專利名稱：一種整合素介導的腫瘤雙重靶向脂質體及其制備方法
技術領域：
本發(fā)明屬于藥物劑型和制劑技術領域，特別涉及一種供注射用的載抗癌藥物 的靶向性給藥系統(tǒng)。同時用聚乙二醇(PEG)和含苯丙氨酸-組氨酸-半胱氨酸-絲氨酸-天冬酰胺(PHSCN)序列的整合素配體將脂質體的表面進行修飾，修飾 后的脂質體可以將抗癌藥物同時靶向傳輸?shù)侥[瘤新生血管內皮細胞和腫瘤細胞 內，從而增強腫瘤治療效果。
背景技術：
惡性腫瘤一直是困擾人類的重要疾病，目前尚無治愈癌癥的方法。對于惡性 實體瘤的傳統(tǒng)療法為手術切除腫瘤后再用抗腫瘤藥物進行化療。大部分的化療藥 物沒有選擇性，這些藥物在殺傷腫瘤細胞的同時，也會對正常的細胞產生殺傷作 用，因此會產生嚴重的副作用，如阿霉素的心臟毒性作用等。將抗腫瘤藥物用脂 質體進行包載后可以明顯延長其在體內循環(huán)的時間，有利于抗腫瘤藥物向腫瘤區(qū) 蓄積，從而增加了抗癌藥物的治療指數(shù)，即增加療效，減少了毒副作用。目前已 有阿霉素脂質體、柔紅霉素脂質體、紫杉醇脂質體等產品上市。普通脂質體雖然能夠改善抗癌藥物的療效，但由于其易被肝臟、脾臟內的巨 噬細胞攝取而迅速消除，藥物在體內滯留時間短。普通脂質體的表面進一步用親 水性的聚乙二醇(PEG)進行修飾，可制成長循環(huán)脂質體。長循環(huán)脂質體能夠逃 避血漿中的調理素的調理從而避免了被巨噬細胞攝取(故也稱為隱性脂質體)， 顯著延長了其在循環(huán)系統(tǒng)中的滯留時間，血藥濃度也明顯提高。長循環(huán)脂質體經 增強滯留和滲透作用(EPR)可增加被包載藥物向腫瘤組織內的蓄積，從而提高 了抗癌藥物傳遞的靶向性。目前已有阿霉素隱性脂質體上市(DOXIL⑧， CAELYX )。長循環(huán)脂質體能夠延長藥物在體內的循環(huán)時間，增強抗腫瘤藥物向腫瘤內的 蓄積，但并不意味著一定能夠提高抗腫瘤藥物的療效。其原因之一在于大部分抗 腫瘤藥物的靶點中位于細胞核內，藥物必須克服細胞膜這一屏障進入到細胞內才 能發(fā)揮作用。脂質體包封的藥物進入細胞內主要有三種途徑，即擴散，膜融合以 及被腫瘤細胞吞噬。如果包封在脂質體雙分子膜內的藥物不能夠釋放到細胞間質中，那么通過擴散途徑進入腫瘤細胞內的藥物會受到限制。由于大部分的脂質體 材料不能與細胞膜進行融合，故經膜融合方式進入到細胞內的藥物也有限。許多 試驗證明，普通的隱性脂質體不能經細胞吞噬作用進入到腫瘤細胞，所以長循環(huán) 脂質體盡管能夠增加腫瘤組織中的濃度，但療效卻不一定有所增加。由于通過增 加擴散和膜融合的方式來增加抗腫瘤藥物向細胞內的轉運有很多局限性，用配體 修飾長循環(huán)脂質體就成為提高抗癌藥物靶向性的重要手段。國外有學者用葉酸， 轉鐵蛋白以及單克隆抗體來修飾隱性脂質體用以增加藥物腫瘤細胞內傳遞的耙 向性，動物試驗證明能夠提高抗癌藥物的療效，相關產品有的已進入臨床研究。 腫瘤的生長、侵襲和轉移都依賴于新生血管的形成。當腫瘤體積大于2mm3 時，其繼續(xù)生長依賴于腫瘤新生血管為其提供營養(yǎng)和氧氣，并為其血行擴散和遠 處轉移提供途徑。封閉和抑制腫瘤新生血管，切斷腫瘤的營養(yǎng)和氧氣供應，對于 腫瘤治療是一個有效的治療策略。因此，以腫瘤血管為耙的治療已經成為腫瘤治 療領域的一個重要組成部分。與傳統(tǒng)的以腫瘤細胞為靶的化療相比，腫瘤血管耙向治療具有許多優(yōu)勢(1)內皮細胞基因表達相對穩(wěn)定，不易產生耐藥性。(2)內皮細胞比腫瘤細胞對化療藥物更敏感，藥物劑量小，從而可以降低藥物毒副作用。(3) —根微血管可以維持數(shù)以萬計的腫瘤細胞的生長，治療效率高。(4)腫 瘤血管內皮細胞其表面一般均一地、高度地表達大量特異性受體，有利于腫瘤治 療的選擇性。中國發(fā)明專利(20051006338.0， 2008101345812.2)，涉及供注射用的載抗 癌藥物的長循環(huán)脂質體，其特征在于脂質體同時用PEG鏈和含RGD序列的線性多 肽或含RGD類似物的線性片段修飾。研究表明，這種新型載體的確可以在一定 程度上增加腫瘤細胞內藥物的濃度，提高抗腫瘤效果。RGD類寡肽修飾的脂質體主要針對腫瘤細胞和新生血管內皮細胞表面高度 的整合素0^3和O^5。近年來，a5^在新生血管生成中受到了越來越多的重視?；?因學實驗研究表明，血管發(fā)生和新生血管形成更多的依賴于纖維粘連蛋白FN和 其主要受體a5/3p而不是 類整合素。a5/3i與其配體的結合，不僅可以直接誘導 血管新生，而且還可以增加o^3誘導的血管新生效應。相對于其它亞型，整合素 a5^表達特異性更高，只在新生血管處高表達，而在靜止的血管內皮基本不表達。 PHSCN是從纖維粘連蛋白的協(xié)同結構域PHSRN衍生的一種a5^拮抗劑，其不僅可以和純化的a5/3,、 cg33和ov(35結合，也可以與表達整合素的腫瘤細胞和多種血管 內皮細胞結合?；谏鲜霰尘?，我們設計了一種新的藥物組合物，將脂質體同時用PEG和 含PHSCN序列的線性肽修飾，PEG修飾的長循環(huán)脂質體能通過增強滲透和滯留 作用向腫瘤組織內蓄積，積蓄在腫瘤組織內的脂質體，其腫瘤新生血管內皮細胞 表面和腫瘤細胞所表達的多種整合素所識別，粘附在細胞表面，經內吞作用進入 到腫瘤新生血管內皮細胞和腫瘤細胞內。