專利名稱：用于葉酸靶向劑的改進(jìn)方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及用于制備葉酸靶向綴合物EC145的改進(jìn)方法，用改進(jìn)方法制備的綴合物EC145，和包含用改進(jìn)方法制備的綴合物EC145的藥物組合物。發(fā)明背景和概述
葉酸靶向藥物已開發(fā)并在臨床試驗(yàn)中作為癌癥治療藥試驗(yàn)。EC145包括高效長(zhǎng)春花生物堿細(xì)胞毒性化合物，綴合到葉酸的去乙酰長(zhǎng)春堿酰肼(DAVLBH)。EC145分子靶向在上皮瘤表面上發(fā)現(xiàn)的高水平葉酸受體，這些上皮瘤包括非小細(xì)胞肺癌(NSCLC)、卵巢癌、子宮內(nèi)膜癌和腎癌及其它癌，包括輸卵管癌和原發(fā)性腹膜癌。相信EC145結(jié)合到表達(dá)葉酸受體的腫瘤，這種葉酸受體將長(zhǎng)春花部分直接輸送到癌細(xì)胞，同時(shí)避開正常細(xì)胞。因此，在結(jié)合后，EC145通過胞吞進(jìn)入癌細(xì)胞，釋放DAVLBH，并引起細(xì)胞死亡或抑制細(xì)胞功能。EC145具有下式
權(quán)利要求
1.一種制備EC145的方法，所述方法包括在pH小于8的含水緩沖劑存在下用下式的化合物
2.權(quán)利要求I的方法，其中X為2-硫基吡啶基或3-硝基-2-硫基吡啶基。
3.權(quán)利要求I的方法，其中X為2-硫基吡啶基。
4.權(quán)利要求I至3中任一項(xiàng)的方法，其中緩沖劑具有5.9至6. 3的pH。
5.權(quán)利要求4的方法，其中緩沖劑具有5.9至6. I的pH。
6.權(quán)利要求I至5中任一項(xiàng)的方法，其中緩沖劑為磷酸鹽緩沖劑。
7.權(quán)利要求6的方法，其中緩沖劑為磷酸鈉緩沖劑。
8.權(quán)利要求I的方法，所述方法包括在pH5. 9至6. 3的磷酸鈉緩沖劑存在下用下式的化合物
9.權(quán)利要求I至8中任一項(xiàng)的方法，其中處理在包含乙腈的液體介質(zhì)中進(jìn)行。
10.權(quán)利要求I至9中任一項(xiàng)的方法，所述方法進(jìn)一步包括用式Y(jié)-C0-0-(CH2)2-S-X的酰化劑或其酸加成鹽處理去乙酰長(zhǎng)春堿酰肼的步驟，其中Y為離去基團(tuán)，以形成包含下式的化合物的反應(yīng)混合物
11.權(quán)利要求10的方法，其中?；瘎橄率降幕衔?br> 12.權(quán)利要求11的方法，其中酰化劑為下式的化合物
13.權(quán)利要求11的方法，其中酰化劑為下式的化合物
14.權(quán)利要求10至13中任一項(xiàng)的方法，其中去乙酰長(zhǎng)春堿酰肼用酰化劑在包含乙腈的溶劑中處理。
15.權(quán)利要求10至14中任一項(xiàng)的方法，其中去乙酰長(zhǎng)春堿酰肼以高純化形式提供。
16.權(quán)利要求10至15中任一項(xiàng)的方法，其中用?；瘎┨幚砣ヒ阴ｉL(zhǎng)春堿酰肼以生成包含下式化合物
17.權(quán)利要求I至16中任一項(xiàng)的方法，所述方法進(jìn)一步包括其中包含EC145的反應(yīng)混合物用檸檬酸鹽緩沖氯化鈉水溶液稀釋，并裝到聚苯乙烯-二乙烯基苯聚合物樹脂柱或柱體上純化的步驟。
18.權(quán)利要求17的方法，所述方法進(jìn)一步包括使用包含乙腈和檸檬酸鹽緩沖氯化鈉水溶液的流動(dòng)相從柱或柱體洗脫EC145產(chǎn)物。
19.權(quán)利要求I至18中任一項(xiàng)的方法，所述方法進(jìn)一步包括用超濾提供EC145作為水溶液中的純化產(chǎn)物的步驟。
20.權(quán)利要求I至19中任一項(xiàng)的方法，其中在任何步驟使用的水包含不超過約0.9ppm濃度的溶解氧。
21.綴合物EC145，所述綴合物EC145通過權(quán)利要求I至20中任一項(xiàng)所述的方法制備。
22.通過一種方法制備的綴合物EC145，所述方法包括在其中緩沖劑具有5.9至6. 3的PH的含水緩沖劑存在下用下式的化合物
23.權(quán)利要求22的綴合物，其中X為2-硫基吡啶基。
24.權(quán)利要求22或23的綴合物，其中所述方法進(jìn)一步包括用式Y(jié)-C0-0-(CH2)2-S-X的?；瘎┗蚱渌峒映甥}處理去乙酰長(zhǎng)春堿酰肼的步驟，其中Y為離去基團(tuán)，以形成包含下式的化合物的反應(yīng)混合物
25.權(quán)利要求24的綴合物，其中?；瘎橄率降幕衔?br> 26.—種藥物組合物，所述藥物組合物包含權(quán)利要求21至25中任一項(xiàng)所述的綴合物EC145與稀釋劑、賦形劑或載體。
全文摘要
本發(fā)明涉及用于制備葉酸靶向綴合物EC145的改進(jìn)方法，用改進(jìn)方法制備的綴合物EC145，和包含用改進(jìn)方法制備的綴合物EC145的藥物組合物。
文檔編號(hào)A61K31/519GK102984943SQ201180035630
公開日2013年3月20日 申請(qǐng)日期2011年5月19日 優(yōu)先權(quán)日2010年5月19日
發(fā)明者D.S.雷諾, K.M.斯坦福德, I.R.弗拉霍夫 申請(qǐng)人:恩多塞特公司