專利名稱：一種新的脂質(zhì)體制備方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及生物醫(yī)藥技術(shù)領(lǐng)域，確切地說它是一種新的脂質(zhì)體(liposomes)(包括類脂體，niosomes)制備方法。
背景技術(shù)：
脂質(zhì)體是由磷脂雙分子層形成的閉合囊泡狀結(jié)構(gòu)。脂質(zhì)體根據(jù)其結(jié)構(gòu)的不同可以分為單層脂質(zhì)體(unilamellar yesicles)、多層脂質(zhì)體(multilamellar yesicles)和多囊脂質(zhì)體(multivesicular liposomes)。脂質(zhì)體由英國人Alec D. Bangham在1965年首先發(fā)現(xiàn)。此后，人們發(fā)現(xiàn)脂質(zhì)體作為物質(zhì)載體，尤其是藥物載體，有著巨大的應(yīng)用價值，于是便對脂質(zhì)體進行了系統(tǒng)而廣泛的研究。經(jīng)過了二十多年的探索，科研人員已經(jīng)提出了許多很有價值的脂質(zhì)體制備方法。 目前脂質(zhì)體主要通過分散技術(shù)(dispersion technique)制備，其方法可分為三大類1)以機械分散技術(shù)為基礎(chǔ)。如薄膜分散法(film dispersion)，即將用于形成脂質(zhì)體的磷脂溶于有機溶媒中——通常是氯仿或氯仿和甲醇的混合物，之后在減壓的條件下除去溶媒形成干燥的磷脂膜。將磷脂膜水化即可形成多層脂質(zhì)體(multilamellar vesicles) 0該方法雖是最經(jīng)典、應(yīng)用最廣的方法，但是卻存在一些缺點。例如使用毒性很大的有機溶媒；無法實現(xiàn)工業(yè)化生產(chǎn)；當(dāng)用含藥水溶液水化時，形成的多層脂質(zhì)體(multilamellar vesicles) 層與層之間藥物分布不均一，必須通過反復(fù)凍融處理等。2)以表面活性劑分散技術(shù)為基礎(chǔ)。如去左污劑透析法，但難以工業(yè)化生產(chǎn)，且不適合包封水溶性藥物?；靡匀軇┗蚬踩軇?cosolvent)分散技術(shù)為基礎(chǔ)。例如，逆相蒸發(fā)法(reverse evaporation vesicles, REV)，此種制備方法對水溶性藥物的包封率及載藥量相對較高；而乳劑法制備多囊脂質(zhì)體 (multivesicular liposome)目前可以實現(xiàn)大規(guī)模生產(chǎn)(skyepharma StJ depofoam 技術(shù)平臺)，但是僅限于制備微米級具有緩釋功能的多囊脂質(zhì)體；乙醇注入法(ethanol injection)，已經(jīng)實現(xiàn)大規(guī)模生產(chǎn)(請參見alza公司的技術(shù)和polymun的crossflow技術(shù))，可采用被動載藥法制備脂質(zhì)體，但包封率較低，且需要在較高溫度下制備(60°C左右)，通常會引起易氧化、易水解和易變性的藥物失去活性，而采用主動載藥法制備脂質(zhì)體， 包封率雖有所提高，但不適用于對酸堿敏感的藥物，同時也容易引起磷脂分解變性。而概括起來，目前脂質(zhì)體制備方法主要存在如下缺陷1.制劑的穩(wěn)定性問題。通過已有方法得到的脂質(zhì)體制劑通常為液體制劑，往往不夠穩(wěn)定，主要表現(xiàn)在如下三個方面(1)脂質(zhì)體屬于熱力學(xué)不穩(wěn)定分散系。脂質(zhì)體混懸于水相時，常常會出現(xiàn)聚集、融合等現(xiàn)象，導(dǎo)致粒徑變大，嚴(yán)重的還有可能出現(xiàn)分層。