達到雙重靶向，實現(xiàn)雙重治療腫瘤作用。 發(fā)明內容本發(fā)明的目的在于提供一種整合素受體介導的腫瘤雙重靶向長循環(huán)脂質體組合物，其組成為 抗腫瘤藥物，具有腫瘤新生血管靶向和腫瘤細胞耙向功能的多肽，聚乙二醇或其衍生物，制備脂質體藥物的載體。它們的重量百分組成為抗腫瘤藥物，0.1%-30%具有腫瘤新生血管靶向和腫瘤細胞靶向功能的多肽，0.01%-10% 聚乙二醇或其衍生物，0.01%-20% 制備脂質體藥物的載體，40%-99.88%。聚乙二醇修飾的脂質體能夠顯著延長脂質體在體內的循環(huán)時間，有利于脂質 體在腫瘤部位的被動蓄積。含PHSCN序列的線性多肽連接在PEG鏈的末端， 避免了 PEG鏈對配體受體識別的干擾，使之能夠更好地和腫瘤部位的受體結合， 從而促進包封在脂質體的抗癌藥物主動轉運到腫瘤新生血管內皮細胞和腫瘤細 胞內。本發(fā)明所說的具有腫瘤新生血管靶向和腫瘤細胞靶向功能的多肽片段是含 苯丙氨酸-組氨酸-半胱氨酸-絲氨酸-天冬酰胺(縮寫為PHSCN)序列的任何線性 多肽片段，如含PHSCN序列的五肽、六肽、七肽、八肽、九肽和 十肽。所選 片段應易于和修飾在脂質體表面，并不影響PHSCN序列的活性基團巰基。具體有Ac-PHSCN-NH2. Ac-PHSCNK-NH2, PHSCN， Ac-PHSCNGGK-NH2等，其中優(yōu)選的為Ac-PHSCN-NH2 。本發(fā)明所說的聚乙二醇(PEG)其分子量為200-5000，優(yōu)選的為2000-3000。 聚乙二醇的衍生物，優(yōu)選如聚乙二醇(PEG)的二醛衍生物OHC-PEG-CHO。本發(fā)明所說的組合物中，所述的脂質體是指，主要以磷脂(至少包括一種乙 醇胺類磷脂)和膽固醇為材料所制成的脂質體雙分子囊泡。因此本發(fā)明所述制備脂質體藥物的載體主要為磷脂和膽固醇，其中磷脂包括 大豆磷脂(SPC)， 二月桂酰卵磷脂(DLPC)、 二肉豆蔻酰卵磷脂(DMPC)、 二 棕櫚酰卵磷脂(DPPC)、 二硬脂酰卵磷脂(DPPC)、 二硬脂酰卵磷脂(DSPC)、 l-肉豆蔻酰-2-棕櫚酰卵磷脂(MPPC)、 l-棕櫚酰-2-肉豆蔻酰卵磷脂(PMPC)、 l-棕櫚酰-2-硬脂酰卵磷脂(PSPC)、 l-硬脂酰-2-棕櫚酰卵磷脂(SPPC)、蛋黃卵 磷脂(EPC)、氫化豆磷脂(HSPC)、 二油?；蚜字?DOPC)、 二月桂酰磷脂 酰甘油(DLPG)、 二棕櫚脂酰甘油(DPPG)、 二硬脂酰磷脂酰甘油(DSPG)、 二油酰磷脂酰甘油(DOPG)、 二肉豆蔻酰磷脂酸(DMPA)、 二棕櫚酰磷脂酸 (DPPA)、 二肉豆蔻酰磷脂酰乙醇胺(DMPE)、 二棕櫚酰磷脂酰乙醇胺(DPPE)、 二肉豆蔻酰磷脂酰絲氨酸(DMPS)、 二棕櫚酰磷脂酰二絲氨酸(DPPS)、腦磷 脂酰絲氨酸(PS)、腦神經鞘磷脂(BSP)、 二棕櫚酰神經鞘磷脂(DPSP)、 二硬 脂酰神經鞘磷脂(DSSP)、 二硬脂酰磷脂酰乙醇胺(DSPE)之一種或一種以上 者。本發(fā)明所述的脂質體主要以磷脂和膽固醇組成，其中磷脂總量與膽固醇的比例為1-1000: 1，優(yōu)選為1-10: 1。本發(fā)明所說的被包封的藥物包括阿霉素、環(huán)磷酰胺、放線菌素、博來霉素、 正定霉素、表阿霉素、絲裂霉素、甲氨喋昤、柔紅霉素、紫杉醇、多西紫杉醇、喜樹堿、羥基喜樹堿、柔紅霉素、5-氟脲嘧啶、卡鉑、順鉑、卡氮芥、龜臼乙叉 甙、干擾素、長春堿、長春新堿、三苯氧胺以及相應的鹽類。本發(fā)明的脂質體的制備方法如下(1) 先合成聚乙二醇(PEG)的二醛衍生物(OHC-PEG-CHO)，用于連接 含PHSCN序列的肽片斷到脂質體表面。(2) 取磷脂(如HSPC和DPPE)、膽固醇、OHC-PEG-CHO作為制備脂質 體的原料，置圓底燒瓶中，加入有機溶劑溶解后，按常規(guī)方法制備即可得到空白長循環(huán)脂質體。取含PHSCN序列的肽溶液若干，加入到空白脂質體中，常溫或 37'C孵育l-2小時，采用適當?shù)姆椒ǔノ磁悸?lián)的肽?？拱┧幬?如阿霉素)可 在配體修飾前或修飾后裝載到已制備好的脂質體。 本發(fā)明的優(yōu)點本發(fā)明用含PHSCN序列的線性多肽修飾的長循環(huán)脂質體作為抗腫瘤藥物的 載體，進一步提高了抗腫瘤藥物的治療指數(shù)。本發(fā)明所述脂質體所用的含PHSCN序列的多肽，由于分子量小，因而抗原 性較小，不易發(fā)生免疫反應；含PHSCN序列的多肽可與純化的整合素c^、 avft 以及表達這些整合素的內皮細胞和腫瘤細胞結合。本發(fā)明中，用含PHSCN序列 的多肽修飾的脂質體已被證實能夠主動轉運進入人臍靜脈內皮細胞、鼠黑色素瘤 B16F10細胞和人乳腺癌MDA-MB-231細胞內。本發(fā)明與己報道的用整合素avft特異性的多肽如RGD修飾的脂質體作為抗 癌藥物的載體不同之處在于兩種肽的種類不同，作用機制也不相同。PHSCN為 整合素與其配體結合的協(xié)同片段PHSRN的衍生物，RGD多肽修飾的脂質體主要 靶向整合素cM33，而PHSCN多肽修飾的脂質體主要耙向整合素a5/^。近年來， 在新生血管生成中受到了越來越多的重視?；驅W實驗研究表明，血管發(fā)生和新 生血管形成更多的依賴于纖維粘連蛋白FN和其主要受體a5i8p而不是 類整合 素，因而整合素a5/^相對于其它亞型，表達特異性更高，只在新生血管處高表達， 而在靜止的血管內皮基本不表達。本發(fā)明的PEG的長循環(huán)作用也已被證明切實有效。本法生產簡單，條件溫和，通過OHC-PEG-CHO進行偶聯(lián)，即可實現(xiàn)脂質 體的PEG化，然后通過孵育將配體修飾在脂質體表面，適于大工業(yè)生產。通過研究已證實，本發(fā)明的脂質體在體外對腫瘤細胞和人臍靜脈內皮細胞具 有明顯的選擇性，在體內可以顯著抑制腫瘤的生長，并延長小鼠的生存時間。


