專利名稱：IL-1β抗體及其結(jié)合片段的心血管相關(guān)用途的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本公開一般涉及用于降低、預(yù)防或治療心血管事件和/或心血管疾病(例如，急性心血管疾病或慢性心血管疾病)的IL-I β結(jié)合分子(例如，IL-I β結(jié)合抗體及其片段)。
背景技術(shù)：
在過去十年間，炎癥已成為心血管疾病病理發(fā)生的中心課題，廣泛的心臟病與炎癥和細(xì)胞因子調(diào)控相關(guān)聯(lián)(Mehra等人，2005，J. LeukocyteBiol. 78 =805-818)。心肌中的每一種有核的細(xì)胞類型(包括心肌細(xì)胞)都可以響應(yīng)各種形式的應(yīng)激/損傷，而分泌促炎細(xì)胞因子。它們在多種條件下升高，如炎性心肌炎、同種異體移植排斥、心缺血狀態(tài)、充血性心力衰竭(CHF)和再灌注損傷。IL-I β是由許多不同細(xì)胞類型，包括單核細(xì)胞和巨噬細(xì)胞，分泌的促炎細(xì)胞因子。當(dāng)作為炎癥反應(yīng)的一部分釋放時，IL-I β造成一系列生物效應(yīng)，這主要通過誘導(dǎo)其他炎癥介質(zhì)來介導(dǎo)，所述其他炎癥介質(zhì)例如促腎上腺皮質(zhì)激素、血小板因子-4、前列腺素 Ε2 (PGE2)、IL-6和IL_8。IL-I β通過激活I(lǐng)L-I受體(其存在于幾乎所有細(xì)胞類型上)， 誘導(dǎo)局部和全身的炎癥效應(yīng)。白介素-I(IL-I)細(xì)胞因子家族已被提示牽涉許多疾病狀態(tài)。 IL-I家族成員包括IL-I α、IL-I β和IL_lRa。盡管通過其與IL_1受體(IL-1R1和IL-1R2) 結(jié)合的能力而相關(guān)聯(lián)，但這些細(xì)胞因子的每一個都是不同的，由不同基因表達(dá)且具有不同的一級氨基酸序列。此外，這些細(xì)胞因子的生理活性可以彼此區(qū)分。發(fā)明概述本公開一般涉及用于降低、預(yù)防或治療心血管事件和/或心血管疾病的IL-I β結(jié)合分子，包括急性心血管疾病或慢性心血管疾病。本公開還涉及用于預(yù)防或治療心血管事件和/或心血管疾病的方法，包括通過降低心血管事件或疾病。本公開提供了降低個體中的心血管事件的方法，包括向所述個體施用治療有效量的抗IL-I β結(jié)合抗體或其結(jié)合片段，其中所述個體是有在先的心血管事件歷史或至少一種心血管疾病的風(fēng)險因子歷史的個體，且其中所述心血管事件是心肌梗塞、中風(fēng)、心血管死亡、充血性心力衰竭、心臟停搏、急性冠脈綜合征、絞痛或血管再生術(shù)。本公開提供了降低有至少一種心血管疾病的風(fēng)險因子歷史的個體中的心血管事件的方法(例如，延遲至事件的時間、降低事件的可能性或風(fēng)險、預(yù)防事件、降低事件的嚴(yán)重程度、降低恢復(fù)的時間)，包括向所述個體施用治療有效量的抗IL-I β結(jié)合抗體或其結(jié)合片段，且其中所述心血管事件是心肌梗塞、中風(fēng)、心血管死亡、充血性心力衰竭、心臟停搏、急性冠脈綜合征、絞痛或血管再生術(shù)。本公開還提供了降低有在先的心血管事件歷史的個體中的心血管事件的方法(例如，延遲至事件的時間、降低事件的可能性或風(fēng)險、預(yù)防事件、降低事件的嚴(yán)重程度、降低恢復(fù)的時間)，包括向所述個體施用治療有效量的抗IL-I β結(jié)合抗體或其結(jié)合片段，且其中所述心血管事件是心肌梗塞、中風(fēng)、心血管死亡、充血性心力衰竭、心臟停搏、急性冠脈綜合征、絞痛或血管再生術(shù)。在一些實施方案中，在先的心血管事件是第一次心血管事件。 在一些實施方案中，在先的或第一次心血管事件選自心肌梗塞、中風(fēng)、充血性心力衰竭、急性冠脈綜合征、絞痛和血管再生術(shù)。在一些實施方案中，在先的或第一次心血管事件是心肌梗塞或急性冠脈綜合征。在一些實施方案中，心肌梗塞是有ST升高的心肌梗塞(例如，ST 段升高型心肌梗塞，STEMI)。在一些實施方案中，心肌梗塞是沒有ST升高的心肌梗塞(例如，無ST段升高型心肌梗塞，NSTEMI)。在一些實施方案中，通過心電圖(例如，ECG、EKG) 確定ST升高的存在或缺失。在一些實施方案中，降低心血管事件的方法是降低第二次或繼發(fā)性心血管事件的方法。在一些實施方案中，所述心血管事件(例如，第二次或繼發(fā)性心血管事件)選自心肌梗塞、中風(fēng)、心血管死亡、充血性心力衰竭、心臟停搏、急性冠脈綜合征、 絞痛和血管再生術(shù)。在一些實施方案中，第一次心血管事件和第二次心血管事件是相同類型的心血管事件。在一些實施方案中，第一次心血管事件和第二次心血管事件是不同類型的心血管事件。在一些實施方案中，血管再生術(shù)是冠脈、頸動脈或外周動脈血管再生術(shù)。在一些實施方案中，所述冠脈、頸動脈或外周動脈血管再生術(shù)是經(jīng)皮冠狀動脈介入治療 (percutaneous coronary intervention, PCI)、植人支架(stent implant)、冠狀動脈旁路移植血管(CABG)、頸動脈內(nèi)膜切除術(shù)、外周血管病旁路手術(shù)(peripheral vascular disease bypass surgery)或夕卜周血管成形術(shù)。在一些實施方案中，所述個體還具有至少一種心血管疾病的風(fēng)險因子的歷史。在一些實施方案中，所述風(fēng)險因子是明顯的冠心病、冠狀動脈病、血栓形成、短暫性缺血發(fā)作 (transient ischaemic attack)、左心室月巴大、動脈硬化(arteriosclerosis)、再狹窄、 吸煙或外周血管病。在一些實施方案中，所述風(fēng)險因子是升高的甘油三酯、全身性炎癥、 高血磷水平、高甲狀旁腺激素水平、微量蛋白尿或高同型半胱氨酸水平。在一些實施方案中，所述風(fēng)險因子是肥胖、高血糖(hyperglycemia)、慢性腎衰竭、高血葡萄糖(high blood glucose)、慢性腎病或代謝綜合征。在一些實施方案中，所述風(fēng)險因子是末期腎病。在一些實施方案中，所述風(fēng)險因子是高血壓、血脂異常、血脂過多、升高的總膽固醇、升高的LDL膽固醇或低HDL膽固醇或動脈粥樣硬化(atherosclerosis)。在一些實施方案中，高血壓表現(xiàn)為血壓大于或等于180/110mm Hg。在一些其它實施方案中，高血壓是溫和至中度的，伴隨收縮壓(SBP)為140至180mm Hg，和/或舒張壓(DBP)為90至IlOmm Hg。在一些實施方案中，所述個體具有升高的C-反應(yīng)蛋白(CRP)水平。在一些實施方案中，所述個體大于55歲。在一些實施方案中，所述個體大于65歲。在一些實施方案中，所述個體是非高血壓的。在一些實施方案中，所述個體患難以控制的高血壓。在一些實施方案中，所述個體有心律不齊。在一些實施方案中，所述個體有“A型”人格。在一些實施方案中，所述個體有久坐的生活方式。
在一些實施方案中，所述個體患糖尿病。在一些實施方案中，所述糖尿病是2型糖尿病。在一些實施方案中，所述個體具有兩種或多種所述風(fēng)險因子的歷史。在一些實施方案中，所述個體具有三種或多種所述風(fēng)險因子的歷史。在一些實施方案中，施用所述治療有效量的抗IL-I β結(jié)合抗體或其結(jié)合片段足以實現(xiàn)CRP水平的減少。本公開還提供了在心血管事件后，降低個體死亡率的方法，包括向所述個體施用治療有效量的抗IL-I β結(jié)合抗體或其結(jié)合片段。在一些實施方案中，所述心血管事件是心肌梗塞、中風(fēng)、充血性心力衰竭、急性冠脈綜合征、絞痛或血管再生術(shù)。在一些實施方案中，所述心血管事件是心肌梗塞或急性冠脈綜合征。在一些實施方案中，心肌梗塞是有ST升高的心肌梗塞(例如，ST段升高型心肌梗塞，STEMI)。在一些實施方案中，心肌梗塞是沒有ST升高的心肌梗塞(例如，無ST段升高型心肌梗塞，NSTEMI)。在一些實施方案中，通過心電圖(例如，ECG、EKG)確定ST升高的存在或缺失。在一些實施方案中，血管再生術(shù)是冠脈、頸動脈或外周動脈血管再生術(shù)。在一些實施方案中，所述冠脈、頸動脈或外周動脈血管再生術(shù)是經(jīng)皮冠狀動脈介入治療(PCI)、植入支架、冠狀動脈旁路移植血管(CABG)、頸動脈內(nèi)膜切除術(shù)、外周血管病旁路手術(shù)或外周血管成形術(shù)。在一些實施方案中，所述個體沒有2型糖尿病。在一些實施方案中，所述個體是經(jīng)在先的心肌梗塞或中風(fēng)的心血管事件后存活的。在一些實施方案中，所述心血管事件的發(fā)生是心肌梗塞或中風(fēng)的心血管事件的復(fù)發(fā)。在一些實施方案中，所述個體具有一種或多種的心血管疾病風(fēng)險因子的歷史。在一些實施方案中，所述風(fēng)險因子是明顯的冠心病、冠狀動脈病、血栓形成、短暫性缺血發(fā)作、 左心室肥大、動脈硬化、再狹窄、吸煙或外周血管病。在一些實施方案中，所述風(fēng)險因子是升高的甘油三酯、全身性炎癥、高血磷水平、高甲狀旁腺激素水平、微量蛋白尿或高同型半胱氨酸水平。在一些實施方案中，所述風(fēng)險因子是肥胖、高血糖、慢性腎衰竭、高血葡萄糖、慢性腎病或代謝綜合征。在一些實施方案中，所述風(fēng)險因子是末期腎病。在一些實施方案中， 所述風(fēng)險因子是高血壓、血脂異常、血脂過多、升高的總膽固醇、升高的LDL膽固醇或低HDL 膽固醇或動脈粥樣硬化。在一些實施方案中，高血壓表現(xiàn)為血壓大于或等于180/110mmHg。 在一些其它實施方案中，高血壓是溫和至中度的，伴隨收縮壓(SBP)為140至180mm Hg，和 /或舒張壓(DBP)為90至IlOmm Hg。在--些實施方案中，所述個體是非高血壓的。
在--些實施方案中，所述個體患難以控制的高血壓。
在--些實施方案中，所述個體有心律不齊。
在--些實施方案中，所述個體有“A型”人格。
在--些實施方案中，所述個體有久坐的生活方式。
