一方面來看，本案涉及一種調(diào)控堿性成纖維細胞生長因子的表達的方 法，所述方法包含以沙利度胺與所述堿性成纖維細胞生長因子上富含鳥嘌呤區(qū)和/或富含 鳥嘌呤胞嘧啶區(qū)相互作用的步驟。較佳地，其中所述沙利度胺的濃度介于100微克/毫升與0. 01微克/毫升間。較佳地，其中所述沙利度胺的濃度介于10微克/毫升與0. 1微克/毫升間。較佳地，其中所述鳥嘌呤區(qū)和/或鳥嘌呤胞嘧啶區(qū)的鳥嘌呤胞嘧啶含量超過 50%。較佳地，其中所述沙利度胺是通過投藥技術來持續(xù)釋放。較佳地，其中所述沙利度胺是經(jīng)過包裹的。就另一方面而言，本案涉及一種調(diào)控一堿性成纖維細胞生長因子的表達的藥物組 合物，所述藥物組合物包含沙利度胺。就另一方面來看，本案涉及一種治療與堿性成纖維細胞生長因子的表達有關連的 一疾病的方法，所述方法包含以沙利度胺與所述堿性成纖維細胞生長因子上富含鳥嘌呤區(qū) 和/或富含鳥嘌呤胞嘧啶區(qū)相互作用的步驟。較佳地，其中所述與堿性成纖維細胞生長因子的表達有關連的疾病是與所述堿性 成纖維細胞生長因子過度反應有關連的疾病。較佳地，其中所述與堿性成纖維細胞生長因子的表達有關連的疾病選自癌癥、免 疫失調(diào)疾病、血管發(fā)生相關疾病或睡眠障礙。較佳地，其中所述癌癥選自腦瘤(brain tumor)、前列腺癌(prostatecancer)、胰 臟癌(pancreatic cancer)、乳癌(breast cancer)、月市癌(Iungcancer)、頭頸部癌(head and neck cancer) ^MDtfg (bladder cancer)(renal cell carcinoma) ^^jM 腸癌(colorectal carcinoma)、月干細胞癌(hepatocellular carcinoma)、卵巢癌(ovarian carcinoma)、子宮內(nèi)膜癌(endometrial carcinoma)、催乳素瘤(prolactinoma)、黑色素瘤 (melanoma)、卡波西肉瘤(Kaposis，s sarcoma)、軟組織肉瘤(soft tissue sarcoma)、多發(fā)性骨髓瘤(multiple myeloma)、骨髓增生異常綜合征(myelodysplastic syndrome)、非霍 奇金淋巴瘤(non-Hodgkin lymphoma)或白血病(leukemia)。較佳地，其中所述免疫失調(diào)疾病選自類風濕性關節(jié)炎(rheumatoidarthritis)、 骨關節(jié)炎(osteoarthritis)、貝切特病(Behcet' s disease)、全身性硬化癥(systemic sclerosis)、結(jié)節(jié)性多動脈炎(polyarteritisnodosa)、牛皮癬(psoriasis)、哮喘 (asthma)、春季角膜結(jié)膜炎(vernalkeratoconjunctivitis)或克羅恩病(Crohn，s disease)。較佳地，其中所述血管發(fā)生相關疾病選自肺動脈高壓(pulmonaryarterial hypertension)、^I M Sl 個生 # H (rheumatoid arthritis)、 Bf喘(asthma), ψ J^ 0 (psoriasis)、增殖性糖尿病性視網(wǎng)膜病變(proliferativediabetic retinopathy)或與年 φ^WHSEiI^T(age-relatedmacular degeneration)。就另一方面來看，本案涉及一種治療與一堿性成纖維細胞生長因子之表達有關連 的一疾病的藥物組合物，其中所述藥物組合物是通過所述堿性成纖維細胞生長因子上富含 鳥嘌呤區(qū)和/或富含鳥嘌呤胞嘧啶區(qū)來治療所述疾病。所述藥物組合物包含沙利度胺。就另一方面來看，本案提及一種調(diào)控具有富含鳥嘌呤區(qū)和/或富含鳥嘌呤胞嘧啶 區(qū)的一脫氧核醣核酸和/或一核醣核酸的表達的方法，所述方法包含以一濃度介于100微 克/毫升與0.01微克/毫升間的沙利度胺與所述鳥嘌呤區(qū)和/或所述鳥嘌呤胞嘧啶區(qū)相 互作用的步驟。