專利名稱：：暴馬丁香樹皮提取物的制備新工藝和新用途的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
：本發(fā)明所屬醫(yī)藥產(chǎn)品研究開發(fā)
技術(shù)領(lǐng)域：
。本發(fā)明涉及以暴馬丁香5j/ri/7卵柳we/^2'sRupr.樹皮為原料制備提取物的新工藝和新用途。
背景技術(shù)：
：暴馬丁香6>ri/^s8fflur朋幻'sR叩r.為長白山常見藥用植物之一，在我國主要分布在吉林、遼寧、華北、西北和華中地區(qū)，資源豐富。樹皮、樹干及枝條均可藥用，味苦，性微寒，經(jīng)現(xiàn)代藥理實驗證明具有清肺祛痰、止咳、平喘、消炎、利尿的功能。目前，關(guān)于暴馬丁香樹皮提取物和化學(xué)成分及藥理作用研究鮮見報道，僅有幾篇報道從樹皮、樹枝中分離得到數(shù)個化合物，未對暴馬丁香樹皮提取物做過抑菌研究。因此，本發(fā)明采用乙醇冷浸并結(jié)合超聲波法對藥用植物暴馬丁香樹皮化學(xué)成分進(jìn)行了提取，獲得了暴馬丁香樹皮提取物并進(jìn)行了抑菌試驗。本發(fā)明的暴馬丁香樹皮提取物對革蘭氏陽性菌、革蘭氏陰性菌具有抑制作用，這種抑菌作用具有積極的應(yīng)用價值，這對于擴大暴馬丁香藥源，并對其進(jìn)行合理開發(fā)利用具有重要意義。
發(fā)明內(nèi)容本發(fā)明的目的是提供一種具有抑菌活性的暴馬丁香樹皮提取物的制備新工藝并將暴馬丁香樹皮提取物在具有抑菌作用的產(chǎn)品中進(jìn)行開發(fā)應(yīng)用。木發(fā)明的暴馬丁香樹皮提取物對大腸桿菌、金黃色葡萄球菌、巴氏菌、鏈球菌、沙門氏菌均有不同程度的抑制作用，可開發(fā)為天然抗菌劑應(yīng)用于食品、藥品等行業(yè)，制備出具有抑菌作用的各種形式的產(chǎn)品。1.以暴馬丁香樹皮為原料制備提取物的新工藝和新用途，并將暴馬丁香樹皮揮發(fā)油在具有抑菌作用的產(chǎn)品中進(jìn)行開發(fā)應(yīng)用。本發(fā)明的暴馬丁香樹皮提取物對大腸桿菌、金黃色葡萄球菌、巴氏菌、鏈球菌、沙門氏菌均有不同程度的抑制作用，可開發(fā)為天然抗菌劑應(yīng)用于食品、藥品等行業(yè)，制備出具有抑菌作用的各種形式的產(chǎn)品。2.—種制備暴馬丁香樹皮提取物的新工藝，其特征在于該工藝包括以下過程(1)取暴馬丁香樹皮，挑去雜物，水洗，烘干或晾干，粉碎，用8-10倍量20%-30%的乙醇室溫下浸提4-6h后超聲1-1.5h，溫度為3CTC功率為80W，然后用綢布與濾紙分別過濾一次，得到濾；(2)暴馬丁香樹皮經(jīng)(1)處理后的濾渣再分別用6倍量與4倍量20%_30%的乙醇重復(fù)(1)步驟各一次，分別得到濾液，合并三次濾液；(3)將上述(2)濾液回收乙醇，得暴馬丁香樹皮提取物。3.根據(jù)本發(fā)明所述的制備暴馬丁香樹皮提取物的原料為暴馬丁香5>ri/^aaM;r朋5i5R叩r.的樹皮。4.根據(jù)本發(fā)明，暴馬廠香樹皮提取物對大腸桿菌、金黃色葡萄球菌、巴氏菌、鏈球菌、沙門氏菌均有不同程度的抑制作用。5.根據(jù)本發(fā)明所述的暴馬丁香樹皮提取物，其特征在于該樹皮提取物可作為天然抗菌劑用于食品、藥品等行業(yè)，代替有毒副作用的合成抗菌劑。根據(jù)本發(fā)明，本發(fā)明中的"％"是重量百分比。具體實施例方式本發(fā)明所述的暴馬丁香樹皮提取物制備新工藝包括以下實施例，下面的實施例可進(jìn)一步說明本發(fā)明，但不以任何方式限制本發(fā)明。實施例1:(1)取暴馬丁香樹皮5kg,挑去雜物，水洗，烘干或晾干，粉碎，用8倍量20%的乙醇室溫下浸提4h，再超聲lh，溫度為3(TC功率為80W，然后用綢布與濾紙分別過濾一次，得到濾液；(2)暴馬丁香樹皮經(jīng)(1)處理后的濾渣再分別用6倍量與4倍量20%的乙醇重復(fù)(丄)步驟各一次，分別得到濾液，合并三次濾液(3)將上述(2)濾液回收乙醇，得到暴馬丁香樹皮提取物，收率為28%。