用于治療心力衰竭的合成的apelin模擬物的制作方法
【專利摘要】本發(fā)明提供了式I’的合成的多肽：X1-X2-X3-X4-X5-X6-X7-X8-X9-X1Q-X11-X12-X13或:M：酉先月安酉旨或鹽，其中XI、X2、X3、X4、X5、X6、X7、X8、X9、X10、XII、X12和X13如說明書定義。該多肽是APJ的激動(dòng)劑。本發(fā)明還涉及制備本發(fā)明多肽的方法，及其治療用途，諸如治療或預(yù)防急性代償失調(diào)性心力衰竭（ADHF)、慢性心力衰竭、肺性高血壓、心房震顫、布魯格達(dá)氏綜合征、室性心動(dòng)過速、動(dòng)脈粥樣硬化、高血壓、再狹窄、局部缺血性心血管疾病、心肌病、心臟纖維化、心律不齊、水潴留、糖尿病（包括妊娠糖尿?。?、肥胖癥、外周動(dòng)脈病、腦血管意外、暫時(shí)性缺血發(fā)作、創(chuàng)傷性腦損傷、肌萎縮側(cè)索硬化、灼傷（包括曬傷）及先兆子癇。本發(fā)明還提供了藥理學(xué)活性劑的組合以及藥物組合物。
【專利說明】用于治療心力衰竭的合成的APELIN模擬物

【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001] 本發(fā)明涉及包含修飾的肽及多肽序列的新組合物，所述肽及多肽序列被設(shè)計(jì)用于 治療其所施與個(gè)體的心血管疾病，且比其野生型對(duì)應(yīng)物顯示更好的對(duì)降解的抵抗性及等效 或更高的生物活性。本發(fā)明還涉及制備所述組合物及使用所述組合物作為藥物活性劑來治 療心血管疾病的方法。
[0002] 發(fā)明背景
[0003] 在西方世界中65歲以上成人心力衰竭的發(fā)病率為約1/100。最常見病理為心肌 收縮力且因此心輸出量（即，任一心室隨時(shí)間排出的有效血液體積）的慢性短缺?；加新?性心力衰竭的患者在心肌收縮力進(jìn)一步下降時(shí)會(huì)具有急性代償失調(diào)發(fā)作（即，心臟無法維 持足夠的血液循環(huán)）。僅美國(guó)每年便有約50萬人因"急性代償失調(diào)性心力衰竭"（ADHF)住 院。
[0004] 目前用于ADHF的療法包括利尿劑、血管舒張劑及直接增加心肌收縮力的強(qiáng)心劑 (inotropes)。當(dāng)前靜脈內(nèi)強(qiáng)心劑（多巴酚丁胺（dobutamine)、多巴胺（dopamine)、米力農(nóng) (milrinone)、左西孟旦（Ievosimendan)用于急性情況，盡管其與諸如心律不齊及增加的 長(zhǎng)期致命性等不良事件相關(guān)。這些傾向已阻止其應(yīng)用于慢性心力衰竭。地高辛（Digoxin) 是口服強(qiáng)心劑，但其受限于窄治療指數(shù)、增加的致心律失常性可能以及腎功能不全中的禁 >*^Τ·ΙΗ 〇
[0005] ADHF迫切地需要這樣的心力衰竭療法，其增加心肌收縮力而沒有致心律失常性或 致命性傾向，并且還可以解決慢性心力衰竭的巨大未滿足的醫(yī)療需要。
[0006] Apelin是先前孤兒G-蛋白-偶聯(lián)受體（GPCR)、APJ(也稱為apelin受體、血管緊張 素樣-1受體、血管緊張素 π樣-1受體等）的內(nèi)源性配體。Apelin/APJ通路廣泛地表達(dá)于心 血管系統(tǒng)中，并且在臨床前模型中apelin已顯示重大有益心血管作用。人類的急性apelin 施用引起外周及冠狀血管舒張并增加心輸出量（Circulation. 2010;121:1818-1827)。因 此，APJ激動(dòng)正成為患有心力衰竭的患者的重要治療祀標(biāo)。認(rèn)為apelin受體APJ的活化增 加心肌收縮力并提供心臟保護(hù)而無當(dāng)前療法的不利傾向。然而，天然apelin展示極短的半 衰期及活體內(nèi)作用持續(xù)時(shí)間。
