專(zhuān)利名稱(chēng)：蓮子心及其提取物的新用途的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明提供了蓮子心及其提取物，具體地，是蓮子心及其提取物、蓮子心生物堿、 雙芐基異喹啉-(7-0-11' )_單醚鍵生物堿衍生物或類(lèi)似物的用途。屬藥物領(lǐng)域。
背景技術(shù)：
蓮子心(PLUMULANELUMBINIS)，又名蓮心，為睡蓮科 Nelumbonucifera Ga ertn. 多年生水生草本植物蓮的成熟種子中的青嫩胚芽。《中國(guó)藥典》2005版一部收載，具有清心 安神，交通心腎，澀精止血。據(jù)報(bào)道，蓮子心中主要含有蓮心堿(liensinine)、甲基蓮心堿 (neferine)、異蓮心堿(isoliensinine)等生物堿及木犀草素、蘆丁等黃酮類(lèi)化合物。蓮子 心的藥效主要為降壓和抗心律失常等作用。李娟，等，蓮心生物堿保健功能研究進(jìn)展，《糧食與油脂》，2010年1期，蓮心生物堿 具有降壓、抗氧化、保護(hù)心肌等多種藥用及保健功能。王輝等人研究發(fā)現(xiàn)蓮心堿對(duì)大鼠缺血 再灌注損傷心肌有保護(hù)作用，可減少心肌梗死的面積，減輕心肌細(xì)胞的損傷。蓮心堿還可 顯著降低實(shí)驗(yàn)性高脂血癥大鼠血清中總膽固醇、甘油三酯、低密度脂蛋白膽固醇水平和動(dòng) 脈粥樣硬化指數(shù)；二丙?；徯膲A具有廣泛的抗心律失常作用；異蓮心堿能顯著抑制自氧 化，對(duì)氧化損傷紅細(xì)胞有保護(hù)作用；甲基蓮心堿對(duì)高血脂癥模型大鼠血脂具有顯著的抑制 作用，同時(shí)能增強(qiáng)機(jī)體抗氧化作用，減輕脂質(zhì)過(guò)氧化的程度王輝，楊柳，楊俊，等.異蓮心 堿對(duì)大鼠肝勻漿脂質(zhì)過(guò)氧化的影響.中國(guó)醫(yī)院藥學(xué)雜志，2005,25(5)402-404 ；王輝，鄒英， 何文，等.蓮心堿對(duì)大鼠缺血再灌注損傷心肌的保護(hù)作用.醫(yī)藥導(dǎo)報(bào)，2003(8) :522-523。 余萬(wàn)桂等人研究發(fā)現(xiàn)蓮心堿可顯著減少大鼠梗死病灶范圍，抑制腦缺血再灌注后NOS和 C-Fos蛋白的表達(dá)，其對(duì)大鼠腦缺血再灌注的保護(hù)機(jī)制可能與抑制NOS和C-Fos蛋白的表達(dá) 有關(guān)(余萬(wàn)桂，陳庭煊，張恒文，等.蓮心堿對(duì)大鼠局灶性腦缺血C-Fos蛋白表達(dá)的影響，時(shí) 珍國(guó)醫(yī)國(guó)藥，2007. 18(3) :536-537)。史霄燕等人研究表明，甲基蓮心堿在體外血中可明顯 抑制多種誘聚劑誘導(dǎo)的高脂血癥患者和健康人血小板聚集(史霄燕，王嘉陵，胡文淑.甲基 蓮心堿對(duì)正常與高脂血人及動(dòng)物血小板聚集功能的影響，中國(guó)藥師，1998. 1(2) :51。5α_還原酶抑制劑是一類(lèi)重要的治療良性前列腺增生、男性禿頂、女性多毛等癥 狀的藥物。5 α-還原酶抑制劑是近年來(lái)上市的新型治療前列腺增生藥物。5α_還原酶廣 泛存在于前列腺以及其它組織和器官中，它是睪酮轉(zhuǎn)變?yōu)殡p氫睪酮的催化酶，而睪酮和雙 氫睪酮各有不同的作用，5 α-還原酶抑制劑能阻止睪酮轉(zhuǎn)變?yōu)殡p氫睪酮，從而抑制前列腺 體的增生。目前該類(lèi)藥物主要有非那雄胺、愛(ài)普列特等。近年來(lái)，小劑量5α_還原酶抑制 劑還用于男性型脫發(fā)的治療。男性型脫發(fā)又稱(chēng)雄激素源性脫發(fā)，脂溢性脫發(fā)，早禿等。在脫 發(fā)中有95%以上屬男性脫發(fā)。其發(fā)病原因尚未完全明確，現(xiàn)在醫(yī)學(xué)研究認(rèn)為遺傳因素和雙 氫睪酮是導(dǎo)致男性型脫發(fā)的主要因素?；加心行孕兔摪l(fā)的男士中，頭皮毛囊中雙氫睪酮激 素濃度很高，毛囊受其刺激后逐漸萎縮。頭發(fā)即出現(xiàn)生長(zhǎng)期縮短和頭發(fā)變稀疏、脫落，而雙 氫睪酮是睪酮通過(guò)5 α -還原酶轉(zhuǎn)化而成的。5 α -還原酶抑制劑能有效地抑制5 α -還原 酶，減少體內(nèi)雙氫睪酮的濃度，從而有效防治脫發(fā)。(張倫，5 α-還原酶抑制劑研究進(jìn)展及市場(chǎng)狀況，《中國(guó)制藥信息》，2005年21卷2期)目前臨床上尚無(wú)用于治療前列腺增生、脫發(fā)和痤瘡的藥劑、保健食品和食品添加 劑
