一種具有天然防腐功效中藥復(fù)方的制備方法
【專利摘要】一種具有天然防腐功效中藥復(fù)方的制備方法：（1）將天葵子和紫花地丁用粉碎機打成粗粉；（2）將粗粉加入溶劑后用膠體磨磨成細粉的混懸液；（3）將野菊花、金銀花、蒲公英、夏枯草4為藥材裝入提取罐，加入前一步中的細粉的混懸液，進行常溫循環(huán)提??；（4）進行常規(guī)的沉降、過濾處理。采用本發(fā)明的制備方法，能克服傳統(tǒng)中藥制備工藝有效成分轉(zhuǎn)移率低，雜質(zhì)溶出多，顏色深，步驟繁多，操作周期長，成本高等問題。
【專利說明】一種具有天然防腐功效中藥復(fù)方的制備方法
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001]本發(fā)明涉及一種提取液的制備方法，更具體地說，涉及一種具有天然防腐功效中藥復(fù)方的的制備方法。
【背景技術(shù)】
[0002]目前中藥制備最常用的方法為水煎煮、濃縮、醇沉、濃縮、過濾等工藝，此法制備的提取液低沸點的成分保留少，雜質(zhì)溶出多，顏色深，影響其在化妝品成品中的添加使用。并且整個工藝步驟繁瑣，生產(chǎn)周期長，需要的設(shè)備多，能耗大，生產(chǎn)成本較高，并且酒精用量大。
[0003]為了減少大分子色素的溶出和保留低沸點成分，也有用冷滲漉工藝，但此法溶劑用量大造成后續(xù)的濃縮量大，提取過程時間長，并且一般對藥材進行粗粉，提取過程容易堵塞。
[0004]添加到化妝品中使用是植物提取物產(chǎn)業(yè)發(fā)展的一個重要方向，具有很大的市場空間，如何制備出符合化妝品添加要求即高濃度又顏色淺的提取液是目前急需解決的問題，利用物質(zhì)擴散特點，結(jié)合已有設(shè)備的操作特點進行合理改進、優(yōu)化和組合，是解決這一問題的可行思路。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0005]本發(fā)明所要解決的技術(shù)問題在于克服了傳統(tǒng)制備工藝制備的中藥提取液顏色深，有效成分保留少，雜質(zhì)多，步驟繁瑣，生產(chǎn)周期長，能耗大，酒精用量大等問題，根據(jù)藥材的擴散特性，將不容易被溶劑滲 透的藥材通過膠體磨制備成細粉混懸液，去循環(huán)滲漉提取容易被溶劑滲透的藥材，減少色素的溶出，更好的保留小分子和低沸點物質(zhì)，提取過程不產(chǎn)生堵塞現(xiàn)象，大幅度減少溶劑的用量，省去濃縮、酒沉等步驟，達到簡化工藝步驟，縮短生產(chǎn)周期，減少能耗等的效果，在滿足化妝品使用要求和節(jié)約成本上有重要貢獻。
[0006]具體步驟:
[0007](I)對天葵子和紫花地丁用粉碎機進行粉碎，粉碎成20-40目粗粉；
[0008](2)將粗粉加入水，或低75度的乙醇溶液，溶劑量為2~4倍，用膠體磨磨成2~50 μ m細粉的混懸液；
[0009](3)將野菊花、金銀花、蒲公英、夏枯草4為藥材裝入提取罐，加入前一步中的細粉的混懸液，進行常溫循環(huán)提取，提取溫度(T30°C，針對體積2.5L提取罐，其循環(huán)速度為flOL/h，其他體積的提取罐以線速度相等的原則改變流量大小，提取時間為2~6h。
[0010](4)沉降過夜，取上清液過濾。
[0011]本發(fā)明的積極意義:
[0012](I)本發(fā)明克服傳統(tǒng)煎煮法的缺點，利用低溫提取減少葉綠素等大分子色素的溶出，并增強對低沸點物質(zhì)的保留，制備的提取液顏色較淺，滿足化妝品使用要求；
[0013](2)用容易被溶劑滲透的藥材直接在滲漉罐中進行提取，避免了提取過程堵塞，方便操作；
