本發(fā)明涉及治療乳腺疾病藥物
技術(shù)領(lǐng)域：
，具體而言，涉及一種治療乳腺癌的藥物組合物、藥物傳遞系統(tǒng)及其制備方法。
背景技術(shù)：
：乳腺癌是人類高發(fā)的重要惡性腫瘤疾病，且發(fā)病率呈逐年上升的趨勢(shì)。2014年美國國立癌癥研究所(NationalCancerInstitute)的最新癌癥統(tǒng)計(jì)數(shù)據(jù)顯示，乳腺癌居于美國女性惡性腫瘤發(fā)病率第一位，死亡率占16％。乳腺癌在我國，特別是京、津、滬等大城市乳腺癌發(fā)病率已上升為女性惡性腫瘤的第一位，成為婦女健康的最大威脅。所以探尋新型高效的乳腺癌治療方法是國內(nèi)外研究的熱點(diǎn)。紫杉醇(Paclitaxel)是從紫杉樹皮中提取出的一種四環(huán)二萜類化合物，是紅豆杉中的主要抗癌活性成分，能夠從整體、器官、細(xì)胞和分子多水平治療乳腺癌，已于1992年被FDA批準(zhǔn)用于治療人卵巢癌和轉(zhuǎn)移性乳腺癌。但是單純使用紫杉醇治療乳腺癌，藥效并不顯著，且具有較強(qiáng)的副作用。有鑒于此，特提出本發(fā)明。技術(shù)實(shí)現(xiàn)要素：本發(fā)明的第一目的在于提供一種治療乳腺癌的藥物組合物，以解決現(xiàn)有技術(shù)單純采用紫杉醇治療乳腺癌效果不明顯的問題，所述的治療乳腺癌的藥物采用紫杉醇和姜黃素以一定的比例協(xié)同使用，具有能夠高效活化caspase-8、促進(jìn)線粒體釋放細(xì)胞色素C、Smac/Diablo和AIF進(jìn)入腫瘤細(xì)胞胞質(zhì)、促進(jìn)腫瘤細(xì)胞凋亡等優(yōu)點(diǎn)。本發(fā)明的第二目的在于提供一種含有所述的治療乳腺癌的藥物傳遞系統(tǒng)，該藥物傳遞系統(tǒng)在有效成分外包覆介孔材料載體和脂質(zhì)層，具有靶向給藥的優(yōu)點(diǎn)；具體的，以介孔材料為內(nèi)殼，可以增加難溶藥物的溶解度、提高載藥量；以磷脂和膽固醇材料構(gòu)建具有功能性的脂質(zhì)層，可防止藥物到達(dá)靶部位前泄露，從而增加藥物穩(wěn)定性、降低毒副作用，在入胞后發(fā)生破膜作用，實(shí)現(xiàn)藥物的迅速釋放；在脂質(zhì)層外修飾聚乙二醇，構(gòu)成長(zhǎng)循環(huán)遞藥系統(tǒng)，可以提高藥物活性。本發(fā)明的第三目的在于提供一種含有所述的治療乳腺癌的藥物傳遞系統(tǒng)的制備方法，該方法方便、簡(jiǎn)單、易于操作，適合批量生產(chǎn)和廣泛應(yīng)用。為了實(shí)現(xiàn)本發(fā)明的上述目的，特采用以下技術(shù)方案：一種治療乳腺癌的藥物組合物，包括紫杉醇和姜黃素，且所述紫杉醇與所述姜黃素的摩爾比為1：(5-40)；優(yōu)選的，所述紫杉醇與所述姜黃素的摩爾比為1:(15-25)。紫杉醇(Paclitaxel)是從紫杉樹皮中提取出的一種四環(huán)二萜類化合物，是紅豆杉中的主要抗癌活性成分，能夠從整體、器官、細(xì)胞和分子多水平治療乳腺癌，已于1992年被FDA批準(zhǔn)用于治療人卵巢癌和轉(zhuǎn)移性乳腺癌。姜黃素(Curcumin)具有抑制多種腫瘤的功效，尤其對(duì)于治療乳腺癌發(fā)揮著重要作用。