用于減少注射引起的皮膚反應(yīng)的腎上腺素能受體激動(dòng)劑和填充劑的可注射組合物的制作方法
【專利摘要】本發(fā)明公開了一種可注射組合物，其包括填充劑或肉毒桿菌毒素以及腎上腺素能受體激動(dòng)劑，該組合物可以用于減輕、減小或避免由注射引起的皮膚反應(yīng)，特別是發(fā)紅、瘀斑、瘀傷、流血、紅斑、水腫、壞死、潰瘍、腫脹和/或炎癥。
【專利說明】用于減少注射引起的皮膚反應(yīng)的腎上腺素能受體激動(dòng)劑和 填充劑的可注射組合物

【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001] 本發(fā)明涉及外科手術(shù)及皮膚病學(xué)領(lǐng)域。
[0002] 本發(fā)明涉及一種可注射的組合物，其包括腎上腺素能受體激動(dòng)劑（優(yōu)選地為溴莫 尼定）和填充劑（優(yōu)選地為透明質(zhì)酸）。本發(fā)明用于預(yù)防和/或治療由美容手術(shù)引起的表 面瘀傷及流血。

【背景技術(shù)】
[0003] 表面瘀傷及較小程度的流血是很多美容手術(shù)（包括皮下填充劑注射、肉毒桿菌毒 素注射及鐳射磨皮）的常見結(jié)果，報(bào)告顯示平均約占手術(shù)時(shí)間的三分之一。
[0004] 而抽脂術(shù)、豐胸術(shù)/胸部提升、面部拉皮以及腹壁整形術(shù)等外科手術(shù)中會(huì)出現(xiàn)更 嚴(yán)重的瘀傷。
[0005] 由于填充劑的皮下或皮內(nèi)注射造成血管損傷或血管壁破裂而引起的瘀斑、瘀傷、 血液成分滲出會(huì)馬上導(dǎo)致炎癥、發(fā)紅以及水腫，這些繼發(fā)性即時(shí)反應(yīng)的處理是大家尤其關(guān) 心的問題。
[0006] 盡管一般認(rèn)為發(fā)紅、皮膚紅斑、瘀傷及流血不是大問題，但是大多數(shù)的醫(yī)師會(huì)在手 術(shù)前提醒病人為這些可能發(fā)生的癥狀作好準(zhǔn)備。特別地，醫(yī)師們通常會(huì)注意不在手術(shù)前和 手術(shù)后使用阿司匹林或其它抗凝血藥物，而是在手術(shù)后立即大量使用冰袋，同時(shí)常常使用 山金車（一種用于促進(jìn)愈合的草藥）。這種缺陷常常會(huì)讓一些病人沮喪，尤其是那些進(jìn)行美 容手術(shù)的病人。特別是對(duì)于瘀傷/流血的結(jié)果，醫(yī)師們報(bào)告指出，病人們最關(guān)注的一個(gè)問題 是出現(xiàn)瘀傷時(shí)的停工期，當(dāng)出現(xiàn)瘀傷時(shí)，病人們更愿意待在家里，而不是返回工作及參加社 交活動(dòng)。
[0007] 因此，需要減輕美容或外科手術(shù)中（尤其是注射填充劑時(shí)）出現(xiàn)的瘀傷/流血。
[0008] 本發(fā)明經(jīng) 申請(qǐng)人:證明，腎上腺素能受體激動(dòng)劑與填充劑一起注射可以減少由于注 射引起的皮膚反應(yīng)的發(fā)生。


【發(fā)明內(nèi)容】

[0009] 本發(fā)明提供了一種由大量腎上腺素能受體激動(dòng)劑（優(yōu)選稱為溴莫尼定的產(chǎn)品）和 填充劑或肉毒桿菌毒素（優(yōu)選地為透明質(zhì)酸）組成的組合物。所述組合物全身性給藥于需 要的個(gè)體。
[0010] 本發(fā)明提供了大量的腎上腺素能受體激動(dòng)劑（優(yōu)選稱為溴莫尼定的產(chǎn)品）與肉毒 桿菌毒素或填充劑（優(yōu)選地為透明質(zhì)酸）的結(jié)合在需要的個(gè)體中的使用。
