專利名稱：一種柳茶有效部位提取物及其制備方法和用途的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及中藥和保健品領(lǐng)域，具體涉及ー種柳茶有效部位提取物及其制備方法和用途。
背景技術(shù)：
肥胖科技的發(fā)展社會(huì)的進(jìn)步，使得人類從繁重的體力勞動(dòng)中脫離出來(lái)，通過(guò)操作機(jī)器，駕駛汽車，點(diǎn)擊鼠標(biāo)，完成日常的工作和生活。而另一方面，由于物質(zhì)生活的極大豐富，雞鴨魚(yú)肉等高能量富營(yíng)養(yǎng)的食品成為尋常百姓家里的常見(jiàn)菜品。于是吃的多而動(dòng)的少，讓越來(lái)越多的人得上富貴病肥胖，繼而引發(fā)高血糖，高血脂以及高血壓，嚴(yán)重危害老百姓的生命健康，盡管醫(yī)學(xué)手段不斷的進(jìn)步和發(fā)展，三高人群依賴并通過(guò)藥物維持生命活動(dòng)。世界衛(wèi)生組織肥胖癥學(xué)會(huì)向社會(huì)發(fā)出警示肥胖本身就是ー種疾病，其危害程度高于吸煙4倍，控制肥胖癥是降低慢性病發(fā)病率和病死率的一個(gè)關(guān)鍵因素。全球范圍看，經(jīng)濟(jì)最為發(fā)達(dá) 的美國(guó)，肥胖人群占全部人口的28. 8%，高血壓，高血糖，高血脂在美國(guó)50歲以上人口不作為疾病看待，人們普遍接受這樣的觀念隨著年齡增大，三高是伴生而來(lái)的身體不適，通過(guò)藥物的控制，使得人的生命活動(dòng)處于維持的狀態(tài)。而經(jīng)濟(jì)水平相對(duì)落后的中國(guó)，肥胖人群占人口總數(shù)的6. 72%，這ー數(shù)字城市比例相對(duì)于農(nóng)村要高出很多。根據(jù)近十年的發(fā)展變化看，中國(guó)的百姓肥胖及三高的比例正大踏步的向美國(guó)追趕，作為人口占世界19%的中國(guó)，隨著城市化的進(jìn)程以及物質(zhì)生活的極大進(jìn)步，在未來(lái)十年中以15%的比例來(lái)估算，中國(guó)將會(huì)有2億多的人口進(jìn)入肥胖者行列，這些人群帶來(lái)的三高的疾病及其國(guó)民將使用的藥物和付出的代價(jià)來(lái)看，那將是非常龐大的數(shù)量級(jí)。如何控制這種非原發(fā)性肥胖癥，富營(yíng)養(yǎng)化導(dǎo)致的三高問(wèn)題，是所有健康相關(guān)領(lǐng)域工作者所共同關(guān)注的核心問(wèn)題。社會(huì)急需健康減肥降脂的產(chǎn)品，主動(dòng)參與機(jī)體脂肪代謝，控制人體膽固醇及血糖處于合理水平。柳茶學(xué)名是鮮卑花屬-Sibiraea Maxim的枝葉。落葉灌木，高約I. 5米；小
