發(fā)明領(lǐng)域本發(fā)明涉及一種制備大環(huán)螯合劑dota的釓金屬絡(luò)合物制劑的方法，所述制劑還包含少過量的游離dota。該方法使用受控條件，使得過量的釓以氧化釓的沉淀存在，并過濾以除去過量，之后加入限定過量的dota螯合劑。還提供了制備基于gd-dota的mri造影劑的方法。發(fā)明背景鑭系金屬(特別是釓)的金屬絡(luò)合物作為在體內(nèi)醫(yī)學(xué)成像領(lǐng)域中的mri造影劑具有重要意義?；卺彽慕饘俳j(luò)合物的mri造影劑已被詳盡地評(píng)述[見例如zhang等人,curr.med.chem.,12,751-778(2005)和aime等人,adv.inorg.chem.,57,173-237(2005)]。然而，游離釓離子確實(shí)在體內(nèi)顯示出明顯的毒性。us5,876,695通過在釓金屬絡(luò)合物的制劑中包含添加劑解決了這個(gè)問題，所述添加劑是例如具有鈣的“弱金屬螯合物絡(luò)合物”。想法是過量的“弱金屬螯合物絡(luò)合物”將有效地絡(luò)合可偶然地釋出或存在的任何釓離子，因而改進(jìn)了mri造影組合物的安全性。ep2513043b1公開了一種制備釓金屬絡(luò)合物的方法，其中先使釓與任選地用金屬配位基團(tuán)官能化的陽離子交換樹脂絡(luò)合。固相結(jié)合的釓隨后與氨基羧酸螯合劑反應(yīng)以釋出所需的釓絡(luò)合物。任何過量的釓保持與固相的結(jié)合。ep2242515b9公開了一種制備含有大環(huán)螯合物與鑭系元素的絡(luò)合物和0.002%和0.4%之間的mol/mol量的游離大環(huán)螯合物的液體藥物制劑的過程，所述過程包括以下連續(xù)的步驟：b)通過混合游離大環(huán)螯合物的溶液和游離鑭系元素的溶液，以通過大環(huán)螯合物獲得鑭系元素的絡(luò)合，制備含有大環(huán)螯合物與鑭系元素的絡(luò)合物，和不在賦形劑x[x',l]的形式下的游離大環(huán)螯合物的液體藥物組合物，其中l(wèi)是大環(huán)螯合物且x和x'是金屬離子，特別是獨(dú)立地選自鈣、鈉、鋅和鎂，和游離鑭系元素，游離大環(huán)螯合物的量和游離鑭系元素的量使得并非所有鑭系元素被絡(luò)合；c)測量在步驟b)中獲得的藥物制劑中的游離鑭系元素的濃度clanl；游離大環(huán)螯合物的濃度cchl等于0；d)通過將一定量的游離大環(huán)螯合物加入到步驟b)中獲得的制劑中來調(diào)節(jié)cchl和clanl，所述游離大環(huán)螯合物的量有必要首先完成游離鑭系元素的絡(luò)合以獲得clanl=0，且其次獲得cchl=ctchl，其中ctchl是最終液體藥物制劑中的游離大環(huán)螯合物的目標(biāo)濃度并在0.002%和0.4%mol/mol之間的范圍內(nèi)選擇，其中最終液體藥物制劑中的游離大環(huán)螯合物的量對(duì)應(yīng)于游離大環(huán)螯合物相對(duì)于最終液體藥物制劑中絡(luò)合的大環(huán)螯合物的量的比例。ep2242515b9教導(dǎo)了所述方法優(yōu)選還包括測定最終液體藥物制劑中的游離大環(huán)螯合物的理論目標(biāo)濃度ctchl的在先步驟a)。us2012/0082624a1公開了與ep2242515b9類似的過程，不同之處在于以粉末形式獲得藥物制劑。ep2242515b9和us2012/0082624a1二者都強(qiáng)調(diào)，對(duì)于工業(yè)規(guī)模的藥物制造過程，加入0.1mol%的游離大環(huán)螯合物難以單靠稱重達(dá)到所需的準(zhǔn)確度。