圖1 、 PHSCNK修飾的阿霉素長循環(huán)脂質體(PHSCNK-PL-DOX)的結構。 圖2、尾靜脈注射阿霉素溶液(Free DOX)、阿霉素長循環(huán)脂質體(PL-DOX)、 和PHSCNK修飾的阿霉素長循環(huán)脂質體(PHSCNK-PL-DOX)后的血藥濃度曲 線。其中PHSCNK代表乙?；?苯丙氨酸-組氨酸-半胱氨酸-絲氨酸-天冬酰胺-賴氨酸-酰胺基。圖3、尾靜脈注射阿霉素溶液(Free DOX)、阿霉素長循環(huán)脂質體(PL-DOX)、 和PHSCNK修飾的阿霉素長循環(huán)脂質體(PHSCNK-PL-DOX)后的腫瘤組織阿霉素濃度曲線。圖4、尾靜脈注射生理鹽水(Saline)、阿霉素溶液(Free DOX)、阿霉素 長循環(huán)脂質體(PL-DOX)、和PHSCNK修飾的阿霉素長循環(huán)脂質體 (PHSCNK-PL-DOX)后的小鼠腫瘤生長曲線。圖5、尾靜脈注射生理鹽水(Saline)、阿霉素溶液(Free DOX)、阿霉素 長循環(huán)脂質體(PL-DOX)、和PHSCNK修飾的阿霉素長循環(huán)脂質體 (PHSCNK-PL-DOX)后的小鼠的存活率曲線。
具體實施方式
通過以下實施例進一步說明本發(fā)明，但不作為本發(fā)明的限制。 實施例1、包載阿霉素的PHSCNK修飾的長循環(huán)脂質體的制備取氫化豆磷脂、膽固醇、二棕櫚酰磷脂酰乙醇胺、OHC-PEG2000-CHO (摩爾比為15: 10: 5: 10)，置于圓底燒瓶中，加入適量氯仿甲醇(10: 1)，超聲溶解后，置水浴加熱真空旋轉蒸發(fā)除去有機溶劑，使成均勻的透明薄膜。吸取適量硫酸銨溶液(123mM， pH5.4)加入到圓底燒瓶中，渦旋振蕩使脂膜完全脫落， 水浴超聲至出現(xiàn)淡藍色乳光。將制得的空白脂質體過SephadexG50柱，用磷酸鹽 緩沖鹽(PBS， pH7.4)洗脫，收集脂質體部分，將收集到的空白脂質體置75i: 水浴中預熱，加入阿霉素儲備液孵育10分鐘，并時時振蕩，得到PEG2000修飾的 阿霉素脂質體(PL-DOX)。取PHSCNK儲備液適量，緩慢加入到純化的PL-DOX 溶液，滴加完畢后，37°C， 2000rpm，孵育2小時，得至ljPHSCNK修飾的阿霉素脂 質體(PHSCNK-PL-DOX)。脂質體結構見附圖l。本發(fā)明制備的阿霉素脂質體PL-DOX和PHSCNK-PL-DOX基本理化性質見表l:制劑平均粒徑(nm)PDI表面電位(mV)PL-DOX95.4±2.50.114士0.01-2.12±0.9PHSCNK- PL-DOX96.0±3.10.128±0.01-3.34±0.5實施例2、包載阿霉素的PHSCNK修飾的長循環(huán)脂質體的體外細胞靶向性評價
采用激光共聚焦試驗考察細胞對阿霉素的攝取以及阿霉素在細胞內的分布 情況。將人臍靜脈內皮細胞或黑色素瘤細胞分別與PL-DOX和PHSCNK-PL-DOX 置C02培養(yǎng)箱中孵育2小時，依次用冷PBS緩沖液漂洗3次，組織細胞固定液固定， 然后用Hoechst 33258進行細胞核染色10min， PBS漂洗3次后用PBS封片，避光冷 藏，用激光共聚焦顯微鏡測定。實驗結果表明，PHSCNK修飾的阿霉素長循環(huán)脂 質體能夠顯著增加內皮細胞和腫瘤細胞對藥物的攝取。
實施例3、包載阿霉素的PHSCNK修飾的長循環(huán)脂質體的藥動學以及在腫瘤組織 中的分布
由于本發(fā)明結合了長循環(huán)脂質體技術和促進細胞內轉運的方法來提高抗癌 藥物的療效，要求其具備長長循環(huán)脂質體的特征，即延緩藥物在血漿中的清除以 及向腫瘤組織和腫瘤細胞內的轉運。本實施例以接種黑色素瘤B1610的C57BL/6 小鼠為動物模型，尾靜脈注射阿霉素制劑后的實驗結果。 參比制劑阿霉素長循環(huán)脂質體，游離阿霉素溶液。 試驗制劑包載阿霉素的PHSCNK修飾的長循環(huán)脂質體。 試驗動物接種鼠源性的黑色素瘤B16F10的C57BL/6小鼠，體重18-22克， 待腫瘤長到lcm、寸，尾靜脈注射給藥，給藥劑量為6mg/kg，每個時間點3-5只。
試驗結果血藥濃度以及腫瘤中藥物濃度隨時間的變化數(shù)據(jù)分別見附圖2和 附圖3。
