專利名稱：沙棘油-聚乳酸-羥基乙酸共聚物微球及其制備方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種保健物質(zhì)沙棘油的緩釋微球，具體說是涉及一種沙棘油 一-聚乳酸一羥基乙酸共聚物微球及其制備方法。
背景技術(shù)：
沙棘(HippophaehamnoidesLinn)屬胡頹子科沙棘屬植物，又稱醋柳，是 我國古代藏醫(yī)、蒙醫(yī)常用藥物，1977年正式列入中國藥典。從沙棘種子中提取 的沙棘油活性成分有106種之多，不飽和脂肪酸高達(dá)68% ,維生素E含量大 于1 mg/g，還含有豐富的維生素K及類胡蘿卜素等成分。醫(yī)學(xué)研究表明，沙棘 油抗炎生肌，對消化系統(tǒng)的修補(bǔ)有良好作用。沙棘黃銅對心肌缺血，高血脂， 冠狀動脈硬化療效甚佳，并且還能殺死癌細(xì)胞，含有豐富的清除自由基作用 的超氧化物歧化酶(SOD)，是重要的抗衰老物質(zhì)。沙棘油中的生物活性物質(zhì) 在沙棘油中的特殊配比，協(xié)調(diào)并且增強(qiáng)了其抵抗和治療疾病的功效。經(jīng)臨床 驗證，沙棘油有扶正固本、健脾養(yǎng)胃、活血化淤、軟化血管、降脂保肝、提 高機(jī)體免疫力及治療和預(yù)防多種疾病的作用，尤其對癌癥有治療和輔助治療 的作用，對放療和化療引起的不適癥、消化道疾病及燒傷、燙傷均有一定療 效。
盡管沙棘油有如此良好的保健作用，但是由于其含有大量的不飽和脂肪 酸以及其他易氧化物質(zhì)，所以沙棘油產(chǎn)品都面臨一個易氧化問題。油脂的抗 氧化一般除了傳統(tǒng)的儲藏時遮光密閉外，多是添加抗氧化劑以延長油脂產(chǎn)品 貨架期。除了傳統(tǒng)的BHT、 TBHQ等人工合成抗氧化劑以外，張鞍靈等對于 沙棘和銀杏黃酮在沙棘油中的抗氧化功效也進(jìn)行了研究。而采用微膠囊化技 術(shù)，將精制的沙棘油制成沙棘油膠囊粉末，是目前延長沙棘油及其相關(guān)產(chǎn)品 的貨架期以及保質(zhì)期的一個熱點，通過這一技術(shù)也可以達(dá)到工業(yè)化生產(chǎn)目的， 使沙棘油微膠囊產(chǎn)品進(jìn)入市場，這對于防止沙棘油氧化變質(zhì)，為沙棘油保健 食品的開發(fā)，甚至保健藥品的開發(fā)提供價廉物美的沙棘油粉劑，都具有較大 實用價值。目前已經(jīng)有一些關(guān)于沙棘油微囊化的研究，葛寒英、聶斌英分別
3對于明膠、阿拉伯膠制備沙棘油微膠囊進(jìn)行了研究，并制出了包埋率相對較
好的產(chǎn)品。目前制備微球的一種新型壁材，聚乳酸-羥基乙酸共聚物(PLGA)， 由于其在體內(nèi)代謝最終產(chǎn)物為水和二氧化碳，中間產(chǎn)物乳酸是體內(nèi)的正常的 糖代謝產(chǎn)物，具有無毒性、無剌激性的優(yōu)點而在醫(yī)藥領(lǐng)域廣泛應(yīng)用，制作出 的藥品微膠囊突釋明顯減緩?？紤]將其應(yīng)用于沙棘油微囊制備，可能會獲得 較高的包埋率；又由于PLGA表面可以不斷更新,其表面不斷降解形成微孔, 緩慢暴露內(nèi)部包封的沙棘油，從而獲得較好的緩釋效果，更好的發(fā)揮保健作 用。但是經(jīng)査閱文獻(xiàn)，目前國內(nèi)尚無沙棘油PLGA微球及其相關(guān)實驗研究的 報道。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明目的正是為了提供一種以PLGA為基質(zhì)材料來制備沙棘油一聚乳 酸一羥基乙酸共聚物微球及其制備方法。該制備方法為W/0/W復(fù)乳干燥法 (又名溶劑揮發(fā)法、溶劑固化法和溶劑提取法)，用高分子材料PLGA為載 體材料包封沙棘油，在磁力攪拌的作用下制備出緩釋沙棘油微球。采用該方 法制備出的微球具有表面光滑圓整、顆粒規(guī)則無粘連、包埋良好的特點。 本發(fā)明的目的可通過下述技術(shù)措施來實現(xiàn)
