專利名稱：用于治療肌營養(yǎng)不良癥的非免疫抑制性環(huán)孢素的制作方法
用于治療肌營養(yǎng)不良癥的非免疫抑制性環(huán)孢素本發(fā)明涉及非免疫抑制性環(huán)孢素A衍生物在減少被診斷有患有肢帶型肌營養(yǎng)不 良(LGMD)，特別是肌聚糖病(sarcoglycanopathy)的受試者中肌纖維壞死的誘發(fā)和肌變性 的應用。肌營養(yǎng)不良癥(MD)包括多組主要累及橫紋肌組織的遺傳性障礙，這些障礙導致 進行性肌無力，消瘦，并且在許多病例中，導致早產(chǎn)兒死亡。與人MD有因果關(guān)系的許多特征 性突變與結(jié)構(gòu)性粘附蛋白中的改變有關(guān)，所述粘附蛋白將基礎的收縮蛋白粘附在基膜上， 從而為骨骼肌細胞膜(肌膜)提供剛性，或與直接穩(wěn)定或修復細胞膜的蛋白，諸如肌聚糖 (sarcoglycan)或肌營養(yǎng)不良蛋白(dystrophin)有關(guān)。肌聚糖基因α-，β-, Υ-，和δ-肌聚糖基因的遺傳突變導致包括異源綜合征， LGMD及其亞組，肌聚糖病的骨骼肌疾病。肌聚糖病的綜合征或表型取決于哪種肌聚糖基因 被突變以及遺傳突變的類型(等位基因變異體)，并且顯示四種形式的特殊功能障礙=LGMD 2C型，2D型，2Ε型和2F型(分別為Υ-，α-，β-，和δ -肌聚糖基因的突變)，它們占所有 被診斷為LGMD病例的25%。具體地，在δ -肌聚糖基因中具體觀察到的不同突變導致LGMD 2F型或LGMD2F的嚴重功能障礙(Online Mendelian Inheritance in Man(人類孟德爾遺 傳聯(lián)機系統(tǒng))
#601287，genetic mutations (遺傳突變)
601411. Emery 等， The Lancet,2002，359 :687_695·)。不同的LGMD類型的特征為伴有萎縮的進行性消瘦和無力，主要累及分別在肩 部和髖部近端的臂部和腿部的肌肉。疾病表型類似于嚴重的杜氏(Ducherme)或貝克 (Becker)肌營養(yǎng)不良綜合征的那些表型。然而，后兩者疾病涉及不同的分子機制和遺傳障 礙。在出現(xiàn)LGMD的分子診斷之前，LGMD患者經(jīng)常被診斷為患有患有杜氏肌營養(yǎng)不良。疾 病的發(fā)作從幼兒時期至成人期的輕度至重度臨床類型不等。至多25%的患者顯示疾病的 嚴重形式，發(fā)生嚴重的腰椎前凸，跟腱攣縮，肌肉肥大，心肌病和心臟傳導缺陷。小腿或舌 肥大，累及肌肉的選擇性和晚期心臟并發(fā)癥或多或少地與各不同的臨床類型特異性地相關(guān) (DaniAle 等，IntJ. Biochem Cell Biol.，2007 ；39 1608-1624)。進行性無力導致限制性肺 疾病和需要輔助通氣的肺換氣不足。通常，發(fā)病率和死亡率存在差異。早發(fā)者，發(fā)展到死亡 的進程是非常迅速的。死亡經(jīng)常是呼吸系統(tǒng)并發(fā)癥的結(jié)局。迄今為止，對于患有任意一種LGMD綜合征的患者沒有特異性的治療方法。用于保 留肌肉功能的積極支持療法，例如，矯形術(shù)，手術(shù)和物理治療使功能性能力達到最大，并且 延長了預期壽命。然而，這些措施不能阻止肌纖維變性和呼吸系統(tǒng)并發(fā)癥的最終發(fā)生。隨著缺少參與肌營養(yǎng)不良癥的特異基因的動物的開發(fā)，不久會更好地理解肌聚糖 病的基礎的分子機制。近年來，顯示缺少S-肌聚糖的小鼠(scgd-/-小鼠)的肌肉細胞由 于S-肌聚糖基因(SCgd)的靶向失活而具有增加的細胞鈣內(nèi)流的傾向。人們認為肌營養(yǎng) 不良蛋白-糖蛋白復合物(DGC)諸如肌營養(yǎng)不良蛋白或肌聚糖復合物的組分丟失導致肌細 胞膜的物理性質(zhì)的根本改變，以及肌膜的滲透壓泄漏的增加。由膜不穩(wěn)定性和脆性導致的 不受調(diào)控的鈣內(nèi)流通道的激活可引起骨骼肌中的營養(yǎng)不良障礙，導致肌纖維變性和誘發(fā)肌 纖維壞死。
