專利名稱：一種肉桂多酚提取物、其制備方法及其用途的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及天然藥物領(lǐng)域，具體涉及一種肉桂多酚提取物、其制備方法及其用途， 本發(fā)明的肉桂多酚具有在治療和預(yù)防2型糖尿病中降低血糖、調(diào)節(jié)血脂和改善肝功能的作用。
背景技術(shù)：
糖尿病是一種常見的代謝內(nèi)分泌疾病，1999年世界衛(wèi)生組織糖尿病專家委員會(huì)對(duì)糖尿病作出了如下定義糖尿病是由于人體內(nèi)胰島素缺乏或相對(duì)缺乏所致的一種慢性內(nèi)分秘代謝性疾病，以糖代謝紊亂為突出表現(xiàn)，未治療狀態(tài)下高血糖為主要特征，并伴有蛋白質(zhì)和脂肪代謝異常。糖尿病是一種古老的疾病，我國(guó)早在2000多年前就有該病的記載，早在 《黃帝內(nèi)經(jīng)》中對(duì)糖尿病已有詳細(xì)的記載，對(duì)糖尿病病因病機(jī)、臨床表現(xiàn)、治則和預(yù)后都作出了論述，到漢代在《金匱要略》中把糖尿病作為一個(gè)獨(dú)立疾病來(lái)對(duì)待，唐代《外臺(tái)秘要》中最先記載了糖尿病尿甜的表現(xiàn)。而西方國(guó)家直到1672年才有土耳其人Areteus較系統(tǒng)的描述了糖尿病的臨床表現(xiàn)，他發(fā)現(xiàn)了糖尿病患者“尿甜如蜜”，并詳細(xì)記載了糖尿病患者從開始發(fā)病到病情惡化，直至昏迷死亡的臨床過程。盡管歐州人直到17世紀(jì)才認(rèn)識(shí)了糖尿病的特點(diǎn)，但在19世紀(jì)他們最早證明尿中排泄的是葡萄糖，從而最早揭示了糖尿病與葡萄糖代謝間的關(guān)系。糖尿病臨床表現(xiàn)為多飲、多食、多尿、身體消瘦，即“三多一少”，并有疲乏無(wú)力、尿有甜味等表現(xiàn)，嚴(yán)重者可發(fā)生酮癥酸中毒甚至昏迷，常易并發(fā)心腦血管、神經(jīng)、腎、眼、 急性感染等病變，是嚴(yán)重危害人類健康的疾病。糖尿病是由遺傳和環(huán)境因素相互作用而引起的常見病，臨床以高血糖為主要標(biāo)志，主要分為1型(胰島素依賴型，IDDM)和2型(非胰島素依賴型，NIDDM)兩種，前者乃因胰島素絕對(duì)缺乏，胰島β細(xì)胞分泌極少胰島素，以致于不能抑制脂肪分解，有大量酮體產(chǎn)生而導(dǎo)致酮癥酸中毒(DKA)。2型糖尿病患者的胰島β細(xì)胞仍有一定量胰島素分泌功能， 足以抑制脂肪組織過多游離脂肪酸釋放，防止自發(fā)性酮癥酸中毒的發(fā)生。然而高血糖長(zhǎng)時(shí)期存在。還有一種新型的遲發(fā)自身免疫型糖尿病(LADA)，也稱1.5型糖尿病。2010年3月25日出版的《新英格蘭醫(yī)學(xué)雜志》上，由來(lái)自杜蘭大學(xué)的研究員人和他們的中國(guó)同事在中國(guó)進(jìn)行的一項(xiàng)基于大規(guī)模人群的糖尿病研究得出結(jié)論說，這種疾病在中國(guó)成年人群中已經(jīng)達(dá)到了流行的比例。這項(xiàng)研究估計(jì)9240萬(wàn)20歲或20歲以上的成年人 (人口的9. 7%)有糖尿病，而14820萬(wàn)成年人(15.5%)有前驅(qū)糖尿病，后者是出現(xiàn)顯性糖尿病和心血管疾病的一個(gè)關(guān)鍵的風(fēng)險(xiǎn)因素。國(guó)際糖尿病聯(lián)盟(IDF)主席Pierre Lefebvre 教授概述了以下事實(shí)“50多年來(lái)，糖尿病已經(jīng)發(fā)展為一個(gè)危害人類健康和社會(huì)發(fā)展的全球性問題。