一種組合物在制備治療脂肪肝的藥物中的應(yīng)用的制作方法
【專利摘要】本發(fā)明公開了一種組合物在制備治療脂肪肝的藥物中的應(yīng)用，所述組合物包含治療有效量的1-異丙基-1'-(1-甲基-2-氧代-2,3-二氫-1H-苯并[d]咪唑-5-羰基)-4,6-二氫螺[吲唑-5,4'-哌啶]-7(1H)-酮，和治療有效量的4-(5-氰基-4-{[4-(1-甲基-1H-四唑-5-基)苯氧基]甲基}-1H-吡唑-1-基)哌啶-1-甲酸-1-甲基環(huán)丙酯；二者的質(zhì)量比為3:1～1:3。
【專利說明】一種組合物在制備治療脂肪肝的藥物中的應(yīng)用

【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001]本發(fā)明涉及一種藥物，具體涉及一種組合物在制備治療脂肪肝的藥物中的應(yīng)用。

【背景技術(shù)】
[0002]脂肪肝，是指由于各種原因引起的肝細胞內(nèi)脂肪堆積過多的病變。脂肪性肝病正嚴重威脅國人的健康，成為僅次于病毒性肝炎的第二大肝病，已被公認為隱蔽性肝硬化的常見原因。脂肪肝是一種常見的臨床現(xiàn)象，而非一種獨立的疾病。其臨床表現(xiàn)輕者無癥狀，重者病情兇猛。一般而言，脂肪肝屬可逆性疾病，苗山脂肝湯治療?？苫謴?fù)正常。
[0003]脂肪肝的發(fā)病率近幾年在歐美和中國迅速上升，成為僅次于病毒性肝炎的第二大肝病。在某些職業(yè)人群中(白領(lǐng)人士、出租車司機、職業(yè)經(jīng)理人、個體業(yè)主、政府官員、高級知識分子等)脂肪肝的平均發(fā)病率為25% ;肥胖人群與II型糖尿病患者中脂肪肝的發(fā)病率為50%;嗜酒和酗酒者脂肪肝的發(fā)病率為58%;在經(jīng)常失眠、疲勞、不思茶飯、胃腸功能失調(diào)的亞健康人群中脂肪肝的發(fā)病率約為60%。近年來脂肪肝人群的年齡也不斷下降，平均年齡只有40歲，30歲左右的病人也越來越多。45歲以下男性脂肪肝明顯多于女性。
[0004]脂肪肝的發(fā)病機制包括:食物中脂肪經(jīng)酶水解并與膽鹽結(jié)合，由腸黏膜吸收，再與蛋白質(zhì)、膽固醇和磷脂形成乳糜微粒，乳糜微粒進入肝臟后在肝竇庫普弗細胞分解成甘油和脂酸，脂酸進入肝細胞后在線粒體內(nèi)氧化、分解而釋出能量；或酯化合成三酰甘油；或在內(nèi)質(zhì)網(wǎng)轉(zhuǎn)化為磷脂及形成膽固醇酯。肝細胞內(nèi)大部分的三酰甘油與載脂蛋白等形成極低密度脂蛋白(VLDL)并以此形式進入血液循環(huán)。VLDL在血中去脂成為脂酸提供給各種組織能量。脂類代謝障礙是產(chǎn)生脂肪肝的原因:
[0005](I)食物中脂肪過量、高脂血癥及脂肪組織動員增加(饑餓、創(chuàng)傷及糖尿病)，游離脂肪酸(FFA)輸送入肝增多，為肝內(nèi)三酰甘油合成提供大量前體。
[0006](2)食物中缺乏必需脂肪酸，急性酒精中毒、急性蘇氨酸缺乏、攝入大劑量巴比妥鹽等使肝細胞內(nèi)三酰甘油及游離脂酸合成增加。
[0007](3)熱量攝入過高，從糖類轉(zhuǎn)化為三酰甘油增多。
[0008](4)肝細胞內(nèi)游離脂酸清除減少，過量飲酒、膽堿缺乏、四氯化碳和乙硫氨酸中毒等均可抑制肝內(nèi)游離脂酸的氧化。乙硫氨酸中毒及膽堿缺乏可阻斷磷脂合成。
[0009](5) VLDL合成或分泌障礙等一個或多個環(huán)節(jié)，破壞脂肪組織細胞、血液及肝細胞之間脂肪代謝的動態(tài)平衡，引起肝細胞三酰甘油的合成與分泌之間失去平衡，最終導(dǎo)致中性脂肪為主的脂質(zhì)在肝細胞內(nèi)過度沉積形成脂肪腫。