[0011] 本發(fā)明提供了一種方法，用于減輕、減少或避免特別是美容手術(shù)中的瘀傷以及較 小程度地減輕、減少或避免流血，其通過給需要的個(gè)體提供包含皮膚填充劑（優(yōu)選地為透 明質(zhì)酸）以及大量的腎上腺素能受體激動(dòng)劑（優(yōu)選稱為溴莫尼定的產(chǎn)品）實(shí)現(xiàn)。
[0012] 第一方面，本發(fā)明涉及一種組合物，其包括： -填充劑或肉毒桿菌毒素； -腎上腺素能受體激動(dòng)劑。
[0013] 通過本發(fā)明的描述可以清楚地了解，本發(fā)明主要用于預(yù)防及治療皮膚缺陷，特別 是那些由于皮膚老化（褶皺、皺紋、皮膚凹陷，……）或者皮膚損傷（疤痕，……）造成的 皮膚缺陷。
[0014] 在過去的幾年里，皮膚缺陷的治療已經(jīng)獲得巨大的關(guān)注。結(jié)果，人們提出了皮內(nèi)或 皮下注射的化合物。
[0015] 作為首選，可以局部注射能夠引起肌肉麻痹或收縮的肉毒桿菌毒素。
[0016] 或者在優(yōu)選實(shí)施例中，可以注射填充劑。填充劑一般定義為能夠填充皮膚組織的 生物材料。所述要求保護(hù)的可注射組合物也可以定義為"皮膚填充劑"（dermal filler)，該 組合物包含在水性介質(zhì)中的所述填充劑,并表現(xiàn)出填充性質(zhì)。
[0017] 在這種情況下，一些化合物如聚丙烯酰胺凝膠、聚甲基丙烯酸甲酯（PMMA)顆?；?硅酮都可以使用。
[0018] 最優(yōu)選的化合物是可再吸收的分子，如透明質(zhì)酸、膠原蛋白、藻酸鹽、右旋糖酐、彈 性蛋白（elastine)或聚氨酯凝膠。
[0019] 透明質(zhì)酸或透明質(zhì)酸鹽（hyaluronate)是一種廣泛分布在結(jié)締組織、上皮組織以 及神經(jīng)組織中的不含硫的粘多糖。它是細(xì)胞外基質(zhì)的主要成分之一。其顯著有助于細(xì)胞增 殖及細(xì)胞遷移。它對(duì)皮膚含水量及皮膚彈性起重要作用。隨著年齡增大，透明質(zhì)酸的含量 及質(zhì)量水平都不斷下降，從而導(dǎo)致皮膚干燥和皺紋。
[0020] 透明質(zhì)酸是一種天然形成的生物聚合物，它在水中會(huì)形成高粘度溶液。因此，它作 為一種藥劑產(chǎn)品得到廣泛應(yīng)用。另外，由于未觀察到任何免疫原性反應(yīng)，該種化合物被認(rèn)為 是非常安全的。到目前為止，只出現(xiàn)了極少不良事件。
[0021] 因此，有利地，填充劑為透明質(zhì)酸或其藥學(xué)上可接受的鹽或衍生物，特別是其鈉鹽 或鉀鹽。透明質(zhì)酸能夠以不同的形式使用：它的鹽、它的衍生物，如線性形式或交聯(lián)的酯類 或酰胺類化合物。特別地，其分子量（一般在500kDa-5000kDa之間）及交聯(lián)度取決于其應(yīng) 用，特別是取決于需要填充的皺紋的深度。
[0022] 所述要求保護(hù)的組合物的第二個(gè)成分是腎上腺素能受體激動(dòng)劑。已知腎上腺素能 受體激動(dòng)劑能夠綁定和激活腎上腺素能受體。
[0023] 本領(lǐng)域中眾所周知的是，腎上腺素能受體包括α和β受體。二十世紀(jì)七十年代， 在α腎上腺素能受體中區(qū)分出α?和α2受體。同一年代，發(fā)現(xiàn)α2出現(xiàn)在血管平滑肌 上并顯不出對(duì)血管收縮反應(yīng)（vasoconstrictor response)的介導(dǎo)（"Subtypes offunct ional α丨-and a 2-adrenoceptors (功能性α丨和α 2腎上腺素能受體亞型）"JR Docherty ; European Journal of Pharmacology 361(1998) 1-15)。因此，表現(xiàn)出 α 腎上腺素能激動(dòng) 性（a adrenergic agonism)特別是α 2腎上腺素能激動(dòng)性的分子具有周圍血管收縮活性。
