一種用于輔助降血糖的益生菌發(fā)酵中藥復(fù)方組合物及其制備方法和應(yīng)用的制作方法
【專利摘要】本發(fā)明公開了一種用于輔助降血糖的益生菌發(fā)酵中藥復(fù)方組合物及其制備方法和應(yīng)用，所述的益生菌發(fā)酵中藥復(fù)方組合物以中藥復(fù)方粉葛、山藥、桑葉、枸杞子、馬齒莧、干姜、苦蕎麥、西洋參，甘草、蠶蛹、豬胰臟的提取物為發(fā)酵底物，經(jīng)益生菌發(fā)酵后制得，該益生菌發(fā)酵中藥復(fù)方組合物可用于制備治療糖尿病的藥物或保健食品或食品。本發(fā)明的益生菌發(fā)酵中藥復(fù)方組合物具有口感易于接受，不刺激胃腸道，同時由于含有益生菌菌體及其代謝產(chǎn)物，能夠調(diào)理胃腸道環(huán)境，增加了對藥物的吸收，減輕了鹽酸小檗堿對胃腸道的刺激。
【專利說明】一種用于輔助降血糖的益生菌發(fā)酵中藥復(fù)方組合物及其制備方法和應(yīng)用
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001]本發(fā)明涉及益生菌發(fā)酵中藥提取物制劑及制備方法，進(jìn)一步涉及由粉葛、山藥、桑葉、枸杞子、馬齒莧、干姜、苦蕎麥、西洋參、甘草、蠶蛹、豬胰臟提取物經(jīng)腸道益生菌發(fā)酵后制得的發(fā)酵組合物，以及該發(fā)酵組合物在制備用于降低高血糖病人食品、保健品、藥品中的應(yīng)用，屬于生物發(fā)酵【技術(shù)領(lǐng)域】。
【背景技術(shù)】
[0002]糖尿病(Diabetes Mellitus,DM)是一種常見的內(nèi)分泌代謝性疾病，在中國傳統(tǒng)醫(yī)學(xué)中屬于“消渴病”的范疇。它是一組由于胰島素分泌缺陷，或胰島素作用缺陷，或者兩者兼而有之引起的高血糖代謝為特征的代謝疾病。糖尿病的慢性高血糖帶來氧化應(yīng)激增加，引起多臟器的長期損害，功能減退和衰竭，尤其是眼、腎臟、神經(jīng)、心臟和血管，危害健康。目前，中國每年約增加100萬新的糖尿病患者。糖尿病流行的原因主要包括以下幾個方面:種族和遺傳、單基因突變遺傳性糖尿病、生活方式的變化以及人口老齡化糖尿病常伴隨各種并發(fā)癥。
[0003]對糖尿病基礎(chǔ)研究的深入，越來越多的治療藥物研制成功并投入臨床使用。西藥降血糖作用強、起效快.但往往缺乏整體的協(xié)調(diào)性，且具有明顯的副作用，不利于糖尿病患者長期使用。我國歷代醫(yī)學(xué)書籍中所述的消渴癥與糖尿病類同.且證明患者尿甜。中醫(yī)認(rèn)為，陰虛內(nèi)熱，日久則陰損于陽，瘀血阻絡(luò)，氣陰兩虛，是本病及其并發(fā)癥的病理基礎(chǔ)。近年來現(xiàn)代中醫(yī)藥對糖尿病的研究有了進(jìn)一步的深入，諸多研究表明中藥治療糖尿病多途徑、多靶點、多環(huán)節(jié).是綜合治療作用的體現(xiàn)。因此，從中藥中尋找新的降血糖藥物。對提高患者的整體狀況有獨特的優(yōu)勢。
[0004]近年來，有關(guān)中草藥及其成分用于治療實驗性糖尿病的研究甚為活躍。中草藥的某些活性成分可以保護(hù)β細(xì)胞的功能，延緩β細(xì)胞功能衰竭，糾正胰島素分泌缺陷，緩解糖毒性。中草藥治療糖尿病的同時，不增加低血糖、體重增加等風(fēng)險。目前微生態(tài)學(xué)研究表明，糖尿病人的腸道菌群失調(diào)，有害菌增加，而有益菌減少，很多慢性病的發(fā)生發(fā)展與腸道菌群結(jié)構(gòu)失調(diào)有密切關(guān)系，并且近年來的藥代動力學(xué)表明，口服的天然藥物其藥理作用的發(fā)揮，很大程度上依賴于腸道菌群對其的分解代謝，因此，利用腸道有益菌群對中草藥進(jìn)行發(fā)酵轉(zhuǎn)化，提高藥物的活性成分，調(diào)理人體的腸道功能，提高藥物的吸收率，是藥物研發(fā)的重要手段。