糖尿病患者的總?cè)藬?shù)每年以驚人的速度在遞增。如果繼續(xù)對(duì)糖尿病的蔓延無(wú)動(dòng)于衷，那么它的肆虐將波及全球超過3. 5億人口，進(jìn)而威脅到許多國(guó)家的醫(yī)療保障體系，甚至吞噬發(fā)展中國(guó)家的經(jīng)濟(jì)發(fā)展成果?！敝袊?guó)的糖尿病患者人數(shù)近6年內(nèi)激增2倍多，現(xiàn)已突破9000萬(wàn)之眾，這個(gè)“世界第一”的帽子已給正在崛起的中國(guó)帶來(lái)了沉重負(fù)擔(dān)，每年我國(guó)直接用于糖尿病的醫(yī)療費(fèi)用高達(dá)一千七百億元人民幣。世界衛(wèi)生組織指出，如不采取有效措施，預(yù)計(jì)在未來(lái)10年內(nèi)，僅糖尿病、心臟病、中風(fēng)就將給中國(guó)造成至少5500億美元的經(jīng)濟(jì)損失。2型糖尿病的主要治療方法就是各種形式的胰島素控制治療，2型糖尿病患者的病癥主要表現(xiàn)為代謝異常，最為典型的就是胰島素抵抗和胰島素缺乏，這些異常導(dǎo)致血糖升高，進(jìn)而提升了發(fā)生心血管方面疾病的可能。因此控制血糖能延緩2型糖尿病患者微血管和大血管病變的發(fā)展。眾所周知的用于治療高血糖的各種技術(shù)和治療方法可概括為兩種，一種通過改變生活方式來(lái)增加胰島素敏感性，主要包括減輕體重，改善飲食和適量的運(yùn)動(dòng)，隨著病情的發(fā)展口服胰島素促泌劑和胰島素增敏劑，以保持血糖正常水平，患病后期由于胰島β細(xì)胞功能的衰退，需要注射胰島素來(lái)達(dá)到控制血糖的目的。對(duì)于某些患者來(lái)說， 單用口服降糖藥物是沒有效果的，往往需要配合胰島素一起使用才能起效，但是經(jīng)常會(huì)有無(wú)法增加體重和低血糖的效果。還有一些患者因?yàn)樯眢w或者有其他疾病的因素影響，無(wú)法使用胰島素治療。目前常用口服降糖藥以促胰島素分泌劑和胰島素增敏劑為主，前者包括磺脲類 (格列本脲(優(yōu)降糖))，雙胍類(二甲雙胍)，后者主要為增敏劑(羅格列酮)，等用于二型糖尿病的治療，還有一種α-葡萄糖苷酶抑制劑，不同于磺脲類和雙胍類的新一代抗高血糖藥物。這類藥物能提高肌肉、脂肪對(duì)葡萄糖的攝取和利用，抑制肝臟葡萄糖的輸出，降低血糖。但是2型糖尿病為一種慢性疾病，需終生服藥，控制血糖的同時(shí)，西藥不良反應(yīng)隨之出現(xiàn)，患者對(duì)西藥耐受性差，長(zhǎng)期服藥會(huì)給患者帶來(lái)諸多器官損傷，有些反應(yīng)較嚴(yán)重甚至引起死亡。其中不良反應(yīng)包括低血糖，心血管副反應(yīng)，消化道副反應(yīng)，乳酸性酸中毒，肝腎毒性寸。中醫(yī)藥是中華民族優(yōu)秀文化的燦爛結(jié)晶，數(shù)千年來(lái)，為中華民族的繁衍昌盛建立了不可磨滅的功績(jī)，同時(shí)也為世界民族醫(yī)學(xué)的發(fā)展作出了貢獻(xiàn)。采用現(xiàn)代科學(xué)研究手段，開發(fā)出高效、優(yōu)質(zhì)、安全、穩(wěn)定的“三效”、“三小”、“三便”的新型中藥，隨著人類對(duì)化學(xué)藥物毒副作用的認(rèn)識(shí)，傾向于“回歸自然”，采用天然藥進(jìn)行醫(yī)療保健日益受到重視。迄今為止，中醫(yī)治療糖尿病取得了很大成績(jī)，其優(yōu)點(diǎn)在于它不僅可降低血糖，減低胰島素抵抗，且作用持久，無(wú)毒副作用，同時(shí)可降低糖尿病并發(fā)癥的發(fā)病率，延緩并發(fā)癥的進(jìn)程，發(fā)揮整體調(diào)節(jié)的優(yōu)勢(shì)，改善患者生活質(zhì)量。