本發(fā)明主要涉及制藥
技術(shù)領(lǐng)域：
，具體涉及一種(s)-4-羥基-2氧代-1-吡咯烷乙酰胺無(wú)菌粉末注射劑及其制備方法。
背景技術(shù)：
：左旋奧拉西坦化學(xué)名稱為：s-(-)-4-羥基-2-氧代吡咯烷-n-乙酰胺，為白色微晶狀粉末，熔點(diǎn)135～136℃，旋光度-36°(c＝1.00inwater)，左旋奧拉西坦的溶解性明顯優(yōu)于消旋體?；瘜W(xué)結(jié)構(gòu)式如下所示：該藥于1987年在意大利上市，上市的劑型為片劑，800mg；膠囊，800mg；注射液，1g/5ml。目前國(guó)內(nèi)只有奧拉西坦膠囊和注射液上市，且所用主要活性成分均為外消旋體。葉雷等在公開(kāi)號(hào)為cn103735545a專利中提到左旋奧拉西坦對(duì)酒精中毒所致昏迷的促醒作用明顯，而右旋奧拉西坦基本沒(méi)有作用，左旋奧拉西坦的上述促醒效果為消旋奧拉西坦的2倍；左旋奧拉西坦對(duì)外傷、麻醉所致昏迷的促醒作用均顯著。張峰等在公開(kāi)號(hào)為cn103599101a的專利中披露左旋奧拉西坦對(duì)液壓及自由落體所致創(chuàng)傷性腦損傷大鼠學(xué)習(xí)記憶認(rèn)知功能障礙均有明顯的改善作用，其藥效遠(yuǎn)高于右旋奧拉西坦。且200mg/kg左旋奧拉西坦與400mg/kg奧拉西坦的作用相當(dāng)。藥代動(dòng)力學(xué)研究結(jié)果顯示：左旋奧拉西坦和右旋奧拉西坦在比格犬體內(nèi)無(wú)明顯手性轉(zhuǎn)化。比格犬單次靜脈注射給予左旋和2倍劑量的消旋奧拉西坦后血漿中左旋奧拉西坦的主要藥動(dòng)學(xué)參數(shù)均無(wú)明顯差異。安全藥理、急毒、長(zhǎng)毒等試驗(yàn)結(jié)果表明，在同等劑量水平下，左旋奧拉西坦與奧拉西坦對(duì)受試動(dòng)物或細(xì)胞的毒性無(wú)明顯差異。上述臨床前的研究結(jié)果表明，左旋奧拉西坦是奧拉西坦體內(nèi)發(fā)揮藥效的主要活性成分，單獨(dú)使用本品可降低臨床使用劑量，降低潛在的毒副反應(yīng)。現(xiàn)有注射用(s)-4-羥基-2氧代-1-吡咯烷乙酰胺無(wú)菌粉末其主要存在制備過(guò)程雜質(zhì)增加明顯、產(chǎn)品無(wú)固定形狀、不易形成骨架、易出現(xiàn)干縮和鼓泡現(xiàn)象，成品穩(wěn)定性差，貨架期短，均一性不好，上下層性狀不一致，并且產(chǎn)品注射過(guò)程疼痛明顯，患者順應(yīng)性差等問(wèn)題。技術(shù)實(shí)現(xiàn)要素：本發(fā)明的目的在于提供一種具有固定形態(tài)、穩(wěn)定性好、產(chǎn)品均一性好的(s)-4-羥基-2氧代-1-吡咯烷乙酰胺無(wú)菌粉末注射劑。本發(fā)明的另一目的在于提供上述(s)-4-羥基-2氧代-1-吡咯烷乙酰胺無(wú)菌粉末注射劑的制備方法。本發(fā)明的目的是通過(guò)如下技術(shù)措施實(shí)現(xiàn)的：一種(s)-4-羥基-2氧代-1-吡咯烷乙酰胺無(wú)菌粉末注射劑，其特征在于，它是以(s)-4-羥基-2氧代-1-吡咯烷乙酰胺為原料，再加入一定量的附加劑制得；其中所述附加劑為蔗糖、海藻糖、甘露醇、乳糖、葡萄糖、麥芽糖、葡聚糖、白蛋白、聚乙二醇、甘油、l-絲氨酸、維生素c、硫代硫酸鈉，甲硫氨酸、谷氨酸鈉、丙氨酸、甘氨酸、肌氨酸、磷酸鹽、醋酸鹽、檸檬酸鹽、苯甲醇中的一種或多種。