枝粗壯，圓柱形，光滑無(wú)毛，幼時(shí)紫紅色，老時(shí)黑褐色；冬芽卵形，先端急尖，外被紫褐色鱗片。本屬有4種，分布?xì)W洲、前蘇聯(lián)西伯利亞及我國(guó)西部。我國(guó)產(chǎn)三種，一種為毛葉鮮卑花Sibiraea tomentosa Diels.,分布于云南西北部；另兩種為鮮卑花Sibiraea laevigata(L. ) Maxim.和窄葉鮮卑花 Sibiraea angustata (Rehd. ) Hand.-Mazz.,分布于青海(海晏、西寧)、甘肅(岷縣、西固)、西藏(索縣)。生于高山、溪邊或草甸灌叢中，海抜2000— 4000米的灌木叢中。蘇聯(lián)西伯利亞南部也有分布。柳茶為薔薇科鮮卑花屬植物鮮卑花 Sibiraea laevigata (L. ) Maxim.和窄葉鮮卑花 Sibiraea angustata (Rehd.)Hand. -Mazz.的嫩枝和葉子入藥，為藏族民間常用藥物。因其葉型像柳葉，故稱為“柳茶”，藏名為尼阿措。藏族民間常用作茶飲，用來(lái)治療食后腹脹等諸多原因引起的消化不良等癥狀，藏醫(yī)藥文獻(xiàn)收載，主治熱病和疫病。柳茶在西藏民間作為藥食同源的產(chǎn)品使用，由于藏民的生活飲食的牛羊肉高油膩的特點(diǎn)，柳茶成為生活中不可或缺的重要食品，餐后飲用，有助于消化，促進(jìn)腸道蠕動(dòng)，排便成形性好，以及明顯的減肥。廣泛的民間應(yīng)用及長(zhǎng)期的使用，充分驗(yàn)證了對(duì)人體的安全性。
目前文獻(xiàn)報(bào)道了柳茶的藥學(xué)研究中西醫(yī)結(jié)合消化雜志，2009，17，376 ;中藥材，2011,34,922 ；中國(guó)中藥雜志，1995，20，746 ;中草藥，1995，26，473 ;免疫學(xué)雜志，1996，12,237 ;中藥新藥與臨床藥理，2010，21，148，也有一些專利CN1857458 ；CN102188515 ；CN101732441 ;CN101077881公開(kāi)了柳茶的一些提取物能夠體現(xiàn)一定程度的減肥降脂、生發(fā)、促進(jìn)消化、調(diào)節(jié)便秘等作用，但是這些提取物或者提煉エ藝復(fù)雜成本高且提取率過(guò)低、沒(méi)有實(shí)際生產(chǎn)價(jià)值且沒(méi)有臨床驗(yàn)證(CN101077881)，或者活性成分純度不夠高、顏色深、療效不夠顯著并有強(qiáng)烈的異味或若干副作用等。因此高效提取柳茶的高純度有效活性成分，研究藥理作用和臨床實(shí)踐具有十分重要的意義。同時(shí)有不少文獻(xiàn)報(bào)道熱帶亞熱帶植物學(xué)報(bào)，1999，7，248 ;中華實(shí)用中西醫(yī)雜志，2005，18，1530 ;中國(guó)中藥雜志，1992，17，360 ;藥學(xué)學(xué)報(bào)，1993，28，798 ;華西藥學(xué)雜志，2004，19，113 ;華西藥學(xué)雜志，2004，19，178柳茶提取物至少有60多種化學(xué)成分，其中有異阿魏酸、咖啡酸、羽扇豆 酸、羽扇豆酷、咖啡酸葡萄糖醇酷、2-羥基熊果酸、熊果酸、齊墩果醇酸、阿魏酸、鮮卑花酷、十八酸等，其中大部分的報(bào)道的化學(xué)成分是已知的，特別是揮發(fā)性化學(xué)成分和上述羧酸類物質(zhì)單獨(dú)使用并不具有明顯減肥降脂作用，而柳茶提取物中ー些糖苷類化合物可能有很好的減肥降脂作用。