專利名稱：一種增加紅參中總皂苷、小極性皂苷和精氨酸雙糖苷含量的炮制方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明屬于中藥技術(shù)領(lǐng)域，具體涉及一種增加紅參中總皂苷、 小極性皂苷和精氨酸雙糖苷含量的炮制方法。
背景技術(shù)：
人參系五加科植物人參(尸朋oxgwwwgC.A.Meyer)的干燥根， 具有"主補五臟，安精神，定魂魄，止驚悸，明目，開心益智，久服 輕身延年"之功效。鮮參洗凈后直接干燥者稱為"生曬參"，蒸制后 干燥者稱為"紅參"。其中白參藥性偏涼，適用于氣陰不足；紅參性 質(zhì)偏溫，適用于氣虛陽虛者，久服紅參可以提高人體免疫力、抗疲勞、 抗輻射、抑制腫瘤、調(diào)整人體內(nèi)分泌系統(tǒng)。
人參含有多種化學成分，人參皂苷是其中最重要的一類活性成 分，具有多種藥理作用，對它的研究也是最深入和廣泛的，目前為止 已發(fā)現(xiàn)了40多種人參皂苷。其中某些小極性人參皂苷在抗癌、抗氧 化、抗病毒方面有比較明顯的效果，但是在普通加工的紅參中含量較 低。近年來，對人參非皂苷類成分的研究也很多。精氨酸雙糖苷(AFG)
就是在紅參加工過程中麥芽糖與精氨酸發(fā)生梅拉德反應(yīng)而生成的有 重要生物活性的非皂苷類水溶性成分，具有增強免疫，擴張血管及抑 制小腸麥芽糖酶活性等作用。實驗證明，AFG只有在加熱、酸性條 件下才能生成，并且無水環(huán)境有利于增加其含量。傳統(tǒng)的紅參加工方法一般是將鮮參洗凈直接放入鍋或?qū)蟽?nèi)，在 加熱的過程中，人參直接接觸水蒸汽，在這種情況下，人參皂苷容易 流失，產(chǎn)生較大損失(婁子恒，張立臣等.蒸參水濃縮物中人參皂苷的
含量測定.人參研究.2003,15 (1) :33);同時還易使麥芽糖和精氨 酸之間的梅拉德反應(yīng)向反方向即AFG分解的方向進行，造成AFG產(chǎn) 率下降(鄭毅男，孟祥穎等.紅參中新化合物精氨酸苷的生成機理及生 成條件的研究.中國藥物化學雜志.1997，7(3):217-220)。
發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的是提供一種一種增加紅參中總皂苷、小極性皂苷 和精氨酸雙糖苷含量的炮制方法。該方法將鮮參洗凈，放入密閉容器 內(nèi)，然后放入蒸參箱中，經(jīng)過升溫、蒸制、烘干，即得本炮制方法加
工的紅參。
本發(fā)明經(jīng)過大量研究發(fā)現(xiàn)在紅參加工過程中，蒸制溫度、蒸制 時間對人參皂苷的種類和含量以及梅拉德反應(yīng)的進行都有一定的影 響。傳統(tǒng)紅參在蒸制的過程中有部分皂苷損失，并且含量較多的大極 性皂苷也不易轉(zhuǎn)化為活性好的小極性皂苷；同時溫和、多水的環(huán)境也 不利于AFG的生成。因此，在紅參加工過程中，要不斷改善紅參加 工工藝，以減少紅參總皂苷的損失，并盡量多地生成小極性皂苷和梅 拉德初級反應(yīng)產(chǎn)物。
實施本發(fā)明的技術(shù)方案如下:把鮮參清洗干凈，密封后置于蒸參 箱的籠屜內(nèi)，在100-12(TC范圍內(nèi)蒸制1.5-9小時，當蒸制時間結(jié)束 時讓人參在蒸參箱內(nèi)自然冷卻至60°C，然后取出放入烘箱中以50°C烘干4-5天，得到總皂苷、小極性皂苷和精氨酸雙糖苷含量增加的紅
取一部分洗凈的鮮參作為對照組直接放入上述的蒸參箱的籠屜 內(nèi)，按相同的條件蒸制、烘干，得到的紅參為傳統(tǒng)方法得到的紅參。 下面介紹分析檢測方法；
樣品溶液制備取本發(fā)明提供的方法得到的紅參和傳統(tǒng)方法得到 的對照紅參各lg粉末，加入30ml的甲醇，超聲提取l小時，過濾； 將甲醇提取液蒸干，加入30ml水溶解，然后加入乙醚、氯仿等有機 溶劑脫脂3次，每次20-40分鐘，靜止分層，棄去有機層，合并水層 提取液，再用水飽和正丁醇萃取水層提取液3次，每次30-60分鐘， 合并萃取液，蒸干，定容10ml，即得紅參總皂苷提取物；
將甲醇提取之后的殘渣加入30ml水，超聲提取l小時，過濾，濃 縮提取液至5ml，得到含精氨酸雙糖苷的紅參水提取物。