[0024] 在要求保護(hù)的組合物中使用的激動(dòng)劑可以指向α和/或β受體。不過，由于可 能存在副作用，最好不使用表現(xiàn)出β腎上腺素能激動(dòng)性的分子。在本申請(qǐng)的余下部分中， 對(duì)β腎上腺素能受體不具有親和力的分子將命名為"α腎上腺素能受體激動(dòng)劑"。
[0025] 在α受體中，所述激動(dòng)劑可以是α 1受體和α 2受體兩者的激動(dòng)劑，或者可以是 特別針對(duì)α 1或α 2受體的激動(dòng)劑。優(yōu)選地，選定的分子對(duì)α 2的親和力比對(duì)α 1受體的 親和力強(qiáng)，并且在本申請(qǐng)的余下部分中將通常被命名為" α 2腎上腺素能受體激動(dòng)劑"。
[0026] 在優(yōu)選實(shí)施例中，所述腎上腺素能受體激動(dòng)劑為α 2腎上腺素能受體激動(dòng)劑，優(yōu) 選地為溴莫尼定。
[0027] α 2腎上腺素能受體的激動(dòng)劑已經(jīng)用于治療很多問題，包括高血壓、充血性心臟衰 竭、心絞痛、痙攣、青光眼、腹瀉，以及抑制麻醉劑戒斷癥狀（J. Ρ. Heible和R. R. Ruffolo， Therapeutic Applications of Agents Interacting with a-Adrenoceptors (與 a 腎上腺素能受體相互作用的因子的治療應(yīng)用），Progress in Basic and Clinical Pharmacology (《基礎(chǔ)和臨床藥理學(xué)進(jìn)展》），第8卷，180-206頁，P. Lomax和E. S. Vesell Ed. , Karger, 1991) 〇
[0028] 盡管已有貼劑，但是腎上腺素能受體激動(dòng)劑（如可樂定）主要采用口服。已知α 2 激動(dòng)劑介導(dǎo)病人的中心及周圍血管收縮。特別地，已知在受到寒冷或壓力的刺激時(shí)，α 2腎 上腺素能受體激動(dòng)劑會(huì)引起周邊動(dòng)脈的血管收縮。
[0029] 很多病人講述了使用溴莫尼定來治療眼睛問題及眼部疾病。在加拿大專利 CA2326690中，描述了僅在眼睛中局部使用該眼科藥物來治療眼部疾病。
[0030] 如上所述，本發(fā)明范圍中最優(yōu)選的化合物是（5-溴-喹喔啉-6-基）-(4,5_二 氫-IH-咪唑 _2_ 基）-胺（(5-Brom〇-quinoxalin_6-yl) - (4, 5-dihydr〇-lH-imidazol_2-y I)-amine)(-般稱為溴莫尼定）及其藥學(xué)上可接受的鹽，特別是酒石酸鹽。
[0031] 其他已知的能夠用于本發(fā)明中的α 2腎上腺素能受體激動(dòng)劑化合物是：可樂定、 apo 可樂定（apoclonidine)。
[0032] 更普遍地說，其他的α腎上腺素能受體激動(dòng)劑化合物是：辛弗林、二甲己胺、抗利 尿激素及類似物、鳥氨加壓素（ornipressine)、米多君、苯腎上腺素、賽洛唑啉、羥甲唑啉、 去甲腎上腺素、甲氧胺。
[0033] 對(duì)β受體也具有親和力但某些情況下能夠使用的化合物是：腎上腺素、麻黃堿、 依替福林。
[0034] 當(dāng)然，所有這些化合物的藥學(xué)上可接受的鹽也包括在內(nèi)。
[0035] 根據(jù)本發(fā)明，這里使用的術(shù)語"藥學(xué)上可接受的鹽"是指本發(fā)明可安全、有效地在 哺乳動(dòng)物上局部使用并具有所需生物活性的那些化合物的鹽。藥學(xué)上可接受的鹽包括存在 于本發(fā)明的化合物中的酸式鹽或堿式鹽。