實施例2:(1)取暴馬丁香樹皮10kg,挑去雜物，水洗，烘干或晾干，粉碎，用10倍量30%的乙醇室溫下浸提6h，再超聲1.5h，溫度為30'C功率為80W,然后用綢布與濾紙分別過濾一次，得到濾液；(2)暴馬丁香樹皮經(jīng)(1)處理后的濾渣再分別用6倍量與4倍量30%的乙醇重復(fù)(1)步驟各一次，分別得到濾液，合并三次濾液；(3)將上述(2)濾液回收乙醇，得到暴馬丁香樹皮提取物，收率為30%。4藥理試驗例暴馬r香樹皮提取物的抑菌作用1實驗材料大腸桿菌、鏈球菌、沙門氏菌、巴氏菌和金黃色葡萄球菌均來自于美國菌種保藏中心(ATCC),37'C在蛋白胨牛肉湯中培養(yǎng)12h。培養(yǎng)基為牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基。菌的活化與培養(yǎng)時用液體培養(yǎng)基，組成為牛肉膏蛋白胨氯化鈉蒸餾水(3:10:5:1000)。菌的保存及抑菌實驗時用固體培養(yǎng)基，組成為牛肉膏蛋白胨氯化鈉瓊脂蒸餾水(3:10:5:22:1000)。2實驗方法2.1培養(yǎng)基的配制取牛肉膏0.6g、蛋白胨2g、氯化鈉lg、蒸餾水200ml，混合并攪拌使其完全溶解，配成液體培養(yǎng)基。用量筒量取液體培養(yǎng)基，將其平均分裝在10個50ml的三角瓶內(nèi)，每瓶20ml。取牛肉膏3g、蛋白胨IOg、氯化鈉5g、瓊脂22g、蒸餾水1000ml，混合后將其置于電爐子上加熱，使瓊脂完全溶解，配成固體培養(yǎng)基。用量筒量取固體培養(yǎng)基，將其平均分裝在5個150ml的二角瓶內(nèi)，每瓶IOOml。三角瓶瓶口均用棉塞塞緊并用牛皮紙包扎。2.2滅菌將配好的固休培養(yǎng)基、液體培養(yǎng)基均放入高壓滅菌鍋中滅菌，溫度上升到121'C時，開始計時20min。培養(yǎng)皿、量筒、鑷子、剪刀、6mm濾紙片(放在小燒杯中)、滴管、氨瓶等實驗器材均放入烘箱中170'C滅菌2h。實驗前用75%乙醇擦拭超凈丁作臺并紫外滅菌20rain。37。C恒溫培養(yǎng)箱在使用前需用75%乙醇擦拭滅菌。2.3菌的培養(yǎng)與查菌將5個菌種在超凈工作臺上、酒精燈環(huán)境下倒入裝有液體培養(yǎng)基的三角瓶中，每種菌培養(yǎng)兩份。將這10個三角瓶放入搖床37。C搖菌6h。顯微鏡做鏡檢后開始查菌，記錄數(shù)據(jù)并計算菌濃度，若5個中方格總菌數(shù)為A，菌液稀釋倍數(shù)為B，.則lml菌液中總菌數(shù)二A/5X25X10000X13=50000AB2.4樣品液及濾紙片的制備將暴馬丁香樹皮提取物配制成5mg/ml的溶液(可加04tiL二甲基亞砜助容)，按1:2"稀釋成2.5mg/ml、1.25mg/ml、0.625mg/ml、0.3125mg/ml的溶液。將濾紙片用打孔器打成直徑為6mm的圓片，在超凈工作臺將濾紙片放進(jìn)各梯度樣品中浸泡2h。2.5有菌瓊脂平板的制備將稀釋好的菌液與固體培養(yǎng)基混合并搖晃均勻，此時菌的濃度應(yīng)達(dá)到3.6X108CFU/ml。將有菌培養(yǎng)基依次倒入各培養(yǎng)皿中，晃動培養(yǎng)皿使培養(yǎng)基均勻地鋪在培養(yǎng)皿底部，冷卻至凝固。2.6抑菌實驗方法用記號筆在有菌瓊脂平板上標(biāo)號，將浸泡好的濾紙片用鑷子夾出，放入寫相應(yīng)對照編號的培養(yǎng)皿中，每個樣品做三個平行，放入37。C恒溫培養(yǎng)箱培養(yǎng)。3.實驗結(jié)果3.1抑菌效果用抑菌圈直徑DD表示(單位mm)在抑菌實驗結(jié)束后的第12h、24h、36h、48h觀察菌的生長情況，測量抑菌圈直徑并記錄。