這歸因于包含的螯合劑的量的1000倍差異，加上螯合劑的吸濕特性。要求保護(hù)的發(fā)明，如上所述，是首先進(jìn)行與過量的鑭系金屬離子的金屬絡(luò)合，然后再準(zhǔn)確確定未絡(luò)合的、過量的鑭系元素的濃度。隨后該測定被用來精確計(jì)算多少額外的螯合劑必須加入以既使過量的鑭系元素絡(luò)合，又達(dá)到所需的0.1%摩爾過量的大環(huán)螯合物。ep2242515b9的參考實(shí)施例3包括實(shí)驗(yàn)室規(guī)模的制備，其通過使dota(10g,25mmol)與化學(xué)計(jì)量量的氧化釓(gd2o3,12.5mmol)在80℃，在水(ph6-7)中反應(yīng)來制備gd-dota。然后將ph調(diào)節(jié)至5，且殘余的游離釓?fù)ㄟ^與chelex樹脂一起攪拌2小時(shí)，接著過濾除去。ep2242515b9教導(dǎo)了gd-dota絡(luò)合物隨后從乙醇水溶液沉淀，得到80%分離產(chǎn)率的白色粉末。ep2242515b9未教導(dǎo)參考實(shí)施例3的方法如何可適合提供液體藥物組合物，其具有過量的在0.002%和0.4%mol/mol范圍內(nèi)的大環(huán)螯合物，特別是在工業(yè)規(guī)模上。wo2014/114664提供一種制備gd-dota葡甲胺(釓特酸葡甲胺)的過程，其首先包括從輪環(huán)藤寧(cyclen)合成dota，接著經(jīng)由重結(jié)晶和陽離子和陰離子交換層析二者的多步驟純化。然后使純化的dota與gd2o3反應(yīng)，得到gd-dota絡(luò)合物，接著加入葡甲胺，得到所需產(chǎn)物。wo2014/161925教導(dǎo)，當(dāng)以工業(yè)規(guī)模制備gd-dota和類似的絡(luò)合物時(shí)，在使用和修正相應(yīng)所用的摩爾量之前，必須測定螯合劑的含水量。wo2014/161925指明，dota的含水量隨著相對(duì)濕度條件而變化。對(duì)制備結(jié)合過量的此類螯合劑的大環(huán)螯合物的鑭系金屬絡(luò)合物的制劑的備選方法仍有需求。所述方法應(yīng)優(yōu)選地適合于工業(yè)規(guī)模的藥物制造，且還適合于提供包含這樣的制劑的mri造影劑。本發(fā)明本發(fā)明提供了一種制備液體藥物制劑的方法，所述制劑包含釓dota絡(luò)合物，以及量在0.002和0.4mol/mol%范圍內(nèi)的未絡(luò)合形式的dota。這樣的制劑在提供mri造影劑中是有用的。然后，本發(fā)明的方法避免了對(duì)現(xiàn)有技術(shù)的測量和調(diào)節(jié)步驟的需要，這對(duì)于簡化時(shí)間和工作量二者有用。本方法替代提供了一種方法，由此首先獲得gd-dota金屬絡(luò)合物，而不存在過量的釓離子。這通過控制反應(yīng)條件來實(shí)現(xiàn)，使得任何過量的釓以不溶性gd2o3存在，其可以通過過濾除去。此外，gd-dota絡(luò)合物保持在水溶液中，因此不需要對(duì)絡(luò)合物的水分含量進(jìn)行修正。由于該方法提供不具有游離釓離子的gd-dota金屬絡(luò)合物的中間體溶液，可容易地計(jì)算加入以得到具有限定過量的游離螯合劑的所需制劑的過量dota的量。本發(fā)明的方法還具有可以在工業(yè)規(guī)模上進(jìn)行的優(yōu)點(diǎn)。