[0007] 因此，鑒定模擬apelin功能但具有增加的半衰期并顯示與天然存在的apelin等 效或更高生物活性的肽及多肽是所需要的。此外，鑒定顯示出增加的構(gòu)象限制（即，達(dá)成并 維持活性構(gòu)象狀態(tài)以使得肽及多肽可與其受體和/或其它通路靶點(diǎn)相互作用而無需額外 折疊或復(fù)位的能力）的apelin類似物肽及多肽是所需要的。需要使用這些肽及多肽類似 物、包含所述類似物的組合物以及制備和使用所述組合物作為藥物活性劑的方法，來治療 諸如心血管疾病等疾病。


【發(fā)明內(nèi)容】

[0008] 本發(fā)明的目的是提供新的肽及多肽，其可用作APJ激動(dòng)劑且還具有以下優(yōu)于野生 型apelin及其它已知apelin類似物的至少一種改進(jìn)：增加的半衰期；對(duì)施用后和/或溶解 后降解更大的免疫性；及增加的構(gòu)象限制，其全部同時(shí)展示與野生型apelin相同或更高的 生物活性。因此，本發(fā)明的肽及多肽尤其可用于治療或預(yù)防心血管疾病，例如心力衰竭、與 心力衰竭相關(guān)的病癥及病況及對(duì)APJ受體活性的活化響應(yīng)的病癥及病況。
[0009] 在一個(gè)實(shí)施方案中，本發(fā)明的肽及多肽尤其可用于治療或預(yù)防與心力衰竭有關(guān)的 病癥或病況或?qū)PJ受體活性的活化（或激動(dòng)）響應(yīng)的病癥。在另一實(shí)施方案中，本發(fā)明 的肽及多肽可用于治療急性代償失調(diào)性心力衰竭（ADHF)、慢性心力衰竭、肺性高血壓、心房 震顫、布魯格達(dá)氏（Brugada)綜合征、室性心動(dòng)過速、動(dòng)脈粥樣硬化、高血壓、再狹窄、局部 缺血性心血管疾病、心肌病、心臟纖維化、心律不齊、水潴留、糖尿?。òㄈ焉镄蕴悄虿。?、 肥胖癥、外周動(dòng)脈疾病、腦血管意外、暫時(shí)性缺血發(fā)作、創(chuàng)傷性腦損傷、肌萎縮側(cè)索硬化、灼 傷（包括曬傷）及先兆子癇。
[0010] 本發(fā)明涉及如本文所述的肽及多肽、藥物組合物及其制備方法和用途。本發(fā)明的 肽及多肽的實(shí)例包括如式I至IX中任一個(gè)所述的肽及多肽或其酰胺、酯或鹽、以及本文具 體列出的任何肽或多肽，包括但不限于實(shí)驗(yàn)實(shí)施例。
[0011] 因此，本發(fā)明提供式（I'）的肽或多肽：
[0012]

【權(quán)利要求】
1.具有以下式I'的多肽：
其中： Xl是該多肽的N-末端，并且其不存在或選自pE、R、lsn、Q、A、K和5-氨基-戊酸； X2 是 R、A、r、N-Me-R、K、H、hF、hK、F、E 或 Orn ; X3是P、A、a、p、4-PhP、K、D、2-哌啶酸或半胱氨酸，其中半胱氨酸的側(cè)鏈與X7位置處 的半胱氨酸的側(cè)鏈形成二硫鍵； X4是R、A、r、N-Me-R、F、E或半胱氨酸，其中半胱氨酸的側(cè)鏈與X7位置處的半胱氨酸 的側(cè)鏈形成-硫鍵； X5 是 L、Cha、A、D-L、N-Me-L、K、D、4-PhF 或 F ; X6及X12獨(dú)立地是選自C、c、hC、D-hC、K、D、Orn、Dab或E的天然或非天然氨基 酸，其中X6和X12的側(cè)鏈通過共價(jià)鍵連接在一起形成單硫鍵（-S-)、二硫鍵（-S-S-)或 酰胺鍵（-NHC (0)-或-C (0) -NH-)或式-S-CH2-C ( = Z) -CH2-S-的連接；其中 Z 是 0、 N-O-CH2C (0) -L1-R1或N-NH-CH2C (0) -L1-R1,其中R1是脂肪酸衍生物且L1是含有一或多個(gè)氨 基酸和/或一個(gè)或多個(gè)-NH-C 2_6-亞烷基-NH-單元的連接體； 