姜黃素能夠通過影響NF-κB、Akt/mTOR、STATs、EGFR/erbB1、IGF-1R、TNF等大量信號(hào)靶點(diǎn)信號(hào)通路抑制血管生成、誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡、抑制癌癥細(xì)胞侵襲和轉(zhuǎn)移，從而對(duì)腫瘤細(xì)胞發(fā)生、發(fā)展的各個(gè)階段和環(huán)節(jié)產(chǎn)生影響，從DNA、mRNA到蛋白水平都可作為其靶點(diǎn)。紫杉醇和姜黃素具有協(xié)同治療惡性腫瘤的功效。姜黃素和紫杉醇合用能夠高效活化caspase-8，促進(jìn)線粒體釋放細(xì)胞色素C、Smac/Diablo和AIF進(jìn)入腫瘤細(xì)胞胞質(zhì)，促進(jìn)腫瘤細(xì)胞凋亡。除此之外，二者合用可大大降低紫杉醇劑量，最低至10nM，降低了高劑量紫杉醇臨床細(xì)胞毒性的風(fēng)險(xiǎn)。紫杉醇與姜黃素的摩爾比為1：(5-40)，優(yōu)選的比例為1:(15-25)。將紫杉醇、姜黃素以適當(dāng)?shù)谋壤旌?，在治療乳腺癌方面，如以犬乳腺癌?xì)胞系7364和ctzz為例，可以起到很好的協(xié)同增效作用。優(yōu)選的，所述藥物組合物還包括醫(yī)藥輔料；優(yōu)選的，所述藥物組合物的劑型為口服給藥制劑或非腸道給藥制劑；優(yōu)選的，所述口服給藥制劑包括片劑、膠囊劑、顆粒劑、丸劑和口服液，所述非腸道給藥制劑包括注射劑、粉針劑、噴霧劑和貼劑。該藥物可以制備為不同的劑型。含有所述的藥物組合物的藥物傳遞系統(tǒng)；優(yōu)選的，所述藥物傳遞系統(tǒng)為粒徑在50-250nm的顆粒；優(yōu)選的，所述藥物傳遞系統(tǒng)包括介孔材料載體和包覆所述介孔材料載體的脂質(zhì)層，所述介孔材料載體中負(fù)載所述的藥物組合物；更優(yōu)選的，所述脂質(zhì)層的厚度為5-20nm。紫杉醇和姜黃素都是疏水性藥物，這一特性大大降低了二者的藥效。其中，紫杉醇水溶性極差(小于1μg/mL)，導(dǎo)致其體內(nèi)生物利用度低。因此，臨床上使用的紫杉醇注射液采用聚氧乙烯蓖麻油(EL)與無水乙醇1:1(體積比)混合溶液來穩(wěn)定和溶解紫杉醇，然而這種載體會(huì)引發(fā)多種副作用。姜黃素難溶于水且性質(zhì)不穩(wěn)定，在有機(jī)溶劑中見光易分解，大大影響其活性。姜黃素進(jìn)入生物體內(nèi)受自身水溶性和體內(nèi)pH環(huán)境的影響易被代謝，導(dǎo)致其生物利用度低。因此，提高紫杉醇和姜黃素的穩(wěn)定性，增加二者水溶性是提高生物利用度的前提。本申請(qǐng)采用介孔二氧化硅為藥物傳遞系統(tǒng)以提高紫杉醇和姜黃素的藥效，介孔二氧化硅與紫杉醇的質(zhì)量比為(8-25):1，以保證包覆完整，同時(shí)不會(huì)影響藥物的吸脫附脫吸附。對(duì)藥物傳遞系統(tǒng)和脂質(zhì)層的厚度均進(jìn)行一定的限制，使藥物達(dá)到合理的緩釋效果，避免到達(dá)靶向位置時(shí)，脂質(zhì)層提前破裂。優(yōu)選的，所述介孔材料載體為介孔二氧化硅；所述介孔二氧化硅與所述紫杉醇的質(zhì)量比為(8-25):1。優(yōu)選的，所述介孔二氧化硅為MCM-41型介孔二氧化硅、MCM-48型介孔二氧化硅或SBA-15型介孔二氧化硅中的一種。MCM-41型介孔二氧化硅以季銨鹽為模板劑，在堿性條件下制備得到，具有六方有序排列孔道結(jié)構(gòu)和長(zhǎng)程有序性的介孔分子篩。MCM-41分子篩是具有均一孔徑的長(zhǎng)程有序介孔材料，具有極高的BET比表面積、大吸附容量、均一的中孔結(jié)構(gòu)等特點(diǎn)。