專利名稱：一種黑果枸杞原花青素提取物的制備方法
技術領域：
本發(fā)明涉及一種原花青素提取物的制備方法，尤其涉及一種黑果枸杞原花青素提 取物的制備方法。
背景技術：
原花青素是植物中廣泛存在的一大類天然多酚化合物的總稱，具有清除自由基、 抗氧化、抗致突變、酶抑制及治療毛細血管疾病等藥理活性。目前，主要從葡萄籽中提取原 花青素，國內生產的葡萄籽提取物原花青素含量一般在75%左右，國際上好的葡萄籽提取 物產品其原花青素含量可達到85%。葡萄籽提取物中的總多酚一般在75 95%之間，我 國葡萄籽提取物總多酚大多為85%左右，葡萄籽原花青素提取物抗氧化指數0RAC(OXygen radicalabsorbance capacity)值在5000左右(ymolTE/g)。國內個別制造商葡萄籽提取 物原花青素含量> 90%，ORAC為18782ymolTE/g。黑果枸杞(Lycium ruthenicum Murr.)為茄科枸杞屬植物，是我國西北部分地區(qū) 常見的野生灌木，其漿果果實成熟后為圓形，呈黑紫色。藏藥及維藥用于治療心熱病、心臟 病、降壓及月經不調等，民間用于滋補強壯。黑果枸杞果汁中原花青素含量為0. 62%,ORAC 值為66737ymolTE/L，干燥果實的原花青素含量為7. 2%，說明黑果枸杞具有很好的抗氧 化活性。

發(fā)明內容
本發(fā)明所要解決的技術問題是提供一種以黑果枸杞為原料、成本低廉的黑果枸杞 原花青素提取物的制備方法。為解決上述問題，本發(fā)明所述的一種黑果枸杞原花青素提取物的制備方法，包括 以下步驟(1)以黑果枸杞果汁或黑果枸杞濃縮液為原料，經非極性大孔吸附樹脂分離后，用 去離子水洗脫至無糖，再用2 50倍床層體積的鹽酸_乙醇溶液洗脫吸附在大孔樹脂上 的原花青素，得到含有原花青素的洗脫液；其中鹽酸-乙醇溶液中的乙醇質量濃度為40 100%、鹽酸質量濃度為0. 5 3% ；(2)將所述含有原花青素的洗脫液經真空減壓濃縮或納濾膜濃縮后，得到原花青 素濃縮液；(3)將所述原花青素濃縮液經噴霧干燥或冷凍干燥后，即可得到黑果枸杞原花青 素提取物。所述步驟(1)中的黑果枸杞果汁是指將新鮮黑果枸杞果實壓榨后經0. 5 300 μ m 過濾器或3000 8000r/min離心機過濾去渣、并過0. 02 10 μ m陶瓷膜除去懸浮物的果汁。所述步驟(1)中的黑果枸杞濃縮液是指將干燥過的新鮮黑果枸杞果實榨汁后剩 余的籽皮或干燥的黑果枸杞果實粉碎后，用其3 10倍重量的鹽酸_乙醇溶液在25 60°C
3下提取2 3次，并將得到的提取液依次經0. 5 300 μ m過濾器過濾、真空減壓濃縮或納 濾膜濃縮后得到的濃縮液；其中鹽酸-乙醇溶液中的乙醇質量濃度為10 100%、鹽酸質 量濃度為0. 5 3%。所述納濾膜濃縮的條件是指納濾膜截留分子量為50 300，壓力為2 20kg，溫 度為15 50°C，流速為50 1000ml/min。本發(fā)明與現有技術相比具有以下優(yōu)點1、由于本發(fā)明采用膜分離技術集合柱層析分離技術，即先用陶瓷膜可有效去除果 汁中的鞣質、粘液質等雜質，再通過大孔樹脂分離，因此，不但有效地縮短了提取分離的時 間，減少了工藝過程中的能耗，而且所得到的產品純度高、性能穩(wěn)定，可應用于天然色素食 品添加劑以及具有抗氧化作用的醫(yī)藥保健品原料。