實驗結果表明，游離阿霉素尾靜脈注射后迅速從循環(huán)系統(tǒng)中清除，0.5小時 后，血漿中阿霉素濃度檢測不到。與游離阿霉素相比，阿霉素長循環(huán)脂質體和 PHSCNK修飾的阿霉素長循環(huán)脂質體均能夠在血液循環(huán)中維持較長的時間，并且 能夠在腫瘤組織中蓄積，其血漿AUC分別為439.4和233.0hr^g/mL。游離阿霉素、 阿霉素長循環(huán)脂質體和PHSCNK修飾的阿霉素長循環(huán)脂質體的腫瘤AUC分別為 63.4、 91.4和79.3h卞g/g。
實施例4、包載阿霉素的PHSCNK修飾的長循環(huán)脂質體的藥效學
參比制劑阿霉素長循環(huán)脂質體，游離阿霉素溶液。
試驗制劑包載阿霉素的PHSCNK修飾的長循環(huán)脂質體。試驗動物接種鼠源性的黑色素瘤B16F10的C57BL/6小鼠，體重18 — 22克， 接種24小時后，尾靜脈注射給藥， 一周三次，給藥劑量為1.25mg/kg，共給藥六 次，每組6只小鼠，考察指標為腫瘤生長抑制和小鼠存活率。
試驗結果腫瘤抑制試驗結果見附圖4，小鼠生存曲線見附圖5。 結果表明，PHSCNK修飾的阿霉素長循環(huán)脂質體能夠明顯抑制腫瘤的生長 并延長荷瘤小鼠的存活率。
實施例5、包載阿霉素的PHSCNK修飾的長循環(huán)脂質體的制備
取氫化豆磷脂、膽固醇、二棕櫚酰磷脂酰乙醇胺、OHC-PEG2000-CHO (摩
爾比為20: 5: 5: 20)，置于圓底燒瓶中，加入適量氯仿甲醇(10: 1)，超聲
溶解后，置水浴加熱真空旋轉蒸發(fā)除去有機溶劑，使成均勻的透明薄膜。吸取適
量硫酸銨溶液(123mM, pH5.4)加入到圓底燒瓶中，渦旋振蕩使脂膜完全脫落， 水浴超聲至出現(xiàn)淡藍色乳光。將制得的空白脂質體過SephadexG50柱，用磷酸鹽 緩沖鹽(PBS， pH7.4)洗脫，收集脂質體部分，將收集到的空白脂質體置65'C 水浴中預熱，加入阿霉素儲備液孵育10分鐘，并時時振蕩，得到PEG2000修飾的 阿霉素脂質體(PL-DOX)。取PHSCNK儲備液適量，緩慢加入到純化的PL-DOX 溶液，滴加完畢后，37°C, 2000rpm，孵育2小時，得到PHSCNK修飾的阿霉素脂 質體(PHSCNK-PL-DOX)。
實施例6、包載阿霉素的PHSCNK修飾的長循環(huán)脂質體的制備
取氫化豆磷脂、膽固醇、二棕櫚酰磷脂酰乙醇胺、OHC-PEG2000-CHO (摩
爾比為20: 10: 10: 20)，置于圓底燒瓶中，加入適量氯仿甲醇(10: 1)，超
聲溶解后，置水浴加熱真空旋轉蒸發(fā)除去有機溶劑，使成均勻的透明薄膜。吸取
適量硫酸銨溶液(123mM， pH5.4)加入到圓底燒瓶中，渦旋振蕩使脂膜完全脫 落，水浴超聲至出現(xiàn)淡藍色乳光。將制得的空白脂質體過SephadexG50柱，用磷 酸鹽緩沖鹽(PBS, pH7.4)洗脫，收集脂質體部分，將收集到的空白脂質體置 65'C水浴中預熱，加入阿霉素儲備液孵育10分鐘，并時時振蕩，得到PEG2000 修飾的阿霉素脂質體(PL-DOX)。取PHSCNK儲備液適量，緩慢加入到純化的 PL-DOX溶液，滴加完畢后，37°C， 2000rpm，孵育2小時，得到PHSCNK修飾的 阿霉素脂質體(PHSCNK-PL-DOX)。
實施例7、包載阿霉素的PHSCNK修飾的長循環(huán)脂質體的制備取大豆磷脂、膽固醇、二棕櫚酰磷脂酰乙醇胺、OHC-PEG2000-CHO (摩爾
比為15: 10: 5: 10)，置于圓底燒瓶中，加入適量氯仿甲醇(10: 1)，超聲溶 解后，置水浴加熱真空旋轉蒸發(fā)除去有機溶劑，使成均勻的透明薄膜。吸取適量 硫酸銨溶液(123mM， pH5.4)加入到圓底燒瓶中，渦旋振蕩使脂膜完全脫落， 水浴超聲至出現(xiàn)淡藍色乳光。將制得的空白脂質體過SephadexG50柱，用磷酸鹽 緩沖鹽(PBS， pH7，4)洗脫，收集脂質體部分，將收集到的空白脂質體置65'C 水浴中預熱，加入阿霉素儲備液孵育10分鐘，并時時振蕩，得到PEG2000修飾的 阿霉素脂質體(PL-DOX)。取PHSCNK儲備液適量，緩慢加入到純化的PL-DOX 溶液，滴加完畢后，37°C， 2000rpm，孵育2小時，得到PHSCNK修飾的阿霉素脂 質體(PHSCNK-PL-DOX)。
實施例8、包載阿霉素的PHSCNK修飾的長循環(huán)脂質體的制備
取卵磷脂、膽固醇、二棕櫚酰磷脂酰乙醇胺、OHC-PEG2000-CHO (摩爾比
為15: 10: 5: 10)，置于圓底燒瓶中，加入適量氯仿甲醇(10: 1)，超聲溶解
后，置水浴加熱真空旋轉蒸發(fā)除去有機溶劑，使成均勻的透明薄膜。吸取適量硫
酸銨溶液(123mM， pH5.4)加入到圓底燒瓶中，渦旋振蕩使脂膜完全脫落，水 浴超聲至出現(xiàn)淡藍色乳光。將制得的空白脂質體過SephadexG50柱，用磷酸鹽緩 沖鹽(PBS， pH7.4)洗脫，收集脂質體部分，將收集到的空白脂質體置65'C水 浴中預熱，加入阿霉素儲備液孵育10分鐘，并時時振蕩，得到PEG2000修飾的阿 霉素脂質體(PL-DOX)。取PHSCNK儲備液適量，緩慢加入到純化的PL-DOX溶 液，滴加完畢后，37°C， 2000rpm，孵育2小時，得到PHSCNK修飾的阿霉素脂質 體(PHSCNK-PL-DOX)。