(2)磷脂存在于水相時，通常容易出現(xiàn)水解、氧化等現(xiàn)象。由于磷脂水解后會形成溶血磷脂，一方面增加制劑的毒性，另一方面也容易使脂質(zhì)體解體，造成被包封藥物的滲漏。(3)脂質(zhì)體混懸在水相中，在儲存過程中，藥物可能會滲漏，導(dǎo)致藥物包封率改變，從而影響制劑療效。如果藥物本身容易水解，制劑的穩(wěn)定性問題更顯突出。2.包封率問題。通過已有方法得到的脂質(zhì)體制劑，水溶性藥物包封率往往較低。 包封率低不但會造成原料浪費，還可能達不到有效劑量，不能夠體現(xiàn)脂質(zhì)體制劑的優(yōu)勢。目前常用主動載藥法(remote loading)來提高水溶性藥物包封率。但無論是pH梯度還是硫酸銨梯度主動載藥法，均需要在脂質(zhì)體膜內(nèi)外提供較大差別的PH環(huán)境，不僅不適用于對酸堿敏感的藥物，也容易引起磷脂分解變性。此外，主動載藥法僅適用于可解離的藥物，應(yīng)用范圍相對有限。3.脂質(zhì)體制劑滅菌問題。由于磷脂本身的性質(zhì)，一般不能夠?qū)ψ罱K的制劑加熱滅菌，這樣就要求整個生產(chǎn)過程必須采用無菌操作。這對某些脂質(zhì)體制備工藝來說可能無法實現(xiàn)。4.脂質(zhì)體的粒徑控制問題。獲得小粒徑脂質(zhì)體(小于200nm)通常有利于靜脈給藥。這是因為(1)大粒徑的脂質(zhì)體很容易被體內(nèi)的單核巨噬系統(tǒng)所吞噬，從而被迅速清除。(2)小粒徑的脂質(zhì)體可以被動靶向腫瘤組織和缺血心肌。為了獲得小粒徑脂質(zhì)體， 通常需要對已得到的脂質(zhì)體進行超聲、研磨或擠出。這往往又會導(dǎo)致藥物進一步滲漏，影響制劑質(zhì)量。5.藥物釋放問題一些藥物(如拓?fù)涮婵档认矘鋲A類藥物)包封入脂質(zhì)體后釋放過快，無法達到藥物的病灶濃集作用；而一些藥物(如鉬類制劑)包封入脂質(zhì)體后釋放過慢，脂質(zhì)體達到病灶部位后卻由于釋藥過慢而無法達到有效治療濃度。為了能夠解決上述問題，我們發(fā)明了新的脂質(zhì)體制備方法。

發(fā)明內(nèi)容
為了克服上述脂質(zhì)體制備技術(shù)的不足，我們發(fā)明了一種新的脂質(zhì)體制備方法。通過此方法，可以解決目前脂質(zhì)體制劑所面臨的一些難題。我們將該方法稱為乳化-凍干法 (emulsification-lyophilization)。該制備方法包括以下步驟a、將用于形成脂質(zhì)體的脂類物質(zhì)、凍干品支撐劑和待包封的親脂性物質(zhì)溶于有機溶劑形成油相(0)，將待包封的親水性物質(zhì)和凍干保護劑溶于水形成內(nèi)水相(W)，將油相 (0)、內(nèi)水相(W)按合適的比例混合并乳化得到W/0型乳劑；b、將得到的W/0型乳劑冷凍干燥除去溶媒；C、將得到的凍干產(chǎn)物水化得到脂質(zhì)體。下面我們將就該技術(shù)的具體操作和優(yōu)勢進行詳細(xì)描述。步驟a優(yōu)選的有機溶媒為環(huán)己烷或環(huán)己烷一氯仿混合溶液，用于形成脂質(zhì)體的脂類物質(zhì)主要包括磷脂酰膽堿(phosphatidylcholine，PC)和調(diào)節(jié)磷脂膜性質(zhì)的膽固醇(cholesterol)；具有類似磷脂性質(zhì)的兩性物質(zhì)司盤(Span)可用于形成類脂體 (niosomes)。此外，為了提高特包封物質(zhì)的包封率、減小脂質(zhì)體粒徑、增加脂質(zhì)體穩(wěn)定性，可加入適量的荷電脂類物質(zhì)在包封荷負(fù)電物質(zhì)時，可加入荷正電的脂類物質(zhì)，如1，2_ 二?