專利名稱：一種碳納米管-細(xì)胞生長因子復(fù)合敷料及其制備方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種碳納米管-細(xì)胞生長因子復(fù)合敷料的制備方法。
背景技術(shù)：
皮膚起著保護機體內(nèi)環(huán)境并維持其穩(wěn)定的作用，皮膚燒、創(chuàng)傷后治療的最終目標(biāo)就是促進創(chuàng)面愈合，重建或恢復(fù)皮膚屏障功能。隨著對傷口愈合研究機制的深入，人們認(rèn)識到使用敷料的目的遠(yuǎn)遠(yuǎn)不止是為了覆蓋創(chuàng)面，還應(yīng)具有吸附分泌物、殺滅細(xì)菌和促進傷口愈合的多重功效。納米敷料具有很強的吸附性，能起到抗菌膜屏障作用，防止創(chuàng)面感染、出血，促進創(chuàng)面修復(fù)而成為近年來的研究熱點。碳納米管敷料是目前比較成熟的納米輔料，具有一定的抗菌及促進創(chuàng)面愈合的療效，并且毒副作用小，使用方便。但碳納米管敷料的缺點是吸水性較差，隨體性欠佳，對創(chuàng)面黏附性強，給換藥帶來一定的困難，還不能很好地促進創(chuàng)面愈合，因此有待于進一步研究改進。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明旨在提供一種碳納米管-細(xì)胞生長因子復(fù)合敷料的制備方法。為了達(dá)到上述目的，本發(fā)明包括以下步驟1.酸化碳納米管(I)酸化碳納米管將85%-98· 3% (重量百分比)的濃硫酸20 IOOml、65%_85%(重量百分比)的濃硝酸10 50 ml和粒徑為30 nm 500 nm碳納米管O.1g 2. Og分散均勻后再放入60°C 100°C水浴中酸化O. 5 h 2 h ;(2)抽濾洗滌用孔徑為O. 11 μ m-0. 33 μ m的抽濾膜進行抽濾，并用蒸餾水洗滌至洗滌液pH值5. O 8. O ;(3)干燥稱重將經(jīng)步驟(2)濾出的碳納米管在40°C -70°C烘干；(4)溶解離心計算將(3)得到的碳納米管溶于50 ml蒸餾水中，室溫超聲分散O. 5h -3h,再在 8000rpm-20000rpm 離心 5mins 30 mins,然后沉淀干燥；2.制備碳納米管-聚乙烯醇-細(xì)胞生長因子復(fù)合溶液(I)將碳納米管加入去離子水分散均勻。(2)以所得碳納米管分散液為液體介質(zhì)，加入聚乙烯醇中。在60°C 100°C下水浴加熱，攪拌均勻；(3)向經(jīng)上述步驟所得的溶液里面加入細(xì)胞生長因子粉劑或者細(xì)胞生長因子溶液，使細(xì)胞生長因子終濃度為O.Olyg/ml 1000 μ g/ml，室溫磁力振蕩或者超聲分散O. 5h 8 h。生物電鏡表征顯示其再將其分散均勻。3.靜電紡織將碳納米管-聚乙烯醇-細(xì)胞生長因子復(fù)合溶液進行靜電紡絲，設(shè)定電壓范圍20kv 70kv (10-200)。

采用本發(fā)明的制備方法可得到組織均勻、發(fā)珠較少，纖維平直、連續(xù)、直徑均一的碳納米管一聚乙烯醇-細(xì)胞生長因子復(fù)合無紡布材料，由這些纖維形成的無紡布是一種有納米微孔的多孔材料，因此有更大的比表面積，并且層中孔隙保證了空氣的流通，可阻隔水等液體的深入，這樣不僅可以有效地保護傷口、防止感染，而且保證了傷口的通風(fēng)，同時采用本發(fā)明的制備方法可很好地復(fù)合細(xì)胞生長因子而作為藥物載體形成緩釋控釋體系，促進傷口的愈合，有利于傷口盡快復(fù)原。且很好地保證了細(xì)胞生長因子的活性