[0036] 藥學(xué)上可接受的酸式鹽包括但不限于，鹽酸鹽、氫溴酸鹽、氫碘酸鹽、硝酸鹽、硫 酸鹽、硫酸氫鹽、磷酸鹽、酸性磷酸鹽、異煙酸鹽（isonicotinate)、醋酸鹽、乳酸鹽、水楊 酸鹽、檸檬酸鹽、酒石酸鹽、泛酸鹽、酒石酸氫鹽、抗壞血酸鹽、琥珀酸鹽、馬來酸鹽、龍膽酸 鹽（gentisinate)、延胡索酸鹽、葡萄糖酸鹽、葡萄糖醒酸鹽（glucaronate)、鹿糖鹽、甲酸 鹽、苯甲酸鹽、谷氨酸鹽、甲磺酸鹽、乙磺酸鹽、苯磺酸鹽、對(duì)甲苯磺酸鹽和巴莫酸鹽（即，1， 1'-亞甲基-雙（2-羥基-3-萘甲酸鹽））。本發(fā)明的某些化合物能夠與各種氨基酸反應(yīng) 形成藥學(xué)上可接受的鹽。
[0037] 合適的堿式鹽包括但不限于，鋁鹽、鈣鹽、鋰鹽、鎂鹽、鉀鹽、鈉鹽、鋅鹽和二乙醇胺 鹽。關(guān)于藥學(xué)上可接受的鹽的綜述參考BERGE ET AL.，66 J.PHARM. Sci. 1-19(1977)。
[0038] 根據(jù)第一個(gè)實(shí)施例，所述要求保護(hù)的組合物僅包含填充劑（或其混合物）以及腎 上腺素能受體激動(dòng)劑（或其混合物），優(yōu)選地為透明質(zhì)酸和溴莫尼定。
[0039] 根據(jù)本發(fā)明的另一實(shí)施例，所述要求保護(hù)的組合物還包含一種或多種其他成分。
[0040] 上述一種或多種其他成分可以是活性成分，例如，麻醉劑。優(yōu)選的麻醉劑是利多卡 因或其藥學(xué)上可接受的鹽。其他活性成分是例如生長(zhǎng)因子、肽…… 所述要求保護(hù)的組合物還包含其他藥學(xué)上可接受的成分，如載體、賦形劑、防腐劑…… 在一個(gè)實(shí)施例中，本發(fā)明的化合物對(duì)需要該化合物的病人的給藥方式為全身給藥途 徑，優(yōu)選地通過注射給藥。因此，本發(fā)明中的化合物在藥學(xué)上可接受的載體中遞送到皮膚的 患病區(qū)域。這里使用的藥學(xué)上可接受的載體是任意藥學(xué)上可接受的藥劑，其能夠應(yīng)用于皮 膚，通過真皮、皮內(nèi)或透皮遞送藥物或藥品。藥學(xué)上可接受的載體和本發(fā)明化合物的組合一 起稱為本發(fā)明的可注射藥劑。
[0041] 在本發(fā)明的范圍內(nèi)，所述組合物是藥學(xué)上可接受的可注射藥劑。在本發(fā)明中，"藥 學(xué)上可接受的可注射藥劑"是指任何可用于全身給藥的藥學(xué)上可接受的藥劑。優(yōu)選地，所述 組合物在真皮淺層、真皮中層或真皮深層通過皮下或皮內(nèi)途徑給藥。一般來說，所述要求保 護(hù)的組合物包含在溶液或凝膠中，優(yōu)選地包含在水性溶液或凝膠中。
[0042] 所述要求保護(hù)的組合物由治療有效量的腎上腺素能受體激動(dòng)劑和填充劑組成，或 包含治療有效量的腎上腺素能受體激動(dòng)劑和填充劑。這里使用的"本發(fā)明化合物的治療有 效量"是指能夠有效實(shí)現(xiàn)本發(fā)明目標(biāo)效果的化合物的最小量。
[0043] 通常，所述要求保護(hù)的組合物包含： -填充劑，優(yōu)選地為HA，其占組合物重量的1% -2. 5% ; -腎上腺素能受體激動(dòng)劑，優(yōu)選地為溴莫尼定，其占組合物重量的〇. 0001% -1% ; -可選的麻醉劑，其占組合物重量的〇. 01% -3%。
[0044] 如上所述，要求保護(hù)的組合物旨在對(duì)患者或病人給藥，特別是通過面部注射（前 額、眼睛、鼻唇溝、……）進(jìn)行給藥。這里使用的術(shù)語"患者"或"病人"是等同用語，表示任 何將要或已經(jīng)給予本發(fā)明化合物或藥劑的動(dòng)物，優(yōu)選地是哺乳動(dòng)物，更優(yōu)選地是人類。這里 使用的術(shù)語"哺乳動(dòng)物"包括任何哺乳動(dòng)物。
