專利名稱：蕨菜黃酮提取物在制備降血脂藥物中的應(yīng)用的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及蕨菜黃酮提取物的用途。
背景技術(shù)：
高脂血癥(hyperlipidemia，HLP)是指血漿(或)血清中一種或多種脂質(zhì)的含量超過正常高限時的病癥。一般以總膽固醇(Tc)、低密度脂蛋白膽固醇(LDL-C)增高，高密度脂蛋白膽固醇(HDL-c)降低和(或)甘油三脂(TG)增高為主要特征。我國成人血脂異常患病率為18. 6%，估計全國血脂異?，F(xiàn)患人數(shù)1. 6億，其中高膽固醇血癥2. 9%，高甘油三酯血癥11. 9%，低高密度脂蛋白血癥7. 4% ；2007年的《中國成人血脂異常防治指南》血脂總達(dá)標(biāo)率為50%。研究表明高脂血癥是脂肪肝、心血管疾病、 糖尿病等多種重大疾病的致病因素和病理基礎(chǔ)。調(diào)血脂藥物主要包括他汀類、貝特類、煙酸、膽汁酸結(jié)合樹脂、普羅布考和?；o酶A膽固醇酰基轉(zhuǎn)移酶抑制劑、天然藥物等，應(yīng)用較多的是他汀類藥物和貝特類，前者的使用比例高達(dá)84%，后者9.0%。隨著"早期干預(yù)、強(qiáng)化降脂、長期用藥"理論的提出，調(diào)血脂藥物的安全性問題備受關(guān)注。臨床單用他汀類治療，血脂異常達(dá)標(biāo)率僅為35%，與貝特類合用療效提高，但有增加橫紋肌溶解的風(fēng)險。因此，迫切需要尋找通過多環(huán)節(jié)、多途徑、多靶點(diǎn)且不良反應(yīng)少或輕的調(diào)脂藥物。大量的現(xiàn)代研究證實(shí)，中藥可通過多環(huán)節(jié)、多途徑、多靶點(diǎn)治療高脂血癥，取得了良好的療效；但傳統(tǒng)中藥復(fù)方藥味多，成分復(fù)雜，質(zhì)量不易控制，且中藥復(fù)方的煎制和攜帶也給患者帶來諸多不便。因此，現(xiàn)在研究人員將目光投向中藥有效成分或有效部位的研究開發(fā)。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明通過蕨菜黃酮提取物調(diào)節(jié)血脂的動物實(shí)驗(yàn)，觀察其對高脂血癥大鼠模型的調(diào)血脂作用，旨在提供一種安全有效、服用方便的調(diào)血脂藥物。蕨菜別名拳頭菜，如意菜，龍爪菜等。它是采自蕨科蕨屬中的蕨 [Pteridiumaquilinum(L.)Kuhn var. Iatiusculum(Desv.)Underw]的幼嫩葉，因其生長在山林野地，污染小，富含對人體有益的多種營養(yǎng)成分，已成為人們喜愛的山珍野菜。蕨菜黃酮是從蕨菜中提取的有效部位，搜索文獻(xiàn)未見其生理活性的研究，本課題組研究發(fā)現(xiàn)其具有顯著的調(diào)血脂療效。蕨菜黃酮提取物的獲得(1)蕨菜黃酮提取物的獲得將新鮮蕨菜烘至6-8成干，再在103°C烘干后研磨成粉末狀，用乙醚脫去蕨菜干粉脂及除脂溶性色素，當(dāng)乙醚抽提液無色時揮盡蕨菜粉中乙醚， 將蕨菜干粉放在燒瓶中加入水或不同體積分?jǐn)?shù)的乙醇或不同體積分?jǐn)?shù)的丙酮為溶劑回流提取蕨菜黃酮。每次浸提約2-池，浸提溫度為50°C -90°C，共浸提3-5次，浸提固液比為 1 5-10 (g ml)，合并所有浸提液并于旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器中濃縮成漿狀或?qū){狀物103°C烘干，粉碎得粗黃酮粉。