[0005]近20年的大量研究表明，人體內(nèi)的低度、全身性的慢性炎癥是肥胖、糖尿病、冠心病、衰老和老年性疾病以及很多癌癥的重要誘發(fā)因素。重新建立合理的菌群結(jié)構(gòu)，消除慢性炎癥，就可能修復(fù)我們的身體。微生態(tài)學(xué)研究表明，糖尿病等一些慢性疾病，均可導(dǎo)致菌群失調(diào)，而促使疾病發(fā)生發(fā)展。
[0006]小檗堿(Berberine,BBR)是一種異喹啉，分子式[C2qH18qN4]+,廣泛存在于小檗科等許多植物中。由于對多種革蘭陽性及陰性菌具有抑菌作用，同時又能增強白細(xì)胞及肝網(wǎng)狀內(nèi)皮系統(tǒng)的吞噬能力，臨床現(xiàn)廣泛用于治療胃腸炎、細(xì)菌性痢疾等感染性疾病。小檗堿是中藥黃連的主要有效成分之一，故鹽酸小檗堿又稱黃連素。黃連盡管為清熱解毒的代表藥物，但早在魏晉時期，《名醫(yī)別錄》就有“黃連止消渴”的記載；《肘后備急方》、《本草綱目》也有記載，在治療消渴的方劑配伍中，不少含有黃連。目前，小檗堿應(yīng)用于糖尿病及其并發(fā)癥的治療已經(jīng)超過20年，現(xiàn)代藥理證明，黃連具有明顯的降血糖作用。由于黃連的大苦、大寒之性使黃連尤其是大劑量并未在治療糖尿病得到廣泛使用。黃連口感差、并且容易造成胃腸功能紊亂，主要表現(xiàn)在腹瀉和便秘。黃連為苦寒之品，易傷胃陽，易致脾胃虛寒出現(xiàn)胃脘脹滿不舒。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0007]本發(fā)明的一個目的是克服現(xiàn)有藥物治療糖尿病癥的缺陷，提供一種用于輔助降血糖的益生菌發(fā)酵中藥復(fù)方組合物。
[0008]本發(fā)明的技術(shù)方案為:
一種用于輔助降血糖的益生菌發(fā)酵中藥復(fù)方組合物，由益生菌發(fā)酵中藥復(fù)方制得，所述中藥復(fù)方的成分及含量為:每1000ml益生菌發(fā)酵中藥復(fù)方組合物中含:粉葛50g-100g、山藥20g-600g、桑葉20g-60g、枸杞子20g-60g、馬齒莧30g_90g、干姜10g_40g、苦蕎麥50-150、西洋參 10g-60g、甘草 4g-10g、蠶蛹 10g_50g、豬胰臟 30g_90g。
[0009]優(yōu)選方案為:每1000ml益生菌發(fā)酵中藥復(fù)方組合物中含:粉葛80g、山藥40g、桑葉40g、枸杞子40g、馬齒莧60g、干姜25g、苦蕎麥100g、西洋參50g (細(xì)粉)，甘草8g、蠶蛹24g、豬胰臟60g。
[0010]所述的益生菌為雙歧桿菌和乳桿菌。
[0011]所述的雙歧桿菌選自兩歧雙歧桿菌、短雙歧桿菌、青春雙歧桿菌、嬰兒雙歧桿菌；所述的乳桿菌選自嗜酸乳桿菌、德氏乳桿菌、植物乳桿菌、干酪乳桿菌、鼠李糖乳桿菌。菌種來源于中國典型培養(yǎng)物保藏中心(CCTCC)(中國，武漢)或中國普通微生物菌種保藏管理中心(CGMCC)(中國，北京)或者從正常人的糞便或腸粘膜組織中分離得到這些細(xì)菌菌株。
[0012]本發(fā)明的另一個目的是提供一種制備上述用于輔助降血糖的益生菌發(fā)酵中藥復(fù)方組合物的方法，其步驟如下:
a.制備脫脂蠶蛹粉液:按中藥復(fù)方取蠶蛹洗凈，100°C烘干至水分小于5.0%，粉碎，過40目篩，加入蠶蛹粉重量/體積比3倍量的95%乙醇，60°C脫脂2.0小時，抽濾后，80°C烘干，過40目篩，得脫脂蠶蛹粉，加入重量/體積比6倍的水，浸泡30分鐘，加熱煮沸30分鐘，冷卻至45°C，即得脫脂蠶蛹粉液；
b.制備蠶蛹酶解液:取新鮮豬胰臟去掉脂肪筋膜，打漿后與脫脂蠶蛹粉液混合，用氫氧化鈉調(diào)PH值為8.0，酶解3小時左右，pH降至6.5—6.8時，加熱滅酶，結(jié)束酶解；將酶解液用鹽酸調(diào)PH值為4.5，加熱至沸10分鐘，過濾后得蠶蛹酶解液；
c.制備中藥復(fù)方提取物:將西洋參粉碎，過100目篩，得西洋參粉；將中藥粉葛、山藥、桑葉、枸杞子、馬齒莧、干姜、苦蕎麥、西洋參粉、甘草加重量/體積比8倍的飲用水，浸泡I小時后，并于100°c提取1小時,過濾,再向濾渣中加重量/體積比6倍的水，100°C提取I小時后，過濾后合并濾液，并與步驟b制備的蠶蛹酶解液混合，減壓下濃縮至所需體積，即得中藥復(fù)方提取物；d.制備益生菌發(fā)酵用的中藥復(fù)方提取物底物:在步驟c得到的中藥復(fù)方提取物中加入重量/體積比為0.25%~1.5%的葡萄糖、重量/體積比為0.1%~0.6%的蛋白胨、重量/體積比為0.05 %~0.2%的酵母粉、重量/體積比為0.1%~0.4%的酵母膏、重量/體積比為0.01%~0.03%的三氯蔗糖、無機鹽、三氯化鉻CrCl3.6H20 0.77mg/100ml，調(diào)整pH值7.0并于115°C下滅菌40分鐘后，得到益生菌發(fā)酵用的中藥復(fù)方提取物底物；
e.制備益生菌發(fā)酵中藥復(fù)方組合物:當(dāng)步驟d得到的益生菌發(fā)酵用的中藥復(fù)方提取物底物滅菌后溫度降至39°C左右時，接種預(yù)培養(yǎng)的體積百分比各約0.5%的一種或者兩種雙歧桿菌的菌液，常規(guī)培養(yǎng)約2飛小時，再次接種預(yù)培養(yǎng)的體積百分比各約0.5%的兩種或者三種乳桿菌的菌液，繼續(xù)發(fā)酵20-22小時，pH值降至4.0以下時結(jié)束發(fā)酵，穩(wěn)定化處理后即得到本發(fā)明所述的益生菌發(fā)酵中藥復(fù)方組合物。
[0013]步驟d 中所述的無機鹽為 FeS04*7H20 1.0mg/100ml、ZnS04*7H20 4.4mg/100ml、Na2Se03*5H20 0.024 mg/100ml、MgS04*7H20 70mg/100ml、Κ2ΗΡ04.3Η20 100mg/100ml、KH2P04 100mg/100ml。 [0014]步驟e中所述的接種的方式為同時接種預(yù)培養(yǎng)的體積百分比各約0.5%的一種或者兩種雙歧桿菌的菌液和預(yù)培養(yǎng)的體積百分比各約0.5%的兩種或者三種乳桿菌的菌液；所述發(fā)酵的時間為常規(guī)發(fā)酵16~48小時，當(dāng)pH降至4.0以下時結(jié)束發(fā)酵，穩(wěn)定化處理后即得本發(fā)明所述的益生菌發(fā)酵中藥復(fù)方組合物。
[0015]本發(fā)明的再一個目的是提供本發(fā)明的益生菌發(fā)酵中藥復(fù)方組合物在制備治療糖尿病的藥物或保健食品或食品中的應(yīng)用。
[0016]可按照制藥工業(yè)中已知的方法(如參見Remington’s PharmaceuticalScience.15th ed., Mack Publishing Company, 1980 )將本發(fā)明的益生菌發(fā)酵中藥復(fù)方組合物與一種或多種醫(yī)藥上可接受的載體或賦形劑或稀釋劑按適當(dāng)?shù)谋壤旌?，并按已知方法除菌后，制成藥劑學(xué)上可接受的膠囊劑、顆粒劑、散劑、丸劑、片劑、口服液制劑。
