本發(fā)明屬于獸藥制劑領(lǐng)域，特別涉及一種氟苯尼考可溶性粉的組方及其制備方法
背景技術(shù)：
氟苯尼考(Florefnioc)，化學(xué)名稱為D(+)-蘇-1-對(duì)甲楓基苯基-2-二氯乙酞氨基-3-氟丙醇，是化學(xué)合成的第三代氯霉素類廣譜抗菌藥物，對(duì)多種革蘭氏陽(yáng)性菌和革蘭氏陰性菌均有抑制作用。氟苯尼考的抗菌活性與氯霉素非常相似，但因結(jié)構(gòu)中無(wú)對(duì)位硝基而無(wú)潛在致再生障礙性貧血作用。其合成工藝以(1R,2R)-3-羥基-2-氨基-3-[4-(甲砜基)苯基]-丙酸乙酯為原料,經(jīng)過(guò)還原、保護(hù)、氟化、水解、二氯乙?；?步反應(yīng)最后得到氟苯尼考，因此不會(huì)產(chǎn)生氯霉素等問(wèn)題。
氟苯尼考結(jié)構(gòu)式
氟苯尼考是甲砜霉素(Thiamphenicol)的單氟衍生物，作用機(jī)理及抗菌譜同甲砜霉素和氯霉素(Chiormaphneioc)，能夠抑制細(xì)菌70S核糖體，與50S亞基結(jié)合，抑制肽?；D(zhuǎn)移酶，從而抑制肽鏈的延伸，干擾蛋白質(zhì)的合成。
甲硯霉素和氯霉素耐藥菌菌株通常會(huì)產(chǎn)生隨質(zhì)粒傳播的乙酞轉(zhuǎn)移酶(Acetyltransferase)，該酶能夠使甲砜霉素和氯霉素結(jié)構(gòu)中C-3(α-甲基)位上的-OH發(fā)生乙?；磻?yīng)，并因此失去藥理活性。而氟苯尼考則因C-3的-OH被-F取代，不會(huì)受乙酰轉(zhuǎn)移酶的破壞，所以對(duì)甲砜霉素和氯霉素耐藥的菌株仍對(duì)氟苯尼考敏感。
氟苯尼考屬動(dòng)物專用廣譜抗菌藥，對(duì)革蘭氏陽(yáng)性菌和陰性菌均有效，抗菌譜與氯霉素相似，但抗菌活性優(yōu)于氯霉素和甲砜霉素。對(duì)耐氯霉素和甲楓霉素的大腸桿菌、沙門氏菌、克雷白菌亦有效。大多數(shù)病原菌對(duì)氟苯尼考具有高度的敏感性(MIC 0.2～1.6ug/ml)，而這些病原菌對(duì)氯霉素和羥氨芐青霉素往往產(chǎn)生耐藥或快速耐藥。
氟苯尼考在治療劑量時(shí)對(duì)大小鼠毒性很低，口服LD50大于5000mg/kg。以30mg/kg劑量連續(xù)應(yīng)用60d，對(duì)大鼠的增重、骨髓造血機(jī)能及各組織器官均無(wú)影響。以50mg/kg的劑量對(duì)腎臟有輕度的損傷，在30d時(shí)可減少大鼠的增重，但對(duì)其他組織器官以及骨髓造血機(jī)能 均無(wú)影響。以100mg/kg劑量連續(xù)應(yīng)用30d以上，會(huì)減少大鼠的增重，降低骨髓的造血機(jī)能，損傷肝臟，嚴(yán)重?fù)p傷腎臟及睪丸，但對(duì)脾臟、肺臟、雌性生殖器官、大腦無(wú)損傷。
研究表明，氟苯尼考無(wú)致畸、致癌和致突變作用。氟苯尼考不會(huì)引起染色體改變和數(shù)目改變；在S9激活系統(tǒng)存在條件下，不會(huì)導(dǎo)致小鼠淋巴瘤L5l78Y細(xì)胞內(nèi)TK位點(diǎn)發(fā)生突變；在急性或亞急性給藥條件下，不會(huì)誘發(fā)骨髓細(xì)胞染色體畸變：通過(guò)檢查微核，也未發(fā)現(xiàn)有致突變作用。