經高效液相色譜HPLC (來源美國安捷 倫公司，Agilent 1100)測試，所得產品的原花青素含量彡50%，總多酚含量彡50%，花色 苷含量彡1%。2、由于本發(fā)明采用納濾膜濃縮，而納濾膜對小分子有機物有較高的截留性，因此， 有效地降低了設備投資，同時也降低了耗能。3、由于本發(fā)明采用原料資源量豐富的黑果枸杞果實為原料，因此，有效地降低了 生產成本。4、由于本發(fā)明采用不同質量濃度的乙醇洗脫，因此，在分離過程中可以得到各種 含量的黑果枸杞原花青素提取物產品，從而滿足國際市場上不同層次的市場需求。
具體實施例方式實施例1 一種黑果枸杞原花青素提取物的制備方法，包括以下步驟(1)將IOkg黑果枸杞果汁，經非極性大孔吸附樹脂分離后，用去離子水洗脫，以去 除蛋白質、糖類雜質，再用2倍床層體積的鹽酸-乙醇溶液洗脫吸附在大孔樹脂上的原花青 素，得到含有原花青素的洗脫液；其中鹽酸-乙醇溶液中的乙醇質量濃度為40%、鹽酸質量 濃度為0.5% ；其中黑果枸杞果汁是指將新鮮黑果枸杞果實壓榨后經0. 5 μ m過濾器過濾細微 顆粒去渣，并經壓力為0. 2Mpa、流速為120ml/min的0. 02 μ m陶瓷膜微濾除去懸浮物、鞣質 及粘液質的果汁。(2)將含有原花青素的洗脫液在溫度為55°C、壓力為0. 07Mpa的條件下真空減壓 濃縮后，回收乙醇，得到原花青素濃縮液。(3)將原花青素濃縮液在進口熱風溫度為160°C、出口熱風溫度為80°C、干物質含 量為12%、進料溫度為60°C、離心霧化器轉速為25000r/min的條件下進行噴霧干燥后，即 可得到0. 4kg黑果枸杞原花青素提取物。經HPLC測試，該提取物中原花青素含量為50.6%，總多酚含量為52.3%，花色苷 含量為1.46%。實施例2 —種黑果枸杞原花青素提取物的制備方法，包括以下步驟(1)將IOkg黑果枸杞果汁，經非極性大孔吸附樹脂分離后，用去離子水洗脫，以去 除蛋白質、糖類雜質，再用5倍床層體積的鹽酸-乙醇溶液洗脫吸附在大孔樹脂上的原花青 素，得到含有原花青素的洗脫液；其中鹽酸-乙醇溶液中的乙醇質量濃度為100%、鹽酸質量濃度為3% ；其中黑果枸杞果汁是指將新鮮黑果枸杞果實壓榨后經300 μ m過濾器過濾細微 顆粒去渣，并經壓力為0. 05Mpa、流速為220ml/min的10 μ m陶瓷膜微濾除去懸浮物、鞣質及 粘液質的果汁。(2)將含有原花青素的洗脫液在溫度為25°C、流速為50ml/min、壓力為Ilkg的條 件下，采用截留分子量為50的納濾膜濃縮，回收乙醇后，得到原花青素濃縮液。(3)將原花青素濃縮液在冷阱溫度為_30°C、加熱板溫度為80°C、真空度為20Pa的 條件下進行冷凍干燥后，即可得到0. 43kg黑果枸杞原花青素提取物。經HPLC測試，該提取物中原花青素含量為53.7%，總多酚含量為56.9%，花色苷 含量為1. 52%。實施例3 —種黑果枸杞原花青素提取物的制備方法，包括以下步驟(1)將IOkg黑果枸杞果汁，經非極性大孔吸附樹脂分離后，用去離子水洗脫，以去 除蛋白質、糖類雜質，再用10倍床層體積的鹽酸-乙醇溶液洗脫吸附在大孔樹脂上的原花 青素，得到含有原花青素的洗脫液；其中鹽酸-乙醇溶液中的乙醇質量濃度為70%、鹽酸質 量濃度為；其中黑果枸杞果汁是指將新鮮黑果枸杞果實壓榨后經150 μ m過濾器過濾細微 顆粒去渣，并經壓力為0. IMpa、流速為150ml/min的5 μ m陶瓷膜微濾除去懸浮物、鞣質及粘 液質的果汁。