；?sn-甘油-3-乙基磷脂酰膽堿等。在包封荷正電的水溶性藥物時，可加入荷負(fù)電的脂類物質(zhì)，如磷脂酰甘油和磷脂酰絲氨酸等。為了提高磷脂的抗氧化能力，可加入脂溶性抗氧化劑如vitamin E等。本發(fā)明的成功實施，要求步驟a中必須得到穩(wěn)定的W/0型乳劑。ff/Ο型乳劑指的是澄明、半透明或乳白色均一穩(wěn)定乳劑。如果環(huán)己烷溶液和水溶液的比例不合適，則乳劑不穩(wěn)定，分層沉淀，可能會出現(xiàn)相反0/W型乳劑，無法使待包封物質(zhì)包封于內(nèi)水相，從而導(dǎo)致形成的脂質(zhì)體包封率大大下降。

步驟b優(yōu)選的去除溶媒的方法為冷凍干燥法，ff/Ο乳劑可以先置于液氮或低溫度裝置中迅速凍結(jié)，然后在凍干機中凍干。步驟c為水化凍干產(chǎn)物以形成脂質(zhì)體，可采用內(nèi)水相相同溶液或合適的緩沖液在適宜的溫度下完成，為加速水化，也可在機械力的作用下完成，如可以進行攪拌或振蕩等。為了得到無菌制劑，可將步驟a中得到的W/0乳劑(包括微乳、反膠束)可以濾過除菌(但并非所有W/0乳劑都可以濾過除菌，如果粒徑大于200納米則難以濾過除菌)，其它步驟在無菌條件下完成。實施本發(fā)明的時候，通過步驟a得到的W/0型乳劑，內(nèi)水相(W)中可加入水溶性凍干保護劑，如海藻糖、蔗糖、乳糖、甘露醇等物質(zhì)，外油相中可加入油、水兩溶性支撐劑(如 PEG1000，PEGl500，PEG2000，PEG3000，PVP等)。這些物質(zhì)，有如下幾個作用1、可以作為凍干保護劑，確保形成的脂質(zhì)體具有合適的粒徑及較高的包封率；2、使得到的凍干產(chǎn)物穩(wěn)定， 可以長期儲存，臨用前再進行水化形成脂質(zhì)體；3、顯著加快凍干產(chǎn)物的水化速度，使凍干產(chǎn)物可以立即水化形成脂質(zhì)體；4、使凍干產(chǎn)物具有良好的形態(tài)。本發(fā)明中提到的待包封物質(zhì)，可以是各種藥物藥物也可以是其它物質(zhì)。若為水溶性藥物，則將藥物、凍干保護劑溶于內(nèi)水相(W)，脂類物質(zhì)、支撐劑溶于有機相，通過乳化法得到W/0型乳劑后凍干。得到的凍干產(chǎn)物可長期貯存，臨用前水化形成脂質(zhì)體制劑。為了改變藥物釋放速率可以加入能夠與藥物形成不同晶型沉淀或絡(luò)合物的不同物質(zhì)(如拓?fù)涮婵?topotecan)與硫酸根(S042_)形成沉淀，與銅離子(Cu2+)、鎳離子(Ni2+)形成絡(luò)合物等)以制備控釋脂質(zhì)體。待包封物質(zhì)若為脂溶性藥物，則與脂類物質(zhì)、支撐劑溶于有機相，凍干保護劑溶于內(nèi)水相，通過乳化法得到W/0型乳劑后凍干。得到的凍干產(chǎn)物可長期貯存，臨用前水化形成脂質(zhì)體制劑。本發(fā)明也可以采用主動載藥法，待包封物質(zhì)可以為硫酸銨、醋酸鈉等物質(zhì)。例如， 采用硫酸銨梯度法進行主動載藥時，可以將硫酸銨溶于內(nèi)水相，凍干保護劑溶于內(nèi)水相，月旨類物質(zhì)(及支撐劑)溶于有機相，通過乳化法得到W/0型乳劑后凍干。得到的凍干產(chǎn)物可長期貯存，待到使用時，加水水化形成包封硫酸銨的脂質(zhì)體，之后加入藥物，即實現(xiàn)主動載藥過程。采用PH梯度法進行主動載藥時，可以將檸檬酸溶于內(nèi)水相，凍干保護劑溶于內(nèi)水相，脂類物質(zhì)溶于有機相，通過乳化法得到W/0型乳劑后凍干。得到的凍干產(chǎn)物可長期貯存，臨用前先加入水水化形成包封檸檬酸的脂質(zhì)體，之后加入生物堿類藥物，孵育得到含藥脂質(zhì)體，實現(xiàn)主動載藥過程。