以聚乳酸-羥基乙醇酸共聚物為材料制備多西紫杉醇納米載藥顆粒的方法
【專利說明】以聚乳酸-羥基乙醇酸共聚物為材料制備多西紫杉醇納米載藥顆粒的方法
[0001]
技術(shù)領(lǐng)域
[0002]本發(fā)明涉及生物材料與納米技術(shù)領(lǐng)域，具體涉及一種具有適宜包封率和載藥量、高生物安全性，并且能夠緩慢釋放藥物多西紫杉醇的以聚乳酸-羥基乙醇酸共聚物為材料制備多西紫杉醇納米顆粒的方法。
【背景技術(shù)】
[0003]多西紫杉醇(docetaxel)又名多西他賽，是由羅納普朗克.樂安公司開發(fā)的，是新一代紫杉醇烷類抗腫瘤藥物，屬于微管解聚抑制劑。本品通過作用于細胞微管與聚合的管蛋白作用并抑制其解聚，使腫瘤細胞停止在有絲分裂期而死亡，有效抑制腫瘤細胞的復制。臨床研究表明，多西紫杉醇可以單獨或與其他抗腫瘤藥物合用治療非小細胞性肺癌、乳腺癌、卵巢癌、胃癌等癌癥。本品已于1995年4月在墨西哥首次上市，并隨即在法、德、英等一些國家上市。另有研究發(fā)現(xiàn)，多西紫杉醇能夠調(diào)節(jié)體內(nèi)免疫功能，作用于巨噬細胞的腫瘤壞死因子(tumor necrosis factor，TNF)受體，促使TNF-1、白介素-1、干擾素的釋放，從而對于腫瘤細胞產(chǎn)生抑制和殺傷作用。由于多西紫杉醇具有親脂性，在水中的溶解度非常小(約10mg/L)，因此上市的靜脈注射劑多西紫杉醇濃溶液中含有大量的吐溫80，且需要用13%乙醇稀釋后方能注射。由于吐溫80具有溶血性且黏度較大，臨床試驗中大多數(shù)患者產(chǎn)生明顯的過敏反應，并且藥物本身也具有一定的毒副作用，容易引起骨髓抑制，神經(jīng)毒性反應，心臟毒性反應，關(guān)節(jié)或者肌肉疼痛，肝臟腎臟毒性反應等。因此近年來開發(fā)新型多西紫杉醇制劑一直是研究的熱點。
[0004]納米藥物載體通過將藥物包封于亞微粒中，可以調(diào)節(jié)釋藥的速度，能增加生物膜的透過性，改變在體內(nèi)的分布，提高生物利用度等，為改善抗腫瘤藥物療效和降低腫瘤耐藥性提供了新的思路。而且納米藥物載體作為抗腫瘤藥物遞送載體具有獨特的優(yōu)勢，基于腫瘤組織的高通透性和滯留效應(enhanced permeability and retent1n effect，EPR)，通過在納米顆粒表面負載腫瘤特異性靶向分子(如抗體、抗體Fab段、多肽片段或核酸適配子(Aptamer)等)，可以實現(xiàn)藥物載體在腫瘤組織局部的被動或主動聚集，從而有助于提高腫瘤局部藥物濃度。靶向釋藥系統(tǒng)能夠克服或部分的解決抗腫瘤藥物毒副作用大、水溶性差、半衰期短、生物利用度低等傳統(tǒng)化療中存在的問題，在改善化療藥物的體內(nèi)分布特性和藥代動力學特性，增加藥物效力，降低藥物毒性，減少腫瘤多藥耐藥性產(chǎn)生從而提高治療指數(shù)和腫瘤化療效果方面有著獨特的優(yōu)勢，在腫瘤治療中有著非常良好的應用前景。
[0005]聚乳酸-輕基乙酸共聚物(poly(lactic-co-glycolic acid)，PLGA)由兩種單體一乳酸和羥基乙酸隨機聚合而成，PLGA有良好的生物相容性和生物降解性能且降解速度可控，已經(jīng)通過美國FD認證，在生物醫(yī)學工程領(lǐng)域有廣泛的用途。目前已被制作為人工導管，藥物緩釋載體，組織工程支架材料。
[0006]納米載藥顆粒的制備方法有納米沉降法，高壓勻漿法、超臨界流體技術(shù)、乳化/溶劑揮發(fā)法等等。而乳化溶劑揮發(fā)法是最常見的納米顆粒的制備方法。
[0007]中國專利CN 102871966 A“用于改善雷帕霉素生物利用度的納米載藥顆粒及其制備方法”中采用的是聚乙二醇修飾的PLGA包裹的雷帕霉素，發(fā)現(xiàn)通過乳化溶劑揮發(fā)法制備得到的納米微粒粒徑均一，分散性良好且載藥量和包封率比較高。制備得到的納米載藥顆粒體外藥物釋放實驗，細胞毒性實驗的結(jié)果都比較理想。