因此，在柳茶提取物中如能夠高效除去羧酸類物質(zhì)(比如用稀堿水處理)和揮發(fā)性輕組分(比如利用石油醚洗滌脫脂)之后，進(jìn)行快速簡(jiǎn)單的柱層析分離(兼具脫色作用)，使用硅膠薄層色譜法檢測(cè)淋洗液，并利用糖類物質(zhì)的特征顯色反應(yīng)，收集主要含有糖苷類溶質(zhì)的淋洗液,從而獲得柳茶有效部位提取物，該提取物將富集較高純度的糖苷類化合物；使用該エ藝制備富集較高純度的糖苷類化合物的柳茶提取物，生產(chǎn)成本低廉，顔色好，大生產(chǎn)エ藝容易實(shí)現(xiàn)，那么研究此類提取物的用途并進(jìn)行動(dòng)物實(shí)驗(yàn)以及進(jìn)ー步的臨床實(shí)驗(yàn)，就更顯得非常有實(shí)際意義。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的是提供ー種柳茶有效部位提取物及其制備方法和用途。本發(fā)明的柳茶有效部位提取物，通過(guò)以下制備步驟獲得
(1)將柳茶干燥粉碎，用質(zhì)量濃度為I%的碳酸氫鈉水溶液加熱回流2小時(shí)，碳酸氫鈉水溶液與柳茶原料的質(zhì)量比是10 :1 15 1，所得水提物用石油醚洗滌脫脂后濃縮至干，即得柳茶水提膏；
(2)將步驟(I)的柳茶水提膏粉碎，用こ醇加熱回流2小時(shí)，こ醇與柳茶水提膏的質(zhì)量比是3 :1 6:1，こ醇提取液濃縮至干后獲得こ醇提取物；
(3)將步驟(2)的こ醇提取物用活性炭或硅膠柱層析，こ醇提取物與吸附劑活性炭或硅膠的質(zhì)量比是I :1 I :2，用體積濃度為20%的こ醇水溶液作為洗脫劑進(jìn)行洗脫，使用硅膠薄層色譜法檢測(cè)淋洗液和洗脫進(jìn)程，噴灑體積濃度為10%硫酸的甲醇溶液作為顯色齊U，收集110°C下加熱15分鐘能顯黒色斑點(diǎn)的淋洗液，持續(xù)進(jìn)行洗脫直到洗脫物質(zhì)完全消失，合并收集的顯黑色斑點(diǎn)的淋洗液，濃縮至干，得到柳茶有效部位提取物，其中硅膠薄層色譜法的展開(kāi)劑是體積濃度為50%甲醇的こ酸こ酯溶液。ー種柳茶有效部位提取物的制備方法，包括以下步驟
(I)將柳茶干燥粉碎，用質(zhì)量濃度為I %的碳酸氫鈉水溶液加熱回流2小時(shí)，碳酸氫鈉水溶液與柳茶原料的質(zhì)量比是10 :1 15 1，所得水提物用石油醚洗滌脫脂后濃縮至干，即得柳茶水提膏；(2)將步驟(I)的柳茶水提膏粉碎，用乙醇加熱回流2小時(shí)，乙醇與柳茶水提膏的質(zhì)量比是3 :1 6:1，乙醇提取液濃縮至干后獲得乙醇提取物；
(3)將步驟(2)的乙醇提取物用活性炭或硅膠柱層析，乙醇提取物與吸附劑活性炭或硅膠的質(zhì)量比是I :1 I :2，用體積濃度為20%的乙醇水溶液作為洗脫劑進(jìn)行洗脫，使用硅膠薄層色譜法檢測(cè)淋洗液和洗脫進(jìn)程，噴灑體積濃度為10%硫酸的甲醇溶液作為顯色齊U，收集110°C下加熱15分鐘能顯黑色斑點(diǎn)的淋洗液，持續(xù)進(jìn)行洗脫直到洗脫物質(zhì)完全消失，合并收集的顯黑色斑點(diǎn)的淋洗液，濃縮至干，得到柳茶有效部位提取物，其中硅膠薄層色譜法的展開(kāi)劑是體積濃度為50%甲醇的乙酸乙酯溶液。本發(fā)明的柳茶有效部位提取 物在制備降血脂藥物中的應(yīng)用。柳茶有效部位提取物活性成分日劑量為I 200毫克/公斤體重，可以一次或分為2 4次施用。本發(fā)明的柳茶有效部位提取物在制備減肥藥物中的應(yīng)用。