從上述步驟中我們可以看出，我們發(fā)明的制備工藝具有如下優(yōu)點1.該制備工藝適用于大規(guī)模生產(chǎn)。脂質(zhì)體工業(yè)化生產(chǎn)必須解決幾個問題，例如 滅菌、除熱源、生產(chǎn)工藝簡單便于放大，保證脂質(zhì)體在儲藏期內(nèi)穩(wěn)定等。我們發(fā)明的制備工藝可以解決上述問題1)可以將a步驟得到的W/0型乳劑過濾滅菌(粒徑小于200納米的乳劑)，其他步驟采用無菌操作，得到無菌制劑；2)工藝相對簡單，只需乳化設(shè)備及凍干設(shè)備，均為常用設(shè)備，比較容易放大；3)為了保證脂質(zhì)體在儲藏期內(nèi)穩(wěn)定，可以將凍干物在使用前水化形成脂質(zhì)體，實驗表明得到的凍干物可以長期儲存，使用時水化立即形成脂質(zhì)體。2.本制備方法的顯著特點是可以明顯提高水溶性藥物包封率。由于水溶性藥物始終包含于乳劑內(nèi)水相、有序磷脂內(nèi)部、形成的脂質(zhì)體內(nèi)部，因此有較高包封率。3.易于制備控釋脂質(zhì)體。將能夠與藥物形成穩(wěn)定晶型沉淀或絡(luò)合物等的物質(zhì)與藥物共同包封于脂質(zhì)體，可以有效控制藥物釋放速度。4.本發(fā)明可以有效地控制脂質(zhì)體粒徑。如前所述，通過調(diào)整凍干保護劑、支撐劑、 脂類物質(zhì)的比例及乳化過程等條件，可以有效地控制脂質(zhì)體的粒徑。由于可以得到粒度均一的小粒徑脂質(zhì)體，增加了本發(fā)明的應(yīng)用價值。5.該制備工藝可以充分保證某些敏感藥物的活性。由于制備工藝在低溫下完成， 這樣就避免了藥物的水解和氧化。水溶性藥物在W/0型乳劑中僅存在于內(nèi)水相，且存在的時間很短，可以避免有機溶媒使藥物的變性失活。脂溶性藥物在W/0型乳劑中雖存在于油相，但有機溶媒對于脂溶性藥物一般無變性失活作用。6.可以徹底除去殘留溶媒也是本發(fā)明的一個優(yōu)點。由于凍干機的真空度很低(可小于IOpa)，所以得到的凍干產(chǎn)物中檢查不出溶媒殘留。簡而言之，本發(fā)明不同于傳統(tǒng)的脂質(zhì)體制備工藝(如REV)，其實質(zhì)是通過凍干的手段去除W/0型乳劑中的溶媒并得到凍干產(chǎn)物，再水化形成脂質(zhì)體，從而具備了上述顯著優(yōu)勢。通過下列實施實例舉例說明本發(fā)明的具體制備方法，但本發(fā)明的保護范圍，不局限于此。
具體實施例方式實施例1 支撐劑及凍干保護劑蔗糖對凍干特性的影響將以5%蔗糖水溶液為內(nèi)水相，支撐劑1%PEG1500、1%大豆卵磷脂溶于乙醚一氯仿一環(huán)己烷(1 1 4，ν/ν/ν)溶液為油相，內(nèi)水相與油相按1 3體積比混合，通過探頭超聲(80w，30s)乳化，得到W/0型乳劑，分裝Iml/瓶，置入-80低溫冰箱冷凍后，轉(zhuǎn)入冷凍干燥機凍干，發(fā)現(xiàn)支撐劑PEG2000、凍干保護劑蔗糖加入明顯改善凍干產(chǎn)物的形態(tài)，加快水化速率，并且得到的水化產(chǎn)物為粒徑小于200 納米的脂質(zhì)體。凍干品儲存1年以上仍可以形成脂質(zhì)體。實施例2 脂質(zhì)成分對脂質(zhì)體粒徑的影響將以5%乳糖水溶液為內(nèi)水相，2% PEG2000溶于氯仿一乙醚(1 1，ν/ν)油相，通過渦旋振蕩(2000rpm, 3min)乳化，得到W/0型乳劑后， 分裝Iml/瓶，置入充滿液氮的液氮灌冷凍后，轉(zhuǎn)入凍干機凍干，凍干產(chǎn)物中脂質(zhì)成分為PC， PC/CH0L(4 1，質(zhì)量比)，PC/PS(9 1，質(zhì)量比)，加入5%蔗糖水溶液后形成磷脂濃度均為 1 %的脂質(zhì)體，用LS230 (Beckmann公司)測定粒徑，脂質(zhì)體的平均粒徑分別為176nm，158nm, 123nm(number mean diameter)。這說脂質(zhì)成分對于脂質(zhì)體粒徑有一定的影響。實施例3