實施例9、包載阿霉素的PHSCNK修飾的長循環(huán)脂質體的制備
取氫化豆磷脂、膽固醇、二硬脂酰磷脂酰乙醇胺、OHC-PEG2000-CHO (摩
爾比為15: 10: 5: 10)，置于圓底燒瓶中，加入適量氯仿甲醇(10: 1)，超聲
溶解后，置水浴加熱真空旋轉蒸發(fā)除去有機溶劑，使成均勻的透明薄膜。吸取適
量硫酸銨溶液(123mM， pH5.4)加入到圓底燒瓶中，渦旋振蕩使脂膜完全脫落， 水浴超聲至出現(xiàn)淡藍色乳光。將制得的空白脂質體過SephadexG50柱，用磷酸鹽 緩沖鹽(PBS, pH7.4)洗脫，收集脂質體部分，將收集到的空白脂質體置75'C 水浴中預熱，加入阿霉素儲備液孵育10分鐘，并時時振蕩，得到PEG2000修飾的阿霉素脂質體(PL-DOX)。取PHSCNK儲備液適量，緩慢加入到純化的PL-DOX 溶液，滴加完畢后，37°C， 2000rpm，孵育2小時，得到PHSCNK修飾的阿霉素脂 質體(PHSCNK-PL-DOX)
實施例IO、包載阿霉素的PHSCNK修飾的長循環(huán)脂質體的制備
取卵磷脂、膽固醇、二硬脂酰磷脂酰乙醇胺、OHC-PEG2000-CHO (摩爾比
為20: 5: 5: 10)，置于圓底燒瓶中，加入適量氯仿甲醇(10: 1),超聲溶解
后，置水浴加熱真空旋轉蒸發(fā)除去有機溶劑，使成均勻的透明薄膜。吸取適量硫
酸銨溶液(123mM, pH5.4)加入到圓底燒瓶中，渦旋振蕩使脂膜完全脫落，水 浴超聲至出現(xiàn)淡藍色乳光。將制得的空白脂質體過SephadexG50柱，用磷酸鹽緩 沖鹽(PBS， pH7.4)洗脫，收集脂質體部分，將收集到的空白脂質體置65'C水 浴中預熱，加入阿霉素儲備液孵育10分鐘，并時時振蕩，得到PEG2000修飾的阿 霉素脂質體(PL-DOX)。取PHSCNK儲備液適量，緩慢加入到純化的PL-DOX溶 液，滴加完畢后，37°C， 2000rpm，孵育2小時，得到PHSCNK修飾的阿霉素脂質 體(PHSCNK-PL-DOX)。
實施例ll、包載阿霉素的PHSCNK修飾的長循環(huán)脂質體的制備
取大豆磷脂、膽固醇、二硬脂酰磷脂酰乙醇胺、OHC-PEG2000-CHO (摩爾
比為15: 10: 5: 10)，置于圓底燒瓶中，加入適量氯仿甲醇(10: 1)，超聲溶 解后，置水浴加熱真空旋轉蒸發(fā)除去有機溶劑，使成均勻的透明薄膜。吸取適量 硫酸銨溶液(123mM， pH5.4)加入到圓底燒瓶中，渦旋振蕩使脂膜完全脫落， 水浴超聲至出現(xiàn)淡藍色乳光。將制得的空白脂質體過SephadexG50柱，用磷酸鹽 緩沖鹽(PBS， pH7.4)洗脫，收集脂質體部分，將收集到的空白脂質體置65'C 水浴中預熱，加入阿霉素儲備液孵育10分鐘，并時時振蕩，得到PEG2000修飾的 阿霉素脂質體(PL-DOX)。取PHSCNK儲備液適量，緩慢加入到純化的PL-DOX 溶液，滴加完畢后，37°C， 2000rpm，孵育2小時，得到PHSCNK修飾的阿霉素脂 質體(PHSCNK-PL-DOX)。
實施例12、包載阿霉素的PHSCNK修飾的長循環(huán)脂質體的制備
取氫化豆磷脂、膽固醇、二肉豆蔻酰磷脂酰乙醇胺、OHC-PEG2000-CHO
(摩爾比為15: 10: 5: 10)，置于圓底燒瓶中，加入適量氯仿甲醇(10: 1)，
超聲溶解后，置水浴加熱真空旋轉蒸發(fā)除去有機溶劑，使成均勻的透明薄膜。吸取適量硫酸銨溶液(123mM， pH5.4)加入到圓底燒瓶中，渦旋振蕩使脂膜完全 脫落，水浴超聲至出現(xiàn)淡藍色乳光。將制得的空白脂質體過SephadexG50柱，用 磷酸鹽緩沖鹽(PBS， pH7.4)洗脫，收集脂質體部分，將收集到的空白脂質體 置75'C水浴中預熱，加入阿霉素儲備液孵育10分鐘，并時時振蕩，得到PEG2000 修飾的阿霉素脂質體(PL-DOX)。取PHSCNK儲備液適量，緩慢加入到純化的 PL-DOX溶液，滴加完畢后，37°C， 2000卬m，孵育2小時，得歪lJPHSCNK修飾的 阿霉素脂質體(PHSCNK-PL-DOX)
實施例13、包載阿霉素的PHSCNK修飾的長循環(huán)脂質體的制備
取卵磷脂、膽固醇、二肉豆蔻酰磷脂酰乙醇胺、OHC-PEG2000-CHO (摩爾
比為20: 5: 5: 10)，置于圓底燒瓶中，加入適量氯仿甲醇(10: 1)，超聲溶
解后，置水浴加熱真空旋轉蒸發(fā)除去有機溶劑，使成均勻的透明薄膜。吸取適量
硫酸銨溶液(123mM， pH5.4)加入到圓底燒瓶中，渦旋振蕩使脂膜完全脫落， 水浴超聲至出現(xiàn)淡藍色乳光。將制得的空白脂質體過SephadexG50柱，用磷酸鹽 緩沖鹽(PBS， pH7.4)洗脫，收集脂質體部分，將收集到的空白脂質體置65'C 水浴中預熱，加入阿霉素儲備液孵育10分鐘，并時時振蕩，得到PEG2000修飾的 阿霉素脂質體(PL-DOX)。取PHSCNK儲備液適量，緩慢加入到純化的PL-DOX 溶液，滴加完畢后，37°C, 2000rpm，孵育2小時，得到PHSCNK修飾的阿霉素脂 質體(PHSCNK-PL-DOX)。
實施例14、包載阿霉素的PHSCNK修飾的長循環(huán)脂質體的制備
