專利名稱：丹皮酚及其衍生物的醫(yī)藥新用途的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及醫(yī)藥技術(shù)領(lǐng)域，尤其涉及丹皮酚及其衍生物的醫(yī)藥新用途，具體涉及丹皮酚及其衍生物在制備治療和預防眼病藥物中的用途。
背景技術(shù)：
現(xiàn)有文獻已經(jīng)公開了化合物丹皮酚及其部分衍生物，丹皮酚的結(jié)構(gòu)式為化學式為2-羥基-4-甲氧基苯乙酮，分子式為C9HltlO3,相對分子質(zhì)量為166. 18。 英文名為faeonolum。別名芍藥醇，牡丹酚。該化合物具有熔點低[mp (51+1) °C ]、易揮發(fā)及水溶性差的特性。其主要衍生物之一丹皮酚磺酸鈉是丹皮酚經(jīng)磺化后而得到的，化學結(jié)構(gòu)為2-甲氧基-4羥基-5-乙?；交撬徕c，其特點是其水溶性得到明顯的提高，其藥理作用與丹皮酚基本相同。2-甲氧基-4-羥基-5-乙?；嫉?4-胂酸是丹皮酚與對氨基苯胂酸進行偶聯(lián)反應制得的衍生物，其特點是增強了丹皮酚的藥理作用，其藥理作用與丹皮酚基本相同。丹皮酚可由中藥牡丹皮[毛茛科植物牡丹(Paeonia suffruticosa)的根皮]和中藥徐長卿[蘿摩科植物徐長卿(Cynanchum paniculatum)的全草]中提取制得，也可化學合成，已知可以用作治療座瘡、皮膚美白、心血管疾病、風濕關(guān)節(jié)炎、抗腫瘤藥的活性組分， 目前已有丹皮酚及丹皮酚黃酸鈉的商品，但迄今為止，還未見任何有關(guān)丹皮酚及其衍生物與藥學上可接受的一種或多種載體或賦型劑結(jié)合制成丹皮酚及其衍生物的藥物組合物或制劑被用作治療或預防眼病藥物的文獻報道或?qū)＠?br>
發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明公開了丹皮酚及其衍生物在制備治療和預防眼病藥物中的用途。事實上，免疫性結(jié)膜炎、干眼、慢性結(jié)膜炎、鞏膜炎、葡萄膜炎等眼病目前尚無理想的治療方法，醫(yī)學界仍在努力尋找療效更好、副作用更小的治療免疫性結(jié)膜炎、干眼、慢性結(jié)膜炎、鞏膜炎、葡萄膜炎等眼病的新的藥物。本發(fā)明經(jīng)過反復研究，并通過動物及臨床試驗的反復驗證完成了本發(fā)明。本發(fā)明在于提供丹皮酚及其衍生物的新用途，即在制藥中的新應用。實際上，本發(fā)明涉及丹皮酚及其衍生物在制備治療或預防眼病的藥中的應用。涉及丹皮酚及其衍生物在制備治療或預防免疫性結(jié)膜炎的藥中的應用。所述的免
COCHs
OCH3
C^H-ι 0O3 166.18
3疫性結(jié)膜炎又稱為變應性結(jié)膜炎，主要包括過敏性結(jié)膜炎、常年過敏性結(jié)膜炎、季節(jié)性過敏性結(jié)膜炎、春季角結(jié)膜炎、巨乳頭性結(jié)膜炎、泡性角結(jié)膜炎、自身免疫性結(jié)膜炎等。涉及丹皮酚及其衍生物在制備治療干眼的藥中的應用。干眼又稱干眼癥。涉及丹皮酚及其衍生物在制備治療慢性結(jié)膜炎的藥中的應用。還涉及丹皮酚及其衍生物在制備治療葡萄膜炎的藥中的應用。還涉及丹皮酚及其衍生物在制備治療鞏膜炎的藥中的應用。上述丹皮酚及其衍生物包括丹皮酚及其相似結(jié)構(gòu)的系列衍生物。