發(fā)明詳述在第一方面，本發(fā)明提供制備液體藥物制劑的方法，所述制劑包含金屬絡(luò)合物gd-dota的葡甲胺鹽，以及量在所述gd-dota絡(luò)合物的0.002-0.4mol/mol%范圍內(nèi)的未絡(luò)合形式的dota，所述方法包括以下步驟：(i)以下任一反應(yīng)：(a)1:1摩爾比的dota和葡甲胺的水溶液與過量的gd2o3反應(yīng)，由此所有的dota反應(yīng)以得到gd-dota；或(b)dota的水溶液與不足的gd2o3在ph2.0-6.0下反應(yīng)，其中所有的釓反應(yīng)以得到gd-dota，接著加入葡甲胺以將ph升高至6.5-8.0，然后加入過量的gd2o3；或(c)dota與過量的葡甲胺的水溶液在ph6.5-8.0下與過量的gd2o3反應(yīng)，由此所有dota反應(yīng)以得到gd-dota；由此(a)、(b)或(c)得到含有過量未溶解gd2o3的gd-dota第一溶液；(ii)過濾來自步驟(i)的第一溶液以除去過量的未溶解gd2o3，得到包含gd-dota的不含過量gd2o3的第二溶液；(iii)將0.002-0.4mol/mol%范圍內(nèi)的未絡(luò)合形式的dota加入到來自步驟(ii)的所述第二溶液中，得到所述液體藥物制劑；其中未絡(luò)合形式的所述dota不含配位金屬離子。術(shù)語“dota”是大環(huán)螯合劑1,4,7,10-四氮雜環(huán)十二烷-1,4,7,10-四乙酸的常規(guī)縮寫，且指dota本身或其鹽：dota。dota及其生物醫(yī)學(xué)成像中的金屬絡(luò)合物已經(jīng)由stasiuk和long[chem.comm.，49，22732-2746(2013)]描述。短語“未絡(luò)合形式的dota”指“游離螯合劑”，即無任何配位的金屬離子。因此，未絡(luò)合形式的dota不具有任何配位的鑭系元素或其它金屬離子，因此完全可用于后續(xù)的金屬絡(luò)合。“未絡(luò)合形式的dota”可含有離子形式的金屬離子，例如當(dāng)作為羧酸金屬供體基團(tuán)的羧酸鹽存在時(shí)。術(shù)語“葡甲胺”具有其常規(guī)含義，且指n-甲基葡糖胺。術(shù)語“包含”或“含有”在整個(gè)本申請(qǐng)中具有其常規(guī)意義并意味著試劑或組合物必須具有所列的基本特征或組分，但其它物質(zhì)可能另外存在。術(shù)語“包含”包括“基本由…組成”作為優(yōu)選的子集，“基本由…組成”意指組合物具有所列組分，而不存在其它特征或組分。用于步驟(i)的絡(luò)合的合適溶劑是本領(lǐng)域已知的[醫(yī)學(xué)磁共振成像中造影劑的化學(xué)(thechemistryofcontrastagentsinmedicalmagneticresonanceimaging),第2版,a.merbach,l.helm&e.toth(eds),wiley(2013)]，并且合適地是水性的。釓?fù)ㄟ^大環(huán)螯合物(例如dota)的絡(luò)合是涉及稍微穩(wěn)定的初始絡(luò)合物的多步驟過程，所述初始絡(luò)合物緩慢地成熟，得到最終的熱力學(xué)穩(wěn)定的金屬絡(luò)合物。步驟(i)(a)中過量的釓或步驟(i)(b)中過量的dota通過知道釓dota絡(luò)合物的化學(xué)計(jì)量比為1:1絡(luò)合物來計(jì)算摩爾比獲得。還考慮了使用的釓和dota二者的化學(xué)純度百分比。氧化釓(gd2o3)不溶于水，但在酸性ph下會(huì)水解，在溶液中給出游離的釓離子。在中性ph下，這種水解已報(bào)道為不存在或非常緩慢[hemmer等人，adv.mat.sci.eng.，1-15(2012)doi：10.1155/2012/748098)。