MCM-48型介孔二氧化硅具有約2.6nm左右的均一孔徑及兩套相互獨(dú)立的三維螺旋孔道網(wǎng)絡(luò)結(jié)構(gòu)。MCM-48具有良好的長(zhǎng)程有序和較高的熱穩(wěn)定性，作為吸附劑使用。SBA-15型介孔二氧化硅，SBA-15是以嵌段共聚物為模板劑，在酸性條件下合成的具有二維六方結(jié)構(gòu)的介孔二氧化硅分子篩，與MCM-41不同的是其二維孔道之間相互連接，SBA-15的介孔分子篩具有更大的孔徑、更厚的孔壁和更高的孔容，而且具有更好的水熱穩(wěn)定性，有利于它在溫度較高、體系中有水的反應(yīng)中應(yīng)用。在介孔二氧化硅中，以上三種類型，均具有合適的多孔空間結(jié)構(gòu)，適合包覆紫杉醇和姜黃素，構(gòu)成遞藥系統(tǒng)。其中，所述MCM-41型介孔二氧化硅的制備方法，包括以下步驟：將0.5-5g十六烷基三甲基溴化銨分散于250-2500ml蒸餾水中，加熱升溫至50-85℃，在400-800rmp磁力攪拌條件下加入1-5mL、2mol/L的氫氧化鈉；然后滴入2.5-25ml正硅酸乙酯，反應(yīng)1-5小時(shí)；用無水乙醇和去離子水交替超聲清洗2-6遍反應(yīng)產(chǎn)物，再用酸萃取液清洗2-6遍，最后用無水乙醇和去離子水超聲交替清洗2-6遍后，得到含有MCM-41型介孔二氧化硅的蒸餾水混懸液。MCM-41型介孔二氧化硅可以采用上述的方法制備，得到具有六方有序排列孔道結(jié)構(gòu)和長(zhǎng)程有序性的介孔分子篩，制備方法簡(jiǎn)單，容易操作，所制備的MCM-41型介孔二氧化硅具有極高的BET比表面積、大吸附容量、均一的中孔結(jié)構(gòu)等特點(diǎn)，為優(yōu)選的介孔二氧化硅類型。其中，所述酸萃取液為濃鹽酸和無水乙醇以1:8的體積比混合后的溶液。透射電鏡下觀察所制備的介孔二氧化硅，如圖1所示，其外觀為球形，經(jīng)過粒徑分析得平均粒徑為219nm，PDI為0.140。對(duì)其進(jìn)行紅外光譜儀檢測(cè)，結(jié)果如圖2所示，可以獲得理想的紅外光譜圖，說明該方法可以有效制備MCM-41型介孔二氧化硅。對(duì)該二氧化硅進(jìn)行低角度XRD衍射分析，結(jié)果如圖3所示，所制得的介孔二氧化硅材料具有有序六方介孔結(jié)構(gòu)。對(duì)所制得的介孔二氧化硅進(jìn)行氮?dú)馕?脫吸附試驗(yàn)，結(jié)果如圖4所示，表明該二氧化硅材料的孔徑約為2.754nm。綜上，本申通中提供的制備MCM-41型介孔二氧化硅的方法所制備的介孔二氧化硅，具備優(yōu)異的空間結(jié)構(gòu)和孔徑，適合作為紫杉醇和姜黃素的遞藥系統(tǒng)。優(yōu)選的，所述脂質(zhì)層主要由磷脂和膽固醇組成；優(yōu)選的，所述磷脂與所述介孔二氧化硅的摩爾比為(0.5-1.5)：1，所述膽固醇與所述磷脂質(zhì)量比為1:(2-10)。加入既定質(zhì)量比的磷脂和膽固醇，構(gòu)成雙分子脂質(zhì)層，脂質(zhì)層可防止藥物到達(dá)靶部位前泄露，從而增加藥物穩(wěn)定性，該系統(tǒng)能夠針對(duì)性解決難溶性藥物生物利用度低的弊端，提高抗腫瘤藥物的活性。該脂質(zhì)層可以降低藥物的毒副作用，同時(shí)在入胞后發(fā)生破膜作用，實(shí)現(xiàn)藥物的迅速釋放。優(yōu)選的，在所述脂質(zhì)層外還修飾有聚乙二醇或DSPE-PEG；優(yōu)選的，所述聚乙二醇或DSPE-PEG與所述磷脂的摩爾比為1：(4-40)。