專利名稱：可用作蛋白激酶抑制劑的吡唑化合物的制作方法
技術領域：
本發(fā)明屬于醫(yī)藥化學領域，涉及作為蛋白激酶抑制劑的化合物、含有這類化合物的組合物和使用方法。更具體地，本發(fā)明涉及這樣的化合物，它們是Aurora-2蛋白激酶的抑制劑。本發(fā)明還涉及治療與蛋白激酶有關的疾病的方法，尤其是與Aurora-2有關的疾病，如癌癥。
背景技術：
近年來對與靶疾病有關的酶和其他生物分子結(jié)構(gòu)的深入理解已經(jīng)大大有助于新治療劑的研究。已經(jīng)成為廣泛研究主題的一類重要的酶是蛋白激酶。蛋白激酶介導細胞內(nèi)信號轉(zhuǎn)導。它們通過影響磷?；鶑娜姿岷塑辙D(zhuǎn)移至參與發(fā)信號途徑的蛋白質(zhì)受體而做到這一點。通過大量激酶和途徑，細胞外與其他刺激導致各種細胞應答發(fā)生在細胞內(nèi)部。這類刺激的實例包括環(huán)境與化學應激反應信號(例如滲透壓休克、熱激、紫外輻射、細菌內(nèi)毒素、H2O2)、細胞因子(例如白介素-I(IL-I)和腫瘤壞死因子 α (TNF-α))和生長因子(例如粒細胞巨噬細胞集落刺激因子(GM-CSF)和成纖維細胞生長因子(FGF))。細胞外刺激可以影響一種或多種細胞應答，涉及細胞生長、移行、分化、激素分泌、轉(zhuǎn)錄因子活化、肌肉收縮、糖代謝、蛋白質(zhì)合成控制和細胞周期調(diào)節(jié)。很多疾病與由蛋白激酶介導的事件激發(fā)的異常細胞應答有關。這些疾病包括自體免疫疾病、炎性疾病、神經(jīng)病學與神經(jīng)變性疾病、癌癥、心血管疾病、變態(tài)反應與氣喘、阿爾茨海默氏病或涉及激素的疾病。因此，醫(yī)藥化學界一直努力發(fā)現(xiàn)作為治療劑有效的蛋白激酶抑制劑。Aurora-2是一種絲氨酸/蘇氨酸蛋白激酶，它與人的癌癥有牽連，例如結(jié)腸、乳腺和其他實體腫瘤。這種激酶據(jù)信參與調(diào)節(jié)細胞周期的蛋白質(zhì)磷酸化事件。具體而言， Aurora-2可能在有絲分裂期間控制染色體的正確分離中起到一定作用。細胞周期的誤調(diào)節(jié)能夠引起細胞增殖和其他異常。在人結(jié)腸癌組織中，已經(jīng)發(fā)現(xiàn)Aurora-2蛋白被過度表達。 參見 Bischoff 等，EMBO J.，1998，17，3052-3065 ；Schumacher 等，J. Cell Biol.，1998，143， 1635-1646 ；Kimura 等，J. Biol. Chem.，1997，272，13766-13771。糖原合成激酶-3(GSK_3)是一種絲氨酸/蘇氨酸蛋白激酶，由α和β同種型構(gòu)成，各自被不同的基因所編碼(Coghlan等，Chemistry&Biology，7，793-803 Q000) ；Kim and Kimme 1, Cu rr. Opinion Genetics Dev.，10，508-514 OOOO))。GSK-3 與各種疾病有牽連，包括糖尿病、阿爾茨海默氏病、CNS障礙(例如躁狂抑郁性精神障礙和神經(jīng)變性疾病)和心肌肥大(W0 99/65897 ；WO 00/38675 ;Haq 等，J. Cell Biol. Q000) 151，117)。這些疾病可以由某些細胞發(fā)信號途徑的異常運作所導致或者導致這些異常運作，GSK-3在其中起到一定作用。