或者備選地X6是K，X13不存在且X12是F或f，其中X12的C-末端與X6的氨基側(cè)鏈 形成酰胺鍵； X7是H、h、A、N-Me-A、a、Aib、K、Nal、F、P、Dap、N、E或半胱氨酸，其中該半胱氨酸的側(cè) 鏈與X3位置處的半胱氨酸的側(cè)鏈或與X4位置處的半胱氨酸的側(cè)鏈形成二硫鍵； X8 是 K、k、F、f、A、hF、N-Me-R、E 或 4-氨基-Isn ; X9 是 G、N-Me-G、A、D、L、R 或 Aib ; XlO 是 P、A、p、4-PhP 或 2-哌啶酸； 父11是]\1、0-犯6、犯6、^]^州16、]\1(0)、六、卩、￥、1^、1(、3-?7六或〇^;且 X13 是 C-末端且不存在或選自 F、f、N-Me-F、Nal、D-Nal、3-Br-F、（S)-0-3-F、I、A、a、 K、Dap、H和 E ; 其中： Nle是L-正亮氨酸； D-hC是D-高半胱氨酸 hC是L-高半胱氨酸； hF是L- 1?苯丙氨酸； hK是L-賴氨酸； Nal是L-萘丙氨酸； Orn是鳥氨酸； Aib是α-氨基異丁酸； Dab是（S)-二氨基丁酸； Dap是（S)-2, 3-二氨基丙酸； M(O)是甲硫氨酸砜； Cha為（S)-P-環(huán)己基丙氨酸； 4-氨基-Isn是4-氨基哌啶-4-甲酸； Isn是異哌啶甲酰； PE是L-焦谷氨酸； 3- PyA為3- (3-吡啶基）-L-丙氨酸； 4- PhF是4-苯基-L-苯丙氨酸； 其中該N-末端與該C-末端任選地與1個(gè)、2個(gè)、3個(gè)或4個(gè)甘氨酸氨基酸一起形成環(huán)； 且 其中K、Orn、Dab、Dap、hK或4-氨基-Isn的側(cè)鏈中的氨基任選地通過酰胺鍵連接至親 脂性基團(tuán)； 或所述多肽的酰胺、酯或鹽；或基本上與其等價(jià)的多肽。
2. 具有下面式II的多肽：
Xl為不存在、pE、R、Q或Isn ; X5 是 L 或 Cha ; X7是H、Aib、F、K (月桂酰基）或K (棕櫚?；?； X8是K、F或4-氣基-Isn ; X9 是 G 或 Aib ; Xll 是 Nle 或 Cha ; X13不存在或是F、f、K (月桂?； (棕櫚?；?； X6及X12獨(dú)立地是選自C、c、he、D-hc、K、D、Orn、Dab或E的天然或非天然氨基酸，其 中X6和X12的側(cè)鏈通過共價(jià)鍵連接在一起形成二硫鍵或酰胺鍵；并且其中該N-末端與該 C-末端任選地與1個(gè)、2個(gè)、3個(gè)或4個(gè)甘氨酸氨基酸一起形成環(huán)；或所述多肽的酰胺、酯或 鹽；或基本上與其等價(jià)的多肽。
3. 根據(jù)權(quán)利要求1或2的多肽，其中 X6和X12獨(dú)立地選自K、0rn、Dab、E和D，并且其中X6和X12的側(cè)鏈一起形成酰胺鍵； 或所述多肽的酰胺、酯或鹽。
4. 根據(jù)權(quán)利要求1或2的多肽，其中 X6和X12獨(dú)立地是C，其中X6和X12的側(cè)鏈一起形成二硫鍵；或所述多肽的酰胺、酯或 鹽。
5. 根據(jù)權(quán)利要求1、2或4的多肽，其具有式III :
或所述多肽的酰胺、酯或鹽。
6. 根據(jù)權(quán)利要求1-5任一項(xiàng)的多肽，其具有式IV
或所述多肽的酰胺、酯或鹽。
7. 根據(jù)權(quán)利要求1、2和4-6任一項(xiàng)的多肽，其具有式V
或所述多肽的酰胺、酯或鹽。
8. 根據(jù)權(quán)利要求1的多肽，其具有式VI :
或所述多肽的酰胺、酯或鹽。
9. 根據(jù)權(quán)利要求1的多肽，其具有式VII :
或所述多肽的酰胺、酯或鹽。
10. 根據(jù)權(quán)利要求1、2、5、6或7的多肽，其具有式VIII :
其中Xl的N-末端和X13的C-末端與連接體L形成環(huán)；并且其中L是（G) r，G是甘氨 酸且r是1、2、3或4 ;或所述肽的鹽。