發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的技術(shù)方案提供了蓮子心及其提取物的新用途，具體地，是在制備5α_還 原酶抑制劑的藥物或保健食品中的用途。本發(fā)明還提供了一種5 α -還原酶抑制劑。本發(fā)明提供了蓮子心及其提取物在制備5 α -還原酶抑制劑的藥物或保健食品中 的用途。本發(fā)明還提供了蓮子心生物堿在制備5 α-還原酶抑制劑的藥物或保健食品中的 用途。本發(fā)明還提供了雙芐基異喹啉-(7-0-11' )_單醚鍵生物堿衍生物或類(lèi)似物在制 備5 α-還原酶抑制劑的藥物或保健食品中的用途。所述的雙芐基異喹啉-(7-0-11' )_單醚鍵生物堿衍生物或類(lèi)似物如通式I 通式I其中Rl、R2、R3、R4、R5 為 H、CH3> CH3CO, CH3CH2CO, CH3CH2CH2CO 等；Ql、Q2兩個(gè)氮原子的結(jié)合狀態(tài)為NH、NCH3> N — 0、NR+等。當(dāng) Ql 和 Q2 為 N-CH3，R1、R2、R3、R4、R5 各為 CH3、CH3、CH3、H、H 禾口 CH3、H、CH3 禾口 CH3> CH3、CH3、H、CH3時(shí)，分別為蓮心堿、異蓮心堿、甲基蓮心堿，它們的乙?；苌锛捌湎鄳?yīng)的鹽。其中，所述的雙芐基異喹啉-(7-0-11' )_單醚鍵生物堿衍生物為蓮心堿、異蓮 心堿、甲基蓮心堿。具體結(jié)構(gòu)式為 蓮心堿 異蓮心堿 甲基蓮心堿其中，所述的藥物或保健食品是治療或預(yù)防前列腺增生的藥物或保健食品。其中，所述的藥物或保健食品是治療或預(yù)防脫發(fā)的藥物或保健食品。其中，所述的藥物或保健食品是治療或預(yù)防痤瘡的藥物或保健食品。其中，所述的蓮子心提取物是蓮子心水或有機(jī)溶劑提取物。所述的蓮心提取物， 可以是用蓮心的水提物，如水煎，水煎液的濃縮液，或蓮心水提醇沉后經(jīng)噴霧干燥得到的粉 劑；可以是以乙醇或其他有機(jī)溶劑對(duì)蓮心進(jìn)行提??；可以是以酸液滲漉對(duì)蓮心進(jìn)行提?。?可以是以離子交換樹(shù)脂對(duì)蓮心進(jìn)行提??；可以是以膜分離技術(shù)對(duì)蓮心進(jìn)行提取等。其中，所述的所述的蓮子心總生物堿中總生物堿的百分含量為5% 95%，含有 蓮心堿的重量百分含量為 80%。本發(fā)明的活性成分蓮心總生物堿的含量以蓮心堿為標(biāo)準(zhǔn)計(jì)算。含量測(cè)定采用紫外 分光光度法測(cè)定蓮心堿含量，蓮心堿在282nm處有最大吸收，根據(jù)蓮心堿的含量計(jì)算總生 物堿的含量，也可采用HPLC法測(cè)定。(參考文獻(xiàn)郭毛娣，李蘭貴.中國(guó)大陸產(chǎn)蓮子心中生 物堿成分的研究[J].中草藥，1984，15 (7) 3.袁小紅.蓮子心微囊中總生物堿的含量測(cè)定 [J].時(shí)珍國(guó)醫(yī)國(guó)藥，2006，17(7) :1141-1142 ；柳偉，王宏潔，司南等.蓮子心總生物堿滴丸 的制備工藝及含量測(cè)定[J].中國(guó)中藥雜志，2007，32(7) :581-584 ；陳錦容.HPLC法測(cè)定不 同炮制工藝蓮子心中生物堿的含量[J].海峽藥學(xué)，2009，21 (9) 33-36)本發(fā)明還提供了一種5 α-還原酶抑制劑，它是由有效量的蓮子心及其提取物、蓮 子心生物堿或雙芐基異喹啉-(7-0-11' )_單醚鍵生物堿衍生物或類(lèi)似物為活性成分，力口 上藥學(xué)上可接受的輔料或輔助性成分制備而成的制劑。其中，所述的制劑是口服制劑、注射制劑。蓮心及其活性成分制成的藥劑、保健食品和食品添加劑或添加到化妝品中，可以 是臨床上能夠使用的各種不同劑型。如片劑、口服液、丸劑、膠囊劑、注射劑(包括靜脈輸液 劑)、膏劑、酊劑、散劑、沖劑、栓劑、霜?jiǎng)?、透皮制劑等。也可添加到食品、飲料等保健食品?添加到化妝品中。當(dāng)然也可以將蓮心原藥直接制備成單方或復(fù)方的制劑、保健食品和食品添加劑。本發(fā)明蓮子心作為5 α -還原酶抑制劑，可作為藥物、保健食品或食品添加劑。綜上所述，本發(fā)明蓮心及其活性成分用于抑制5 α -還原酶，能使前列腺腺體縮小，可迅速解 除前列腺增生的梗阻癥狀，還可治療脂溢性脫發(fā)，痤瘡，藥效明確，且質(zhì)量可控，安全，為臨 床提供了一種新的選擇。顯然，根據(jù)本發(fā)明的上述內(nèi)容，按照本領(lǐng)域的普通技術(shù)知識(shí)和慣用手段，在不脫離 本發(fā)明上述基本技術(shù)思想前提下，還可以做出其它多種形式的修改、替換或變更。以下通過(guò)實(shí)施例形式的具體實(shí)施方式