[0008]在中國醫(yī)學科學院學報上發(fā)表的文獻“雷帕霉素聚乳酸-聚乙醇酸納米粒子的制備、表征及血管內(nèi)局部給藥效能”中采用超聲乳化/溶劑揮發(fā)法制備的納米顆粒穩(wěn)定性可靠，包封效率高，載藥量控制穩(wěn)定，粒徑小、范圍窄，體外釋放藥物恒定、效果滿意。
[0009]在國際藥學研究雜志上發(fā)表的文獻“石杉堿甲聚乳酸-乙醇酸納米粒的制備、表征及其小鼠活體成像腦靶向分布”中制備的納米顆粒具有較小的粒徑，良好的緩釋性能并能提高腦內(nèi)藥物濃度水平。
[0010]目前文獻中已經(jīng)有人使用以甲基化修飾的聚乙二醇-聚乳酸共聚物為材料，采用乳化溶劑揮發(fā)法制備包裹紫杉醇的納米顆粒，得到的納米顆粒載藥量和包封率較高，用于腦膠質(zhì)瘤的治療。
[0011]上述材料中均是采用的乳化/溶劑揮發(fā)法制備納米顆粒，均得到理想的結(jié)果。但目前尚未報道將乳化/溶劑揮發(fā)法用于制備PLGA納米微球包裹多西紫杉醇來治療癌癥。因此本專利正是做出了這方面的研究。
[0012]在中國組織工程研究與臨床康復雜志上發(fā)表的“載多烯紫杉醇聚乳酸-羥基乙酸微球的制備、表征及其藥物穩(wěn)性”中采用的同樣是乳化/溶劑揮發(fā)法制備納米顆粒，但是乳化時采用的是機械攪拌，得到的納米微球粒徑較大，且分散性不理想。因此本專利的獨特之處在于使用超聲乳化/溶劑揮發(fā)法制備該納米顆粒。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0013]本發(fā)明的目的是提供通過納米合成技術(shù)-超聲乳化/溶劑揮發(fā)法，構(gòu)建針對藥物多西紫杉醇的納米載藥系統(tǒng)，解決多西紫杉醇水溶性、緩釋性、吸收性、生物利用度方面存在的問題，使其在癌癥的治療方面得到較好的效果。這種方法具有操作方便，重復性好，簡單易行，成本低廉等優(yōu)點。
[0014]為達到上述目的，本發(fā)明采用的技術(shù)方案是:一種以聚乳酸-羥基乙醇酸共聚物為材料制備多西紫杉醇納米載藥顆粒的方法，具體步驟如下:采用揮發(fā)性有機溶劑將聚乳酸-羥基乙醇酸共聚物與多西紫杉醇溶解，得到有機相，而后在超聲乳化儀超聲的條件下將所述的有機相分散至水相中，得到水包油型乳液，攪拌使所述的有機溶劑揮發(fā)，得到納米顆粒，離心后即得多西紫杉醇納米載藥顆粒。
[0015]根據(jù)本發(fā)明，所述的揮發(fā)性有機溶劑為二氯甲烷。
[0016]根據(jù)本發(fā)明，所述的水相為聚乙烯醇水溶液。優(yōu)選地，聚乙烯醇水溶液的質(zhì)量濃度為 0.5wt%~2wt%。
[0017]根據(jù)本發(fā)明，所述的聚乳酸-羥基乙醇酸共聚物與所述的多西紫杉醇的投料質(zhì)量比為40~60:1。優(yōu)選為50:1。
[0018]根據(jù)本發(fā)明，所述有機相與水相的體積之比為15~25:1。優(yōu)選為20:1。
[0019]根據(jù)本發(fā)明，所述的聚乳酸-羥基乙醇酸共聚物中DL-丙交酯:乙交酯的摩爾比為50:50，所述的聚乳酸-羥基乙醇酸共聚物的分子量為7000~17000Da。
[0020]根據(jù)本發(fā)明，所述的方法還包括在離心操作后，將納米載藥顆粒洗滌干凈、凍干的步驟。
[0021 ] 根據(jù)本發(fā)明，采用超純水將納米載藥顆粒洗滌干凈。
[0022]由于上述技術(shù)方案的運用，本發(fā)明與現(xiàn)有技術(shù)相比具有下列優(yōu)點:采用簡單易行的乳化溶劑揮發(fā)法制備納米載