在脂質(zhì)層外修飾聚乙二醇，脂質(zhì)層與所述的聚乙二醇分子以共價(jià)鍵結(jié)合形式連接，構(gòu)成復(fù)合長(zhǎng)循環(huán)遞藥系統(tǒng)，可以提高藥物活性。修飾后的脂質(zhì)層可因PEG分子中大量的親水基團(tuán)與水結(jié)合構(gòu)成空間位阻，降低網(wǎng)狀內(nèi)皮系統(tǒng)(RES)的識(shí)別和吞噬概率，使有效的血藥濃度長(zhǎng)時(shí)間作用于靶組織或靶細(xì)胞中，提高治療效果。DSPE-PEG為二硬脂?；字Ｒ掖及?聚乙二醇。優(yōu)選的，所述聚乙二醇或DSPE-PEG的分子量分別為1000-6000，優(yōu)選的所述聚乙二醇為PEG2000。一種所述的藥物傳遞系統(tǒng)的制備方法，包括以下步驟：1)、將介孔材料載體、紫杉醇、姜黃素分散于三氯甲烷中，避光恒溫震蕩10-36小時(shí)后，在12000-14000轉(zhuǎn)/分的速度下離心，移除離心后的上層清液，得到載藥的介孔材料載體；2)、將磷脂、膽固醇和聚乙二醇溶于有機(jī)溶劑中，然后蒸發(fā)除去有機(jī)溶劑，形成透明的薄膜；將步驟1)中制得的載藥的介孔材料載體加入所述薄膜中，使薄膜溶脹水合，超聲20-40分鐘后得到所述藥物傳遞系統(tǒng)。本申請(qǐng)所提供的治療乳腺癌的藥物傳遞系統(tǒng)的制備方法的示意圖如圖7所示，先將紫杉醇和姜黃素包覆在介孔二氧化硅，紫杉醇和姜黃素以三氯甲烷儲(chǔ)備，隨后的加熱可以去除三氯甲烷。然后在此基礎(chǔ)上，包覆脂質(zhì)和修飾聚乙二醇，構(gòu)成長(zhǎng)循環(huán)藥物傳遞系統(tǒng)。其中，有機(jī)溶劑是指常見的如無水乙醇、氯仿等，能夠同時(shí)溶解磷脂、膽固醇和聚乙二醇。所述的藥物組合物在制備治療人或者動(dòng)物的乳腺癌疾病的藥物中的應(yīng)用，或所述的藥物傳遞系統(tǒng)在制備治療人或者動(dòng)物的乳腺癌疾病的靜脈或口服給藥制劑中的應(yīng)用。乳腺癌的治療方法，包括給予受試者有效量的所述的藥物組合物?？梢詫?duì)受試者進(jìn)行限定；還可以對(duì)有效量進(jìn)行限定；還可以對(duì)給藥方法進(jìn)行限定。本申請(qǐng)所提供的藥物組合物和藥物傳遞系統(tǒng)可以用于治療乳腺癌。與現(xiàn)有技術(shù)相比，本發(fā)明的有益效果為：1)、本發(fā)明提供的治療乳腺癌的藥物組合物，采用紫杉醇和姜黃素以一定的比例協(xié)同使用，具有能夠高效活化caspase-8、促進(jìn)線粒體釋放細(xì)胞色素C、Smac/Diablo和AIF進(jìn)入腫瘤細(xì)胞胞質(zhì)、促進(jìn)腫瘤細(xì)胞凋亡等優(yōu)點(diǎn)。2)、含有所述的治療乳腺癌的藥物傳遞系統(tǒng)，該藥物傳遞系統(tǒng)在有效成分外包覆介孔材料載體和脂質(zhì)層，具有靶向給藥的優(yōu)點(diǎn)；具體的，以介孔材料為內(nèi)殼，可以增加難溶藥物的溶解度、提高載藥量；以磷脂和膽固醇材料構(gòu)建具有功能性的脂質(zhì)層，可防止藥物到達(dá)靶部位前泄露，從而增加藥物穩(wěn)定性、降低毒副作用，在入胞后發(fā)生破膜作用，實(shí)現(xiàn)藥物的迅速釋放；在脂質(zhì)層外修飾聚乙二醇，構(gòu)成長(zhǎng)循環(huán)遞藥系統(tǒng)，可以提高藥物活性。