，對(duì)本發(fā)明的上述內(nèi)容再作進(jìn)一步的詳細(xì)說(shuō) 明。但不應(yīng)將此理解為本發(fā)明上述主題的范圍僅限于以下的實(shí)例。凡基于本發(fā)明上述內(nèi)容 所實(shí)現(xiàn)的技術(shù)均屬于本發(fā)明的范圍。
具體實(shí)施例方式實(shí)施例1本發(fā)明蓮心總堿的制備取蓮心，粉碎，加水2 6倍，煎煮3次，每次0. 5 2h，合并濾液，回流濃縮，過(guò)濾， 加入2 8倍乙醇，使水提溶液中乙醇濃度達(dá)50 60%。靜置12 24h，過(guò)濾，濾液減壓回 收乙醇至盡，并濃縮之相對(duì)密度為1.20 1.40，減壓干燥，得蓮心提取物，即得蓮心總堿。 含量測(cè)定采用紫外分光光度法，結(jié)果總生物堿的重量百分含量為70%，以蓮心堿計(jì)，重量 百分含量為30%。實(shí)施例2本發(fā)明蓮心總堿的制備取蓮心，粉碎，用2 5倍量70 85 %乙醇回流提取2 4次，每次回流提取 0. 5 1. 5h，濾過(guò)合并濾液，減壓回收乙醇，濃縮之相對(duì)密度為1. 01 1. 10的濃縮液。濃 縮液用硫酸調(diào)pH至2. 0 4. 0，靜置，離心，離心液用10 20%氨堿化調(diào)pH至8 10，靜 置，過(guò)濾取沉淀，加乙醇加熱溶解，靜置，過(guò)濾，濾液減壓回收乙醇至盡，并濃縮之相對(duì)密度 為1. 20 1. 40，減壓干燥，得蓮心提取物，即得蓮心總堿?？偵飰A含量50%，以蓮心堿計(jì) 占10%。含量測(cè)定采用紫外分光光度法。實(shí)施例3本發(fā)明蓮心總堿的制備取蓮心，粉碎，放入滲漉器中，加入2 6%。HCl浸漬膨脹24 48h，然后不斷添加 新的2 6%。HC1，自上而下使其滲透過(guò)藥材，從滲漉器下部流出并收集浸出液，合并所有濾 液，用10 20%氨堿化至pH值為8 10，過(guò)濾得到沉淀，減壓干燥，即得蓮心總堿，總生物 堿含量30%，以蓮心堿計(jì)占15%。含量測(cè)定采用紫外分光光度法。實(shí)施例4蓮心堿、異蓮心堿、甲基蓮心堿可從蓮心總堿通過(guò)如下方式提取路線(xiàn)制備。蓮心總堿一用制備高效液相分離蓮心總堿一膠束電動(dòng)色譜分離其中，蓮心堿、異蓮心堿、甲基蓮心堿三個(gè)化合物分離純化方法可參考如下文獻(xiàn) 朱金花，李德亮.膠束電動(dòng)色譜中大體積進(jìn)樣法分離測(cè)定蓮子心中的蓮心堿、異蓮心堿和 甲基蓮心堿.分析化學(xué)，2009，37 (10) :126;陳昌國(guó).大孔吸附樹(shù)脂分離純化蓮心中蓮心總 堿的研究.時(shí)珍國(guó)醫(yī)國(guó)藥2009，20 (4) :981-983;張先洲，胡學(xué)民，羅順德等.高效液相色譜 法測(cè)定蓮子心中3種生物堿的含量.藥物分折雜志，1997，17 (2) :110_112，或直接通過(guò)市售購(gòu)買(mǎi)化合物標(biāo)準(zhǔn)品。這里所說(shuō)的活性成分主要為雙芐基異喹啉-(7-0-11' )_單醚鍵生物 堿衍生物及類(lèi)似物，主要為蓮心堿、異蓮心堿、甲基蓮心堿，可從睡蓮科植物的不同部位，如 蓮心、蓮須、荷葉等或通過(guò)全合成或半合成方法制備。以下通過(guò)藥效學(xué)試驗(yàn)或臨床試驗(yàn)證明本發(fā)明的有益效果。試驗(yàn)例1本發(fā)明蓮心堿等對(duì)5 α -還原酶的抑制作用
1、采用分光光度計(jì)法測(cè)定蓮心堿對(duì)5 α -還原酶的抑制作用?？瞻讓?duì)照組(系列濃度的睪丸酮、II型5 α -還原酶、依賴(lài)還原輔酶II (NADPH)和 tris緩沖液)，陽(yáng)性對(duì)照組(系列濃度非那甾胺、系列濃度的睪丸酮、II型5 α -還原酶、依 賴(lài)還原輔酶II (NADPH)和tris緩沖液)，蓮心堿組(系列濃度蓮心堿、系列濃度的睪丸酮、 II型5 α -還原酶、依賴(lài)還原輔酶II (NADPH)和tris緩沖液)，甲基蓮心堿組(系列濃度 甲基蓮心堿、系列濃度的睪丸酮、II型5 α -還原酶、依賴(lài)還原輔酶II (NADPH)和tris緩沖 液)，異蓮心堿組(系列濃度異蓮心堿、系列濃度的睪丸酮、II型5α-還原酶、依賴(lài)還原輔 酶II (NADPH)和tris緩沖液)，蓮心總堿組(同實(shí)施例1制備，系列濃度蓮心總堿、系列濃 度的睪丸酮、II型5 α -還原酶、依賴(lài)還原輔酶II (NADPH)和tris緩沖液)一起作37°C連 續(xù)孵育，用紫外光柵分光光度計(jì)在340nm處連續(xù)測(cè)定NADPH的特征吸收波長(zhǎng)OD值的時(shí)間變 化曲線(xiàn)。