[0017]可將本發(fā)明的發(fā)酵組合物直接制成保健食品或藥物，適于患有高血糖的人預(yù)防或治療使用。
[0018]一般說來，本發(fā)明的發(fā)酵組合物的口服給藥劑量可根據(jù)待治療的病癥或病理狀態(tài)的性質(zhì)、嚴(yán)重程度、病人或動物的年齡、體重、一般健康狀態(tài)，以及病人或動物對所用藥物的敏感性、耐受性和給藥方式等因素，按照個體化的原則由臨床醫(yī)生確定。
[0019]本發(fā)明的益生菌發(fā)酵中藥組合物具有口感易于接受、不刺激胃腸道，同時由于含有益生菌菌體及其代謝產(chǎn)物，能夠調(diào)理胃腸道環(huán)境，增加了對藥物的吸收。
[0020]利用腸道益生菌發(fā)酵中藥提取物，產(chǎn)生的酸性代謝物可以中和黃連的苦，使患者能夠堅持服用。并且益生菌發(fā)酵中藥組合物可以調(diào)理胃腸道功能，減輕鹽酸小檗堿對胃腸道的刺激。
[0021]腸道益生菌參與了人體的生理、生化、病理和藥理過程。因此，益生菌發(fā)酵中藥組合物用于糖尿病人的輔助治療，具有重大的社會和經(jīng)濟(jì)效益。
【具體實施方式】
[0022]實施例1:益生菌發(fā)酵中藥復(fù)方組合物中蠶蛹提取方法
取蠶蛹24g，100°C將洗凈后的蠶蛹烘干至水分小于5.0%，粉碎，過40目篩，加入蠶蛹粉3倍量的(重量/體積)95%乙醇，60°C脫脂2.0小時，抽濾后，80°C烘干，過40目篩，得脫脂蠶蛹粉，將脫脂蠶蛹粉中加入6倍的水(重量/體積)，浸泡30分鐘，加熱煮沸30分鐘，冷卻至45°C備用。此為脫脂蠶蛹粉液。取新鮮的豬胰臟60g，去掉脂肪筋膜，打漿后與脫脂蠶蛹粉液混合，用氫氧化鈉調(diào)PH值為8.0，酶解3小時左右，pH降至6.5—6.8時，加熱滅酶，結(jié)束酶解。將酶解液用鹽酸調(diào)PH值為4.5，加熱至沸10分鐘，過濾后得蠶蛹酶解液?；蛘咧苯淤徺I脫脂的蠶蛹粉，加水浸泡后同樣方法酶解，即得。
[0023]實施例2益生菌發(fā)酵中藥復(fù)方組合物的制備
將西洋參粉碎，過100目篩，得西洋參粉；按下列重量稱取各味中藥:粉葛80g、山藥40g、桑葉40g、枸杞子40g、馬齒莧60g、干姜25g、苦蕎麥100g、西洋參50g(細(xì)粉)、甘草8g，加8倍水浸泡I小時，并于100°C提取I小時，過濾，再向濾渣中加6倍量水，100°C提取I小時后，過濾并合并濾液，并加入實施例1中提取的蠶蛹酶解液，減壓下濃縮至1000ml，即得中藥復(fù)方提取物。然后再加入葡萄糖(重量/體積比0.5%)、蛋白胨(重量/體積比0.2%)、酵母粉(重量/體積比0.1%)、酵母膏(重量/體積比0.2%)、三氯蔗糖(重量/體積比0.017%)、無機鹽(FeS04*7H20 1.0mg/100ml、ZnS04*7H20 4.4mg/100ml、Na2Se03*5H20 0.024mg/100ml、MgSO4.7Η20 70mg/100ml、K2HPO4.3Η20 100mg/100ml、KH2PO4 lOOmg/lOOml)，三氯化鉻(CrCl3*6H20)0.77mg/100ml，調(diào)整ρΗ7.0左右，并于115°C下滅菌40分鐘。當(dāng)溫度降至39°C左右時，接種預(yù)培養(yǎng)的各約0.5% (體積百分比)的兩歧雙歧桿菌(正常人體分離，經(jīng)中國科學(xué)院微生物研究所鑒定)和短雙歧桿菌(AS 1.2213)的菌液，37°C培養(yǎng)約6小時后，再接種各約0.5% (體積百分比)的嗜酸乳桿菌(AS 1.1854)、植物乳桿菌(AS 1.19)和德氏乳桿菌(AS 1.1480)的菌液，37°C發(fā)酵16小時檢測pH值，當(dāng)pH值降至4.0以下時結(jié)束發(fā)酵，70°C穩(wěn)定化處理4小時。即得到益生菌發(fā)酵中藥復(fù)方組合物。