所述丹皮酚相似結(jié)構(gòu)的系列衍生物可以是由自然物質(zhì)如植物中提取得到的與丹皮酚具有相似化學結(jié)構(gòu)的， 特別是與丹皮酚具有相似藥理作用衍生物。所述丹皮酚相似結(jié)構(gòu)的系列衍生物也可以是以丹皮酚為原料通過化學合成的衍生物。上述丹皮酚或其系列衍生物的單體、丹皮酚及其系列衍生物的混合物可以與藥學上可接受的一種或多種載體或賦型劑結(jié)合制成丹皮酚及其衍生物的藥物組合物或制劑，其在組合物中的含量為0. 05%至99%。所述丹皮酚或其系列衍生物的單體是丹皮酚單體、丹皮酚系列衍生物中的一種的單體。丹皮酚及其系列衍生物的混合物是丹皮酚及其系列衍生物中任意兩種單體或者兩種以上的單體的混合物。上述丹皮酚及其衍生物可以制備成眼用液體制劑、眼用半固體制劑、眼用固體制劑、眼用緩釋藥物制劑、眼用膜控釋藥制劑、透鞏膜釋藥制劑、膠囊劑、丸劑、片劑、顆粒劑、 注射劑、散劑等用于治療眼病的藥物。根據(jù)《中華人民共和國藥典》2005年版，上述眼用液體制劑是指滴眼液、洗眼劑、眼內(nèi)注射劑；上述眼用半固體制劑是指眼膏劑、眼用乳劑、眼用凝膠劑；上述眼用固體制劑是指眼膜劑、眼丸劑、眼內(nèi)插入劑。為了更好地理解本發(fā)明的實質(zhì)，下面用丹皮酚或丹皮酚黃酸鈉化合物的藥理試驗及結(jié)果來說明其在制藥領(lǐng)域中的新用途。同樣地，因為丹皮酚和丹皮酚磺酸鈉混合不產(chǎn)生新物質(zhì)，因此，丹皮酚、丹皮酚黃酸鈉的混合物也可達到同樣的藥理效果。進一步丹皮酚及其相似結(jié)構(gòu)的系列衍生物的單體或混合物在作為治療或預防眼病的藥中有相同或相似的藥理學機理的應用都在本發(fā)明的保護范圍內(nèi)。1.小鼠的急性毒性及慢性毒性試驗在現(xiàn)有丹皮酚及丹皮酚黃酸鈉的急性毒性和慢性毒性試驗的文獻報道中[《中醫(yī)藥信息》2009，26(1) :20]，已經(jīng)證明丹皮酚以及丹皮酚黃酸鈉全身使用均無明顯的毒副作用，目前丹皮酚及丹皮酚磺酸鈉已是獲得國家批準的人體臨床用藥。2.由于眼結(jié)膜組織具有血管豐富、部位暴露在外的解剖生理特點，使其最容易受到外界抗原組織的刺激而發(fā)生過敏反應，因此，變應性(免疫性)結(jié)膜炎是臨床上常見病、 多發(fā)病。由于眼結(jié)膜結(jié)構(gòu)較松弛，網(wǎng)眼中有豐富的淋巴細胞、肥大細胞等，當眼部受到外界抗原組織的刺激而發(fā)生過敏反應時，結(jié)膜存在嗜酸性細胞、嗜中性粒細胞的浸潤及肥大細胞的活化，其中結(jié)膜中的肥大細胞的密度可高達5000個/mm2。而肥大細胞的活化及脫顆粒是過敏性結(jié)膜炎、常年過敏性結(jié)膜炎、季節(jié)性過敏性結(jié)膜炎、春季角結(jié)膜炎、巨乳頭性結(jié)膜炎等免疫性結(jié)膜炎的發(fā)病機制中最重要的環(huán)節(jié)；組胺是引起免疫性結(jié)膜炎癥狀和體征最重要的介質(zhì)。因此，組胺和肥大細胞均為治療眼部過敏的重要目標。目前用于臨床的多種治療免疫性結(jié)膜炎的滴眼液(西藥)絕大多數(shù)是通過阻斷肥大細胞的活化及脫顆粒、以及抗組