[0010]到目前為止，西藥尚無防治脂肪肝的有效藥物，以中藥長期調(diào)理性的治療最好。用一些含有姜黃等中藥成分的專業(yè)藥物，如甘貝爾等，都是不錯的。中藥中以制何首烏和山楂最好，這兩種藥能降低血脂，防止膽固醇在肝內(nèi)沉積。西藥常選用保護肝細胞、去脂藥物及抗氧化劑等，如維生素B、C、E、卵磷脂、熊去氧膽酸、水飛薊素、肌苷、輔酶A、還原型谷胱甘肽、?；撬?、肉毒堿乳清酸鹽、肝泰樂，以及某些降脂藥物(例如:肝旨清)等等。上述藥物雖然很多，但大多仍需要進一步驗證其療效以及安全性，因此，應(yīng)在醫(yī)生指導(dǎo)下正確選用，切不可濫用。但一般而言，如果僅僅是脂肪肝，而不是肝性腦病，以上藥物中維生素B、C、E、卵磷脂、肌苷、輔酶A、還原型谷胱甘肽、?；撬?、肉毒堿乳清酸鹽等維生素及內(nèi)源性氨基酸類的藥物安全性非常高，而且也不會像聯(lián)苯雙酯類的藥物停藥后還出現(xiàn)反彈。
[0011]現(xiàn)有技術(shù)中，對脂肪肝的治療，多數(shù)僅僅考慮脂肪肝本身，而未考慮脂肪肝的伴生病癥，比如高血壓、高血脂、糖尿病等。


【發(fā)明內(nèi)容】

[0012]本發(fā)明的目的在于提供治療脂肪肝的藥物，所述藥物不僅僅針對脂肪肝本身，還能治療肥胖癥引起的聞血壓、聞血脂和糖尿病等。
[0013]本發(fā)明的目的之一在于提供一種組合物在制備治療脂肪肝的藥物中的應(yīng)用，其特征在于，所述組合物包含治療有效量的1-異丙基-1’ - (1-甲基-2-氧代-2，3- 二氫-1H-苯并[d]咪唑-5-羰基)-4，6-二氫螺[吲唑-5，4’-哌啶]-7(1Η)-酮，和治療有效量的
4-(5-氰基-4-{[4-(1-甲基-1H-四唑-5-基)苯氧基]甲基}_1Η_吡唑-1-基)哌啶-1-甲酸-1-甲基環(huán)丙酯；二者的質(zhì)量比為3:1?1:3。
[0014]表述“治療有效量”表示本發(fā)明化合物或其藥學(xué)上可接受的鹽的這樣的量，其(i)治療或預(yù)防特定疾病、病況或病癥，(ii)減輕、改善或消除特定疾病、病況或病癥的一或多種癥狀，或(iii)預(yù)防或延遲本文所述的特定疾病、病況或病癥的一或多種癥狀的發(fā)作。
[0015]1-異丙基-1’-(1-甲基-2-氧代-2，3-二氫-1H-苯并[d]咪唑_5_羰基)_4，6_二氫螺[吲唑_5，4’ -哌啶]-7 (IH)-酮用于治療可通過抑制乙酰輔酶A羧化酶而進行調(diào)節(jié)的疾病、病況或病癥的用途。
[0016]乙酰輔酶A羧化酶(ACC)為在大多數(shù)物種中發(fā)現(xiàn)的酶家族，且經(jīng)由催化從乙酰輔酶A產(chǎn)生丙二?；?CoA而與脂肪酸合成和代謝有關(guān)。在哺乳動物中，已確定了 ACC酶的2種同種型。ACC1，其在脂質(zhì)合成組織(諸如脂肪和肝臟)中以高水平表達，控制長鏈脂肪酸的生物合成中的第一關(guān)鍵步驟。如果乙酰輔酶A不被羧酸化以形成丙二酰基-CoA，那么其將使用檸檬酸循環(huán)(Krebs cycle)進行代謝。ACC2，其是肝臟ACC的次要組分，但在心臟和骨骼肌肉中是主要的同種型，催化在線粒體的胞質(zhì)表面產(chǎn)生丙二?；?CoA，且通過抑制肉堿棕櫚?；D(zhuǎn)移酶調(diào)節(jié)在β_氧化中利用的脂肪酸的量。因此，通過增加脂肪酸利用和通過阻止從頭脂肪酸合成的增加，ACC抑制劑(ACC-1)的慢性施用也可在消費高或低脂飲食的肥胖者體內(nèi)耗盡肝臟和脂肪組織甘油三酯(TG)儲存，從而導(dǎo)致體脂肪的選擇性損耗。