(2)將含有原花青素的洗脫液在溫度為30°C、流速為300ml/min、壓力為8kg的條 件下，采用截留分子量為300的納濾膜濃縮，回收乙醇后，得到原花青素濃縮液。(3)將濃縮液經噴霧干燥后，即可得到0. 39kg黑果枸杞原花青素提取物。經HPLC測試，該提取物中原花青素含量為54%，總多酚含量為53%，花色苷含量 為 1. 57%。實施例4 一種黑果枸杞原花青素提取物的制備方法，包括以下步驟(1)將25kg黑果枸杞果汁，經非極性大孔吸附樹脂分離后，用去離子水洗脫，以去 除蛋白質、糖類雜質，再用15倍床層體積的鹽酸-乙醇溶液洗脫吸附在大孔樹脂上的原花 青素，得到含有原花青素的洗脫液；其中鹽酸-乙醇溶液中的乙醇質量濃度為50%、鹽酸質 量濃度為2% ；其中黑果枸杞果汁是指將新鮮黑果枸杞果實壓榨后經3000r/min離心機離心過 濾細微顆粒去渣，并經壓力為0. 2Mpa、流速為120ml/min的0. 05 μ m陶瓷膜微濾除去懸浮 物、鞣質及粘液質的果汁。(2)將含有原花青素的洗脫液在溫度為15°C、流速為200ml/min、壓力為2kg的條 件下，采用截留分子量為200的納濾膜濃縮，回收乙醇后，得到原花青素濃縮液。(3)將原花青素濃縮液經冷凍干燥后，即可得到1. 2kg黑果枸杞原花青素提取物。經HPLC測試，該提取物中原花青素含量為65. 1%，總多酚含量為69. 1%，花色苷 含量為1. 79%。實施例5 —種黑果枸杞原花青素提取物的制備方法，包括以下步驟(1)將25kg黑果枸杞果汁，經非極性大孔吸附樹脂分離后，用去離子水洗脫，以去 除蛋白質、糖類雜質，再用10倍床層體積的鹽酸-乙醇溶液洗脫吸附在大孔樹脂上的原花
5青素，得到含有原花青素的洗脫液；其中鹽酸-乙醇溶液中的乙醇質量濃度為90%、鹽酸質 量濃度為3% ；其中黑果枸杞果汁是指將新鮮黑果枸杞果實壓榨后經8000r/min離心機離心過 濾細微顆粒去渣，并經壓力為0. 04Mpa、流速為240ml/min的8 μ m陶瓷膜微濾除去懸浮物、 鞣質及粘液質的果汁。(2)將含有原花青素的洗脫液在溫度為21°C、流速為121ml/min、壓力為9kg的條 件下，采用截留分子量為100的納濾膜濃縮，回收乙醇后，得到原花青素濃縮液。(3)將原花青素濃縮液經冷凍干燥后，即可得到1. Ikg黑果枸杞原花青素提取物。經HPLC測試，該提取物中原花青素含量為95. 7%，總多酚含量為94. 7%，花色苷 含量為4.8%。實施例6 —種黑果枸杞原花青素提取物的制備方法，包括以下步驟(1)將25kg黑果枸杞果汁，經非極性大孔吸附樹脂分離后，用去離子水洗脫，以去 除蛋白質、糖類雜質，再用20倍床層體積的鹽酸-乙醇溶液洗脫吸附在大孔樹脂上的原花 青素，得到含有原花青素的洗脫液；其中鹽酸-乙醇溶液中的乙醇質量濃度為60%、鹽酸質 量濃度為；其中黑果枸杞果汁是指將新鮮黑果枸杞果實壓榨后經5000r/min離心機離心過 濾細微顆粒去渣，并經壓力為0. IMpa、流速為150ml/min的6μπι陶瓷膜微濾除去懸浮物、鞣 質及粘液質的果汁。(2)將含有原花青素的洗脫液在溫度為35°C、流速為lOOOml/min、壓力為5kg的條 件下，采用截留分子量為150的納濾膜濃縮，回收乙醇后，得到原花青素濃縮液。(3)將原花青素濃縮液經噴霧干燥后，即可得到1. 4kg黑果枸杞原花青素提取物。