發(fā)明人在研究過(guò)程中發(fā)現(xiàn)，選擇特定的附加劑種類，配合附加劑特定用量配比、再配合特定的冷凍干燥技術(shù)，可使得上述(s)-4-羥基-2氧代-1-吡咯烷乙酰胺無(wú)菌粉末注射劑在制備過(guò)程雜質(zhì)增加較小、其具有固定形狀、易形成骨架、產(chǎn)品均一性好、上下層性狀一致，并且產(chǎn)品注射過(guò)程疼痛感有所減輕，；上述(s)-4-羥基-2氧代-1-吡咯烷乙酰胺無(wú)菌粉末注射劑，其特征在于，它是以(s)-4-羥基-2氧代-1-吡咯烷乙酰胺、l-絲氨酸、甘露醇、聚乙二醇2000、甲硫氨酸、苯甲醇為原輔料，通過(guò)濃配、稀配、冷凍干燥以及軋蓋步驟制得；其中原輔料用量分別為重量百分比的(s)-4-羥基-2氧代-1-吡咯烷乙酰胺58％～65％、l-絲氨酸15％～23％、甘露醇10％～16％、聚乙二醇20002％～8％、甲硫氨酸3％～8％、苯甲醇1％～2％；所述冷凍干燥步驟為快速將導(dǎo)熱油溫度冷凍至-40℃，保持恒溫60分鐘，以5℃/小時(shí)升溫至-10℃，保持恒溫80分鐘，在快速冷卻至-40℃，恒溫冷凍120分鐘，然后抽真空干燥，以10℃/小時(shí)升溫至，-10℃恒溫150分鐘；以4℃/小時(shí)升溫至0℃，0℃恒溫300分鐘；以5℃/小時(shí)升溫至10℃，10℃恒溫240分鐘，以10℃/小時(shí)升溫至30℃，30℃恒溫60分鐘，同時(shí)前箱真空降達(dá)到10pa/10分時(shí)，凍干結(jié)束。進(jìn)一步的上述(s)-4-羥基-2氧代-1-吡咯烷乙酰胺無(wú)菌粉末注射劑，其特征在于，它是由下列重量百分比的原輔料制得：(s)-4-羥基-2氧代-1-吡咯烷乙酰胺60％～63％、l-絲氨酸17％～20％、甘露醇11％～13％、聚乙二醇20003％～5％、甲硫氨酸4％～7％、苯甲醇1％～2％；將處方量的原輔料置于容器中，加入(s)-4-羥基-2氧代-1-吡咯烷乙酰胺5倍重量份的滅菌注射用水?dāng)嚢?，溶解后，加入質(zhì)量分?jǐn)?shù)0.5％的針用活性炭，攪拌30min，隨后用0.45微米微孔濾膜濾過(guò)，收集濾液，備用；向?yàn)V液中加入滅菌注射用水至濾液體積的1000倍，用鹽酸或氫氧化鈉調(diào)節(jié)ph至7.0，隨后用0.22微米的微孔濾膜除菌過(guò)濾，取濾液合格后灌裝分裝于無(wú)菌玻璃瓶中，備用；快速將導(dǎo)熱油溫度冷凍至-40℃，保持恒溫60分鐘，以5℃/小時(shí)升溫至-10℃，保持恒溫80分鐘，在快速冷卻至-40℃，恒溫冷凍120分鐘，然后抽真空干燥，以10℃/小時(shí)升溫至，-10℃恒溫150分鐘；以4℃/小時(shí)升溫至0℃，0℃恒溫300分鐘；以5℃/小時(shí)升溫至10℃，10℃恒溫240分鐘，以10℃/小時(shí)升溫至30℃，30℃恒溫60分鐘，同時(shí)前箱真空降達(dá)到10pa/10分時(shí)，凍干結(jié)束。上述所需原輔料，均為本領(lǐng)域技術(shù)人員公知的，市場(chǎng)上均可購(gòu)買到。