在步驟(i)(a)中，將過量的氧化釓加入到1:1摩爾比的dota和葡甲胺的混合物中。dota將消耗氧化釓并形成gd-dota，且通過使用正確的dota/葡甲胺比(100:95至100:100摩爾比dota/葡甲胺)，ph將在絡(luò)合結(jié)束時(shí)接近較高的ph(ph6-8)。由于較高的ph值，不溶性氧化釓的水解非常緩慢，這允許通過過濾隨后除去過量的氧化釓。在步驟(i)(b)中，在酸性ph下將不足化學(xué)計(jì)量量的gd2o3加入到dota中。在完全消耗氧化釓后，加入葡甲胺以將ph升高至6.5-8.0，接著加入過量的gd2o3(約1至5%)。這有助于所有dota的完全絡(luò)合，同時(shí)使過量gd2o3的水解最小化(由于中性ph下的緩慢動(dòng)力學(xué))。在這個(gè)過程中，利用低ph下的高絡(luò)合速率和在升高ph下的低水解率二者。在步驟(i)(c)中，使用過量的葡甲胺，導(dǎo)致更高的ph(約ph6.5-8)，導(dǎo)致氧化釓的水解程度甚至更低。由于dota的酸度，在步驟(iii)中隨后通過加入0.1mol/%的過量dota中和堿性gd-dota-葡甲胺溶液。步驟(ii)的過濾可以通過標(biāo)準(zhǔn)方法實(shí)現(xiàn)。步驟(iii)的加入優(yōu)選地在不進(jìn)行游離釓在第一或第二溶液中的濃度/量的在先過程中測定的情況下實(shí)施。這是因?yàn)檫@樣一個(gè)步驟對(duì)于本方法不是必要的-步驟(ii)的過濾得到具有已知(即有效零)濃度的游離釓的“第二溶液”。因此，基于步驟(i)中起始摩爾量的dota，基于假定在步驟(i)的絡(luò)合反應(yīng)中100%轉(zhuǎn)化率，根據(jù)計(jì)算量的“未絡(luò)合形式的dota”進(jìn)行步驟(iii)的加入。100%轉(zhuǎn)化率與本領(lǐng)域關(guān)于這樣反應(yīng)的有效性已知的一致。dota可作為固體，或作為溶液且優(yōu)選作為溶液加入。當(dāng)制備dota的溶液以便進(jìn)行步驟(i)時(shí)，那么最優(yōu)選的方法是從該溶液除去合適的體積分?jǐn)?shù)，然后加入氧化釓(例如從1000l反應(yīng)體積或等量除去約1l)。然后方便地將該體積分?jǐn)?shù)用于步驟(iii)的加入。這種方法不再需要補(bǔ)充多種溶液，和/或進(jìn)行多次計(jì)算以修正純度或含水量。第一方面的方法適合以實(shí)驗(yàn)室、中試設(shè)備或工業(yè)制造規(guī)模進(jìn)行。該方法特別適合于千克規(guī)模生產(chǎn)，從1kg至800kg，優(yōu)選100kg-650kg規(guī)模。優(yōu)選實(shí)施方案.在第一方面的方法中，步驟(i)的選項(xiàng)(a)、(b)和(c)中過量的gd2o3在0.001至5范圍內(nèi)，更優(yōu)選為0.01至1，最優(yōu)選為0.05至0.5mol/mol%，0.05至5mol/mol%。在該范圍(約0.001至0.01mol%)內(nèi)的過量的釓金屬的最低水平可以通過以下實(shí)現(xiàn)：增量加入釓的等分試樣，直到觀察到存在游離釓離子的陽性試驗(yàn)。這樣的“現(xiàn)場試驗(yàn)”對(duì)存在/不存在問題給出是/否的回答，但未提供關(guān)于游離釓濃度的信息?，F(xiàn)場試驗(yàn)可使用偶氮胂染料進(jìn)行，如本領(lǐng)域已知?；蛘撸^量的釓可通過如本領(lǐng)域已知的二甲酚橙測定或偶氮胂iii測定來確定[分別在barge等人,contrastmed.mol.imaging,1,184-188(2006)和hvattum等人，j.pharm.biomed.anal.