氟苯尼考由于其溶水性極差，限制了它的臨床應(yīng)用?，F(xiàn)有技術(shù)中多選用固體分散載體方法，其中包含PVP30、PVP5、聚乙二醇等，此組方工藝可行，但其溶水性沒(méi)有經(jīng)過(guò)包被后的氟苯尼考好。還有一些發(fā)明組方中加入了一些氯化銨，中藥，吸收促進(jìn)劑等，這些組方對(duì)于實(shí)際使用來(lái)講，依然沒(méi)有解決溶水性問(wèn)題。
“一種氟苯尼考粉劑及制備方法(104706629A；公開(kāi)日：2015-06-17)”，組方為氟苯尼考10％，羥丙基-β-環(huán)糊精18-22％，乙醇30-50％，甲醇20-40％。氟苯尼考通過(guò)與羥丙基-β-環(huán)糊精包囊后使包囊后的氟苯尼考可溶于水，臨床使用方便。制備方法為先將氟苯尼考與甲醇混合溶解，再將β環(huán)糊精與乙醇混合溶解，再將兩溶液混合回流9小時(shí)，烘箱80-90度烘干。由于組方使用大量的乙醇、甲醇，而且制備工藝中將溶液直接烘箱烘干，生產(chǎn)危險(xiǎn)性大。
“一種氟苯尼考可溶性粉的生產(chǎn)方法”(公開(kāi)號(hào)CN 101966340 A)，工藝步驟如下：
氟苯尼考與2-羥丙基-β環(huán)糊精的包合；將2-羥丙基-β環(huán)糊精與水混合溶解，并將氟苯尼考溶解到二甲基甲酰胺中，將上述兩溶液投入到研磨機(jī)中進(jìn)行混合研磨，時(shí)間為2～5小時(shí)后噴霧干燥。產(chǎn)品可直接溶于水給動(dòng)物飲用治病。這種制備方法只是將氟苯尼考與β環(huán)糊精進(jìn)行簡(jiǎn)單的物理研磨，未包合的氟苯尼考未進(jìn)行去除，會(huì)影響成品的溶解度和溶解的穩(wěn)定性。
技術(shù)實(shí)現(xiàn)要素：
基于上述原因，本發(fā)明提供一種含有包被劑的氟苯尼考組合物，可以使得溶水性不良的氟苯尼考被包被物空穴包被，原料的疏水性得到改善，在水中保持長(zhǎng)時(shí)間溶解。
本發(fā)明提供了一種氟苯尼考可溶性粉的組方為：
所述助溶劑選自N，N-二甲基甲酰胺、二甲基乙酰胺、乙醇中的一種或一種組合，優(yōu)選二甲基乙酰胺或二甲基乙酰胺與乙醇組合。
所述包被劑選自β-環(huán)糊精、羥丙基-β-環(huán)糊精、葡萄糖基-β-環(huán)糊精和羧甲基-β環(huán)糊精中的一種。
所述促溶劑選自尿素、維生素C中的一種或組合。
所述水為純化水或超純水。
所述制備工藝是通過(guò)下述技術(shù)步驟實(shí)現(xiàn)的：
(1)按處方量取助溶劑，加入氟苯尼考，攪拌直到完全溶解，保溫備用，得A液；
(2)按處方量稱取水，加入促溶劑，邊攪拌邊緩慢加入包被劑，直至溶解澄清，保溫備用，得B液；
(3)將A液緩慢的滴加到B液內(nèi)，維持40℃、勻速攪拌，在維持9h，減壓蒸餾除去助溶劑，去除未包被析出物，將透明包被溶液進(jìn)行噴霧干燥，即得。
所述步驟(1)、(2)保溫溫度為35～45℃；優(yōu)選40℃。本發(fā)明的有益效果是：
1、用本發(fā)明助溶技術(shù)生產(chǎn)的氟苯尼考可溶性粉，溶水性比未包被的原料增加了約200倍，使用水溶解包被劑，降低生產(chǎn)危險(xiǎn)性，且升溫回流的助溶劑可以回收利用。
2、本發(fā)明提供的氟苯尼考組合物提高了氟苯尼考的溶解性，有意促溶劑的加入，可保持至少6小時(shí)氟苯尼考溶解不析出。而不加促溶劑的組方，氟苯尼考溶解4小時(shí)溶液略渾濁，6小時(shí)可見(jiàn)溶液略有沉淀析出。
具體實(shí)施方式
本發(fā)明可用下面特征實(shí)施例的處方和制備方法加以說(shuō)明。(按100kg處方量)