一種(s)-4-羥基-2氧代-1-吡咯烷乙酰胺凍干粉針的制備方法，其特征在于，它是按如下步驟制得的：1.濃配：將處方量的原輔料置于容器中，加入(s)-4-羥基-2氧代-1-吡咯烷乙酰胺5倍重量份的滅菌注射用水?dāng)嚢?，溶解后，加入質(zhì)量分?jǐn)?shù)0.5％的針用活性炭，攪拌30min，隨后用0.45微米微孔濾膜濾過(guò)，收集濾液，備用；2.稀配：向?yàn)V液中加入滅菌注射用水至濾液體積的1000倍，用鹽酸或氫氧化鈉調(diào)節(jié)ph至7.0，隨后用0.22微米的微孔濾膜除菌過(guò)濾，取濾液合格后灌裝分裝于無(wú)菌玻璃瓶中，備用；3.冷凍干燥：快速將導(dǎo)熱油溫度冷凍至-40℃，保持恒溫60分鐘，以5℃/小時(shí)升溫至-10℃，保持恒溫80分鐘，在快速冷卻至-40℃，恒溫冷凍120分鐘，然后抽真空干燥，以10℃/小時(shí)升溫至，-10℃恒溫150分鐘；以4℃/小時(shí)升溫至0℃，0℃恒溫300分鐘；以5℃/小時(shí)升溫至10℃，10℃恒溫240分鐘，以10℃/小時(shí)升溫至30℃，30℃恒溫60分鐘，同時(shí)前箱真空降達(dá)到10pa/10分時(shí)，凍干結(jié)束；4.軋蓋：鋁塑組合蓋需經(jīng)清洗后滅菌、干燥，然后進(jìn)行軋蓋，即得。本發(fā)明具有如下的有益效果：本發(fā)明(s)-4-羥基-2氧代-1-吡咯烷乙酰胺無(wú)菌粉末注射劑在制備過(guò)程中雜質(zhì)增加較少，其整個(gè)制備過(guò)程雜質(zhì)增加量?jī)H為0.04％，產(chǎn)品具有固定形狀、在凍干制備過(guò)程中無(wú)干縮和鼓泡的現(xiàn)象，成品均一性好，上下層性狀一致，穩(wěn)定性好，雜質(zhì)少，貨架期內(nèi)總雜質(zhì)低于0.28％，貨架期長(zhǎng)達(dá)24月，患者注射過(guò)程中疼痛感較輕，患者順應(yīng)性好。具體實(shí)施方式下面通過(guò)實(shí)施例對(duì)本發(fā)明進(jìn)行具體的描述，有必要在此指出的是以下實(shí)施例只用于對(duì)本發(fā)明進(jìn)行進(jìn)一步說(shuō)明，不能理解為對(duì)本發(fā)明保護(hù)范圍的限制，在不背離本發(fā)明精神和實(shí)質(zhì)的情況下，對(duì)本發(fā)明方法、步驟或條件所作的修改或替換，均屬于本發(fā)明的范圍。實(shí)施例1一種(s)-4-羥基-2氧代-1-吡咯烷乙酰胺無(wú)菌粉末注射劑，按以下步驟制得：成分用量(重量百分比％)(s)-4-羥基-2氧代-1-吡咯烷乙酰胺60％l-絲氨酸18％甘露醇11％聚乙二醇20005％甲硫氨酸5％苯甲醇1％制成1000瓶制劑工藝：1.濃配：將處方量的原輔料置于容器中，加入(s)-4-羥基-2氧代-1-吡咯烷乙酰胺5倍重量份的滅菌注射用水?dāng)嚢?，溶解后，加入質(zhì)量分?jǐn)?shù)0.5％的針用活性炭，攪拌30min，隨后用0.45微米微孔濾膜濾過(guò)，收集濾液，備用；2.稀配：向?yàn)V液中加入滅菌注射用水至濾液體積的1000倍，用鹽酸或氫氧化鈉調(diào)節(jié)ph至7.0，隨后用0.22微米的微孔濾膜除菌過(guò)濾，取濾液合格后灌裝分裝于無(wú)菌玻璃瓶中，備用；3.