專利名稱：一種肝素化方法及應(yīng)用的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種肝素固定化方法及應(yīng)用，具體說是一種基于納米孔道的肝素化方法及在人工血管尤其是直徑< 6mm的人工血管中的應(yīng)用。
背景技術(shù)：
肝素作為一種重要的生化藥物，是一簇酸性粘多糖化合物的統(tǒng)稱。它是由己糖醛酸(L一艾杜糖醛酸、葡萄糖醛酸)與硫酸氨基葡萄糖分子以一定的比例交替聯(lián)結(jié)形成的具有六糖或八糖單位的線型鏈狀大分子(見下面肝素的結(jié)構(gòu)式)，分子量在3000至37500之間。肝素具有很強的抗凝血性，自1937年在臨床上用作抗凝劑以來，它一直是最主要的抗凝藥物。肝素通過和抗凝血酶III(antithrombin III，AT-III)、肝素結(jié)合蛋白(heparin interactingprotein, HIP)和血小板因子(platelet factor, PF)等活性物質(zhì)結(jié)合來發(fā)揮其生理功能，具有抗凝血的功效。數(shù)十年的實踐證實了肝素化抗凝血材料是臨床上改善生物材料抗凝性的普適方法。但是，肝素的存儲和釋放制約著生物材料的發(fā)展例如血管重建手術(shù)治療血管疾病，就受阻于小口徑人工血管(小于6mm)的通暢難題，急需長期緩釋肝素的新技術(shù)以防止人工血管內(nèi)皮細胞化之前形成血栓。臨床中的人工血管材料主要有滌綸、膨體聚四氟乙烯(ePTFE)、聚氨酯以及醫(yī)用高分子可降解材料等等，其中ePTFE人工血管是首選材料，然而它的自身抗凝性差而限制了臨床應(yīng)用，因此需要進行血管材料表面修飾和改性。在諸如物理方法處理(表面負電荷，低溫等離子體，表面納米處理等)，化學(xué)方法，生物方法(蛋白修飾，多糖修飾等)，人工血管的基因修飾等眾多方法中，材料表面固定肝素在目前的效果最為明確；但是小口徑人工血管的長期通暢卻至今難以做到。因此增加 ePTFE材料上肝素固載量和延長作用時間目前成為醫(yī)學(xué)，生物學(xué)，材料學(xué)，化學(xué)等重要交叉學(xué)科研究的難點之一。
權(quán)利要求
1.一種肝素化方法，其特征在于引入介孔材料的納米孔道限域效應(yīng)于肝素固定化方法中，實現(xiàn)肝素在納米孔道中的固載以及可控緩釋。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的肝素化方法，其特征在于所述肝素固定在介孔材料的納米孔道中并能夠從納米孔道中緩慢釋放出來。
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的肝素化方法，其特征在于所述納米孔道的孔徑范圍為 0. 2-50nm，其中包含0. 2~2nm微孔和2_50nm介孔。
4.權(quán)利要求1所述的肝素化方法在人工血管中的應(yīng)用。
5.根據(jù)權(quán)利要求4所述的應(yīng)用，其特征在于首先將介孔材料被覆到人工血管上，得到被覆有介孔材料的人工血管，然后通過介孔材料的納米孔道限域效應(yīng)實現(xiàn)肝素在納米孔道中的固載以及可控緩釋。
6.根據(jù)權(quán)利要求5所述的應(yīng)用，其特征在于所述介孔材料被覆在所述人工血管凹凸不平的基質(zhì)表面上。
7.根據(jù)權(quán)利要求5或6所述的應(yīng)用，其特征在于所述介孔材料被覆到人工血管上的方法為在介孔材料合成體系中制備介孔材料溶膠，然后將制備好的介孔材料溶膠與人工血管相混合，再將人工血管加入到介孔材料合成體系中，按照介孔材料合成的步驟處理后得到被覆有介孔材料的人工血管。
8.根據(jù)權(quán)利要求7所述的應(yīng)用，其特征在于所述介孔材料合成體系包括三嵌段聚合物_檸檬酸體系和十六烷基溴化銨_檸檬酸_檸檬酸鈉體系。
9.根據(jù)權(quán)利要求8所述的應(yīng)用，其特征在于所述三嵌段聚合物-檸檬酸體系是采用三嵌段聚合物為模板劑，檸檬酸作酸源合成孔徑為7-12nm的介孔，具體制備方法如下室溫下，將三嵌段聚合物溶解在水中，然后加入檸檬酸，攪拌完全溶解后加入硅源，所得溶液繼續(xù)攪拌反應(yīng)至生成穩(wěn)定介孔結(jié)構(gòu)，然后進釜陳化，冷卻、過濾、洗滌、室溫晾干得到原粉樣品；脫除原粉樣品中的模板劑即得到孔徑為7-12nm的介孔材料；其中檸檬酸與三嵌段聚合物的摩爾比為1-180。
10.根據(jù)權(quán)利要求8所述的應(yīng)用，其特征在于所述十六烷基溴化銨-檸檬酸-檸檬酸鈉體系是采用十六烷基溴化銨作模板劑，檸檬酸作酸源，檸檬酸鈉作助劑合成孔徑為 2-3. 4nm的介孔；具體制備方法如下按照正硅酸乙酯、十六烷基溴化銨、檸檬酸、檸檬酸鈉和水之間的摩爾比為1 0. 2 1 0.5-2.5 200-800進行稱?。蝗缓髮⑹榛寤@、檸檬酸和檸檬酸鈉溶解于水中，攪拌溶解后加入正硅酸乙酯得到溶液混合物，再將溶液混合物在20-50°C反應(yīng)至生成穩(wěn)定介孔結(jié)構(gòu)，過濾、洗滌、室溫晾干，得到白色原粉；脫除白色原粉中的模板劑即得到孔徑為2-3. 4nm的介孔材料。
全文摘要
本發(fā)明公開了一種肝素化方法及應(yīng)用，該方法為引入介孔材料的納米孔道限域效應(yīng)于肝素固定化方法中，實現(xiàn)肝素在納米孔道中的固載以及可控緩釋。上述肝素化方法在人工血管中的應(yīng)用。本發(fā)明利用分子篩材料的納米孔道固載和緩釋肝素，調(diào)變肝素的緩釋，避免共價鍵固定法和終點附著固定法所導(dǎo)致的生物活性降低，克服物理吸附共混法及離子鍵固定法所引起的釋放不可控性以及其降解產(chǎn)物生成；通過介孔材料在ePTFE人工血管表面生長、制備新型介孔分子篩被覆人工血管的方法，能大幅度地提高新型人工血管的生物相容性、長期抗血栓性及內(nèi)皮細胞相容性。
文檔編號A61L27/28GK102240416SQ20111010373
公開日2011年11月16日 申請日期2011年4月25日 優(yōu)先權(quán)日2011年4月25日
發(fā)明者劉長建, 周瑜, 朱建華, 李坤, 楊佳園, 王英 申請人:南京大學(xué)