具體實施例方式實施例1 :1.酸化碳納米管(I)酸化碳納米管將85%-98. 3%的濃硫酸60ml、65%_85%的濃硝酸20 ml和粒徑為30 nm 500 nm碳納米管O.1g 2. Og超聲分散O. 5 h _3h,再放入60°C 100°C水浴中酸化O. 5 h 2 h ;(2)抽濾洗滌用孔徑為O. 11 μ m-0. 33 μ m的抽濾膜進行抽濾，并用蒸餾水洗滌至洗滌液pH值5. O 8. O ;(3)干燥稱重將經(jīng)步驟(2)濾出的碳納米管在40°C -70°C烘干；(4)溶解離心計算將(3)得到的碳納米管溶于50 ml蒸餾水中，室溫超聲分散O. 5h -3h,再在 8000rpm-20000rpm 離心 5mins 30 mins,然后沉淀干燥；2.制備碳納米管-聚乙烯醇-細(xì)胞生長因子復(fù)合溶液(I)將酸化得到的碳納米管IOmg放入燒杯中，加入去離子水1000ml，5 W 100 W磁力攪拌O.1 h 6 h,再 10khz-40 khz頻率超聲分散O. 5 h 3 h,得到均一、穩(wěn)定、無沉淀的分散溶液。(2)以所得碳納米管水分散液為液體介質(zhì),加入O. Olml-1Oml (質(zhì)量分?jǐn)?shù)為1%-50%)的聚乙烯醇。在60 °C 100°C下水浴加熱I h 3 h。持續(xù)攪拌，以保證最終所得為均一、穩(wěn)定、不出現(xiàn)沉淀或者絮凝的分散液。(3)向經(jīng)上述步驟所得的溶液里面加入細(xì)胞生長因子粉劑或者細(xì)胞生長因子溶液，使細(xì)胞生長因子終濃度為O.Olyg/ml 1000 μ g/ml，室溫磁力振蕩或者超聲分散O. 5h 8 h直至分散均勻。3.靜電紡織將碳納米管-聚乙烯醇-細(xì)胞生長因子復(fù)合溶液倒入注射器中，并將注射器固定在注射泵上。打開高壓發(fā)生器，開始靜電紡絲，在收集介質(zhì)(金屬箔)上收集所得樣品。設(shè)定電壓范圍20kv 70kv，進行靜電紡織，得到無紡布。采用本發(fā)明的制備方法可得到組織均勻、發(fā)珠較少，纖維平直、連續(xù)、直徑均一的碳納米管一聚乙烯醇復(fù)合無紡布材料，由這些纖維形成的無紡布是一種有納米微孔的多孔材料，因此有更大的比表面積，并且層中孔隙保證了空氣的流通，可阻隔水等液體的深入，這樣不僅可以有效地保護傷口、防止感染，而且保證了傷口的通風(fēng)，同時采用本發(fā)明的制備方法可很好地復(fù)合細(xì)胞生長因子而作為藥物載體形成緩釋控釋體系，促進傷口的愈合，有利于傷口盡快復(fù)原。實施例2 1.酸化碳納米管 (I)酸化碳納米管將85%-98· 3%的濃硫酸60ml、65%_85%的濃硝酸20 ml和粒徑為30 nm 500 nm碳納米管O.1g 2. Og超聲分散O. 5 h _3h,再放入60°C 100°C水浴中酸化O. 5 h 2 h ;(2)抽濾洗滌用孔徑為O. 11 μ m-0. 33 μ m的抽濾膜進行抽濾，并用蒸餾水洗滌至洗滌液pH值5. O 8. O ;(3)干燥稱重將經(jīng)步驟(2)濾出的碳納米管在40°C -70°C烘干；(4)溶解離心計算將(3)得到的碳納米管溶于50 ml蒸餾水中，室溫超聲分散O. 