柳茶有效部位提取物活性成分日劑量為I 200暈克/公斤體重,可以一次或分為2 4次施用。本發(fā)明的柳茶有效部位提取物在制備減肥降脂保健品中的應(yīng)用。柳茶有效部位提取物活性成分日劑量為I 200毫克/公斤體重，可以一次或分為2 4次施用。本發(fā)明的柳茶有效部位提取物在制備健康食品中作為添加劑應(yīng)用，柳茶有效部位提取物活性成分用量相當(dāng)于食品重量的0. 01 10%。上述的健康食品是面包、面條、蛋糕、餅干、牛奶、酸奶、飲料、礦泉水、調(diào)味品(例如醬油)、食用油(例如菜籽油、麻油、茶油、玉米油和花生油)和酒(例如黃酒、啤酒、白酒)。本發(fā)明的柳茶有效部位提取物在制備降血脂藥物、減肥藥物、減肥降脂保健品應(yīng)用中，其劑型為醫(yī)學(xué)上可以接受的各類片劑、膠囊劑、顆粒劑、口服液或沖劑。各種劑型可以按照藥學(xué)領(lǐng)域的常規(guī)生產(chǎn)方法制備。本發(fā)明的柳茶有效部位提取過(guò)程中，1%的碳酸氫鈉水溶液能夠高效除去羧酸類物質(zhì)，并利用石油醚洗滌脫脂可以進(jìn)一步除去揮發(fā)性輕組分，乙醇提取物進(jìn)行快速簡(jiǎn)單的活性炭或硅膠柱層析分離，(活性炭或硅膠兼具脫色作用)，使用硅膠薄層色譜法檢測(cè)淋洗液，并利用糖類物質(zhì)的特征顯色反應(yīng)，收集主要含有糖苷類溶質(zhì)的淋洗液,從而獲得柳茶有效部位提取物，該提取物將富集較高純度的糖苷類化合物，因此使用該工藝獲得的柳茶有效部位提取物富集了較高純度或濃度的糖苷類活性化合物。具體實(shí)施方法
以下實(shí)施例將有助于理解本發(fā)明，但不限于本發(fā)明的內(nèi)容
實(shí)施例I柳茶有效部位提取物的制備
將10公斤干燥的柳茶進(jìn)行粉碎，然后以100升質(zhì)量濃度為I %的碳酸氫鈉水溶液加熱回流2小時(shí)提取，濾除不溶性殘?jiān)螅盟嵛镉?0升石油醚洗滌脫脂后濃縮至干，制得
I.3公斤柳茶水提膏；用6公斤乙醇加熱回流2小時(shí)提取上述粉碎的柳茶水提膏，乙醇提取液濃縮至干后獲得0. 54公斤乙醇提取物；該乙醇提取物用活性炭柱層析，吸附劑活性炭的用量是I公斤，用體積濃度為20%的乙醇水溶液作為洗脫劑進(jìn)行洗脫，使用硅膠薄層色譜法檢測(cè)淋洗液和洗脫進(jìn)程，噴灑體積濃度為10%硫酸的甲醇溶液作為顯色劑，收集110°C下加熱15分鐘能顯黑色斑點(diǎn)的淋洗液，持續(xù)進(jìn)行洗脫直到洗脫物質(zhì)完全消失，合并收集的顯黑色斑點(diǎn)的淋洗液，然后濃縮至干即得到77克柳茶有效部位提取物，其中硅膠薄層色譜法的展開(kāi)劑是體積濃度為50%甲醇的乙酸乙酯溶液。
實(shí)施例2柳茶有效部位提取物的安全性檢查
按2010年中國(guó)藥典第三部的《異常毒性檢查法》:每藥品各5只健康小鼠，供試品是實(shí)施例I制備的柳茶有效部位提取物，腹腔注射，按照常規(guī)的急毒性試驗(yàn)進(jìn)行檢測(cè)，結(jié)果正常飼養(yǎng)，觀察7天內(nèi) 未見(jiàn)死亡。實(shí)施例3柳茶有效部位提取物作為有效添加劑的健康食品