較佳地，其中所述脫氧核醣核酸和/或所述核醣核酸選自堿性成纖維細胞 生長因子、血管內(nèi)皮生長因子(VEGF)、血小板衍生生長因子-A(PDGF-A)、缺氧誘導因 子-1 α (HIF-1 α )、B細胞淋巴瘤/白血病_2 (Bcl_2)、鳥類骨髓母細胞增多癥病毒致癌 基因同源物(c-Myb)、哈迪氏-祖克曼氏4貓科肉瘤病毒致癌基因同源物(c-Kit)、視網(wǎng) 膜母細胞瘤(Rb)、ret原癌基因(Ret)、鳥類骨髓細胞增多癥病毒癌基因同源物(c_MYC)、 克斯汀氏鼠肉瘤-2病毒致癌基因同源物(KRAS)、II型腫瘤壞死因子受體(type II TNF receptor)、胰島素樣生長因子1 (IGF-1)、胰島素樣生長因子1受體(IGF-1 receptor)、整 聯(lián)蛋白(integrin)或四次跨膜蛋白(tetraspanins)、人類端粒酶反轉(zhuǎn)錄酶(hTERT)。較佳地，其中所述沙利度胺是通過投藥技術來持續(xù)釋放。較佳地，其中所述沙利度胺是通過包裹物來持續(xù)釋放。就另一方面而言，本案提及一種調(diào)控具有富含鳥嘌呤區(qū)和/或富含鳥嘌呤胞嘧啶 區(qū)的一脫氧核醣核酸和/或一核醣核酸的藥物組合物。該藥物組合物包含介于100微克/ 毫升與0. 01微克/毫升間的沙利度胺。就另一方面而言，本案涉及一種治療與具有富含鳥嘌呤區(qū)和/或富含鳥嘌呤胞嘧 啶區(qū)的一脫氧核醣核酸和/或一核醣核酸的表達有關連的疾病的方法，其中所述方法包含 以濃度介于10微克/毫升與0. 1微克/毫升間的沙利度胺與所述鳥嘌呤區(qū)和/或所述鳥 嘌呤胞嘧啶區(qū)相互作用的步驟。較佳地，其中所述疾病選自癌癥、免疫失調(diào)疾病、血管發(fā)生相關疾病或睡眠障礙。就另一方面而言，本案涉及一種用于治療與具有富含鳥嘌呤區(qū)和/或富含鳥嘌呤 胞嘧啶區(qū)的一脫氧核醣核酸和/或一核醣核酸的表達有關連的疾病的藥物組合物，其中所 述藥物組合物包含濃度介于100微克/毫升與0. 01微克/毫升間的沙利度胺。
就另一方面來看，本案涉及一種增加沙利度胺對于堿性成纖維細胞生長因子的生 物利用度的方法，所述方法包含以緩慢釋放技術(slow-release technology)來控制所述 沙利度胺的濃度的步驟。較佳地，其中所述沙利度胺的濃度介于10微克/毫升與0. 1微克/毫升間。就再一方面來看，本案涉及一種增加沙利度胺對于堿性成纖維細胞生長因子的生 物利用度的藥物組合物，其中所述藥物組合物包含緩慢釋放載體與所述沙利度胺，且所述 沙利度胺位于所述緩慢釋放載體中。以上這些內(nèi)容以及本案的其它內(nèi)容將可在結(jié)合以下的較佳實施例的說明與圖式 內(nèi)容后而變得較為明確，雖然可進行一些變化以及調(diào)整，但是仍不脫本案的精神以及所揭 露的新穎概念范圍。所附的圖式說明了本案的一個或是更多實施例，而且在配合相關的說明內(nèi)容后， 兩者一并用來解釋本案的原理。其中，在圖式中盡可能使用相同的參考符號來代表相同或 是類似的實施例組件。圖式簡單說明圖IA表達出沙利度胺對于人類神經(jīng)膠質(zhì)瘤細胞U-87MG的堿性成纖維細胞生長因 子轉(zhuǎn)錄子(bFGF transcript)含量的效果。其中沙利度胺(0_10微克/毫升)是在添加至 細胞進行3小時處理之前由儲存溶液新鮮配制。圖IB表達出了沙利度胺對于U-87MG細胞的堿性成纖維細胞生長因子轉(zhuǎn)錄子 (bFGF transcript)含量的效果。其中沙利度胺(0_10微克/毫升)是在添加至細胞進行 12小時處理之前由儲存溶液新鮮配制。圖IC表達出了將在培養(yǎng)基中進行預培養(yǎng)后的沙利度胺對于U-87MG細胞的堿性成 纖維細胞生長因子轉(zhuǎn)錄子(bFGF transcript)含量的效果。其中沙利度胺(0_10微克/毫 升)是在添加至細胞進行3小時處理之前，先與培養(yǎng)基一起培養(yǎng)9個小時。圖ID表達出了沙利度胺對于U-87MG細胞的堿性成纖維細胞生長因子轉(zhuǎn)錄 子(bFGF transcript)含量的效果。其中添加微脂體包裹的沙利度胺(1 iposomal thalidomide) (0-10微克/毫升)至細胞中以進行12或是24小時的處理。圖2A表達出了沙利度胺對于U-87MG細胞的堿性成纖維細胞生長因子蛋白質(zhì)表達 的效果。其中添加微脂體包裹的沙利度胺(liposomalthalidomide) (0-10微克/毫升)至 細胞中以進行12小時的處理，而堿性成纖維細胞生長因子蛋白質(zhì)的表達是通過熒光激活 細胞分選儀(fluorescence-activated cell sorting，簡稱 FACS)來分析。圖2B表達出了沙利度胺對于堿性成纖維細胞生長因子蛋白質(zhì)的細胞內(nèi)分布效 果。