樣品檢測本發(fā)明應(yīng)用高效液相色譜法分析人參皂苷，條件如下 色譜柱為日本資生堂Shiseido-CAPCELL,C18-ODS 4.6mmx250mm色 譜柱(粒徑5Wn)，高效液相色譜儀為Waters 2695，配備Waters 2996 diode array detector檢測器。流動相A為乙腈，流動相B為0.05%磷酸 水溶液。洗脫條件為0 50min: 25% 50%A、 75% 50%B; 50 80min: 50% 90%A、 50% 10%B; 80 90min: 90% 100%A、 10% 0%B。流速0.5mL/min;檢測波長195 nm;柱溫40°C， 進樣量20.0 iU。結(jié)果測得傳統(tǒng)方法得到的紅參總皂苷含量為 1.48-5.37%， 20R-Rg3的含量為0.004-0.12%;而本發(fā)明提供的方法得到的紅參總皂苷含量為2.45-6.69%, 20R-Rg3的含量為0.004-0.20%。 同時以100°C傳統(tǒng)蒸制3h得到的紅參總皂苷提取物色譜圖中的Rf峰 作為內(nèi)標，比較兩種方法得到的總皂苷提取物中各種小極性皂苷的含 量變化。
應(yīng)用質(zhì)譜方法半定量分析精氨酸雙糖苷含量的變化，方法是將得 到的紅參水提取物精密取10rt，稀釋至1.5ml;然后取IOW，加入 10(H4紅景天苷溶液做內(nèi)標，采用相同的質(zhì)譜條件檢測，根據(jù)相對豐 度比較含量變化。
圖1為傳統(tǒng)方法得到的紅參總皂苷提取物的高效液相色譜圖。 圖2為本發(fā)明提供的方法得到的紅參總皂苷提取物的高效液相 色譜圖。
其中1-21號色譜峰分別為l:Re、 2:Rgl、 3:Rf、 4:Rb!、 6:Rc、 7:Rb2、 8:Rd、 9:Ro、〗0:未知、11:R1m、 12:Rg6、 13:f4、 14:Rk3、 15:Rh4、 16:20S-Rg3、 17:20R-Rg3、 18:20S-Rs3、 19: 20R-Rs3、 20: Rk!、 21:Rg5。
從色譜圖可以看出，本發(fā)明提供的方法得到的紅參總皂苷含量顯著提 高，13-21號峰面積明顯增大，說明小極性皂苷種類增多，含量也明 顯增加。
圖3為傳統(tǒng)方法得到的紅參水層提取物的質(zhì)譜圖，其中m/z359 為內(nèi)標紅景天苷的分子離子峰，m/z497為精氨酸雙糖苷的分子離子峰。
圖4為本發(fā)明提供的方法得到的紅參水層提取物的質(zhì)譜圖，可以看出精氨酸雙糖苷的含量明顯增加。
具體實施方式
實施例1:
(1) 加工方法
挑選6-8根鮮參清洗干凈， 一部分密封后放入蒸參箱的籠屜內(nèi)， IO(TC蒸制3小時，當蒸制時間結(jié)束時讓人參在蒸參箱內(nèi)斷電自然冷 卻至60。C，然后取出后分別放入烘箱中以5(TC烘干5天，得到總皂 苷、小極性皂苷和精氨酸雙糖苷含量增加的紅參。
將上述洗凈鮮參一部分作為對照組直接放入上述的屜中，按相 同的條件蒸制、烘干，得到傳統(tǒng)方法加工的紅參。
(2) 樣品溶液制備
取本發(fā)明提供的方法得到的紅參和傳統(tǒng)方法得到的紅參對照品各 lg粉末，加入甲醇20ml， 4(TC超聲提取lh，過濾，蒸干甲醇提取液， 加入30ml水溶解；然后用60ml乙醚脫脂3次；用90ml水飽和正丁醇 萃取3次，合并正丁醇液，蒸干，用甲醇定容于10ml容量瓶中，即得
紅參總皂苷提取物；
殘渣加水30ml， 4(TC超聲提取lh，過濾，濃縮至5ml，即得紅參
水層提取物。
(3) 樣品檢測
按照技術(shù)方案中的樣品檢測方法對紅參總皂苷提取物和水層提 取物進行檢測，結(jié)果測得本發(fā)明提供的方法得到的紅參總皂苷和傳統(tǒng) 方法相比，含量增加101.55%，小極性皂苷的種類有所增加，含量也增加33.67% 。紅參水層提取物中AFG的含量比傳統(tǒng)方法增加20.42。/。。 實施例2:
挑選6-8根鮮參清洗干凈， 一部分密封后放入蒸參箱的籠屜內(nèi)， ll(TC蒸制1. 5小時，當蒸制時間結(jié)束時讓人參在蒸參箱內(nèi)自然冷卻 至60'C，然后取出后分別放入烘箱中以5(TC烘干5天，得到總皂苷、 小極性皂苷和精氨酸雙糖苷含量增加的紅參。
將上述洗凈鮮參一部分作為對照組直接放入上述的屜中，按相同 的條件蒸制、烘干，得到傳統(tǒng)方法加工的紅參。 樣品溶液制備和樣品檢測同實施例1.