根據(jù)NADPH標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)折算出作為酶學(xué)反應(yīng)底物NADPH IOmin內(nèi)的濃度下降速率， 扣除空白對(duì)照管的下降速率，測(cè)定酶活性。見(jiàn)表1。表1分光光度計(jì)法測(cè)定蓮心堿等對(duì)5 α -還原酶的活性 通過(guò)測(cè)定NADPH的結(jié)果，說(shuō)明蓮心堿對(duì)5α-還原酶的活性有明顯抑制作用。酶 的抑制率按公式為Ι(%) = (ΔΑ0-ΔΑη)/ΔΑ0Χ100%計(jì)算。非那雄胺抑制率平均為 57. 14%，蓮心堿抑制率平均為71. 43%。甲基蓮心堿抑制率平均為68. 22%。異蓮心堿抑 制率平均為65. 48%。蓮心總堿抑制率平均為78. 57%。蓮心堿，甲基蓮心堿和異蓮心堿對(duì) 5 α-還原酶的抑制率強(qiáng)于非那甾胺。試驗(yàn)例2采用DHT試劑盒測(cè)定DHT的濃度變化，可以反映5 α -還原酶的活性，同 時(shí)也反映藥物對(duì)5 α -還原酶的抑制作用?？瞻讓?duì)照組(系列濃度的睪丸酮、II型5 α -還原酶、依賴(lài)還原輔酶II (NADPH)和 tris緩沖液)，陽(yáng)性對(duì)照組(系列濃度非那甾胺、系列濃度的睪丸酮、II型5 α -還原酶、依 賴(lài)還原輔酶II (NADPH)和tris緩沖液)，蓮心堿組(系列濃度蓮心堿、系列濃度的睪丸酮、 II型5 α -還原酶、依賴(lài)還原輔酶II (NADPH)和tris緩沖液)，甲基蓮心堿組(系列濃度 甲基蓮心堿、系列濃度的睪丸酮、II型5 α -還原酶、依賴(lài)還原輔酶II (NADPH)和tris緩沖 液)，異蓮心堿組(系列濃度異蓮心堿、系列濃度的睪丸酮、II型5α-還原酶、依賴(lài)還原輔 酶II (NADPH)和tris緩沖液)，蓮心總堿組(由實(shí)施例2方法制備，系列濃度蓮心總堿、系 列濃度的睪丸酮、II型5 α-還原酶、依賴(lài)還原輔酶II (NADPH)和tris緩沖液)一起作37°C 孵育30分鐘，采用DHT試劑盒測(cè)定DHT的濃度。見(jiàn)表2。表2DHT試劑盒測(cè)定DHT濃度 通過(guò)產(chǎn)物DHT濃度變化，說(shuō)明蓮心總堿、蓮心堿、甲基蓮心堿、異蓮心堿對(duì)5 α -還 原酶的活性有明顯抑制作用。試驗(yàn)例3本發(fā)明蓮心總堿、蓮心堿、甲基蓮心堿、異蓮心堿對(duì)前列腺平滑肌組織的 作用1.取經(jīng)丙酸睪丸酮造模所致前列腺增生的大鼠，斷頭處死，迅速摘取完整前列腺， 去除結(jié)締組織，置于-70°C低溫冰箱保存。實(shí)驗(yàn)時(shí)取出前列腺組織，解凍，充分剪碎，加適 量PBS勻漿，過(guò)濾；濾液以12000r/min離心20min，傾去上清液，加適量PBS緩沖，再加入 70%蔗糖液攪勻；將混合液裝入離心管，依次加入45%、41%、37%蔗糖液，制成蔗糖梯度， 以78000r/min離心20min，取出37% 41%蔗糖界面膜成分，用IOml預(yù)冷N(xiāo)aHCO3稀釋?zhuān)?后以27000r/min離心20min，加適量PBS制成細(xì)胞膜置冰浴中備用。在0. Iml細(xì)胞膜中，力口 入125IBE50pmol/L(購(gòu)自北京醫(yī)科大學(xué)第三附屬醫(yī)院血管醫(yī)學(xué)研究所)和系列濃度的蓮心堿(由實(shí)施例3方法制備)、甲基蓮心堿、異蓮心堿或鹽酸特拉唑嗪。37°C溫浴20min，加冷 Tris-HCl終止反應(yīng)，用玻璃纖維膜抽濾，再加Tris-HCl洗膜2次，抽干后在、計(jì)數(shù)器上測(cè) 定125I的cpm值。觀察不同濃度蓮心堿、甲基蓮心堿、異蓮心堿和鹽酸特拉唑嗪對(duì)α fAR與 125IBE結(jié)合的競(jìng)爭(zhēng)抑制效應(yīng)。2.實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)以均數(shù)士標(biāo)準(zhǔn)差(S ±s)表示，實(shí)驗(yàn)結(jié)果用SPSS 11.5統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行 方差分析，以P < 0. 05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。