其中添加自由態(tài)的沙利度胺(free-form thalidomide)或是微脂體包裹的沙利度胺 (liposomal thalidomide) (0. 1-10微克/毫升)至U-87MG細胞中以進行12小時的處理， 而堿性成纖維細胞生長因子蛋白質(zhì)的分布是通過熒光顯微鏡(fluorescence microscopy) 來檢測。脫氧核醣核酸(DNA)是通過熒光染料赫斯特33258 (Hoechst 33258)來染色以做 為核的標記，放大倍數(shù)為400倍。圖2C表達出了沙利度胺對于堿性成纖維細胞生長因子的多種異構(gòu)體(multiple isoforms)的蛋白質(zhì)表達的效果。其中添加自由態(tài)的沙利度胺(free-form thalidomide) 或是微脂體包裹的沙利度胺(liposomalthalidomide) (0. 1-10微克/毫升)至U-87MG細胞中以進行12小時的處理，而細胞性堿性成纖維細胞生長因子的含量是通過西方墨點法 (Western blot)來分析。圖3A表達出了沙利度胺對于細胞增生(cell proliferation)的效果。其中添 加自由態(tài)的沙利度胺(free-form thalidomide)或是微脂體包裹的沙利度胺(liposomal thalidomide) (0-100微克/毫升)至U-87MG細胞中以進行72小時的處理，而相對細胞生 長(relative cell growth)是通過刃天青檢驗法來(Resazurin assay)來檢測。圖3B表達出了沙利度胺對于U-87MG細胞的非固著依賴性生長 (anchorage-independent growth)的抑制效果。細胞是在包含自由態(tài)的沙利度胺 (free-form thalidomide)或是微脂體包裹的沙利度胺(Iiposomalthalidomide) (0-10 微 克/毫升)的軟洋菜膠(soft agar)中進行培養(yǎng)。在相關實驗開始后14天對細胞群落 (colony)進行拍照。圖3C表達出了沙利度胺對于U-87MG細胞的非固著依賴性生長 (anchorage-independent growth)的抑制效果。細胞是在包含自由態(tài)的沙利度胺 (free-form thalidomide)或是微脂體包裹的沙利度胺(Iiposomalthalidomide) (0-10 微 克/毫升)的軟洋菜膠(soft agar)中進行培養(yǎng)。在相關實驗開始后14天對細胞群落 (colony)進行計數(shù)。圖3D表達出了沙利度胺對于球狀體(spheroids)的解聚集作用 (disaggregation)以及堿性成纖維細胞生長因子對沙利度胺解聚集的逆轉(zhuǎn)(reversal)效 果。細胞分別在有外加堿性成纖維細胞生長因子與沒外加堿性成纖維細胞生長因子但是含 沙利度胺(0-10微克/毫升)的培養(yǎng)基中懸浮培養(yǎng)。球狀體(spheroids)是使用相位差顯 微鏡(phasecontrast microscope)進行拍攝，放大倍數(shù)為100倍。圖3E表達出了沙利度胺對于U-87MG細胞的立體生長(three-dimension growth) 的抑制效果。細胞在包含沙利度胺(0-10微克/毫升)的培養(yǎng)基中懸浮培養(yǎng)。分析聚集百 分t匕(aggregation percentage)。圖4A表達了沙利度胺對于U-87MG細胞中堿性成纖維細胞生長因子啟動子所控 制的增強型綠色熒光蛋白(enhanced green fluorescentprotein，簡稱EGFP)報告基因 (reporter gene)表達的抑制效果。細胞穩(wěn)定地轉(zhuǎn)染(transfect)入質(zhì)體pbFGF-EGFP。在 經(jīng)過3小時的沙利度胺(0-10微克/毫升)處理后，以流式細胞儀(flow cytometer)來檢 測增強型綠色熒光蛋白轉(zhuǎn)錄子(EGFP transcript)的熒光表達狀況。圖4B表達了沙利度胺對于U-87MG細胞中堿性成纖維細胞生長因子啟動子所控 制的增強型綠色熒光蛋白(enhanced green fluorescentprotein，簡稱EGFP)報告基因 (reporter gene)表達的抑制效果。細胞穩(wěn)定地轉(zhuǎn)染(transfect)入質(zhì)體pbFGF-EGFP。 