已經(jīng)發(fā)現(xiàn)GSK-3磷酸化和調(diào)制大量調(diào)節(jié)性蛋白質(zhì)的活性。這些蛋白質(zhì)包括糖原合成所必要的限速酶糖原合成酶、微管締合蛋白τ、基因轉(zhuǎn)錄因子β-連環(huán)蛋白、轉(zhuǎn)譯抑制因子 elF2B、以及ATP檸檬酸裂合酶、蟲漆脂、熱激因子-l、c-Jun、c-Myc、c-Myb、CREB和CEPB α。 這些不同的蛋白靶使GSK-3與細胞代謝、增殖、分化和發(fā)育的很多方面都有牽連。在GSK-3介導的II型糖尿病治療相關性途徑中，胰島素誘導的發(fā)信號引起細胞葡萄糖攝取和糖原合成。沿著該途徑，GSK-3是胰島素誘導信號的負調(diào)節(jié)物。正常情況下， 胰島素的存在導致GSK-3介導的糖原合成酶磷酸化和失活的抑制。GSK-3的抑制引起糖原合成和葡萄糖攝取的增加(Klein 等，PNAS，93，8455-9 (1996) ；Cross 等，Biochem. J.，303， 21-26(1994) ；Cohen, Biochem. Soc. Trans. , 21, 555-567 (1993) ；Massillon 等，Biochem. J.，299，123-1 (1994))。不過，在胰島素應答被削弱的糖尿病患者中，盡管存在相當高血液水平的胰島素，糖原合成和葡萄糖攝取也不能增加。這引起異常高血液水平的葡萄糖，急性和長期后果可以最終導致心血管疾病、腎衰和失明。在這類患者中，正常的胰島素誘導的 GSK-3抑制不能發(fā)生。另據(jù)報道，在II型糖尿病患者中，GSK-3被過度表達(W0 00/38675)。 GSK-3的治療性抑制劑因此潛在地可用于治療胰島素應答被削弱的糖尿病患者。GSK-3活性還與阿爾茨海默氏病有關。這種疾病是以熟知的β-淀粉樣肽和細胞內(nèi)神經(jīng)原纖維纏結(jié)物的形成為特征的。神經(jīng)原纖維纏結(jié)物含有過度磷酸化的τ蛋白，其中 τ在異常位點上被磷酸化。已經(jīng)顯示GSK-3在細胞和動物模型中磷酸化這些異常位點。進而，已經(jīng)顯示GSK-3的抑制在細胞中防止τ的過度磷酸化(Lovestone等，Current Biology 4,1077-86(1994) ；Brownlees 等，Neuroi^port 8,3251-55(1997))。因此，據(jù)信 GSK-3 活性可以促進神經(jīng)原纖維纏結(jié)物的生成和阿爾茨海默氏病的進展。另一種GSK-3底物是β-連環(huán)蛋白，它在磷酸化之后被GSK-3降解。β-連環(huán)蛋白水平降低已經(jīng)見于精神分裂癥患者的報告，還與其他涉及神經(jīng)元細胞死亡增加的疾病有關 (Zhong 等，Nature，395，698-702 (1998) ；Takashima 等，PNAS，90，7789-93 (1993) ；Pei 等， J. Neuropathol. Exp.，56，70—78(1997))。作為GSK-3的生物學重要性的結(jié)果，當前的興趣在于治療學上有效的GSK-3抑制劑。抑制 GSK-3 的小分子最近已有報道(W0 99/65897 (Chiron) ；WO 00/38675 (SmithKline Beecham))。