專利名稱：一種核酸和藥物組合物及其應(yīng)用的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及生物技術(shù)領(lǐng)域，具體地，涉及一種核酸、該核酸的應(yīng)用和一種藥物組合物。
背景技術(shù)：
肌動蛋白(Actin)是細(xì)胞的一種重要骨架蛋白，在細(xì)胞分泌、吞噬、移位、胞質(zhì)運(yùn)動和胞質(zhì)分裂等過程中起重要作用，且在不同物種之間高度保守。Actin具有至少六種亞型，其中β_肌動蛋白(β-Actin)是橫紋肌肌纖維中的一種主要蛋白質(zhì)成分，也是肌肉細(xì)絲及細(xì)胞骨架微絲的主要成分。正是基于β-Actin廣泛的分布和豐富的表達(dá)量，β -Actin被作為最常用的內(nèi)參基因。目前核酸干擾研究中，也使用針對β-Actin的干擾核酸作為內(nèi)參，但是現(xiàn)有的針對β-Actin的干擾核酸的體內(nèi)干擾效果較差。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的是克服現(xiàn)有的針對β -Actin的干擾核酸的體內(nèi)干擾效果較差的缺陷，提供一種體內(nèi)干擾效果較好的針對β-Actin的干擾核酸。為了實(shí)現(xiàn)上述目的，本發(fā)明提供了一種核酸，該核酸含有正義鏈序列為SEQ IDNO:1且反義鏈序列為SEQ ID NO:2的siRNA-14、正義鏈序列為SEQ ID NO:3且反義鏈序列為SEQ ID NO:4的siRNA-30、正義鏈序列為SEQ ID NO:20且反義鏈序列為SEQ ID NO:21的siRNA-13、正義鏈序列為SEQ ID NO:22且反義鏈序列為SEQ ID NO:23的siRNA-24和正義鏈序列為SEQ ID NO:24且反義鏈序列為SEQ ID NO:25的siRNA-25中的至少一種。本發(fā)明還提 供了另外一種核酸，該核酸為插入有編碼短發(fā)夾核糖核酸的核酸片段的質(zhì)粒，所述質(zhì)粒表達(dá)所述短發(fā)夾核糖核酸，所述編碼短發(fā)夾核糖核酸的核酸片段由兩個(gè)短反向重復(fù)片段和位于所述兩個(gè)短反向重復(fù)片段之間的環(huán)片段組成；所述兩個(gè)短反向重復(fù)片段的序列分別為SEQ ID NO:5和SEQ ID NO:6，或所述兩個(gè)短反向重復(fù)片段的序列分別為SEQ ID NO:7和SEQ ID NO:8，或所述兩個(gè)短反向重復(fù)片段的序列分別為SEQ ID N0:26和SEQ ID NO:27，或所述兩個(gè)短反向重復(fù)片段的序列分別為SEQ ID NO:28和SEQ ID NO:29，或所述兩個(gè)短反向重復(fù)片段的序列分別為SEQ ID NO:30 和 SEQ ID NO:31。本發(fā)明還提供了上述核酸在制備用于干擾β_肌動蛋白表達(dá)的藥物組合物中的應(yīng)用。本發(fā)明還提供了一種藥物組合物，該藥物組合物含有如上所述的核酸和藥學(xué)上可接受的載體。通過上述技術(shù)方案，本發(fā)明提供的核酸和藥物組合物能夠在體內(nèi)達(dá)到30%以上抑制率的干擾β-Actin表達(dá)的效果。本發(fā)明的其他特征和優(yōu)點(diǎn)將在隨后的具體實(shí)施方式
部分予以詳細(xì)說明。
具體實(shí)施例方式以下對本發(fā)明的具體實(shí)施方式
進(jìn)行詳細(xì)說明。應(yīng)當(dāng)理解的是，此處所描述的具體實(shí)施方式
僅用于說明和解釋本發(fā)明，并不用于限制本發(fā)明。在本發(fā)明中，使用的術(shù)語SiRNA是指小干擾核糖核酸，使用的術(shù)語ShRNA是指短發(fā)夾核糖核酸。本發(fā)明提供了一種核酸，該核酸含有正義鏈序列為SEQ ID NO:1且反義鏈序列為SEQ ID NO:2的siRNA-14、正義鏈序列為SEQ ID NO:3且反義鏈序列為SEQ ID NO:4的siRNA-30、正義鏈序列為SEQ ID NO:20且反義鏈序列為SEQ ID NO:21的siRNA-13、正義鏈序列為SEQ ID NO:22且反義鏈序列為SEQ ID NO:23的siRNA_24和正義鏈序列為SEQID NO:24且反義鏈序列為SEQ ID NO:25的siRNA-25中的至少一種。根據(jù)本發(fā)明所述的核酸，其中，優(yōu)選情況下，該核酸為所述siRNA-14或所述siRNA-30ο 根據(jù)本發(fā)明所述的核酸，其中，所述核酸含有核苷酸基團(tuán)作為基本結(jié)構(gòu)單元，所述核苷酸基團(tuán)含有磷酸基團(tuán)、核糖基團(tuán)和堿基，優(yōu)選情況下，所述核酸含有至少一個(gè)修飾的核苷酸基團(tuán)。所述修飾的核苷酸基團(tuán)不會導(dǎo)致所述核酸干擾β-Actin的功能的喪失。根據(jù)本發(fā)明所述的核酸，其中，所述修飾的核苷酸基團(tuán)為磷酸基團(tuán)、核糖基團(tuán)和堿基中的至少一種被修飾的核苷酸基團(tuán)。例如，磷酸基團(tuán)的修飾是指對磷酸基團(tuán)中的氧進(jìn)行修飾，包括硫代磷酸修飾(Phosphorthioate)和硼燒化磷酸鹽修飾(Boranophosphate)。如下式所示分別用硫和硼烷置換磷酸基團(tuán)中的氧。兩種修飾都能穩(wěn)定核酸的結(jié)構(gòu)，保持堿基配對的高特異性和高親和力。
