本發(fā)明涉及一種阿霉素緩釋植入劑及其制備方法，具體地說(shuō)涉及阿霉素緩釋植入劑的組成、形狀、尺寸、強(qiáng)度、釋藥性能和制備方法，屬于藥物技術(shù)領(lǐng)域。

背景技術(shù)：

阿霉素是一種廣譜抗腫瘤藥物，具有很強(qiáng)的抗癌藥理活性，可直接作用于DNA，插入DNA雙螺旋鏈，使后者解開(kāi)，改變DNA的模板性質(zhì)，抑制DNA聚合酶從而抑制DNA合成，也抑制RNA合成。此外，阿霉素具有形成超氧基自由基的功能，并有特殊的破壞細(xì)胞的膜結(jié)構(gòu)和功能的作用，作為一種周期非特異性抗癌化療藥物，對(duì)各期細(xì)胞均有作用，適用于急性白血病、惡性淋巴瘤、乳腺癌、支氣管肺癌、卵巢癌、軟組織肉瘤、成骨肉瘤、橫紋肌肉瘤、尤文肉瘤、腎母細(xì)胞瘤、神經(jīng)母細(xì)胞瘤、膀胱癌、甲狀腺癌、前列腺癌、頭頸部鱗癌、睪丸癌、胃癌、肝癌等。

阿霉素是一種濃度、時(shí)間依賴(lài)性藥物，維持有效藥物濃度的時(shí)間越長(zhǎng)，療效越好；血液中藥物峰濃度越高，全身毒性越大。

早期，阿霉素是靜脈推注給藥，藥物在體內(nèi)駐留時(shí)間短，療效較低，因血藥峰濃度高，毒副作用嚴(yán)重，如嚴(yán)重的心臟毒性、骨髓抑制、口腔潰瘍等。

為提升療效、降低全身的毒副作用，用靜脈滴注方式給藥，靜滴時(shí)間為數(shù)十分鐘到96小時(shí)，延長(zhǎng)藥物在血液中的運(yùn)行時(shí)間，降低血藥峰濃度，結(jié)果顯示：靜滴時(shí)間越長(zhǎng)，療效越好，全身的毒性越小。由于藥物經(jīng)血液灌注全身，沒(méi)有靶向性，在殺死腫瘤細(xì)胞的同時(shí)也殺死正常細(xì)胞，對(duì)全身仍有一定的毒性，且給藥困難。

近期，人們開(kāi)發(fā)了阿霉素脂質(zhì)體注射劑，使用時(shí)，以5%葡萄糖液稀釋?zhuān)o脈滴注30～60分鐘，藥物體內(nèi)清除慢，半衰期長(zhǎng)達(dá)55小時(shí)，體內(nèi)駐留時(shí)間長(zhǎng)，療效有所提升，并且給藥方便，然而全身毒性仍然存在。

為了使阿霉素持續(xù)長(zhǎng)時(shí)間集中作用于腫瘤區(qū)以獲得更好的療效，同時(shí)大幅度降低或避免藥物對(duì)全身的毒性，人們研發(fā)出阿霉素緩釋植入劑，使用時(shí)，通過(guò)給藥器或手術(shù)植入腫瘤區(qū)，植入劑在腫瘤部位持續(xù)長(zhǎng)時(shí)間釋放阿霉素，使腫瘤區(qū)濃度高、作用時(shí)間長(zhǎng)，療效提升，同時(shí)血藥濃度極低，全身不良反應(yīng)極小。

業(yè)已研發(fā)的阿霉素植入劑有非降解型與降解型兩類(lèi)，非降解型是以不可降解材料(如羥基磷灰石、硅橡膠、聚丙烯酸酯、聚醋酸乙烯酯等)為輔料制成的阿霉素植入劑，這類(lèi)植入劑釋放度調(diào)控容易、質(zhì)量穩(wěn)定，但輔料不降解，植入人體后產(chǎn)生一些不良反應(yīng)，應(yīng)用受到限制，研發(fā)逐漸減少；降解型是以可降解材料(如聚乳酸、乙交酯-丙交酯共聚物、聚乙內(nèi)酯、殼聚糖、明膠等)為輔料制成的阿霉素植入劑，這類(lèi)植入劑釋放度難以控制，保存條件要求高，但輔料可降解為無(wú)毒無(wú)害的小分子物質(zhì)，植入人體后不產(chǎn)生毒副作用，應(yīng)用廣范，受到人們重視，研發(fā)日漸增多，其中以乙交酯-丙交酯共聚物(PLGA)為輔料的阿霉素植入劑是最實(shí)用、最受歡迎的一種。

PLGA生物相容性好，在體內(nèi)先降解為內(nèi)源性物質(zhì)乙醇酸、乳酸，后者參與體內(nèi)代謝，降解為二氧化碳和水，對(duì)人體無(wú)害。另外，可以通過(guò)改變PLGA的分子結(jié)構(gòu)、分子量、分子量分布等調(diào)節(jié)其強(qiáng)度、硬度、降解速度和對(duì)藥物的控制力，是安全性好的優(yōu)質(zhì)藥用材料，用PLGA制成的亮丙瑞林植入劑、地塞米松植入劑等產(chǎn)品上市后深受歡迎。

美國(guó)學(xué)者Brent D. Weinberg等以鹽酸阿霉素為有效藥、PLGA(乙交酯:丙交酯=50:50)為緩釋材料、氯化鈉為致孔劑，用熱壓法制成阿霉素植入劑，直徑1.5mm、長(zhǎng)8mm，含PLGA為65%、氯化鈉21.5%、阿霉素13.5%，植入兔肝臟瘤體內(nèi) (瘤株為XV2，瘤體直徑約8mm)，植入劑周邊濃度高達(dá)1000μg/g，并向外擴(kuò)散，4天治療組腫瘤面積為0.17±0.06 cm²，對(duì)照組為0.31±0.08 cm²，p = 0.048；8天治療組腫瘤面積為0.14±0.04 cm²，對(duì)照組為1.8±0.8 cm²，p = 0.025，植入劑抑瘤效果顯著｛[1]Brent D. Weinberg，Hua Ai，Elvin Blanco，et al. Antitumor efficacy and local distribution of doxorubicin via intratumoral delivery from polymer millirods[J]. Journal of Biomedical Materials Research Part A DOI 10.1002/jbm.a, Published online 21 November 2006 in Wiley InterScience (www.interscience.wiley.com). DOI: 10.1002/jbm.a.30914｝。該植入劑持續(xù)釋藥約4天(體內(nèi)4天釋放度87.2±1.5%，8天87.2±2.3%，4天后釋放度沒(méi)變化)，作用時(shí)間短，療效有限。