在經(jīng)過3小時的沙利度胺(0-10微克/毫升)處理后，以實時反轉(zhuǎn)錄聚合酶連鎖反 應(real-timereverse transcription polymerase chain reaction，簡禾爾 real-time RT-PCR)來檢測增強型綠色熒光蛋白轉(zhuǎn)錄子(EGFP transcript)的表達狀況。圖5A是質(zhì)體pLMW-IRES與質(zhì)體pHMW_IRES的概要表達圖。圖5B表達了沙利度胺在U-87MG細胞中對于低分子量內(nèi)源性核醣體結(jié)合位置 (LMW-IRES)有關的轉(zhuǎn)譯(translation)的抑制效果。細胞以如圖5A所示的雙順反子載體 (bicistronic vector)質(zhì)體pLMW-IRES進行穩(wěn)定地轉(zhuǎn)染(transfect)，并經(jīng)過12小時的沙利度胺(0-10微克/毫升)處理。通過計算水母冷光酶(Renilla luciferase，簡稱LucR) 對螢火蟲冷光酶(firefly luciferase，簡稱LucF)的比例來決定內(nèi)源性核醣體結(jié)合位置 (IRES)的活性。圖5C表達了沙利度胺在U-87MG細胞中對于高分子量內(nèi)源性核醣體結(jié)合位置 (HMW-IRES)有關的轉(zhuǎn)譯(translation)的抑制效果。細胞以如圖5A所示的雙順反子載體 (bicistronic vector)質(zhì)體pHMW-IRES進行穩(wěn)定地轉(zhuǎn)染(transfect)，并經(jīng)過12小時的沙 利度胺(0-10微克/毫升)處理。通過計算水母冷光酶(Renilla luciferase，簡稱LucR) 對螢火蟲冷光酶(firefly luciferase，簡稱LucF)的比例來決定內(nèi)源性核醣體結(jié)合位置 (IRES)的活性。圖6A呈現(xiàn)了 一部份的堿性成纖維細胞生長因子的互補脫氧核醣核酸 (complementary DNA，簡稱cDNA)序列。其中富含鳥嘌呤(G_rich)的片段是通過實線框來 標示；非富含鳥嘌呤(non-G-rich)的對照組脫氧核醣核酸(control DNA)片段則是以虛線 框標示。圖6B是與富含鳥嘌呤(G-rich)的堿性成纖維細胞生長因子的脫氧核醣核酸 (DNA)片段一起培養(yǎng)的沙利度胺的紫外光-可見光吸收(UV-VIS absorbance)光譜。圖6C是與非富含鳥嘌呤(non-G-rich)的堿性成纖維細胞生長因子對照組脫 氧核醣核酸(control DNA)片段一起培養(yǎng)的沙利度胺的紫外光-可見光吸收(UV-VIS absorbance) H^10圖7A是一個西方墨點法(Western blot)結(jié)果；其呈現(xiàn)了堿性成纖維細胞生長因 子降低克隆(bFGF knock-down clones)以及對照組克隆(control clone)，與內(nèi)部對照組 甘油!！三石粦酸去S1BI (glyceraldehyde-3-phosphate dehydrogenase，簡稱 GAPDH)比較， 堿性成纖維細胞生長因子蛋白的表達量顯著地減少了?？寺【幪?至3號分別代表衍生自 表達堿性成纖維細胞生長因子短發(fā)夾核醣核酸(shorthairpin RNA，簡稱shRNA)編號1至 3號的U-87MG細胞的克隆。圖7B呈現(xiàn)了堿性成纖維細胞生長因子降低克隆(bFGF knock-downclones)以及 對照組克隆(control clone)的細胞增生(cell proliferation)能力。圖7C呈現(xiàn)了沙利度胺對于堿性成纖維細胞生長因子降低克隆(bFGF knock-down clones)的非固著依賴性細胞生長(anchorage-ind印endent growth)的抑制效果以及通 過外加堿性成纖維細胞生長因子的處理而回復的情況。細胞是在包含自由態(tài)的沙利度胺 (free-form thalidomide)或是微脂體包裹的沙利度胺(Iiposomalthalidomide) (0-10 微 克/毫升)的軟洋菜膠(soft agar)中，以外加堿性成纖維細胞生長因子或是不外加堿性 成纖維細胞生長因子的方式進行培養(yǎng)。在14天后對細胞群落(colony)進行拍照。圖7D呈現(xiàn)了沙利度胺對于堿性成纖維細胞生長因子降低克隆(bFGF knock-down clones)的非固著依賴性細胞生長(anchorage-ind印endent growth)的抑制效果以及通 過外加堿性成纖維細胞生長因子的處理而回復的情況。