關于很多上述與異常GSK-3活性有關的疾病，其他蛋白激酶也已定向于治療相同的疾病。不過，各種蛋白激酶經(jīng)常通過不同的生物學途徑發(fā)揮作用。例如，某些喹唑啉衍生物最近已被報道是P38激酶的抑制劑(W0 00/12497, Scios) 0這些化合物據(jù)報道可用于治療以ρ38-α活性增強和/或TGF-β活性增強為特征的病癥。盡管ρ38活性與多種疾病有牽連，包括糖尿病，不過沒有報道Ρ38激酶是調(diào)節(jié)糖原合成或葡萄糖攝取的胰島素發(fā)信號途徑的構(gòu)成部分。因此，與GSK-3不同，ρ38抑制不被預期增強糖原合成和/或葡萄糖攝取。仍然需要發(fā)現(xiàn)新的治療人類疾病的治療劑。蛋白激酶Aurora-2和GSK-3尤其是受到關注的用于發(fā)現(xiàn)新治療劑的目標，因為它們分別在癌癥和糖尿病中起到重要作用
發(fā)明內(nèi)容
現(xiàn)已發(fā)現(xiàn)，本發(fā)明化合物及其藥物組合物是有效的蛋白激酶抑制劑，特別是 Aurora-2抑制劑。這些化合物具有通式I
權利要求
1.式IIIa化合物
2.根據(jù)權利要求1的化合物，其中所述化合物具有一個或多個選自下組的特征(a)Rx是氫；(b)R是具有5-10個環(huán)原子的雜環(huán)；(c)環(huán)D是被T-R5選擇性取代的苯基。
3.根據(jù)權利要求1或2的化合物，其中T是化合價鍵。
4.選自下組的化合物(5-環(huán)丙基-2H-吡唑-3-基)-[2-(萘-2-基硫基)-6-苯基嘧啶_4_基]-胺；(5-環(huán)丙基-2H-吡唑-3-基)-[2- (3-甲氧羰基-苯硫基)-6-苯基嘧啶_4_基]-胺； (5-環(huán)丙基-2H-吡唑-3-基)-[2-(萘-2-基硫基)-嘧啶-4-基]-胺； (5-環(huán)丙基-2H-吡唑-3-基)-[5，6- 二甲基-2-(萘-2-基硫基)-嘧啶_4_基]-胺； (5-環(huán)丙基-2H-吡唑-3-基)-[5_甲基-2-(萘-2-基硫基)_嘧啶_4_基]-胺； (5-環(huán)丙基-2H-吡唑-3-基)-[6-甲基-2-(萘-2-基硫基)-嘧啶_4_基]-胺； (5-環(huán)丙基-2H-吡唑-3-基)46-(嗎啉-4-基)-2-(萘-2-基硫基)-嘧啶-4-基]-胺；(5-環(huán)丙基-2H-吡唑-3-基)-W- (1-甲基哌嗪-4-基)-2-(萘-2-基硫基)-嘧啶-4-基]-胺；[6-(2,6- 二甲基苯基)-2-(萘-2-基硫基)-嘧啶-4-基]-(5_甲基-2H-吡唑-3-基)-胺；[6- (2-甲基苯基)-2-(萘-2-基硫基)-嘧啶-4-基]-(5-甲基-2H-吡唑_3_基)-胺； [2- (4-乙酰氨基-苯硫基)-6-苯基-嘧啶-4-基]-(5-甲基-2H-吡唑_3_基)-胺； (5-甲基-2H-吡唑-3-基)-[2-(萘-2-基硫基)-6-苯基嘧啶_4_基]-胺； [2- (4-異丁酰氨基-苯硫基)-6-苯基-嘧啶-4-基]-(5-甲基-2H-吡唑_3_基)-胺； [6- (4-甲基哌嗪-1-基)-2-甲硫基-嘧啶-4-基]-(5-甲基-2H-吡唑_3_基)-胺； (5-甲基-2H-吡唑-3-基)-[6-苯基-2- (4-丙酰氨基-苯硫基)-嘧啶_4_基]-胺; [2-(4-環(huán)丙烷碳酰氨基-苯硫基)