美國(guó)學(xué)者Ronnie Ortiz等對(duì)阿霉素PLGA植入劑的組成與釋放度的關(guān)系作了系統(tǒng)的研究，以鹽酸阿霉素為有效藥、PLGA為緩釋材料、丙酮為溶劑，用溶劑法研制成直徑0.8 mm、長(zhǎng)8 mm的系列植入劑，所用PLGA的分子量分別為7.9、 9.4、33和54kDa，小于10 kD的未封端，較高分子量的酯基封端，制成的植入劑鹽酸阿霉素的含量分別為10%、20%和30%，體外7天釋放特性有4種： (1) 快速釋放：鹽酸阿霉素含量30%時(shí)，1天釋放80%以上，1～2天釋放完全；(2) 嚴(yán)重突釋、釋放時(shí)間短、釋藥不完全：鹽酸阿霉素含量20%時(shí)：1天釋放60%以上，持續(xù)釋放2天～7天，釋放程度約為75%；(3) 釋放速度小、釋放時(shí)間短、釋放程度低：鹽酸阿霉素含量10%時(shí)，1天釋放小于4%，釋放1天～2天后停止釋放，釋放程度約為5%。 (4) 釋藥量小、釋放不連續(xù)、二次釋放： PLGA分子量小于10 KDa、鹽酸阿霉素含量10%的植入劑，第1天釋放小于4%，停釋2天～4天，再次釋放，釋放程度17%～40%｛[2] (Ronnie Ortiz, Jessie L-S. Au , Ze Lu ,et al.Biodegradable Intraprostatic Doxorubicin Implants[J]. The AAPS Journal 2007; 9 (2) Article 27 (http://www.aapsj.org)｝。這些植入劑有的迅速釋放，有的突釋嚴(yán)重，有的釋放太慢，有的釋放程度低，有的二次釋放，不具有長(zhǎng)時(shí)間持續(xù)釋放阿霉素的性質(zhì)，植入腫瘤區(qū)不能持續(xù)長(zhǎng)時(shí)間給藥殺滅腫瘤細(xì)胞，療效有限。

為克服現(xiàn)有技術(shù)的不足，本發(fā)明提供一種持續(xù)長(zhǎng)時(shí)間釋放阿霉素的植入劑及其制備方法，解決現(xiàn)有阿霉素PLGA植入劑不能持續(xù)長(zhǎng)時(shí)間、均勻或比較均勻、完全或比較完全釋放阿霉素的問(wèn)題，為臨床提供安全優(yōu)質(zhì)阿霉素植入劑，該植入劑植入瘤區(qū)后，持續(xù)長(zhǎng)時(shí)間釋放阿霉素直至釋放完全，腫瘤部位濃度高、作用時(shí)間長(zhǎng)，療效顯著；同時(shí)血藥濃度極低，全身毒性大幅度下降；給藥一次，數(shù)十天有效，尤其適用于實(shí)體腫瘤的治療。

技術(shù)實(shí)現(xiàn)要素：

技術(shù)方案：一種持續(xù)長(zhǎng)時(shí)間釋放阿霉素的植入劑(以下簡(jiǎn)稱(chēng)本發(fā)明植入劑)，其特征是，由鹽酸阿霉素、PLGA、聚乙二醇組成的緩慢釋放阿霉素的固體緩釋劑，所述PLGA，其乙交酯與丙交酯的摩爾比為15:85～85:15，優(yōu)選為15:85、25:75、50:50或75:25，最優(yōu)選為25:75或50:50，粘度為0.22 dl/g～1.23 dl/g，優(yōu)選為0.29 dl/g～0.86 dl/g，最優(yōu)選為0.32 dl/g～0.56 dl/g；所述聚乙二醇的分子量為2300～8500，優(yōu)選3000～6500，最優(yōu)選為3350、4000、4500、5000或6000；各組分含量(重量百分比)如下：

鹽酸阿霉素：9%～36%，優(yōu)選為12%～28%，最優(yōu)選為15%～24%；

聚乙二醇：4.5%～9.5%，優(yōu)選用量5%～8%，最優(yōu)選5.5%～7.5%；

PLGA：余量，即100%-鹽酸阿霉素含量-聚乙二醇含量。

本發(fā)明植入劑的形狀為圓柱體，直徑0.3mm～1.6mm，長(zhǎng)0.8mm～5mm，優(yōu)選直徑0.6mm～1.2mm，長(zhǎng)1.2mm～4mm，最優(yōu)選直徑0.7mm、0.8mm或0.9mm，長(zhǎng)2 mm、3mm或4mm；抗壓強(qiáng)度41MPa～65MPa，可用植藥針經(jīng)皮穿刺植入病灶區(qū)內(nèi)。

本發(fā)明植入劑在體內(nèi)1天釋藥5%～21%、5天釋藥25%～51%、10天釋藥35%～63%、30天釋藥80%～100%。

本發(fā)明植入劑的制備方法為熔融模塑法，包括以下步驟：

(1) 分別低溫粉碎阿霉素、PLGA、聚乙二醇，分別過(guò)120目藥篩，制成3種細(xì)粉；

(2) 將(1)的細(xì)粉按配比混合均勻，制成混合粉；

(3) 將(2)的混合粉在溫度20℃以下、壓力2KPa～15KPa下真空干燥，使混合粉中水及揮發(fā)性成分含量低于0.1%,制得干燥混合粉；

(4) 將(3)的干燥混合粉在90℃～140℃溫度下熔融3～12分鐘，注入模具內(nèi)成型、冷卻、脫模，即得持續(xù)長(zhǎng)時(shí)間釋放阿霉素的植入劑。