(2)蕨菜黃酮提取物中黃酮含量進(jìn)行測定采用分光光度法測定黃酮含量，即利用黃酮類化合物與鋁鹽生成紅色絡(luò)合物，以蘆丁為標(biāo)準(zhǔn)品，在510nm處測定吸光度，所得數(shù)據(jù)經(jīng)回歸處理可得到標(biāo)準(zhǔn)曲線的回歸方程。取一定體積樣品液按標(biāo)準(zhǔn)曲線相同方法操作測得吸光度后，由回歸方程計算出黃酮含量。本發(fā)明中的蕨菜黃酮提取物中黃酮含量蕨菜黃酮提取物如為漿狀物，黃酮占漿狀物的質(zhì)量分?jǐn)?shù)為10-15 ；蕨菜黃酮提取物如為粗黃酮粉(粉末狀物)，黃酮占粗黃酮粉的質(zhì)量分?jǐn)?shù)為15-30。蕨菜黃酮提取物調(diào)節(jié)血脂作用強(qiáng)，安全無毒，副作用小，服用方便，有很好的開發(fā)前景。蕨菜黃酮提取物在調(diào)節(jié)血脂方面的應(yīng)用按每公斤體重每日使用蕨菜黃酮 30-300mg(蕨菜黃酮提取物的使用量以測定出的黃酮含量進(jìn)行折算)的量進(jìn)行服用，可達(dá)到顯著的調(diào)節(jié)血脂效果。本發(fā)明具有以下優(yōu)點(diǎn)1、本發(fā)明使用的蕨菜黃酮提取物系從天然的，深受人們喜愛的山野菜-蕨菜中提取獲得，屬天然提取物，毒副作用小，安全性高。2、蕨菜黃酮提取物調(diào)節(jié)血脂作用顯著，可將其制備成片劑、顆粒劑、膠囊等，有很好的開發(fā)前景。3、蕨菜資源豐富，蕨菜黃酮提取物易獲得，適于工業(yè)化生產(chǎn)。
具體實(shí)施例方式為了更好地理解本發(fā)明的實(shí)質(zhì)，下面通過具體的實(shí)驗(yàn)結(jié)果和數(shù)據(jù)來說明蕨菜黃酮提取物在制藥領(lǐng)域中的新用途。蕨菜黃酮提取物在降血脂方面的實(shí)驗(yàn)依據(jù)1材料與方法1.1實(shí)驗(yàn)動物普通級SD大鼠60只，均為雄性，體重200_M0g。合格證號皖醫(yī)實(shí)驗(yàn)動物準(zhǔn)第01 號，由安徽醫(yī)科大學(xué)實(shí)驗(yàn)動物中心提供。1. 2蕨菜粗黃酮的提取及黃酮含量測定新鮮蕨菜烘至6-8成干，然后剪成2_3cm碎段，再在103°C烘干后研磨成粉末狀。稱取一定質(zhì)量的蕨菜干粉用乙醚脫脂及除脂溶性色素，當(dāng)乙醚抽提液無色時揮盡蕨菜粉中乙醚，將蕨菜干粉放在燒瓶中加入水或體積分?jǐn)?shù)為30% -80%乙醇或體積分?jǐn)?shù)為30% -80% 丙酮為溶劑，回流提取蕨菜黃酮。每次浸提約2-池，浸提溫度為50-90°C，共浸提3-5次，浸提固液比為1 5-10(g ml)，合并所有浸提液并于旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器中濃縮成漿狀或103°C烘干，粉碎得粗黃酮粉。采用分光光度法測定黃酮含量，即利用黃酮類化合物與鋁鹽生成紅色絡(luò)合物，以蘆丁為標(biāo)準(zhǔn)品，在510nm處測定吸光度，所得數(shù)據(jù)經(jīng)回歸處理可得到標(biāo)準(zhǔn)曲線的回歸方程。取一定體積樣品液按標(biāo)準(zhǔn)曲線相同方法操作測得吸光度后，由回歸方程計算出黃酮含量。1. 3造模及分組給藥