用透射電子顯微鏡觀察實施例1和2中得到的脂質(zhì)體。采用負(fù)染法進行觀察。即將脂質(zhì)體用的磷鎢酸(PH= 7)染色。在電子顯微鏡下發(fā)現(xiàn)脂質(zhì)體為單層或寡層、近球形囊泡，大小與用粒度儀測定的結(jié)果相吻合。實施例4

鈣黃綠素脂質(zhì)體的制備將3ml含0. 5%大豆卵磷脂、0. 5% PEG3000的乙醚一環(huán)己烷(1 4, ν/ν)溶液與Iml含10%海藻糖的0. ImM鈣黃綠素水溶液混合，以高速混勻器乳化(26000rpm，lmin)，得到W/0型乳劑，分裝Iml/瓶，置入-80低溫冰箱冷凍后，轉(zhuǎn)入冷凍干燥機凍干。用Iml 10%蔗糖溶液水化凍干品，用LS32 (Beckmarm公司)測定粒徑，脂質(zhì)體的平均粒徑為102nm(number mean diameter)。用熒光猝滅法測包封率，為75. 1%。實施例5 本實施例是將非甾體抗炎藥物Flurbiprofen制成脂質(zhì)體。將3ml含 Flurbiprofen (ImM)、1 % SPC、1 % PVP (聚乙烯吡咯烷酮)的環(huán)己烷溶液與Iml含2. 5 %葡萄糖、2. 5%甘露醇水溶液混合，水浴超聲乳化(21kHz，120w,2min)得到W/0型乳劑，分裝Iml/ 瓶，置入-80低溫冰箱冷凍后，轉(zhuǎn)入冷凍干燥機凍干。每瓶凍干品用Iml 5%蔗糖水溶液水化,用LS230(LS32version 3. 19 software，Beckmann公司)測定粒徑。脂質(zhì)體的平均粒徑為122nm(number meandiameter) 0用微柱離心分離法分離脂質(zhì)體和游離藥物，測得包封率為 91. 2%。實施例6:本實施例是制備具有控釋特性的拓?fù)涮婵抵|(zhì)體。將3ml含2% SPC,2% PEG1500 的環(huán)己燒一氯仿(3 1，ν/ν)溶液與Iml 5%蔗糖水溶液(不同處方分別含有300mM枸櫞酸鈉、300mM Na2SO4,300mM CuSO4)混合后高壓乳勻機乳化(200psi，3 cycles)，得到W/0型乳劑，分裝Iml/瓶，置入-80低溫冰箱冷凍后，轉(zhuǎn)入冷凍干燥機凍干。凍干品用5%蔗糖水溶液水化，得到小粒徑脂質(zhì)體，測得包封率為60%-70%,含有300mM枸櫞酸鈉脂質(zhì)體釋藥速率約為含300mM CuSO4脂質(zhì)體的3倍，為300mM Na2SO4脂質(zhì)體的2倍。實施例7 本實施例是將乳化一凍干法與主動載藥法結(jié)合制備拓?fù)涮婵抵|(zhì)體。將3ml含 2% SPC,4% PEG2000乙醚一環(huán)己烷(1 4，ν/ν)溶液與Iml 5%蔗糖水溶液(含硫酸銨)混合，混勻器乳化(6000rpm，3min)，得到W/0型乳劑，分裝Iml/瓶，置入充滿液氮的液氮灌冷凍后，轉(zhuǎn)入凍干機凍干，凍干品用5%蔗糖水溶液水化，得到小粒徑脂質(zhì)體，用G-50 SEPHADEX葡聚糖凝膠柱分離去除游離硫酸銨，加入拓?fù)涮婵?藥物/磷脂=1 4)，在 40-50°C保溫10分鐘，得到包封拓?fù)涮婵档闹|(zhì)體，測得包封率為99. 7%。實施例8 本實施例是將乳化一凍干法制備5-FU類脂體(niosomes)。將3ml含2% SPAN60、 4%PEG2000的乙醚一環(huán)己烷(1 l，v/v)溶液與Iml 5%葡萄糖水溶液(含5mg/ml 5-FU) 混合，混勻器乳化(6000rpm，3min)，得到W/0型乳劑，分裝Iml/瓶，置入_80°C低溫冰箱冷凍后，轉(zhuǎn)入凍干機凍干。凍干品用5%蔗糖水溶液水化，得到粒徑為230納米的類脂體，測得包封率為25. 7%。