5h -3h,再在 8000rpm-20000rpm 離心 5mins 30 mins,然后沉淀干燥；2.制備碳納米管-聚乙烯醇-細(xì)胞生長因子復(fù)合溶液(I)將酸化得到的碳納米管IOmg放入燒杯中，加入去離子水1000ml，5 W 100 W磁力攪拌O.1 h 6 h,再10khz-40 khz頻率超聲分散O. 5 h 3 h,得到均一、穩(wěn)定、無沉淀的分散溶液。(2)以所得碳納米管水分散液為液體介質(zhì),加入O. Olml-1Oml (質(zhì)量分?jǐn)?shù)為1%-50%)的聚乙烯醇。在60°C 100°C下水浴加熱I h 3 h。持續(xù)攪拌，以保證最終所得為均一、穩(wěn)定、不出現(xiàn)沉淀或者絮凝的分散液。(3)向經(jīng)上述步驟所得的溶液里面加入細(xì)胞生長因子粉劑或者細(xì)胞生長因子溶液，使細(xì)胞生長因子終濃度為O.Olyg/ml 1000 μ g/ml，室溫磁力振蕩或者超聲分散O. 5h 8 h直至分散均勻。3.靜電紡織將碳納米管-聚乙烯醇-細(xì)胞生長因子復(fù)合溶液進行靜電紡絲，設(shè)定電壓范圍20kv 70kvo
采用本發(fā)明的制備方法可得到組織均勻、發(fā)珠較少，纖維平直、連續(xù)、直徑均一的碳納米管一聚乙烯醇復(fù)合無紡布材料，由這些纖維形成的無紡布是一種有納米微孔的多孔材料，因此有更大的比表面積，并且層中孔隙保證了空氣的流通，可阻隔水等液體的深入，這樣不僅可以有效地保護傷口、防止感染，而且保證了傷口的通風(fēng)，同時采用本發(fā)明的制備方法可很好地復(fù)合細(xì)胞生長因子而作為藥物載體形成緩釋控釋體系，促進傷口的愈合，有利于傷口盡快復(fù)原。實施例3:1.酸化碳納米管(I)酸化碳納米管將85%-98· 3%的濃硫酸60ml、65%_85%的濃硝酸20 ml和粒徑為30 nm 500 nm碳納米管O.1g 2. Og超聲分散O. 5 h _3h,再放入60°C 100°C水浴中酸化O. 5 h 2 h ;(2)抽濾洗滌用孔徑為O. 11 μ m-0. 33 μ m的抽濾膜進行抽濾，并用蒸餾水洗滌至洗滌液pH值5. O 8. O ;(3)干燥稱重將經(jīng)步驟(2)濾出的碳納米管在40°C -70°C烘干；(4)溶解離心計算將(3)得到的碳納米管溶于50 ml蒸餾水中，室溫超聲分散O. 5h -3h,再在 8000rpm-20000rpm 離心 5mins 30 mins,然后沉淀干燥；2.制備碳納米管-聚乙烯醇-細(xì)胞生長因子復(fù)合溶液(I)將酸化得到的碳納米管IOmg放入燒杯中，加入去離子水1000ml，5 W 100 W磁力攪拌O.1 h 6 h,再10khz-40 khz頻率超聲分散O. 5 h 3 h,得到均一、穩(wěn)定、無沉淀的分散溶液。
(2)以所得碳納米管水分散液為液體介質(zhì)，加入O. Olml-1Oml(質(zhì)量分?jǐn)?shù)為1%_50%)的聚乙烯醇。在60°C 100°C下水浴加熱I h 3 h。持續(xù)攪拌，以保證最終所得為均一、穩(wěn)定、不出現(xiàn)沉淀或者絮凝的分散液。(3)向經(jīng)上述步驟所得的溶液里面加入細(xì)胞生長因子粉劑或者細(xì)胞生長因子溶液，使細(xì)胞生長因子終濃度為O.Olyg/ml 1000 μ g/ml，室溫磁力振蕩或者超聲分散O. 