專(zhuān)利名稱(chēng)：一種明日葉中查耳酮類(lèi)成分的提取工藝的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明屬化學(xué)成分提取技術(shù)領(lǐng)域，具體涉及一種明日葉中查耳酮類(lèi)成分的提取工藝。
背景技術(shù)：
明日葉是原產(chǎn)于日本八丈島、伊豆七島的一種蔬菜，來(lái)源為芹科(傘形科，拉 丁名Umbelliferae)植物明日葉的根、莖、葉，其拉丁學(xué)名Angelica Keiskei Koidzumi。明日葉中主要成分為查耳酮類(lèi)和香豆素類(lèi)化合物，其中以查耳酮類(lèi)黃色素化合 物的含量最高。黃色素是明日葉中多種水溶性有效成分的混合物，屬查耳酮類(lèi)有效部位 群，易溶于水、稀醇等極性溶劑，不溶于無(wú)水乙醇、丙酮、乙醚和石油醚，具有良好的 抗腫瘤、抗癌、抗?jié)?、抗血栓、降血壓、抗過(guò)敏、抗艾滋病、防癡呆癥、防糖尿病等 諸多功效，而其中尤以4-hydroxyderrcin和黃腐酚(xanthoangelol)效果最好。目前，國(guó)內(nèi)對(duì)于查耳酮的研究，僅僅停留在采用有機(jī)化學(xué)合成方法制備查耳酮 (作為黃酮類(lèi)化合物的中間體)，所得到的產(chǎn)物副反應(yīng)較多，耗時(shí)長(zhǎng)，操作繁瑣，后處理 不易，同時(shí)，產(chǎn)品純度較低且存在對(duì)映異構(gòu)體等眾多缺點(diǎn)，而對(duì)于從明日葉中提取查耳 酮類(lèi)有效成分，用于食品和藥品方面的研究較少，經(jīng)檢索還沒(méi)有相關(guān)文獻(xiàn)。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的是提供一種明日葉中查耳酮類(lèi)成分的提取工藝，采用乙醇作為提 取溶劑可有效地降低查耳酮酶的活性，避免提取時(shí)查耳酮的分解，提高查耳酮的提取 率，以及查耳酮內(nèi)成分4-hydroxyderrcin (4-羥基德里辛，簡(jiǎn)稱(chēng)4HD)和xanthoangelol (黃 腐酚，簡(jiǎn)稱(chēng)XA)的提取率。本發(fā)明所采用的技術(shù)方案一種明日葉中查耳酮類(lèi)成分的提取工藝，是選取傘形科植物明日葉(Angelica Keiskei Koidzumi)的干燥莖葉，粉碎，按重量比計(jì)用9 11倍量40 % 60 %乙醇于 65°C 75°C熱浸提取2 4次，每次2 3h，合并提取液，減壓回收乙醇至無(wú)醇味得到 流浸膏；按重量比計(jì)用7 9倍量的水溶解流浸膏2次，合并水提取液，然后用乙酸乙酯 萃取5 7次，合并萃取液，減壓回收乙酸乙酯得萃取物，即得查耳酮粗品，查耳酮粗品 采用AB-8大孔吸附樹(shù)脂柱，以蒸餾水為洗脫液，樹(shù)脂粒徑30目，流速為15ml/min，進(jìn) 行分離純化，收集洗脫液，洗脫液再經(jīng)100目硅膠層析柱進(jìn)行分離純化，得查耳酮。將上述查耳酮采用氯仿-甲醇(100 1 —30 1)混合液進(jìn)行梯度洗脫，HPLC 檢測(cè)收集目標(biāo)物4HD及XA，再用50%乙醇進(jìn)行重結(jié)晶兩次，最終得到4HD及XA純品。所述氯仿-甲醇混合液是將氯仿和甲醇按體積比為氯仿甲醇=100 1 30 1的比例進(jìn)行混合。本發(fā)明的優(yōu)點(diǎn)在于
(1)反應(yīng)條件溫和，關(guān)鍵工藝參數(shù)易于控制。