，13(7)，927-932(1995)]。二甲酚橙和偶氮胂iii是市售可得的。更高水平(>0.01mol%至最多5mol%)的過量的釓可通過單獨(dú)稱重獲得。在第一方面的方法中，步驟(iii)的未絡(luò)合形式的dota的量相對(duì)于gd-dota絡(luò)合物優(yōu)選在0.025-0.25范圍內(nèi)，更優(yōu)選為0.08至0.12，最優(yōu)選為0.09至0.11mol/mol%。未絡(luò)合形式的dota合適地不含釓金屬離子，且優(yōu)選也不含配位的鈣、鋅和鎂離子。第一方面的方法的步驟(ii)優(yōu)選進(jìn)一步包括在過濾之后，通過以下步驟除去溶液中的任何過量的gd3+：(a)將過濾的溶液與固相結(jié)合的清除劑螯合劑接觸一次或多次，由此溶液中的任何過量的gd3+與所述清除劑螯合劑絡(luò)合；(b)從步驟(a)的過濾的溶液中分離固相。短語“固相結(jié)合的清除劑螯合劑”指共價(jià)綴合到不溶于用于鑭系元素絡(luò)合的溶劑的固相材料的螯合劑。綴合的螯合劑絡(luò)合溶液中的游離金屬離子，因此能夠從溶液除去或“清除”任何這樣的金屬離子。選擇不同于dota的清除劑螯合劑，因此適當(dāng)?shù)鼐哂斜萪ota更低的與釓金屬的形成常數(shù)，且適當(dāng)?shù)剡x擇使得它不能替代來自gd-dota金屬絡(luò)合物的釓。優(yōu)選選擇清除劑螯合劑，使得捕獲溶液中的游離金屬離子的動(dòng)力學(xué)是快速的。因此，優(yōu)選線性(即非大環(huán))清除劑螯合劑。在結(jié)合到固相時(shí)，清除劑螯合劑通過過濾在任選的洗滌情況下容易與其所接觸的溶液分離。合適的固相材料包括合成的聚合物和共聚物。步驟(a)的接觸可以通過兩種主要方法或其組合進(jìn)行。第一個(gè)選項(xiàng)是將固相樹脂與“第一溶液”混合?；蛘撸滔嗫梢宰鳛橹峁?，且“第一溶液”通過柱洗脫。然后通過過濾溶液以除去釓結(jié)合的樹脂，或通過分別從柱洗脫中收集洗脫液來實(shí)現(xiàn)步驟(b)的分離。優(yōu)選地，過濾的樹脂或固相柱可以用合適的溶劑洗滌以確保更完全地回收“第二溶液”。步驟(a)的接觸優(yōu)選在ph4.0至6，更優(yōu)選4.5至5.5下進(jìn)行，約ph5是理想的。清除劑螯合劑優(yōu)選包含亞氨基二乙酸(ida)、edta或dtpa，更優(yōu)選亞氨基二乙酸。優(yōu)選的固相結(jié)合的清除劑螯合劑是chelex?100，其是苯乙烯二乙烯基苯共聚物，具有綴合于其上的螯合劑ida。chelex?100可作為來自bio-radlaboratories和其他供應(yīng)商的鈉鹽或銨鹽市售可得。商業(yè)供應(yīng)商提供關(guān)于用于除去給定量的金屬的合適量樹脂的信息。在中性ph下，chelex作為陽離子交換樹脂起作用，因此對(duì)帶負(fù)電例如gd(dota)-的釓金屬絡(luò)合物沒有親和力。這具有以下優(yōu)點(diǎn)：這種絡(luò)合物與固相的非特異性結(jié)合是最小的，因此對(duì)產(chǎn)率的影響最小。清除劑螯合劑優(yōu)選作為所述清除劑螯合劑的葡甲胺鹽存在。這樣的材料可通過常規(guī)離子交換層析技術(shù)制備，以通過培養(yǎng)或用過量的葡甲胺溶液洗脫來改變反荷離子(例如chelex?-100的鈉或銨鹽)。然后，固相可以任選在使用前干燥?；蛘撸霞装符}清除劑樹脂可通過加入質(zhì)子化形式的樹脂(通過以與實(shí)施例1的程序類似的程序，用強(qiáng)酸洗滌例如市售的chelex獲得)原位生成。