一種改善多西紫杉醇親水性的方法
【專利摘要】本發(fā)明為一種改善多西紫杉醇親水性的方法，該方法包括以下步驟：（1）將多西紫杉醇和低聚糖表面活性劑粉末置于裝有正庚烷的聚四氟乙烯罐中成懸浮狀，攪拌均勻，然后再加入無(wú)水四氯化錫，繼續(xù)攪拌20~40min；（2）向(1)中的混合液中加入環(huán)氧丙烷，攪拌均勻，移入高壓釜中，持續(xù)攪拌下在20~40℃反應(yīng)0~16h，反應(yīng)完成后靜置，倒出上層正庚烷，回收再用，將下層產(chǎn)物真空干燥后溶于甲醇，除去未反應(yīng)的多西紫杉醇，最后經(jīng)真空干燥后，得到多西紫杉醇共聚物；本發(fā)明得到的改性后的多西紫杉醇共聚物在水中的溶解度(2.86g/L)與多西紫杉醇純藥品(0.003g/L)相比，增強(qiáng)了近1000倍，明顯的提高其水溶性。
【專利說(shuō)明】一種改善多西紫杉醇親水性的方法

【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001] 本發(fā)明涉及提供一種通過(guò)環(huán)氧丙烷開(kāi)環(huán)，將兩親性低聚糖表面活性劑和抗癌藥物 多西紫杉醇連接在一起，對(duì)多西紫杉醇進(jìn)行親水改性的方法，提高其水溶性和生物相容性， 屬于生物醫(yī)藥領(lǐng)域。

【背景技術(shù)】
[0002] 多西紫杉醇是紫杉類抗癌藥物中的一種，是以紫杉樹(shù)中的化學(xué)物質(zhì)為基礎(chǔ)合成而 來(lái)的，另一種紫杉類藥物紫杉醇是直接從紅豆杉屬植物的樹(shù)皮中提取得到的。在體內(nèi)活性 方面，二者均對(duì)卵巢癌、乳腺癌等腫瘤有良好療效，而多西紫杉醇在藥性方面對(duì)微管結(jié)合部 位的親和力是紫杉醇的2倍；在抗瘤活性體外試驗(yàn)中，已證實(shí)多西紫杉醇活性是紫杉醇的 1. 3?1. 5倍。目前，研究開(kāi)發(fā)抗癌藥物已成為藥物研究的重點(diǎn)，因此多西紫杉醇具有極大 的應(yīng)用前景。
[0003] 由于多西紫杉醇水溶性差，幾乎無(wú)法溶解于人體血液，大大限制了其在臨床 醫(yī)療上的廣泛使用。目前唯一得到臨床使用的多西紫杉醇制劑是以聚氧乙烯蓖麻油 為助溶劑，但制劑中的聚氧乙烯蓖麻油會(huì)產(chǎn)生比較嚴(yán)重的毒副作用以及過(guò)敏反應(yīng)。因 此，提高多西紫杉醇的水溶性已成為近年來(lái)研究的熱點(diǎn)。目前，國(guó)內(nèi)外已有關(guān)于改善多 西紫杉醇水溶性的文獻(xiàn)報(bào)道，大多是采用物理方法直接包覆，藥物的載藥量都不是很 高，而且藥物釋放時(shí)間較短，不利于多西紫杉醇在體內(nèi)的沉積，降低了多西紫杉醇的藥 效，例如，季冬英（PLA-mPEG的合成和多西紫杉醇共聚物膠束的制備，中國(guó)藥科大學(xué)學(xué) 報(bào)，2008, 39(3) : 223?227)等人用開(kāi)環(huán)反應(yīng)合成不同比例的聚乳酸-聚乙二醇單甲醚共 聚物直接對(duì)多西紫杉醇進(jìn)行包覆，載藥量為27.3%。YU. Yiyi (Self-assembled methoxy poly(ethylene glycol)cholesterol micelles for hydrophobic drug delivery. Journal of pharmaceutial since, 2013, 102 (3) :1054 ?1062)等人用含甲氧基的聚（乙 二醇）膽固醇改善多西紫杉醇的溶解性，載藥量為4. 76%，24小時(shí)藥物釋放量達(dá)到86%。 Ho-Chul Shin(A3-in_lPolymeric Micelle Nanocontainer for Poorly Water-Soluble Drugs. Molecular Pharmaceutics, 2011，8:1257 ?1265)等人設(shè)計(jì)了一種以聚乙二醇-聚 乳酸膠束為載體的多西紫杉醇輸送系統(tǒng)，多西紫杉醇的載藥量達(dá)到23 %，24小時(shí)藥物釋放 量達(dá)到96%。
[0004] 本發(fā)明提出一種通過(guò)環(huán)氧丙烷開(kāi)環(huán)，將兩親性低聚糖表面活性劑和多西紫杉醇連 接在一起，對(duì)多西紫杉醇進(jìn)行親水改性的方法。其中低聚糖集營(yíng)養(yǎng)、保健、食療于一體，廣泛 應(yīng)用于食品、保健品、飲料、醫(yī)藥、飼料添加劑等領(lǐng)域，而環(huán)氧丙烷是制備聚醚的主要原料， 聚醚毒性很低，常用作藥物賦形劑和乳化劑，在口腔、鼻噴霧劑、眼、耳滴劑和洗發(fā)劑中都經(jīng) 常使用。因此，以低聚糖表面活性劑為原料改性多西紫杉醇，具備無(wú)毒和良好生物相容性的 特點(diǎn)，而且本發(fā)明還提高了多西紫杉醇的載藥量，并延緩其釋放周期。此技術(shù)尚未見(jiàn)報(bào)道。