在實(shí)驗(yàn)環(huán)境下先用普通飼料預(yù)飼7天后，隨機(jī)分為正常組(10只)與模型組(50 只)，模型組大鼠飼喂高脂飼料。實(shí)驗(yàn)期間動物白由飼喂、自由飲水。模型組動物飼喂高脂飼料20天后隨機(jī)分為5組高脂模型組(10只，高脂飼料自由飲水)、陽性對照組(10只， 高脂飼料自由飲水十脂必妥片300mg/kg)、低劑組(10只；高脂飼料自由飲水十蕨菜黃酮 50mg/kg)、中劑量組(10只，高脂飼料自由飲水+蕨菜黃酮150mg/kg)、高劑組(10只，高脂飼料自由飲水+蕨菜黃酮300mg/kg)，灌胃給藥，給藥容積為lml/100g，每天1次，連續(xù)30 天。1. 4指標(biāo)檢測灌胃30天后，末次給藥后lh，于空腹12小時情況下，眼眶靜脈叢取血，離心，分離血清后由Chem Well 自動性生化儀測定血清TC、TG、LDL-C、HDL-C及血液流變學(xué)指標(biāo)，即全血黏度、紅細(xì)胞比積(HCT)、紅細(xì)胞沉降率(ESR)、纖維蛋白原(FIB)。1. 5統(tǒng)計處理各組數(shù)據(jù)以均數(shù)士標(biāo)準(zhǔn)差(χ士 s)表示，各組均數(shù)間差異采用方差分析，用SAS9. O 統(tǒng)計軟件進(jìn)行統(tǒng)計。2 結(jié)果2. 1蕨菜黃酮對大鼠一般情況的影響蕨菜黃酮組和陽性藥物組大鼠表現(xiàn)活躍皮毛潔白、光滑，尤其是蕨菜黃酮高劑量組最為明顯，越到實(shí)驗(yàn)后期，和高脂對照組的差異愈發(fā)明顯，后者皮毛明顯發(fā)黃、凌亂，精神萎靡，活動不積極。而蕨菜黃酮劑量組與陽性藥物組和高脂對照組相比糞便多呈紅褐色，這與大鼠灌胃蕨菜黃酮有關(guān)，其它未見任何明顯不良反應(yīng)。2. 2蕨菜黃酮對高脂血癥大鼠血脂的影響與正常組相比，模型組大鼠血清TC、TG、LDL_C含量顯著升高，HDL-C顯著降低。與模型組相比，蕨菜黃酮中、高劑量組血清TC、TG、LDL-C含量顯著降低，HDL-C顯著升高。表明蕨菜黃酮對高脂血癥大鼠血脂有調(diào)節(jié)作用。見表1。表1蕨菜黃酮灌胃給藥30天對高脂血癥大鼠血脂水平的影響(S[士s，η = 10， mmol/L)
權(quán)利要求
1.蕨菜黃酮提取物在制備降血脂藥物中的應(yīng)用，其特征在于蕨菜黃酮提取物在降血脂藥物中的應(yīng)用。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的蕨菜黃酮提取物在制備降血脂藥物中的應(yīng)用，其特征在于 蕨菜黃酮提取物在降血脂方面的應(yīng)用，所述蕨菜黃酮提取物為深褐色的漿狀物，黃酮占漿狀物的質(zhì)量分?jǐn)?shù)為10-15。
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的蕨菜黃酮提取物在制備降血脂藥物中的應(yīng)用，其特征在于 蕨菜黃酮提取物在降血脂藥物中的應(yīng)用，所述蕨菜黃酮提取物為深褐色的粉末狀物，黃酮占粗黃酮粉的質(zhì)量分?jǐn)?shù)為15-30。
全文摘要
本發(fā)明涉及蕨菜黃酮提取物在制備降血脂藥物中的應(yīng)用。蕨菜黃酮提取物系從蕨菜中提取，經(jīng)實(shí)驗(yàn)，按每日每公斤體重使用蕨菜黃酮30-300mg(蕨菜黃酮提取物的使用量是以測定出來的黃酮含量進(jìn)行折算)的使用量，可以達(dá)到顯著的降血脂作用。
文檔編號A61K127/00GK102247410SQ20101017553
公開日2011年11月23日 申請日期2010年5月18日 優(yōu)先權(quán)日2010年5月18日
發(fā)明者張莉, 戴軍, 谷仿麗, 陳乃東, 陳乃富, 陳存武, 陳適, 韓邦興 申請人:回音必集團(tuán)霍山制藥有限公司