目前，暢銷的中藥制劑及其復(fù)方制劑約有 10多個(gè)。據(jù)不完全統(tǒng)計(jì)，消渴丸、糖脈康、消渴康、糖樂、玉蘭降糖膠囊、玉苓消渴茶是6個(gè)獨(dú)家品種。而降糖舒、渴樂寧、玉泉丸(片、散、顆粒)、十味玉泉膠囊、參芪降糖、振源膠囊(口服液、片)等各個(gè)品種獲準(zhǔn)生產(chǎn)的廠商均在10家之內(nèi)；降糖寧、消渴靈生產(chǎn)批文多達(dá)50多個(gè)；降糖中成藥制劑生產(chǎn)批文已超過200多個(gè)。但是，整體來(lái)看，糖尿病中成藥在整個(gè)糖尿病用藥中的市場(chǎng)份額相對(duì)較少，在口服糖尿病市場(chǎng)上，中成藥只占據(jù)16%的市場(chǎng)份額，遠(yuǎn)遠(yuǎn)低于西藥，處于輔助治療地位。在主要品種中，消渴丸占有市場(chǎng)主導(dǎo)地位，占領(lǐng)整個(gè)糖尿病中成藥55%的市場(chǎng)分額，但消渴丸中含有西藥成分，并非純中藥產(chǎn)品。目前純中藥降糖制劑包括糖脈康顆粒、參芪降糖顆粒、金芪降糖片和輔仁糖尿樂膠囊等只占市場(chǎng)的31%強(qiáng)。其他品種只占10%多的市場(chǎng)。研制一種具有確切降糖作用的純中藥制劑具有非常重大的市場(chǎng)價(jià)值，并對(duì)研究降糖天然化學(xué)活性組分具有重要的理論意義。肉桂為樟科植物肉桂(Cinnamomum cassia Presl)的干燥樹皮，是一種常用中藥材，作為香料和藥用歷史悠久，最早記載源于《神農(nóng)本草經(jīng)》，有“桂為百藥之長(zhǎng)”的說法。肉桂其性味辛、甘、大熱，歸腎、脾、心、肝經(jīng)，具有補(bǔ)火助陽(yáng)，引火歸源，散寒止痛，活血通經(jīng)的功能?！吨腥A人民共和國(guó)藥典》收載了肉桂皮、枝和枝葉提取的揮發(fā)油，分別命名為肉桂、桂枝、肉桂油。肉桂所含化學(xué)成分復(fù)雜，其中多數(shù)物質(zhì)都具有其獨(dú)特的藥理作用。肉桂和桂枝作為香料、食品添加劑和中藥，長(zhǎng)期以來(lái)主要關(guān)注的是揮發(fā)油部分，肉桂油為常用的驅(qū)風(fēng)藥及健胃藥。肉桂一股含揮發(fā)油 2%，其中桂皮醛(cirmamaldehycOTS1^ 90%，并含有少量醋酸桂皮脂(cirmamyl acetate)、丁香酚等。CO2超臨界萃取法可以從肉桂中提取 10%左右的肉桂醛油，其中大部分為揮發(fā)油，CO2超臨界萃取的揮發(fā)油一股作為香料和食品添加劑使用。肉桂水或醇提取物中主要含鞣質(zhì)類、香豆素類、桂皮酸、膽堿、倍半萜、二萜類化合物等。經(jīng)現(xiàn)代藥理試驗(yàn)表明，Karalee J等研究發(fā)現(xiàn)肉桂中含有的一種甲基羥基查爾酮聚合物(MHCP)在3T3-L1脂肪細(xì)胞中有類似胰島素樣作用(Karalee J. Jarvill-Taylor, et al. A Hydroxychalcone Derived from Cinnamon Functions as a Mimetic for Insulin in 3T3-L1 adipocytes[J]Journal of the American College of Nutrition 2001, 20(4) :327-336), Justin A等研究發(fā)現(xiàn)肉桂不能夠提高1型糖尿病患者的血糖代謝水平 (Justin A Altschuler，Samuel J. Casella,et al. The effect of Cinnamon on AlC among adolescents with type 1 diabetes[J]Diabetes Care April 2007,30(4) :813-816)； 于峰、王厚偉等認(rèn)為肉桂多糖對(duì)四氧嘧啶誘發(fā)的實(shí)驗(yàn)性糖尿病小鼠有顯著的降糖效果(肉桂多糖對(duì)四氧嘧啶致實(shí)驗(yàn)性糖尿病小鼠降糖作用的研究[J].