【發(fā)明內(nèi)容】

[0005] 本發(fā)明針對(duì)多西紫杉醇水溶性差，且現(xiàn)有助溶劑毒副作用大的問(wèn)題，提供一種通 過(guò)環(huán)氧丙烷開(kāi)環(huán)，將兩親性低聚糖表面活性劑和多西紫杉醇連接在一起，提高多西紫杉醇 親水性的方法，該方法制備的多西紫杉醇共聚物具有高水溶性、低毒和良好生物相容性的 特點(diǎn)。
[0006] -種改善多西紫杉醇親水性的方法，包括以下步驟：
[0007] (1)將多西紫杉醇和低聚糖表面活性劑粉末置于裝有正庚烷的聚四氟乙烯罐中成 懸浮狀，攪拌均勻，然后再加入無(wú)水四氯化錫，繼續(xù)攪拌20?40min ;
[0008] 其中物料配比為：每IOOml正庚烷中8?640mg多西紫杉醇、100?200mg低聚糖 表面活性劑，以及0. 5?3mg無(wú)水四氯化錫；
[0009] (2)向（1)中的混合液中加入環(huán)氧丙烷，攪拌均勻，移入高壓釜中，持續(xù)攪拌下在 20?40°C反應(yīng)0?16h，反應(yīng)完成后靜置，倒出上層正庚烷，回收再用，將下層產(chǎn)物真空干燥 后溶于甲醇，除去未反應(yīng)的多西紫杉醇，最后經(jīng)真空干燥后，得到多西紫杉醇共聚物；
[0010] 其中，環(huán)氧丙烷的加入量為：每IOOml正庚烷加120?350 μ L環(huán)氧丙烷。
[0011] 所述的低聚糖表面活性劑粉末由以下方法制得，包括以下步驟：
[0012] 將磷酸降解后的水溶性低聚糖粉末置于裝有正庚烷的聚四氟乙烯罐中，再加入無(wú) 水四氯化錫，攪拌后，再向混合液中加入環(huán)氧丙烷，攪拌均勻，隨后放入已穩(wěn)定的高壓釜中 (轉(zhuǎn)速為200rpm，60?80°C下反應(yīng)7h ;反應(yīng)完成后，倒出上層正庚烷，將下層產(chǎn)物真空干燥 后溶于正丙醇水溶液中除去未反應(yīng)的低聚糖，真空干燥，得到低聚糖表面活性劑；
[0013] 所述的物料配比為：每IOOml正庚烷加入20?40g磷酸降解后的水溶性低聚糖、 0. 1?I. Og無(wú)水四氯化錫、3?30mL環(huán)氧丙燒。
[0014] 本發(fā)明中對(duì)多西紫杉醇進(jìn)行親水改性的低聚糖表面活性劑是由平均聚合度為7 的低聚糖和環(huán)氧丙烷反應(yīng)制備得到的。從原料來(lái)源看，多西紫杉醇共聚物具有低毒性，因 為低聚糖集營(yíng)養(yǎng)、保健、食療于一體，廣泛應(yīng)用于食品、保健品、飲料、醫(yī)藥、飼料添加劑等領(lǐng) 域，而環(huán)氧丙烷是制備聚醚的主要原料，聚醚毒性很低，常用作藥物賦形劑和乳化劑，在口 腔、鼻噴霧劑、眼、耳滴劑和洗發(fā)劑中都經(jīng)常使用。產(chǎn)品多西紫杉醇共聚物經(jīng)實(shí)驗(yàn)分析，結(jié) 果表明其較佳載藥量為32. 6%，與已有直接物理包覆方法（1.4%?27.4% )相比，增強(qiáng)了 5%以上；9天累計(jì)釋放量為96. 9%，與直接物理包覆法（1?3天）相比，延長(zhǎng)了釋放周期， 有利于藥物在人體內(nèi)的較好吸收。改性后的多西紫杉醇共聚物在水中的溶解度（2. 86g/L) 與多西紫杉醇純藥品（〇.〇〇3g/L)相比，增強(qiáng)了近1000倍，明顯的提高其水溶性。因此，本 發(fā)明對(duì)新型多西紫杉醇臨床試驗(yàn)具有積極的推動(dòng)作用。