取大豆磷脂、膽固醇、二肉豆蔻酰磷脂酰乙醇胺、OHC-PEG2000-CHO (摩
爾比為15: 10: 5: 10)，置于圓底燒瓶中，加入適量氯仿甲醇(10: 1),超聲
溶解后，置水浴加熱真空旋轉蒸發(fā)除去有機溶劑，使成均勻的透明薄膜。吸取適
量硫酸銨溶液(123mM， pH5.4)加入到圓底燒瓶中，渦旋振蕩使脂膜完全脫落， 水浴超聲至出現(xiàn)淡藍色乳光。將制得的空白脂質體過SephadexG50柱，用磷酸鹽 緩沖鹽(PBS， pH7.4)洗脫，收集脂質體部分，將收集到的空白脂質體置65。C 水浴中預熱，加入阿霉素儲備液孵育10分鐘，并時時振蕩，得到PEG2000修飾的 阿霉素脂質體(PL-DOX)。取PHSCNK儲備液適量，緩慢加入到純化的PL-DOX 溶液，滴加完畢后，37°C， 2000rpm，孵育2小時，得到PHSCNK修飾的阿霉素脂 質體(PHSCNK-PL-DOX)。實施例15、包載阿霉素的PHSCNGGK修飾的長循環(huán)脂質體的制備
取氫化豆磷脂、膽固醇、二硬脂酰磷脂酰乙醇胺、OHC-PEG2000-CHO (摩
爾比為15: 10: 5: 10)，置于圓底燒瓶中，加入適量氯仿甲醇(10: 1)，超聲
溶解后，置水浴加熱真空旋轉蒸發(fā)除去有機溶劑，使成均勻的透明薄膜。吸取適
量硫酸銨溶液(123mM， pH5.4)加入到圓底燒瓶中，渦旋振蕩使脂膜完全脫落， 水浴超聲至出現(xiàn)淡藍色乳光。將制得的空白脂質體過SephadexG50柱，用磷酸鹽 緩沖鹽(PBS， pH7.4)洗脫，收集脂質體部分，將收集到的空白脂質體置75i: 水浴中預熱，加入阿霉素儲備液孵育10分鐘，并時時振蕩，得到PEG修飾的阿霉 素脂質體(PL-DOX)。取PHSCNK儲備液適量，緩慢加入到純化的PL-DOX溶液， 滴加完畢后，37°C， 2000rpm，孵育2小時，得到PHSCNK修飾的阿霉素脂質體 (PHSCNK孔-DOX)。
實施例16、包載阿霉素的PHSCNGGK修飾的長循環(huán)脂質體的制備
取卵磷脂、膽固醇、二硬脂酰磷脂酰乙醇胺、OHC-PEG2000-CHO (摩爾比
為15: 10: 5: 10)，置于圓底燒瓶中，加入適量氯仿甲醇(10: 1)，超聲溶解
后，置水浴加熱真空旋轉蒸發(fā)除去有機溶劑，使成均勻的透明薄膜。吸取適量硫
酸銨溶液(123mM， pH5.4)加入到圓底燒瓶中，渦旋振蕩使脂膜完全脫落，水 浴超聲至出現(xiàn)淡藍色乳光。將制得的空白脂質體過SephadexG50柱，用磷酸鹽緩 沖鹽(PBS， pH7.4)洗脫，收集脂質體部分，將收集到的空白脂質體置65r水 浴中預熱，加入阿霉素儲備液孵育10分鐘，并時時振蕩，得到PEG2000修飾的阿 霉素脂質體(PL-DOX)。取PHSCNK儲備液適量，緩慢加入到純化的PL-DOX溶 液，滴加完畢后，37°C， 2000rpm，孵育2小時，得到PHSCNK修飾的阿霉素脂質 體(PHSCNK-PL-DOX)。
實施例17、包載阿霉素的PHSCNGGK修飾的長循環(huán)脂質體的制備
取大豆磷脂、膽固醇、二硬脂酰磷脂酰乙醇胺、OHC-PEG2000-CHO (摩爾
比為15: 10: 5: 10)，置于圓底燒瓶中，加入適量氯仿甲醇(10: 1)，超聲溶
解后，置水浴加熱真空旋轉蒸發(fā)除去有機溶劑，使成均勻的透明薄膜。吸取適量
硫酸銨溶液(123mM， pH5.4)加入到圓底燒瓶中，渦旋振蕩使脂膜完全脫落， 水浴超聲至出現(xiàn)淡藍色乳光。將制得的空白脂質體過SephadexG50柱，用磷酸鹽 緩沖鹽(PBS， pH7.4)洗脫，收集脂質體部分，將收集到的空白脂質體置65'C水浴中預熱，加入阿霉素儲備液孵育10分鐘，并時時振蕩，得到PEG2000修飾的 阿霉素脂質體(PL-DOX)。取PHSCNK儲備液適量，緩慢加入到純化的PL-DOX 溶液，滴加完畢后，37°C， 2000rpm，孵育2小時，得到PHSCNK修飾的阿霉素脂 質體(PHSCNK-PL-DOX)。
實施例18、包載阿霉素的PHSCNK修飾的長循環(huán)脂質體的制備
取氫化豆磷脂、膽固醇、二棕櫚酰磷脂酰乙醇胺、OHC-PEG3500-CHO (摩
爾比為15: 10: 5: 10)，置于圓底燒瓶中，加入適量氯仿甲醇(10: 1)，超聲
溶解后，置水浴加熱真空旋轉蒸發(fā)除去有機溶劑，使成均勻的透明薄膜。吸取適
量硫酸銨溶液(123mM， pH5.4)加入到圓底燒瓶中，渦旋振蕩使脂膜完全脫落， 水浴超聲至出現(xiàn)淡藍色乳光。將制得的空白脂質體過SephadexG50柱，用磷酸鹽 緩沖鹽(PBS， pH7.4)洗脫，收集脂質體部分，將收集到的空白脂質體置75'C 水浴中預熱，加入阿霉素儲備液孵育10分鐘，并時時振蕩，得到PEG2000修飾的 阿霉素脂質體(PL-DOX)。取PHSCNK儲備液適量，緩慢加入到純化的PL-DOX 溶液，滴加完畢后，37°C， 2000rpm，孵育2小時，得到PHSCNK修飾的阿霉素脂 質體(PHSCNK-PL-DOX)
實施例19、包載阿霉素的PHSCNK修飾的長循環(huán)脂質體的制備