食品與藥品2009，11 (6) 25-27)；李宗孝，溫普紅，袁美娟的細(xì)胞實(shí)驗(yàn)表明，從肉桂中分離得到的MHCP有胰島素樣作用，能有效調(diào)節(jié)細(xì)胞各種反應(yīng)能力(肉桂中查耳酮的類似胰島素作用[J].中醫(yī)藥學(xué)報(bào) 2004,32(5) :72-75)，但是該文獻(xiàn)并未提到MHCP的化學(xué)組成、具體來(lái)源和制備方法。CN200610201217.4公開了一種肉桂治療糖尿病上的用途及產(chǎn)品和其制備方法， CN200610117512. 1公開了一種肉桂提取物的制備方法、肉桂提取物、其組合物及用途，這兩篇專利中都沒有明確肉桂中降糖活性組分的屬性及其質(zhì)量控制方法，并且兩專利中的肉桂提取物的制備都是采用水或水性溶劑提取，萃取物中含有大量的揮發(fā)油成分，主要是肉桂醛、香豆類等，現(xiàn)代研究表明此類物質(zhì)不但沒有降糖活性，并且會(huì)影響血壓的穩(wěn)定。 CN200610023280. 3公開了一種從中藥肉桂中提取α -葡萄糖苷酶抑制劑的方法，該專利認(rèn)為提取物對(duì)α-葡萄糖苷酶具有很強(qiáng)的抑制作用，但該專利沒有明確提取物的性質(zhì)、穩(wěn)定性、測(cè)定指標(biāo)和質(zhì)量控制方法。CN200810027065. X公開了一種肉桂皂苷提取物及其制備方法和應(yīng)用，該專利提取了肉桂皂苷作用活性成分。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明公開了一種肉桂多酚提取物。發(fā)明人研究發(fā)現(xiàn)，肉桂中的降糖成分是水溶性多酚類物質(zhì)，其在肉桂藥材中的含量非常低，約0. 1%-0.3%。中藥肉桂中含有8% 12%的肉桂醛、肉桂酸、香豆素類、丁香酚等揮發(fā)性物質(zhì)，它們沒有降糖效果，因此必須在提取多酚前預(yù)先分離和去除。(X)2超臨界萃取可有效分離出脂溶性物質(zhì)并另加利用，萃取殘?jiān)?jīng)水或水混合性溶劑提取，可得到總酚含量6%左右的肉桂多酚粗提取物，其中含有大量的水解多糖、水溶性淀粉等雜質(zhì)，它們的存在造成產(chǎn)品具有非常大的引濕性，影響肉桂多酚提取物的穩(wěn)定性，且不利于保存和生產(chǎn)制劑，所以必須進(jìn)一步純化。發(fā)明人采用SP207大孔吸附樹脂純化可以最大程度的分離出水溶性多酚，純化后總多酚含量提高到了以上，其純度高，質(zhì)量穩(wěn)定。并且提取物有利于后續(xù)的制劑生產(chǎn)。本發(fā)明的肉桂多酚提取物用以下方法得到(1)肉桂藥材粉碎后用CO2超臨界萃取去除揮發(fā)油；(2) CO2超臨界萃取后殘?jiān)盟?0% 70%乙醇加熱煎煮；(3)煎煮液離心分離，濾液真空濃縮后干燥得肉桂多酚粗提物；(4)將肉桂多酚粗提物用50% 80%的丙酮或50% 80%的乙醇萃取，抽濾，濾液濃縮后加水得上柱液；(5)上柱液上SP207樹脂柱，用40 % 55 %乙醇洗脫，收集洗脫液，旋蒸至干，得肉桂多酚提取物；本發(fā)明中的百分比均為重量百分比。上述涉及百分比的溶液均是指的水溶液。步驟(1)中(X)2超臨界萃取的溫度為45°C 60°C，壓力為32 35MP。