權(quán)利要求
1.一種核酸，該核酸含有正義鏈序列為SEQ ID NO:1且反義鏈序列為SEQ ID NO:2的siRNA-14、正義鏈序列為SEQ ID NO:3且反義鏈序列為SEQ ID NO:4的siRNA_30、正義鏈序列為SEQ ID NO:20且反義鏈序列為SEQ ID NO:21的siRNA_13、正義鏈序列為SEQ IDNO:22且反義鏈序列為SEQ ID NO:23的siRNA_24和正義鏈序列為SEQ ID NO:24且反義鏈序列為SEQ ID NO:25的siRNA-25中的至少一種。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的核酸，其中，該核酸為所述siRNA-14或所述siRNA-30。
3.根據(jù)權(quán)利要求1或2所述的核酸，其中，所述核酸含有至少一個(gè)修飾的核苷酸基團(tuán)，所述修飾的核苷酸基團(tuán)為磷酸基團(tuán)、核糖基團(tuán)和堿基中的至少一種被修飾的核苷酸基團(tuán)。
4.根據(jù)權(quán)利要求3所述的核酸，其中，所述核糖基團(tuán)被修飾的核苷酸基團(tuán)為核糖基團(tuán)的2’ -OH被甲氧基或氟取代的核苷酸基團(tuán)。
5.根據(jù)權(quán)利要求4所述的核酸，其中，該核酸含有正義鏈序列為SEQID N0:10且反義鏈序列為SEQ ID NO: 11的siRNA(m)-14-1、正義鏈序列為SEQ ID NO:12且反義鏈序列為SEQ ID NO: 11的siRNA(m)-14-2、正義鏈序列為SEQ ID NO:13且反義鏈序列為SEQ IDNO:14的siRNA (m)-30-1和正義鏈序列為SEQ ID NO:15且反義鏈序列為SEQ ID NO:14的siRNA (m)-30-2中的至少一種。
6.一種核酸，該核酸為插入有編碼短發(fā)夾核糖核酸的核酸片段的質(zhì)粒，所述質(zhì)粒表達(dá)所述短發(fā)夾核糖核酸，所述編碼短發(fā)夾核糖核酸的核酸片段由兩個(gè)短反向重復(fù)片段和位于所述兩個(gè)短反向重復(fù)片段之間的環(huán)片段組成；所述兩個(gè)短反向重復(fù)片段的序列分別為SEQ ID NO:5和SEQ ID NO:6，或所述兩個(gè)短反向重復(fù)片段的序列分別為SEQ ID NO:7和SEQ ID NO:8，或所述兩個(gè)短反向重復(fù)片段的序列分別為SEQ ID N0:26·和SEQ ID NO:27，或所述兩個(gè)短反向重復(fù)片段的序列分別為SEQID N0:28和SEQ ID NO:29，或所述兩個(gè)短反向重復(fù)片段的序列分別為SEQ ID N0:30和SEQID NO:31o
7.根據(jù)權(quán)利要求6所述的核酸，其中，所述兩個(gè)短反向重復(fù)片段的序列分別為SEQIDNO:5和SEQ ID NO:6，或所述兩個(gè)短反向重復(fù)片段的序列分別為SEQ ID NO:7和SEQ IDNO:8。
8.權(quán)利要求1-7中任意一項(xiàng)所述的核酸在制備用于干擾β-肌動蛋白表達(dá)的藥物組合物中的應(yīng)用。
9.一種藥物組合物，該藥物組合物含有權(quán)利要求1-7中任意一項(xiàng)所述的核酸和藥學(xué)上可接受的載體。
10.根據(jù)權(quán)利要求9所述的藥物組合物，其中，相對于I重量份的所述核酸，所述藥學(xué)上可接受的載體的含量為1-100000重量份。
全文摘要
本發(fā)明提供了一種核酸，該核酸為siRNA或者插入有編碼短發(fā)夾核糖核酸的核酸片段的質(zhì)粒。本發(fā)明還提供了上述核酸在制備用于干擾β-肌動蛋白表達(dá)的藥物組合物中的應(yīng)用。本發(fā)明還提供了一種藥物組合物，該藥物組合物含有如上所述的核酸和藥學(xué)上可接受的載體。本發(fā)明提供的核酸和藥物組合物能夠在體內(nèi)達(dá)到30％以上抑制率的干擾β-Actin表達(dá)的效果。
文檔編號A61P43/00GK103074339SQ20111032826
公開日2013年5月1日 申請日期2011年10月26日 優(yōu)先權(quán)日2011年10月26日
發(fā)明者梁子才, 李德毓, 王建浩, 王茜 申請人:昆山市工業(yè)技術(shù)研究院小核酸生物技術(shù)研究所有限責(zé)任公司