表1暴馬丁香樹皮提取物的抑菌活性<table>tableseeoriginaldocumentpage6</column></row><table>3.2最小抑菌濃度MIC的測定(單位mg/ml)用水做陰性對照，鏈霉素做陽性對照，提取物的抑菌效果與二者對比得出最小抑菌濃度。表2暴馬丁香樹皮提取物的最小抑齒濃度MIC(單位mg/ml)<table>tableseeoriginaldocumentpage6</column></row><table>結(jié)果表明暴馬丁香樹皮提取物對大腸桿菌、金黃色葡萄球菌、巴氏菌、鏈球菌、沙門氏菌均有不同程度的抑制作用。提取物對五種菌的最小抑菌濃度在0.63mg/ml2.50mg/ml之間。.通過具體實施實例說明暴馬丁香樹皮提取物抑菌效果很好，可作為天然抗菌劑用于食品、藥品等行業(yè)，代替有毒副作用的合成抗菌劑9暴馬丁香提取物對鏈球菌有良好的抑制作用，可以制備各種劑型的藥品，用于治療化膿性炎癥、猩紅熱、風(fēng)濕熱、急性腎小球腎炎等疾病。對大腸桿菌、金黃色葡萄球菌、沙門氏菌有良好的抑制作用；可以制備食品添加劑以及各種劑型的藥品，用于預(yù)防與治療因食物被細(xì)菌污染而導(dǎo)致的食物中毒。權(quán)利要求1.以暴馬丁香SyringaamurensisRupr.樹皮為原料制備提取物的新工藝和新用途。取暴馬丁香樹皮，用8-10倍量20％-30％的乙醇室溫下浸提4-6h后超聲1-1.5h，溫度為30℃功率為80W，然后用綢布與濾紙分別過濾一次，濾渣再分別用6倍量與4倍量20％-30％的乙醇重復(fù)以上步驟各一次，合并三次濾液，回收乙醇，得暴馬丁香樹皮提取物。本發(fā)明產(chǎn)品對大腸桿菌、金黃色葡萄球菌、巴氏菌、鏈球菌、沙門氏菌均有不同程度的抑制作用，可開發(fā)為天然抗菌劑應(yīng)用于食品、藥品等行業(yè)，制備出具有抑菌作用的各種形式的產(chǎn)品。2.—種制備暴馬丁香樹皮提取物的新工藝，其特征在于該工藝包括以下過程(1)取暴馬丁香樹皮，挑去雜物，水洗，烘干或晾干，粉碎，用8-10倍量20%-30%的乙醇室溫下浸提4-6h后超聲1-1.5h,溫度為30'C功率為80W,然后用綢布與濾紙分別過濾一次，得到濾液；(2)暴馬丁香樹皮經(jīng)(1)處理后的濾渣再分別用6倍量與4倍量20%-30%的乙醇重復(fù)(1)步驟各一次，分別得到濾液，合并三次濾液；(3)將上述(2)濾液回收乙醇，得暴馬丁香樹皮提取物。3.根據(jù)本發(fā)明所述的制備暴馬丁香樹皮提取物的原料為暴馬丁香\S>/v'/^3，yre/wisRupr.的樹皮。4.根據(jù)本發(fā)明，暴馬丁香樹皮提取物對大腸桿菌、金黃色葡萄球菌、巴氏菌、鏈球菌、沙門氏菌均有不同程度的抑制作用。5.根據(jù)本發(fā)明所述的暴馬丁香樹皮提取物，其特征在于該樹皮提取物可作為天然抗菌劑用于食品、藥品等行業(yè)，代替有毒副作用的合成抗菌劑。全文摘要本發(fā)明所屬醫(yī)藥產(chǎn)品研究開發(fā)
技術(shù)領(lǐng)域：
。本發(fā)明涉及以暴馬丁香SyringaamurensisRupr.樹皮為原料制備提取物的新工藝和新用途。取暴馬丁香樹皮，用8-10倍量20％-30％的乙醇室溫下浸提4-6h后超聲1-1.5h，溫度為30℃功率為80W，然后用綢布與濾紙分別過濾一次，濾渣再分別用6倍量與4倍量20％-30％的乙醇重復(fù)以上步驟各一次，合并三次濾液，回收乙醇，得暴馬丁香樹皮提取物。本發(fā)明產(chǎn)品對大腸桿菌、金黃色葡萄球菌、巴氏菌、鏈球菌、沙門氏菌均有不同程度的抑制作用，可開發(fā)為天然抗菌劑應(yīng)用于食品、藥品等行業(yè)，制備出具有抑菌作用的各種形式的產(chǎn)品。文檔編號A61K36/185GK101559087SQ20091014572公開日2009年10月21日申請日期2009年5月31日優(yōu)先權(quán)日2009年5月31日發(fā)明者張崇禧申請人:山東大學(xué)威海分校