4胺環(huán)節(jié)來發(fā)揮治療作用的，但是這些藥物都存在不同程度的副作用。在本發(fā)明配制成的藥物對卵白蛋白誘發(fā)的主動變應性(又稱免疫性)結(jié)膜炎的治療作用的試驗研究中發(fā)現(xiàn)，丹皮酚及其衍生物配制的不同類型、不同濃度的眼用制劑均能明顯的減輕或消除免疫性結(jié)膜炎動物模型的眼局部組織的炎癥反應、明顯減輕或消除結(jié)膜上皮細胞內(nèi)以及基質(zhì)內(nèi)嗜酸性細胞的浸潤，明顯減少肥大細胞脫顆粒。在本發(fā)明配制成的藥物對組胺引起的變應性(又稱免疫性)結(jié)膜炎的治療作用的試驗研究中發(fā)現(xiàn)，丹皮酚及其衍生物配制的不同類型、不同濃度的眼用制劑均能明顯的減輕或消除免疫性結(jié)膜炎動物模型的眼局部組織的炎癥反應、明顯降低眼瞼及結(jié)膜血管的通透性。本發(fā)明人的研究結(jié)果說明丹皮酚及其衍生物的主要藥理作用體現(xiàn)在抗組胺、穩(wěn)定肥大細胞、減少肥大細胞脫顆粒以及嗜酸性細胞的浸潤，能夠顯著的減輕或消除卵白蛋白誘發(fā)的主動免疫性結(jié)膜炎以及組胺引起的免疫性結(jié)膜炎動物模型的眼局部組織的炎癥反應，說明本發(fā)明丹皮酚及其衍生物的主要藥理作用恰恰是針對了免疫性結(jié)膜炎最根本的發(fā)病機制，并且是具有抗組胺/穩(wěn)定肥大細胞雙重作用，因此能夠有效的預防和治療過敏性結(jié)膜炎、常年過敏性結(jié)膜炎、季節(jié)性過敏性結(jié)膜炎、春季角結(jié)膜炎、巨乳頭性結(jié)膜炎等免疫性結(jié)膜炎等眼病。3.干眼，是指由于淚液量或質(zhì)的異常引起的淚膜不穩(wěn)定和眼表損害而致眼部不適的一類疾病。根據(jù)干眼發(fā)病與淚膜的關(guān)系，干眼可分為五類水液缺乏型干眼、脂質(zhì)缺乏型干眼、粘蛋白缺乏型干眼、淚液動力學異常型干眼、混合型干眼。最新研究表明，雖然不同類型干眼的始發(fā)原因不同，但眼表的細胞因子介導的炎癥反應是影響干眼病情十分重要的因素，被認為是各種不同類型干眼的共同發(fā)病機制；并且干眼與炎癥互為因果、形成惡性循環(huán)，免疫反應是干眼發(fā)病的中心環(huán)節(jié)、抗炎治療是治療干眼的重要方法。而白細胞介素 (IL)、腫瘤壞死因子-α (TNF-α)等細胞因子與干眼的眼表炎癥有密切關(guān)系，在用NRTN基因缺失小鼠制成的干眼模型中，模型眼角膜上皮IL-I β mRNA含量及淚液IL-Ιβ含量均明顯高于正常對照組；在將人角膜上皮置于不同滲透壓培養(yǎng)液中的離體實驗研究也發(fā)現(xiàn)，培養(yǎng)液的滲透壓越高，其IL-I β含量越高；臨床研究也顯示干眼患者淚膜和結(jié)膜的IL-I β和 TNF-α含量也明顯高于正常人；因此，IL-I β和TNF-α在干眼的發(fā)病機制中起重要作用， 眼表組織的IL-I β和TNF-a濃度是反映干眼嚴重程度的一個重要指標。不同類型干眼的臨床表現(xiàn)可不盡相同，但是淚液滲透壓升高被作為診斷干眼的“金標準”?，F(xiàn)有的干眼動物模型雖然擬從多個方面模擬干眼的發(fā)病機制，但目前尚沒有一種能夠全面反映干眼及其復雜的發(fā)病機制的理想的動物模型，而淚液滲透壓升高是各種干眼的一個共同臨床特征和病理生理改變、被作為診斷干眼的“金標準”。因此，本發(fā)明采用將兔角膜上皮細胞置于高滲透壓細胞培養(yǎng)液中，再給予丹皮酚磺酸鈉進行干預，觀察其對IL-I β和TNF-a含量的影響。 研究結(jié)果發(fā)現(xiàn)0. 01mg/ml,0. 05mg/ml和0. lmg/ml丹皮酚磺酸鈉均能有效的控制干眼的非感染性的免疫性炎癥，在治療干眼方面有廣闊的應用前景。因此，說明丹皮酚及其衍生物能夠治療干眼癥等眼病。4.