權(quán)利要求
1.一種新的脂質(zhì)體制備方法，其特征在于a、將用于形成脂質(zhì)體的脂類物質(zhì)和待包封的親脂性物質(zhì)溶于有機溶劑形成油相(0)， 將待包封的親水性物質(zhì)溶于水形成內(nèi)水相(W)，將油相(0)、內(nèi)水相(W)按合適的比例混合并乳化得到W/0型乳劑(包括微乳、反膠束)；b、將得到的W/0型乳劑冷凍干燥除去溶媒得到凍干產(chǎn)物；c、將得到的凍干產(chǎn)物水化得到脂質(zhì)體。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種新的脂質(zhì)體制備方法，其特征在于步驟a中的有機溶劑指環(huán)己烷、氯仿、乙醚等與水不混溶易揮發(fā)除去的有機溶劑，或其混合物，優(yōu)選與水凝固點接近的有機溶劑。
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種新的脂質(zhì)體制備方法，其特征在于步驟a中的乳化 (emulsification)指的是攪拌，或振蕩，或渦旋振蕩，或勻乳，或高壓勻乳，或超聲等機械做功操作，或為攪拌、渦旋振蕩、勻乳、高壓勻乳、超聲等組合操作，或為處方成分自動乳化，等等。
4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種新的脂質(zhì)體制備方法，其特征在于步驟a中用于形成脂質(zhì)體的脂類物質(zhì)主要為磷脂(phospholipid)，如磷脂酰膽堿(phosphatidylcholine， PC)、磷脂酰乙醇胺(phosphatidylethanolamine，ΡΕ)或聚乙二醇修飾磷脂酰乙醇胺(PEGylatedPE)、磷脂酰絲氨酸(Phosphatidylserine，PS)、磷脂酰甘油 (Phosphatidylglycerol,PG)等，以及調(diào)節(jié)磷脂膜性質(zhì)的膽固醇(cholesterol)；也可以為具有磷脂類似性質(zhì)的其它兩性物質(zhì)(如司盤類等，以形成類脂質(zhì)體，niosomes)；以及不同脂類適當(dāng)配比的混合物；為了提高待包封物質(zhì)的包封率、減小脂質(zhì)體粒徑及增加穩(wěn)定性，可加入適量的荷電脂類物質(zhì)在包封負(fù)電荷物質(zhì)時，可加入荷正電的脂類物質(zhì)，在包封正電荷物質(zhì)時，可加入荷負(fù)電的脂類物質(zhì)；為了提高脂質(zhì)體在體內(nèi)外穩(wěn)定性可以加入親水性高分子修飾磷脂，如聚乙二醇磷脂酰乙醇胺(PEG-PE)；為了提高磷脂的抗氧化能力，可加入脂溶性抗氧化劑。
5.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種新的脂質(zhì)體制備方法，其特征在于步驟a中待包封的物質(zhì)可以為藥物，也可以為其它物質(zhì)，如核酸，DNA等。
6.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種新的脂質(zhì)體制備方法，其特征在于為了使凍干產(chǎn)品易于水化及改善凍干品外形，可以在油相中加入能夠同時溶于有機溶劑及水的支撐劑(supportagents)，如聚乙二醇類(polyethylene glycol, PEG，如 PEG1000，PEG1500, PEG2000，PEG3000，等溶于鹵代烴，水)、聚乙烯吡咯烷酮(Polyvinylpyrrolidone，PVP易溶解于水，醇，胺以及鹵代烴中)。