-6-苯基-嘧啶-4-基]-(5-甲基-2H-吡唑-3-基)-胺；(5-甲基-2H-吡唑-3-基)-{6-苯基-2- [4-(丙烷-1-磺酰氨基)-苯硫基]-嘧啶-4-基}_胺；[2- (4-乙磺酰氨基-苯硫基)-6-苯基-嘧啶-4-基]-(5-甲基-2H-吡唑_3_基)-胺； [2-(4-乙酰氨基-苯硫基)-6- -甲基苯基)-嘧啶-4-基]-(5-甲基-2H-吡唑-3-基)-胺；[2-(4-異丁烷碳酰氨基-苯硫基)-6-苯基-嘧啶-4-基]-(5-甲基-2H-吡唑-3-基)-胺；[2-(4-乙酰氨基-苯硫基)-5-甲基-6-苯基-嘧啶-4-基]-(5-甲基-2H-吡唑-3-基)-胺；[2- (4-乙酰氨基-苯硫基)-6- 甲氧基苯基)-嘧啶-4-基]-(5-甲基-2H-吡唑-3-基)-胺；[6- (3-乙酰氨基苯基)-2- (4-乙酰氨基-苯硫基)-嘧啶-4-基]-(5-甲基-2H-吡唑-3-基)-胺；[2-(4-異丙磺酰氨基-苯硫基)-6-苯基-嘧啶-4-基]-(5_甲基-2H-吡唑-3-基)-胺；{2- [4- (2- 二甲氨基-乙酰氨基)-苯硫基]-6-苯基-嘧啶-4-基} - (5-甲基-2H-吡唑-3-基)-胺；[2- (3-氯-芐硫基)-6-嗎啉-4-基-嘧啶-4-基]-(5-甲基-2H-吡唑_3_基)-胺; [2-(3-氯-芐硫基)-6- -甲氧基-乙氨基)_嘧啶-4-基]-(5-甲基-2H-吡唑-3-基)-胺；[2-芐硫基-6- (4-甲基哌嗪-1-基)-嘧啶-4-基]-(5-甲基-2H-吡唑_3_基)-胺； [2-芐硫基-6-嗎啉-4-基-嘧啶-4-基]-(5-甲基-2H-吡唑_3_基)-胺； [2-(3-氯-芐硫基)-6- -甲基哌嗪-1-基)_嘧啶-4-基]-(5_甲基-2H-吡唑-3-基)-胺；[2-(4-甲氧基-芐硫基)-6- -甲基哌嗪-1-基)_嘧啶-4-基]-(5-甲基-2H-吡唑-3-基)-胺；[2- (4-乙酰氨基-苯硫基)-6-叔丁基-嘧啶-4-基]-(5-甲基-2H-吡唑_3_基)-胺； (5-環(huán)丙基-2H-吡唑-3-基)-[6-苯基-2- (4-丙酰氨基-苯硫基)-嘧啶_4_基]-胺； [2- (3-氯-芐硫基)-6-(哌啶-1-基)-嘧啶-4-基]-(5-甲基-2H-吡唑_3_基)-胺； (5-甲基-2H-吡唑-3-基)-{2-[4-(嗎啉磺?；?-芐硫基]-6-嗎啉-4-基-嘧啶-4-基}_胺；{6-(2-甲氧基-乙氨基)-244-(嗎啉磺?；?_芐硫基]-嘧啶-4-基}-(5_甲基-2H-吡唑-3-基)-胺；{6-(4-甲基哌嗪-1-基)-244-(嗎啉磺?；?_芐硫基]-嘧啶-4-基}-(5_甲基-2H-吡唑-3-基)-胺；[6-甲氧基甲基-2-(4-丙酰氨基-苯硫基)-嘧啶-4-基]-(5-甲基-2H-吡唑-3-基)-胺；[2-(4-甲氧羰基-苯硫基)-6-甲氧基甲基-嘧啶-4-基]-(5-甲基-2H-吡唑-3-基)-胺；[2-(3,5- 二甲氧基-芐硫基)-6-嗎啉-4-基-嘧啶-4-基]-(5_甲基-2H-吡唑-3-基)-胺；[2- (3，5- 二甲氧基-芐硫基)-6-吡咯烷-4-基-嘧啶-4-基]-(5-甲基-2H-吡唑-3-基)-胺；(5-甲基-2H-吡唑-3-基)-[6-嗎啉-4-基-2-(萘-2-基甲硫基)-嘧啶_4_基]-胺； {2-(4-乙酰氨基-苯硫基)-644-(3- 