[0014](3)對組織致密的藥材用膠體磨磨成細粉混懸液，在提取過程中直接穿過滲漉罐的藥材層，參與循環(huán)，既增加藥材有效成分的溶出，又避免粗粉填料產(chǎn)生的堵塞現(xiàn)象；
[0015](4)通過用膠體磨磨成細粉混懸液直接提取其他藥材，以及使用循環(huán)滲漉方式，大幅減少溶劑的使用，提高提取液中有效成分的含量，縮短提取過程的時間，減少后續(xù)的濃縮等步驟，大幅簡化了工藝，縮短生產(chǎn)周期；
[0016](5)本發(fā)明是依據(jù)物質(zhì)的擴散特性的對提取藥材進行區(qū)分處理，只要對現(xiàn)有設(shè)備做較小的改進和組合即可實現(xiàn)該方法，使提取操作方便，有效成分保留好，顏色淺；
[0017](6)節(jié)約能耗:能耗最大的操作單元為濃縮單元，而本案省去傳統(tǒng)工藝2次濃縮、一次酒沉、以及冷藏步驟的能耗，極大地降低了能耗；
[0018](7)安全:可以減少甚至不使用酒精等有機溶劑，生產(chǎn)過程更安全。
【專利附圖】

【附圖說明】
[0019]圖1為發(fā)明的循環(huán)滲漉裝置的示意圖。
【具體實施方式】 [0020]下面通過實施例的方式進一步說明本發(fā)明，但并不因此將本發(fā)明限制在所述的實施例范圍之中。
[0021]實施例1:
[0022]工藝流程:
[0023]如附圖1所示的循環(huán)滲漉裝置及工藝流程。循環(huán)滲漉裝置由滲漉罐1、泵2、流量計3、加熱/冷卻裝置4及閥門5相連，形成循環(huán)裝置。容易被溶劑滲透的藥材裝入滲漉罐I中，不易被溶劑滲透的藥材先用粉碎機粉碎，然后與溶劑一起用膠體磨進一步粉碎成細粉的混懸液，再加入滲漉罐I中與其他藥材混合，之后在滲漉罐1、泵2及加熱/冷卻裝置4中循環(huán)提取。
[0024]抑菌試驗步驟:
[0025]( I)試驗菌株
[0026]金黃色葡萄球菌(ATCC8739)，大腸桿菌(ATCC6538)，綠膿桿菌(ATCC9027)，白色念珠球菌(ATCC10231 )，黑曲霉菌(ATCC16404)。
[0027](2)培養(yǎng)基
[0028]TSB 固體培養(yǎng)基:蛋白胨 10g/L，NaC110g/L, K2HP042.5g/L，酵母提取物 3g/L，瓊脂15g/L，蒸餾水溶解，調(diào)節(jié)pH為7.2±0.2，115°C高壓滅菌20min ;TSB液體培養(yǎng)基:蛋白胨 10g/L，NaC110g/L, K2HP042.5g/L，酵母提取物 3g/L，蒸餾水溶解，調(diào)節(jié) pH 為 7.2±0.2，115°C高壓滅菌20min ；
[0029]SDB固體培養(yǎng)基:蛋白胨10g/L，葡萄糖20g/L，K2HP043g/L，酵母提取物5g/L，瓊脂15g/L，蒸餾水溶解，115°C高壓滅菌20min ；SDB液體培養(yǎng)基:蛋白胨10g/L，葡萄糖20g/L，K2HP043g/L，酵母提取物5g/L，蒸餾水溶解，115°C高壓滅菌20min。
[0030]( 3 )菌懸液制備及接種
[0031]取甘油保藏的金黃色葡萄球菌，大腸桿菌，綠膿桿菌100 μ L涂布于TSB固體培養(yǎng)基上，37°C培養(yǎng)2d，用生理鹽水重懸，得到菌懸液，并用平板培養(yǎng)法計數(shù)，將測試菌濃度調(diào)整為 IO5 ~106CFU/mL。
[0032]白色念珠球菌和黑曲霉菌100 μ L涂布于SDB固體培養(yǎng)基上，30°C培養(yǎng)2d，用生理鹽水重懸，得到菌懸液，并用平板培養(yǎng)法計數(shù)，將測試菌濃度調(diào)整為IO5~106。