[0045] 因此，本發(fā)明還提供了一種藥劑，以向病人遞送全身劑量的化合物。實(shí)際上，對(duì)于 給藥程序，活性化合物的量如下： -對(duì)于填充劑，優(yōu)選地為HA :在0. 05mg/kg-2mg/kg體重之間。其表示從5mg-100mg。
[0046] -對(duì)于腎上腺素能受體激動(dòng)劑，優(yōu)選地為溴莫尼定：在5. l(T3mg-0. 8mg/kg體重之 間。其表示從〇· 5 μ g_40mg。
[0047] 在優(yōu)選實(shí)施例中，所述要求保護(hù)的待注射組合物的體積在0. I-IOml之間，一般在 0.5_4ml之間。優(yōu)選地，所述體積以單劑量注射器的形式提供。所述注射能夠重復(fù)進(jìn)行，例 如在4-18個(gè)月后重注射。
[0048] 本發(fā)明的另一方面是一種制品，其包括裝在合適的帶有標(biāo)簽的容器中的本發(fā)明全 身藥劑及使用說明。所述容器優(yōu)選地是單劑量注射器。
[0049] 優(yōu)選地，使用說明與本發(fā)明的藥劑包裝在一起，例如，小冊(cè)子或包裝標(biāo)簽。標(biāo)簽說 明解釋本發(fā)明的藥劑如何以足以治療病人的量及時(shí)間段進(jìn)行給藥。優(yōu)選地，標(biāo)簽包括劑量 和給藥說明、藥劑組成、臨床藥理學(xué)、耐藥性、藥物代謝動(dòng)力學(xué)、吸收、生物利用率以及各種 7Mc Fztt 心、O
[0050] 接著，要求保護(hù)的可注射組合物可整合成一試劑盒，其包括含有所述組合物的注 射器。在所述試劑盒中，兩種活性成分，即填充劑和腎上腺素能受體激動(dòng)劑，能夠以混合物 形式裝在注射器中，或者能夠裝在兩個(gè)獨(dú)立的注射器中，使用時(shí)混合。
[0051] 所述要求保護(hù)的組合物優(yōu)選地在適合保存各活性成分的條件下進(jìn)行滅菌。
[0052] 如上所述，要求保護(hù)的組合物用于預(yù)防和/或治療各種皮膚缺陷，特別是褶皺、皺 紋、皮膚凹陷和疤痕。其用于美容治療或治療處理。
[0053] 根據(jù)本發(fā)明，已經(jīng)表明要求保護(hù)的組合物的主要優(yōu)點(diǎn)在于減輕、減少或避免紅斑、 瘀斑、瘀傷或流血，特別是由于注射皮膚填充劑造成的。
[0054] 要求保護(hù)的組合物的其他潛在優(yōu)點(diǎn)如下： -當(dāng)所述組合物還包含麻醉劑（如，利多卡因）時(shí)，所述麻醉劑的藥效能夠獲得提高： 由α腎上腺素能激動(dòng)劑提供的血管收縮效果限制了麻醉劑的大面積擴(kuò)散，從而導(dǎo)致麻醉 只在嚴(yán)格的注射部位有效； -通過減少炎癥，填充劑能夠持續(xù)更長(zhǎng)時(shí)間，這可能是由于其降解減緩了 ：填充劑的炎 癥越重，劇烈的組織反應(yīng)越多，并且炎癥種類（inflammatory species)的水平越高，從而加 速填充劑的降解。在填充劑中加入血管收縮分子能夠限制吸引至注射部位的炎癥種類； -觀察到能夠減輕水腫和腫脹：原因與上述優(yōu)點(diǎn)相同，填充劑的血管收縮活性限制了 與注射有關(guān)的液流，從而阻礙了注射部位附近的液體濃度升高。
[0055] 更籠統(tǒng)地說，所述要求保護(hù)的組合物因此意圖用于減輕、減少或避免所有由注射 引起的不希望的皮膚反應(yīng)（即時(shí)的和/或繼發(fā)性的）。其確實(shí)包括瘀斑、瘀傷或流血，但還 包括可能的發(fā)紅、紅斑、水腫、壞死、潰瘍、腫脹和炎癥。
[0056] 所述要求保護(hù)的包含兩種活性成分的組合物可以同時(shí)使用、單獨(dú)使用或按順序使 用。換句話說，本發(fā)明提供了一種試劑盒，其成分為大量腎上腺素能受體激動(dòng)劑（優(yōu)選地為 稱為溴莫尼定的產(chǎn)品）和填充劑（優(yōu)選地為透明質(zhì)酸）的結(jié)合。