二甲氨基-丙氧基)_苯基]-嘧啶-4-基} - (5-甲基-2H-吡唑-3-基)-胺；[2-(4-乙酰氨基-苯硫基)-6-(嗎啉-4-基)-嘧啶-4-基]-(5-甲基-2H-吡唑-3-基)-胺；[6-羥甲基-2- (4-丙酰氨基-苯硫基)-嘧啶-4-基]-(5-甲基-2H-吡唑_3_基)-胺； [2- (4-乙酰氨基-苯硫基)-嘧啶-4-基]-(5-甲基-2H-吡唑-3-基)-胺；叔丁氧羰基)-2-(4-丙酰氨基-苯硫基)-嘧啶-4-基]-(5-甲基-2H-吡唑-3-基)-胺；和[6-甲氧羰基-2-(4-丙酰氨基-苯硫基)_嘧啶-4-基]-(5_甲基-2H-吡唑-3-基)-胺。
5.組合物，包含根據(jù)權利要求1-4任意一項的化合物和藥學上可接受的載體。
6.根據(jù)權利要求5的組合物，其中所述組合物被配制成對人給藥的劑型。
7.抑制離體或體外生物樣本中的Aurora-2、GSK-3或Src活性的方法，包括使所述生物樣本與根據(jù)權利要求1-4任意一項的化合物接觸的步驟。
8.權利要求1-4任意一項的化合物在制備用于抑制患者Aurora-2活性的藥物中的用途。
9.權利要求1-4任一項的化合物在制備用于治療患者下列疾病的藥物中的用途黑素瘤、淋巴瘤、成神經(jīng)細胞瘤、白血病、或選自下列的癌癥結(jié)腸、乳腺、肺、腎、卵巢、胰腺、腎臟、中樞神經(jīng)系統(tǒng)、宮頸、前列腺或胃腸道癌。
10.權利要求1-4任意一項的化合物在制備用于抑制患者GSK-3活性的藥物中的用途。
11.權利要求1-4任意一項的化合物在制備用于治療患者下列疾病的藥物中的用途 糖尿病、阿爾茨海默氏病、亨廷頓氏病、帕金森氏病、與AIDS有關的癡呆、肌萎縮性側(cè)索硬化、多發(fā)性硬化、精神分裂癥、心肌肥大、再灌注/局部缺血或脫發(fā)。
12.根據(jù)權利要求11的用途，其中所述疾病是糖尿病。
13.根據(jù)權利要求1-4任意一項的化合物在制備用于對需要的患者增強糖原合成或降低血糖水平的藥物中的用途。
14.根據(jù)權利要求1-4任意一項的化合物在制備用于抑制患者過度磷酸化τ蛋白產(chǎn)生的藥物中的用途。
15.根據(jù)權利要求1-4任意一項的化合物在制備用于抑制連環(huán)蛋白磷酸化的藥物中的用途。
16.根據(jù)權利要求1-4任意一項的化合物在制備用于抑制患者Src活性的藥物中的用途。
17.權利要求1-4任一項的化合物在制備用于治療患者下列疾病的藥物中的用途高鈣血、骨質(zhì)疏松、骨關節(jié)炎、骨轉(zhuǎn)移瘤的對癥治療和佩吉特氏病。
全文摘要
本發(fā)明描述新穎的式IIIa吡唑化合物，其中R1是T-環(huán)D，其中環(huán)D是5-7元單環(huán)或8-10元二環(huán)，選自芳基、雜芳基、雜環(huán)基或碳環(huán)基；Rx、Ry、R2和R2’是如說明書所述的。這些化合物可用作蛋白激酶抑制劑，尤其是Aurora-2和GSK-3的抑制劑，用于治療癌癥、糖尿病和阿爾茨海默氏病等疾病。
文檔編號A61KGK102250071SQ20111010428
公開日2011年11月23日 申請日期2001年12月19日 優(yōu)先權日2000年12月21日
發(fā)明者A·米勒, D·拜賓頓, J·高利克, J-D·查理爾, R·克奈格泰爾 申請人:沃泰克斯藥物股份有限公司