本發(fā)明植入劑的另一種制備方法為熔融擠塑法，包括以下步驟：

(1) 分別低溫粉碎阿霉素、PLGA、聚乙二醇，分別過(guò)120目藥篩，制成3種細(xì)粉；

(2) 將(1)的細(xì)粉按配比混合均勻，制成混合粉；

(3) 將(2)的混合粉在溫度20℃以下、壓力2KPa～15KPa下真空干燥，使混合粉中水及揮發(fā)性成分含量低于0.1%,制得干燥混合粉；

(4) 將(3)的干燥混合粉用擠塑機(jī)融熔擠成圓柱體料條，冷卻后，用切割器切成圓柱體，即得持續(xù)長(zhǎng)時(shí)間釋放阿霉素的植入劑。

本發(fā)明植入劑的使用方法：根據(jù)患者的具體情況，可采用以下使用方法：

(1) 對(duì)于不愿手術(shù)或不宜手術(shù)的腫瘤患者，用植藥針經(jīng)皮穿刺將其植入腫瘤內(nèi)或腫瘤周邊，或植入需要給藥的部位，使之長(zhǎng)時(shí)間殺滅腫瘤細(xì)胞，抑制腫瘤生長(zhǎng)；

(2) 對(duì)于手術(shù)中不能摘除的腫瘤，通過(guò)手術(shù)將其植入腫瘤內(nèi)或腫瘤周邊，或植入需要給藥的部位，使之長(zhǎng)時(shí)間殺滅腫瘤細(xì)胞，抑制腫瘤生長(zhǎng)；

(3) 對(duì)于手術(shù)摘除的腫瘤，術(shù)中將其植入瘤床，殺滅殘留的腫瘤細(xì)胞，預(yù)防腫瘤復(fù)發(fā)。

發(fā)明描述：

本發(fā)明為一種持續(xù)長(zhǎng)時(shí)間釋放阿霉素的植入劑及其制備方法，為使對(duì)來(lái)發(fā)明有更好地理解，作進(jìn)一步闡述：

1 本發(fā)明植入劑組成：由鹽酸阿霉素、PLGA和聚乙二醇組成，各組分作用與要求為：

(1) 鹽酸阿霉素：抗腫瘤有效成分，可直接殺滅腫瘤細(xì)胞，選用藥用級(jí)鹽酸阿霉素，在植入劑中的含量(重量百分比)為9%～36%，優(yōu)選為12%～28%，最優(yōu)選為15%～24%。含量過(guò)低，難以釋放，含量過(guò)高,釋放度不易控制。

(2) PLGA：為主要輔料，賦予植入劑的形狀、硬度與強(qiáng)度，控制鹽酸阿霉素的釋放速度等。PLGA是生物相容性好、可降解的優(yōu)質(zhì)藥用材料，在體內(nèi)藥物釋完后降解為內(nèi)源性物質(zhì)乳酸、乙醇酸，后者參與體內(nèi)代謝為二氧化碳與水，對(duì)人體無(wú)害。

PLGA的組成與特性粘度既影響植入劑的強(qiáng)度、釋藥性質(zhì)、穩(wěn)定性、貯運(yùn)條件和應(yīng)用，又影響植入劑的制備工藝與設(shè)備，PLGA分子中丙交酯含量過(guò)高，熔點(diǎn)高、降解慢，制備難度增大，應(yīng)用范圍受限；PLGA粘度過(guò)低，降解快、穩(wěn)定性差，導(dǎo)致植入劑質(zhì)量難控、穩(wěn)定性差，保存、運(yùn)輸困難；粘度過(guò)高，加工難度大，且降解慢，應(yīng)用受限。

本發(fā)明植入劑所用PLGA的乙交酯與丙交酯的摩爾比選為15:85～85:15，優(yōu)選為15:85、25:75、50:50或75:25，最優(yōu)選為25:75或50:50；PLGA粘度選為0.22 dl/g～1.23 dl/g，優(yōu)選為0.29 dl/g～0.86 dl/g，最優(yōu)選為0.32 dl/g～0.56 dl/g。

(3) 聚乙二醇：為次輔料，作用有：① 減小植入劑的突釋、縮短或消除植入劑的滯釋時(shí)間，調(diào)節(jié)植入劑的釋藥特性；② 提高植入劑的韌性、強(qiáng)度、表面光滑度，改善植入劑的質(zhì)量；③ 改善植入劑物料的流動(dòng)性和加工性。

聚乙二醇對(duì)植入劑的突釋、滯釋、釋藥規(guī)律等的調(diào)節(jié)效果與聚乙二醇的分子量及用量密切相關(guān)，分子量在一定范圍內(nèi)的聚乙二醇，用量合適時(shí)，既能減小前期釋放，又可消除滯釋期，使植入劑具有持續(xù)長(zhǎng)時(shí)間釋放藥物直至完全釋放的性質(zhì)。

本發(fā)明植入劑所用聚乙二醇的分子量可選為2300～8500，優(yōu)選為3000～6500，最優(yōu)選為3350、4000、4500、5000或6000；聚乙二醇用量(重量百分比) 為4.5%～9.5%，優(yōu)選用量5%～8%，最優(yōu)選5.5%～7.5%；用量過(guò)低，前期釋放量增加，植入體內(nèi)沖擊過(guò)大，易導(dǎo)致局部壞死；用量過(guò)高，前期釋放過(guò)低，植入體內(nèi)可使腫瘤細(xì)胞產(chǎn)生獲得性耐藥效應(yīng)，且釋放一定藥物后產(chǎn)生新的滯釋期，不能持續(xù)將藥物釋放完全，此外，用量過(guò)高還降低植入劑的硬度與剛度，導(dǎo)致植藥針使用困難。

為了更好地理解聚乙二醇在本發(fā)明植入劑中的作用，作如下進(jìn)一步闡述：

以鹽酸阿霉素為有效藥，以不同分子組成、不同粘度的PLGA為輔料，熔融法制備的阿霉素植入劑在純水中的釋放特性呈出現(xiàn)以下3類(lèi)，如圖1所示：

第1類(lèi)，速釋型：當(dāng)鹽酸阿霉素含量高時(shí)，第1天釋放80%以上，1天～2天釋放完全，如圖1釋放曲線A，突釋特別嚴(yán)重，釋藥時(shí)間特別短。