更優(yōu)選的溫度為45°C 55°C，最優(yōu)選為47V 53°C。步驟O)中水或30% 70%乙醇的重量?jī)?yōu)選(X)2超臨界萃取后殘?jiān)亓康? 12倍。(X)2超臨界提取后的殘?jiān)捎盟部梢允褂?0% 70%的乙醇水溶液提取，但水提成本較低。步驟O)中加熱煎煮溫度優(yōu)選45°C 70°C。優(yōu)選范圍為45°C 60°C，更優(yōu)選為 45°C 55°C，最優(yōu)選的條件為50°C 53°C。步驟(4)中肉桂多酚粗提物可用純凈水或丙酮水溶液萃取，優(yōu)選用50% 80%的丙酮萃取，更優(yōu)選用80%丙酮萃取。用純凈水萃取后還需要進(jìn)行醇沉，操作復(fù)雜、時(shí)間長(zhǎng)。步驟(4)中濾液濃縮后加適量體積的水制得總多酚濃度適當(dāng)?shù)纳现骸饪s溫度優(yōu)選低于70°C，更優(yōu)選的條件是低于60°C。所加水的量?jī)?yōu)選加水后上柱液中總多酚含量在 1. 5 5. Omg/ml，更優(yōu)選為2 4. 5mg/ml，進(jìn)一步優(yōu)選為3 4. Omg/ml。步驟(5)中上柱液上SP207樹脂柱后，優(yōu)選先用0. 乙酸沖洗，然后用50%乙醇洗脫，收集50%乙醇洗脫液。SP207樹脂是一種聚合溴代苯乙烯系大孔吸附樹脂，比純苯乙烯聚合物疏水性更強(qiáng)，對(duì)非極性大分子有較大的吸附選擇性?？兹莘e為1. :3ml/g ；比表面積為600m2/g ；孔半徑11θΑ;表觀密度780g/L-R ；水含量43 53%。SP207對(duì)肉桂多酚類物質(zhì)最大吸附量達(dá)到7mg/g,同時(shí)能吸附水解多糖。0. 乙酸水溶液可洗脫不含羥基的物質(zhì)以及小分子的糖類物質(zhì)。肉桂多酚類物質(zhì)的洗脫劑優(yōu)選為40% 55%乙醇，最優(yōu)選為50%乙醇。70% 95%的乙醇能洗脫多糖和水溶性淀粉。本發(fā)明的第( 步驟中，最優(yōu)選操作條件為SP207樹脂床Φ 45 X 220mm,柱體積為 350mL，上柱液的多酚濃度為3 ％ig/mL，上柱吸附速度為2mL/min，洗脫速度為ld/s，50% 乙醇洗脫體積為3BV。上述制備方法得到的肉桂多酚其總多酚含量不低于沈%。其為棕紅色具有特殊香氣的粉末，引濕性小，可在避光、密閉條件下室溫保存，其保存期不少于M個(gè)月。其能溶于純水、50% 80%丙酮水溶液和50% 75%乙醇水溶液，不能全溶于丙酮或無(wú)水乙醇。其有相當(dāng)好的粉末流動(dòng)性，能直接和輔料混合后壓片，壓成的肉桂多酚片穩(wěn)定性和溶出度合格。該肉桂多酚提取物屬于無(wú)毒物。
本發(fā)明的優(yōu)選實(shí)施方式中，所述肉桂多酚提取物的HPLC圖譜如圖4所示。本發(fā)明中的肉桂多酚提取物的制備方法具有工業(yè)化規(guī)模，產(chǎn)品穩(wěn)定性好、易保存。 用本發(fā)明方法制得的肉桂多酚具有增加胰島素敏感性、促進(jìn)胰島素分泌、降低血糖的作用， 同時(shí)具有調(diào)節(jié)血脂、改善肝功能的作用。本發(fā)明的肉桂多酚在治療和預(yù)防2型糖尿病和調(diào)節(jié)血脂藥品或保健品中有廣泛的應(yīng)用。本發(fā)明的肉桂多酚提取物在35 140mg/kg/d的范圍內(nèi)能顯著降低STZ致糖尿病大鼠血糖、調(diào)節(jié)血脂，并具有改善肝功能的作用。本發(fā)明的肉桂多酚提取物可以通過常規(guī)方法制成任何常規(guī)的制劑形式。具體說用本發(fā)明的肉桂多酚提取物制成的藥品或保健品可為顆粒劑、片劑、凍干粉、膠囊、舌下含片或其它合適的形狀。