[0017]4-(5-氰基-4-{[4-(1-甲基-1H-四唑-5-基)苯氧基]甲基} _1Η_吡唑_1_基)哌啶-1-甲酸-1-甲基環(huán)丙酯調(diào)節(jié)G-蛋白偶聯(lián)受體的活性。特別地，此類化合物調(diào)節(jié)GPR119。因此，此類化合物可用于治療其中GPR119活性促成疾病病理或癥狀的疾病，諸如糖尿病。此類病狀的實例包括高脂血癥、I型糖尿病、II型糖尿病、特發(fā)性I型糖尿病(Ib型)、成人的隱匿性自身免疫性糖尿病(LADA)、早發(fā)性2型糖尿病(EOD)、青年型非典型糖尿病(YOAD)、青年人的成年發(fā)病型糖尿病(MODY)、與營養(yǎng)不良有關(guān)的糖尿病、妊娠期糖尿病、冠心病、局部缺血性中風、血管成形術(shù)后的再狹窄、周圍血管疾病、間歇性跛行、心肌梗塞(例如壞死及凋亡)、血脂異常、餐后脂血癥、葡萄糖耐受性不良的病況(IGT)、空腹血糖異常的病況、代謝性酸中毒、酮病、關(guān)節(jié)炎、肥胖、骨質(zhì)疏松癥、高血壓、充血性心力衰竭、左心室肥大癥、周圍動脈疾病、糖尿病性視網(wǎng)膜病變、黃斑變性、白內(nèi)障、糖尿病性腎病、腎小球硬化、慢性腎衰竭、糖尿病性神經(jīng)病變、代謝綜合征、X綜合征、經(jīng)前綜合征、冠心病、心絞痛、血栓形成、動脈粥樣硬化、短暫性腦缺血發(fā)作、中風、血管再狹窄、高血糖癥、高胰島素血癥、高脂血癥、高甘油三酯血癥、胰島素抵抗、葡萄糖代謝不良、葡萄糖耐受性不良的病況、空腹血糖異常的病況、肥胖、勃起功能障礙、皮膚及結(jié)締組織病癥、足部潰瘍及潰瘍性結(jié)腸炎、內(nèi)皮功能障礙及血管順應(yīng)性不良。此類化合物可用于治療神經(jīng)病癥，諸如阿爾茨海默病、精神分裂癥及認知不良。此類化合物也有利于胃腸病，諸如炎性腸病、潰瘍性結(jié)腸炎、克羅恩病、腸易激綜合征等。此類化合物也可用于刺激肥胖癥患者(尤其是受糖尿病困擾的患者)減輕體重。
[0018]本發(fā)明對現(xiàn)有技術(shù)的貢獻，就在于所述特定兩種藥物的聯(lián)合使用。實驗證明，所述兩種藥物的聯(lián)合使用，可以在治療脂肪肝的同時，治療肥胖引起的高血壓、糖尿病等癥狀。

【具體實施方式】
[0019]為便于理解本發(fā)明，本發(fā)明列舉實施例如下。本領(lǐng)域技術(shù)人員應(yīng)該明了，所述實施例僅僅用于幫助理解本發(fā)明，不應(yīng)視為對本發(fā)明的具體限制。
[0020]實施例1
[0021]一種組合物在制備治療脂肪肝的藥物中的應(yīng)用，其特征在于，所述組合物包含治療有效量的1-異丙基-1’ -(1-甲基-2-氧代_2，3- 二氫-1H-苯并[d]咪唑-5-羰基)-4，6- 二氫螺[吲唑_5，4’ -哌啶]-7 (IH)-酮，和治療有效量的4- (5-氰基-4- {[4-(1-甲基-1H-四唑-5-基)苯氧基]甲基} -1H-吡唑-1-基)哌啶-1-甲酸-1-甲基環(huán)丙酯；二者的質(zhì)量比為1:1。
[0022]可通過評估其減少來自治療的動物的肝臟和肌肉組織中的丙二?；?CoA水平的能力，在體內(nèi)證實本發(fā)明化合物的ACC抑制活性。