11. 根據(jù)權(quán)利要求10的多肽，其中Xl是Q、X13是F并且r是2 ;或所述肽的鹽。
12. 根據(jù)權(quán)利要求1的多肽，其中X6是K，X13不存在且X12是F或f，其中X12的C-末 端與X6的氨基側(cè)鏈形成酰胺鍵，或具有式IX :
或所述多肽的酯、酰胺或鹽。
13. 根據(jù)權(quán)利要求1至9和12任一項(xiàng)的多肽，其中Xl是pE ;或所述多肽的酰胺、酯或 鹽。
14. 根據(jù)權(quán)利要求1至9和12任一項(xiàng)的多肽，其中Xl不存在；或所述多肽的酰胺、酯 或鹽。
15. 根據(jù)權(quán)利要求14的多肽，其中N-末端是酰胺；或所述多肽的鹽。
16. 根據(jù)權(quán)利要求15的多肽，其中N-末端是式-NHR的酰胺，且R是乙?；?、苯甲?；?、 苯甲酰甲基、琥珀?；⑿刘；?、4-苯基丁?；?-C1 -Ph- (CH2) 3C (O)-或Ph-CH2CH2NHC (O)-， 或所述多肽的鹽。
17. 根據(jù)權(quán)利要求1至9和12任一項(xiàng)的多肽，其中N-末端是式NHRl的酰胺，且Rl是 CH3C (O)-XH3-(O-CH2CH2)，(：(0)-、棕櫚?；?20c) p、肉豆蘧?；?20c)p、月桂?；?20c) p 或 Ph-CH2CH2NHC (O)-，并且其中 P是1至4的整數(shù)； m是1至12的整數(shù)； 月桂酰基（020c)是 C11H23C (O)NH-(CH2)2-O-(CH2)2-O-CH 2-C(O)-; 肉豆蘧?；?20c)是 C13H27C (O)NH-(CH2)2-O-(CH2)2-O-CH 2-C(O)-; 棕櫚酰基（020c)是 C15H31C(O)NH-(CH2)2-O-(CH 2)2-0-CH2-C(0)-;或所述多肽的鹽。
18. 根據(jù)權(quán)利要求1至9任一項(xiàng)的多肽，其中X13是F ;或所述多肽的酰胺、酯或鹽。
19. 根據(jù)權(quán)利要求1至9任一項(xiàng)的多肽，其中X13不存在；或所述多肽的酰胺、酯或鹽。
20. 根據(jù)權(quán)利要求19的多肽，其中C-末端是酰胺；或所述多肽的鹽。
21. 根據(jù)權(quán)利要求20的多肽，其中C-末端是式-C(0)-R2的酰胺，并且R2 是-NH2、-NH-Me、-NH-NHBn 或-NH- (CH2) 2-Ph ;或所述多肽的鹽。
22. 根據(jù)權(quán)利要求1至21任一項(xiàng)的多肽，其中X5是L ;或所述多肽的酰胺、酯或鹽。
23. 根據(jù)權(quán)利要求1至7和10至22任一項(xiàng)的多肽，其中X7是H ;或所述多肽的酰胺、 酯或鹽。
24. 根據(jù)權(quán)利要求1至5和8至23任一項(xiàng)的多肽，其中X8是K ;或所述多肽的酰胺、酯 或鹽。
25. 根據(jù)權(quán)利要求1至5和8至24任一項(xiàng)的多肽，其中X9是G ;或所述多肽的酰胺、酯 或鹽。
26. 根據(jù)權(quán)利要求1至25任一項(xiàng)的多肽，其中Xll是Nle ;或所述多肽的酰胺、酯或鹽。
27. 根據(jù)權(quán)利要求1的多肽，其選自：

肉豆蘧酰基 020c020c020cQ-R-P-R-L-C*-H-K-G-P-Nle-C*-f-0H ; 肉豆蘧?；?020c020c020c020cQ-R-P-R-L-C*-H-K-G-P-Nle-C-f-0H ; pE-R-P-R-L-OH-K-G-P-Nl e-c*-F-〇H ; pE-R-P-R-L-c*-H-K-G-P-Nle-c*-F-〇H ;和 pE-R-P-R-L-O-H-K (Myr) -G-P-Nle-O-F-OH pE-R-P-R-L-〇#-H-K-G-P-Nle-〇#-F-〇H 其中用標(biāo)記的2個(gè)氨基酸分別表示經(jīng)由其側(cè)鏈或末端形成二硫鍵或酰胺鍵 的氨基酸，且其中用"**"標(biāo)記的2個(gè)氨基酸表示經(jīng)由其側(cè)鏈形成二硫鍵或經(jīng)由其末端 形成酰胺鍵的氨基酸；且其中用"***"標(biāo)記的2個(gè)氨基酸表示經(jīng)由其側(cè)鏈形成單硫鍵 或-S-CH 2-C (0) -CH2-S-連接的氨基酸； 或所述多肽的酰胺、酯或鹽。