【專利附圖】

【附圖說(shuō)明】
[0015] 圖1是實(shí)施例1-5中不同低聚糖表面活性劑溶液的表面張力圖。
[0016] 圖2是實(shí)施例1中低聚糖表面活性劑的臨界膠束濃度圖。
[0017] 圖3是實(shí)施例1中多西紫杉醇改性前后對(duì)比的1H NMR譜圖。
[0018] 圖4是實(shí)施例1中的多西紫杉醇的釋放曲線。

【具體實(shí)施方式】
[0019] 下面列舉實(shí)例對(duì)本發(fā)明作進(jìn)一步說(shuō)明，但所保護(hù)范圍并不僅限于此。
[0020] 實(shí)施例I
[0021] (1)將24g棉纖維（湖北省祥泰纖維有限公司，平均聚合度為6370)和240ml質(zhì)量 分?jǐn)?shù)為85%的濃磷酸，加入到燒杯中，用玻璃棒攪拌。攪拌后的混合物放入超聲波清洗器 中，超聲至混合物成透明溶液，將預(yù)處理后的纖維素置于55°C恒溫水浴鍋中機(jī)械攪拌10h， 至溶液呈現(xiàn)棕色后，向其中加入480mL蒸餾水，使水溶性糖充分溶解，水不溶性纖維素沉 降。靜置一夜后，抽濾，將水溶性低聚糖溶液進(jìn)行旋蒸，得到水溶性低聚糖濃縮液，在濃縮液 中加入沉淀劑丙酮（濃縮液與丙酮體積比為1:3)，使水溶性低聚糖析出，并用丙酮反復(fù)洗 滌至沉淀物為粉末狀，將沉淀物放入真空干燥箱中進(jìn)行干燥，即得磷酸降解后的水溶性低 聚糖粉末（平均聚合度為7)。
[0022] (2)將25g磷酸降解后的水溶性低聚糖粉末置于裝有IOOml正庚烷的聚四氟乙烯 罐中，快速移取〇. 5g無(wú)水四氯化錫于懸浮液中，攪拌15min，再向混合液中加入30mL環(huán)氧 丙烷，攪拌均勻，隨后放入已穩(wěn)定的高壓釜中（轉(zhuǎn)速為200rpm，70°C)，反應(yīng)7h。反應(yīng)完成 后，倒出上層正庚烷，將下層產(chǎn)物真空干燥后溶于正丙醇水溶液（10:3)中除去未反應(yīng)的低 聚糖。最后真空干燥，得到環(huán)氧丙烷加成數(shù)為20的低聚糖表面活性劑。
[0023] (3)稱取64mg多西紫杉醇和160mg低聚糖表面活性劑粉末置于裝有IOOml正庚烷 的聚四氟乙烯罐中，攪拌均勻，快速移取2mg無(wú)水四氯化錫于懸浮液中，繼續(xù)攪拌30min，再 向混合液中加入230 μ L環(huán)氧丙燒，攪拌均勻，隨后放入已穩(wěn)定的高壓荃中（轉(zhuǎn)速為200rpm， 30°C)，反應(yīng)8h。反應(yīng)完成后，靜置，倒出上層正庚烷，將下層產(chǎn)物真空干燥后溶于甲醇中除 去未反應(yīng)的多西紫杉醇。最后真空干燥，得到最終產(chǎn)品。向IOOmL蒸餾水中逐漸加入多西 紫杉醇共聚物，直至溶液產(chǎn)生沉淀達(dá)到飽和狀態(tài)，測(cè)得多西紫杉醇共聚物溶解度為2. 86g/ L，與多西紫杉醇純藥品在水中的溶解度（0.003g/L)相比，增強(qiáng)了近1000倍。
[0024] 產(chǎn)品多西紫杉醇共聚物經(jīng)高效液相色譜分析，按以下方程式計(jì)算載藥量為 32. 6%。
[0025]