冷凍干燥：快速將導(dǎo)熱油溫度冷凍至-40℃，保持恒溫60分鐘，以5℃/小時(shí)升溫至-10℃，保持恒溫80分鐘，在快速冷卻至-40℃，恒溫冷凍120分鐘，然后抽真空干燥，以10℃/小時(shí)升溫至，-10℃恒溫150分鐘；以4℃/小時(shí)升溫至0℃，0℃恒溫300分鐘；以5℃/小時(shí)升溫至10℃，10℃恒溫240分鐘，以10℃/小時(shí)升溫至30℃，30℃恒溫60分鐘，同時(shí)前箱真空降達(dá)到10pa/10分時(shí)，凍干結(jié)束；4.軋蓋：鋁塑組合蓋需經(jīng)清洗后滅菌、干燥，然后進(jìn)行軋蓋，即得。為了更好的理解本發(fā)明，以下通過(guò)本發(fā)明穩(wěn)定性試驗(yàn)來(lái)進(jìn)一步闡述發(fā)明藥物的有益效果，而非對(duì)本發(fā)明的限制。實(shí)驗(yàn)一：本發(fā)明一種(s)-4-羥基-2氧代-1-吡咯烷乙酰胺無(wú)菌粉末注射劑穩(wěn)定性實(shí)驗(yàn)實(shí)驗(yàn)材料：(s)-4-羥基-2氧代-1-吡咯烷乙酰胺無(wú)菌粉末注射劑樣品：為實(shí)施例1制得加速實(shí)驗(yàn)方法：將實(shí)施例1制得的(s)-4-羥基-2氧代-1-吡咯烷乙酰胺無(wú)菌粉末注射劑按上市包裝，置加速實(shí)驗(yàn)箱中，一定時(shí)間取樣，對(duì)考察項(xiàng)目進(jìn)行檢驗(yàn)。加速實(shí)驗(yàn)溫度：40±2℃濕度：rh75％±5％考察時(shí)間：0、1、2、3、6月考察指標(biāo)：性狀、可見(jiàn)異物、ph、有關(guān)物質(zhì)、含量、無(wú)菌檢查加速試驗(yàn)穩(wěn)定性記錄：加速實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明：加速6月樣品與0月樣品各項(xiàng)檢測(cè)指標(biāo)質(zhì)量相當(dāng)，表明本品加速實(shí)驗(yàn)6月，質(zhì)量保持穩(wěn)定，本品穩(wěn)定性較好。長(zhǎng)期實(shí)驗(yàn)方法：將實(shí)施例1制得的(s)-4-羥基-2氧代-1-吡咯烷乙酰胺無(wú)菌粉末注射劑按上市包裝，置長(zhǎng)期留樣箱中，一定時(shí)間取樣，對(duì)考察項(xiàng)目進(jìn)行檢驗(yàn)。加速實(shí)驗(yàn)溫度：25±2℃濕度：rh60％±10％考察時(shí)間：0、3、6、9、12、18、24月考察指標(biāo)：性狀、可見(jiàn)異物、ph、有關(guān)物質(zhì)、含量、無(wú)菌檢查長(zhǎng)期試驗(yàn)穩(wěn)定性記錄：長(zhǎng)期試驗(yàn)表明：本品長(zhǎng)期試驗(yàn)24個(gè)月性狀、可見(jiàn)異物、ph值、有關(guān)物質(zhì)、含量以及無(wú)菌檢查各項(xiàng)指標(biāo)均無(wú)顯著變化，均符合生產(chǎn)用質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)草案的各項(xiàng)相關(guān)規(guī)定。