28. 根據(jù)權(quán)利要求27的多肽，其選自： 其中2個(gè)半胱氨酸氨基酸
C*的側(cè)鏈一起形成二硫鍵；或所述多肽的酰胺、酯或鹽。
29. 在有需要的個(gè)體中治療或預(yù)防對(duì)APJ受體的激動(dòng)響應(yīng)的疾病或病癥的方法，其包 括向所述個(gè)體施用治療有效量的根據(jù)權(quán)利要求1至28任一項(xiàng)的多肽或其酰胺、酯或鹽。
30. 權(quán)利要求29的方法，其中所述疾病或病癥選自：急性代償失調(diào)性心力衰竭（ADHF)、 慢性心力衰竭、肺性高血壓、心房震顫、布魯格達(dá)氏綜合征、室性心動(dòng)過速、動(dòng)脈粥樣硬化、 高血壓、再狹窄、局部缺血性心血管疾病、心肌病、心臟纖維化、心律不齊、水潴留、糖尿病 (包括妊娠糖尿病）、肥胖癥、外周動(dòng)脈病、腦血管意外、暫時(shí)性缺血發(fā)作、創(chuàng)傷性腦損傷、肌 萎縮側(cè)索硬化、灼傷（包括曬傷）及先兆子癇。
31. 根據(jù)權(quán)利要求1至28任一項(xiàng)的多肽或其酰胺、酯或鹽，其用作藥物。
32. 根據(jù)權(quán)利要求1至28任一項(xiàng)的多肽或其酰胺、酯或鹽，其用于治療或預(yù)防對(duì)APJ受 體的激動(dòng)響應(yīng)的疾病或病癥。
33. 根據(jù)權(quán)利要求1至28任一項(xiàng)的多肽或其酰胺、酯或鹽，其用于治療急性代償失調(diào) 性心力衰竭（ADHF)、慢性心力衰竭、肺性高血壓、心房震顫、布魯格達(dá)氏綜合征、室性心動(dòng) 過速、動(dòng)脈粥樣硬化、高血壓、再狹窄、局部缺血性心血管疾病、心肌病、心臟纖維化、心律不 齊、水潴留、糖尿?。òㄈ焉锾悄虿。?、肥胖癥、外周動(dòng)脈病、腦血管意外、暫時(shí)性缺血發(fā) 作、創(chuàng)傷性腦損傷、肌萎縮側(cè)索硬化、灼傷（包括曬傷）及先兆子癇。
34. 組合產(chǎn)品，其包含治療有效量的根據(jù)權(quán)利要求1至28任一項(xiàng)的多肽或其酰胺、酯或 鹽以及一種或多種治療活性的共用物質(zhì)。
35. 根據(jù)權(quán)利要求34的組合產(chǎn)品，其中所述共用物質(zhì)選自強(qiáng)心劑、β腎上腺素能受體 阻斷劑、HMG-Co-A還原酶抑制劑、血管緊張素 II受體拮抗劑、血管緊張素轉(zhuǎn)化酶（ACE)抑制 齊U、鈣通道阻斷劑（CCB)、內(nèi)皮素拮抗劑、腎素抑制劑、利尿劑、ApoA-I模擬物、抗糖尿病劑、 減肥劑、醛固酮受體阻斷劑、內(nèi)皮素受體阻斷劑、醛固酮合酶抑制劑（ASI)、CETP抑制劑、抗 凝劑、松弛素 、BNP (奈西立肽）和/或NEP抑制劑。
36. 藥物組合物，其包含治療有效量的根據(jù)權(quán)利要求1至28任一項(xiàng)的多肽或其酰胺、酯 或鹽以及一種或多種可藥用載體。
【文檔編號(hào)】A61K38/12GK104220452SQ201380016261
【公開日】2014年12月17日 申請(qǐng)日期:2013年1月25日 優(yōu)先權(quán)日:2012年1月27日
【發(fā)明者】A·戈隆索夫, P·格羅舍, 胡琦穎, 今瀨英智, D·T·帕克, 八十島華楊, F·澤克里H·趙 申請(qǐng)人:諾華股份有限公司