各組兩兩比較采用最小差異LSD方法，結(jié)果 見(jiàn)表3。表3蓮心堿、甲基蓮心堿、異蓮心堿抑制前列腺平滑肌α rAR與125IBE結(jié)合的Ki 值 G±S) *與特拉唑嗪相比，P < 0. 05.實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，蓮心堿高劑量和甲基蓮心堿高劑量能抑制前列腺平滑肌α 1-AR， 作用強(qiáng)于特拉唑嗪(P < 0. 05)，其余與特拉唑嗪無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P > 0. 05)。試驗(yàn)例4本發(fā)明蓮心提取物對(duì)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物前列腺增生的作用1.實(shí)驗(yàn)材料1. 1實(shí)驗(yàn)動(dòng)物雄性SD大鼠，初始體重120. 38士 14. 09g，由四川大學(xué)華西醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn) 動(dòng)物中心提供，合格證號(hào)046。1. 2實(shí)驗(yàn)藥物蓮心提取物，由實(shí)施例1方法制備，使用時(shí)用生理鹽水配制灌胃； 丙酸睪酮注射液，2ml/支，含丙酸睪酮25mg · ml，上海通用藥業(yè)股份有限公司生產(chǎn)，批號(hào) 090202 ；保列治0. 5mg/片，杭州默沙東制藥有限公司生產(chǎn)，批號(hào)284979。2.方法2. 1劑量設(shè)計(jì)蓮心提取物高劑量，蓮心提取物4mg -kg"1,蓮心提取物中劑量，蓮心 提取物2mg · kg—1，蓮心提取物低劑量，蓮心提取物Img · kg—1。保列治劑量為Img · kg—1。2. 2模型制備參照文獻(xiàn)[徐叔云 藥理實(shí)驗(yàn)方法學(xué)[M] 北京人民衛(wèi)生出版社， 2005 1553]。取雄性SD大鼠60只，體重120. 38 士 14. 09g,隨機(jī)分成6組，每組10只，除正 常組外，其余各組皮下注射丙酸睪酮5mg AgM,連續(xù)30天。灌胃量按Iml Ag4給藥。其 中正常組(生理鹽水Iml 'kg—1，灌胃)；模型組(生理鹽水Iml .kg-1，灌胃)；陽(yáng)性組(非那 雄胺Img ^kgl灌胃)；高劑量組(蓮心提取物4mg· kg—1，灌胃)；中劑量組(蓮心提取物 2mg · kg-1，灌胃)；低劑量組(蓮心提取物Img · kg-1，灌胃)；灌胃給藥，1次/d，共30d。第31天禁食12h，斷頭處死，迅速摘取完整前列腺，電子天平稱(chēng)重，計(jì)算前列腺臟/體重比值。3.實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)以均數(shù)士標(biāo)準(zhǔn)差(i±s)表示，實(shí)驗(yàn)結(jié)果用SPSS 11.5統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行 方差分析，以P < 0. 05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。各組兩兩比較采用最小差異LSD方法，結(jié)果 見(jiàn)表4。表4蓮心提取物對(duì)大鼠前列腺濕重和指數(shù)的影響 注與正常組比較*:Ρ<0·01 ;與模型組比較:Ρ < 0. 01 ；與陽(yáng)性藥比較Δ :Ρ < 0. 01 ；與低劑量比較※P < 0. 01 ；4.結(jié)果連續(xù)給藥30天后，各組與模型組大鼠前列腺濕重比較，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P < 0.01)，各組均較模型組降低；各組與模型組大鼠前列腺指數(shù)比較，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P <0.01)，各組均較模型組降低。陽(yáng)性藥組與蓮心提取物高劑量比較，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P <0.01)。其余各劑量組與陽(yáng)性藥組在前列腺濕重及指數(shù)方面比較，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P > 0. 05)。