[0057] 除了上述這些，下述的實(shí)例用于闡述具體實(shí)施例，但不限制本發(fā)明的保護(hù)范圍。

【專利附圖】

【附圖說明】
[0058] 圖1顯示了要求保護(hù)的組合物（試驗(yàn)2)與單獨(dú)的填充劑（試驗(yàn)1)相比較，原發(fā) 刺激指數(shù)（Irritating Primary Index, IPI)在0-8天之間的演變； 圖2顯示了要求保護(hù)的組合物（試驗(yàn)2)與單獨(dú)的填充劑（試驗(yàn)1)相比較，在第8天 時(shí)的炎癥反應(yīng)的總分?jǐn)?shù)。

【具體實(shí)施方式】
[0059] 研究?jī)?nèi)容 進(jìn)行含有利多卡因和名為RADACT014的血管收縮劑藥物（溴莫尼定）的基于透明質(zhì)酸 的皮膚填充劑的皮內(nèi)試驗(yàn)，以評(píng)估溴莫尼定減少兔子皮內(nèi)注射填充劑后引起的刺激性的潛 力。
[0060] 兩只成年兔子通過皮內(nèi)途徑接受0. 2mL試驗(yàn)產(chǎn)品RADACT014(試驗(yàn)2)、NaCl 0. 9% (試驗(yàn)5 :陰性對(duì)照）和10LDEEP010 (與RADACT014相同的透明質(zhì)酸填充劑，但是不含利多 卡因和溴莫尼定；試驗(yàn)1 :陽性對(duì)照）。
[0061] 將使用含有溴莫尼定的填充劑（一批RADACT014(試驗(yàn)2))測(cè)得的結(jié)果與不含溴 莫尼定的皮膚填充劑（陽性對(duì)照：試驗(yàn)1)進(jìn)行對(duì)比。
[0062] 注射后0-8天檢查這些部位的組織反應(yīng)的大體證據(jù)（gross evidence)，如紅斑、 水腫和壞死（圖1)，并在第8天處死后進(jìn)行組織學(xué)觀察，在顯微鏡下觀察組織反應(yīng)（圖2)。
[0063] 該研究根據(jù)ISO 10993標(biāo)準(zhǔn)的要求進(jìn)行：醫(yī)療器械的生物學(xué)評(píng)價(jià)（Biological Evaluation ofmedical devices),第10部分：刺激和遲發(fā)型超敏反應(yīng)試驗(yàn)。
[0064] 材料和方法 制各對(duì)照奪聯(lián)誘明質(zhì)酸填充劑：10LDEEP010 交聯(lián)的透明質(zhì)酸填充劑10LDEEP010 (試驗(yàn)1)通過用25 %的BDDE (-種來自細(xì)菌來源 的透明質(zhì)酸鈉，其特征是具有2-4 X IO6Da左右的高分子量）進(jìn)行交聯(lián)獲得。交聯(lián)后，向交聯(lián) 的透明質(zhì)酸中加入鹽酸利多卡因，使?jié)舛冗_(dá)到0.3%。通過將混合物擠出網(wǎng)狀物（mesh)得 到均勻混合的利多卡因。所得到的凝膠裝入ImL注射器中，其濃度為20mg/mL，并經(jīng)蒸汽滅 菌。
[0065] 制各含有溴草尼定的奪聯(lián)誘明質(zhì)酸填充劑：RADACT014 對(duì)相同的透明質(zhì)酸采用相同的交聯(lián)條件，得到不含利多卡因的填充劑。同時(shí)，用SgNaOH 和42g純化水制備4N氫氧化鈉溶液。通過將0. 22g酒石酸溴莫尼定和0. 33g鹽酸利多卡 因溶解在9. 45mL的磷酸鹽緩沖液中制得另一種含有溴莫尼定和利多卡因的溶液。用NaOH 溶液將PH調(diào)節(jié)到6。然后，將溴莫尼定和利多卡因?qū)?. 22微米進(jìn)行過濾。
