專利名稱：8-甲氧補(bǔ)骨脂素在防治絕經(jīng)后婦女骨質(zhì)疏松癥中的新用途的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種藥物的新用途，特別涉及8-甲氧補(bǔ)骨脂素(甲氧沙林)用于防治絕經(jīng)后婦女骨質(zhì)疏松癥藥物中的新用途。
背景技術(shù)：
骨質(zhì)疏松癥是一種以骨量減少、骨組織細(xì)微結(jié)構(gòu)退化為特征，伴有骨脆性增加及易發(fā)生骨折的一種全身性骨骼系統(tǒng)疾病，是中老年的常見疾病，在世界常見病、多發(fā)病中位居第7位。隨著世界人口趨于老齡化，骨質(zhì)疏松癥及骨質(zhì)疏松性骨折的發(fā)病率呈迅速上升的趨勢，現(xiàn)在已成為世界性關(guān)注的嚴(yán)重社會問題。骨質(zhì)疏松癥的發(fā)病機(jī)制非常復(fù)雜，有些問題至今尚難闡明，通常認(rèn)為是由遺傳、激素、營養(yǎng)、廢用、年齡及免疫學(xué)等方面多種因素交互影響的結(jié)果。目前對骨質(zhì)疏松癥的西藥治療主要有骨吸收抑制劑和骨形成促進(jìn)劑，雖然治療藥物較多，但多數(shù)藥物副作用較大?，F(xiàn)代醫(yī)學(xué)研究認(rèn)為絕經(jīng)后婦女骨質(zhì)疏松癥的發(fā)病與雌激素水平降低有關(guān)，由此一度認(rèn)為雌激素替代療法(HRT)是防治絕經(jīng)后骨質(zhì)疏松的一線療法，但是長期使用會增加心腦血管疾病、子宮內(nèi)膜癌及乳腺癌的發(fā)病幾率，從而限制了其廣泛應(yīng)用。8_甲氧補(bǔ)骨脂素(8-methoxypsoralen),又名甲氧沙林(Methoxsalen),甲氧補(bǔ)骨脂素，化學(xué)名稱8_甲氧基-呋喃香豆素，是一種香豆素類化合物，目前臨床上用于治療白癜風(fēng)、牛皮癬(銀屑病)，迄今為止尚未見甲氧補(bǔ)骨脂素用于防治骨質(zhì)疏松癥的報(bào)道。8-甲氧補(bǔ)骨脂素化學(xué)結(jié)構(gòu)式0^^^0入0
OCH
發(fā)明內(nèi)容
我們通過對該化合物進(jìn)行藥理活性研究，發(fā)現(xiàn)該化合物能明顯的促進(jìn)體外培養(yǎng)的大鼠成骨細(xì)胞的增殖與分化，對去卵巢大鼠骨質(zhì)疏松有明顯的防治作用，發(fā)現(xiàn)了甲氧補(bǔ)骨脂素在防治骨質(zhì)疏松中的新用途，提出8-甲氧補(bǔ)骨脂素在制備防治絕經(jīng)后婦女骨質(zhì)疏松癥的藥物制劑方面的應(yīng)用，所述的8-甲氧補(bǔ)骨脂素可與臨床適用的鈣制劑或膦酸鹽制劑配合制成臨床上治療骨質(zhì)疏松的復(fù)合口服制劑形式，特別是8-甲氧補(bǔ)骨脂素可與臨床上接受的藥物載體或輔料配合制成治療骨質(zhì)疏松的片劑、膠囊、口服液和靜脈及肌肉注射制劑形式、脂質(zhì)體制劑形式、微膠囊制劑形式。本發(fā)明所指的8-甲氧補(bǔ)骨脂素(8-methoxypsoralen)與補(bǔ)骨脂素(psoralen)及異補(bǔ)骨脂素(isopsoralen)不是同一種化合物，與補(bǔ)骨脂素(psoralen)及異補(bǔ)骨脂素(isopsoralen)的化學(xué)結(jié)構(gòu)式不同。本發(fā)明可以借助以下實(shí)施例被進(jìn)一步了解，這些實(shí)施例僅作為說明之用，而非用于限制本發(fā)明范圍。
實(shí)施例I 8-甲氧補(bǔ)骨脂素對大鼠成骨細(xì)胞增殖與分化影響的實(shí)驗(yàn)成骨細(xì)胞是參與骨代謝的主要細(xì)胞，成骨細(xì)胞在骨形成中發(fā)揮著重要的作用，可合成分泌多種膠原與非膠原蛋白質(zhì)和一些骨代謝局部調(diào)節(jié)因子，其中包括堿性磷酸酶，骨鈣素，I型膠原等，促進(jìn)成骨細(xì)胞數(shù)量增加和功能提高，有利于維持骨密度和骨強(qiáng)度。成骨細(xì)胞增殖受抑制及分化程度降低，是造成骨質(zhì)疏松癥的重要原因之一。我們采用體外細(xì)胞培養(yǎng)的方法來觀察8-甲氧補(bǔ)骨脂素對大鼠成骨細(xì)胞的增殖、堿性磷酸酶活性和骨鈣素水平的影響，可以明確其對骨形成的作用。I. I實(shí)驗(yàn)材料DMEM購自Gibco公司；胰蛋白酶、噻唑藍(lán)(MTT)、二甲基亞砜(DMSO)購自Sigma公司；II型膠原酶購自Interogenm公司；胎牛血清(FBS)購自北京燕生生物有限公司；堿性磷酸酶試劑盒購自保定長城試劑有限公司；培養(yǎng)塑料制品購自Corning公司；其他試劑均為國產(chǎn)分析純。 I. 2細(xì)胞培養(yǎng)無菌條件下，取出生后24h以內(nèi)的大鼠乳鼠顱蓋骨，用平衡鹽溶液PBS沖洗數(shù)次，放入0. 