[0023]實驗動物中的丙二?；?CoA產(chǎn)生抑制的測量。在此方法中，在研究之前將維持于任意采食標準飼料和水的雄性Sprague-Dawley大鼠(225-275克)隨機化。在實驗開始之前給動物喂食或禁食18小時。在進入光周期2小時前，給動物口服施用5毫升/千克體積的(0.5%甲基纖維素；媒介物)或適當化合物(制備于媒介物中)。喂食媒介物的對照用于測定組織丙二?；?CoA的基線水平，而禁食動物用于測定禁食對丙二?；?CoA水平的影響。施用化合物一小時之后，以CO2使動物窒息和取出組織。特別地，通過心臟穿刺收集血液且將其放入包含EDTA的BD Microtainer管(BD B1sciences, NJ)中，混合且放在冰上。血漿用于測定藥物暴露。取出肝臟和四頭肌，立刻冷凍夾緊，包裝在箔紙中并儲存在液氮中。
[0024]在液N2下將組織粉末化以確保取樣的均勻性。在FastPr印FP120(ThermoScientific,速度=5.5 ;進行 45 秒)中用 5 體積的在 Lysing Matrix A 中的 10% 三羧酸(MP B1medicals, PN6910)從組織(150-200 毫克)中提取丙二?；?CoA。以 15000xg離心(Eppendorf Centrifuge5402) 30分鐘之后，從細胞碎片中移出包含丙二?；?CoA的上清液。將樣品穩(wěn)定地冷凍在_80°C，直到完成分析。
[0025]肝臟和肌肉組織中的丙二?；鵆oA水平可使用下列方法評估。
[0026]該方法利用下列材料:丙二?；?CoA四鋰鹽和丙二?；?13C3_CoA三鋰鹽，其購自 Isotec(Miamisburg, OH, USA)、高氯酸鈉(Sigma,目錄號 410241 )、三氯乙酸(ACR0S,目錄號 42145)、磷酸(J.T.Baker,目錄號 0260-01)、甲酸銨(Fluka，目錄號 17843)、甲醇(HPLC等級，J.T.Baker,目錄號9093-33)和水(HPLC等級，J.T.Baker, 4218-03)用來制造所需的移動相。Strata-X 在線固相萃取柱，25 μ m, 20mm x2.0mm 1.D (目錄號 00M-S033-B0-CB)獲自 Phenomenex (Torrance, CA, USA)。SunFire C18 反相柱，3.5 μ m, 100mm x3.0mmT.D.(目錄號 186002543)購自 Waters 公司(Milford, MA, USA)。
[0027]所述測試結(jié)果表明，所述兩種藥物的聯(lián)合使用，可以在治療脂肪肝的同時，治療肥胖引起的聞血壓、糖尿病等癥狀。
[0028] 申請人:聲明，本發(fā)明通過上述實施例來說明本發(fā)明的詳細工藝配方和工藝流程，但本發(fā)明并不局限于上述詳細工藝配方和工藝流程，即不意味著本發(fā)明必須依賴上述詳細工藝配方和工藝流程才能實施。所屬【技術(shù)領(lǐng)域】的技術(shù)人員應(yīng)該明了，對本發(fā)明的任何改進，對本發(fā)明產(chǎn)品各原料的等效替換及輔助成分的添加、具體方式的選擇等，均落在本發(fā)明的保護范圍和公開范圍之內(nèi)。
【權(quán)利要求】
1.一種組合物在制備治療脂肪肝的藥物中的應(yīng)用，其特征在于，所述組合物包含治療有效量的1-異丙基-1’ -(1-甲基-2-氧代-2，3-二氫-1H-苯并[d]咪唑-5-羰基)-4，6-二氫螺[吲唑_5，4’ -哌啶]-7 (IH)-酮，和治療有效量的4- (5-氰基-4- {[4- (1-甲基-1H-四唑-5-基)苯氧基]甲基}-1H-吡唑-1-基)哌啶-1-甲酸-1-甲基環(huán)丙酯；二者的質(zhì)量比為3:1?1:3。
【文檔編號】A61K31/454GK104274451SQ201310291508
【公開日】2015年1月14日 申請日期:2013年7月11日 優(yōu)先權(quán)日:2013年7月11日
【發(fā)明者】王岳榮 申請人:無錫信達醫(yī)療器械有限公司