經HPLC測試，該提取物中原花青素含量為75. 5%，總多酚含量為72. 3%，花色苷 含量為1.62%。實施例7 —種黑果枸杞原花青素提取物的制備方法，包括以下步驟(1)將50kg黑果枸杞濃縮液，經非極性大孔吸附樹脂分離后，用去離子水洗脫，以 去除蛋白質、糖類雜質，再用50倍床層體積的鹽酸_乙醇溶液洗脫吸附在大孔樹脂上的原 花青素，得到含有原花青素的洗脫液；其中鹽酸-乙醇溶液中的乙醇質量濃度為85%、鹽酸 質量濃度為0.5% ；其中黑果枸杞濃縮液是指將干燥的黑果枸杞果實粉碎后，用其3倍重量的鹽 酸_乙醇溶液在25°C下提取2次，第一次提取時間為60min，其余提取時間為30min，合并 提取液；并將得到的提取液經300 μ m過濾器過濾去除細微顆粒后，在溫度為50°C、壓力為 0. 06Mpa的條件下進行真空減壓濃縮得到的濃縮液；其中鹽酸_乙醇溶液中的乙醇質量濃 度為10%、鹽酸質量濃度為3%。(2)將含有原花青素的洗脫液在溫度為50°C、壓力為0. 06Mpa的條件下真空減壓 濃縮后，回收乙醇，得到原花青素濃縮液。(3)將原花青素濃縮液采用噴霧干燥后，即可得到2kg黑果枸杞原花青素提取物。經HPLC測試，該提取物中原花青素含量為73. 2%，總多酚含量為79. 0%，總花色 苷含量為1. 58%。實施例8 —種黑果枸杞原花青素提取物的制備方法，包括以下步驟
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(1)將50kg黑果枸杞濃縮液，經非極性大孔吸附樹脂分離后，用去離子水洗脫，以 去除蛋白質、糖類雜質，再用10倍床層體積的鹽酸-乙醇溶液洗脫吸附在大孔樹脂上的原 花青素，得到含有原花青素的洗脫液；其中鹽酸-乙醇溶液中的乙醇質量濃度為60%、鹽酸 質量濃度為0.8% ；其中黑果枸杞濃縮液是指將干燥過的新鮮黑果枸杞果實榨汁后剩余的籽皮粉碎 后，用其10倍重量的鹽酸-乙醇溶液在60°C下提取3次，第一次提取時間為50min，其余提 取時間為40min，合并提取液；并將得到的提取液先經0. 5 μ m過濾器過濾去除細微顆粒，過 濾液經壓力為0. lOMpa、流速為300ml/min的10 μ m陶瓷膜微濾后，再經截留分子量為100 的納濾膜，在溫度為50°C、壓力為20kg、流速為50ml/min的條件下進行濃縮得到的濃縮液； 其中鹽酸-乙醇溶液中的乙醇質量濃度為100%、鹽酸質量濃度為1. 5%。(2)將含有原花青素的洗脫液在溫度為40°C、流速為20ml/min、壓力為IOkg的條 件下，采用截留分子量為100的納濾膜濃縮后，回收乙醇，得到原花青素濃縮液。(3)將原花青素濃縮液采用冷凍干燥后，即可得到2. 6kg黑果枸杞原花青素提取 物。經HPLC測試，該提取物中原花青素含量為52.8%，總多酚含量為58.6%，總花色 苷含量為1. 32%。實施例9 一種黑果枸杞原花青素提取物的制備方法，包括以下步驟(1)將50kg黑果枸杞濃縮液，經非極性大孔吸附樹脂分離后，用去離子水洗脫，以 去除蛋白質、糖類雜質，再用2倍床層體積的鹽酸-乙醇溶液洗脫吸附在大孔樹脂上的原花 青素，得到含有原花青素的洗脫液；其中鹽酸-乙醇溶液中的乙醇質量濃度為80%、鹽酸質 量濃度為2% ；其中黑果枸杞濃縮液是指將干燥的黑果枸杞果實粉碎后，用其7倍重量的鹽 酸_乙醇溶液在50°C下提取3次，第一次提取時間為70min，其余提取時間為20min，合并 提取液；并將得到的提取液經180 μ m過濾器過濾去除細微顆粒后，在溫度為50°C、壓力為 0. 