5h 8 h直至分散均勻。3.靜電紡織將碳納米管-聚乙烯醇-細(xì)胞生長因子復(fù)合溶液進行靜電紡絲，設(shè)定電壓范圍20kv 70kv。采用本發(fā)明的制備方法可得到組織均勻、發(fā)珠較少，纖維平直、連續(xù)、直徑均一的碳納米管一聚乙烯醇復(fù)合無紡布材料，由這些纖維形成的無紡布是一種有納米微孔的多孔材料，因此有更大的比表 面積，并且層中孔隙保證了空氣的流通，可阻隔水等液體的深入，這樣不僅可以有效地保護傷口、防止感染，而且保證了傷口的通風(fēng)，同時采用本發(fā)明的制備方法可很好地復(fù)合細(xì)胞生長因子而作為藥物載體形成緩釋控釋體系，促進傷口的愈合，有利于傷口盡快復(fù)原。
權(quán)利要求
1.一種碳納米管-細(xì)胞生長因子復(fù)合敷料的制備方法，其特征是，包括以下步驟 (一)酸化碳納米管 (1)將85 98.3% (重量百分比)的濃硫酸20 IOOml、65 85% (重量百分比)的濃硝酸10 50ml和粒徑為5 500nm碳納米管O.1 2. Og分散均勻后再放入60 100°C水浴中酸化O. 5 2h ; (2)用孔徑為O.11 O. 33 μ m的抽濾膜進行抽濾，并用蒸餾水洗滌至洗滌液pH值5.O 8. O ; (3)將經(jīng)步驟(2)濾出的碳納米管在40 70°C烘干； (4)將(3)得到的碳納米管溶于蒸餾水中，分散均勻，沉淀干燥； (二)制備碳納米管-聚乙烯醇-細(xì)胞生長因子復(fù)合溶液 (1)將碳納米管加入去離子水分散均勻； (2)以所得碳納米管分散液為液體介質(zhì)，加入聚乙烯醇中，使碳納米管的質(zhì)量分?jǐn)?shù)為I 50%，在60 100°C下水浴加熱，攪拌均勻； (3)向經(jīng)上述步驟所得的溶液里面加入細(xì)胞生長因子粉劑或者細(xì)胞生長因子溶液，使細(xì)胞生長因子終濃度為O. 01 1000 μ g/ml，將其分散均勻，制成碳納米管-聚乙烯醇-細(xì)胞生長因子復(fù)合溶液； (三)靜電紡織 將碳納米管-聚乙烯醇-細(xì)胞生長因子復(fù)合溶液進行靜電紡絲，設(shè)定電壓范圍10 200kvo
2.根據(jù)權(quán)利要求1的碳納米管-細(xì)胞生長因子復(fù)合敷料的制備方法，其特征是，所述靜電紡絲電壓范圍為20 70kv。
全文摘要
本發(fā)明公開了一種碳納米管-細(xì)胞生長因子復(fù)合敷料的制備方法，包括以下步驟(一)酸化碳納米管；(二)制備碳納米管-聚乙烯醇-細(xì)胞生長因子復(fù)合溶液；(三)靜電紡織?？傻玫浇M織均勻、發(fā)珠較少，纖維平直、連續(xù)、直徑均一的碳納米管-聚乙烯醇復(fù)合無紡布材料，有更大的比表面積，并且層中孔隙保證了空氣的流通，可阻隔水等液體的深入，這樣不僅可以有效地保護傷口、防止感染，而且保證了傷口的通風(fēng)，同時采用本發(fā)明的制備方法可很好地復(fù)合細(xì)胞生長因子而作為藥物載體形成緩釋控釋體系，促進傷口的愈合，有利于傷口盡快復(fù)原。
文檔編號A61L15/24GK103041439SQ20121033047
公開日2013年4月17日 申請日期2012年9月7日 優(yōu)先權(quán)日2012年9月7日
發(fā)明者周建大, 周江林, 謝慧清, 胡豐 申請人:中南大學(xué)湘雅三醫(yī)院, 湖南湘雅博愛康復(fù)醫(yī)院