[0066] 通過3個(gè)步驟使5g含有上述2種活性成分的溶液和50g前面的交聯(lián)透明質(zhì)酸凝 膠緩慢混合獲得含有溴莫尼定和利多卡因的填充劑（稱為RADACT014(試驗(yàn)2)):機(jī)械混合 5分鐘后打碎15分鐘，然后再混合5分鐘。將所得凝膠裝入ImL注射器中，并采用蒸汽滅 菌。透明質(zhì)酸酶消化后測(cè)定各活性成分的終濃度，通過HPLC-MS-MS測(cè)得的溴莫尼定的濃度 為0. 16%，通過HPLC測(cè)得的利多卡因的濃度為0. 29%。
[0067] 調(diào)杳即時(shí)不自反應(yīng)事件的ΜΦ 通過動(dòng)物研究評(píng)價(jià)RADACT014減少刺激的潛力，該研究的進(jìn)行依據(jù)IS010993-10要求： 醫(yī)療器械的生物學(xué)評(píng)價(jià)-刺激和遲發(fā)型超敏反應(yīng)試驗(yàn)。
[0068] 研究方案 在第0天（DO)，兩只成年兔子通過皮內(nèi)途徑接受0. 2mL試驗(yàn)產(chǎn)品（試驗(yàn)I :10LDEEP010 和試驗(yàn)2 :RADACT014)和陰性對(duì)照（試驗(yàn)5 :生理鹽水），采用27G針頭注射。在這些條件 下，每個(gè)產(chǎn)品注射4個(gè)部位。
[0069] 然后，從第0天到第8天，每天檢查2次注射部位的組織反應(yīng)大體證據(jù)，如紅斑、水 腫、潰瘍和壞死，用以下標(biāo)準(zhǔn)評(píng)分：

【權(quán)利要求】
1. 一種可注射組合物，其包括： 透明質(zhì)酸或其藥學(xué)上可接受的鹽或衍生物； a腎上腺素能受體激動(dòng)劑； 利多卡因。
2. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的組合物，其中腎上腺素能受體激動(dòng)劑是a 2腎上腺素能受體 激動(dòng)劑。
3. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的組合物，其中腎上腺素能受體激動(dòng)劑溴莫尼定、賽洛唑啉或 輕甲唑啉。
4. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的組合物，其中所述組合物包括： 透明質(zhì)酸，其占組合物重量的1% -2. 5% ; 腎上腺素能受體激動(dòng)劑，優(yōu)選地為溴莫尼定，其占組合物重量的〇. 0001% -1% ; 利多卡因，其占組合物重量的0.01% -3%。
5. 根據(jù)權(quán)利要求1或4所述的組合物，所述組合制備物同時(shí)使用。
6. 根據(jù)權(quán)利要求1或4所述的組合物，所述組合制備物同時(shí)使用，用于預(yù)防或治療皮膚 缺陷，特別是褶皺、皺紋、皮膚凹陷和疤痕。
7. 根據(jù)權(quán)利要求1或4所述的組合物，所述組合制備物同時(shí)使用，用于減輕、減小或避 免由注射引起的皮膚反應(yīng)，特別是發(fā)紅、瘀斑、瘀傷、流血、紅斑、水腫、壞死、潰瘍、腫脹和/ 或炎癥。
8. -種試劑盒，其包括注射器并包括權(quán)利要求1或4所述的組合物。
9. 根據(jù)權(quán)利要求8所述的試劑盒，其用于預(yù)防或治療皮膚缺陷，特別是褶皺、皺紋、皮 膚凹陷和疤痕。
10. 根據(jù)權(quán)利要求8所述的試劑盒，其用于減輕、減小或避免由注射引起的皮膚反應(yīng)， 特別是發(fā)紅、瘀斑、瘀傷、流血、紅斑、水腫、壞死、潰瘍、腫脹和/或炎癥。
【文檔編號(hào)】A61P17/02GK104324378SQ201410508012
【公開日】2015年2月4日 申請(qǐng)日期:2010年5月28日 優(yōu)先權(quán)日:2009年5月29日
【發(fā)明者】I·博科倫, F·布魯耐爾, B·賀巴爵, C·維拉德 申請(qǐng)人:蓋爾德馬研究及發(fā)展公司