第2類(lèi)，快釋—滯釋(藥物釋放速度極小或停止釋放)—再釋型：當(dāng)鹽酸阿霉素含量中等時(shí)，前期釋放快，釋放2天～5天后，滯釋數(shù)天～數(shù)十天，然后再次釋放至完全，如圖1釋放曲線B，釋藥時(shí)間短，滯釋期長(zhǎng)。

第3類(lèi)，慢釋—滯釋—再釋型：當(dāng)鹽酸阿霉素含量低時(shí)，第1天釋放4%以下，釋放2天～5天后，停釋數(shù)天～數(shù)十天，然后再次釋放至完全，如圖1中釋放曲線C，釋放速度過(guò)小，滯釋期長(zhǎng)。

上述第1類(lèi)PLGA含量少，對(duì)鹽酸阿霉素控制弱，導(dǎo)致藥物迅速釋放，釋藥時(shí)間特別短；第3類(lèi)PLGA含量多，對(duì)鹽酸阿霉素控制強(qiáng)，且阿霉素為蒽環(huán)類(lèi)物質(zhì)，結(jié)構(gòu)復(fù)雜，分子量大(580 Da)，空間幾何尺寸大，運(yùn)動(dòng)困難，難以溶出，只有植入劑表面少量未受控或受控弱的鹽酸阿霉素可以溶出，導(dǎo)致釋放少量藥物后滯釋?zhuān)笃谠俅吾尫攀荘LGA降解、植入劑結(jié)構(gòu)疏松所致。第2類(lèi)PLGA含量在第1類(lèi)與第3類(lèi)之間，鹽酸阿霉素部分受PLGA控制，未受控部分迅速釋放，受控部分難以溶出導(dǎo)致滯釋?zhuān)笃谠俅吾尫攀荘LGA降解、植入劑結(jié)構(gòu)疏松所致。所有植入劑不具有持續(xù)長(zhǎng)時(shí)間釋放阿霉素直至釋放完全的性質(zhì)。

上述阿霉素植入劑的主要缺陷是有長(zhǎng)的滯釋期，要獲得持續(xù)長(zhǎng)時(shí)間釋放阿霉素的植入劑，關(guān)鍵是消除滯釋期，同時(shí)降低前期釋放量。

研究發(fā)現(xiàn)：(1) 在上述阿霉素植入劑中加入水不溶性的阻滯劑，可以減小前期釋放，但不能消除滯釋期，有的還會(huì)增加滯釋期；(2) 在阿霉素植入劑中加入水溶性低分子的致孔劑，則前期釋放加劇。這兩種措施都不能獲得持續(xù)長(zhǎng)時(shí)間釋放藥物的植入劑。

進(jìn)一步研究發(fā)現(xiàn)：在阿霉素植入劑中加入聚乙二醇，出現(xiàn)以下情況：

① 當(dāng)聚乙二醇分子量低時(shí)，加量越多，突釋越嚴(yán)重，且釋放越快，與加入其他水溶性小分子致孔劑作用類(lèi)似。

② 當(dāng)聚乙二醇分子量為2300～10000時(shí)，植入劑前期釋放與滯釋等發(fā)生多種變化：

前期釋放量隨聚乙二醇量的增加而增加，達(dá)到一個(gè)極值后，隨聚乙二醇量的增加反而減小，例如：當(dāng)聚乙二醇分子量為3350時(shí)，含4%聚乙二醇的植入劑，前期釋放速度比不含聚乙二醇的快，如圖2中釋放曲線E高于釋放曲線D；含6%聚乙二醇的植入劑，前期釋放速度比不含聚乙二醇的慢，如圖2中釋放曲線F低于釋放曲線D。

滯釋期隨聚乙二醇量的增加逐漸縮短直至消失，再隨聚乙二醇量的增加，則在較高釋放度時(shí)出現(xiàn)新的滯釋期。例如：含6%聚乙二醇的植入劑，滯釋期消失了，如圖2中釋放曲線F；而含10%聚乙二醇的植入劑，則在較高釋放度時(shí)形成了滯釋期，如圖2中釋放曲線G。

聚乙二醇在2300～10000時(shí)，具有調(diào)節(jié)植入劑的前期釋放量、減小或消除滯釋期、形成新的滯釋期等釋的作用。

聚乙二醇在植入劑中的作用機(jī)理：① 聚乙二醇分子量低時(shí)，因高親水性使周?chē)幬铽@水分而溶解、擴(kuò)散，由于自身分子量低，水溶性好，遇水溶解并向外擴(kuò)散，產(chǎn)生孔隙，為藥物提供擴(kuò)散通道，雙重作用促進(jìn)了藥物的釋放，導(dǎo)致突釋增加，釋放加快；② 聚乙二醇分子量高時(shí)，表層聚乙二醇吸水溶脹形成凝膠，使周?chē)幬铽@得水分而溶解、擴(kuò)散，產(chǎn)生釋放加速效應(yīng)，另一方面，凝膠又阻礙所覆蓋的藥物向外擴(kuò)散，產(chǎn)生阻滯效應(yīng)，聚乙二醇含量小時(shí)，凝膠覆蓋少，阻滯效應(yīng)小，加速效應(yīng)大，導(dǎo)致前期釋放增加；隨著聚乙二醇量的增加，凝膠增多，所覆蓋的藥物增多，阻滯效應(yīng)增大，加速效應(yīng)減小，導(dǎo)致前期釋放減小。植入劑內(nèi)部的聚乙二醇吸水形成凝膠，致使植入劑膨脹，內(nèi)部結(jié)構(gòu)疏松，一定時(shí)間后，凝膠態(tài)的聚乙二醇逐漸溶解，進(jìn)一步疏松內(nèi)部結(jié)構(gòu)，藥物向外擴(kuò)散阻力減小，同時(shí)植入劑內(nèi)部水分增加，促進(jìn)內(nèi)部藥物溶解、擴(kuò)散，多重作用促進(jìn)著內(nèi)部藥物的釋放，從而縮短或消除了藥物的滯釋期。