在--些實施方案中，所述個體具有兩種或多種所述風(fēng)險因子的歷史。
在--些實施方案中，所述個體具有三種或多種所述風(fēng)險因子的歷史。
在一些實施方案中，所述個體是有心血管疾病的患者，包括急性心血管疾病(例如，與充血性心力衰竭不相關(guān)的)或慢性心血管疾病(例如，與多種動脈粥樣硬化型心血管疾病的風(fēng)險因子相關(guān)的)。在一些實施方案中，施用所述治療有效量的抗IL-I β結(jié)合抗體或其結(jié)合片段足以實現(xiàn)CRP水平的減少。本公開還提供了在有至少一種心血管疾病風(fēng)險因子歷史的個體中降低心血管事件的方法，包括向所述個體施用治療有效量的抗IL-Ιβ結(jié)合抗體或其結(jié)合片段，且其中所述風(fēng)險因子不是2型糖尿病、肥胖、高血糖、血脂異常、血脂過多、慢性腎衰竭、高血葡萄糖、 慢性腎病、高血壓、動脈粥樣硬化或代謝綜合征。在一些實施方案中，所述心血管事件是心肌梗塞、中風(fēng)、心臟停搏、充血性心力衰竭、心血管死亡、急性冠脈綜合征(例如，經(jīng)診斷的)、絞痛或血管再生術(shù)。在一些實施方案中，所述血管再生術(shù)是冠脈、頸動脈或外周動脈血管再生術(shù)。在一些實施方案中，所述冠脈、 頸動脈或外周動脈血管再生術(shù)是經(jīng)皮冠狀動脈介入治療(PCI)、植入支架、冠狀動脈旁路移植血管(CABG)、頸動脈內(nèi)膜切除術(shù)、外周血管病旁路手術(shù)或外周血管成形術(shù)。在一些實施方案中，所述風(fēng)險因子是明顯的冠心病、冠狀動脈病、血栓形成、短暫性缺血發(fā)作、左心室肥大、動脈硬化、再狹窄、吸煙或外周血管病。在一些實施方案中，所述風(fēng)險因子是升高的甘油三酯、全身性炎癥、高血磷水平、高甲狀旁腺激素水平、微量蛋白尿或高同型半胱氨酸水平。在--些實施方案中，所述個體具有升高的C-反應(yīng)蛋白(CRP)水平。
在--些實施方案中，所述個體大于55歲。
在--些實施方案中，所述個體大于65歲。
在--些實施方案中，所述個體具有兩種或多種所述風(fēng)險因子的歷史。
在--些實施方案中，所述個體具有三種或多種所述風(fēng)險因子的歷史。
在--些實施方案中，所述個體是患心血管疾病的患者，包括急性心血管疾病(例
如，與充血性心力衰竭不相關(guān)的)或慢性心血管疾病(例如，與多種動脈粥樣硬化型心血管疾病的風(fēng)險因子相關(guān)的)。在一些實施方案中，施用所述治療有效量的抗IL-I β結(jié)合抗體或其結(jié)合片段足以實現(xiàn)CRP水平的減少。本公開還提供了治療個體中的心血管事件的方法，其中所述心血管事件是心肌梗塞、中風(fēng)、充血性心力衰竭、急性冠脈綜合征或絞痛，包括向所述個體施用治療有效量的抗 IL-I β結(jié)合抗體或其結(jié)合片段和至少一種包括IL-I β抗體或片段以外的活性劑的其他藥物組合物。在一些實施方案中，所述心血管事件是心肌梗塞或急性冠脈綜合征。在一些實施方案中，心肌梗塞是有ST升高的心肌梗塞(例如，ST段升高型心肌梗塞，STEMI)。在一些實施方案中，心肌梗塞是沒有ST升高的心肌梗塞(例如，無ST段升高型心肌梗塞，NSTEMI)。 在一些實施方案中，通過心電圖(例如，ECG、EKG)確定ST升高的存在或缺失。在一些實施方案中，所述至少一種其他藥物組合物的活性劑是膽固醇降低劑、抑制素、HMG-CoA還原酶抑制劑、鈣通道阻斷劑、β阻斷劑、抗高血壓劑、利尿劑、阿司匹林、煙酸、血管緊張肽轉(zhuǎn)變酶(ACE)抑制劑、血管緊張素II受體阻斷劑、血管舒張劑、抗凝劑、血小板聚集的抑制劑、溶栓劑或毛地黃。本公開還提供了治療個體中的心血管事件的方法，其中所述心血管事件是心肌梗塞、中風(fēng)、充血性心力衰竭、急性冠脈綜合征或絞痛，包括向所述個體施用治療有效量的抗 IL-I β結(jié)合抗體或其結(jié)合片段和(例如，聯(lián)合)血管再生術(shù)。在一些實施方案中，所述心血管事件是心肌梗塞或急性冠脈綜合征。在一些實施方案中，心肌梗塞是有ST升高的心肌梗塞(例如，ST段升高型心肌梗塞，STEMI)。在一些實施方案中，心肌梗塞是沒有ST升高的心肌梗塞(例如，無ST段升高型心肌梗塞，NSTEMI)。 在一些實施方案中，通過心電圖(例如，ECG、EKG)確定ST升高的存在或缺失。在一些實施方案中，所述血管再生術(shù)是冠脈、頸動脈或外周動脈血管再生術(shù)。本公開還提供了治療個體的心血管疾病的方法，包括例如急性心血管疾病或慢性心血管疾病，包括向所述個體施用治療有效量的抗IL-I β結(jié)合抗體或其結(jié)合片段和(例如，聯(lián)合)血管再生術(shù)。在一些實施方案中，施用所述治療有效量的抗IL-I β結(jié)合抗體或其結(jié)合片段足以實現(xiàn)降低MACE (主要的消極心臟事件，例如心肌梗塞、中風(fēng)、死亡，如CV死亡，和/或其混合)的相關(guān)風(fēng)險(例如，更低的風(fēng)險、頻率、發(fā)生、嚴(yán)重程度)，包括例如在患心血管疾病例如急性心血管疾病或慢性心血管疾病的患者中，或者在有動脈粥樣硬化型心血管疾病的多種風(fēng)險因子(例如，年齡55、年齡65，加一種或多種的CABG、NSTEMI、高血壓、升高的膽固醇或抑制素、升高的CRP、不超過6個月的在先心肌梗塞/中風(fēng)史、在先的ACS或TIA史、吸煙、PCI史、2型糖尿病)的患者中。在一些實施方案中，施用所述治療有效量的抗IL-Ιβ結(jié)合抗體或其結(jié)合片段足以及時對第一次MACE事件、血管再生術(shù)(例如，CABG)，總括性死亡率(all cause mortality)、外周血管病、首次記錄的絞痛終點、充血性心力衰竭(CHF)入院，實現(xiàn)減少的入院次數(shù)、住院持續(xù)時間、因缺血事件(例如，絞痛和/或CHF)而再入院、梗塞面積、舒張期容積、射血分?jǐn)?shù)或利尿劑的使用。在一些實施方案中，施用所述治療有效量的抗IL-I β結(jié)合抗體或其結(jié)合片段足以實現(xiàn)斑塊消退、斑塊穩(wěn)定和/或抑制斑塊破裂。在一些實施方案中，施用所述治療有效量的抗IL-I β結(jié)合抗體或其結(jié)合片段足以實現(xiàn)CRP水平、BNP水平、肌鈣蛋白水平、C-肽水平、LDL水平、血壓或血糖(HbAlC)的減少。在一些實施方案中，施用所述治療有效量的抗IL-I β結(jié)合抗體或其結(jié)合片段足以實現(xiàn)SAE、惡化、低血糖、嚴(yán)重感染率、感染率、免疫原性或心力衰竭的減少或不再增加。本公開還提供了降低個體在血管再生術(shù)后再狹窄的方法，包括向所述個體施用治療有效量的抗IL-I β結(jié)合抗體或其結(jié)合片段。在一些實施方案中，所述血管再生術(shù)是冠脈、頸動脈或外周動脈血管再生術(shù)。在一些實施方案中，施用所述治療有效量的抗IL-I β結(jié)合抗體或其結(jié)合片段足以實現(xiàn)CRP水平的減少。本公開還提供了治療個體急性高血壓的方法，包括向所述個體施用治療有效量的抗IL-Ιβ結(jié)合抗體或其結(jié)合片段和一種或多種抗高血壓劑。在一些實施方案中，所述個體具有高于或等于180/110mm Hg的血壓。在一些其它實施方案中，個體具有溫和至中度的高血壓，伴隨收縮壓(SBP)為140至180mm Hg，和/或舒張壓(DBP)為90至IlOmm Hg。 在一些實施方案中，所述抗高血壓劑是靜脈內(nèi)施用的。在一些實施方案中，所述抗高血壓劑選自α/β腎上腺素能阻斷劑、血管緊張肽轉(zhuǎn)變酶抑制劑、血管緊張素II受體拮抗劑、 抗腎上腺素能劑、β腎上腺素能阻斷劑、鈣通道阻斷劑、利尿劑和血管舒張劑。在一些實施方案中，所述抗高血壓劑是卡維地洛(carvedilol)、拉貝洛爾(labetalol，)、貝那普利 (benazepril)、卡托普利(captopril)、依那普利(enalapril)、福辛普利(fosinopril)、 賴諾普利(Iisinopril)、莫昔普利(moexipril)、培哚普利(perindopril)、喹那普利 (quinapril)、雷米普利(ramipril)、群多普利(trandolapril)、坎地沙坦(candesartan)、 依普羅沙坦(eprosartan)、厄貝沙坦(irbesartan)、氯沙坦(Iosartan)、替米沙坦 (telmisartan)、纈沙坦(valsartan)、可樂定(clonidine)、多沙唑嗪(doxazosin)、胍那 zW (guanabenz) >(guanadrel) > @ji Zi 1 (guanethidine)(guanfacine) >