[0024]本發(fā)明中使用的益生菌包括雙歧桿菌和乳桿菌，其中雙歧桿菌是人或哺乳動物體內(nèi)最重要的生理性細(xì)菌，主要分布于小腸下部和結(jié)腸內(nèi)。乳桿菌是人體內(nèi)分布最為廣泛的益生菌。在胃腸道中，該細(xì)菌主要分布于迥腸部。這些益生菌產(chǎn)生出的乳酸、醋酸等酸性物質(zhì)能刺激腸道分泌大量腸液，對糞便起到軟化作用。益生菌作用所形成的酸性環(huán)境也能使結(jié)腸蠕動增強，有利于糞便排泄。因此，本發(fā)明選用兩歧雙歧桿菌、短雙歧桿菌、嗜酸乳桿菌、德氏乳桿菌、植物乳桿菌等常見益生菌菌株。我們之所以選擇這些細(xì)菌，主要是基于它們在人或動物腸道內(nèi)分布的總體廣泛性，以及它們生理學(xué)活性的互補性。
[0025]囷株可以從中國典型培養(yǎng)物保減中心(CCTCC)(中國，武漢)和中國普通微生物囷種保藏管理中心(CGMCC)(中國，北京)購得，或者從正常人的糞便或腸粘膜組織中分離得到這些細(xì)菌菌株。
[0026]為檢測本發(fā)明的益生菌發(fā)酵中藥復(fù)方組合物、以及與鹽酸小檗堿聯(lián)合應(yīng)用對糖尿病的功能作用，本發(fā)明通過以下對比試驗，以證明經(jīng)過益生菌發(fā)酵中藥復(fù)方組合物，對大鼠高血糖模型的空腹血糖和葡萄糖耐受量和體重等的影響。結(jié)果表明，本發(fā)明的益生菌發(fā)酵中藥復(fù)方組合物與鹽酸小檗堿聯(lián)合應(yīng)用可以顯著性的降低大鼠的空腹血糖、葡萄糖耐量指標(biāo)，與模型組比較，有明顯的降低血糖的作用，具有顯著性差異。并且，益生菌發(fā)酵中藥復(fù)方組合物與鹽酸小檗堿聯(lián)合應(yīng)用于高血糖大鼠可以減輕鹽酸小檗堿對大鼠體重的影響。實驗結(jié)果表明益生菌發(fā)酵中藥復(fù)方組合物可以減輕鹽酸小檗堿對胃腸道的刺激，不影響大鼠的代謝、生長。[0027]實驗例1:本發(fā)明益生菌發(fā)酵中藥復(fù)方組合物輔助降血糖及糖耐量實驗
本實施例旨在利用大鼠的高血糖模型，舉例描述按本發(fā)明方法制備益生菌發(fā)酵中藥復(fù)方組合物降血糖效果。
[0028]空腹降血糖實驗:取實施例2制備的益生菌發(fā)酵中藥復(fù)方組合物和鹽酸小檗堿(青島黃海制藥有限公司)，作為供試樣品。強生血糖測定儀測定血糖值。
[0029]取體重180±20g的雄性大鼠80只，適應(yīng)性飼養(yǎng)3天，隨機取出10只單獨喂養(yǎng)，為空白對照組，其余70只按照60mg/kg的劑量尾靜脈注射鏈尿霉素，48小時后測定空腹血糖，若低于12mmol/L，適量補加注射鏈尿霉素，6天后禁食3小時，測血糖，血糖值大于15 mmol/L為高血糖模型成功動物。選高血糖模型成功動物60只，按照禁食3小時的血糖水平，隨機分為6組，每組10只。分別為高血糖模型組、發(fā)酵組合物高劑量組、發(fā)酵組合物中劑量組、發(fā)酵組合物高劑量+鹽酸小檗堿組、發(fā)酵組合物中劑量+鹽酸小檗堿組、鹽酸小檗堿組。高劑量組為人體推薦量的20倍，即每日每只大鼠口服2.9ml (濃縮，相當(dāng)于原組合物5.8ml)；低劑量組為人體推薦量的10倍，即每日每只大鼠口服2.9ml ;鹽酸小檗堿組大鼠口服劑量為150mg/kg。高血糖模型組和空白對照組給予蒸餾水，連續(xù)給藥30天后，禁食3小時后測定空腹血糖值，比較各組動物血糖值。具體實驗結(jié)果見表1。