應用文獻公開報道的“結(jié)膜下埋線法”制作慢性結(jié)膜炎模型，即將30只新西蘭大白兔以結(jié)膜下埋線法制作成慢性結(jié)膜炎動物模型，并采用裂隙燈觀察動物眼的炎癥情況，研究結(jié)果顯示0. 05%,0. 1%、0. 5%的丹皮酚磺酸鈉滴眼液均能明顯的減輕慢性結(jié)膜炎動物模型眼的炎癥反應，這些作用恰恰是針對了慢性結(jié)膜炎的最主要臨床表現(xiàn)，說明本發(fā)明的配制成的藥物能夠有效的治療慢性結(jié)膜炎等眼病。
5.應用經(jīng)典的內(nèi)毒素誘導葡萄膜炎(endotoxin-induced uveitis, EIU)動物模型方法，即將50只SD大鼠采用腹腔和雙后足墊注射內(nèi)毒素制作葡萄膜炎模型，并采用裂隙燈觀察動物的虹膜充血、前房內(nèi)滲出、前房積膿、瞳孔縮小等眼前段組織的炎癥反應程度，近視網(wǎng)膜內(nèi)表面的玻璃體、視網(wǎng)膜組織中的炎癥浸潤細胞計數(shù)等方法觀察丹皮酚對EIU 葡萄膜炎大鼠的影響，研究結(jié)果顯示丹皮酚能明顯減輕EIU葡萄膜炎大鼠眼前節(jié)的炎癥反應，減少近視網(wǎng)膜內(nèi)表面的玻璃體中以及視網(wǎng)膜組織中的炎癥細胞浸潤，這些作用恰恰是針對了葡萄膜炎的最主要病理變化，說明本發(fā)明的配制成的藥物能夠有效的治療葡萄膜炎等眼病。6.丹皮酚治療鞏膜炎的臨床試驗研究表明，丹皮酚試驗組在治愈率、總有效率方面均優(yōu)于美洛昔康對照組，說明丹皮酚能夠有效的治療鞏膜炎等眼病。從以上結(jié)果可以得出，本發(fā)明最突出的優(yōu)點在于本發(fā)明對已知化合物丹皮酚及其衍生物發(fā)掘了新的醫(yī)療用途——丹皮酚及其衍生物在制備治療或預防眼病的藥中的應用，開拓了一個新的應用領(lǐng)域；本發(fā)明的產(chǎn)品原料來源豐富、價廉，并且丹皮酚及其衍生物安全低毒，藥理作用強，預示著很好的藥用前景。
具體實施例方式以下通過實施例進一步描述本發(fā)明，但這些實施例僅是說明本發(fā)明，而不應理解為對本發(fā)明范圍的任何限制。實施例1丹皮酚磺酸鈉滴眼液的制備按照常規(guī)制備滴眼液的方法分別制備不同濃度的丹皮酚磺酸鈉滴眼液，該滴眼液是以丹皮酚磺酸鈉為其主要活性成分。在制備過程中除按常規(guī)加入助溶劑、滲透壓調(diào)節(jié)劑、抗氧化劑、防腐劑、PH調(diào)節(jié)劑之外，還可選擇性的加入冰片、 薄荷等輔料以及透明質(zhì)酸鈉或甲基纖維素或羥丙甲基纖維素等粘性賦形劑。其目的是提高藥物在眼組織中的濃度、增加其生物利用度、增強療效及減少不良反應等。上述助溶劑是指選自環(huán)糊精、聚丙烯類聚合物、聚乙烯醇、聚乙烯吡咯酮、對氨基苯甲酸、聚山梨醇酯中的至少一種，或者是它們的混合物中的至少一種。滲透壓調(diào)節(jié)劑是指選自氯化鈉、硼酸鹽、硼酸中的至少一種，或者是它們的混合物中的至少一種；抗氧化劑是指選自亞硫酸鈉、亞硫酸氫鈉、焦亞硫酸鈉、硫代硫酸鈉、枸櫞酸鈉、抗壞血酸中的至少一種，或者是它們的混合物中的至少一種；防腐劑是指選自尼泊金類、苯乙醇、苯扎溴胺中的至少一種，或者是它們的混合物中的至少一種；PH調(diào)節(jié)劑是指選自磷酸鹽緩沖液、 硼酸鹽緩沖液、氫氧化鈉、碳酸氫鈉中的至少一種，或者是它們的混合物中的至少一種。具體例丹皮酚磺酸鈉滴眼液的配制。