美卡拉明(mecamylamine)、甲基多巴(methyldopa)、呱唑嗪(prazosin)、利血平 (reserpine)、特拉唑嗪(terazosin)、醋丁洛爾(acebutolol)、阿替洛爾(atenolol)、 倍他洛爾(betaxolol)、比索洛爾(bisoprolol)、卡替洛爾(carteolol)、美托洛爾 (metoprolol)、那多洛爾(nadolol)、噴布洛爾(penbutolol)、吲哚洛爾(pindolo)、普萘洛爾(propranolol)、噻嗎洛爾(timolol)、氨氯地平(amlodipine)、地爾硫卓(diltiazem)、 非洛地平(felodipine)、伊拉地平(isradipine)、尼卡地平(nicardipine)、硝苯地平 (nifedipine)、尼索地平(nisoldipine)、維拉帕米(verapamil)、阿米洛利(amiloride)、 芐噻嗪(benzthiazide)、氯噻嗪(chlorothiazide)、氯噻酮(chlorthalidone)、呋塞米(furosemide)、氧氯噻嗪(hydrochlorothiazide)、Π引達(dá)中白胺(indapamide)、美托拉宗(metolazone)、泊利噻嗪(polythiazide)、螺內(nèi)酯(spironolactone)、托拉塞米 (torsemide)、三氯噻嗪(trichlormethiazide)、胼苯噠嗪(hydralazine)、硝酸甘油 (nitroglycerin)、硝普鈉(sodium nitroprusside)、氯維地平(clevidipine)或米諾地爾(minoxidil)。在一些實施方案中，所述抗高血壓劑是拉貝洛爾(labetalol)、美托洛爾(metoprolol)、胼苯噠嗪(hydralazine)、硝酸甘油(nitroglycerin)、尼卡地平 (nicardipine)、硝普鈉(sodiumnitroprusside)或氯維地平(clevidipine)。本公開還提供了降低、預(yù)防或治療個體中的心血管事件或疾病(例如，急性心血管疾病或慢性心血管疾病)的方法，包括向所述個體施用抗IL-I β結(jié)合抗體或其結(jié)合片段與醫(yī)學(xué)或手術(shù)干預(yù)的(例如，在之前、過程中或之后的)組合(例如，聯(lián)合)。此類抗體可以治療有效量施用。此類干預(yù)可以是治療有效的。在一些實施方案中，醫(yī)學(xué)干預(yù)是活性劑，例如藥物或生物活性劑，包括例如任何一種或多種本文所述的活性劑。在一些實施方案中，醫(yī)學(xué)干預(yù)是門診病人醫(yī)學(xué)處理或方法。在一些實施方案中，醫(yī)學(xué)干預(yù)是住院病人住院。在一些實施方案中，手術(shù)干預(yù)是血管再生術(shù)，包括例如任何一種或多種本文所述的血管再生術(shù)。 在一些實施方案中，手術(shù)干預(yù)涉及心臟瓣膜修復(fù)或替換、冠狀動脈搭橋手術(shù)、心臟移植或心臟泵。在一些實施方案中，手術(shù)干預(yù)涉及雙心室心臟起搏器、心內(nèi)除顫器(internalcardiac defibrillator，I⑶)或肌切除術(shù)。在一些實施方案中，醫(yī)學(xué)干預(yù)是戒煙藥療或戒煙咨詢服務(wù)。本公開還提供了在有至少一種心血管疾病風(fēng)險因子歷史的個體中降低心血管事件的方法，包括(a)鑒別、診斷或選擇有至少一種心血管疾病風(fēng)險因子歷史的個體，和(b)向所述個體施用治療有效量的抗IL-I β結(jié)合抗體或其結(jié)合片段，且其中所述心血管事件是心肌梗塞、中風(fēng)、心血管死亡、充血性心力衰竭、心臟停搏、急性冠脈綜合征、絞痛或血管再生術(shù)。本公開還提供了在有在先心血管事件歷史的個體中降低心血管事件的方法，包括
(a)鑒別、診斷或選擇有在先心血管事件歷史的個體，和(b)向所述個體施用治療有效量的抗IL-Ιβ結(jié)合抗體或其結(jié)合片段，且其中所述心血管事件是心肌梗塞、中風(fēng)、急性冠脈綜合征、絞痛或血管再生術(shù)。在一些實施方案中，在先的心血管事件是第一次心血管事件。在一些實施方案中，在先的或第一次心血管事件選自心肌梗塞、中風(fēng)、充血性心力衰竭、急性冠脈綜合征、絞痛和血管再生術(shù)。在一些實施方案中，在先的或第一次心血管事件是心肌梗塞或急性冠脈綜合征。在一些實施方案中，心肌梗塞是有ST升高的心肌梗塞(例如，ST段升高型心肌梗塞，STEMI)。在一些實施方案中，心肌梗塞是沒有ST升高的心肌梗塞(例如， 無ST段升高型心肌梗塞，NSTEMI)。在一些實施方案中，通過心電圖(例如，ECG、EKG)確定 ST升高的存在或缺失。在一些實施方案中，降低心血管事件的方法是降低第二次或繼發(fā)性心血管事件的方法。在一些實施方案中，所述心血管事件(例如，第二次或繼發(fā)性心血管事件)選自心肌梗塞、中風(fēng)、心血管死亡、充血性心力衰竭、心臟停搏、急性冠脈綜合征、絞痛或血管再生術(shù)。在一些實施方案中，第一次心血管事件和第二次心血管事件是相同類型的心血管事件。在一些實施方案中，第一次心血管事件和第二次心血管事件是不同類型的心血管事件。本公開還提供了在心血管事件后，降低個體死亡率的方法，包括(a)鑒別、診斷或選擇有心血管事件的個體，和(b)向所述個體施用治療有效量的抗IL-I β結(jié)合抗體或其結(jié)合片段。在一些實施方案中，所述心血管事件選自心肌梗塞、中風(fēng)、充血性心力衰竭、急性冠脈綜合征、絞痛和血管再生術(shù)。在一些實施方案中，所述心血管事件是心肌梗塞或急性冠脈綜合征。在一些實施方案中，心肌梗塞是有ST升高的心肌梗塞(例如，ST段升高型心肌梗塞，STEMI)。在一些實施方案中，心肌梗塞是沒有ST升高的心肌梗塞(例如，無ST段升高型心肌梗塞，NSTEMI)。在一些實施方案中，通過心電圖(例如，ECG、EKG)確定ST升高的存在或缺失。本公開還提供了在有至少一種心血管疾病的風(fēng)險因子歷史的個體中降低心血管事件的方法，包括(a)鑒別、診斷或選擇有至少一種心血管疾病的風(fēng)險因子歷史的個體，和
(b)向所述個體施用治療有效量的抗IL-Iβ結(jié)合抗體或其結(jié)合片段，且其中所述風(fēng)險因子不是2型糖尿病、肥胖、高血糖、血脂異常、血脂過多、慢性腎衰竭、高血葡萄糖、慢性腎病、 高血壓、動脈粥樣硬化、或代謝綜合征。在一些實施方案中，所述心血管事件選自心肌梗塞、 中風(fēng)、心血管死亡、充血性心力衰竭、心臟停搏、急性冠脈綜合征、絞痛和血管再生術(shù)。本公開還提供了治療個體中的心血管事件的方法，其中所述心血管事件是心肌梗塞、中風(fēng)、充血性心力衰竭、急性冠脈綜合征或絞痛，包括(a)鑒別、診斷或選擇有心血管事件的個體，和(b)向所述個體施用治療有效量的抗IL-I β結(jié)合抗體或其結(jié)合片段和至少一種包含IL-I β抗體或片段以外的活性劑的其他藥物組合物。在一些實施方案中，在先的或第一次心血管事件是心肌梗塞或急性冠脈綜合征。在一些實施方案中，心肌梗塞是有ST升高的心肌梗塞(例如，ST段升高型心肌梗塞，STEMI)。在一些實施方案中，心肌梗塞是沒有 ST升高的心肌梗塞(例如，無ST段升高型心肌梗塞，NSTEMI)。在一些實施方案中，通過心電圖(例如，ECG、EKG)確定ST升高的存在或缺失。本公開還提供了治療個體中的心血管事件的方法，其中所述心血管事件是心肌梗塞、中風(fēng)、充血性心力衰竭、急性冠脈綜合征或絞痛，包括(a)鑒別、診斷或選擇有心血管事件的個體，和(b)向所述個體施用治療有效量的抗IL-I β結(jié)合抗體或其結(jié)合片段和(例如聯(lián)合)血管再生術(shù)。在一些實施方案中，在先的或第一次心血管事件是心肌梗塞或急性冠脈綜合征。在一些實施方案中，心肌梗塞是有ST升高的心肌梗塞(例如，ST段升高型心肌梗塞，STEMI)。在一些實施方案中，心肌梗塞是沒有ST升高的心肌梗塞(例如，無ST段升高型心肌梗塞，NSTEMI)。在一些實施方案中，通過心電圖(例如，ECG、EKG)確定ST升高的存在或缺失。本公開還提供了降低個體在血管再生術(shù)后再狹窄的方法，包括(a)鑒別、診斷或選擇有血管再生術(shù)的個體，和(b)向所述個體施用治療有效量的抗IL-I β結(jié)合抗體或其結(jié)合片段。本公開還提供了治療個體的急性高血壓的方法，包括(a)鑒別、診斷或選擇有急性高血壓的個體，和(b)向所述個體施用治療有效量的抗IL-I β結(jié)合抗體或其結(jié)合片段和一種或多種抗高血壓劑。在一些實施方案中，高血壓表現(xiàn)為血壓大于或等于180/110mm Hg。 在一些其它實施方案中，高血壓是溫和至中度的，伴隨收縮壓(SBP)為140至180mm Hg，和 /或舒張壓(DBP)為90至IlOmm Hg。在任意的和/或所有的上述實施方案中，施用所述治療有效量的抗IL-I β結(jié)合抗體或其結(jié)合片段足以實現(xiàn)CRP水平的減少。本公開還提供了用于任意的和/或所有的上述方法中的藥物組合物，包括例如用于降低、預(yù)防或治療心血管事件和/或心血管疾病，包括急性心血管疾病或慢性心血管疾病，這是通過施用治療有效量的抗IL-I β結(jié)合抗體或其結(jié)合片段。本文提供了各種方法和藥物組合物，包括例如如上所述的那些。本公開進(jìn)一步提供了 IL-I β結(jié)合抗體及其結(jié)合片段，以及可用于任意的和/或所有的上述方法和藥物組合物中的合適劑量和給藥方案，或可與任意的和/或所有的上述方法和藥物組合物一起使用的合適劑量和給藥方案。在任意的和/或所有的上述方法和藥物組合物的一些實施方案中，與人IL-I β結(jié)合的抗體或片段具有約InM或更低的解離常數(shù)。在一些實施方案中，與人IL-I β結(jié)合的抗體或片段具有約500ρΜ或更低的解離常數(shù)。在一些實施方案中，與人IL-I β結(jié)合的抗 IL-I β結(jié)合抗體或其結(jié)合片段具有約250ρΜ或更低的解離常數(shù)。在一些實施方案中，與人 IL-I β結(jié)合的抗IL-I β結(jié)合抗體或其結(jié)合片段具有約IOOpM或更低的解離常數(shù)。在任何上述方法的一些實施方案中，與人IL-I β結(jié)合的抗IL-I β結(jié)合抗體或其結(jié)合片段具有約 50ρΜ或更低的解離常數(shù)。在任何上述方法的一些實施方案中，與人IL-I β結(jié)合的抗IL-I β 結(jié)合抗體或其結(jié)合片段具有約5ρΜ或更低的解離常數(shù)。在一些實施方案中，與人IL-I β結(jié)合的抗IL-I β結(jié)合抗體或其結(jié)合片段具有約IpM或更低的解離常數(shù)。在一些實施方案中， 與人IL-I β結(jié)合的抗IL-I β結(jié)合抗體或其結(jié)合片段具有約0.3ρΜ或更低的解離常數(shù)。在任意的和/或所有的上述方法的一些實施方案中，抗IL-I β結(jié)合抗體或其結(jié)合片段是中和抗體。在任意的和/或所有的上述方法的一些實施方案中，抗IL-I β結(jié)合抗體或其結(jié)合片段結(jié)合IL-I β表位，使得所述結(jié)合抗體或片段基本允許IL-I β與IL-I受體I (IL-IRI) 的結(jié)合。在任意的和/或所有的上述方法的一些實施方案中，抗IL-I β結(jié)合抗體或其結(jié)合片段不與IL-I α、IL-IR或IL-IRa可檢測的結(jié)合。