細胞是在包含自由態(tài)的沙利度胺 (free-form thalidomide)或是微脂體包裹的沙利度胺(Iiposomalthalidomide) (0-10 微 克/毫升)的軟洋菜膠(soft agar)中，以外加堿性成纖維細胞生長因子或是不外加堿性 成纖維細胞生長因子的方式進行培養(yǎng)。在14天后進行細胞群落(colony)的計數(shù)。圖8A呈現(xiàn)了來自堿性成纖維細胞生長因子降低克隆(bFGFknock-down clones)以及對照組克隆(control clone)的球狀體(spheroids)型態(tài)。以相位差顯微鏡(phase contrast microscope)來拍攝球狀體(spheroids)。圖8B呈現(xiàn)了來自堿性成纖維細胞生長因子降低克隆(bFGFknock-down clones) 以及對照組克隆(control clone)的球狀體(spheroids)直徑。圖8C呈現(xiàn)了來自堿性成纖維細胞生長因子降低克隆(bFGFknock-down clones) 以及對照組克隆(control clone)的球狀體中的細胞數(shù)目。圖9是一個呈現(xiàn)沙利度胺可以在至少兩個層面上調(diào)控堿性成纖維細胞生長因子 的表達的示意圖。實施方式一般而言，本說明書中所使用的術語都有其在本發(fā)明背景領域中的通常意義，以 及其在特定背景中使用時的意義。某些用以描述本發(fā)明的術語將于后討論，或是在說明書 中的其它地方討論，以供做為從事者了解本發(fā)明說明的額外指導。為了方便起見，某些術語 可能會被強調(diào)，例如使用斜體字和/或引號來表達。使用強調(diào)的方式表達并不影響術語的 范圍與意義，在相同背景下，不管術語是否有被強調(diào)，該術語的范圍與意義仍是相同的。值 得注意的是同一件事可能會以超過一種方式來說明；因此，在本文中會使用可替換性地語 言以及同義詞來表達任何一個或更多的術語，不論該術語是否有在文中進行精辟的闡述或 是討論，使用可替換性地語言以及同義詞都沒有特定的意義。本案會提供某些術語的同義 詞。一個或更多常用的同義詞并不排除其它同義詞的使用。本說明書中任何部分所提到的 例子(包含所討論的任何術語例子)都是用來說明而已，并沒有限制本發(fā)明的范圍、意義或 是任何當作例子來說明的術語。同樣地，本發(fā)明也不受限于本說明書所提供的各種實施例 中。除非有特別地定義，否則在本說明書中所提及的技術性或是特定術語都有其對于 在本發(fā)明所屬領域中具通常知識者一般所了解的相同意義。至于意見分歧的部分，本申請 文件(包含定義的部分)將會進行控管。本文中所提到的“約”、“大約”或是“大概”一般是指一指定數(shù)值或是范圍的20 % 以內(nèi)，較佳地是指10%以內(nèi)，而更佳地是指5%以內(nèi)。所提到的數(shù)值量只是接近值，意指如 果沒有明確表示，則“約”、“大約”或是“大概”這些術語可以經(jīng)推想而知。本發(fā)明綜述在本案的一個實施例中，本案使用了一個較習知臨床血清治療用量(1.8-10微克 /毫升)(Eleutherakis-Papaiakovou等人，2004))為低的沙利度胺(0. 1微克/毫升)， 而在U-87MG人類神經(jīng)膠質(zhì)瘤細胞中調(diào)降了堿性成纖維細胞生長因子轉(zhuǎn)錄子的表達；其 中沙利度胺是通過以堿性成纖維細胞生長因子轉(zhuǎn)錄子中富含鳥嘌呤和/或富含鳥嘌呤胞 嘧啶的啟動子為標的而作用。本案的一較佳實施例也呈現(xiàn)了沙利度胺是以劑量依存方式 (dose-dependent manner) (0. 1、1與10微克/毫升)來調(diào)降不同堿性成纖維細胞生長因子 異構(gòu)體(isoform)的表達，其是因為富含鳥嘌呤和/或富含鳥嘌呤胞嘧啶的內(nèi)源性核醣體 結(jié)合位置(IRES)的活性改變所致。因為已知沙利度胺非常容易在溶液中水解(Eriksson等 人，1998)，本案更提供了一種通過緩慢釋放技術，例如以微脂體(liposome)包裹的方式， 而提升沙利度胺在濃度介于0. 1-10微克/毫升中的生物有效性的方法。本發(fā)明的一個較佳實施例說明了堿性成纖維細胞生長因子中富含鳥嘌呤和/或富含鳥嘌呤胞嘧啶的啟動子和/或富含鳥嘌呤和/或富含鳥嘌呤胞嘧啶的編碼序列 (coding sequence)是沙利度胺的主要作用標的。