(2)查耳酮提取工藝中采用乙醇可對(duì)明日葉中的查耳酮進(jìn)行有效提取，優(yōu)點(diǎn)在于 存在植物體內(nèi)的查耳酮酶在提取時(shí)會(huì)分解查耳酮，使其變?yōu)橛坞x態(tài)，降低了其水溶性， 采用乙醇能降低其內(nèi)酶的活性，從而使查耳酮盡可能的提取完全，提高提取率。
(3)采用100目硅膠層析柱進(jìn)行分離純化，用氯仿-甲醇混合液洗脫劑進(jìn)行梯度 洗脫，對(duì)查耳酮的分離效果佳，產(chǎn)品純度高，最終產(chǎn)物提取率及產(chǎn)品純度相對(duì)較高。
(4)采用50%乙醇低溫(0°C)進(jìn)行重結(jié)晶，所得產(chǎn)品純度較高，避免了其他有機(jī) 溶劑重結(jié)晶引起的目標(biāo)產(chǎn)物構(gòu)型的轉(zhuǎn)變(如在50°C以上黃腐酚易產(chǎn)生熱異構(gòu)化生成黃腐 酮從而使得目標(biāo)產(chǎn)物降低)。
具體實(shí)施方式
下面用非限定性實(shí)施例對(duì)本發(fā)明作進(jìn)一步說(shuō)明。
實(shí)施例一
選取傘形科植物明日葉(Angelica Keiskei Koidzumi)的干燥莖葉2.0kg，粉碎，用10倍量50%乙醇、70°C熱浸提取2次，每次Zh，合并提取液，減壓回收乙醇至無(wú)醇味得 流浸膏，向其內(nèi)加8倍量水溶解2次，合并水提取液，并采用乙酸乙酯萃取6次，合并萃 取液，減壓回收乙酸乙酯得其萃取物，即得查耳酮粗品51. ，萃取物采用AB-8大孔吸 附樹(shù)脂柱，以蒸餾水為洗脫液，樹(shù)脂粒徑30目，流速為15ιη1/ ι，進(jìn)行分離純化，收集 洗脫液，洗脫液再經(jīng)100目硅膠層析柱進(jìn)行分離純化，得黃色提取物43Jg。將提取物與 硼酸進(jìn)行反應(yīng)，反應(yīng)產(chǎn)物顯亮黃色。將提取物與鹽酸-鎂粉進(jìn)行反應(yīng)，呈陰性。由此判 斷所得提取物為查耳酮。
采用氯仿-甲醇(90 1)混合液對(duì)所得查耳酮進(jìn)行梯度洗脫，HPLC檢測(cè)收集 目標(biāo)物4HD及XA，再用50%乙醇進(jìn)行重結(jié)晶兩次，最終得到4HD及XA純品，分別為 18.44g 禾P 6.34g。
實(shí)施例二
選取傘形科植物明日葉(Angelica Keiskei Koidzumi)的干燥莖葉3.0kg，粉碎，按重量比計(jì)用9倍量45%乙醇于68°C熱浸提取3次，每次3h，合并提取液，減壓回收乙 醇至無(wú)醇味得到流浸膏；按重量比計(jì)用7倍量的水溶解流浸膏2次，合并水提取液，然 后用乙酸乙酯萃取7次，合并萃取液，減壓回收乙酸乙酯得其萃取物，即得查耳酮粗品 80.4g,查耳酮粗品采用AB-8大孔吸附樹(shù)脂柱，以蒸餾水為洗脫液，樹(shù)脂粒徑30目，流 速為15ιη1/ ι，進(jìn)行分離純化，收集洗脫液，洗脫液再經(jīng)100目硅膠層析柱進(jìn)行分離純 化，得黃色提取物68.相。將提取物與硼酸進(jìn)行反應(yīng)，反應(yīng)產(chǎn)物顯亮黃色。將提取物與 鹽酸-鎂粉進(jìn)行反應(yīng)，呈陰性。由此判斷所得提取物為查耳酮。
采用氯仿-甲醇(60 1)混合液對(duì)所得查耳酮進(jìn)行梯度洗脫，HPLC檢測(cè)收集 目標(biāo)物4HD及ΧΑ，再用50%乙醇進(jìn)行重結(jié)晶兩次，最終得到4HD及XA純品，分別為 29.53g 和 11.25g。
實(shí)施例三