在任意的和/或所有的上述方法的一些實施方案中，抗IL-I β結(jié)合抗體或其結(jié)合片段與具有SEQ ID NO :1的輕鏈可變區(qū)和SEQ ID NO :2的重鏈可變區(qū)的抗體競爭結(jié)合。在任意的和/或所有的上述方法的一些實施方案中，抗IL-I β結(jié)合抗體或其結(jié)合片段結(jié)合的表位與具有SEQ ID NO :1的輕鏈可變區(qū)和SEQ ID NO :2的重鏈可變區(qū)的抗體所結(jié)合的表位相同或基本相同。在任意的和/或所有的上述方法的一些實施方案中，抗IL-I β結(jié)合抗體或其結(jié)合片段包含SEQ ID NO 1的輕鏈可變區(qū)和SEQ ID NO 2的重鏈可變區(qū)。在任意的和/或所有的上述方法的一些實施方案中，抗IL-I β結(jié)合抗體或其結(jié)合片段與IL-I β中包含Glu64的表位結(jié)合。在任意的和/或所有的上述方法的一些實施方案中，抗IL-I β結(jié)合抗體或其結(jié)合片段與IL-I β的N末端的氨基酸1-34結(jié)合。在任意的和/或所有的上述方法和藥物組合物的一些實施方案中，抗IL-I β結(jié)合抗體或其結(jié)合片段是人源化的或人的。在任意的和/或所有的上述方法的一些實施方案中，抗IL-I β結(jié)合抗體或其結(jié)合片段以一個或多個劑量的^rig/kg的抗體或片段進(jìn)行施用。在一些實施方案中，抗IL-I β 結(jié)合抗體或其結(jié)合片段以一個或多個劑量的lmg/kg或更少的抗體或片段進(jìn)行施用。在一些實施方案中，抗IL-I β結(jié)合抗體或其結(jié)合片段以一個或多個劑量的0. 3mg/kg或更少的抗體或片段進(jìn)行施用。在一些實施方案中，抗IL-I β結(jié)合抗體或其結(jié)合片段以一個或多個的0. lmg/kg或更少的抗體或片段進(jìn)行施用。在一些實施方案中，抗IL-I β結(jié)合抗體或其結(jié)合片段以一個或多個劑量的0. 03mg/kg或更少的抗體或片段進(jìn)行施用。在一些實施方案中，一個或多個劑量至少為0. 0lmg/kg的抗體或片段。在任意上述方法的一些實施方案中， 抗IL-I β結(jié)合抗體或其結(jié)合片段以一個或多個劑量的0.03mg/kg至lmg/kg進(jìn)行施用。在任意的和/或所有的上述方法的一些實施方案中，抗IL-I β結(jié)合抗體或其結(jié)合片段以固定劑量施用，不依賴于劑量與個體體重的比例。在一些實施方案中，抗IL-I β結(jié)合抗體或其結(jié)合片段以一個或多個的IOOmg或更少的抗體或片段劑量進(jìn)行施用。在一些實施方案中，抗IL-I β結(jié)合抗體或其結(jié)合片段以一個或多個的25mg或更少的抗體或片段劑量進(jìn)行施用。在一些實施方案中，抗IL-I β結(jié)合抗體或其結(jié)合片段以一個或多個的IOmg 或更少的抗體或片段劑量進(jìn)行施用。在一些實施方案中，抗IL-I β結(jié)合抗體或其結(jié)合片段以一個或多個的至少0.5mg的抗體或片段劑量進(jìn)行施用。在一些實施方案中，抗IL-I β結(jié)合抗體或其結(jié)合片段以一個或多個的Img至IOOmg的抗體或片段劑量進(jìn)行施用。在一些實施方案中，抗IL-I β結(jié)合抗體或其結(jié)合片段的所述固定劑量是使用預(yù)裝填的注射器或遞送裝置施用的。在任意的和/或所有的上述方法的一些實施方案中，抗IL-I β結(jié)合抗體或其結(jié)合片段是通過皮下、靜脈內(nèi)或肌肉內(nèi)注射施用的。在任意的和/或所有的上述方法的一些實施方案中，在施用初始劑量的抗IL-I β 結(jié)合抗體或其結(jié)合片段后，再施用一次或多次后續(xù)劑量。在一些實施方案中，所述初始劑量和一次或多次后續(xù)劑量是以約每周1次至約每12個月1次的間隔施用的。在一些實施方案中，所述初始劑量和一次或多次后續(xù)劑量是以約每兩周1次至約每6個月1次的間隔施用的。在一些實施方案中，所述初始劑量和一次或多次后續(xù)劑量是以約每月1次至約每6 個月1次的間隔施用的。在一些實施方案中，所述初始劑量和一次或多次后續(xù)劑量是以約每月1次至約每3個月1次的間隔施用的。在一些實施方案中，所述初始劑量和一次或多次后續(xù)劑量是以約每3個月1次至約每6個月1次的間隔施用的。在任意的和/或所有的上述方法的一些實施方案中提供了給藥方案，其中所述給藥方案包括以一次以上的給藥間隔施用IL-I β結(jié)合抗體或其結(jié)合片段。在一些實施方案中，給藥方案包括以至少兩個(例如，2、3、4、5、6)不同的給藥間隔施用IL-I β抗體或其片段。在一些實施方案中，給藥方案包括以兩個不同的給藥間隔施用IL-Ιβ抗體或其片段。 在一些實施方案中，給藥方案包括以兩個不同的給藥間隔施用IL-I β結(jié)合抗體或其結(jié)合片段，其中所述第一個給藥間隔包括施用一次或多次IL-I β抗體或其片段劑量，而第二個給藥間隔包括施用一次或多次IL-I β抗體或其片段劑量，并且其中第一個給藥間隔時間上短于第二個給藥間隔。例如，第一個給藥間隔可以是天或周，而第二個給藥間隔可以是月。在一些實施方案中，第一個給藥間隔是約5天至約觀天，約7天至約21天，約12天至約16天，或約14天。在一些實施方案中，第二個給藥間隔是約1個月至約3個月，約1個月至約2個月，或約1個月。在一些實施方案中，第一個給藥間隔是約7天，第二個給藥間隔是約1個月。在一些實施方案中，在施用初始劑量的抗IL-I β結(jié)合抗體或其結(jié)合片段后，再施用一次或多次后續(xù)劑量，并且其中在施用初始劑量和第二次劑量之間的給藥間隔，和在第二次和第三次劑量之間的給藥間隔是約7天至約21天，并且其中在施用后續(xù)劑量之間的給藥間隔是約1個月至約3個月。在一些實施方案中，在施用初始劑量和第二次劑量之間的給藥間隔，和在第二次和第三次劑量之間的給藥間隔是約12天至約16天，而在施用后續(xù)劑量之間的給藥間隔是約1個月至約2個月。在一些實施方案中，在施用初始劑量和第二次劑量之間的給藥間隔，和在第二次和第三次劑量之間的給藥間隔是約14天，而在施用后續(xù)劑量之間的給藥間隔是約1個月。在任意的和/或所有的上述方法、劑量和/或給藥方案的優(yōu)選的實施方案中， IL-I β結(jié)合抗體或其結(jié)合片段(例如，治療有效量的抗IL-I β結(jié)合抗體或其結(jié)合片段)是在心血管事件的1周內(nèi)、在心血管事件的96小時內(nèi)、在心血管事件的72小時內(nèi)、在心血管事件的48小時內(nèi)、在心血管事件的M小時內(nèi)，或在心血管事件的12小時內(nèi)第一次施用。在任意的和/或所有的上述方法的一些實施方案中，施用初始劑量的抗IL-I β結(jié)合抗體或其結(jié)合片段后，再施用一次或多次后續(xù)劑量，并且其中所述一次或多次后續(xù)劑量的量與初始劑量幾乎相同或較少。在任意的和/或所有的上述方法的一些實施方案中，施用初始劑量的抗IL-I β結(jié)合抗體或其結(jié)合片段后，再施用一次或多次后續(xù)劑量，并且其中至少一次后續(xù)劑量的量比初始劑量多。在任意的和/或所有的上述方法的一些實施方案中，抗IL-I β結(jié)合抗體或其結(jié)合片段在測量IL-Ιβ誘導(dǎo)的IL-8生產(chǎn)的人全血IL-I β抑制測定中，具有比IL-Ιβ受體拮抗劑更低的IC5(I。在一些實施方案中，所述IL-I β受體拮抗劑是阿那白滯素(anakinra)。
在一些實施方案中，任意的和/或所有的上述方法可進(jìn)一步包括施用至少一種包括抗IL-I β結(jié)合抗體或其結(jié)合片段以外的活性劑的其他藥物組合物。在一些實施方案中，所述至少一種其他藥物組合物的活性劑是膽固醇降低劑。在一些實施方案中，所述至少一種其他藥物組合物的活性劑是抑制素或HMG-CoA還原酶抑制劑(例如，
^ ilk tT (lovastatin) > ^^ftlltT (pravastatin) > Φ ftk tT (simvastatin) > M^ftk tT (fluvastatin) > Hft^ftlltT (atorvastatin) > H5ftktT (cerivastatin) > ^^ftk 汀(mevastatin)、匹伐他汀(pitavastatin)、羅蘇伐他汀(rosuvastatin)或其混合物， 或其與依澤替米貝(Ezetimibe)、煙酸、苯磺酸氨氯地平(Amlodipine Besylate)的混合物)。在一些實施方案中，所述至少一種其他藥物組合物的活性劑是鈣通道阻斷劑(例如，氨氯地平、地爾硫卓、硝苯地平、尼卡地平、維拉帕米)或β阻斷劑(例如，艾司洛爾 (esmolol)、美托洛爾(metoprolol)、納多洛爾(nadolol)、噴布洛爾(penbutolol))。在一些實施方案中，所述至少一種其他藥物組合物的活性劑是抗高血壓劑(例如，拉貝洛爾、美托洛爾、胼苯噠嗪、硝酸甘油、尼卡地平、硝普鈉、氯維地平)、利尿劑(例如，噻嗪類利尿劑、氯噻酮(chlorthalidone)、呋塞米、氫氯噻嗪、吲達(dá)帕胺、美托拉宗、鹽酸阿米洛利、螺內(nèi)酯(spironolactone)、氨苯蝶啶(triamterene))或阿司匹林。在一些實施方案中，所述至少一種其他藥物組合物的活性劑是血管緊張肽轉(zhuǎn)變酶(ACE)抑制劑(例如，雷米普利、雷米普利拉(ramiprilat)、卡托普利(captopril)、賴諾普利(Iisinopril))或血管緊張素II受體阻斷劑(例如，氯沙坦、奧美沙坦(olmesartan)、纈沙坦)。在一些實施方案中，所述至少一種其他藥物組合物的活性劑是血管舒張劑。在一些實施方案中， 所述至少一種其他藥物組合物的活性劑是抗凝劑(例如，醋硝香豆素(acenocoumarol)、 苯丙香豆素(phenprocoumon)、華法林(warfarin)、肝素(h印arin)、低分子量肝素(low molecular weight heparin))或血小板聚集的抑制劑(例如，氯吡格雷(clopidogrel)、 噻氯匹定(ticlopidine)、西洛他唑(cilostazol)、雙嘧達(dá)莫(dipyridamole)、依替巴肽 (印tifibatide)、阿司匹林(aspirin)、阿昔單抗(abciximab)、依替巴肽(印tifibatide)、 替羅非班(tirofiban))。