然后水合氫離子chelex樹脂在含有葡甲胺的絡(luò)合反應(yīng)中原位形成對(duì)應(yīng)的葡甲胺鹽形式。這樣的葡甲胺樹脂具有特定的優(yōu)點(diǎn)，即當(dāng)制備gd-dota葡甲胺鹽時(shí)，產(chǎn)物的鈉離子/鹽含量減少。因此，在市售的chelex?樹脂中的清除劑螯合物(ida)的反荷離子是鈉，因此對(duì)于捕獲的每一個(gè)釓離子，3個(gè)鈉離子被釋放進(jìn)入反應(yīng)混合物中。為避免鈉污染，可制備chelex?樹脂以便所有的鈉離子交換葡甲胺鹽離子。因此，當(dāng)釓離子被清除劑樹脂捕獲時(shí)，釋出3個(gè)葡甲胺鹽離子。使用后，具有結(jié)合的金屬離子的清除劑螯合物樹脂可任選地再生，以通過用過量的葡甲胺或其它反荷離子處理隨后再使用。對(duì)于chelex，標(biāo)準(zhǔn)再生方法在由商業(yè)供應(yīng)商提供的操作指示手冊中描述。完全除去釓將通過在樹脂的酸性水洗滌后的洗脫液的icp-aes或icp-ms，或通過上文提及的“現(xiàn)場試驗(yàn)”確定。步驟(i)的釓絡(luò)合過程通常本質(zhì)上是多步驟的。絡(luò)合發(fā)生在較寬的ph范圍內(nèi)，但是多步驟過程的每個(gè)步驟都具有最佳的ph范圍。在步驟(i)的選項(xiàng)(a)、(b)(c)中使用包括ph的反應(yīng)條件的控制。低ph(ph約2)是適于溶解所有g(shù)d2o3以在溶液中得到游離的釓離子。然而，在該低ph下，dota的羧酸根基團(tuán)不能完全絡(luò)合所有的釓離子，因?yàn)轸人岣鶊F(tuán)被部分質(zhì)子化。在稍高的ph(約4至5)下，羧酸根陰離子的形成是有利的，這繼而有利于金屬絡(luò)合。形成的初始gd-dota絡(luò)合物實(shí)際上是雙質(zhì)子化的，然后緩慢成熟以得到高熱力學(xué)(和動(dòng)力學(xué))穩(wěn)定性的最終gd-dota絡(luò)合物[moreau等人，chem.eur.j.，10(20)，5218-32(2004)]。成熟過程通過較高的ph和加熱(通常在約ph5下加熱幾小時(shí))而有利。步驟(iii)的加入優(yōu)選在加入過量的dota之前首先中和至中性ph(約ph7-7.4)進(jìn)行。該中和優(yōu)選使用葡甲胺進(jìn)行。dota可從一系列的供應(yīng)商市售可得。dota也可通過desreux[inorg.chem.,19,1319-1324(1980)]或toth等人[inorg.chem.，33,4070-4076(1994)]的方法合成。大環(huán)螯合物合成的進(jìn)一步細(xì)節(jié)由kotel等人給出[第3章第83-155頁，醫(yī)學(xué)磁共振成像中造影劑的化學(xué)(thechemistryofcontrastagentsinmedicalmagneticresonanceimaging),第2版,a.merbach,l.helm&e.toth(eds),wiley(2013)]。葡甲胺(n-甲基葡萄糖胺)可從一系列的供應(yīng)商市售可得。優(yōu)選地，使用藥用級(jí)材料。在第二方面，本發(fā)明提供一種制備mri造影劑的方法，其包括：(a)進(jìn)行第一方面的方法，得到如在其中限定的液體藥物制劑；(b)任選地用生物相容的載體稀釋來自步驟(a)的液體藥物制劑；(c)將來自步驟(b)的制劑分配到藥學(xué)上可接受的容器或注射器中，得到分配的容器或注射器；(d)在無菌制造條件下進(jìn)行步驟(a)-(c)，或進(jìn)行來自步驟(c)的分配的容器或注射器的終端滅菌，得到呈適合于哺乳動(dòng)物給予形式的在所述藥學(xué)上可接受的容器或注射器中的mri造影劑。