選取傘形科植物明日葉(AngelicaICeiskeiKoidzumi)的干燥莖葉1.01 ，粉碎，按重量比計(jì)用11倍量55%乙醇于73°C熱浸提取3次，每次4h，合并提取液，減壓回收乙醇至無(wú)醇味得到流浸膏；按重量比計(jì)用9倍量的水溶解流浸膏2次，合并水提取液，然 后用乙酸乙酯萃取5次，合并萃取液，減壓回收乙酸乙酯得其萃取物，即得查耳酮粗品 24.8g，查耳酮粗品采用AB-8大孔吸附樹(shù)脂柱，以蒸餾水為洗脫液，樹(shù)脂粒徑30目，流 速為15ml/min，進(jìn)行分離純化，收集洗脫液，洗脫液再經(jīng)100目硅膠層析柱進(jìn)行分離純 化，得黃色提取物21.3g。將提取物與硼酸進(jìn)行反應(yīng)，反應(yīng)產(chǎn)物顯亮黃色。將提取物與 鹽酸_鎂粉進(jìn)行反應(yīng)，呈陰性。由此判斷所得提取物為查耳酮。 采用氯仿-甲醇(40 1)混合液對(duì)所得查耳酮進(jìn)行梯度洗脫，HPLC檢測(cè)收集 目標(biāo)物4HD及XA，再用50%乙醇進(jìn)行重結(jié)晶兩次，最終得到4HD及XA純品，分別為 10.26g 和 3.57g。
權(quán)利要求
1.一種明日葉中查耳酮類(lèi)成分的提取工藝，其特征是選取傘形科植物明日葉的干燥 莖葉，粉碎，按重量比計(jì)用9 11倍量40% 60%乙醇于65°C 75°C熱浸提取2 4 次，每次2 3h，合并提取液，減壓回收乙醇至無(wú)醇味得到流浸膏；按重量比計(jì)用7 9 倍量的水溶解流浸膏2次，合并水提取液，然后用乙酸乙酯萃取5 7次，合并萃取液， 減壓回收乙酸乙酯得萃取物，即得查耳酮粗品，查耳酮粗品采用AB-8大孔吸附樹(shù)脂柱， 以蒸餾水為洗脫液，樹(shù)脂粒徑30目，流速為15ml/min，進(jìn)行分離純化，收集洗脫液，洗 脫液再經(jīng)100目硅膠層析柱進(jìn)行分離純化，得查耳酮。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的明日葉中查耳酮類(lèi)成分的提取工藝，其特征在于將所得 查耳酮采用氯仿_甲醇混合液進(jìn)行梯度洗脫，HPLC檢測(cè)收集目標(biāo)物4HD及XA，再用 50%乙醇進(jìn)行重結(jié)晶兩次，最終得到4HD及XA純品。
3.根據(jù)權(quán)利要求2所述的明日葉中查耳酮類(lèi)成分的提取工藝，其特征在于所述氯 仿-甲醇混合液是將氯仿和甲醇按體積比為氯仿甲醇=100 1 30 1的比例進(jìn)行 混合ο
全文摘要
本發(fā)明屬化學(xué)成分提取技術(shù)領(lǐng)域，具體涉及一種明日葉中查耳酮類(lèi)成分的提取工藝，是選取明日葉的干燥莖葉，粉碎，用乙醇進(jìn)行熱浸提取，合并提取液，減壓回收乙醇至無(wú)醇味得到流浸膏；用水溶解流浸膏后用乙酸乙酯進(jìn)行萃取，減壓回收乙酸乙酯得萃取物，即得查耳酮粗品，查耳酮粗品采用AB-8大孔吸附樹(shù)脂柱進(jìn)行分離純化，收集洗脫液，洗脫液再經(jīng)100目硅膠層析柱進(jìn)行分離純化，得查耳酮。本發(fā)明采用乙醇作為提取溶劑可有效地降低查耳酮酶的活性，避免提取時(shí)查耳酮的分解，提高提取率，工藝簡(jiǎn)單，耗時(shí)短，為查耳酮的植物提取提供一條工業(yè)化途徑。
文檔編號(hào)C07C49/84GK102020544SQ201010299189
公開(kāi)日2011年4月20日 申請(qǐng)日期2010年9月29日 優(yōu)先權(quán)日2010年9月29日
發(fā)明者中山策敏, 滕秀蘭 申請(qǐng)人:海南蘭地高新科技有限公司