附圖說明為了更清楚地說明本發(fā)明實(shí)施例或現(xiàn)有技術(shù)中的技術(shù)方案，以下將對(duì)實(shí)施例或現(xiàn)有技術(shù)描述中所需要使用的附圖作簡(jiǎn)單地介紹。圖1為MCM-41型介孔二氧化硅透射電鏡測(cè)試圖；圖2為MCM-41型介孔二氧化硅紅外光譜儀檢測(cè)結(jié)果；圖3為MCM-41型介孔二氧化硅低角度XRD衍射分析結(jié)果；圖4為MCM-41型介孔二氧化硅進(jìn)行氮?dú)馕?脫吸附試驗(yàn)；圖5為實(shí)施例5所提供的治療乳腺癌的藥物的透射電鏡圖(bar＝1.0μm)；圖6為實(shí)施例5所提供的治療乳腺癌的藥物的透射電鏡圖(bar＝100nm)；圖7為本申請(qǐng)?zhí)峁┑乃幬飩鬟f系統(tǒng)制備過程示意圖。具體實(shí)施方式下面將結(jié)合實(shí)施例對(duì)本發(fā)明的實(shí)施方案進(jìn)行詳細(xì)描述，但是本領(lǐng)域技術(shù)人員將會(huì)理解，下列實(shí)施例僅用于說明本發(fā)明，而不應(yīng)視為限制本發(fā)明的范圍。實(shí)施例中未注明具體條件者，按照常規(guī)條件或制造商建議的條件進(jìn)行。所用試劑或儀器未注明生產(chǎn)廠商者，均為可以通過市售購買獲得的常規(guī)產(chǎn)品。實(shí)施例1本實(shí)施例所提供的治療乳腺癌的藥物組合物,包括紫杉醇和姜黃素,紫杉醇和姜黃素的摩爾比為1:5。該治療乳腺癌的藥物的制備方法，采用常規(guī)的物理混合。實(shí)施例2本實(shí)施例所提供的治療乳腺癌的藥物組合物，包括紫杉醇、姜黃素和醫(yī)藥輔料,其中，紫杉醇和姜黃素的摩爾比為1:40。該治療乳腺癌的藥物的制備方法，采用常規(guī)的物理混合后，制備為口服給藥制劑。實(shí)施例3本實(shí)施例所提供的含有治療乳腺癌的藥物傳遞系統(tǒng),包括紫杉醇、姜黃素、MCM-48型介孔二氧化硅、磷脂、膽固醇和聚乙二醇；其中，紫杉醇與姜黃素的摩爾比為1：40；MCM-48型介孔二氧化硅與紫杉醇的質(zhì)量比為8:1；磷脂與介孔二氧化硅的摩爾比為0.5：1；膽固醇與磷脂質(zhì)量比為1:2；聚乙二醇與所述磷脂的摩爾比為1：4，且聚乙二醇的分子量為1000。該含有治療乳腺癌的藥物傳遞系統(tǒng)的制備方法，具體包括以下步驟：S31、將介孔材料載體、紫杉醇、姜黃素分散于三氯甲烷中，避光恒溫震蕩10小時(shí)后，在12000轉(zhuǎn)/分的速度下離心，移除離心后的上層清液，得到載藥的介孔材料載體；S32、將磷脂、膽固醇和聚乙二醇溶于有機(jī)溶劑中，然后蒸發(fā)除去有機(jī)溶劑，形成透明的薄膜；將步驟S31中制得的載藥介孔材料載體加入所述薄膜中，使薄膜溶脹水合，超聲20分鐘后得到所述藥物傳遞系統(tǒng)。實(shí)施例4本實(shí)施例所提供的含有治療乳腺癌的藥物傳遞系統(tǒng)的藥物,包括紫杉醇、姜黃素、SBA-15型介孔二氧化硅、磷脂、膽固醇和聚乙二醇；其中，紫杉醇與姜黃素的摩爾比為1：10；MCM-48型介孔二氧化硅與紫杉醇的質(zhì)量比為25:1；磷脂與介孔二氧化硅的摩爾比為1.5：1；膽固醇與磷脂質(zhì)量比為1:10；DSPE-PEG與所述磷脂的摩爾比為1：40，且DSPE-PEG的分子量為6000。