Parsons 等(J. Biol. Chem.，2007，282 10068-10078)顯示基因缺失引起的鈣 / 鈣調(diào)蛋白激活的絲氨酸/蘇氨酸蛋白磷酸酶鈣調(diào)磷酸酶(鈣調(diào)磷酸酶(calcineurin))活 性抑制減少了 scgd-/-小鼠中的骨骼肌和肌纖維變性和炎癥，并且是細胞保護性的。在用 作貝克肌營養(yǎng)不良模型的缺少mdx基因(肌營養(yǎng)不良基因突變)的小鼠中沒有觀察到抑 制鈣調(diào)磷酸酶活性后的類似疾病改善，即使在兩種肌營養(yǎng)不良模型中均觀察到增加的鈣內(nèi) 流。事實上，鈣調(diào)磷酸酶轉(zhuǎn)基因的激活保護mdx小鼠(Chakkalakal等，Hum. Mol. Genet.， 2004，13 379-399 ；Stupka 等，ActaNeuropathol.，2004，107 :299_310，但參見 De Luca 等， Am. J. Pathol.，2005，166 :477_489)。Parsons等將鈣調(diào)磷酸酶鑒定為LGMD治療的潛在靶 標?；谒麄兊挠^察結(jié)果，Parsons等建議抑制鈣調(diào)磷酸酶活性可在選擇肌疾病類型，諸如 肢帶型肌營養(yǎng)不良中提供一些益處，因此，環(huán)孢素(CsA)可能是潛在有益的。導致由LGMD中膜通透性改變所誘發(fā)的進行性肌纖維變性的效應器機制還未被明 確，并且是積極研究的主題，其可為最終開發(fā)用于患此類疾病的患者的基于機制的新型治 療策略提供基礎。然而，此時，對于治療患LGMD的患者沒有有效的方法可用。因此，有諸如 本文所述的新型治療方式的需求。本發(fā)明的目的是為臨床醫(yī)生提供用于治療患有LGMD，并且特別是患有肌聚糖病， 更特別地是患有LGMD 2F型的患者中肌纖維壞死和肌變性的誘發(fā)和進展的治療方法。此治 療方法應該保護肌營養(yǎng)不良骨骼肌以及還保護心肌和膈肌免于壞死，并且應該延緩疾病的進展。本發(fā)明人驚奇地發(fā)現(xiàn)不抑制鈣調(diào)磷酸酶的非免疫抑制性環(huán)孢素A(CsA)衍生物對 患診斷為LGMD，特別是肌聚糖病，更特別地是LGMD 2F型的受試者的施用是有效的治療。他 們觀察到非免疫抑制性環(huán)孢素A衍生物[D-MeAla]3-[EtVal]4-CsA的施用減少了診斷患有 肌纖維壞死，特別是LGMD，更特別地是LGMD 2F型的受試者的肌肉病變，和疾病的變性和進 展，以及通過減少線粒體對潛在的鈣超載的敏感性來使肌纖維面積分布正?；?。受試者可以是顯示由于負責該疾病的顯型的基因的缺失或不表達引起的肌營養(yǎng) 不良顯性的人或哺乳動物諸如，例如，小鼠。因此，本發(fā)明涉及式I的非免疫抑制性環(huán)孢素A衍生物，更優(yōu)選地式II的 非免疫抑制性環(huán)孢素A衍生物和最優(yōu)選地式III的非免疫抑制性環(huán)孢素A衍生物 [D-MeAla]3-[EtVall4-CsA在制備用于預防或減少患有LGMD，特別是肌聚糖病，更特 別地LGMD 2F型的受試者中的肌變性的藥品中的應用。適于用于本發(fā)明的非免疫抑 制性CsA衍生物也描述在Novartis AG的國際專利申請W02005/021028的3_6頁上。 [D-MeAla]3-[EtVal]4-CsA 公開在 Wenger 等的國際專利申請 WO 00/01715 中。式 III 的 [D-MeAla]3-[EtVall4-CsA 已經(jīng)被歸屬為 CAS 注冊號 254435-95-5。用于本發(fā)明中的非免疫抑制性CsA衍生物是由下式所述的環(huán)狀十一氨基酸多肽式I
權(quán)利要求
具有下式的非免疫抑制性環(huán)孢素A衍生物在制備用于治療肢帶型肌營養(yǎng)不良的藥物中的應用，其中W是MeBmt、二氫 MeBmt、8’ 羥基 MeBmt或O 乙?；?MeBmt；X是αAbu、Val、Thr、Nva或O 甲基蘇氨酸(MeOThr)；R是Pro、Sar、(D) MeSer、(D) MeAla或(D) MeSer(O乙?；?；Y是MeLeu、硫代MeLeu、γ 羥基 MeLeu、MeIle、MeVal、MeThr、MeAla、MeaIle或MeaThr；N 乙基Val(EtVal)、N 乙基Ile、N 乙基Thr、N 乙基Phe、N 乙基Tyr或N 乙基Thr(O乙?；?，其中當R是Sar時Y不是MeLeu；Z是Val、Leu、MeVal或MeLeu；Q是MeLeu、γ 羥基 MeLeu、MeAla或Pro；T1是(D)Ala或Lys；T2是MeLeu或γ 羥基 MeLeu；和T3是MeLeu或MeAla。FPA00001190033500011.tif