注：上表中二甲基乙酰胺與乙醇混合溶劑的組方比例均為1:1(W/W)。
實(shí)施例1配制方法：
(1)將15kg二甲基甲酰胺，加入氟苯尼考20kg，攪拌使氟苯尼考完全溶解，保溫35℃?zhèn)溆?，得A液；
(2)將55.5kg水，加入維生素C1.5kg，攪拌至溶解后，緩慢加入β-環(huán)糊精，攪拌至溶解澄清，保溫35℃?zhèn)溆?，得B液；
(3)將A液緩慢的滴加到B液內(nèi)，維持35℃、勻速攪拌(至溶液均勻混懸)，在維持9h，抽濾后，將透明包被溶液噴霧干燥，得成品。
實(shí)施例2配制方法：
(1)將40kg二甲基乙酰胺，加入氟苯尼考20kg，攪拌使氟苯尼考完全溶解，保溫40℃?zhèn)溆?，得A液；
(2)將31kg水，加入2kg尿素，攪拌至溶解，緩慢加入羥丙基-β-環(huán)糊精，攪拌至溶解澄清，保溫40℃?zhèn)溆茫肂液；
(3)將A液緩慢的滴加到B液內(nèi)，維持40℃，勻速攪拌(至溶液均勻混懸)，維持9h，離 心取上清液，將透明包被溶液噴霧干燥，得成品。
實(shí)施例3配制方法：
(1)將5.5kgN,N-二甲基甲酰胺酰胺、5.5kg乙醇混合均勻，加入氟苯尼考8kg，攪拌使氟苯尼考完全溶解，保溫45℃?zhèn)溆?，得A液；
(2)將73.9kg水，加入維生素C1kg、尿素0.5kg，攪拌至溶解后，緩慢加入6kg葡萄糖基-β-環(huán)糊精，攪拌至溶解澄清，保溫45℃?zhèn)溆?，得B液；
(3)將A液緩慢的滴加到B液內(nèi)，維持45℃，勻速攪拌(至溶液均勻混懸)，維持9h，離心取上清液，將透明包被溶液噴霧干燥，得成品。
實(shí)施例4配制方法：
(1)將20kg二甲基乙酰胺、20kg乙醇混合均勻，加入氟苯尼考30kg，攪拌使氟苯尼考完全溶解，保溫40℃?zhèn)溆?，得A液；
(2)將16.5kg水，加入維生素C1.5kg、尿素0.5kg，攪拌至溶解后，緩慢加入12kg羧甲基-β-環(huán)糊精，攪拌至溶解澄清，保溫40℃?zhèn)溆?，得B液；
(3)將A液緩慢的滴加到B液內(nèi)，維持40℃，勻速攪拌(至溶液均勻混懸)，維持9h，離心取上清液，將透明包被溶液噴霧干燥，得成品。
實(shí)施例5配制方法：
(1)將11kg N,N二甲基甲酰胺，加入氟苯尼考10kg，攪拌使氟苯尼考完全溶解，保溫35℃?zhèn)溆?，得A液；
(2)將69.8kg水，加入維生素C1.2kg，攪拌至溶解后，緩慢加入8kg葡萄糖基-β-環(huán)糊精，攪拌至溶解澄清，保溫35℃?zhèn)溆茫肂液；
(3)將A液緩慢的滴加到B液內(nèi)，維持40℃，勻速攪拌(至溶液均勻混懸)，維持9h，離心取上清液，將透明包被溶液噴霧干燥，得成品。
實(shí)施例6配制方法：
(1)取40kg乙醇，加入氟苯尼考18kg，攪拌使氟苯尼考完全溶解，保溫40℃?zhèn)溆茫肁液；
(2)將34kg水，加入尿素2kg，攪拌溶解后，緩慢加入6kg葡萄糖基-β-環(huán)糊精，攪拌至溶解澄清，保溫40℃?zhèn)溆?，得B液；
(3)將A液緩慢的滴加到B液內(nèi)，維持40℃，勻速攪拌(至溶液均勻混懸)，維持9h，離心取上清液，將透明包被溶液噴霧干燥，得成品。
實(shí)施例7配制方法：
(1)將40kg二甲基乙酰胺，加入氟苯尼考20kg，攪拌使氟苯尼考完全溶解，保溫40℃?zhèn)? 用，得A液；
(2)將31kg水，緩慢加入羥丙基-β-環(huán)糊精，攪拌溶解澄清，保溫40℃?zhèn)溆?，得B液；