該含有治療乳腺癌的藥物傳遞系統(tǒng)的制備方法，具體包括以下步驟：S41、將介孔材料載體、紫杉醇、姜黃素分散于三氯甲烷中，避光恒溫震蕩36小時(shí)后，在14000轉(zhuǎn)/分的速度下離心，移除離心后的上層清液，得到載藥的介孔材料載體；S42、將磷脂、膽固醇和聚乙二醇溶于有機(jī)溶劑中，然后蒸發(fā)除去有機(jī)溶劑，形成透明的薄膜；將步驟S41中制得的載藥介孔材料載體加入所述薄膜中，使薄膜溶脹水合，超聲40分鐘后得到所述藥物傳遞系統(tǒng)。實(shí)施例5本實(shí)施例所提供的治療乳腺癌的藥物,包括紫杉醇、姜黃素、MCM-41型介孔二氧化硅、磷脂、膽固醇和PEG2000；其中，紫杉醇與姜黃素的摩爾比為1：20；MCM-41型介孔二氧化硅與紫杉醇的質(zhì)量比為16:1，并且該MCM-41型介孔二氧化硅的制備方法如下：將0.5十六烷基三甲基溴化銨分散于250ml蒸餾水中，加熱升溫至50℃，在400rmp磁力攪拌條件下加入2mol/L的氫氧化鈉；然后滴入2.5ml正硅酸乙酯，反應(yīng)1小時(shí)；用無水乙醇和去離子水交替超聲清洗6遍反應(yīng)產(chǎn)物，再用酸萃取液清洗6遍，最后用無水乙醇和去離子水超聲交替清洗6遍后，得到含有MCM-41型介孔二氧化硅的蒸餾水混懸液；磷脂與介孔二氧化硅的摩爾比為1：1；膽固醇與磷脂質(zhì)量比為1:5；PEG2000與所述磷脂的摩爾比為1：20。該含有治療乳腺癌的藥物傳遞系統(tǒng)的制備方法，具體包括以下步驟：S51、將介孔材料載體、紫杉醇、姜黃素分散于三氯甲烷中，避光恒溫震蕩20小時(shí)后，在13000轉(zhuǎn)/分的速度下離心，移除離心后的上層清液，得到載藥的介孔材料載體；S52、將磷脂、膽固醇和聚乙二醇溶于有機(jī)溶劑中，然后蒸發(fā)除去有機(jī)溶劑，形成透明的薄膜；將步驟S51中制得的載藥的介孔材料載體加入所述薄膜中，使薄膜溶脹水合，超聲30分鐘后得到所述藥物傳遞系統(tǒng)。實(shí)驗(yàn)例1紫杉醇和姜黃素協(xié)同效應(yīng)檢測(cè)將不同濃度紫杉醇、姜黃素單體混合物與犬乳腺腫瘤細(xì)胞7364于37℃、5％CO2培養(yǎng)箱中孵育24h，然后進(jìn)行CCK8檢測(cè)細(xì)胞毒性，結(jié)果如表1所示。其中，組別1-4中紫杉醇和姜黃素的摩爾比與實(shí)施例1、3-5中紫杉醇和姜黃素的摩爾比相同，對(duì)比例1和對(duì)比例2中紫杉醇與姜黃素的摩爾比分別為1:2.5和1：1.25。表1不同摩爾比下紫杉醇和姜黃素對(duì)7364乳腺癌細(xì)胞系的協(xié)同效應(yīng)注：Q>1.15兩藥協(xié)同；0.85-1.15兩藥相加；Q<0.85兩藥拮抗。實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示，在一定濃度配比時(shí)，紫杉醇、姜黃素有顯著的協(xié)同增效作用，但是當(dāng)比例過小時(shí)，沒有協(xié)同作用。實(shí)驗(yàn)例2實(shí)施例3-5所提供的治療乳腺癌的藥物的包覆率測(cè)試對(duì)包覆長(zhǎng)循環(huán)遞藥系統(tǒng)的實(shí)施例3-5所提供的治療乳腺癌的藥物采用HPLC檢測(cè)進(jìn)行包覆率測(cè)試，并通過透射電鏡觀察磷脂層厚度。實(shí)驗(yàn)結(jié)果如表2所示。表2包覆率測(cè)試結(jié)果優(yōu)良的長(zhǎng)循環(huán)遞藥系統(tǒng)應(yīng)當(dāng)具備良好的載藥能力、藥物包封能力及穩(wěn)定性。通常認(rèn)為，載藥量越高越好。