[0030]表1益生菌發(fā)酵中藥復(fù)方組合物對大鼠空腹血糖實驗結(jié)果
【權(quán)利要求】
1.一種用于輔助降血糖的益生菌發(fā)酵中藥復(fù)方組合物，其特征在于，由益生菌發(fā)酵中藥復(fù)方制得，所述中藥復(fù)方的成分及含量為:每1000ml益生菌發(fā)酵中藥復(fù)方組合物中含:粉葛50g-100g、山藥20g-600g、桑葉20g-60g、枸杞子20g_60g、馬齒覓30g_90g、干姜10g-40g、苦蕎麥 50-150、西洋參 10g-60g、甘草 4g_10g、蠶蛹 10g_50g、豬胰臟 30g_90g ;所述的益生菌為雙歧桿菌和乳桿菌。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的用于輔助降血糖的益生菌發(fā)酵中藥復(fù)方組合物，其特征在于，所述的中藥復(fù)方的成分及含量為:每1000ml益生菌發(fā)酵中藥復(fù)方組合物中含:粉葛80g、山藥40g、桑葉40g、枸杞子40g、馬齒莧60g、干姜25g、苦蕎麥100g、西洋參50g(細(xì)粉)，甘草8g、蠶蛹24g、豬胰臟60g。
3.一種用于輔助降血糖的益生菌發(fā)酵中藥復(fù)方組合物的制備方法，其特征在于，步驟如下: a.制備脫脂蠶蛹粉液:按中藥復(fù)方取蠶蛹洗凈，100°C烘干至水分小于5.0%，粉碎，過40目篩，加入蠶蛹粉重量/體積比3倍量的95%乙醇，60°C脫脂2.0小時，抽濾后，80°C烘干，過40目篩，得脫脂蠶蛹粉；加入重量/體積比6倍的水，浸泡30分鐘，加熱煮沸30分鐘，冷卻至45°C，即得脫脂蠶蛹粉液； b.制備蠶蛹酶解液:取新鮮豬胰臟去掉脂肪筋膜，打漿后與脫脂蠶蛹粉液混合，用氫氧化鈉調(diào)PH值為8.0，酶解3小時左右，pH降至6.5—6.8時，加熱滅酶，結(jié)束酶解；將酶解液用鹽酸調(diào)PH值為4.5，加熱至沸10分鐘，過濾后得蠶蛹酶解液； c.制備中藥復(fù)方提取物:將西洋參粉碎，過100目篩，得西洋參粉；將中藥粉葛、山藥、桑葉、枸杞子、馬齒莧、干姜、苦蕎麥、西洋參粉、甘草加重量/體積比8倍的飲用水，浸泡I小時后，并于100°c提取I小時,過濾,再向濾渣中加重量/體積比6倍的水，100°C提取I小時后，過濾后合并濾液，并與步驟b制備的蠶蛹酶解液混合，減壓下濃縮至所需體積，即得中藥復(fù)方提取物； d.制備益生菌發(fā)酵用的中藥復(fù)方提取物底物:在步驟c得到的中藥復(fù)方提取物中加入重量/體積比為0.25%~1.5%的葡萄糖、重量/體積比為0.1%~0.6%的蛋白胨、重量/體積比為0.05 %~0.2%的酵母粉、重量/體積比為0.1%~0.4%的酵母膏、重量/體積比為0.01%~0.03%的三氯蔗糖、無機鹽、三氯化鉻CrCl3WH2O 0.77mg/100ml，調(diào)整pH值7.0，并于115°C下滅菌40分鐘后，得到益生菌發(fā)酵用的中藥復(fù)方提取物底物； e.