2.權(quán)利要求1的非免疫抑制性環(huán)孢素A衍生物的應用，其中 W 是 MeBmt、二氫-MeBmt>8'-羥基-MeBmt ；X 是 α Abu、Val、Thr、Nva 或 0-甲基蘇氨酸(MeOThr)； R 是 Pro、Sar、(D)-MeSer, (D)-MeAla 或(D)-MeSer (0 乙?；?；Y是 MeLeu> 硫代 MeLeu> Y _ 輕基-MeLeu> Melle、MeVal> MeThr> MeAla、MeaIle 或 MeaThr ；N-乙基 Val (EtVal)、N-乙基 lie、N-乙基 Thr, N-乙基 Phe、N-乙基 Tyr 或 N-乙 基Thr (0乙?；?，其中當R是Sar時Y不是MeLeu ；Z 是 Val、Leu、MeVal 或 MeLeu ； Q 是 MeLeu > γ -輕基-MeLeu 或 MeAla ； T1 是(D)Ala;T2 是 MeLeu ；以及 T3 是 MeLeu。
3.權(quán)利要求1的非免疫抑制性環(huán)孢素A衍生物的應用，其中 W 是 MeBmt ；X 是 α Abu ； R 是(D)-MeAla ；Y是 N-乙基 Val (EtVal)； Z 是 Val ；Q 是 MeLeu ； T1 是(D)Ala; T2是MeLeu ；以及 T3 是 MeLeu0
4.用于治療肢帶型肌營養(yǎng)不良的具有下式的非免疫抑制性環(huán)孢素A衍生物
5.權(quán)利要求4的非免疫抑制性環(huán)孢素A衍生物，其中 W 是 MeBmt、二氫-MeBmt>8'-羥基-MeBmt ；X 是 α Abu、Val、Thr、Nva 或 0-甲基蘇氨酸(MeOThr)； R 是 Pro、Sar、(D)-MeSer, (D)-MeAla 或(D)-MeSer (0 乙?；?；Y是 MeLeu> 硫代 MeLeu> Y _ 輕基-MeLeu> Melle、MeVal> MeThr> MeAla、MeaIle 或 MeaThr ；N-乙基 Val (EtVal)、N-乙基 lie、N-乙基 Thr, N-乙基 Phe、N-乙基 Tyr 或 N-乙 基Thr (0乙?；?，其中當R是Sar時Y不是MeLeu ；Z 是 Val、Leu、MeVal 或 MeLeu ； Q 是 MeLeu > γ -輕基-MeLeu 或 MeAla ； T1 是(D)Ala; T2是MeLeu ；以及 T3 是 MeLeu0
6.權(quán)利要求4的非免疫抑制性環(huán)孢素A衍生物，其中 W 是 MeBmt ；X 是 α Abu ； R 是(D)-MeAla ；Y是 N-乙基 Val (EtVal)； Z 是 Val ；Q 是 MeLeu ； T1 是(D)Ala; T2是MeLeu ；以及 T3 是 MeLeu0
7.一種預防或減少患有肢帶型肌營養(yǎng)不良的受試者中的肌變性的方法，包括向所述患 者施用有效量的具有下式的非免疫抑制性環(huán)孢素A衍生物
8.權(quán)利要求7的方法，其中W 是 MeBmt、二氫-MeBmt>8'-羥基-MeBmt ；X 是 α Abu、Val、Thr、Nva 或 0-甲基蘇氨酸(MeOThr)；R 是 Pro、Sar、(D)-MeSer, (D)-MeAla 或(D)-MeSer (0 乙?；?；Y是 MeLeu> 硫代 MeLeu> Y _ 輕基-MeLeu> Melle、MeVal> MeThr> MeAla、MeaIle 或 MeaThr ；N-乙基 Val (EtVal)、N-乙基 lie、N-乙基 Thr, N-乙基 Phe、N-乙基 Tyr 或 N-乙 基Thr (0乙?；?，其中當R是Sar時Y不是MeLeu ；Z 是 Val、Leu、MeVal 或 MeLeu ； Q 是 MeLeu > γ -輕基-MeLeu 或 MeAla ； T1 是(D)Ala; T2是MeLeu ；以及 T3 是 MeLeu0
9.權(quán)利要求7的方法，其中 W 是 MeBmt ；X 是 α Abu ； R 是(D)-MeAla ；Y是 N-乙基 Val (EtVal)； Z 是 Val ；Q 是 MeLeu ； T1 是(D)Ala; T2是MeLeu ；以及 T3 是 MeLeu0
全文摘要
本發(fā)明涉及非免疫抑制性環(huán)孢素A衍生物在預防或減少患有肢帶型肌營養(yǎng)不良的受試者中的肌變性中的應用。
文檔編號A61K38/13GK101939021SQ200980104370
公開日2011年1月5日 申請日期2009年2月5日 優(yōu)先權(quán)日2008年2月8日
發(fā)明者杰弗里·D·莫爾肯廷 申請人:德比奧法姆股份有限公司