取氫化豆磷脂、膽固醇、二棕櫚酰磷脂酰乙醇胺、二硬脂酰磷脂酰乙醇胺-聚乙二醇、OHC-PEG2000-CHO (摩爾比為15: 10: 5: 1: 10)，置于圓底燒瓶 中，加入適量氯仿甲醇(10: 1)，超聲溶解后，置水浴加熱真空旋轉蒸發(fā)除去
有機溶劑，使成均勻的透明薄膜。吸取適量硫酸銨溶液(123mM， pH5.4)加入 到圓底燒瓶中，渦旋振蕩使脂膜完全脫落，水浴超聲至出現(xiàn)淡藍色乳光。將制得 的空白脂質體過SephadexG50柱，用磷酸鹽緩沖鹽(PBS， pH7.4)洗脫，收集 脂質體部分，將收集到的空白脂質體置75t:水浴中預熱，加入阿霉素儲備液孵育 IO分鐘，并時時振蕩，得到PEG2000修飾的阿霉素脂質體(PL-DOX)。取PHSCNK 儲備液適量，緩慢加入到純化的PL-DOX溶液，滴加完畢后，37°C， 2000rpm, 孵育2小時，得到PHSCNK修飾的阿霉素脂質體(PHSCNK-PL-DOX) 實施例20、包載阿霉素的PHSCNK修飾的長循環(huán)脂質體的制備
取氫化豆磷脂、膽固醇、二棕櫚酰磷脂酰乙醇胺、二硬脂酰磷脂酰乙醇胺-聚乙二醇(摩爾比為15: 10: 5: 1)，置于圓底燒瓶中，加入適量氯仿甲醇(10:1)，超聲溶解后，置水浴加熱真空旋轉蒸發(fā)除去有機溶劑，使成均勻的透明薄膜。 吸取適量硫酸銨溶液(123mM， pH5.4)加入到圓底燒瓶中，渦旋振蕩使脂膜完 全脫落，水浴超聲至出現(xiàn)淡藍色乳光。將制得的空白脂質體過SephadexG50柱， 用磷酸鹽緩沖鹽(PBS， pH7.4)洗脫，收集脂質體部分，將收集到的空白脂質 體置75"水浴中預熱，加入阿霉素儲備液孵育10分鐘，并時時振蕩，得到PEG2000 修飾的阿霉素脂質體(PL-DOX)。取OHC-PEG2000-CHO適量用蒸餾水溶解后， 緩慢滴加到純化的PL-DOX溶液中，滴加完畢后，37°C， 2000rpm，孵育2小時， 然后在PBS (pH7.4)中4"C透析24小時除去過量的OHC-PEG2000-CHO。取 PHSCNK儲備液適量，緩慢加入到上述脂質體溶液中，滴加完畢后，37°C， 2000rpm，孵育2小時，得至!jPHSCNK修飾的阿霉素脂質體(PHSCNK-PL-DOX) 實施例21、包載紫衫醇(PTX)的PHSCNGGK修飾的長循環(huán)脂質體的制備
取氫化豆磷脂、膽固醇、二棕櫚酰磷脂酰乙醇胺、OHC-PEG2000-CHO、紫
衫醇(摩爾比為15: 10: 5: 10: 0.5)，置于圓底燒瓶中，加入適量氯仿甲醇 (10: 1)，超聲溶解后，置水浴加熱真空旋轉蒸發(fā)除去有機溶劑，使成均勻的透
明薄膜。加入0.02M的Tris-HC暖沖液(pH7.0，含0.15M的NaCl)，旋轉搖動圓底燒 瓶，得到脂質體懸液。用氮氣沖洗后，封口室溫平衡l天，水浴超聲處理至出現(xiàn) 淡藍色乳光，然后再用5.4%葡萄糖溶液透析除鹽，得到PEG修飾的紫衫醇脂質體 (PL-PTX)。取PHSCNK儲備液適量，緩慢加入到純化的PL-PTX溶液，滴加完 畢后，37°C， 2000rpm，孵育2小時，得到PHSCNK修飾的紫衫醇脂質體 實施例22、包載多烯紫衫醇(DTX)的PHSCNGGK修飾的長循環(huán)脂質體的制備 取氫化豆磷脂、膽固醇、二棕櫚酰磷脂酰乙醇胺、OHC-PEG2000-CHO、多
烯紫衫醇(摩爾比為15: 10: 5: 10: 0.5)，置于圓底燒瓶中，加入適量氯仿 甲醇(10: 1)，超聲溶解后，置水浴加熱真空旋轉蒸發(fā)除去有機溶劑，使成均勻
的透明薄膜。加入0.02M的Tris-HCl緩沖液(pH7.0，含0.15M的NaCl)，旋轉搖動圓 底燒瓶，得到脂質體懸液。用氮氣沖洗后，封口室溫平衡l天，水浴超聲處理至 出現(xiàn)淡藍色乳光，然后再用5.4%葡萄糖溶液透析除鹽，得到PEG修飾的紫衫醇脂 質體(PL-DTX)。取PHSCNK儲備液適量，緩慢加入到純化的PL-PTX溶液，滴 加完畢后，37°C， 2000rpm，孵育2小時，得到PHSCNK修飾的多烯紫衫醇脂質體 實施例23、包載順鉑(CDDP)的PHSCNK修飾的長循環(huán)脂質體的制備取順鉑溶于0.9%的氯化鈉溶液中，濃度為8.5mg/ml，至45"C的水浴中溫育1 小時。取氫化豆磷脂、膽固醇、二棕櫚酰磷脂酰乙醇胺、OHC-PEG2000-CHO(摩
爾比為15: 10: 5: 10)，置于圓底燒瓶中，加入適量乙醇，超聲溶解后，然后加
入到上述藥物的溶液中。使所得混合溶液中脂材的最終濃度為150mg/ml，乙醇 的濃度為10%。將溶液溫度在75'C條件下持續(xù)攪拌1小時，并在65'C條件下擠壓 過200nm的聚碳酯膜ll次，最后過100nm的聚碳膜。將制得的脂質體放冷至室溫， 在冷卻過程中，有深黃色的沉淀形成，棄去上清液，將樣品在室溫下靜置更長時 間，再收集上清液，如此反復。最后將樣品稀釋2倍后用含有l(wèi)mM氯化鈉10。/。蔗 糖溶液透析直至溶液達到平衡，得到PEG修飾的順鉑脂質體(PL-CDDP)。取 PHSCNK儲備液適量，緩慢加入到純化的PL-CDDP溶液，滴加完畢后，37°C， 2000rpm，孵育2小時，得到PHSCNK修飾的多烯紫衫醇脂質體 實施例24、包載阿霉素的PHSCNK修飾的長循環(huán)脂質體的制備
取氫化豆磷脂、膽固醇、二棕櫚酰磷脂酰乙醇胺、OHC-PEG3500-CHO (摩