蓮心提取物高劑量組與中、低劑量組在前列腺濕重和前列腺指數(shù)方面比較，差異 有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P < 0.01)。說(shuō)明蓮心提取物對(duì)丙酸睪丸酮所致大鼠前列腺增生有明顯的抑 制作用，高劑量組優(yōu)于陽(yáng)性藥，高劑量組抑制前列腺增生呈劑量依賴(lài)關(guān)系。實(shí)驗(yàn)例5本發(fā)明蓮心治療脂溢性脫發(fā)臨床觀察及其對(duì)血清二氫睪酮測(cè)定1.病例選擇入選標(biāo)準(zhǔn)20 45歲脂溢性脫發(fā)患者，Norwood/Hamilton分級(jí)III V級(jí)，均有頭頂部脫發(fā)。排除標(biāo)準(zhǔn)具有高血壓(連續(xù)3個(gè)時(shí)點(diǎn)的血壓超過(guò)140/90mmHg)或 有心臟、肝臟、腎、內(nèi)分泌、心理疾病病史的患者；頭皮有脂溢性皮炎，銀屑病或頭皮感染的 患者；在前6個(gè)月內(nèi)接受此項(xiàng)研究?jī)?nèi)的藥物，生發(fā)劑及可能干擾毛發(fā)生長(zhǎng)的藥物(抗高血壓 藥物，系統(tǒng)性使用皮質(zhì)類(lèi)固醇，細(xì)胞毒制劑，抗癲癇藥物，支氣管和血管擴(kuò)張藥物)的患者。2. 一般情況69例患者按就診先后隨機(jī)分為兩組。蓮心提取物組39例，男32例，女7例。年齡 20 45歲，平均(32. 84士7. 35)歲，病程平均(1.77士 1.08)年。非那雄胺組30例，男25 例，女5例。年齡21 45歲，平均(30. 20士6. 79)歲，病程平均(1.63士 1.06)年。兩組在 性別、年齡、病程等方面均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。3.治療方法將患者隨機(jī)分為蓮心提取物膠囊組(由實(shí)施例2方法制備)，每次1粒，每日2次。非那雄胺組(杭州默沙公司生產(chǎn))，每次lmg，每日1次。連用6個(gè)月。治療前后照片比較。同時(shí)采用酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)(ELISA法)測(cè)定治療前后患者血液二氫睪酮。4.療效判斷標(biāo)準(zhǔn)參考《中藥新藥臨床研究指導(dǎo)原則》(1)臨床痊愈毛發(fā)停止脫落，脫發(fā)全部長(zhǎng)出，其分布密度、粗細(xì)、色澤與健發(fā)區(qū)相 同，皮脂分泌恢復(fù)正常。(2)顯效毛發(fā)停止脫落，脫法再生達(dá)70%以上，其密度、粗細(xì)及色澤均接近健發(fā) 區(qū)，皮脂分泌明顯減少。(3)有效毛發(fā)停止脫落，脫發(fā)再生達(dá)30%以上。包括毳毛及白發(fā)長(zhǎng)出。(4)無(wú)效脫發(fā)再生不足30%或加重。5.療效結(jié)果比較見(jiàn)表5，6。表5脫發(fā)臨床療效比較 注兩種治療方法臨床療效比較無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P > 0. 05)。表6血清二氫睪酮比較 注兩組治療前后比較有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P < 0. 01)；兩組間治療后比較無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差 異(P > 0. 05)。實(shí)驗(yàn)例6本發(fā)明蓮心治療前列腺增生臨床觀察1.病例選擇病例以排尿困難為主訴，經(jīng)國(guó)際前列腺癥狀評(píng)分(IPSS))、直腸指檢、 B超檢查等確診為前列腺增生。同時(shí)滿(mǎn)足下列條件(1)年齡> 50歲；(2)未使用藥物治療 或停用有關(guān)藥物治療2周以上；(3)排除前列腺癌、膀胱癌、前列腺炎、神經(jīng)源性膀胱、膀胱 頸硬化癥、尿道狹窄等影響排尿的疾??；(4)無(wú)嚴(yán)重的心、肝、腎等疾病而影響藥物治療的
^^ ο2. 一般情況136例患者隨機(jī)分為蓮心提取物組(由實(shí)施例3方法制備)和非那雄胺組。蓮心 提取物組69例，年齡51 72歲，平均60. 01 士 4. 80歲，治療前IPSS為(22. 91 士 3. 42)分； 非那雄胺組67例，年齡50 75歲，平均59. 06士5. 30歲，治療前IPSS為(22. 76士3. 32) 分。治療前兩組患者年齡、IPSS評(píng)分比較，差異無(wú)顯著性(P > 0. 05)，具有可比性。