在1000毫升丹皮酚磺酸鈉滴眼液中，含有的各成分的重量百分比為丹皮酚磺酸鈉1%、對氨基苯甲酸5%、枸櫞酸鈉0.2%、苯乙醇0. 1%、氯化鈉5%、冰片0. 5%、氫氧化鈉適量、其余為滅菌蒸餾水。氫氧化鈉適量是指通過滴加IM氫氧化鈉，使所配溶液的PH值調(diào)整為6. 8 7. 3。 IM氫氧化鈉溶液預先配制好，IM氫氧化鈉溶液表示在每升溶液中有1摩爾的氫氧化鈉。在本實施例的配制方式是1)將丹皮酚磺酸鈉、對氨基苯甲酸、枸櫞酸鈉、苯乙醇、冰片以相應的重量百分比配好后，加入氯化鈉，用滅菌蒸餾水溶解，通過攪拌使其完全溶解；2)用IM氫氧化鈉溶液將其PH值調(diào)整為6. 8 7. 3以適合眼用；3)加入滅菌蒸餾水
6至1000毫升，攪拌均勻，并過濾至澄清，澄清濾液分裝于無菌的塑料眼藥水瓶即得。上述過程在無菌條件下進行。其它濃度的丹皮酚磺酸鈉滴眼液的制備方法與之相似，丹皮酚磺酸鈉的份量是根據(jù)濃度的不同而不同，其它成分的比例不變。實施例2丹皮酚眼膏的制備按照常規(guī)制備眼藥膏的方法分別制備不同濃度的丹皮酚眼膏，該眼膏是以丹皮酚為其主要活性成分。在制備過程中，可選用不同的膏體如羊毛脂、黃凡士林、液體石蠟、或其混合物等，還可選擇性的加入冰片、薄荷、環(huán)糊精等輔料。其目的是提高藥物在眼組織中的濃度、增加其生物利用度、增強療效及減少不良反應等。具體例丹皮酚眼膏的配置。在1000克丹皮酚眼膏中，含有丹皮酚10克、冰片 5克，其余為黃凡士林、羊毛脂、液體石蠟組成的眼膏基質(zhì)。上述眼膏基質(zhì)各成分的比例為黃凡士林羊毛脂液體石蠟=8 1 1。在本實施例的配制方式是1)稱取丹皮酚10克、冰片5克，研磨、過篩至75 μ m以下，備用；幻將上述眼膏基質(zhì)加熱融化、過濾，再加熱至130°C 150°C滅菌60 80分鐘， 冷卻至室溫，備用；幻將研磨過篩后的丹皮酚和冰片用適量的滅菌液體石蠟濕潤，加入滅菌基質(zhì)至1000克，攪均、灌裝即得。整個配制過程在無菌條件下操作。其它濃度的丹皮酚眼膏的制備方法與之相似，丹皮酚的份量是根據(jù)濃度的不同而不同，其它成分的比例不變。實施例3本發(fā)明對卵白蛋白誘發(fā)的主動免疫性結(jié)膜炎的治療作用的研究。1、試驗材料以本發(fā)明的丹皮酚黃酸鈉配制成0.05%、0. 1^^0.5%、1%的滴眼液；以本發(fā)明的丹皮酚配制成0. 25%,0. 5%,2. 0%的眼藥膏。色苷酸鈉滴眼液為陽性對照組用藥。2、試驗方法(1)造模方法SD大鼠50只，體重IOOg 120g，雌雄各半。采用公開文獻報道的“卵白蛋白誘發(fā)的主動變應性結(jié)膜炎”動物造模方法，將大鼠制作為免疫性(又稱變應性)結(jié)膜炎的大鼠模型。(2)試驗分組隨機將已制作成免疫性結(jié)膜炎動物模型的50只大鼠隨機分為10組，每組5只動物(10只眼)模型對照1組(丹皮酚黃酸鈉滴眼液的溶媒組)，模型對照2組(丹皮酚眼藥膏的基質(zhì)組)，陽性對照組(色苷酸鈉滴眼液組)，受試藥物丹皮酚黃酸鈉滴眼液分別設(shè) 0. 05%,0. 1%,0.5%,1%四個劑量組，受試藥物丹皮酚眼藥膏分別設(shè)0. 25%,1.0%,2.0% 三個劑量組。(3)給藥方法陽性對照組用色苷酸鈉滴眼液。在大鼠腹腔注射卵白蛋白磷酸緩沖液后的第12 天眼局部開始連續(xù)用藥3天，4次/天，即8am、12am、4pm、8pm ；在大鼠腹腔注射卵白蛋白磷酸緩沖液后的第15天進行眼局部抗原攻擊，在眼局部抗原攻擊后5分鐘開始再次眼局部用藥，每10分鐘一次，共三次(即眼局部抗原攻擊后第5分鐘、第15分鐘、第25分鐘)。