結(jié)果測得本發(fā)明提供的方法得到的紅參總皂苷含量增加21. 73%， 小極性皂苷含量增加25.41%， AFG含量增加8.05%。 實施例3:
挑選6-8根鮮參清洗干凈， 一部分密封后放入蒸參箱的籠屜內(nèi)， ll(TC蒸制3小時，當蒸制時間結(jié)束時讓人參在蒸參箱內(nèi)自然冷卻至
6crc，然后取出后分別放入烘箱中以5crc烘干約5天，得到總皂苷、
小極性皂苷和精氨酸雙糖苷含量增加的紅參。
將上述洗凈鮮參一部分作為對照組直接放入上述的屜中，按相同 的條件蒸制、烘干，得到傳統(tǒng)方法加工的紅參。 樣品溶液制備和樣品檢測同實施例1.
結(jié)果測得本發(fā)明提供的方法得到的紅參總皂苷含量增加51. 22% ， 小極性皂苷含量增加83. 48% ， AFG含量增加7. 14% 。
實施例4:挑選5-6根鮮參清洗干凈， 一部分密封后放入蒸參箱的籠屜內(nèi)， ll(TC蒸制5小時，當蒸制時間結(jié)束時讓人參在蒸參箱內(nèi)自然冷卻至 6(TC，然后取出后分別放入烘箱中以5(TC烘干5天，得到總皂苷、 小極性皂苷和精氨酸雙糖苷含量增加的紅參。
將上述洗凈鮮參一部分作為對照組直接放入上述的屜中，按相同 的條件蒸制、烘干，得到傳統(tǒng)方法加工的紅參。 樣品溶液制備和樣品檢測同實施例1.
結(jié)果測得本發(fā)明提供的方法得到的紅參總皂苷含量增加4L 94%， 小極性皂苷含量增加60. 15% ， AFG含量增加58. 51% 。 實施例5:
挑選5-6根鮮參清洗干凈， 一部分密封后放入蒸參箱的籠屜內(nèi)， 12(TC蒸制1. 5小時，當蒸制時間結(jié)束時讓人參在蒸參箱內(nèi)自然冷卻 至6(TC，然后取出后分別放入烘箱中以5(TC烘干5天，得到總皂苷、 小極性皂苷和精氨酸雙糖苷含量增加的紅參。
將上述洗凈鮮參一部分作為對照組直接放入上述的屜中，按相同 的條件蒸制、烘干，得到傳統(tǒng)方法加工的紅參。 樣品溶液制備和樣品檢測同實施例1.
結(jié)果測得本發(fā)明提供的方法得到的紅參總皂苷含量增加6. 00%， 小極性皂苷含量沒有增加，AFG含量增加311. 6%。
實施例6:
挑選5-6根鮮參清洗干凈， 一部分放入2500ml具塞錐形瓶中密 封，然后將錐形瓶放入蒸參箱的籠屜內(nèi)，12(TC蒸制3小時，當蒸制時間結(jié)束時讓人參在蒸參箱內(nèi)自然冷卻至60°C，然后取出后分別
放入烘箱中以5(TC烘干5天，得到總皂苷、小極性皂苷和精氨酸雙
糖苷含量增加的紅參。
將上述洗凈鮮參一部分作為對照組直接放入上述的屜中，按相同 的條件蒸制、烘干，得到傳統(tǒng)方法加工的紅參。
樣品溶液制備和樣品檢測同實施例1.