3.治療方法蓮心提取物膠囊組2粒/次，每日2次。非那雄胺組5mg/次，每日1次。連續(xù)服 用12周后判定療效。4.療效觀察4. 1療效標(biāo)準(zhǔn)參照《中藥新藥臨床研究指導(dǎo)原則》中有關(guān)標(biāo)準(zhǔn) 制定。顯效癥狀基 本消失，IPSS < 7分，直腸指檢或B超檢查前列腺接近正常，或縮小為原來(lái)的60%以下，以 上具備兩項(xiàng)即可；有效癥狀部分消失，IPSS癥狀評(píng)分減少為原來(lái)的50%以下直腸指檢或 B超檢查縮小為原來(lái)的80%以下，以上具備兩項(xiàng)即可；無(wú)效癥狀緩解不明顯，IPSS癥狀評(píng) 分、前列腺檢查等各項(xiàng)指標(biāo)均未達(dá)到有效指標(biāo)。4. 2治療結(jié)果4.2. 1兩組臨床療效比較兩組總有效率比較，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P >0.05)，見(jiàn)表 7。表7兩組臨床療效比較 4. 2. 2IPSS、生活質(zhì)量療效比較兩組間治療前后IPSS、生活質(zhì)量比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué) 意義(P >0.05)，兩組治療前后比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P <0.01)。見(jiàn)表8，表9。表8兩組IPSS和生活質(zhì)量臨床療效比較 表9兩組IPSS和生活質(zhì)量治療前后臨床療效比較 4. 2. 3殘余尿量和前列腺體積療效比較兩組間治療前后殘余尿量和前列腺體積比 較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P > 0. 05)，兩組治療前后比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P < 0. 01)。見(jiàn)表 10，表 11。表10兩組前列腺體積和殘余尿量臨床療效比較 表11兩組前列腺體積和殘余尿量治療前后臨床療效比較 4. 2. 4排尿時(shí)間和最大尿流療效比較兩組間治療前后排尿時(shí)間和最大尿流比較差 異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P < 0. 01)，蓮心治療組優(yōu)于非那雄胺組。兩組治療前后比較差異有統(tǒng)計(jì) 學(xué)意義(P < 0. 01)。見(jiàn)表12，表13。表12兩組排尿時(shí)間和最大尿流臨床療效比較 表13兩組排尿時(shí)間和最大尿流治療前后臨床療效比較~ 以上結(jié)果提示，兩組均能改善前列腺增生的癥狀和體征，但蓮心提取物治療組在 縮短排尿時(shí)間和增大最大尿流率方面療效優(yōu)于非那雄胺組，對(duì)其余癥狀和體征的改善兩組 療效相當(dāng)。實(shí)驗(yàn)例7本發(fā)明蓮心治療尋常型痤瘡臨床觀察1臨床資料1. 1 一般資料入選的87例皮膚科門(mén)診患者。采用隨機(jī)數(shù)字表法將其分為治療 組、對(duì)照組。治療組45例中，男29例，女16例；年齡最小者16歲，最大者33歲，平均年齡 23. 8 士 3. 77歲；病程最長(zhǎng)者18月，最短者2月，平均8. 64士4. 86月；單純面部痤瘡36例， 合并胸背部皮疹9例。對(duì)照組42例中，男23例，女19例；年齡最小者18歲，最大者33歲， 平均年齡23. 3士3. 92歲；病程最長(zhǎng)者20月，最短者2月，平均7. 71士4. 96月；單純面部痤 瘡35例，合并胸背部皮疹7例。經(jīng)統(tǒng)計(jì)學(xué)分析，兩組病例在性別、年齡、病程、病情等方面， 差異均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P > 0. 05)，具有可比性。1. 2診斷標(biāo)準(zhǔn)參照《中醫(yī)病證診斷療效標(biāo)準(zhǔn)》及《臨床皮膚病學(xué)》制定。青春期開(kāi) 始發(fā)病，好發(fā)于面部、上胸及背部等皮脂腺發(fā)達(dá)部位，對(duì)稱(chēng)分布，皮損為丘疹、粉刺、膿皰、結(jié) 節(jié)，伴有皮脂溢出，呈慢性經(jīng)過(guò)。2治療方法2. 1治療組內(nèi)服蓮心提取物膠囊，由實(shí)施例1制備，2粒/次，3次/d。2. 2對(duì)照組內(nèi)服維胺脂膠囊，3次/d，2粒/次。2. 3觀察方法兩組病例均停用其他藥物，避免飲酒及辛辣刺激食物，保持大便通 暢。