7
模型對照1組用配制丹皮酚黃酸鈉滴眼液的溶媒滴眼，具體用藥次數(shù)同陽性對照組。0. 05%丹皮酚黃酸鈉滴眼液組用0. 05%丹皮酚黃酸鈉滴眼液，具體用藥次數(shù)同陽性對照組。0. 丹皮酚黃酸鈉滴眼液組用0. 丹皮酚黃酸鈉滴眼液，具體用藥次數(shù)同陽性對照組0. 5%丹皮酚黃酸鈉滴眼液組用0. 5%丹皮酚黃酸鈉滴眼液，具體用藥次數(shù)同陽性對照組。1. 0%丹皮酚黃酸鈉滴眼液組用1. 0%丹皮酚黃酸鈉滴眼液，具體用藥次數(shù)同陽性對照組。模型對照2組用配制丹皮酚眼藥膏的基質(zhì)滴眼，在大鼠腹腔注射卵白蛋白磷酸緩沖液后的第12天眼局部開始連續(xù)用藥3天，2次/天，即8am、8pm ；在大鼠腹腔注射卵白蛋白磷酸緩沖液后的第15天進行眼局部抗原攻擊，在眼局部抗原攻擊后5分鐘開始再次用藥1次(即眼局部抗原攻擊后第5分鐘)。0. 25%丹皮酚眼藥膏組用0. 25%丹皮酚眼藥膏，具體用藥次數(shù)同模型對照2組。1. 0%丹皮酚眼藥膏組用1. 0%丹皮酚眼藥膏，具體用藥次數(shù)同模型對照2組。2. 0%丹皮酚眼藥膏組用2. 0%丹皮酚眼藥膏，具體用藥次數(shù)同模型對照2組(4)指標檢測①眼局部炎癥反應程度的觀察在局部抗原攻擊后第10分鐘、第20分鐘、第30分鐘進行裂隙燈下判斷組織反應程度。用下列計分法對反應程度進行定量。(瞼結(jié)膜和球結(jié)膜)0分正常；1分結(jié)膜呈粉紅色；2分結(jié)膜呈紅色；3分結(jié)膜呈暗紅色，有瘀斑、瘀點。水腫0分正常；1分僅下眼瞼水腫；2分上下眼瞼均有水腫，眼瞼部分閉合；3 分眼瞼外翻，水腫明顯，眼瞼至少半關(guān)閉；4分上下眼瞼及瞼緣均水腫。分泌物0分無；1分稀黏液狀；2分眼瞼及周圍的毛發(fā)潮濕；3分眼瞼及周圍的毛發(fā)潮濕，稠黏液狀②組織學檢查在局部抗原攻擊后35分鐘切除上方球結(jié)膜制備光鏡標本，將組織固定在Karnovsky’ s固定液中，酒精梯度脫水，異丁烯酸乙醇包埋，切片厚2 μ m，分別進行 HE、PAS、Giemsa染色，光鏡觀察。用網(wǎng)格為0. 25mmX0. 25mm網(wǎng)狀計數(shù)尺在3個不同的視野里分別對結(jié)膜上皮、上皮下組織及基質(zhì)組織中嗜酸細胞(Eos)、肥大細胞(MC)總數(shù)、脫顆粒的MC計數(shù)，然后計算出平均值作為該標本的計數(shù)。結(jié)果①模型對照1組和模型對照2組在局部抗原攻擊后，眼前節(jié)組織出現(xiàn)明顯的充血、水腫、分泌物等免疫性過敏反應，并且充血、水腫、分泌物逐漸加重，在局部抗原攻擊后30分鐘達到高峰；各濃度的丹皮酚黃酸鈉滴眼液、丹皮酚眼膏以及色苷酸鈉滴眼液在各個時段均對免疫性結(jié)膜炎大鼠眼前節(jié)組織的免疫性過敏反應(充血、水腫、分泌物)有明顯的抑制作用，眼前節(jié)組織的充血、水腫、分泌物均呈逐漸減輕的改變，0. 05%,0. 丹皮酚黃酸鈉滴眼液以及0. 25%丹皮酚眼膏的這種作用與色苷酸鈉滴眼液基本相同、其差異無統(tǒng)計學意義，而0.5%、1.0%丹皮酚黃酸鈉滴眼液以及1.0%、2.0%丹皮酚眼膏的這種作用還明顯優(yōu)于色苷酸鈉滴眼液、其差異有統(tǒng)計學意義，見表1-6，表明丹皮酚黃酸納滴眼液及丹皮酚眼膏能夠有效的對抗免疫性結(jié)膜炎眼前節(jié)組織的免疫性過敏反應，并且0.5%、 1. 