爾比為15: 10: 5: 10)，置于圓底燒瓶中，加入適量氯仿甲醇(10: 1)，超聲
溶解后，置水浴加熱真空旋轉蒸發(fā)除去有機溶劑，使成均勻的透明薄膜。吸取適
量硫酸銨溶液(123mM， pH5.4)加入到圓底燒瓶中，渦旋振蕩使脂膜完全脫落， 水浴超聲至出現(xiàn)淡藍色乳光。將制得的空白脂質體過SephadexG50柱，用磷酸鹽 緩沖鹽(PBS， pH7.4)洗脫，收集脂質體部分，將收集到的空白脂質體置75'C 水浴中預熱，加入阿霉素儲備液孵育10分鐘，并時時振蕩，得到PEG3500修飾的 阿霉素脂質體(PL-DOX)。取PHSCNK儲備液適量，緩慢加入到純化的PL-DOX 溶液，滴加完畢后，37°C， 2000rpm，孵育2小時，得至IJPHSCNK修飾的阿霉素脂 質體(PHSCNK-PL-DOX)。
實施例25、包載阿霉素的PHSCNK修飾的長循環(huán)脂質體的制備 組分阿霉素重量百分比0.1%， PHSCNKO.01% ， OHC-PEG3500-CHO0.01%
氫化豆磷脂、膽固醇、二棕櫚酰磷脂酰乙醇胺99.88%，制備方法同實施例24。 實施例26、包載阿霉素的PHSCNK修飾的長循環(huán)脂質體的制備 組分阿霉素重量百分比30%， PHSCNK10。/。 ， OHC-PEG3500-CHO 20% 氫化豆磷脂、膽固醇、二棕櫚酰磷脂酰乙醇胺40%，制備方法同實施例24。
權利要求
1、一種裝載抗癌藥物的長循環(huán)脂質體組合物，其特征在于，其重量百分組成為抗腫瘤藥物，0.1％-30％具有腫瘤新生血管靶向和腫瘤細胞靶向功能的多肽，0.01％-10％聚乙二醇或其衍生物，0.01％-20％制備脂質體藥物的載體，40％-99.88％。
2、 如權利要求1所述的脂質體組合物，其特征在于，所述聚乙二醇選自分子量 在200-50000之間的聚乙二醇，所述聚乙二醇衍生物，選自聚乙二醇的二醛衍 生物OHC-PEG-CHO。
3、 如權利要求1所述的脂質體組合物，其特征在于，所述具有腫瘤新生血管耙向和腫瘤細胞靶向功能的多肽是含有rascN的線性肽或與其結構類似的化合物。
4、 如權利要求3所述的脂質體組合物,其特征在于所述含有PHSCN的線性肽， 是氨基端乙?；汪然缩０坊奈咫?、六肽、七肽、八肽、九肽或十肽。
5、 如權利要求1所述的脂質體組合物，其特征在于，所述含有PHSCN的線性 肽選自Ac-PHSCN-NH2. Ac-PHSCNK-NH2. PHSCN， Ac-PHSCNGGK-NH2等 其中優(yōu)選的為Ac-PHSCN-NH2其中優(yōu)選的為Ac-PHSCN-NH2。
6、 如權利要求1所述的脂質體組合物，其特征在于，所述抗腫瘤藥物選自阿 霉素、環(huán)磷酰胺、放線菌素、博來霉素、正定霉素、表阿霉素、絲裂霉素、甲氨 喋呤、柔紅霉素、紫杉醇、多西紫杉醇、喜樹堿、羥基喜樹堿、柔紅霉素、5-氟脲嘧啶、卡鉑、順鉑、卡氮芥、龜臼乙叉甙、干擾素、長春堿、長春新堿、三 苯氧胺以及相應的鹽類。
7、 如權利要求1所述的脂質體組合物，其特征在于，所述脂質體組合物是注射 給藥的藥物制劑形式。
8、 如權利要求l所述的脂質體組合物，其特征在于，所述脂質體表面多肽的連 接方法是將含苯丙氨酸-組氨酸-半胱氯酸-絲氨酸-天冬酰胺序列的任何線性肽連 到聚乙二醇末端，或直接連接到脂質體的表面。
9、 如權利要求1所述的脂質體組合物，其特征在于，所述脂質體是以磷脂和膽 固醇為材料制成的脂質雙分子層囊泡，其中磷脂總量與膽固醇的比例1-1000: 1;所述制備脂質體藥物的載體主要為磷脂和膽固醇，其中磷脂選自大豆磷脂、二 月桂酰卵磷脂、二肉豆蔻酰卵磷脂、二棕櫚酰卵磷脂、二硬脂酰卵磷脂、二硬脂 酰卵磷脂、1-肉豆蔻酰-2-棕櫚酰卵磷脂、l-棕櫚酰-2-肉豆蔻酰卵磷脂、1-棕櫚 酰-2-硬脂酰卵磷脂、1-硬脂酰-2-棕櫚酰卵磷脂、蛋黃卵磷脂、氫化豆磷脂、二 油?；蚜字?、二月桂酰磷脂酰甘油、二棕櫚脂酰甘油、二硬脂酰磷脂酰甘油、 二油酰磷脂酰甘油、二肉豆蔻酰磷脂酸、二棕櫚酰磷脂酸、二肉豆蔻酰磷脂酰乙 醇胺、二棕櫚酰磷脂酰乙醇胺、二肉豆蔻酰磷脂酰絲氨酸、二棕櫚酰磷脂酰磷脂 酰二絲氨酸、腦磷脂酰絲氨酸、腦神經鞘磷脂、二棕櫚酰神經鞘磷脂、二硬脂酰 神經鞘磷脂或二硬脂酰磷脂酰乙醇胺之一種或一種以上者。
10、如權利要求1所述的脂質體組合物的制備方法，其特征在于，包括以下步驟 將磷脂、膽固醇、聚乙二醇的二醛衍生物作為制備脂質體的原料，用有機溶劑溶 解后，按脂質體制備的常規(guī)方法，制備長循環(huán)脂質體，然后將具有腫瘤新生血管 耙向和腫瘤細胞耙向功能的多肽加入長循環(huán)脂質體中；并加入抗腫瘤藥物。
全文摘要
本發(fā)明提供一種整合素介導的腫瘤雙重靶向脂質體及其制備方法，本發(fā)明的組合物，其組成為抗腫瘤藥物，具有腫瘤新生血管靶向和腫瘤細胞靶向功能的多肽，聚乙二醇或其衍生物和制備脂質體藥物的載體。
文檔編號A61K9/127GK101653416SQ200910176039
公開日2010年2月24日 申請日期2009年9月22日 優(yōu)先權日2009年9月22日
發(fā)明者代文兵, 強 張, 烜 張, 王堅成 申請人:北京大學