4周后判斷療效。同時(shí)采用酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)(ELISA法)測(cè)定治療前后患者血液二氫睪酮。3療效觀察3. 1療效標(biāo)準(zhǔn)治愈皮疹消退，或僅遺留少許色素沉著，癥狀消失；顯效皮疹大 部分消退，癥狀大部分明顯減輕；有效皮損部分消退，癥狀顯著改善；無(wú)效皮疹消退不明 顯，或臨床癥狀反見(jiàn)惡化。3. 2治療結(jié)果兩種治療方法臨床療效比較有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P < 0. 01)，蓮心提取物組療效優(yōu)于維 胺脂膠囊組。血清二氫睪酮兩組治療后比較有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P < 0.01)。蓮心提取物組治療 前后比較有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P <0.01)，血清二氫睪酮明顯降低。維胺脂膠囊組治療前后比較 無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P > 0. 05)。(見(jiàn)表14，表15)表14臨床療效比較 表15血清二氫睪酮比較 綜上所述，本發(fā)明蓮子心作為5α-還原酶抑制劑，可作為藥物、保健食品或食品 添加劑。綜上所述，本發(fā)明蓮心及其活性成分用于抑制5 α-還原酶，能使前列腺腺體縮小， 可迅速解除前列腺增生的梗阻癥狀，還可治療脂溢性脫發(fā)，痤瘡，藥效明確，且質(zhì)量可控，安 全，為臨床提供了 一種新的選擇。
權(quán)利要求
蓮子心及其提取物在制備5α-還原酶抑制劑的藥物或保健食品中的用途。
2.蓮子心總生物堿在制備5a -還原酶抑制劑的藥物或保健食品中的用途。
3.雙芐基異喹啉-(7-0-11')_單醚鍵生物堿衍生物或類(lèi)似物在制備5a-還原酶抑 制劑的藥物或保健食品中的用途，其中，所述的雙芐基異喹啉-(7-0-11' )_單醚鍵生物堿 衍生物或類(lèi)似物如通式I 通式I其中 ；Ql、Q2兩個(gè)氮原子的結(jié)合狀態(tài)為NH、NCH3、N — 0或NR+。
4.根據(jù)權(quán)利要求3所述的用途，其特征在于所述的雙芐基異喹啉-(7-0-11')-單醚 鍵生物堿衍生物為蓮心堿、異蓮心堿、甲基蓮心堿。
5.根據(jù)權(quán)利要求1-3任意一項(xiàng)所述的用途，其特征在于所述的藥物或保健食品是預(yù) 防或/和治療前列腺增生的藥物或保健食品。
6.根據(jù)權(quán)利要求1-3任意一項(xiàng)所述的用途，其特征在于所述的藥物或保健食品是預(yù) 防或/和治療脫發(fā)的藥物或保健食品。
7.根據(jù)權(quán)利要求1-3任意一項(xiàng)所述的用途，其特征在于所述的藥物或保健食品是預(yù) 防或/和治療痤瘡的藥物或保健食品。
8.根據(jù)權(quán)利要求1所述的用途，其特征在于所述的蓮子心提取物是蓮子心的水或有 機(jī)溶劑提取物。
9.根據(jù)權(quán)利要求2所述的用途，其特征在于所述的蓮子心總生物堿中總生物堿的百 分含量為5% 95% ；蓮心堿的重量百分含量為 80%。
10.一種5 a-還原酶抑制劑，其特征在于它是由有效量的蓮子心及其提取物、蓮子心 生物堿或雙芐基異喹啉-(7-0-11' )_單醚鍵生物堿衍生物或類(lèi)似物為活性成分，加上藥 學(xué)上可接受的輔料或輔助性成分制備而成的制劑。
11.根據(jù)權(quán)利要求10所述的5a_還原酶抑制劑，其特征在于所述的制劑是口服制 劑、注射制劑。
全文摘要
本發(fā)明提供了蓮子心的新用途，具體地，是蓮子心及其提取物、蓮子心總生物堿、雙芐基異喹啉-(7-0-11′)-單醚鍵生物堿衍生物或類(lèi)似物在制備5α-還原酶抑制劑的藥物或保健食品中的用途。本發(fā)明還提供了一種5α-還原酶抑制劑。本發(fā)明蓮子心作為5α-還原酶抑制劑，可作為藥物、保健食品或食品添加劑。本發(fā)明蓮心及其活性成分用于抑制5α-還原酶，能使前列腺腺體縮小，可迅速解除前列腺增生的梗阻癥狀，還可治療脂溢性脫發(fā)，痤瘡，藥效明確，且質(zhì)量可控，安全，為臨床提供了一種新的選擇。
文檔編號(hào)A61K31/4725GK101862374SQ20101019936
公開(kāi)日2010年10月20日 申請(qǐng)日期2010年6月12日 優(yōu)先權(quán)日2010年6月12日
發(fā)明者李宏 申請(qǐng)人:李宏