本發(fā)明的沙棘油一聚乳酸一羥基乙酸共聚物微球包括被包裹封裝在包裹 物內(nèi)的沙棘油、以及由聚乳酸一羥基乙酸共聚物作為基質(zhì)成分制備而成的包 裹物。
本發(fā)明的沙棘油一聚乳酸一羥基乙酸共聚物微球的制備方法包括以下步
驟
a、 有機(jī)相的配制按體積比25 100:0 75取二氯甲垸和乙酸乙酯，配 制4ml混合液，
b、 聚乳酸一羥基乙酸共聚物(Polylactide-coglycolide,PLGA)的稱取 及溶解稱取聚乳酸一羥基乙酸共聚物120mg 170mg，加入a步驟所制備的 有機(jī)相中，并使之溶解；
c、 沙棘油的加入取沙棘油190lU 210ul，加入到b步驟所制備的好 的有機(jī)相溶液中，預(yù)乳化超聲處理lmin左右；
d、 水相的制備取2.2g 3.8g粉碎后呈細(xì)末狀的作為修飾劑的聚乙烯醇(PVA)，加入到25ml雙蒸水中，在45。C 55t:的條件下恒溫水浴加熱，使聚 乙烯醇徹底溶解；
e、乳化及微球制備將c步驟所制備的有機(jī)相倒入d步驟所制備的水相 中，進(jìn)行超聲乳化處理，得0/W乳狀液；進(jìn)行常壓磁力攪拌揮發(fā)有機(jī)溶劑， 隨后用離心機(jī)進(jìn)行離心處理，之后將得到的沉淀物用去離子水離心洗滌5次， 冷凍干燥約2d，得到產(chǎn)品，常規(guī)凍干保存。
本發(fā)明中所述聚乳酸一羥基乙酸共聚物(PLGA)中，聚乳酸(PLA)和 羥基乙酸(PGA)的質(zhì)量百分比為75%: 25%，其分子量約為2.0X104。
本發(fā)明中作為修飾劑的聚乙烯醇(PVA)的水解度為87 90%，聚合鏈節(jié) 數(shù)為1700 1750，重均分子量為1.0 2.0X104，溶液濃度為0 12.5%。
本發(fā)明e步驟中所述的超聲乳化處理工序中乳化超聲時間為10-30min， 乳化超聲功率為120-240W，且在室溫下進(jìn)行；磁力攪拌時間為3-5h左右，攪 拌速度為600-1500RPM;離心機(jī)速度為3500r/min，離心時間在5min左右。
本發(fā)明的有益效果如下
由于本發(fā)明采用合適的PLA:PGA質(zhì)量比的PLGA為包裹物基質(zhì)材料(生 物可降解材料)，不僅提高了沙棘油的包埋效果，并可形成形態(tài)良好的微球， 且既能防止易氧化的沙棘油與氧氣接觸，起到良好的抗氧化效果，又能起到 緩釋的效果，使給藥局部保持相對穩(wěn)定的沙棘油濃度并提高沙棘油的利用效 率。


圖1沙棘油-PLGA生物顯微鏡下IOO倍放大拍攝圖 圖2沙棘油-PLGA生物顯微鏡下400倍放大拍攝圖
具體實施例方式
本發(fā)明以下將結(jié)合實施例作進(jìn)一步詳述
以下實施例中所述聚乳酸一羥基乙酸共聚物(PLGA)中，聚乳酸(PLA) 和羥基乙酸(PGA)的質(zhì)量百分比為75%: 25%,其分子量約為2.0X10、作 為修飾劑的聚乙烯醇(PVA)的水解度為87 90%，聚合鏈節(jié)數(shù)為1700 1750， 重均分子量為1.0 2.0X104，溶液濃度為0 12.5%。實施例1:(1) 有機(jī)相的配制用移液管移取4ml的二氯甲烷，加入到小燒杯中。(2) PLGA的稱取及溶解在精密電子天平上稱取125mgPLGA，加入 制備的有機(jī)相中，使PLGA溶解。(3) 沙棘油的加入用移液槍移取200ul的沙棘油，加入到制備好的有 機(jī)相中，超聲處理lmin。(4) 水相的制備在電子天平稱取2.5g粉碎后呈細(xì)末狀的PVA，在150ml 燒杯中加入25ml雙蒸水，將PVA倒入，5(TC恒溫水浴加熱燒杯，使PVA徹 底溶解。