在一些實施方案中，所述至少一種其他藥物組合物的活性劑是溶栓劑(例如，鏈激酶(str印tokinase)、尿激酶(urokinase)、阿替普酶(alt印Iase)、瑞替普酶(reteplase)、替奈普酶(tenect印lase))。在一些實施方案中，所述至少一種其他藥物組合物的活性劑是毛地黃。在一些實施方案中，所述至少一種其他藥物組合物的活性劑是地高辛(digoxin)或奈西立肽(nesiritide)。在一些實施方案中，所述至少一種其他藥物組合物的活性劑是氧。在一些實施方案中，所述至少一種其他藥物組合物的活性劑是凝血酶抑制劑(例如，水蛭素(hirudin)、比伐盧定(bivalirudin))。在一些實施方案中，所述至少一種其他藥物組合物的活性劑是硝酸鹽(例如，三硝酸甘油酯(GTN)/硝酸甘油、二硝酸異山梨酯(isosorbide dinitrate)、單硝酸異山梨酯(isosorbide mononitrate))。在一些實施方案中，所述至少一種其他藥物組合物的活性劑是止痛劑(例如，硫酸嗎啡(morphine sulfate)) 0在一些實施方案中，所述至少一種其他藥物組合物的活性劑是腎素抑制劑。在一些實施方案中，所述至少一種其他藥物組合物的活性劑是內(nèi)皮素A受體抑制劑。在一些實施方案中，所述至少一種其他藥物組合物的活性劑是醛固酮抑制劑。本公開還提供了這樣的抗IL-I β結(jié)合抗體或其結(jié)合片段用于生產(chǎn)組合物的用途，所述抗體或其結(jié)合片段在測量IL-I β誘導(dǎo)的IL-8生產(chǎn)的人全血IL-I β抑制測定中，具有比IL-I β受體拮抗劑更低的IC5tl，其中所述組合物用于降低、預(yù)防或治療心臟事件或
心血管疾病。本文提供的這些IL-I β結(jié)合抗體和其結(jié)合片段，以及合適的劑量和給藥方案和/ 或包括抗IL-I β抗體或其片段以外的活性劑的其他藥物組合物，可用于上述方法和/或藥物組合物中，或與上述方法和/或藥物組合物一起使用，包括例如用于降低有至少一種心血管疾病的風(fēng)險因子歷史的個體中的心血管事件(例如， 延遲至事件的時間、降低事件的可能性或風(fēng)險、預(yù)防事件、降低事件的嚴(yán)重程度、降低恢復(fù)的時間)的方法和/或藥物組合物，包括向所述個體施用治療有效量的抗IL-I β結(jié)合抗體或其結(jié)合片段，且其中所述心血管事件是心肌梗塞、中風(fēng)、心血管死亡、充血性心力衰竭、心臟停搏、急性冠脈綜合征、絞痛或血管再生術(shù)；用于降低有在先的心血管事件歷史的個體中的心血管事件(例如，延遲至事件的時間、降低事件的可能性或風(fēng)險、預(yù)防事件、降低事件的嚴(yán)重程度、降低恢復(fù)的時間)的方法和/或藥物組合物，包括向所述個體施用治療有效量的抗IL-I β結(jié)合抗體或其結(jié)合片段，且其中所述心血管事件是心肌梗塞、中風(fēng)、心血管死亡、充血性心力衰竭、心臟停搏、急性冠脈綜合征、絞痛或血管再生術(shù)；用于降低個體在心血管事件后的死亡率的方法和/或藥物組合物，包括向所述個體施用治療有效量的抗IL-I β結(jié)合抗體或其結(jié)合片段；用于降低有至少一種心血管疾病的風(fēng)險因子歷史的個體中的心血管事件的方法和/或藥物組合物，包括向所述個體施用治療有效量的抗IL-I β結(jié)合抗體或其結(jié)合片段， 且其中所述風(fēng)險因子不是2型糖尿病、肥胖、高血糖、血脂異常、血脂過多、慢性腎衰竭、高血葡萄糖、慢性腎病、高血壓、動脈粥樣硬化或代謝綜合征；用于治療個體中的心血管事件的方法和/或藥物組合物，其中所述心血管事件是心肌梗塞、中風(fēng)、充血性心力衰竭、急性冠脈綜合征或絞痛，包括向所述個體施用治療有效量的抗IL-I β結(jié)合抗體或其結(jié)合片段和至少一種包括IL-I β抗體或片段以外的活性劑的其他藥物組合物；用于治療個體中的心血管事件的方法和/或藥物組合物，其中所述心血管事件是心肌梗塞、中風(fēng)、充血性心力衰竭、急性冠脈綜合征或絞痛，包括向所述個體施用治療有效量的抗IL-I β結(jié)合抗體或其結(jié)合片段和血管再生術(shù)；用于治療個體中的心血管疾病的方法和/或藥物組合物，包括例如急性心血管疾病或慢性心血管疾病，包括向所述個體施用治療有效量的抗IL-I β結(jié)合抗體或其結(jié)合片段和血管再生術(shù)；用于降低個體在血管再生術(shù)后再狹窄的方法和/或藥物組合物，包括向所述個體施用治療有效量的抗IL-I β結(jié)合抗體或其結(jié)合片段；用于治療個體的急性高血壓的方法和/或藥物組合物，包括向所述個體施用治療有效量的抗IL-I β結(jié)合抗體或其結(jié)合片段和一種或多種抗高血壓劑；用于降低、預(yù)防或治療個體中的心血管事件或疾病(例如急性心血管疾病或慢性心血管疾病)的方法和/或藥物組合物，包括向所述個體施用抗IL-I β結(jié)合抗體或其結(jié)合片段與醫(yī)學(xué)或手術(shù)干預(yù)的組合；用于抑制個體中的血小板活性的方法和/或藥物組合物，包括向所述個體施用治療有效量的抗IL-I β結(jié)合抗體或其結(jié)合片段；用于降低有至少一種心血管疾病的風(fēng)險因子歷史的個體中的心血管事件的方法和/或藥物組合物，包括(a)鑒別、診斷或選擇有至少一種心血管疾病風(fēng)險因子歷史的個體，和(b)向所述個體施用治療有效量的抗IL-I β結(jié)合抗體或其結(jié)合片段，且其中所述心血管事件是心肌梗塞、中風(fēng)、心血管死亡、充血性心力衰竭、心臟停搏、急性冠脈綜合征、絞痛或血管再生術(shù)；用于降低有在先心血管事件歷史的個體中的心血管事件的方法和/或藥物組合物，包括(a)鑒別、診斷或選擇有在先心血管事件歷史的個體，和(b)向所述個體施用治療有效量的抗IL-Ιβ結(jié)合抗體或其結(jié)合片段，且其中所述心血管事件是心肌梗塞、中風(fēng)、急性冠脈綜合征、絞痛或血管再生術(shù)；用于在心血管事件后，降低個體死亡率的方法和/或藥物組合物，包括(a)鑒另O、 診斷或選擇有心血管事件的個體，和(b)向所述個體施用治療有效量的抗IL-I β結(jié)合抗體或其結(jié)合片段；用于在有至少一種心血管疾病的風(fēng)險因子歷史的個體中降低心血管事件的方法和/或藥物組合物，包括(a)鑒別、診斷或選擇有至少一種心血管疾病的風(fēng)險因子歷史的個體，和(b)向所述個體施用治療有效量的抗IL-I β結(jié)合抗體或其結(jié)合片段，且其中所述風(fēng)險因子不是2型糖尿病、肥胖、高血糖、血脂異常、血脂過多、慢性腎衰竭、高血葡萄糖、慢性腎病、高血壓、動脈粥樣硬化、或代謝綜合征；用于治療個體中的心血管事件的方法和/或藥物組合物，其中所述心血管事件是心肌梗塞、中風(fēng)、充血性心力衰竭、急性冠脈綜合征或絞痛，包括(a)鑒別、診斷或選擇有心血管事件的個體，和(b)向所述個體施用治療有效量的抗IL-I β結(jié)合抗體或其結(jié)合片段和至少一種包含IL-I β抗體或片段以外的活性劑的其他藥物組合物；用于治療個體中的心血管事件的方法和/或藥物組合物，其中所述心血管事件是心肌梗塞、中風(fēng)、充血性心力衰竭、急性冠脈綜合征或絞痛，包括(a)鑒別、診斷或選擇有心血管事件的個體，和(b)向所述個體施用治療有效量的抗IL-I β結(jié)合抗體或其結(jié)合片段和 (例如聯(lián)合)血管再生術(shù)；用于降低個體在血管再生術(shù)后再狹窄的方法和/或藥物組合物，包括(a)鑒別、診斷或選擇有血管再生術(shù)的個體，和(b)向所述個體施用治療有效量的抗IL-I β結(jié)合抗體或其結(jié)合片段；用于治療個體的急性高血壓的方法和/或藥物組合物，包括(a)鑒別、診斷或選擇有急性高血壓的個體，和(b)向所述個體施用治療有效量的抗IL-I β結(jié)合抗體或其結(jié)合片段和一種或多種抗高血壓劑；應(yīng)該理解當(dāng)本說明書提供了使用具有某些性質(zhì)(例如Kd值或IC5tl值)的IL-Ιβ抗體或其結(jié)合片段的方法時，例如，用于降低、預(yù)防或治療心血管事件和/或心血管疾病，包括急性心血管疾病或慢性心血管疾病時，這也意味著涉及此種抗體或其片段在制備用于這些方法的藥物中的用途。此外，本公開還涵蓋具有這些性質(zhì)的IL-I β抗體或其結(jié)合片段， 以及包含這些抗體或其片段的藥物組合物，用于在本文提供的方法中，例如用于降低、預(yù)防或治療心血管事件和/或心血管疾病，包括急性心血管疾病或慢性心血管疾病。附圖簡述