本品長(zhǎng)期試驗(yàn)24個(gè)月質(zhì)量穩(wěn)定，故本品貨架期最少24個(gè)月，長(zhǎng)期試驗(yàn)仍在繼續(xù)考察過(guò)程中。實(shí)驗(yàn)二：本發(fā)明一種(s)-4-羥基-2氧代-1-吡咯烷乙酰胺無(wú)菌粉末注射劑制備過(guò)程對(duì)雜質(zhì)增加的影響1.實(shí)驗(yàn)材料：(s)-4-羥基-2氧代-1-吡咯烷乙酰胺無(wú)菌粉末注射劑樣品：按實(shí)施例1制備。(s)-4-羥基-2氧代-1-吡咯烷乙酰胺無(wú)菌粉末注射劑對(duì)照樣品：為缺少甲硫氨酸的樣品，其制備工藝同實(shí)施例1。2.實(shí)驗(yàn)方法：實(shí)施例1制備過(guò)程中，分別在制備前后取樣，檢測(cè)其有關(guān)物質(zhì)，考察制備過(guò)程對(duì)有關(guān)物質(zhì)的影響。同時(shí)，取缺少甲硫氨酸的處方作為對(duì)照處方，按實(shí)施例1的制備方法制備，同樣在制備前后取樣檢測(cè)其有關(guān)物質(zhì)，考察制備過(guò)程對(duì)有關(guān)物質(zhì)的影響。3.實(shí)驗(yàn)結(jié)果見(jiàn)下表：供試品制各前有關(guān)物質(zhì)％制備后有關(guān)物質(zhì)％制備過(guò)程有關(guān)物質(zhì)增加量％實(shí)施例10.15％0.19％0.04％對(duì)照樣品10.15％0.35％0.20％4.實(shí)驗(yàn)結(jié)論：實(shí)施例1的處方，制備過(guò)程有關(guān)物質(zhì)增加僅為0.03％，明顯優(yōu)于對(duì)照樣品。實(shí)驗(yàn)三：小鼠扭體法觀察注射過(guò)程中的疼痛感試驗(yàn)試驗(yàn)樣品：按實(shí)施例1制得的一種(s)-4-羥基-2氧代-1-吡咯烷乙酰胺無(wú)菌粉末注射劑作為供試品，未加苯甲醇的處方按實(shí)施例1制得的(s)-4-羥基-2氧代-1-吡咯烷乙酰胺無(wú)菌粉末注射劑作為對(duì)照樣品；目的：比較兩種(s)-4-羥基-2氧代-1-吡咯烷乙酰胺無(wú)菌粉末注射劑注射過(guò)程中的疼痛程度方法：取實(shí)驗(yàn)用小白鼠，皮下注射(s)-4-羥基-2氧代-1-吡咯烷乙酰胺無(wú)菌粉末(生理鹽水溶解稀釋至10ml)，觀察小白鼠是否會(huì)發(fā)生扭體反應(yīng)，根據(jù)小鼠發(fā)生扭體反應(yīng)的幾率來(lái)判斷注射過(guò)程中疼痛感的強(qiáng)弱，供試品與對(duì)照樣品各重復(fù)30次試驗(yàn)；試驗(yàn)結(jié)果：試驗(yàn)結(jié)果見(jiàn)下表：產(chǎn)品名稱實(shí)驗(yàn)樣本(小鼠)發(fā)生扭體反應(yīng)個(gè)體數(shù)扭體反應(yīng)發(fā)生率％供試品30只2只6.7％對(duì)照樣品30只23只76.7％結(jié)論：由上表可知，本發(fā)明一種(s)-4-羥基-2氧代-1-吡咯烷乙酰胺無(wú)菌粉末注射劑注射過(guò)程中疼痛感明顯弱于對(duì)照樣品。