(3)將A液緩慢的滴加到B液內(nèi)，維持40℃，勻速攪拌(至溶液均勻混懸)，維持9h，離心取上清液，將透明包被溶液噴霧干燥，得成品。
實(shí)施例8：氟苯尼考含量及最大溶水性測(cè)定
含量測(cè)定方法：采用中國(guó)獸藥典2010年版氟苯尼考原料的含量測(cè)定方法(高效液相色譜法)，測(cè)定上述實(shí)施例1-6的氟苯尼考含量。
最大溶水性測(cè)定方法：稱取實(shí)施例1-6氟苯尼考組合物(以氟苯尼考計(jì))各1.0g的樣品于具塞比色管內(nèi)，記錄可以使樣品溶解成澄清透明溶液的水的毫升數(shù)，折算成mg/ml，溶解后觀察6小時(shí)。
表1溶解性及含量檢測(cè)結(jié)果
從以上數(shù)據(jù)得出，本發(fā)明提供的氟苯尼考組合物提高了氟苯尼考的溶解性，溶解度較現(xiàn)有技術(shù)有了顯著的提高。促溶劑的加入，可保持至少6小時(shí)氟苯尼考溶解不析出。而不加促溶劑的組方(實(shí)施例7)，氟苯尼考溶解4小時(shí)溶液略渾濁，6小時(shí)可見(jiàn)溶液有沉淀析出，可見(jiàn)促溶劑可提高氟苯尼考在水溶液中的穩(wěn)定性。
實(shí)施例8：臨床療效試驗(yàn)
豬副嗜血桿菌(HPS)是巴氏桿菌科嗜血桿菌屬中的一種沒(méi)有運(yùn)動(dòng)性的小型多態(tài)桿菌，本菌可引起豬多發(fā)性漿膜炎、關(guān)節(jié)炎，表現(xiàn)為呼吸困難、高熱及高死亡率為特征的傳染病，嚴(yán)重時(shí)死亡率達(dá)50％以上，給養(yǎng)豬業(yè)帶來(lái)巨大的經(jīng)濟(jì)損失。
1.材料
空白對(duì)照組：生理鹽水
藥物對(duì)照組：10％氟苯尼考粉，市售。
試驗(yàn)樣品組：本發(fā)明實(shí)施例3可溶性粉自制的10％氟苯尼考可溶性粉，輔料為無(wú)水葡萄糖。2.動(dòng)物分組
天津某豬場(chǎng)(未接種過(guò)豬副嗜血桿菌疫苗)自然發(fā)病長(zhǎng)白、大白雜交仔豬30頭，發(fā)病后經(jīng)臨床診斷、實(shí)驗(yàn)室分離培養(yǎng)確診為豬副嗜血桿菌病。試驗(yàn)前按常規(guī)飼養(yǎng)，自由飲水，隨機(jī)分成3組：氟苯尼考可溶性粉組，氟苯尼考包被粉組和生理鹽水對(duì)照組，每組10頭。
3.給藥方法
按獸藥使用說(shuō)明書(shū)使用，每1kg體重，豬20mg，一日2次，連用3日。藥物對(duì)照組：10％氟苯尼考粉，拌料給藥，試驗(yàn)樣品組：本發(fā)明實(shí)施例3制備的氟苯尼考可溶性粉，飲水給藥。
4.試驗(yàn)結(jié)果
表2臨床試驗(yàn)結(jié)果
5.討論
此臨床試驗(yàn)動(dòng)物數(shù)較少，從實(shí)驗(yàn)結(jié)果來(lái)分析，氟苯尼考可溶性粉(飲水給藥)組與市售的氟苯尼考粉(拌料給藥)組的臨床療效無(wú)明顯差異。說(shuō)明氟苯尼考可溶性粉制備方法不會(huì)對(duì)氟苯尼考的療效造成影響。
盡管本發(fā)明是參照具體實(shí)施例來(lái)描述，但這種描述并不意味著對(duì)本發(fā)明構(gòu)成限制。參照本發(fā)明的描述，所公開(kāi)的實(shí)施例的其他變形，對(duì)于本領(lǐng)域技術(shù)人員都是可以預(yù)料的。因此，這樣的變形不會(huì)脫離所屬權(quán)利要求限定的范圍及精神。