06Mpa的條件下進行真空減壓濃縮得到的濃縮液；其中鹽酸_乙醇溶液中的乙醇質量濃 度為70%、鹽酸質量濃度為0. 5%。(2)將含有原花青素的洗脫液在溫度為60°C、壓力為0. 05Mpa的條件下真空減壓 濃縮后，回收乙醇，得到原花青素濃縮液。(3)將原花青素濃縮液采用噴霧干燥后，即可得到2. 2kg黑果枸杞原花青素提取 物。經HPLC測試，該提取物中原花青素含量為76%，總多酚含量為75%，總花色苷含 量為2. 33%。
權利要求
一種黑果枸杞原花青素提取物的制備方法，包括以下步驟(1)以黑果枸杞果汁或黑果枸杞濃縮液為原料，經非極性大孔吸附樹脂分離后，用去離子水洗脫至無糖，再用2～50倍床層體積的鹽酸 乙醇溶液洗脫吸附在大孔樹脂上的原花青素，得到含有原花青素的洗脫液；其中鹽酸 乙醇溶液中的乙醇質量濃度為40～100％、鹽酸質量濃度為0.5～3％；(2)將所述含有原花青素的洗脫液經真空減壓濃縮或納濾膜濃縮后，得到原花青素濃縮液；(3)將所述原花青素濃縮液經噴霧干燥或冷凍干燥后，即可得到黑果枸杞原花青素提取物。
2.如權利要求1所述的一種黑果枸杞原花青素提取物的制備方法，其特征在于所述 步驟(1)中的黑果枸杞果汁是指將新鮮黑果枸杞果實壓榨后經0.5 300 μ m過濾器或 3000 8000r/min離心機過濾去渣、并過0. 02 10 μ m陶瓷膜除去懸浮物的果汁。
3.如權利要求1所述的一種黑果枸杞原花青素提取物的制備方法，其特征在于所述 步驟(1)中的黑果枸杞濃縮液是指將干燥過的新鮮黑果枸杞果實榨汁后剩余的籽皮或干 燥的黑果枸杞果實粉碎后，用其3 10倍重量的鹽酸-乙醇溶液在25 60°C下提取2 3次，并將得到的提取液依次經0. 5 300 μ m過濾器過濾、真空減壓濃縮或納濾膜濃縮后得 到的濃縮液；其中鹽酸-乙醇溶液中的乙醇質量濃度為10 100%、鹽酸質量濃度為0. 5 3 % ο
4.如權利要求1或3所述的一種黑果枸杞原花青素提取物的制備方法，其特征在于 所述納濾膜濃縮的條件是指納濾膜截留分子量為50 300，壓力為2 20kg，溫度為15 50°C，流速為 50 1000ml/min。
全文摘要
本發(fā)明涉及一種黑果枸杞原花青素提取物的制備方法，該方法以黑果枸杞果汁或黑果枸杞濃縮液為原料，經非極性大孔吸附樹脂分離后，用去離子水洗脫至無糖，再用鹽酸-乙醇溶液洗脫，得到含有原花青素的洗脫液；然后將含有原花青素的洗脫液經真空減壓濃縮或納濾膜濃縮后，得到原花青素濃縮液；最后將濃縮液經噴霧干燥或冷凍干燥后，即可得到原花青素含量≥50％、總多酚含量≥50％、花色苷含量≥1％的的黑果枸杞原花青素提取物。本發(fā)明采用膜分離技術集合柱層析分離技術，不但有效降低了生產成本，縮短了提取分離的時間，減少了工藝過程中的能耗，而且所得產品純度高、性能穩(wěn)定，可應用于天然色素食品添加劑以及具有抗氧化作用的醫(yī)藥保健品原料。
文檔編號A61P39/06GK101912480SQ20101024135
公開日2010年12月15日 申請日期2010年7月23日 優(yōu)先權日2010年7月23日
發(fā)明者于瑞濤, 張興旺, 梅麗娟, 趙曉輝, 邵赟, 陳晨, 陶燕鐸 申請人:中國科學院西北高原生物研究所