[0033](4)樣品抑菌作用的測定
[0034]杯碟法
[0035]在培養(yǎng)皿中倒入TSB或SDB固體培養(yǎng)基，待凝固后，在此培養(yǎng)基上均勻涂布測試菌100 μ L0在培養(yǎng)基上等距離放2個無菌牛津杯[內(nèi)徑(6.0±0.1)mm,外徑(8.0±0.1)mm,高(10.0±0.l)mm，在杯內(nèi)分別注入200 μ L待測樣品，用生理鹽水或含一定量的DMSO的生理鹽水作為對照。37°C或30°C恒溫箱中培養(yǎng)2d后，用直尺測量各種藥品的抑菌圈直徑，取其平均值。
[0036]微孔板法
[0037]在微孔中加入100 μ L待測樣品(初始濃度)，再加入含測試菌濃度1.0 X 105CFU/mL為2XTSB或2XSDB液體培養(yǎng)基100 μ L，混勻，即待測樣品的測試濃度為初始濃度的50%。30°C或37°C恒溫箱中培養(yǎng)2d后，觀察有無菌生長。結(jié)果判斷的前提是生長對照良好，空白對照無菌生長清晰。
[0038](5)最低抑菌濃度(MIC值)的測定
[0039]①最低抑制金黃色葡萄球菌濃度(MIC)、最低抑制大腸桿菌濃度(MIC)、最低抑制綠膿桿菌濃度(MIC)、最低抑制白色念珠球菌濃度(MIC)的測定方法如下:
[0040](I)藥液制備
[0041 ] 將待測樣品用生理鹽水稀釋成實驗濃度。
[0042](2)菌液制備用2XTSB或2XSDB液體培養(yǎng)基稀釋菌懸液，使其最終菌濃度為105CFU/mL。
[0043](3)培養(yǎng)及結(jié)果判讀在微孔中加入菌液100 μ L和藥液100 μ L，同時設(shè)不加菌的陰性對照和不加藥液的正常生長對照，每種藥做3個平行，取平均值。置37°C或30°C濕盒孵育，48h后觀察結(jié)果，采用直接法讀取數(shù)據(jù)。結(jié)果判斷的前提是生長對照良好，空白對照無菌生長清晰，其它孔隨藥物濃度梯度升高而菌的生長受到抑制。
[0044]②最低抑制黑曲霉?jié)舛?MIC)測定
[0045]采用杯碟法，在培養(yǎng)皿中倒入SDB固體培養(yǎng)基，待凝固后，在此培養(yǎng)基上加入黑曲霉菌(105CFU/ml) lOOyL，均勻涂布。在培養(yǎng)基上等距離放3個無菌牛津杯[內(nèi)徑(6.0±0.1)臟，外徑(8.0±0.l)mm，高(10.0±0.l)mm，在杯內(nèi)分別注入200 μ L不同濃度的樣品(用生理鹽水稀釋)。同時設(shè)不加測試樣品的正常生長對照和生理鹽水對照。結(jié)果判斷的前提是生長對照和生理鹽水對照生長良好，其它隨藥物濃度梯度升高而菌的生長受到抑制。
[0046]提取步驟:
[0047](1)對天葵子和紫花地丁各50克，用粉碎機進行粉碎，粉碎成20-40目粗粉；
[0048](2)將粗粉加入2L水，用膠體磨磨成2~50 μ m細粉的混懸液；
[0049](3)將野菊花150g、金銀花150g、蒲公英50g、夏枯草50g裝入2.5L的提取罐中，加入前一步中的細粉的混懸液進行循環(huán)提取，提取溫度30°C，循環(huán)速度為10L/h，提取時間為6h。
[0050](4)沉降過夜，取上清液過濾，補水至1.5L，即得。
[0051]實施例2:
[0052](I)對天葵子和紫花地丁各50克用粉碎機進行粉碎，粉碎成20-40目粗粉；
[0053](2)將粗粉加入1.5L40%乙醇溶液，用膠體磨磨成2~50 μ m細粉的混懸液；
[0054](3)將野菊花150g、金銀花150g、蒲公英50g、夏枯草50g裝入2.5L提取罐中，加入前一步中的細粉的混懸液進行循環(huán)提取，提取溫度15°C，循環(huán)速度為5L/h，提取時間為4h。