(5) 乳化及微球制備將超聲后的有機(jī)相倒入PVA已溶解的水相中，以 150W的功率進(jìn)行10min的超聲乳化處理，得0/W乳狀液。隨后以600RPM 的轉(zhuǎn)速進(jìn)行常壓磁力攪拌揮發(fā)有機(jī)溶劑，隨后用離心機(jī)以3500r/min速度離心 5min，將得到沉淀用去離子水離心洗滌5次，冷凍干燥約2d，得到產(chǎn)品。實施例2:(1) 有機(jī)相的配制用移液管分別移取lml的二氯甲烷和3ml的乙酸乙 酯，配制4ml混合液，加入到小燒杯中。(2) PLGA的稱取及溶解在精密電子天平上稱取135mgPLGA，加入 制備的有機(jī)相中，使PLGA溶解。(3) 沙棘油的加入用移液槍移取200ul的沙棘油，加入到制備好的有 機(jī)相中，超聲處理lmin。(4) 水相的制備在電子天平稱取2.8g粉碎后呈細(xì)末狀的PVA，在150ml 燒杯中加入25ml雙蒸水，將PVA倒入，50'C恒溫水浴加熱燒杯，使PVA徹 底溶解。(5) 乳化及微球制備將超聲后的有機(jī)相倒入PVA己溶解的水相中，以 160W的功率進(jìn)行l(wèi)lmin的超聲乳化處理，得0/W乳狀液。隨后以600RPM 的轉(zhuǎn)速進(jìn)行常壓磁力攪拌揮發(fā)有機(jī)溶劑，隨后用離心機(jī)以3500r/min速度離心 5min，將得到沉淀用去離子水離心洗滌5次，冷凍干燥約2d，得到產(chǎn)品。實施例3:(1)有機(jī)相的配制用移液管分別移取1.5ml的二氯甲烷和2.5ml的乙 酸乙酯，酉己制4ml混合液，加入到小燒杯中。(2) PLGA的稱取及溶解在精密電子天平上稱取145mgPLGA,加入 制備的有機(jī)相中，使PLGA溶解。(3) 沙棘油的加入用移液槍移取200lU的沙棘油，加入到制備好的有 機(jī)相中，超聲處理lmin。(4) 水相的制備在電子天平稱取3.0g粉碎后呈細(xì)末狀的PVA，在150ml 燒杯中加入25ml雙蒸水，將PVA倒入，50'C恒溫水浴加熱燒杯，使PVA徹 底溶解。(5) 乳化及微球制備將超聲后的有機(jī)相倒入PVA已溶解的水相中，以 170W的功率進(jìn)行12min的超聲乳化處理，得0/W乳狀液。隨后以600RPM 的轉(zhuǎn)速進(jìn)行常壓磁力攪拌揮發(fā)有機(jī)溶劑，隨后用離心機(jī)以3500r/min速度離心 5min，將得到沉淀用去離子水離心洗滌5次，冷凍干燥約2d，得到產(chǎn)品。實施例4:(1) 有機(jī)相的配制用移液管分別移取各2ml的二氯甲烷和乙酸乙酯， 配制4ml混合液，加入到小燒杯中。(2) PLGA的稱取及溶解在精密電子天平上稱取155mgPLGA，加入 制備的有機(jī)相中，使PLGA溶解。(3) 沙棘油的加入用移液槍移取200ul的沙棘油，加入到制備好的有 機(jī)相中，超聲處理lmin。(4) 水相的制備:在電子天平稱取3.2g粉碎后呈細(xì)末狀的PVA，在150ml 燒杯中加入25ml雙蒸水，將PVA倒入，5(TC恒溫水浴加熱燒杯，使PVA徹 底溶解。(5) 乳化及微球制備將超聲后的有機(jī)相倒入PVA已溶解的水相中，以 180W的功率進(jìn)行10min的超聲乳化處理，得0/W乳狀液。隨后以600RPM 的轉(zhuǎn)速進(jìn)行常壓磁力攪拌揮發(fā)有機(jī)溶劑，隨后用離心機(jī)以3500r/min速度離心 5min，將得到沉淀用去離子水離心洗滌5次，冷凍干燥約2d，得到產(chǎn)品。實施例5:(1) 有機(jī)相的配制用移液管分別移取各3ml的二氯甲垸和lml的乙酸 乙酯，配制4ml混合液，加入到小燒杯中。(2) PLGA的稱取及溶解在精密電子天平上稱取165mgPLGA，加入 制備的有機(jī)相中，使PLGA溶解。G)沙棘油的加入用移液槍移取200ul的沙棘油，加入到制備好的有 機(jī)相中，超聲處理lmin。