本發(fā)明的肉桂多酚提取物在制備成藥品或保健品時(shí)可含有藥學(xué)上可接受的載體、稀釋劑或賦形劑。本發(fā)明中，“藥學(xué)上可接受的”成分是適用于人和/或動(dòng)物而無(wú)過度不良副反應(yīng)(如毒性、刺激和變態(tài)反應(yīng))，即有合理的效益/風(fēng)險(xiǎn)比的物質(zhì)。本發(fā)明中的肉桂多酚提取物的降血糖和降血脂有效劑量范圍為35 140mg/kg/ d(STZ致糖尿病大鼠)。本文所用的術(shù)語(yǔ)“有效量”指治療劑治療、緩解或預(yù)防目標(biāo)疾病或狀況的量，或是表現(xiàn)出可檢測(cè)的治療或預(yù)防效果的量。對(duì)于某一對(duì)象的精確有效量取決于該對(duì)象的體型和健康狀況、病癥的性質(zhì)和程度、以及選擇給予的治療劑和/或治療劑的組合。 因此，預(yù)先指定準(zhǔn)確的有效量是沒用的。然而，對(duì)于某給定的狀況而言，可以用常規(guī)實(shí)驗(yàn)來(lái)確定該有效量，臨床醫(yī)師是能夠判斷出來(lái)的。為了本發(fā)明的目的，有效劑量為給予個(gè)體35 140mg/kg/d(STZ致糖尿病大鼠) 的本發(fā)明肉桂多酚提取物。此外，本發(fā)明的活性物質(zhì)還可與其他治療劑一起使用。本發(fā)明的肉桂多酚提取物，可將其直接給予對(duì)象。待預(yù)防或治療的對(duì)象可以是動(dòng)物，尤其是人。藥理學(xué)試驗(yàn)證明本發(fā)明的肉桂多酚提取物，能有效降低血糖、調(diào)節(jié)血脂，從而預(yù)防和治療2型糖尿病，并具有明顯的改善肝功能的作用。下面是部分藥理試驗(yàn)及結(jié)果本發(fā)明的肉桂多酚對(duì)鏈尿霉素(STZ)致SD大鼠糖尿病血糖、血脂的影響一、實(shí)驗(yàn)材料檸檬酸三鈉-檸檬酸緩沖液(mol*L-l)組成如下Α.檸檬酸三鈉母液 (0. Imol · L-1) 29. 4g 溶解在 IOOOml 蒸餾水中；B.檸檬酸母液(0. Imol · L-l) :21. Og 溶解在IOOOml蒸餾水中；C.工作液(pH 4. 4)，A B = 1 1. 32 (體積比)；鏈脲佐菌素溶液的配制將鏈脲佐菌素(STZ)溶于工作液C中(冰浴條件下，臨用前配制，5分鐘內(nèi)注射完畢)。2.實(shí)驗(yàn)動(dòng)物和飼料SD大鼠，雄性，清潔級(jí)，體重180士 10g，基礎(chǔ)飼料由小麥粉、玉米粉、麥麩、大豆粉、魚粉、骨粉及多種維生素組成。高糖高脂飼料基礎(chǔ)飼料74.5%、蔗糖10%、豬油10 %、膽固醇0. 5 %、蛋黃粉5%。二、STZ致SD大鼠糖尿病模型的建立1.動(dòng)物模型建立大鼠適應(yīng)性飼養(yǎng)2天，室內(nèi)溫度保持在25°C，濕度在50%左右，明暗周期12h，自由飲水和進(jìn)食。除正常對(duì)照組給予普通標(biāo)準(zhǔn)飼料外，其余均給予高脂高糖飼料喂養(yǎng)四周后測(cè)定口服葡萄糖耐量實(shí)驗(yàn)，然后禁食10 12h。一次性腹腔注射鏈脲霉素(STZ) 40mg/kg, 一周后，取禁食他后大鼠眼角靜脈叢取血用血糖試紙測(cè)空腹血糖，選擇血糖值高于11. Ommol/L 者視為造模成功。2.實(shí)驗(yàn)動(dòng)物分組及給藥本實(shí)驗(yàn)使用的肉桂多酚是按實(shí)施例1所述方法制備的，總多酚含量為27.87%， HPLC譜如圖4。將成模的2型糖尿病大鼠按空腹血糖值隨機(jī)分組，每日1次灌胃給藥，分別為二甲雙胍組100mg/kg，肉桂多酚1 (高劑量組，140mg/kg)，肉桂多酚2 (低劑量組，35mg/kg)。