7.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種脂質(zhì)體制備新方法，其特征在于在步驟a內(nèi)水相(W)中可加入適當(dāng)?shù)膬龈杀Ｗo劑(cryoprotectant)，包括二糖(disaccharide)，如海藻糖(trehalose)、蔗糖(sucrose)、乳糖(lactose)、麥芽糖(maltose)等，或單糖 (monosaccharide),如葡萄糖(glucose)、半乳糖(galactose)、甘露糖(mannose),或其它寡聚糖(oligosaccharide)，如三糖(trisaccharide)、四糖(tetrose)、五糖等，或甘露醇 (mannitol)等具有凍干保護等作用的物質(zhì)；或者為幾種凍干保護劑的混合物；為了改變藥物釋放速率可以加入能夠與藥物形成不同晶型沉淀或絡(luò)合物的不同物質(zhì)(如拓?fù)涮婵?(topotecan)與硫酸根(S042_)形成沉淀，與銅離子(Cu2+)、鎳離子(Ni2+)形成絡(luò)合物等)以制備控釋脂質(zhì)體。
8.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種脂質(zhì)體制備新方法，其特征在于為了得到無菌制劑，可將步驟a中得到的W/0型乳劑(粒徑小于200納米，包括微乳、反膠束)過濾滅菌，其它步驟在無菌條件下完成。
9.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種新的脂質(zhì)體制備方法，其特征在于步驟b中W/0型乳劑可以在液氮或低溫裝置凍結(jié)，然后在凍干機中凍干；也可以直接在凍干機中凍干。
10.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種新的脂質(zhì)體制備方法，其待征在于步驟C為水化凍干產(chǎn)物以形成脂質(zhì)體，可采用水或合適的緩沖液在適當(dāng)?shù)臏囟认峦瓿?，為加速水化，也可在機械力的作用下完成，如可以進行攪拌或振蕩等；如采用被動載藥法時，水化時可以采用水或合適的緩沖液；如采用硫酸銨或醋酸鈉或醋酸鈣梯度法主動載藥時，可以用水水化形成脂質(zhì)體后，加入待包封的藥物孵育形成含藥脂質(zhì)體；如采用PH梯度法主動載藥時，用水水化形成脂質(zhì)體后，再加入藥物孵育得到含藥脂質(zhì)體。
全文摘要
本發(fā)明是一種新的脂質(zhì)體制備方法，它解決了易氧化、易水解和易變性的藥物制備成脂質(zhì)體過程中出現(xiàn)的一些難題，并且對于各類藥物均具有較高包封率。制備工藝過程包括如下步驟a、將用于形成脂質(zhì)體的脂類物質(zhì)、親脂性物質(zhì)溶于有機溶劑形成油相溶液(O)；b、將待包封的水溶性物質(zhì)溶于水中形成水相溶液(W)；c、將上述兩種溶液按合適的比例混合并乳化得到W/O型乳劑(包括微乳、反膠束)；d、將得到的W/O型乳劑冷凍干燥除去溶媒，得到凍干產(chǎn)物；e、將得到的凍干產(chǎn)物水化，即得到脂質(zhì)體。本工藝過程簡單，容易實施。
文檔編號A61K47/24GK102151246SQ20101011220
公開日2011年8月17日 申請日期2010年2月11日 優(yōu)先權(quán)日2010年2月11日
發(fā)明者周亞球, 王汀 申請人:周亞球, 王汀