藉由以沙利度胺做為一個工具，將可發(fā) 現(xiàn)堿性成纖維細胞生長因子在腫瘤生長特征(hallmark of tumorigenicity)-腫瘤非固 著依賴性生長(anchorage-ind印endent growth)-中扮演著非常重要的角色。此實施例 中的沙利度胺分子機制提供了一個阻止癌癥、血管發(fā)生相關疾病、免疫失調(diào)以及睡眠障礙 的新方法，其中沙利度胺是通過使用藥物釋放技術而維持在相對較低的有效治療劑量，舉 例來說，所使用的藥物釋放技術包含以微脂體(liposome)、N_三甲基殼聚醣(N-trimethyl chitosan，簡稱TMC)以及酸堿值依賴型緩慢釋放(pH_d印endent sustained release)技 術。另外，此實施例更提供了一個對于治療與堿性成纖維細胞生長因子高度表達有關疾病 的有效指標，取代了隨機的臨床實驗。范例無意去限制本發(fā)明的范圍，以下說明根據(jù)本發(fā)明之實施例所使用的示范性裝置、 設備、方法以及相關的結(jié)果。應注意的是，在范例中所使用的標題與子標題只是為了供讀者 易于閱讀，而并不限制本發(fā)明的范圍。另外，以下也會說明并揭露一些理論，然而，不論他們 的對錯，只要本發(fā)明可以在不需要根據(jù)特別理論方案而能實施時，這些說明及揭露都不該 限制了本發(fā)明的范圍。范例 1沙利度胺在U-87MG人類神經(jīng)膠質(zhì)瘤細胞細胞中調(diào)降了堿性成纖維細胞生長因子 核醣核酸含量為了測試沙利度胺的抗腫瘤效果是否是通過調(diào)降堿性成纖維細胞生長因子的 表達來進行，本范例使用高度惡性的人類神經(jīng)膠質(zhì)瘤細胞株(high grade human glioma cell line) U-87MG(Ke等人，2000)進行研究，選用所述細胞株的原因在于其具有高基礎 含量(high basal level)的堿性成纖維細胞生長因子。U-87MG細胞是購自美國菌種保 存中心(American Type Culture Collection，ATCC，Rockville，MD)，且是培養(yǎng)在包含 10%熱去活化(heat inactivated)的胎牛血清(fetal bovineserum，簡稱 FBS ;Gibco) 以及抗生素，例如盤尼西林G(penicillin G ；Sigma-AIdrich)和鏈霉素(str印tomycein ； Sigma-Aldrich)，白勺 DMEM J^ # ^ (Dulbecco ‘ s modified Eagle ‘ s medium, DMEM ； Gibco)中，培養(yǎng)溫度是攝氏37度，于含有百分之五的二氧化碳與百分之九十五的空氣的 潮濕培養(yǎng)箱中。沙利度胺(臺灣東洋藥品工業(yè)股份有限公司，臺灣)先溶解在二甲基亞 砜(dimethyl sulfoxide，簡稱DMSO ;Sigma_Aldrich)以形成50毫克/毫升的儲存溶液 (stock solution)，然后再以培養(yǎng)基來稀釋到所需要的濃度。二甲基亞砜在最終培養(yǎng)基中 的最高濃度是萬分之二。U-87MG細胞內(nèi)的堿性成纖維細胞生長因子核醣核酸(RNA)量是使用實時反轉(zhuǎn)錄 IK'pfBSSIfii JxlS (real-time reverse-transcriptionpolymerase chain reaction，簡禾爾 real-time RT-PCR)進行評估。U-87MG細胞以濃度為0、0. 1、1和10微克/毫升的沙利 度胺處理3及12小時，再使用冰磷酸鹽緩沖液(phosphate buffered saline,簡稱PBS) 沖洗兩次，細胞內(nèi)的核醣核酸是以核醣核酸純化試劑(RNA-Bee RNA isolationsolvent ； Tel-test)進行分離及純化。取總量5微克的核醣核酸(RNA)以反轉(zhuǎn)錄酶(AMV reverse transcriptase ；Promega)反轉(zhuǎn)錄成互補脫氧核醣核酸(complementary DNA,簡稱 cDNA)。反轉(zhuǎn)錄的互補脫氧核醣核酸(cDNA)樣本使用核酸定量系統(tǒng)(機型為ABI Prism 7700 SequenceDetection System ；Applied Biosystems)以及焚光定量試劑套組(SYBRGreen Master Mix kit ；Applied Biosystems)進行實時聚合酶連鎖反應(real-time PCR)的分 析。