圖1的圖顯示在人個體中IV施用0. 01,0. 03,0. 1,0. 3或1. Omg/kg抗IL-I β抗體后的血清濃度。圖2的圖顯示在人個體中SC施用0. 03,0. 1或0. ;3mg/kg抗IL-1 β抗體后的血清濃度。圖3的圖顯示在人個體中施用0. 01,0. 03,0. 1、0. 3或1. Omg/kg的抗IL-1 β抗體后，第觀天的CRP的中位百分?jǐn)?shù)改變。圖4的圖顯示在心肌梗塞動物模型中的超聲波心動描記值的改變。圖5的圖顯示在心肌梗塞動物模型中對無著絲粒區(qū)段(代表梗塞面積)、前壁(梗塞)厚度、MPI或Tei指數(shù)(聯(lián)合性收縮和舒張功能障礙的標(biāo)志物，和心力衰竭相關(guān)性死亡率的代表性標(biāo)志物)和TAPSE (右心室功能的標(biāo)志物和AMI相關(guān)性死亡率的代表性標(biāo)志物) 的測量。圖6的圖顯示對內(nèi)皮細(xì)胞釋放巨噬細(xì)胞誘導(dǎo)的促炎細(xì)胞因子的抑制。圖7的圖顯示對平滑肌細(xì)胞釋放巨噬細(xì)胞誘導(dǎo)的細(xì)胞因子和降解酶的抑制。圖8的圖顯示ApoE敲除小鼠的主動脈中的動脈粥樣硬化損傷形成的降低。圖9是en face分析的照片，顯示在ApoE敲除小鼠的主動脈中的動脈粥樣硬化損傷形成的降低。發(fā)明詳述本公開涉及用于治療和/或預(yù)防心血管疾病的方法和相關(guān)制備品(articles of manufacture)，包括例如急性心血管疾病或慢性心血管疾病。方法可用于降低、治療或預(yù)防個體的心血管事件，例如心肌梗塞、中風(fēng)、心血管死亡、充血性心力衰竭、心臟停搏、急性冠脈綜合征、絞痛或血管再生術(shù)，包括在有心血管疾病的風(fēng)險因子歷史的個體中。方法還可用于降低個體在心血管事件后的死亡率。本文公開的抗IL-I β抗體或結(jié)合片段的使用提供了相對于在先可獲得的選項的潛在優(yōu)勢，例如更大的安全性(例如，降低的副作用)、更大的療效、靶向疾病的炎性組分，和/或減低頻率的給藥。細(xì)胞因子的白介素-I(IL-I)家族已被提示牽涉幾種疾病狀態(tài)，例如類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎(RA)、骨關(guān)節(jié)炎、克羅恩氏病、潰瘍性結(jié)腸炎(UC)、膿毒性休克、慢性梗阻性肺部疾病 (COPD)、哮喘、移植物抗宿主病、動脈粥樣硬化、成人T細(xì)胞白血病、多發(fā)性骨髓瘤、多發(fā)性硬化癥、中風(fēng)和阿爾茨海默氏病。IL-I家族成員包括IL-I α、IL_1 β和IL_lRa。盡管由其與IL-I受體(IL-1R1和IL-1R2)結(jié)合的能力而相關(guān)聯(lián)，但這些細(xì)胞因子的每一種都是由不同基因表達(dá)且具有不同的一級氨基酸序列。此外，這些細(xì)胞因子的生理活性可以彼此區(qū)分。破壞IL-I受體信號傳導(dǎo)的化合物已作為治療IL-I介導(dǎo)的疾病例如某些上述疾病的治療劑進(jìn)行研究。這些化合物包括重組IL-IRa(Amgen Inc.，Thousand Oaks，CA)、IL-1受體“陷阱”肽(Regeneron Inc. , Tarry town, NY)、以及動物衍生的IL-1 β抗體和重組IL-1 β 抗體及其片段。直接靶向IL-I β配體的化合物被認(rèn)為提供了較好的策略，特別是當(dāng)施用具有高親和力的IL-I β抗體時。抗體、人源化抗體和人工程化抗體IL-1(例如，IL-Ιβ)結(jié)合抗體可以以下述形式提供多克隆抗體、單克隆抗體 (mAbs)、重組抗體、嵌合抗體、⑶R移植抗體、全人抗體、單鏈抗體和/或雙特異性抗體，以及通過已知技術(shù)提供的片段，包括其變體和衍生物，所述技術(shù)包括但不限于酶促切割、肽合成或重組技術(shù)。抗體一般包含2條重鏈多肽和2條輕鏈多肽，但也考慮具有1條重鏈和1條輕鏈的單結(jié)構(gòu)域抗體、和缺乏輕鏈的重鏈抗體?；谥劓満愣ńY(jié)構(gòu)域的氨基酸序列，存在5種類型的重鏈，稱為α、δ、ε、Y和μ。這些不同類型的重鏈分別產(chǎn)生5類抗體，IgA(包括IgA1 和 IgA2)、IgD、IgE、IgG 和 IgM，包括 4 個 IgG 亞類，即 IgG” IgG2、IgG3 和 IgG40 基于恒定結(jié)構(gòu)域的氨基酸序列，還存在2種類型的輕鏈，稱為kappa(K)或IambdaU )。全長抗體包括恒定結(jié)構(gòu)域和可變結(jié)構(gòu)域。恒定結(jié)構(gòu)域無需存在于抗體的抗原結(jié)合片段中。本文公開的抗體的抗原結(jié)合片段可以包括Fab、Fab'、F(ab'抗體片段。如下文更詳細(xì)地討論的，IL-I β結(jié)合片段包括可以結(jié)合IL-I β的抗體片段和抗原結(jié)合多肽。抗體的重鏈和輕鏈序列，或其抗原結(jié)合片段，均包括具有3個互補(bǔ)決定區(qū)(⑶Rs) 以及非CDR構(gòu)架區(qū)(FRs)的可變區(qū)。除非另有說明，如本文所使用的，術(shù)語“重鏈”和“輕鏈” 分別意指重鏈可變區(qū)和輕鏈可變區(qū)。重鏈⑶Rs在本文中稱為⑶R-H1、⑶R-H2和⑶R-H3。 輕鏈⑶Rs在本文中稱為⑶R-Ll、⑶R-L2和⑶R-L3?？贵w序列中的可變區(qū)和⑶Rs可以通過下述進(jìn)行鑒定(i)根據(jù)本領(lǐng)域中已開發(fā)的一般法則，或(ii)將序列相對已知可變區(qū)的數(shù)據(jù)庫進(jìn)行比對。用于鑒定這些區(qū)域的方法在Kontermarm和Dubel，編輯，Antibody Engineering, Springer, New York, NY, 2001,禾口 Dinarello 等人，Current Protocols in Immunology, John Wileyand Sons he.，Hoboken，NJ，2000 中得到描述?？贵w序列數(shù)據(jù)庫在下述中得到描述，并且可以通過下述獲得www. bioinf. org. uk/abs的〃 TheKabatman" 數(shù)據(jù)庫(由 A.C.Martin 在 the Department of Biochemistry Molecular Biology University College London, London, England 維護(hù))，禾口 www. vbase2. org 的 VBASE2, 如在 Retter 等人，Nucl. Acids Res. ，33(Database issue) :D671_D674 (2005)中描述的?！癒abatman"數(shù)據(jù)庫網(wǎng)站也包括用于鑒定⑶Rs的一般經(jīng)驗法則。除非另有說明，如本文所使用的，術(shù)語"CDR” 如 Kabat 等人，Sequences of Immunological hterest，第 5 版， U. S. Department of Health and Human Services, 1991 中進(jìn)行定義。多克隆抗體優(yōu)選通過相關(guān)抗原和佐劑的多次皮下(sc)或腹膜內(nèi)(ip)免疫注射而在動物中產(chǎn)生，使用本領(lǐng)域已知的標(biāo)準(zhǔn)技術(shù)。改善的抗體應(yīng)答可以通過使用雙官能劑或衍生劑使相關(guān)抗原與蛋白質(zhì)綴合來獲得，所述蛋白質(zhì)在待免疫的物種中是免疫原性的，例如鑰孔血藍(lán)蛋白、血清白蛋白、牛甲狀腺球蛋白、或大豆胰蛋白酶抑制劑，所述雙官能劑或衍生劑為例如馬來酰亞氨基苯甲?；腔牾啺孵?通過半胱氨酸殘基綴合)、N-羥基琥珀酰亞胺(通過賴氨酸殘基)、戊二醛、琥珀酸酐或本領(lǐng)域已知的其他物質(zhì)。單克隆抗體指得自基本上均質(zhì)的一群抗體的抗體。單克隆抗體一般是高度特異性的，并且可以針對單個抗原位點，與一般包括針對不同決定簇(表位)的不同抗體的常規(guī) (多克隆)抗體制品不同。除了其特異性外，單克隆抗體還是有利的，因為它們由均質(zhì)培養(yǎng)物合成，不被具有不同特異性和特征的其他免疫球蛋白污染。待依照本公開使用的單克隆抗體可以通過首先由Kohler等人，(Nature，256: 495-7,1975)描述的雜交瘤方法進(jìn)行制備，或可以通過重組DNA方法(參見例如，美國專利號4，816，567)進(jìn)行制備。單克隆抗體還可以使用例如Clackson等人，(Nature 352 624-628,1991)和 Marks 等人，(J. Mol Biol. 222 :581-597,1991)中描述的技術(shù)，從噬菌體抗體文庫中分離。
進(jìn)一步考慮本公開的抗體可以以本領(lǐng)域眾所周知和本文描述的抗體的較小抗原結(jié)合片段進(jìn)行使用。本公開涵蓋包括2條全長重鏈和2條全長輕鏈的IL-I (例如， IL-I β )結(jié)合抗體?？商娲兀琁L-β結(jié)合抗體可以是保留對于IL-I β的結(jié)合活性的構(gòu)建體，例如單鏈抗體或“微型”抗體。此種構(gòu)建體可以通過本領(lǐng)域已知的方法進(jìn)行制備，例如 PCR介導(dǎo)的單鏈抗體克隆和裝配用于在大腸桿菌中表達(dá)(如Antibody Engineering, The practicalapproach series, J. McCafferty, H. R. Hoogenboom, and D. J. Chiswell,編輯， Oxford University I^ress，1996中描述的)。在這個類型的構(gòu)建體中，抗體分子的重和輕鏈可變部分由cDNA進(jìn)行PCR擴(kuò)增。所得到的擴(kuò)增子隨后可以例如在第二個PCR步驟中通過接頭DNA進(jìn)行裝配，所述接頭DNA編碼由氨基酸Gly和Ser組成的柔性蛋白質(zhì)接頭。這個接頭允許可變重和輕鏈部分以這樣的方式折疊，該方式使得抗體結(jié)合袋重新產(chǎn)生，并且以通常與親本全長二聚免疫球蛋白分子相當(dāng)?shù)挠H和力結(jié)合抗原。IL-I (例如，IL-I β )結(jié)合抗體和片段包括本文公開的示例性抗體、片段和序列的變體。變體包括包含一個或多個氨基酸序列置換、缺失和/或添加的肽和多肽，其具有與本文公開的一種或多種示例性抗體、片段和序列相同或基本上相同的表位結(jié)合親和力和特異性。因此，變體包括包含對本文公開的示例性抗體、片段和序列的一個或多個氨基酸序列置換、缺失和/或添加的肽和多肽，其中此種置換、缺失和/或添加不引起表位結(jié)合的親和力和特異性的實質(zhì)改變。例如，抗體或片段的變體可由對于抗體或片段的一個或多個改變而引起，其中該改變的抗體或片段具有與起始序列相同或基本上相同的表位結(jié)合親和力和特異性。變體可以是天然存在的，例如等位基因變體或剪接變體，或可以是人工構(gòu)建的。變體可以由編碼所述變體的相應(yīng)核酸分子進(jìn)行制備。本發(fā)明抗體和IL-I β結(jié)合片段的變體可以在輕和/或重鏈氨基酸序列中具有變化，所述變化可以是天然發(fā)生的或可以通過使用重組DNA技術(shù)在體外改造天然序列而引入。