【權(quán)利要求】
1. 一種改善多西紫杉醇親水性的方法，其特征為該方法包括以下步驟： (1) 將多西紫杉醇和低聚糖表面活性劑粉末置于裝有正庚烷的聚四氟乙烯罐中成懸浮 狀，攪拌均勻，然后再加入無(wú)水四氯化錫，繼續(xù)攪拌2(T40min ; 其中物料配比為：每l〇〇ml正庚烷中8飛40mg多西紫杉醇、10(T200mg低聚糖表面活性 齊U，以及〇. 5~3mg無(wú)水四氯化錫； (2) 向（1)中的混合液中加入環(huán)氧丙烷，攪拌均勻，移入高壓釜中，持續(xù)攪拌下在 2(T40°C下反應(yīng)(Tl6h，反應(yīng)完成后靜置，倒出上層正庚烷，回收再用，將下層產(chǎn)物真空干燥 后溶于甲醇，除去未反應(yīng)的多西紫杉醇，最后經(jīng)真空干燥后，得到多西紫杉醇共聚物； 其中，環(huán)氧丙燒的加入量為：每l〇〇ml正庚燒加120 350ML環(huán)氧丙燒。
2. 如權(quán)利要求1所述的改善多西紫杉醇親水性的方法，其特征為低聚糖表面活性劑粉 末由以下方法制得，包括以下步驟： 將磷酸降解后的水溶性低聚糖粉末置于裝有正庚烷的聚四氟乙烯罐中，再加入無(wú)水四 氯化錫，攪拌后，再向混合液中加入環(huán)氧丙烷，攪拌均勻，隨后放入已穩(wěn)定的高壓釜中（轉(zhuǎn) 速為200rpm，6(T8(rC下反應(yīng)7h ;反應(yīng)完成后，倒出上層正庚烷，將下層產(chǎn)物真空干燥后溶 于正丙醇水溶液中除去未反應(yīng)的低聚糖，真空干燥，得到低聚糖表面活性劑； 所述的物料配比為：每l〇〇ml正庚烷加入2(T40g磷酸降解后的水溶性低聚糖、 0. 1~1. 0g無(wú)水四氯化錫、3~30mL環(huán)氧丙烷。
【文檔編號(hào)】A61P35/00GK104288778SQ201410568219
【公開(kāi)日】2015年1月21日 申請(qǐng)日期:2014年10月22日 優(yōu)先權(quán)日:2014年10月22日
【發(fā)明者】楊芳, 肖丹, 黎鋼, 張松梅, 范紅顯, 韓華欣 申請(qǐng)人:河北工業(yè)大學(xué)