2 本發(fā)明植入劑形狀：為圓柱體，直徑0.3mm～1.6mm，長(zhǎng)0.8mm～5mm，優(yōu)選直徑0.6mm～1.2mm，長(zhǎng)1.2mm～4mm，最優(yōu)選直徑0.7mm、0.8mm或0.9mm，長(zhǎng)2 mm、3mm或4mm；抗壓強(qiáng)度41MPa～65MPa，可用植藥針經(jīng)皮穿刺植入病灶區(qū)內(nèi)。

植入劑形狀選為圓柱體便于植藥針使用；尺寸涉及使用與制造，尺寸越小，使用時(shí)可用小直徑的植藥針，對(duì)患者的創(chuàng)傷越小，但制造越難，尺寸過(guò)大，需要用較大直徑的植藥針，創(chuàng)傷大，兼顧臨床應(yīng)用與制造難易，選擇上述適宜的尺寸，該植入劑可在手術(shù)時(shí)使用，也可在非手術(shù)時(shí)使用。

3 本發(fā)明植入劑體內(nèi)釋放度：1天釋藥10%～21%、5天釋藥25%～51%、10天釋藥35%～63%、30天釋藥80%～100%。

植入劑初期有點(diǎn)突釋?zhuān)S后持續(xù)長(zhǎng)時(shí)間釋放藥物直至完全釋放，這樣植入劑植入瘤區(qū)后，短時(shí)間內(nèi)可在腫瘤區(qū)形成高的藥物濃度，隨后持續(xù)長(zhǎng)時(shí)間維持有效濃度，有效作用時(shí)間長(zhǎng)，治療強(qiáng)度大，可以提升療效；同時(shí)進(jìn)入血藥量極少，可使全身毒性大幅度下降；給藥一次有效時(shí)間長(zhǎng)達(dá)數(shù)十天。

4 本發(fā)明植入劑制備方法：熔融法。

以鹽酸阿霉素為有效成分、以PLGA、聚乙二醇為輔料制備植入劑的方法有壓制法、溶劑法、微球法、微囊法、熔融法等，因鹽酸阿霉素水溶性好，壓制法不能控制釋放速度；溶劑法使用有機(jī)溶液，工藝復(fù)雜，有污染和安全隱患，工業(yè)化問(wèn)題多；微球法與微囊法工藝復(fù)雜、難度大，質(zhì)量難以控制，工業(yè)化極其困難；熔融法對(duì)藥物的釋放控制強(qiáng)，工藝簡(jiǎn)單、無(wú)污染，易實(shí)現(xiàn)工業(yè)化，最具開(kāi)發(fā)價(jià)值。本發(fā)明選用熔融法，目的是有效控制植入劑質(zhì)量、簡(jiǎn)化生產(chǎn)過(guò)程、減少對(duì)環(huán)境的污染、降低生產(chǎn)成本、便于產(chǎn)業(yè)化，本發(fā)明的熔融法分為熔融模塑法和熔融擠塑法，制備過(guò)程分述如下：

(1) 熔融模塑法，包括以下步驟：

① 分別低溫粉碎阿霉素、PLGA、聚乙二醇，分別過(guò)120目藥篩，制成3種細(xì)粉；

② 將①的細(xì)粉按配比混合均勻，制成混合粉；

③ 將②的混合粉在溫度20℃以下、壓力2KPa～15KPa下真空干燥，使混合粉中水等揮發(fā)性成分含量低于0.1%,得干燥混合粉；

④ 將③的干燥混合粉在90℃～140℃溫度下熔融3～12分鐘，注入模具內(nèi)成型、冷卻、脫模、滅菌，即得持續(xù)長(zhǎng)時(shí)間釋放阿霉素的植入劑。

(2) 熔融擠塑法，包括以下步驟：

① 分別低溫粉碎阿霉素、PLGA、聚乙二醇，分別過(guò)120目藥篩，制成3種細(xì)粉；

② 將①的細(xì)粉按配比混合均勻，制成混合粉；

③ 將②的混合粉在溫度20℃以下、壓力2KPa～15KPa下真空干燥，使混合粉中水等揮發(fā)性成分含量低于0.1%,得干燥混合粉；

④ 將③的干燥混合粉用擠塑機(jī)融熔擠成圓柱體料條，冷卻后，用切割器切成圓柱體，滅菌，即得持續(xù)長(zhǎng)時(shí)間釋放阿霉素的植入劑。

本發(fā)明有益效果

1 本發(fā)明植入劑的優(yōu)點(diǎn)為：

(1) 表面光滑、韌性好、強(qiáng)度高，用植藥針給藥時(shí)，不阻塞針管，不碎裂。

(2) 持續(xù)長(zhǎng)時(shí)間釋放藥物，直至完全釋放，有效時(shí)間長(zhǎng)，藥物利用充分，作用強(qiáng)度大。

本發(fā)明植入劑含有適量、較高分子量的聚乙二醇，它具有潤(rùn)滑、增塑、增韌、增強(qiáng)等功能，使得植入劑表面光滑、韌性好、強(qiáng)度高；它遇水逐漸形成水凝膠，植入劑進(jìn)入人體后表面聚乙二醇形成水凝膠減小表面的藥物擴(kuò)散，避免嚴(yán)重突釋?zhuān)瑑?nèi)部聚乙二醇形成水凝膠的過(guò)程中疏松植入劑結(jié)構(gòu)，促進(jìn)內(nèi)部藥物溶解擴(kuò)散，導(dǎo)致植入劑初期少量突釋?zhuān)S后持續(xù)長(zhǎng)時(shí)間釋放藥物直至釋放完全(體內(nèi)1天釋藥10%～21%、5天釋藥25%～51%、10天釋藥35%～63%、30天釋藥80%～100%)；植入瘤區(qū)后，可以使腫瘤區(qū)短時(shí)間內(nèi)形成高的藥物濃度，并持續(xù)長(zhǎng)時(shí)間維持有效濃度，有效作用時(shí)間長(zhǎng)，作用強(qiáng)度大，可以顯著提升療效；同時(shí)血藥濃度極低，可以大幅度降低全身毒性；給藥一次數(shù)十天有效，臨床給藥更方便。