天然存在的變體包括“體細(xì)胞”變體，其在抗外源抗原的抗體應(yīng)答的產(chǎn)生過程中在體內(nèi)在相應(yīng)胚系(germ line)核苷酸序列中產(chǎn)生。IL-1(例如，IL-Ιβ)結(jié)合抗體和結(jié)合片段的變體也可以通過誘變技術(shù)進(jìn)行制備。例如，氨基酸改變可以在整個抗體編碼區(qū)隨機(jī)地引入，并且所得到的變體可以就對于 IL-I β的結(jié)合親和力或其它性質(zhì)進(jìn)行篩選?？商娲兀被岣淖兛梢栽贗L-I β抗體的所選擇區(qū)域中引入，例如在輕和/或重鏈⑶Rs中，和/或在構(gòu)架區(qū)中引入，并且所得到的抗體可以就與IL-I β的結(jié)合或某些其他活性進(jìn)行篩選。氨基酸改變包括在CDR中的一個或多個氨基酸置換，從單氨基酸差異到在給定CDR例如CDR3內(nèi)引入多個氨基酸變更。在另一種方法中，⑶R內(nèi)的每個殘基對IL-I β結(jié)合的貢獻(xiàn)可以通過用丙氨酸置換在該⑶R內(nèi)的至少一個殘基進(jìn)行評估。Lewis等人(1995)，Mol. Immunol. 32 :1065_72。對于與IL-1 β的結(jié)合并非最佳的殘基隨后可以加以改變，以便確定更優(yōu)化的序列。本發(fā)明也涵蓋通過插入氨基酸以增加CDR例如CDR3的大小而產(chǎn)生的變體。例如，大多數(shù)輕鏈CDR3序列長9個氨基酸。 抗體中短于9個殘基的輕鏈序列可以通過插入合適的氨基酸以增加該CDR的長度，來優(yōu)化與IL-I β的結(jié)合。變體還可以通過輕或重鏈的“鏈改組”進(jìn)行制備。Marks等人(1992)， Biotechnology 10 779-830單條輕(或重)鏈可以與具有重(或輕)鏈庫(r印ertoire) 的文庫組合，并且所得到的群體就所需活性例如與IL-I β的結(jié)合進(jìn)行篩選。與使用既包含重鏈庫又包含輕鏈庫的文庫時的可能情況相比，這允許篩選與單條輕鏈(或重鏈)組合的更多不同重鏈(或輕鏈)樣本。本公開的IL-I (例如，IL-I β )結(jié)合抗體和片段涵蓋本文公開的示例性抗體、片段和序列的衍生物。衍生物包括已進(jìn)行化學(xué)修飾的多肽或肽、或其變體、片段或衍生物。例子包括一個或多個聚合物，例如水溶性聚合物、N聯(lián)或0聯(lián)碳水化合物、糖、磷酸和/或其他此種分子的共價附著。在附著的分子的類型或位置方面，衍生物以不同于天然存在的或起始的肽或多肽的方式被修飾。衍生物還包括天然存在于肽或多肽上的一個或多個化學(xué)基團(tuán)的缺失。IL-I β結(jié)合抗體和片段可以是雙特異性的。雙特異性抗體或片段可以具有幾種構(gòu)型。例如，雙特異性抗體可以類似單個抗體(或抗體片段)，但具有2個不同抗原結(jié)合位點 (可變區(qū))。雙特異性抗體可以通過化學(xué)技術(shù)(Kranz等人(1981)，Proc. Natl. Acad. Sci. USA, 78 5807)、通過“多瘤” (polydoma)技術(shù)(美國專利號4，474，893)或通過重組DNA技術(shù)來產(chǎn)生。本公開的雙特異性抗體可以具有對于至少2種不同表位的結(jié)合特異性，其中至少一種是IL-I β的表位。IL-I β結(jié)合抗體和片段也可以是雜抗體(heteroantibody)。雜抗體是連接在一起的2種或更多種抗體或抗體結(jié)合片段(Fab)，每種抗體或片段具有不同特異性。繞過單克隆抗體產(chǎn)生的、用于制備抗體分子的抗原結(jié)合區(qū)域的重組DNA形式的技術(shù)可以考慮用于本發(fā)明IL-I (例如，IL-I β)結(jié)合抗體和片段。將DNA克隆到細(xì)菌表達(dá)系統(tǒng)內(nèi)。適合于實踐本公開的此種技術(shù)的一個例子，使用具有前導(dǎo)序列的噬菌體λ載體系統(tǒng)， 所述前導(dǎo)序列引起表達(dá)的Fab蛋白質(zhì)移動到周質(zhì)間隙(在細(xì)菌細(xì)胞膜和細(xì)胞壁之間)或分泌?？梢钥焖佼a(chǎn)生大量功能性Fab片段，并就其與IL-I β的結(jié)合進(jìn)行篩選。此種IL-I β 結(jié)合劑(對于IL-I β多肽具有特異性的Fab片段)尤其包括在本公開的IL-I β結(jié)合抗體和片段內(nèi)。本發(fā)明IL-I (例如，IL-I β )結(jié)合抗體和片段可以是人源化或人工程化抗體。如本文所使用的，人源化抗體或其抗原結(jié)合片段是重組多肽，其包含來自非人抗體的抗原結(jié)合位點的部分和人抗體的構(gòu)架和/或恒定區(qū)的部分。人工程化抗體或抗體片段是已通過在特定位置處修改(例如，缺失、插入或置換)氨基酸而被改造的非人(例如，小鼠)抗體，其中所述氨基酸的修改導(dǎo)致減少或消除該修飾抗體在人中的任何可檢測免疫原性。人源化抗體包括嵌合抗體和CDR移植抗體。嵌合抗體是包括與人恒定區(qū)連接的非人抗體可變區(qū)的抗體。因此，在嵌合抗體中，可變區(qū)大部分是非人的，并且恒定區(qū)是人的。嵌合抗體和用于制備其的方法在Morrison等人，Proc. Natl. Acad, kl USA,81 6841-6855(1984)，Boulianne 等人，Nature, 312 :643-646(1984)，和 PCT 申請公開 WO 86/01533中得到描述。盡管，它們可以比小鼠單克隆抗體更少免疫原性，但嵌合抗體的施用已與針對抗體的非人部分的人抗小鼠抗體應(yīng)答(HAMA)關(guān)聯(lián)起來。嵌合抗體也可以通過將來自具有合適抗原結(jié)合特異性的小鼠抗體分子的基因與來自具有合適生物活性的人抗體分子的基因剪接在一起來產(chǎn)生，所述生物活性例如激活人補(bǔ)體和介導(dǎo)ADCC的能力。 Morrison 等人(1984)，Proc. Natl. Acad. Scl，81 :6851 ；Neuberger 等人(1984)，Nature, 312 :604。一個例子是將Fc區(qū)替換為不同同種型的Fc區(qū)。CDR移植抗體是包括與來自人“受體”抗體的構(gòu)架區(qū)連接的來自非人“供體”抗體的CDRs的抗體。一般地，CDR移植抗體包括比嵌合抗體更多的人抗體序列，因為它們包括來自人抗體的恒定區(qū)序列和可變區(qū)(構(gòu)架)序列。因此，例如，本公開的CDR移植人源化抗體可以包含重鏈，所述重鏈包含來自人抗體的構(gòu)架區(qū)(例如，人抗體的FR-l、FR-2或FR-3) 的連續(xù)氨基酸序列(例如，約5個或更多、10個或更多、或甚至15個或更多個連續(xù)氨基酸殘基)，或任選地，人抗體的整個構(gòu)架區(qū)的大多數(shù)或全部。CDR移植抗體和用于制備其的方法在 Jones 等人，Nature，321 :522-525 (1986)，Riechmann 等人，Nature，332 :323-327(1988)， 和Verhoeyen等人，Science，239 1534-1536 (1988))中得到描述?？梢杂糜诋a(chǎn)生人源化抗體的方法也在美國專利號4，816，567,5, 721，367,5, 837，243和6，180，377中得到描述。 CDR移植抗體被認(rèn)為比嵌合抗體較不可能誘導(dǎo)針對非人抗體部分的免疫反應(yīng)。然而，已報告來自供體抗體的構(gòu)架序列是供體抗體的結(jié)合親和力和/或特異性所需的，推測這是因為這些構(gòu)架序列影響供體抗體的抗原結(jié)合部分的折疊。因此，當(dāng)供體非人CDR序列被移植到無關(guān)人構(gòu)建序列上時，在某些情況下，相對于最初非人供體抗體，所得到的CDR移植抗體可能顯示結(jié)合親合力的喪失。參見例如，Riechmann等人，Nature，332 :323-327 (1988)，和 Verhoeyen 等人，Science, 239 1534-1536 (1988)。人工程化抗體包括例如“鑲嵌”抗體和使用HUMANENGINEERING 技術(shù)(美國專利 5，869，619)制備的抗體。HUMANENGINEERING 技術(shù)是商購可得的，并且涉及改變非人抗體或抗體片段，例如小鼠或嵌合抗體或抗體片段，方式是對抗體的氨基酸序列進(jìn)行特異改變， 以便產(chǎn)生在人中具有減少的免疫原性、然而仍保留原始非人抗體的所需結(jié)合性質(zhì)的修飾抗體。一般地，該技術(shù)涉及將非人(例如，小鼠)抗體的氨基酸殘基分類為“低風(fēng)險”、“中等風(fēng)險”或“高風(fēng)險”殘基。分類使用總體風(fēng)險/回報計算來進(jìn)行，該計算評估相對于置換將影響所得抗體的折疊和/或抗原結(jié)合性質(zhì)的風(fēng)險，進(jìn)行該具體置換的預(yù)期益處(例如，在人中的免疫原性)。因此，低風(fēng)險位置是預(yù)期在該處的置換是有利的位置，因為預(yù)期這將減少免疫原性而不顯著影響抗原結(jié)合性質(zhì)。中等風(fēng)險位置是預(yù)期在該處的置換可減少免疫原性但有較大可能影響蛋白質(zhì)折疊和/或抗原結(jié)合的位置。高風(fēng)險位置包含最可能參與正確折疊或抗原結(jié)合的殘基。一般地，非人抗體中的低風(fēng)險位置用人殘基進(jìn)行置換，高風(fēng)險位置很少置換，和有時，但不是不受限制地，在中等風(fēng)險位置處進(jìn)行人源化置換。在非人抗體可變區(qū)序列中具有脯氨酸的位置通常分類為至少中等風(fēng)險位置。在非人(例如，小鼠)抗體序列的給定低或中等風(fēng)險位置處置換的特定人氨基酸殘基可以通過下述進(jìn)行選擇使來自非人抗體的可變區(qū)的氨基酸序列與特定或共有人抗體序列的相應(yīng)區(qū)域比對。根據(jù)該比對，在非人抗體序列的低或中等風(fēng)險位置處的氨基酸殘基可以置換為人抗體序列中的相應(yīng)殘基。