[0055](4)沉降過夜，取上清液過濾，補水至L5L，即得。
[0056]實施例3:
[0057](I)對天葵子和紫花地丁用粉碎機進行粉碎，粉碎成20-40目粗粉；
[0058](2)將粗粉加入1L75%乙醇溶液，用膠體磨磨成2~50 μ m細粉的混懸液；
[0059](3)將野菊花150g、金銀花150g、蒲公英50g、夏枯草50g裝入2.5L提取罐中，加入前一步中的細粉的混懸液進行循環(huán)提取，提取溫度0°c，循環(huán)速度為lL/h，提取時間為2h。
[0060](4)沉降過夜，取上清液過濾，補水至L5L，即得。
[0061]對比實施例1:`[0062]傳統(tǒng)煎煮法:
[0063](I)野菊花150g、金銀花150g、蒲公英50g、夏枯草50g、天葵子50g、紫花地丁 50g,裝入5L圓底燒瓶，加入3L40%的乙醇溶液，至電熱套中加熱回流提取2h ；
[0064](2)過濾，重復(fù)提取I次；
[0065](3)過濾，合并濾液，濃縮至比重(55°C測)1.1 ；
[0066](4)加入95%乙醇醇沉至75%，冷藏過夜；
[0067](5)取上清液過濾，濃縮至1.5L，得。
[0068]對比實施例2:
[0069]傳統(tǒng)滲漉法:
[0070](I)野菊花150g、金銀花150g、蒲公英50g、夏枯草50g、天葵子50g、紫花地丁 50g,混合后用粉碎機打成20-40目粗粉；
[0071 ](2 )用1L40%的乙醇溶液浸泡8h ；
[0072](3)裝入2.5L滲漉罐，以0.5ml.min—1.kg—1速度進行滲漉，滲漉體積為7.5L ；
[0073](4)過濾提取液，濃縮至1.5L，得。
[0074]本發(fā)明與傳統(tǒng)的生產(chǎn)方式相比，過程中各項指標如表1所示:
[0075]表1
[0076]
【權(quán)利要求】
1.一種具有天然防腐功效中藥復(fù)方的的制備方法，其特征在于，將原料采用以下具體制備步驟: (1)將天葵子和紫花地丁用粉碎機打成20-40目粗粉； (2)將步驟(1)制得的粗粉加入溶劑后用膠體磨碾磨成2~50μ m細粉的混懸液； (3)將野菊花、金銀花、蒲公英、夏枯草4味藥材裝入提取罐，加入所述步驟(2)中的細粉混懸液，進行(T30°C循環(huán)提取。
2.如權(quán)利要求1所述的制備方法，其特征在于，所述原料的組分質(zhì)量配比為:夏枯草30份，金銀花30份，野菊花10份、蒲公英10份，天葵子10份、紫花地丁 10份。
3.如權(quán)利要求1所述的制備方法，其特征在于，所述步驟(3)中的循環(huán)提取及步驟(2)中的膠體磨碾磨采用的溶劑為濃度小于75wt%的乙醇溶液，具體為組織致密的藥材先用膠體磨制成混懸液，再加入外循環(huán)提取罐對組織疏松的藥材進行提取，提取溫度(T30°C，提取時間為2飛h，所述提取罐的液體循環(huán)速度數(shù)值為提取罐體積數(shù)值的0.4-4倍。
4.如權(quán)利要求3所述的制備方法，其特征在于，所述提取罐針對的體積為2.5L提取罐，其液體循環(huán)速度為f 10L/h，其他體積的提取罐以線速度相等的原則改變流量和轉(zhuǎn)速大小。
5.如權(quán)利要求1所述的制`備方法，其特征在于，所述提取所用的設(shè)備能進行循環(huán)滲漉。
【文檔編號】A61K8/97GK103520030SQ201310451787
【公開日】2014年1月22日 申請日期:2013年9月29日 優(yōu)先權(quán)日:2013年9月29日
【發(fā)明者】李成亮, 袁圓, 卞春亮 申請人:上海萊博生物科技有限公司