而現(xiàn)有阿霉素植入劑不含有增塑、增韌、增強(qiáng)、潤(rùn)滑功能的物質(zhì)，使得植入劑加工困難、表面粗糙、易碎，難以用植藥針使用。

重要的是現(xiàn)有植入劑不能持續(xù)長(zhǎng)時(shí)間完全釋放阿霉素，作用時(shí)間短，藥物利用低，釋放特性為以下幾種：

(1) 釋藥迅速，作用時(shí)間短：半衰期只有4小時(shí)^[1]，1～2天釋放完全 ^[2]；

(2) 突釋嚴(yán)重，釋藥時(shí)間短、釋放程度低：1天釋放40%以上，釋放2～7天，釋放程度小于75%^[2]；

(3) 釋放過(guò)慢，藥物作用不能發(fā)揮:1天釋放小于4%，2～5天小于6%^[2]。

與現(xiàn)有技術(shù)比較，本發(fā)明植入劑具有實(shí)質(zhì)性特點(diǎn)和顯著進(jìn)步。

2 本發(fā)明植入劑制備方法為熔融法，優(yōu)點(diǎn)為：

(1) 不使用有機(jī)溶劑等任何介質(zhì)，無(wú)三廢排放，環(huán)境友好，對(duì)人體無(wú)影響，安全性好；

(2) 工藝簡(jiǎn)單、設(shè)備要求低、操作簡(jiǎn)便，植入劑質(zhì)量可控性好；

(3) 生產(chǎn)周期短、產(chǎn)量大、成本低，易實(shí)現(xiàn)工業(yè)化。

制備步驟為：

① 分別低溫粉碎阿霉素、PLGA、聚乙二醇，分別過(guò)120目藥篩，制成3種細(xì)粉；

② 將①的細(xì)粉按配比混合均勻，制成混合粉；

③ 將②的混合粉在溫度20℃以下、壓力2KPa～15KPa下真空干燥，使混合粉中水等揮發(fā)性成分含量低于0.1%,得干燥混合粉；

④ 將③的干燥混合粉在90℃～140℃溫度下熔融3～12分鐘，注入模具內(nèi)成型、冷卻、脫模、滅菌，即得持續(xù)長(zhǎng)時(shí)間釋放阿霉素的植入劑。

(或?qū)ⅱ鄣母稍锘旌戏塾脭D塑機(jī)融熔擠成圓柱體料條，冷卻后，用切割器切成圓柱體，滅菌，即得持續(xù)長(zhǎng)時(shí)間釋放阿霉素的植入劑。)

而現(xiàn)有阿霉素PLGA植入劑的制備方法有熱壓法^[1]、[3]、溶劑法^[2]，主要缺點(diǎn)有：

(1) 使用二氯甲烷^[1]、[3]、丙酮^[2]等有毒有害易燃的有機(jī)物作溶劑，污染環(huán)境，危害人體健康，處理或回收困難大，成本上升。

(2) 物料受熱時(shí)間過(guò)長(zhǎng)，植入劑質(zhì)量難以控制(PLGA微球、阿霉素-NaCl混合物在90℃下施壓2小時(shí)^[1]、[3]，受熱時(shí)間長(zhǎng)，PLGA熱降解多，植入劑穩(wěn)定性差，質(zhì)量難以控制)；

(3) 工藝復(fù)雜，設(shè)備多，操作困難(用乳化、冷凍等法制備PLGA微球，用中和、洗滌、再中和法制備鹽酸阿霉素-氯化鈉混合粉，用熱壓法制備植入劑^[1]、[3])；

熱壓法^[1][3]制備步驟為：

① 用二氯甲烷溶解PLGA，制得100mg/L的PLGA溶液；

② 將上述①的PLGA溶液加入聚乙烯醇含量為1%的水溶液內(nèi)進(jìn)行乳化，制得PLGA乳液；

③ 將上述②的乳化液蒸發(fā)去除二氯甲烷，制得懸浮液；

④ 離心分離上述③的懸浮液，收集微球；

⑤ 洗滌、冷凍干燥上述④的微球，經(jīng)篩分制得粒徑4μm的PLGA微球；

⑥ 用氫氧化鈉中和鹽酸阿霉素溶液至pH=9.0，并沉淀阿霉素；

⑦ 洗滌上述⑥的阿霉素；

⑧ 重懸浮上述⑦的阿霉素，加鹽酸調(diào)至pH=3.0，得阿霉素酸溶液；

⑨ 將上述⑧的阿霉素酸溶液濃縮、凍干，制得阿霉素-NaCl混合物細(xì)粉(阿霉素重量百分?jǐn)?shù)為38.5%、NaCl為61.5%)，

⑩ 將上述⑤的PLGA微球65%(重量份)與上述⑨的阿霉素-NaCl混合物細(xì)粉35%(重量份)混合研磨均勻，制得均勻混合粉；

⑾ 將上述⑩的混合粉裝入特氟隆管內(nèi)；

⑿ 用不銹鋼活塞棒對(duì)上述⑾的特氟隆管內(nèi)的混合粉在溫度90℃下壓2小時(shí)，得微棒；

⒀ 將上述⑿的微棒從特氟隆管內(nèi)取出，制得阿霉素植入劑。

｛[3]Feng Qian,Agata Szymanski,Jinming Gao.Fabrication and characterization of controlled release poly(D,L-lactide-co-glycolide) millirods[J]. 2001 John Wiley & Sons, Inc.512-522.｝