第二方面的液體藥物制劑和步驟(a)的方法的優(yōu)選實(shí)施方案如在第一方面(上文)中所述。術(shù)語“造影劑”具有其在體內(nèi)醫(yī)學(xué)成像領(lǐng)域的常規(guī)意義，并指適合于哺乳動(dòng)物給予形式的試劑，其有助于在關(guān)注的區(qū)域或器官提供比可通過單獨(dú)使受試者成像獲得的圖像更清楚的圖像?！癿ri造影劑”通常為一種順磁性或鐵磁性物質(zhì)，適合于哺乳動(dòng)物給予，其縮短在受試者體內(nèi)成像所關(guān)注的區(qū)域中相關(guān)原子核的t1和/或t2弛豫時(shí)間(例如對(duì)于1hnmr的1h)。術(shù)語“受試者”意指哺乳動(dòng)物體內(nèi)，優(yōu)選完整的哺乳動(dòng)物體內(nèi)，和更優(yōu)選活的人類受試者。短語“適合于哺乳動(dòng)物給予的形式”意指這樣的組合物，其是無菌的、無熱原的、缺乏產(chǎn)生毒性或不利作用的化合物，以及在可生物相容的ph(約ph4.0-10.5)下配制。這樣的組合物缺乏可能導(dǎo)致體內(nèi)栓子的風(fēng)險(xiǎn)的顆粒，并被配制以便在與生物流體(例如血)接觸時(shí)不會(huì)發(fā)生沉淀。這樣的組合物也含有僅生物相容的賦形劑，且優(yōu)選是等滲的。如同其它體內(nèi)成像劑，造影劑設(shè)計(jì)成對(duì)要成像的哺乳動(dòng)物受試者具有最小限度的藥理學(xué)作用。優(yōu)選地，造影劑可以最小限度的侵入方式給予哺乳動(dòng)物體內(nèi)，即當(dāng)在專業(yè)的醫(yī)療專門知識(shí)下進(jìn)行時(shí)，對(duì)哺乳動(dòng)物受試者沒有實(shí)質(zhì)上的健康風(fēng)險(xiǎn)。這樣的最小限度的侵入給予優(yōu)選地經(jīng)靜脈內(nèi)給予到所述受試者的外周靜脈中，而不需要局部或全身麻醉。術(shù)語“生物相容的載體”意指一種流體，特別是液體，以使組合物是生理學(xué)上可耐受的，即可給予哺乳動(dòng)物體內(nèi)，而無毒性或過度的不適。生物相容的載體適合為一種可注射的載體液體例如供注射用的無菌、無熱原的水；水溶液例如鹽水(其可有利地進(jìn)行平衡，以使供注射用的最終產(chǎn)品是等滲的)；包含生物相容的緩沖劑(例如磷酸鹽緩沖劑)的水性緩沖溶液；一種或多種滲透壓調(diào)節(jié)物質(zhì)(例如血漿陽離子與生物相容的反荷離子的鹽)、糖(例如葡萄糖或蔗糖)、糖醇(例如山梨糖醇或甘露醇)、二醇(例如甘油)，或其它非離子多元醇材料(例如聚乙二醇、丙二醇等)的水溶液。優(yōu)選地，所述生物相容的載體是供注射用的無熱原的水(wfi)、等滲鹽水或磷酸鹽緩沖劑。短語“無菌制造”指在無菌制造，即無熱源條件下進(jìn)行相關(guān)過程步驟，例如在潔凈室環(huán)境中。術(shù)語“滅菌”或“滅菌法”具有其常規(guī)意義，且指破壞微生物的過程，以獲得一種無菌、無熱源組合物。短語“終端滅菌”具有其常規(guī)意義，并指進(jìn)行在gmp(良好制造規(guī)范)之前的步驟，但在整個(gè)過程中盡可能晚地執(zhí)行滅菌步驟。組分和試劑可通過本領(lǐng)域已知的方法滅菌，包括：無菌過濾、使用例如γ-輻射的終端滅菌、高壓滅菌法、干熱或化學(xué)處理(例如用環(huán)氧乙烷)或其組合。術(shù)語“高壓滅菌法”具有其常規(guī)意義，并指使用過熱蒸汽滅菌的一種特定滅菌方法。