0%丹皮酚黃酸鈉以及ι. 0%,2. 0%丹皮酚眼膏的治療作用還優(yōu)于色苷酸鈉滴眼液。②模型對照1組和模型對照1組的結(jié)膜組織內(nèi)嗜酸性細胞大量浸潤，脫顆粒的肥大細胞明顯增多，脫顆粒的肥大細胞與肥大細胞總數(shù)之比值明顯增高；各濃度的丹皮酚黃酸鈉滴眼液和丹皮酚眼膏以及色苷酸鈉滴眼液均能明顯減少免疫性結(jié)膜炎大鼠的結(jié)膜組織中脫顆粒的肥大細胞及嗜酸細胞的數(shù)量，0. 05%,0. 丹皮酚黃酸鈉滴眼液以及0. 25%丹皮酚眼膏的這種作用與色苷酸鈉滴眼液相比，其差異無統(tǒng)計學意義，而0.5%、1.0%丹皮酚黃酸鈉滴眼液以及1.0%、2.0%丹皮酚眼膏的這種作用還明顯優(yōu)于色苷酸鈉滴眼液，其差異有統(tǒng)計學意義，見表7、表8。表明丹皮酚黃酸納滴眼液及丹皮酚眼膏抑制免疫性結(jié)膜炎眼前節(jié)組織的免疫性過敏反應與其減少結(jié)膜組織內(nèi)嗜酸性細胞大量浸潤、減少肥大細胞的脫顆粒有明顯關(guān)系。因此，丹皮酚黃酸納滴眼液及丹皮酚眼膏均能有效治療免疫性結(jié)膜炎，并且在一定濃度范圍其作用優(yōu)于色苷酸鈉滴眼液。
表1 丹皮酚黃酸鈉滴眼液對模型眼結(jié)膜充血程度影響的評分比較(n = 10)
在局部抗原攻擊后
組別
劑量
第10分鐘
第20分鐘
第30分鐘
模型對照1組2.54±0.45色苷酸鈉組2.0%2.11±0.39丹皮酚黃酸鈉組0.05%1.96±0.41丹皮酚黃酸鈉組0.1%1.91±0.39丹皮酚黃酸鈉組0.5%1.78 士 0.42丹皮酚黃酸鈉組1.0%1.85±0.45
2.74±0.43 1.74 士 0.33 Α 1.53 士 0.43 1.49±0.37Ai 1.21±0.33Ai 1.19±0.30
2.92 士 0.32 1.53±0.41A 1.39 士 0.38Α· 1.09±0.25Ai 0.81±0.21A 0.79 士 0·18Α注(X士SD，統(tǒng)計方法采用SPSS13. 0軟件，相同指標多組間比較用單因素方差分析，多組間兩兩比較用q檢驗，以下各表相同)與模型對照1組比較aP < 0. 05，aaP < 0. 01 ；與色甘酸鈉組比較40.05, TTP<0.01；與色甘酸鈉組比較eP > 0. 05 ；與0. 05%丹皮酚黃酸鈉組比較* P < 0. 05
表2 丹皮酚眼膏對模型眼結(jié)膜充血程度影響的評分比較(n = 8)
在局部抗原攻擊后
組別
劑量
第10分鐘
第20分鐘
第30分鐘
模型對照2組色苷酸鈉組丹皮酚組丹皮酚組丹皮酚組
2.0% 0.25% 1.0% 2.0%
2.61 士 0.46
2.11士0.39
1.91±0.37δ*
1.79±0.40δ·
1.82±0.39δ*
2.79 士 0.45 1.74±0.33δ 1.610±0.34δδ 1.26±0.31ΔΔΤ
1.21 士 0·20ΔΔΤ
2.83±0.43
1.53±0·41ΔΔ
1.39±0.23ΔΔ
1.01 士 0.11ΔΔ”
0.97 土 0. 19δδττ
注與模型對照2組比較ΔΡ < 0. 05，ΔΔΡ < 0. 01 ；與色甘酸鈉組比較 ▼Ρ<0.05, ΤΤΡ<0.01;
與色甘酸鈉組比較eP > 0. 05 ；與0. 25%丹皮酚組比較< 0. 05 表3 丹皮酚黃酸鈉滴眼液對模型眼結(jié)膜水腫程度影響的評分比較(n = 10)
權(quán)利要求