實(shí)施例2一種(s)-4-羥基-2氧代-1-吡咯烷乙酰胺無(wú)菌粉末注射劑，按以下步驟制得：成分用量(重量百分比％)(s)-4-羥基-2氧代-1-吡咯烷乙酰胺63％l-絲氨酸17％甘露醇11％聚乙二醇20003％甲硫氨酸5％苯甲醇1％制成1000瓶制劑工藝：照實(shí)施例1的制備工藝制得。按實(shí)施例1的試驗(yàn)方法，實(shí)施例2樣品穩(wěn)定性試驗(yàn)結(jié)果表明加速6月樣品質(zhì)量穩(wěn)定，長(zhǎng)期24個(gè)月質(zhì)量穩(wěn)定，故本品有效期最少24個(gè)月。實(shí)施例2制備過(guò)程對(duì)雜質(zhì)增加的影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明本品在制備過(guò)程中產(chǎn)品雜質(zhì)增加量較小，滿足產(chǎn)品要求。小鼠扭體法觀察注射過(guò)程中的疼痛感試驗(yàn)結(jié)果表明，實(shí)施例2樣品注射過(guò)程中疼痛感明顯弱于對(duì)照樣品。實(shí)施例3一種(s)-4-羥基-2氧代-1-吡咯烷乙酰胺無(wú)菌粉末注射劑，按以下步驟制得：成分用量(重量百分比％)(s)-4-羥基-2氧代-1-吡咯烷乙酰胺61％l-絲氨酸19％甘露醇12％聚乙二醇20003％甲硫氨酸3％苯甲醇2％制成1000瓶制劑工藝：照實(shí)施例1的制備工藝制得。按實(shí)施例1的試驗(yàn)方法，實(shí)施例3樣品穩(wěn)定性試驗(yàn)結(jié)果表明加速6月樣品質(zhì)量穩(wěn)定，長(zhǎng)期24個(gè)月質(zhì)量穩(wěn)定，故本品有效期最少24個(gè)月。實(shí)施例3制備過(guò)程對(duì)雜質(zhì)增加的影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明本品在制備過(guò)程中產(chǎn)品雜質(zhì)增加量較小，滿足產(chǎn)品要求。小鼠扭體法觀察注射過(guò)程中的疼痛感試驗(yàn)結(jié)果表明，實(shí)施例3樣品注射過(guò)程中疼痛感明顯弱于對(duì)照樣品。實(shí)施例4-6：一種(s)-4-羥基-2氧代-1-吡咯烷乙酰胺無(wú)菌粉末注射劑，按以下重量的原輔料制備而得，制備方法同實(shí)施例1：制劑工藝：照實(shí)施例1的制備工藝制得。按實(shí)施例1的試驗(yàn)方法，實(shí)施例4、5、6樣品穩(wěn)定性試驗(yàn)結(jié)果表明加速6月樣品質(zhì)量穩(wěn)定，長(zhǎng)期24個(gè)月質(zhì)量穩(wěn)定，故本品有效期最少24個(gè)月。實(shí)施例4、5、6制備過(guò)程對(duì)雜質(zhì)增加的影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明本品在制備過(guò)程中產(chǎn)品雜質(zhì)增加量均較小，滿足產(chǎn)品要求。小鼠扭體法觀察注射過(guò)程中的疼痛感試驗(yàn)結(jié)果表明，實(shí)施例4、5、6樣品注射過(guò)程中疼痛感明顯弱于對(duì)照樣品。當(dāng)前第1頁(yè)12