聚合酶連鎖反應(PCR)使用的引子(primer)如表一所示，是以軟件(Primer Express software ；Applied Biosystems)所設計。本范例實驗中，使用人類甘油酸三磷 酸去氫酶(GAPDH)引子(序列表編號為SEQ ID NO. 1和SEQ ID N0. 2)與堿性成纖維細 胞生長因子引子(序列表編號為SEQID N0. 3和SEQ ID N0. 4)。聚合酶連鎖反應(PCR) 反應條件如下攝氏95度先進行變性(denaturation) 10分鐘，再以攝氏95度進行變性 (denaturation) 15 秒、攝氏 55 度黏合(annealing) 20 秒、攝氏 72 度延長(extension) 40 秒，并重復這三個反應進行40個循環(huán)，最后以攝氏72度反應40秒。相對基因表達量的 計算是以細胞內(nèi)人類甘油醛三磷酸去氫酶(GAPDH)的表達量作為內(nèi)部參考(internal reference)，其計算公式參考核酸定量系統(tǒng)(機型為ABI Prism 7700 Sequence Detection System ；AppliedBiosystems)的說明書為2_“CT。U-87MG細胞以濃度為0. 1-10微克/毫升 的沙利度胺處理3小時后，細胞內(nèi)堿性成纖維細胞生長因子的核醣核酸量明顯地降低(圖 1Α)。此實驗中，沙利度胺的有效劑量甚至比被報導過的有效劑量(3-6微克/毫升)更低 (Vacca等人，2005)。然而，細胞以沙利度胺處理較長的時間(12小時)后，其抑制堿性成纖 維細胞生長因子的表達的效果卻消失(

圖1Β)。表一
權利要求
一種調(diào)控堿性成纖維細胞生長因子的表達的方法，所述方法包含以沙利度胺與所述堿性成纖維細胞生長因子上富含鳥嘌呤區(qū)和/或富含鳥嘌呤胞嘧啶區(qū)相互作用的步驟。
2.如權利要求1所述的方法，其中所述沙利度胺的濃度介于100微克/毫升與0.01微克/毫升間。
3.如權利要求1所述的方法，其中所述沙利度胺的濃度介于10微克/毫升與0.1微克/毫升間。
4.如權利要求1所述的方法，其中所述富含鳥嘌呤區(qū)和/或富含鳥嘌呤胞嘧啶區(qū)的鳥 嘌呤胞嘧啶含量超過50%。
5.如權利要求1所述的方法，其中所述沙利度胺通過投藥技術來持續(xù)釋放。
6.如權利要求1所述的方法，其中所述沙利度胺是被載體包裹的。
7.—種通過堿性成纖維細胞生長因子上富含鳥嘌呤區(qū)和/或富含鳥嘌呤胞嘧啶區(qū)來 調(diào)控堿性成纖維細胞生長因子的表達的藥物組合物，所述藥物組合物包含沙利度胺與藥物 載體。
8.一種治療與堿性成纖維細胞生長因子表達相關疾病的方法，所述方法包含以沙利度 胺與所述堿性成纖維細胞生長因子上富含鳥嘌呤區(qū)和/或富含鳥嘌呤胞嘧啶區(qū)相互作用 的步驟。
9.如權利要求8所述的方法，其中該疾病是堿性成纖維細胞生長因子過度表達相關疾病。
10.如權利要求9所述的方法，其中所述堿性成纖維細胞生長因子過度表達相關疾病 選自癌癥、免疫失調(diào)疾病、血管發(fā)生相關疾病或睡眠障礙。
11.如權利要求10所述的方法，其中所述癌癥選自腦瘤(braintumor)、前列腺癌 (prostate cancer)、月夷臟癌(pancreatic cancer)、乳癌(breast cancer)、月市癌(lung cancer)、L (head and neck cancer) > W S3 Ifi I (renal cell carcinoma) > 腸直腸癌(colorectal carcinoma)、月干細胞癌(hepatocellular carcinoma)、卵巢癌 (ovarian carcinoma)、子宮內(nèi)膜癌(endometrial carcinoma)、膀胱癌(bladder cancer)、 催乳素瘤(prolactinoma) 、漂色素瘤(melanoma)、卡波西肉瘤(Kaposis，ssarcoma)、軟 組織肉瘤(soft tissue sarcoma)、多發(fā)性骨髓瘤(multiplemyeloma)、骨髓增生異常綜 合征(myelodysplastic syndrome)、非霍奇金淋巴瘤(Non-Hodgkin Lymphoma)或白血病 (leukemia)0