25%的胰蛋白酶溶液中，剔除骨表面被膜及軟組織，將骨片剪成I 3_3的骨粒，棄去胰蛋白酶溶液。在0. I %膠原酶II中室溫消化45min，將消化液棄去，平衡鹽溶液PBS洗三遍。將骨粒分散于IOOmL培養(yǎng)瓶中，加入含20%胎牛血清的DMEM培養(yǎng)液，37°C 5% CO2培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。5天后，將骨粒棄去，細(xì)胞進(jìn)行傳代培養(yǎng)，將細(xì)胞用胰蛋白酶消化，用含10%胎牛血清的DMEM培養(yǎng)基吹打傳代，置于細(xì)胞培養(yǎng)瓶中放入培養(yǎng)箱中繼續(xù)培養(yǎng)。待細(xì)胞處于對數(shù)生長期時(shí)進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。I. 3 8-甲氧補(bǔ)骨脂素對大鼠成骨細(xì)胞增殖影響的實(shí)驗(yàn)將大鼠成骨細(xì)胞按2X 104/mL密度接種于96孔板，待細(xì)胞70%融合后，換加含不同濃度的甲氧補(bǔ)骨脂素(10-9mol/L 10_5mOl/L)的培養(yǎng)基，每個(gè)濃度均為十個(gè)復(fù)孔。另設(shè)無細(xì)胞調(diào)零孔。分別在培養(yǎng)12h，24h，36h后，每孔加入MTT 20 y L，于37°C，5% CO2培養(yǎng)箱中繼續(xù)孵育4h，吸棄培養(yǎng)基后加入150 u L 二甲基亞砜(DMSO)，IOmin后用酶標(biāo)儀測定492nm吸光度。大鼠成骨細(xì)胞在含不同濃度8-甲氧補(bǔ)骨脂素培養(yǎng)基中培養(yǎng)12h、24h、36h后，與空白組比較，其中濃度為10_6mol/L和10_5mol/L在12h有促增殖作用(P < 0. 05);培養(yǎng)24h和36h后，各個(gè)濃度均有顯著的促增殖作用(P < 0. 01)。見表1-1表1-1甲氧補(bǔ)骨脂素對大鼠成骨細(xì)胞增殖的影響(A，n = 10，；F±S)
權(quán)利要求
1.8-甲氧補(bǔ)骨脂素作為防治絕經(jīng)后婦女骨質(zhì)疏松癥藥物的應(yīng)用，其特征在于8-甲氧補(bǔ)骨脂素可以制備成臨床上防治骨質(zhì)疏松癥的藥物制劑形式。
2.如權(quán)利要求I所述的8-甲氧補(bǔ)骨脂素作為防治骨質(zhì)疏松癥藥物的應(yīng)用，其特征在于所述8-甲氧補(bǔ)骨脂素是指經(jīng)化學(xué)合成或從植物中提取的原料藥物。
3.如權(quán)利要求I所述的8-甲氧補(bǔ)骨脂素作為防治骨質(zhì)疏松癥藥物的應(yīng)用，其特征在于8-甲氧補(bǔ)骨脂素可以制備成臨床上治療骨質(zhì)疏松癥的口服制劑形式。
4.如權(quán)利要求3所述的8-甲氧補(bǔ)骨脂素作為防治骨質(zhì)疏松癥藥物的應(yīng)用，其特征在于所述8-甲氧補(bǔ)骨脂素與臨床適用的鈣制劑配合制成臨床上治療骨質(zhì)疏松的復(fù)合口服制劑形式。
5.如權(quán)利要求4所述的8-甲氧補(bǔ)骨脂素作為防治骨質(zhì)疏松癥藥物的應(yīng)用，其特征在于所述8-甲氧補(bǔ)骨脂素還可與臨床適用的膦酸鹽配合制成臨床上治療骨質(zhì)疏松的復(fù)合口服制劑形式。
6.如權(quán)利要求I所述的8-甲氧補(bǔ)骨脂素作為防治骨質(zhì)疏松癥藥物的應(yīng)用，其特征在于所述8-甲氧補(bǔ)骨脂素與臨床上接受的藥物載體或輔料配合制成防治骨質(zhì)疏松的片劑、膠囊、口服液制劑形式。
7.如權(quán)利要求I所述的8-甲氧補(bǔ)骨脂素作為防治骨質(zhì)疏松癥藥物的應(yīng)用，其特征在于所述8-甲氧補(bǔ)骨脂素可以制成臨床上防治骨質(zhì)疏松癥的靜脈及肌肉注射制劑形式、脂質(zhì)體制劑形式、微膠囊制劑形式。
全文摘要
本發(fā)明涉及一種8-甲氧補(bǔ)骨脂素在制藥領(lǐng)域中的新用途，特別涉及在制備防治骨質(zhì)疏松癥藥物中的應(yīng)用，包括8-甲氧補(bǔ)骨脂素與臨床適用的鈣制劑或臨床適用的膦酸鹽配合制成臨床上治療骨質(zhì)疏松的口服制劑形式；還包括8-甲氧補(bǔ)骨脂素與臨床上接受的藥物載體配合制成治療骨質(zhì)疏松的片劑，膠囊劑，沖劑，口服液，注射液和靜脈及肌肉注射制劑形式、脂質(zhì)體制劑形式、微膠囊制劑形式。
文檔編號A61P19/10GK102727487SQ201110092818
公開日2012年10月17日 申請日期2011年4月14日 優(yōu)先權(quán)日2011年4月14日
發(fā)明者張紅蓮, 張萌, 王娜, 王建華, 王雅楠 申請人:河北醫(yī)科大學(xué)