模型組和空白對(duì)照組給予等體積的蒸餾水，連續(xù)灌胃4周。3.血清的準(zhǔn)備和血清生化檢查分別于第0天給藥前，第7、11、21、觀天給藥后禁食他，眼角靜脈叢取血，低溫離心 (1500Xg, 15min,4°C )，分離血清，分裝于1. 5mL凍存管中，_20°C冰箱保存，以待測(cè)定各個(gè)生化指標(biāo)。采用酶標(biāo)儀按照各試劑盒的說明測(cè)定空腹血糖(FPG)、總膽固醇(TC)、甘油三酯 (TG)、高密度脂蛋白膽固醇(HDL-C)、低密度脂蛋白膽固醇(LDL-C)、谷草轉(zhuǎn)氨酶(AST/GOT) 和谷丙轉(zhuǎn)氨酶水平。采用放免法測(cè)定血清胰島素(FINQ水平。4.運(yùn)用Excel 2007進(jìn)行數(shù)據(jù)分析，實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)均以()表示，組間比較用t檢驗(yàn)。三、實(shí)驗(yàn)結(jié)果1.體重變化SD大鼠正常組、模型組和各用藥組的體重變化如表1所示。表1大鼠體重的變化(n = 8)
權(quán)利要求
1.一種肉桂多酚提取物，其特征是由以下方法制備(1)肉桂藥材粉碎后用CO2超臨界萃取去除揮發(fā)油；(2)CO2超臨界萃取后殘?jiān)盟?0% 70%乙醇加熱煎煮；(3)煎煮液離心分離，濾液真空濃縮后干燥得肉桂多酚粗提物；(4)將肉桂多酚粗提物用50% 80%的丙酮或水萃取，抽濾，濾液濃縮后加水得上柱液；(5)上柱液上SP207樹脂柱，用40% 55%乙醇洗脫，收集洗脫液，旋蒸至干，得肉桂多酚提取物；上述百分比均為重量百分比。
2.權(quán)利要求1的肉桂多酚提取物，其中步驟O)中水或30% 70%乙醇的重量是(X)2 超臨界萃取后殘?jiān)亓康? 12倍。
3.權(quán)利要求1的肉桂多酚提取物，其中步驟O)中加熱煎煮溫度是45°C 70°C。
4.權(quán)利要求1的肉桂多酚提取物，其中步驟中肉桂多酚粗提物用80%丙酮萃取。
5.權(quán)利要求1的肉桂多酚提取物，其中步驟(4)中濾液濃縮后加水得上柱液，加水后總多酚含量為1. 5 5. Omg/ml。
6.權(quán)利要求1的肉桂多酚提取物，其中步驟(5)中上柱液上SP207樹脂柱后，先用 0. 乙酸沖洗，然后用50%乙醇洗脫，收集50%乙醇洗脫液。
7.權(quán)利要求1的肉桂多酚提取物，其中步驟(1)中CO2超臨界萃取的溫度為45°C 60°c，壓力為 32 !ΒδΜΡ。
8.權(quán)利要求1的肉桂多酚提取物，其中肉桂總多酚含量不低于沈％。
9.權(quán)利要求1至8中任一項(xiàng)的肉桂多酚提取物用于制備治療和/或預(yù)防2型糖尿病的藥物或保健品的用途。
全文摘要
本發(fā)明涉及天然藥物領(lǐng)域，具體涉及一種肉桂多酚提取物、其制備方法及其用途，其特征是將肉桂用CO2超臨界萃取除去脂溶性物質(zhì)，萃取殘?jiān)?jīng)水或水混合性溶劑提取，可得到總酚含量6％左右的肉桂多酚粗提取物，再采用SP207大孔吸附樹脂純化，得到的肉桂多酚提取物總多酚含量26％以上，其純度高，質(zhì)量穩(wěn)定。本發(fā)明的肉桂多酚具有在治療和預(yù)防2型糖尿病中降低血糖、調(diào)節(jié)血脂和改善肝功能的作用。
文檔編號(hào)A61K35/64GK102274244SQ20111019720
公開日2011年12月14日 申請(qǐng)日期2011年7月14日 優(yōu)先權(quán)日2011年7月14日
發(fā)明者徐開俊, 李揚(yáng), 李 誠(chéng), 郭守河 申請(qǐng)人:中國(guó)藥科大學(xué), 江蘇九壽堂生物制品有限公司