用于制備人工程化蛋白質(zhì)的技術(shù)在Mudnicka等人，ProteinEngineering, 7 :805-814(1994)，美國專利 5，766，886,5, 770，196,5, 821，123 和5，869，619、和PCT申請公開WO 93/11794中更詳細(xì)地進(jìn)行描述?！拌偳丁笨贵w是非人或人源化(例如，嵌合或⑶R移植抗體)抗體，其已經(jīng)經(jīng)過改造以替換某些暴露于溶劑的氨基酸殘基，以便進(jìn)一步減少其免疫原性或增強(qiáng)其功能。因為推測嵌合抗體的表面殘基較不可能影響正確的抗體折疊但較可能引發(fā)免疫反應(yīng)，所以嵌合抗體的鑲嵌可以包括例如，鑒定嵌合抗體的非人構(gòu)架區(qū)中暴露于溶劑的殘基，和用來自人構(gòu)架區(qū)的相應(yīng)表面殘基替換它們中的至少一個。鑲嵌可以通過任何合適的工程技術(shù)來完成， 包括上述HUMAN ENGINEERING 技術(shù)的使用。在一個不同方法中，可以通過使CDR移植抗體“去人源化”來恢復(fù)結(jié)合親合力。去人源化可以包括使來自供體抗體的構(gòu)架區(qū)的殘基回到CDR移植抗體，從而恢復(fù)正確折疊。 類似的“去人源化”可以通過下述來達(dá)到(i)在“受體”抗體中包括“供體”構(gòu)架區(qū)的部分， 或(ii)將“供體”抗體構(gòu)架區(qū)的部分(連同移植的供體CDRs)移植到受體抗體內(nèi)。關(guān)于抗體、人源化抗體、人工程化抗體和用于其制備的方法的進(jìn)一步討論，參見 Kontermann and Dubel,編輯，Antibody Engineering, Springer, New York, NY, 2001。示例性人源化或人工程化抗體包括IgG、IgM、IgE、IgA和IgD抗體。本發(fā)明抗體可以是任何類型(IgG、IgA、IgM、IgE、IgD等)或同種型，并且可以包括κ或λ輕鏈。例如， 人抗體可以包含IgG重鏈或確定的片段，例如至少一種同種型，IgGl、IgG2、IgG3或IgG4。 作為進(jìn)一步例子，本發(fā)明抗體或片段可以包含IgGl重鏈和IgGl輕鏈。本發(fā)明抗體和片段可以是人抗體(例如結(jié)合IL-I β多肽且由如下核酸序列編碼的抗體，所述核酸序列是人胚系免疫球蛋白核酸序列的天然體細(xì)胞變體)，及其片段、合成變體、衍生物和融合物。此種抗體可以通過本領(lǐng)域已知的任何方法來產(chǎn)生，例如通過使用轉(zhuǎn)基因哺乳動物(例如，轉(zhuǎn)基因小鼠)，其中在該哺乳動物染色體中天然的免疫球蛋白庫已被人V基因替換。此種哺乳動物表現(xiàn)出以正常方式實現(xiàn)人胚系抗體基因的VDJ重組和體細(xì)胞高變，從而產(chǎn)生具有全人序列的高親和力抗體。針對靶蛋白質(zhì)的人抗體也可以使用轉(zhuǎn)基因動物來產(chǎn)生，所述轉(zhuǎn)基因動物不具有內(nèi)源免疫球蛋白生產(chǎn)，且經(jīng)改造而包含人免疫球蛋白基因座。例如，WO 98/24893公開了具有人Ig基因座的轉(zhuǎn)基因動物，其中由于內(nèi)源重和輕鏈基因座的失活，該動物不產(chǎn)生功能性內(nèi)源免疫球蛋白。WO 91/00906還公開了能夠產(chǎn)生針對免疫原的免疫應(yīng)答的轉(zhuǎn)基因非靈長類哺乳動物宿主，其中抗體具有靈長類恒定區(qū)和/或可變區(qū)，且其中內(nèi)源免疫球蛋白編碼基因座被置換或失活。WO 96/30498和美國專利號6，091，001公開了使用Cre/Lox系統(tǒng)修飾哺乳動物中的免疫球蛋白基因座，以便例如替換恒定或可變區(qū)的全部或部分，從而形成修飾的抗體分子。WO 94/(^602公開了具有滅活的內(nèi)源Ig基因座和功能性人Ig基因座的非人哺乳動物宿主。美國專利號5，939，598公開了制備轉(zhuǎn)基因小鼠的方法，其中該小鼠缺乏內(nèi)源重鏈，且表達(dá)包含一個或多個異種恒定區(qū)的外源免疫球蛋白基因座。還參見，美國專利號 6，114，598,6, 657，103 和 6，833，268。使用上文描述的轉(zhuǎn)基因動物，可以產(chǎn)生針對所選擇的抗原分子的免疫應(yīng)答，可以從動物中取出抗體生產(chǎn)細(xì)胞，且用于產(chǎn)生分泌人單克隆抗體的雜交瘤。免疫接種方案、佐劑等是本領(lǐng)域已知的，并且可以在例如轉(zhuǎn)基因小鼠的免疫接種中使用，如WO 96/33735中所述的。這個出版物公開了針對各種抗原分子的單克隆抗體，所述抗原分子包括IL-6、IL-8、 TNFa、人CD4、L選擇蛋白、gp39和破傷風(fēng)毒素。單克隆抗體可以就抑制或中和相應(yīng)蛋白質(zhì)的生物活性或生理效應(yīng)的能力進(jìn)行測試。WO 96/33735公開了針對IL-8的單克隆抗體，其衍生自用IL-8免疫的轉(zhuǎn)基因小鼠的免疫細(xì)胞、阻斷IL-8誘導(dǎo)的嗜中性粒細(xì)胞功能。對用于免疫轉(zhuǎn)基因動物的抗原具有特異性的人單克隆抗體也公開于WO 96/34096和美國專利申請?zhí)?0030194404 ；以及美國專利申請?zhí)?0030031667中。用于制備單克隆抗體的另外轉(zhuǎn)基因動物包括在美國專利號 5，770，4 和 Fishwild 等人(Nat. Biotechnol. 14 :845-851，1996)中描述的 MedarexHuMAb-MOUSE ,其包含來自未重排人抗體基因的編碼人抗體的重和輕鏈的基因序列。對HuMAb- MOUSE 的免疫使得能夠產(chǎn)生針對靶蛋白質(zhì)的全人單克隆抗體。
此外，Ishida等人(Cloning Stem Cells. 4 :91_102，2002)描述了 TransChromo Mouse (TCM0USE )，其包含兆堿基大小的人DNA區(qū)段，并且摻入完整的人免疫球蛋白(hlg) 基因座。TCM0USE 具有hlg的全多樣庫，包括Ig(iS的所有亞類(IgGl-G4)。用各種人抗原免疫接種TC MOUSE 產(chǎn)生包含人抗體的抗體應(yīng)答。還參見Jakobovits 等人，Proc. Natl. Acad. ki. USA，90 :2551(1993) Jakobovits 等人，Nature，362 :255-258(1993) ；Bruggermann 等人，Year in Immunol.，7 :33(1993)； 和美國專利號5，591，669、美國專利號5，589，369、美國專利號5，545，807 ；和美國專利公開號20020199213。美國專利公開號20030092125描述了用于使動物的免疫應(yīng)答偏向所需表位的方法。人抗體也可以通過體外活化的B細(xì)胞來產(chǎn)生(參見美國專利號5，567，610和 5，229，275)。人抗體也可以通過抗體展示文庫的體外篩選來產(chǎn)生。參見Hoogenboom等人 (1991)，J. Mol. Biol. 227 :381 ；禾口 Marks 等人(1991)，J. Mol. Biol. 222 :581。各種包含抗體的噬菌體展示文庫已得到描述，并且可以容易地制備。文庫可以包含各種各樣的人抗體序列，例如人Fab、Fv和scFv片段，可以針對合適靶篩選這些序列。噬菌體展示文庫可以包含非抗體的肽或蛋白質(zhì)，可以篩選該肽或蛋白質(zhì)以鑒定IL-I β的選擇性結(jié)合劑。用于制備重組人抗體基因庫的技術(shù)的發(fā)展和用于將所編碼抗體片段展示在絲狀噬菌體表面上的技術(shù)的發(fā)展，已提供了直接制備人抗體的手段。通過噬菌體技術(shù)產(chǎn)生的抗體以抗原結(jié)合片段——通常為Fv或Fab片段——的形式在細(xì)菌中產(chǎn)生，且因此缺乏效應(yīng)子功能。效應(yīng)子功能可以通過2種策略之一而引入這些片段可以被改造成完全抗體用于在哺乳動物細(xì)胞中表達(dá)，或改造成具有能夠觸發(fā)效應(yīng)子功能的第二結(jié)合位點的雙特異性抗體片段。本公開考慮用于產(chǎn)生靶特異性抗體或其抗原結(jié)合部分的方法，其包括下述步驟 在噬菌體上合成人抗體文庫、用靶蛋白質(zhì)或其部分篩選文庫、分離結(jié)合靶的噬菌體、且由噬菌體獲得抗體。例如，用于制備在噬菌體展示技術(shù)中使用的抗體文庫的一種方法包括下述步驟用靶抗原或其抗原性部分免疫包含人免疫球蛋白基因座的非人動物，以產(chǎn)生免疫應(yīng)答，從免疫接種的動物中提取抗體生產(chǎn)細(xì)胞；從提取的細(xì)胞中分離RNA，將RNA逆轉(zhuǎn)錄以產(chǎn)生cDNA，使用引物擴(kuò)增cDNA，且將cDNA插入噬菌體展示載體內(nèi)，從而使得抗體在噬菌體上表達(dá)。本公開的重組靶特異性抗體可以以這種方式獲得。噬菌體展示方法通過在絲狀噬菌體表面上展示抗體庫，且隨后通過與所選抗原的結(jié)合來選擇噬菌體，從而模擬免疫選擇。一種此種技術(shù)在W099/10494中描述，其描述了使用此種方法分離針對MPL和msk受體的高親和力和功能性拮抗性抗體。本公開的抗體可以通過篩選重組組合抗體文庫，優(yōu)選地scFv噬菌體展示文庫進(jìn)行分離，其中所述文庫可以使用由衍生自人淋巴細(xì)胞的mRNA制備的人cDNA來制備。用于制備和篩選此種文庫的方法是本領(lǐng)域已知的。參見例如，美國專利號5，969，108。存在用于產(chǎn)生噬菌體展示文庫的商購可得試劑盒(例如，PharmaciaRecombinant Phage Antibody System,目錄號 27-9400-01 ；和 MratageneSurfZAP. ΤΜ· phage display kit，目錄號 240612)。還存在其他方法和試劑可以用于產(chǎn)生且篩選抗體展示文庫(參見例如，Ladner等人美國專利號 5，223，409 ;Kang 等人 PCT
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