高壓滅菌法和其它滅菌方法描述于在醫(yī)學(xué)和藥物產(chǎn)品中實(shí)現(xiàn)滅菌(achievingsterilityinmedicalandpharmaceuticalproducts),n.halls(crcpress,1994)。在第二方面的方法中，終端滅菌是優(yōu)選的。一種優(yōu)選的終端滅菌方法是高壓滅菌法。術(shù)語“分配的容器或注射器”指裝料的容器，即已將等分的組合物分配至其中的容器，即分配的小瓶。用于第二方面的方法的合適容器、小瓶和蓋以及注射器是藥用級(jí)的并廣泛市售可得。通過下面詳細(xì)描述的非限制性實(shí)施例說明本發(fā)明。實(shí)施例1提供葡甲胺清除劑螯合劑樹脂的制備。實(shí)施例2提供能夠分析這些組分的混合物中的gd-dota、游離dota和葡甲胺的hplc-cad方法。實(shí)施例3提供gd-dota絡(luò)合物的制備，根據(jù)本發(fā)明的方法除去過量的釓?？s寫dota：1,4,7,10-四氮雜環(huán)十二烷-1,4,7,10-四乙酸；dtpa：二亞乙基三胺-五乙酸；edta：乙二胺-四乙酸；gmp：良好制造規(guī)范；hplc：高效液相色譜；hplc-cad：hplc電霧式檢測器；icp-aes：電感耦合等離子體原子發(fā)射光譜；icp-ms：電感耦合等離子體質(zhì)譜；mecn：乙腈；min：分鐘；mri：磁共振成像；wfi：注射用水。實(shí)施例1：制備葡甲胺化chelex?樹脂(“meg-chelex”).將在燒結(jié)玻璃濾器上的chelex-100樹脂(sigma-aldrich；100g)用1mhcl(1l)按4份處理4h。然后用水洗滌樹脂直至洗脫液為ph6.5，且用樹脂平衡葡甲胺(10g)的水溶液(400ml)經(jīng)1h的時(shí)間段。再次用水洗滌樹脂至ph8，在真空下過濾并干燥1分鐘，得到潮濕的樹脂，其以該形式(“meg-chelex”)使用。實(shí)施例2：hplc-cad方法：gddota-葡甲胺溶液中的dota測定.檢測器：esacorona，電霧式檢測器；柱：sequantzic-philic(5μm,150*4.6mm)。樣品制備：向20μl(約0.5m)反應(yīng)混合物中加入zn(oac)2(10μl,10mg/ml)，然后加入水(270μl)，接著加入mecn(700μl)*。注入體積：20μl；移動(dòng)相：100mm乙酸銨(a)、乙腈(b)。在樣品注入前，用初始組合物(15:85a:b)，以1ml/min的流速調(diào)節(jié)柱至少5分鐘。梯度：時(shí)間(min)流速(ml/min)%a%b曲線1.初始1.0015.085.02.50.001.0033.066.06其中曲線6指線性梯度。觀察到以下保留時(shí)間：保留時(shí)間(min)葡甲胺21.3gddota23.2zndota*28.1.*dota作為zndota絡(luò)合物間接分析。實(shí)施例3：gd-dota-葡甲胺溶液的制備，去除釓離子.將葡甲胺(0.749g，4.00mmol)、dota(1.615g，4.00mmol)、氧化釓(0.749g2.04mmol)和水(8.0g)在燒瓶中合并且在60℃下攪拌過夜。這得到溶液明顯混濁的混合物。將混合物用注射器過濾器(pallacrodisc25mm，0.45μpvdf膜)過濾，得到ph~9的澄清溶液。使用偶氮胂指示劑檢測沒有游離釓[hvattum等人，j.pharm.biomed.anal.，13(7)，927-932(1995)]。檢測限為<9.4μg/ml或<0.06mm。偶氮胂iii染料市售可得。當(dāng)前第1頁12