制備益生菌發(fā)酵中藥復(fù)方組合物:當(dāng)步驟d得到的益生菌發(fā)酵用的中藥復(fù)方提取物底物滅菌后溫度降至39°C左右時，接種預(yù)培養(yǎng)的體積百分比各約0.5%的一種或者兩種雙歧桿菌的菌液，常規(guī)培養(yǎng)約2飛小時，再次接種預(yù)培養(yǎng)的體積百分比各約0.5%的兩種或者三種乳桿菌的菌液，繼續(xù)發(fā)酵20-22小時，pH值降至4.0以下時結(jié)束發(fā)酵，穩(wěn)定化處理后即得到本發(fā)明所述的益生菌發(fā)酵中藥復(fù)方組合物； 所述中藥復(fù)方的成分及含量為:每1000ml益生菌發(fā)酵中藥復(fù)方組合物中含:粉葛50g_100g、山藥 20g_600g、桑葉 20g_60g、枸杞子 20g_60g、馬齒覓 30g_90g、干姜 10g_40g、苦蕎麥 50-150、西洋參 10g-60g、甘草 4g-10g、蠶蛹 10g_50g、豬胰臟 30g_90g。
4.根據(jù)權(quán)利要求3所述的用于輔助降血糖的益生菌發(fā)酵中藥復(fù)方組合物的制備方法，其特征 在于，步驟d中所述的無機鹽為FeS04*7H20 L0mg/100ml、ZnSO4.7Η204.4mg/100ml、Na2Se03.5H20 0.024 mg/100ml、MgSO4*7H20 70mg/100ml、K2HPO4.3Η20lOOmg/lOOml、KH2PO4 lOOmg/lOOml。
5.根據(jù)權(quán)利要求3或4所述的用于輔助降血糖的益生菌發(fā)酵中藥復(fù)方組合物的制備方法，其特征在于，步驟e中所述的接種的方式為同時接種預(yù)培養(yǎng)的體積百分比各約0.5%的一種或者兩種雙歧桿菌的菌液和預(yù)培養(yǎng)的體積百分比各約0.5%的兩種或者三種乳桿菌的菌液；所述發(fā)酵的時間為常規(guī)發(fā)酵16~48小時，當(dāng)pH降至4.0以下時結(jié)束發(fā)酵，穩(wěn)定化處理后即得本發(fā)明所述的益生菌發(fā)酵中藥復(fù)方組合物。
6.根據(jù)權(quán)利要求3或4所述的用于輔助降血糖的益生菌發(fā)酵中藥復(fù)方組合物的制備方法，其特征在于，步驟e中所述的雙歧桿菌選自兩歧雙歧桿菌、短雙歧桿菌、青春雙歧桿菌、嬰兒雙歧桿菌；所述的乳桿菌選自嗜酸乳桿菌、德氏乳桿菌、植物乳桿菌、干酪乳桿菌、鼠李糖乳桿菌。
7.根據(jù)權(quán)利要求5所述的用于輔助降血糖的益生菌發(fā)酵中藥復(fù)方組合物的制備方法，其特征在于，步驟e中所述的雙歧桿菌選自兩歧雙歧桿菌、短雙歧桿菌、青春雙歧桿菌、嬰兒雙歧桿菌；所述的乳桿菌選自嗜酸乳桿菌、德氏乳桿菌、植物乳桿菌、干酪乳桿菌、鼠李糖乳桿菌。
8.—種權(quán)利要求1或2所述的用于輔助降血糖的益生菌發(fā)酵中藥復(fù)方組合物的應(yīng)用，其特征在于，所述的益生菌發(fā)酵中藥復(fù)方組合物在制備治療糖尿病的藥物或保健食品或食品中的應(yīng)用。
9.根據(jù)權(quán)利要求8所述的用于輔助降血糖的益生菌發(fā)酵中藥復(fù)方組合物的應(yīng)用，其特征在于，所述的輔助治療糖尿病的藥物為:將益生菌發(fā)酵中藥復(fù)方組合物按照制藥工業(yè)中已知的方法與一種或多種醫(yī)藥上可接受的載體或賦形劑或稀釋劑按適當(dāng)?shù)谋壤旌?，并按已知方法除菌后，制成藥劑學(xué)上`可接受的膠囊劑、顆粒劑、散劑、丸劑、片劑、口服液制劑。
【文檔編號】A61K36/9068GK103550754SQ201310599564
【公開日】2014年2月5日 申請日期:2013年11月25日 優(yōu)先權(quán)日:2013年11月25日
【發(fā)明者】孫筱林, 褚新紅, 吳炳新, 呂美, 李建龍 申請人:三株福爾制藥有限公司