(4) 水相的制備在電子天平稱取3.5g粉碎后呈細(xì)末狀的PVA，在150ml 燒杯中加入25ml雙蒸水，將PVA倒入，5(TC恒溫水浴加熱燒杯，使PVA徹底溶解。(5) 乳化及微球制備將超聲后的有機(jī)相倒入PVA已溶解的水相中，以 190W的功率進(jìn)行l(wèi)lmin的超聲乳化處理，得O/W乳狀液。隨后以600RPM 的轉(zhuǎn)速進(jìn)行常壓磁力攪拌揮發(fā)有機(jī)溶劑，隨后用離心機(jī)以3500r/min速度離心 5min，將得到沉淀用去離子水離心洗滌5次，冷凍干燥約2d，得到產(chǎn)品。采用本發(fā)明所制備的微球表面光滑圓整，顆粒規(guī)則無粘連(圖1)，經(jīng)放 大觀測表明其包埋良好(圖2)。
權(quán)利要求
1、一種沙棘油-聚乳酸-羥基乙酸共聚物微球，其特征在于所述微球包括被包裹封裝在包裹物內(nèi)的沙棘油、以及由聚乳酸-羥基乙酸共聚物作為基質(zhì)成分制備而成的包裹物。
2、 一種用于權(quán)利要求1所述沙棘油一聚乳酸一羥基乙酸共聚物微球的制 備方法，其特征在于所述制備方法包括以下步驟a、 有機(jī)相的配制按體積比25 100:0 75取二氯甲烷和乙酸乙酯，配 制4ml混合液，b、 聚乳酸一羥基乙酸共聚物的稱取及溶解取聚乳酸一羥基乙酸共聚物120mg 170mg，加入a步驟所制備的有機(jī)相中，并使之溶解；c、 沙棘油的加入取沙棘油190lU 210ul，加入到b步驟所制備的好 的有機(jī)相溶液中，預(yù)乳化超聲處理lmin左右；d、 水相的制備取2.2g 3.8g粉碎后呈細(xì)末狀的作為修飾劑的聚乙烯醇， 加入到25ml雙蒸水中，在45。C 55。C的條件下恒溫水浴加熱，使聚乙烯醇徹 底溶解；e、 乳化及微球制備將c步驟所制備的有機(jī)相倒入d步驟所制備的水相 中，進(jìn)行超聲乳化處理，得0/W乳狀液；進(jìn)行常壓磁力攪拌揮發(fā)有機(jī)溶劑， 隨后用離心機(jī)進(jìn)行離心處理，之后將得到的沉淀物用去離子水離心洗滌5次， 冷凍干燥約2d，得到產(chǎn)品。
3、 根據(jù)權(quán)利要求2所述的制備方法，其特征在于所述聚乳酸一羥基乙 酸共聚物中，聚乳酸和羥基乙酸的質(zhì)量百分比為75%: 25%,其分子量約為 2.0 X104。
4、 根據(jù)權(quán)利要求2所述的制備方法，其特征在于作為修飾劑的聚乙烯 醇的水解度為87 90%，聚合鏈節(jié)數(shù)為1700 1750，重均分子量為1.0 2.0 X104，溶液濃度為0 12.5%。 ，
5、 根據(jù)權(quán)利要求2所述的制備方法，其特征在于e步驟中所述的超聲 乳化處理工序中乳化超聲時間為10-30min，乳化超聲功率為120-240W，且在 室溫下進(jìn)行；磁力攪拌時間為3-5h左右，攪拌速度為600-1500RPM;離心機(jī) 速度為3500r/min，離心時間在5min左右。
全文摘要
本發(fā)明涉及沙棘油—聚乳酸—羥基乙酸共聚物微球及其制備方法，該微球所包封的有效成分為沙棘油，其包裹物的基質(zhì)成分為聚乳酸-羥基乙酸共聚物(Polylactide-coglycolide，PLGA)。并以聚乙烯醇(PVA)作為修飾劑，通過W/O/W復(fù)乳干燥法(又名溶劑揮發(fā)法、溶劑固化法和溶劑提取法)，在機(jī)械攪拌作用下制備出該緩釋PLGA微球。在顯微鏡下觀測，微球表面光滑，球形圓整，粒徑均勻，包埋良好。
文檔編號A61K36/185GK101628019SQ20091006581
公開日2010年1月20日 申請日期2009年8月18日 優(yōu)先權(quán)日2009年8月18日
發(fā)明者劉國琴, 琳 李, 李崇達(dá) 申請人:河南工業(yè)大學(xué)