1.丹皮酚及其衍生物的醫(yī)藥新用途，其特征在于丹皮酚及其衍生物在制備治療或預防眼病的藥中的應用。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的丹皮酚及其衍生物的醫(yī)藥新用途，其特征在于丹皮酚及其衍生物在制備治療或預防免疫性結(jié)膜炎的藥中的應用。
3.根據(jù)權(quán)利要求2所述的丹皮酚及其衍生物的醫(yī)藥新用途，其特征在于所述的免疫性結(jié)膜炎又稱為變應性結(jié)膜炎，主要包括過敏性結(jié)膜炎、常年過敏性結(jié)膜炎、季節(jié)性過敏性結(jié)膜炎、春季角結(jié)膜炎、巨乳頭性結(jié)膜炎、泡性角結(jié)膜炎、自身免疫性結(jié)膜炎。
4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的丹皮酚及其衍生物的醫(yī)藥新用途，其特征在于丹皮酚及其衍生物在制備治療干眼的藥中的應用。
5.根據(jù)權(quán)利要求1所述的丹皮酚及其衍生物的醫(yī)藥新用途，其特征在于丹皮酚及其衍生物在制備治療慢性結(jié)膜炎的藥中的應用。
6.根據(jù)權(quán)利要求1所述的丹皮酚及其衍生物的醫(yī)藥新用途，其特征在于丹皮酚及其衍生物在制備治療葡萄膜炎的藥中的應用。
7.根據(jù)權(quán)利要求1所述的丹皮酚及其衍生物的醫(yī)藥新用途，其特征在于丹皮酚及其衍生物在制備治療鞏膜炎的藥中的應用。
8.根據(jù)權(quán)利要求權(quán)利要求1至7任一項所述的丹皮酚及其衍生物的醫(yī)藥新用途，其特征在于丹皮酚及其衍生物包括丹皮酚及其相似結(jié)構(gòu)的系列衍生物。
9.根據(jù)權(quán)利要求8所述的丹皮酚及其衍生物的醫(yī)藥新用途，其特征在于所述丹皮酚或其系列衍生物的單體、丹皮酚及其系列衍生物的混合物可以與藥學上可接受的一種或多種載體或賦型劑結(jié)合制成丹皮酚及其衍生物的藥物組合物或制劑，其在組合物中的含量為 0. 05%至 99%。
10.根據(jù)權(quán)利要求權(quán)利要求1至7任一項所述的丹皮酚及其衍生物的醫(yī)藥新用途，其特征在于丹皮酚及其衍生物可以制備成眼用液體制劑、眼用半固體制劑、眼用固體制劑、 眼用緩釋藥物制劑、眼用膜控釋藥制劑、透鞏膜釋藥制劑、膠囊劑、丸劑、片劑、顆粒劑、注射劑、散劑等用于治療眼病的藥物。
全文摘要
本發(fā)明涉及丹皮酚及其衍生物在制藥領(lǐng)域中的新用途。動物實驗研究顯示丹皮酚及其衍生物能明顯減輕或消除免疫性結(jié)膜炎眼局部組織的炎癥反應、明顯減少結(jié)膜組織內(nèi)嗜酸性細胞的浸潤以及肥大細胞脫顆粒；明顯減輕葡萄膜炎眼前節(jié)的炎癥反應，減少玻璃體中以及視網(wǎng)膜組織中的炎癥細胞浸潤；能有效的控制干眼的非感染性的免疫性炎癥；明顯減輕慢性結(jié)膜炎動物模型眼的炎癥反應；臨床試驗研究顯示丹皮酚能有效的治療鞏膜炎等眼病。本發(fā)明提供了一種療效確切、安全方便、來源廣泛的治療眼病藥物，其可以與藥學上可接受的一種或多種載體或賦型劑結(jié)合制成丹皮酚及其衍生物的藥物組合物或制劑。
文檔編號A61P27/14GK102166205SQ20101011431
公開日2011年8月31日 申請日期2010年2月26日 優(yōu)先權(quán)日2010年2月26日
發(fā)明者張筱梅 申請人:張筱梅