結(jié)果測得本發(fā)明提供的方法得到的紅參總皂苷含量增加238.15 %，小極性皂苷含量增加150.1%， AFG含量增加281.5%。
實施例7:
挑選6-8根鮮參清洗干凈， 一部分密封后放入蒸參箱的籠屜內(nèi)， 12(TC蒸制4. 5小時，當蒸制時間結(jié)束時讓人參在蒸參箱內(nèi)自然冷卻 至60°C,然后取出后分別放入烘箱中以5(TC烘干約5天，得到總皂 苷、小極性皂苷和精氨酸雙糖苷含量增加的紅參。
將上述洗凈鮮參一部分作為對照組直接放入上述的屜中，按相同 的條件蒸制、烘干，，得到傳統(tǒng)方法加工的紅參。 樣品溶液制備和樣品檢測同實施例1.
結(jié)果測得本發(fā)明提供的方法得到的紅參總皂苷和小極性皂苷含量 均無明顯變化，AFG含量增加13.89%。
挑選6-8根鮮參清洗干凈， 一部分密封后放入蒸參箱的籠屜內(nèi)， 12(TC蒸制6小時，當蒸制時間結(jié)束時讓人參在蒸參箱內(nèi)自然冷卻至 6(TC，然后取出后分別放入烘箱中以5(TC烘干5天，得到總皂苷、小極性皂苷和精氨酸雙糖苷含量增加的紅參。
將上述洗凈鮮參一部分作為對照組直接放入上述的屜中，按相同 的條件蒸制、烘干，得到傳統(tǒng)方法加工的紅參。 樣品溶液制備和樣品檢測同實施例1.
結(jié)果測得本發(fā)明提供的方法得到的紅參總皂苷含量增加80. 12%， 小極性皂苷含量增加228. 3%， AFG含量無明顯增加。 實施例9:
挑選6-8根鮮參清洗干凈， 一部分密封后放入蒸參箱的籠屜內(nèi)， 120。C蒸制9小時，當蒸制時間結(jié)束時讓人參在蒸參箱內(nèi)自然冷卻至 60°C，然后取出后分別放入烘箱中以5(TC烘干5天，得到總皂苷、 小極性皂苷和精氨酸雙糖苷含量增加的紅參。
將上述洗凈鮮參一部分作為對照組直接放入上述的屜中，按相同 的條件蒸制、烘干，得到傳統(tǒng)方法加工的紅參。 樣品溶液制備和樣品檢測同實施例1.
結(jié)果測得本發(fā)明提供的方法得到的紅參總皂苷含量增加7. 99%, 小極性皂苷含量增加12. 72%， AFG含量增加73. 50%。
權(quán)利要求
1、一種增加紅參中總皂苷、小極性皂苷和精氨酸雙糖苷含量的炮制方法，其特征在于，把鮮參清洗干凈，密封后置于蒸參箱的籠屜內(nèi)，在100-120℃范圍內(nèi)蒸制1.5-9小時，當蒸制時間結(jié)束時讓人參在蒸參箱內(nèi)自然冷卻至60℃，然后取出放入烘箱中以50℃烘干4-5天，得到總皂苷、小極性皂苷和精氨酸雙糖苷含量增加的紅參。
全文摘要
本發(fā)明提供了一種增加紅參中總皂苷，小極性皂苷和精氨酸雙糖苷含量的炮制方法。把鮮參清洗干凈，密封后置于蒸參箱的籠屜內(nèi)，在100-120℃范圍內(nèi)蒸制1.5-9小時，當蒸制時間結(jié)束時讓人參在蒸參箱內(nèi)自然冷卻至60℃，然后取出放入烘箱中以50℃烘干4-5天，得到紅參。經(jīng)高壓液相色譜檢測可知，得到的紅參總皂苷含量比傳統(tǒng)方法提高6.00-238.15％；小極性皂苷Rk<sub>5</sub>，Rg<sub>6</sub>，Rk<sub>1</sub>，Rh<sub>4</sub>，Rg<sub>3</sub>，Rs<sub>3</sub>的含量也明顯提高；應(yīng)用質(zhì)譜進行半定量分析可知，精氨酸雙糖苷的含量比普通加工的紅參高7.14％-311.6％。
文檔編號A61P37/04GK101537025SQ20091006690
公開日2009年9月23日 申請日期2009年5月5日 優(yōu)先權(quán)日2009年5月5日
發(fā)明者劉志強, 劉淑瑩, 宋鳳瑞, 杜芹芹, 邢俊鵬 申請人:中國科學院長春應(yīng)用化學研究所