溶劑法^[2]制備步驟為：

① 將PLGA溶于丙酮，制成PLGA丙酮溶液；

② 在上述①的溶液內(nèi)加入鹽酸阿霉素，混合均勻，制得混合物；

③ 去除上述②的混合物中的部分丙酮，制得膏狀混合物；

④ 將上述③的膏狀混合物注入硅膠橡管；

⑤ 干燥上述④的硅橡膠管內(nèi)的圓柱棒，冷卻至室溫，于真空下保存；

⑥ 從上述⑤的硅橡膠管內(nèi)取出圓柱棒，滅菌，即得阿霉素植入劑，直徑0.8mm,長(zhǎng)8mm。

與現(xiàn)有技術(shù)相比，本發(fā)明方法具有顯著進(jìn)步。

本發(fā)明植入劑用于臨床，可給難患者如下益處：

(1) 對(duì)于不愿手術(shù)或不宜手術(shù)的腫瘤患者，如老年腫瘤患者、已手術(shù)的腫瘤患者、不能手術(shù)摘除的器官上有腫瘤的患者，用植藥針經(jīng)皮穿刺將植入劑植入腫瘤內(nèi)或腫瘤周邊，或植入需要給藥的部位，植入劑則持續(xù)長(zhǎng)時(shí)間釋放阿霉素殺滅腫瘤細(xì)胞，長(zhǎng)時(shí)間抑制腫瘤生長(zhǎng)；

(2) 對(duì)于手術(shù)中不能摘除的腫瘤，如手術(shù)中發(fā)現(xiàn)某些部位的腫瘤不能摘除，可通過(guò)手術(shù)將植入劑植入腫瘤內(nèi)或腫瘤周邊，或植入需要給藥的部位，植入劑則長(zhǎng)時(shí)間殺滅腫瘤細(xì)胞、抑制腫瘤生長(zhǎng)；

(3) 對(duì)于手術(shù)摘除的腫瘤，術(shù)中在瘤床內(nèi)植入植入劑，植入劑則即時(shí)且長(zhǎng)時(shí)間殺滅殘留的腫瘤細(xì)胞，預(yù)防腫瘤復(fù)發(fā)。

說(shuō)明書(shū)附圖

附圖簡(jiǎn)單說(shuō)明：

圖1是阿霉素植入劑體外釋放度與釋放時(shí)間的關(guān)系，橫坐標(biāo)表示釋放時(shí)間，單位為天，縱坐標(biāo)表示釋放度，以百分?jǐn)?shù)(%)表示；圖內(nèi)曲線A、B、C分別表示阿霉素植入劑A、B、C的體外釋放度(%)與釋放時(shí)間(天)的關(guān)系，阿霉素植入劑A、B、C含鹽酸阿霉素的重量百分比分別為30%、20%和10%。

圖2是阿霉素植入劑體外釋放度與植入劑中聚乙二醇含量的關(guān)系，橫坐標(biāo)表示釋放時(shí)間時(shí)間，單位為天；縱坐標(biāo)表示釋放度，以百分?jǐn)?shù)(%)表示；圖內(nèi)曲線D、E、F、G分別表示阿霉素植入劑D、E、F、G體外釋放度與釋放時(shí)間的關(guān)系，阿霉素植入劑D、E、F、G含聚乙二醇的重量百分比分別為0%、4%、6%和10%。

圖3是阿霉素植入劑F在大鼠肝內(nèi)釋放度與植入時(shí)間的關(guān)系，橫坐標(biāo)表示植入肝內(nèi)時(shí)間，單位為天；縱坐標(biāo)表示肝內(nèi)釋放度，以百分?jǐn)?shù)(%)表示。

具體實(shí)施方式：

以下實(shí)施例僅對(duì)本發(fā)明的進(jìn)一步說(shuō)明，不能理解為對(duì)本發(fā)明任何的限制。

實(shí)施例1 阿霉素植入劑A、B、C

(1) 處方,見(jiàn)表1。

表1 阿霉素植入劑A、B、C組分與重量比

(2) 制備

① 分別粉碎上表1物料、分別過(guò)120目藥篩，制得鹽酸阿霉素細(xì)粉、PLGA細(xì)粉；

② 將①的細(xì)粉按上表1配比混合均勻，分別制成植入劑A、B、C混合粉；

③ 將②的混合粉在溫度22℃、壓力9KPa下真空干燥箱內(nèi)干燥，使混合粉中水及揮發(fā)性成分含量低于0.1%,制得干燥植入劑A、B、C混合粉；

④ 分別將③的每種干燥混合粉置不銹鋼容器內(nèi)于110℃溫度下熔融9分鐘，注入模具(模孔直徑0.9mm、長(zhǎng)4mm)內(nèi)成型、冷卻、脫模，滅菌，制得阿霉素植入劑A、B、C，植入劑均為紅色圓柱體，直徑0.9mm、長(zhǎng)4mm,耐壓強(qiáng)度47MPa。

實(shí)施例2 阿霉素植入劑D、E、F、G

(1) 處方,見(jiàn)表2。

表2 阿霉素植入劑D、E、F、G組分與重量比

(2) 制備

① 分別粉碎上表2物料、分別過(guò)120目藥篩，制得鹽酸阿霉素細(xì)粉、PLGA細(xì)粉；

② 將①的細(xì)粉按上表2配比混合均勻，分別制成植入劑D、E、F、G混合粉；

③將②的混合粉在溫度26℃、壓力11KPa下真空干燥箱內(nèi)干燥，使混合粉中水及揮發(fā)性成分含量低于0.1%,制得干燥植入劑D、E、F、G混合粉；

④ 分別將③的每種干燥植入劑混合粉置不銹鋼容器內(nèi)于130℃溫度下熔融9分鐘，注入模具(?？字睆?.9mm、長(zhǎng)4mm)內(nèi)成型、冷卻、脫模、滅菌，制得阿霉素植入劑D、E、F、G, 植入劑均為紅色圓柱體，直徑0.9mm、長(zhǎng)4mm,耐壓強(qiáng)度49MPa。

實(shí)施例3 體外釋放度試驗(yàn)

(1) 用分光光度法測(cè)定阿霉素植入劑A、B、C、D、E、F、G含量；

(2) 取3粒阿霉素植入劑A，分別精密稱(chēng)重，各放入1只10mL潔凈具塞試管內(nèi)，每只試管內(nèi)加入5mL純化水(pH=7.0)，并使植入劑粒子浸入水中，放入(37±0.5)℃的水浴槽內(nèi)保溫，即為阿霉素植入劑A體外釋放裝置。