實(shí)施例I制備的柳茶有效部位提取物可以以添加劑形式包含于食品如面包、面條、蛋糕、餅干、牛奶、酸奶以及飲料或礦泉水，調(diào)料例如醬油，油例如菜籽油、麻油、茶油、玉米油和花生油，酒例如黃酒、啤酒、白酒等。添加劑用量相當(dāng)于食品重量的0. 01 10%。
實(shí)施例4柳茶有效部位提取物作為活性成分的膠囊劑的制備
將3重量份的按實(shí)施例I制備的柳茶有效部位提取物、0. 2重量份的糊精和0. 2重量份的硬脂酸鎂充分混合。將0. 25克該混合物裝入一個(gè)膠殼中即得一粒膠囊。實(shí)施例5柳茶有效部位提取物作為活性成分的顆粒劑的制備
將4重量份的按實(shí)施例I制備的柳茶有效部位提取物、0. 5重量份的糊精、0. 3重量份的玉米淀粉和0. 2重量份的硬脂酸鎂充分混合，一步制粒，分裝即得。實(shí)施例6柳茶有效部位提取物作為活性成分的片劑的制備
將2重量份的按實(shí)施例I制備的柳茶有效部位提取物、0. 2重量份的糊精、0. 3重量份的玉米淀粉和0. 5重量份的硬脂酸鎂充分混合，一步壓成片，即得片劑，每片0. 3克。實(shí)施例7柳茶有效部位提取物作為活性成分的口服液的制備
取適量蒸餾水，加入2克按實(shí)施例I制備的柳茶有效部位提取物、10克蔗糖粉、攪拌溶解，過(guò)濾，濾液補(bǔ)充蒸餾水至100毫升，加入適量食用香精，攪拌均勻，分裝，每支10毫升，壓蓋，消毒，即得口服液。實(shí)施例8柳茶有效部位提取物作為活性成分的沖劑的制備
把I重量份按實(shí)施例I制備的柳茶有效部位提取物、0. I重量份的糊精、0. 3重量份蔗糖粉混合，再加入適量70%的乙醇，拌合成軟材，擠壓過(guò)篩(12—14目)制顆粒，60° C干燥，整粒，按每袋相當(dāng)于按實(shí)施例I制備的柳茶有效部位提取物0. I克分裝于塑料袋中，密封，即得。實(shí)施例9柳茶有效部位提取物作為活性成分的減肥功能的臨床應(yīng)用
參照保健食品檢驗(yàn)與評(píng)價(jià)技術(shù)規(guī)范實(shí)施手冊(cè)(2003版)，不替代主食的減肥功能試驗(yàn)采用自身對(duì)照及組間對(duì)照試驗(yàn)設(shè)計(jì)。受試對(duì)象為100例單純性肥胖志愿者，用本發(fā)明實(shí)施例4制備的膠囊，每粒0. 25克，每天服用3次，每次I粒，連續(xù)服用35天后，所得的部分功能性指標(biāo)見(jiàn)表1，試食組體重平均下降3. 8±2. 9千克；經(jīng)試食組自身比較及試食后試食組與對(duì)照組比較，差異具有顯著性；試驗(yàn)前后受試者運(yùn)動(dòng)耐力和其它健康指標(biāo)沒(méi)有明顯變化，并已經(jīng)排除膳食和運(yùn)動(dòng)對(duì)減肥影響。表I
權(quán)利要求
1.一種柳茶有效部位提取物，其特征在于，所述提取物通過(guò)以下制備步驟獲得 (1)將柳茶干燥粉碎，用質(zhì)量濃度為I%的碳酸氫鈉水溶液加熱回流2小時(shí)，碳酸氫鈉水溶液與柳茶原料的質(zhì)量比是10 :1 15 1，所得水提物用石油醚洗滌脫脂后濃縮至干，即得柳茶水提膏； (2)將步驟(I)的柳茶水提膏粉碎，用乙醇加熱回流2小時(shí)，乙醇與柳茶水提膏的質(zhì)量比是3 :1 6:1，乙醇提取液濃縮至干后獲得乙醇提取物； (3)將步驟(2)的乙醇提取物用活性炭或硅膠柱層析，乙醇提取物與吸附劑活性炭或硅膠的質(zhì)量比是I :1 I :2，用體積濃度為20%的乙醇水溶液作為洗脫劑進(jìn)行洗脫，使用硅膠薄層色譜法檢測(cè)淋洗液和洗脫進(jìn)程，噴灑體積濃度為10%硫酸的甲醇溶液作為顯色 齊U，收集110°C下加熱15分鐘能顯黑色斑點(diǎn)的淋洗液，持續(xù)進(jìn)行洗脫直到洗脫物質(zhì)完全消失，合并收集的顯黑色斑點(diǎn)的淋洗液，濃縮至干，得到柳茶有效部位提取物，其中硅膠薄層色譜法的展開(kāi)劑是體積濃度為50%甲醇的乙酸乙酯溶液。
2.一種柳茶有效部位提取物的制備方法，其特征在于，所述制備方法包括以下步驟 (1)將柳茶干燥粉碎，用質(zhì)量濃度為I%的碳酸氫鈉水溶液加熱回流2小時(shí)，碳酸氫鈉水溶液與柳茶原料的質(zhì)量比是10 :1 15 1，所得水提物用石油醚洗滌脫脂后濃縮至干，即得柳茶水提膏； (2)將步驟(I)的柳茶水提膏粉碎，用乙醇加熱回流2小時(shí)，乙醇與柳茶水提膏的質(zhì)量比是3 :1 6:1，乙醇提取液濃縮至干后獲得乙醇提取物； (3)將步驟(2)的乙醇提取物用活性炭或硅膠柱層析，乙醇提取物與吸附劑活性炭或硅膠的質(zhì)量比是I :1 I :2，用體積濃度為20%的乙醇水溶液作為洗脫劑進(jìn)行洗脫，使用硅膠薄層色譜法檢測(cè)淋洗液和洗脫進(jìn)程，噴灑體積濃度為10%硫酸的甲醇溶液作為顯色齊U，收集110°C下加熱15分鐘能顯黑色斑點(diǎn)的淋洗液，持續(xù)進(jìn)行洗脫直到洗脫物質(zhì)完全消失，合并收集的顯黑色斑點(diǎn)的淋洗液，濃縮至干，得到柳茶有效部位提取物，其中硅膠薄層色譜法的展開(kāi)劑是體積濃度為50%甲醇的乙酸乙酯溶液。
3.權(quán)利要求I所述的柳茶有效部位提取物在制備降血脂藥物中的應(yīng)用。
4.權(quán)利要求I所述的柳茶有效部位提取物在制備減肥藥物中的應(yīng)用。
5.權(quán)利要求I所述的柳茶有效部位提取物在制備減肥降脂保健品中的應(yīng)用。
6.權(quán)利要求I所述的柳茶有效部位提取物在制備健康食品中作為添加劑的應(yīng)用。
7.根據(jù)權(quán)利要求6所述的柳茶有效部位提取物在制備健康食品作為添加劑，其特征在于所說(shuō)的健康食品是面包、面條、蛋糕、餅干、牛奶、酸奶、飲料、礦泉水、調(diào)味品、食用油和酒。
全文摘要
本發(fā)明涉及一種柳茶有效部位提取物及其制備方法和用途。柳茶有效部位提取物通過(guò)以下制備方法得到以稀堿水熱提粉碎后的柳茶，所得水提物用石油醚洗滌脫脂后濃縮至干并粉碎，然后用乙醇在加熱回流條件下進(jìn)一步提取，乙醇溶液濃縮至干后獲得乙醇提取物，該提取物用活性炭或硅膠柱層析后就制得柳茶有效部位提取物。臨床應(yīng)用證明，通過(guò)本發(fā)明方法制備的柳茶有效部位提取物安全有效，可以用于減肥降脂的藥物或保健食品以及作為添加劑用于飲料等健康食品。
文檔編號(hào)A61P3/04GK102641352SQ20121012122
公開(kāi)日2012年8月22日 申請(qǐng)日期2012年4月24日 優(yōu)先權(quán)日2012年4月24日
發(fā)明者吳承龍, 林旭鋒 申請(qǐng)人:杭州柳茶醫(yī)藥科技有限公司