12.如權利要求10所述的方法，其中所述免疫失調(diào)疾病選自類風濕性關節(jié)炎 (rheumatoid arthritis)、骨關節(jié)炎(osteoarthritis)、貝切特病(Behcet' s disease)、 全身性硬化癥(systemic sclerosis)、結(jié)節(jié)性多動脈炎(polyarteritis nodosa)、牛皮癬 (psoriasis)、哮喘(asthma)、春季角膜結(jié)膜炎(vernal keratoconjunctivitis)或克羅恩 病(Crohn， sdisease)0
13.如權利要求10所述的方法，其中所述血管發(fā)生相關疾病選自肺動脈高壓 (pulmonary arterial hypertension)(rheumatoid arthritis)、哮P^f (asthma)、牛皮癬(psoriasis)、增殖性糖尿病性視網(wǎng)膜病變(proliferative diabetic retinopathy) ^^^^tB^WItSEMift^l^^ (age-related macular degeneration)。
14.一種通過堿性成纖維細胞生長因子上富含鳥嘌呤區(qū)和/或富含鳥嘌呤胞嘧啶區(qū)來治療堿性成纖維細胞生長因子相關疾病的藥物組合物，所述藥物組合物包含沙利度胺與藥 物載體。
15.一種調(diào)控富含鳥嘌呤區(qū)和/或富含鳥嘌呤胞嘧啶區(qū)的脫氧核醣核酸和/或核醣核 酸的表達的方法，所述方法包含以濃度介于100微克/毫升與0. 01微克/毫升間的沙利度 胺與所述富含鳥嘌呤區(qū)和/或富含鳥嘌呤胞嘧啶區(qū)相互作用的步驟。
16.如權利要求15所述的方法，其中所述富含鳥嘌呤區(qū)和/或富含鳥嘌呤胞嘧啶區(qū)的 脫氧核醣核酸和/或核醣核酸選自堿性成纖維細胞生長因子、血管內(nèi)皮生長因子(VEGF)、 血小板衍生生長因子-A(PDGF-A)、缺氧誘導因子-1 α (HIF-1 α )、Bcl_2、c_Myb、c_Kit、視 網(wǎng)膜母細胞瘤(Rb)、Ret、c-MYC, KRAS, II型腫瘤壞死因子受體(typell TNF receptor), 胰島素樣生長因子l(IGF-l)、胰島素樣生長因子1受體(IGF-1 rec印tor)、整聯(lián)蛋白 (integrin)、四次跨膜蛋白(tetraspanins)或人類端粒酶反轉(zhuǎn)錄酶(hTERT)。
17.如權利要求15所述的方法，其中所述沙利度胺通過投藥技術來持續(xù)釋放。
18.如權利要求15所述的方法，其中所述沙利度胺是被包裹的。
19.一種調(diào)控具有富含鳥嘌呤區(qū)和/或富含鳥嘌呤胞嘧啶區(qū)的脫氧核醣核酸和/或核 醣核酸的表達的藥物組合物，其包含濃度介于100微克/毫升與0. 01微克/毫升間的沙利 度胺。
20.一種治療與富含鳥嘌呤區(qū)和/或富含鳥嘌呤胞嘧啶區(qū)的脫氧核醣核酸和/或核醣 核酸表達相關疾病的方法，所述方法包含以具有濃度介于10微克/毫升與0. 1微克/毫升 間的沙利度胺與所述富含鳥嘌呤區(qū)和/或富含鳥嘌呤胞嘧啶區(qū)相互作用的步驟。
21.如權利要求20所述的方法，其中所述疾病選自癌癥、免疫失調(diào)疾病、血管發(fā)生相關 疾病或睡眠障礙。
22.—種治療與富含鳥嘌呤區(qū)和/或富含鳥嘌呤胞嘧啶區(qū)的脫氧核醣核酸和/或核醣 核酸的表達相關疾病的藥物組合物，所述藥物組合物包含具有濃度介于100微克/毫升與 0. 01微克/毫升間的沙利度胺。
23.一種增加沙利度胺對于堿性成纖維細胞生長因子的生物利用度的方法，包含以緩 慢釋放技術(slow-release technology)來控制所述沙利度胺濃度的步驟。
24.如權利要求23所述的方法，其中所述的濃度介于10微克/毫升與0.1微克/毫升間。
25.一種增加沙利度胺對于堿性成纖維細胞生長因子的生物利用度的藥物組合物，其 包含位于緩慢釋放載體中的沙利度胺。
全文摘要
本案提出了調(diào)控富含鳥嘌呤(Guanosine)和/或富含鳥嘌呤(Guanosine)胞嘧啶(Cytosine)的核酸之表達的方法及藥物組合物。其中，所述方法包含以沙利度胺(thalidomide)和所述鳥嘌呤(Guanosine)和/或鳥嘌呤(Guanosine)胞嘧啶(Cytosine)作用的步驟；而所述藥物組合物包含沙利度胺(thalidomide)和一藥物載體。
文檔編號A61K31/445GK101970473SQ200880116879
公開日2011年2月9日 申請日期2008年10月24日 優(yōu)先權日2007年11月22日
發(fā)明者S·S·F·吳, 吳榮燦 申請人:S·S·F·吳;吳榮燦