（3）同法制作阿霉素植入劑B、C、D、E、F、G的體外釋放裝置。

（4）每天分別取出每只試管內(nèi)的全部液體，同時(shí)加入同體積的新鮮純化水，并放入(37±0.5 )℃的水浴槽內(nèi)保溫；

（5）用分光光度法分別檢測(cè)每天取出液的鹽酸阿霉素的量，根據(jù)投入量與釋放量計(jì)算釋放度，結(jié)果見(jiàn)圖1、2。

圖1顯示：① 當(dāng)鹽酸阿霉素含量30%時(shí)，第1天釋放80%以上，1天～2天釋放完全，見(jiàn)圖1釋放曲線A，突釋特別嚴(yán)重，釋藥時(shí)間特別短；②當(dāng)鹽酸阿霉素含量20%時(shí)，第1天釋放30%以上，釋放6天，滯釋12天，然后再次釋放至完全，見(jiàn)圖1釋放曲線B，突釋嚴(yán)重，釋藥時(shí)間短，滯釋期長(zhǎng); ③ 當(dāng)鹽酸阿霉素含量10%時(shí)，第1天釋放4%以下，釋放5天，滯釋13天，然后再次釋放至完全，如圖1中釋放曲線C，釋放速度過(guò)小，滯釋期長(zhǎng)。

圖2顯示：聚乙二醇(分子量為3350)對(duì)阿霉素植入劑釋放度的影響極其復(fù)雜：① 聚乙二醇含量為4%時(shí)，提高了阿霉素植入劑的初期釋放量，前期釋放快，滯釋期消失，藥物釋放完全，圖2中釋放曲線E高于D；② 聚乙二醇含量為6%時(shí)，減小了阿霉素植入劑的突釋量，滯釋期消失，藥物釋放較均勻直至完全釋放，圖2中釋放曲線F前期低于D，而后期高于D；③ 聚乙二醇含量為10%時(shí)，顯著減小阿霉素植入劑突釋量，藥物較均勻釋放至85%時(shí)，形成新的滯釋期，藥物不能持續(xù)釋主放完全, 圖2中釋放曲線G前期低于D，而后期高于D，但低于F。

實(shí)施例4 體內(nèi)釋放度試驗(yàn)

取Wista大鼠30只，每只大鼠麻醉后，剖腹，用植藥針向肝內(nèi)植入1粒已稱(chēng)重的阿霉素植入劑F，關(guān)腹、消毒，常規(guī)飼養(yǎng)；分別于植藥后第1、3、5、7、10、15、20、25、30、35天時(shí)各處死大鼠3只，取出每只大鼠內(nèi)的殘留植入劑，高效液相色譜法檢測(cè)殘留植入劑中鹽酸阿霉素的剩余量，根據(jù)植入藥量和剩余藥量計(jì)算釋放度，阿霉素植入劑F在大鼠肝內(nèi)釋放度(%)與植入體內(nèi)時(shí)間(天) 的關(guān)系見(jiàn)表3與圖3。

表3 阿霉素植入劑F在大鼠肝內(nèi)釋放度(/%)與植入肝內(nèi)時(shí)間(天)的關(guān)系

表3與圖3顯示：阿霉素植入劑F在大鼠體內(nèi)1天釋放(14.6 ± 2.5)%、5天釋放(35.8± 1.9)%、10天釋放(53.8± 2.7)%、30天釋放(93.5± 1.6)%，初期有一定突釋?zhuān)掷m(xù)35天釋放阿霉素直至釋放98.7%。

實(shí)施例5 藥效學(xué)試驗(yàn)

取生產(chǎn)旺盛的SGC-7901瘤組織切成1.5mm³左右，在無(wú)菌條件下，接種于12只裸小鼠(BALB/CA,18～22g,雌性，6周齡)腋窩皮下，在接種后第6天隨機(jī)均分為對(duì)照組與植入劑組，對(duì)照組不治療，植入劑組第6天按0.06mg/只量(以鹽酸阿霉素計(jì))將阿霉素植入劑F埋入裸小鼠皮瘤結(jié)邊緣，接種36天后解剖稱(chēng)瘤重，按下式計(jì)算腫瘤生長(zhǎng)抑制率：

抑制率=100%×(對(duì)照組瘤重-植入劑組瘤重)/對(duì)照組瘤重

結(jié)果：阿霉素植入劑F對(duì)人胃瘤SGC-7901的抑瘤率為83.2%。

實(shí)施例6 阿霉素植入劑治療晚期腫癌單個(gè)腫瘤

肝癌晚期，經(jīng)多次介入治療后，肝部復(fù)發(fā)生長(zhǎng)5.4cm×4.7cm腫瘤，在B超引導(dǎo)下，用12號(hào)植藥針經(jīng)皮穿刺將阿霉素植入劑F植入瘤內(nèi)，給藥量(以鹽酸阿霉素計(jì))200mg，治療期間生理生化指標(biāo)未見(jiàn)異常，肝、腎、心臟、肺等功能正常，未出現(xiàn)不良反應(yīng)，1月后，CT機(jī)檢查：腫瘤內(nèi)壞死86%。

實(shí)施例7 阿霉素植入劑治療晚期肝癌多個(gè)腫瘤

肝癌晚期，經(jīng)多次介入治療后，肝部復(fù)發(fā)生長(zhǎng)腫瘤3個(gè)，尺寸分別為5.3cm×4.2cm、6.3cm×5.8cm和7.9cm×6.4cm；在B超引導(dǎo)下，用12號(hào)植藥針經(jīng)皮穿刺將阿霉素植入劑F植入瘤周，每個(gè)瘤周分四點(diǎn)給藥，3個(gè)腫瘤給藥總量(以鹽酸阿霉素計(jì))340mg，治療期間生理生化指標(biāo)無(wú)異常變化，肝、腎、心臟、肺等功能正常，未出現(xiàn)不良反應(yīng)，1月后，CT機(jī)檢查：3個(gè)腫瘤的瘤周均有不同程度壞死，腫瘤體積縮小。