同時(shí)也要結(jié)合藥物在血中的穩(wěn)定性來確定適當(dāng)?shù)妮d藥量，使藥效發(fā)揮最好。但由于脂質(zhì)體易出現(xiàn)滲漏現(xiàn)象，因此，在脂質(zhì)體的研究中包封率是質(zhì)量控制的重要指標(biāo)之一。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，本申請(qǐng)實(shí)施例所提供的治療乳腺癌的藥物，均具有良好的包封率。圖5和圖6為實(shí)施例4所提供的治療乳腺癌的藥物的不同倍數(shù)的透射電鏡圖，可以觀測(cè)到明顯的脂質(zhì)層，其脂質(zhì)層厚度適中。實(shí)驗(yàn)例3治療乳腺癌的藥物對(duì)犬乳腺腫瘤細(xì)胞7364細(xì)胞毒性測(cè)試將實(shí)施例1-5以及對(duì)比例3和對(duì)比例4所提供的治療乳腺癌的藥物與犬乳腺腫瘤細(xì)胞7364于37℃、5％CO2培養(yǎng)箱中孵育24h，分別在24h、48h和60h用CCK8檢測(cè)細(xì)胞毒性，實(shí)驗(yàn)結(jié)果如表3所示。對(duì)比例3和4是在實(shí)施例5所提供的藥物組成、比例及方法的基礎(chǔ)上有所改變。其中，對(duì)比例3為單一的紫杉醇；對(duì)比例4為不加入聚乙二醇得到的藥物，即在紫杉醇和姜黃素外只包覆介孔二氧化硅和脂質(zhì)層，并與對(duì)比例5(生理鹽水組)和對(duì)比例6(空白載體組)對(duì)比。表3治療乳腺癌的藥物對(duì)犬乳腺腫瘤細(xì)胞7364細(xì)胞毒性測(cè)試結(jié)果組別GI％(24h)GI％(48h)GI％(60h)實(shí)施例146.1645.8434.35實(shí)施例249.4950.2751,38實(shí)施例353.5754.8860.79實(shí)施例456.3857.1663.23實(shí)施例558.2258.9064.54對(duì)比例336.2938.6837.79對(duì)比例447.0459.6157.70對(duì)比例5---對(duì)比例6---“-”表示未測(cè)出。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，在一定濃度配比時(shí)，與生理鹽水組和空白載體組相比，本申請(qǐng)中實(shí)施例1-4以及對(duì)比例3和對(duì)比例所提供的治療乳腺癌的藥物均有一定的細(xì)胞毒性，實(shí)施例2-4所提供的治療乳腺癌的藥物與單一的紫杉醇和物理混合藥物組(實(shí)施例1)相比較，細(xì)胞毒性強(qiáng)，并且能體現(xiàn)出一定的長(zhǎng)循環(huán)效果。實(shí)驗(yàn)例4治療乳腺癌的藥物對(duì)小鼠乳腺腫瘤4T1細(xì)胞系藥效測(cè)試將小鼠乳腺腫瘤4T1細(xì)胞系細(xì)胞懸液的濃度調(diào)整至1×107個(gè)/mL，在30只小鼠腹部乳區(qū)皮下接種，每只200μL(含細(xì)胞數(shù)2×106個(gè))，荷瘤小鼠模型建立后，對(duì)小鼠進(jìn)行稱重并測(cè)量腫瘤大小，隨機(jī)將30只小鼠分為6組，每組5只，采取靜脈給藥的方式。對(duì)比例和對(duì)照組的設(shè)計(jì)參照實(shí)驗(yàn)例3。實(shí)驗(yàn)結(jié)果如表4所示。其中，對(duì)比例7是在實(shí)施例1中具有紫杉醇相同給藥濃度的紫杉醇單藥組；對(duì)比例8、9分別為空白載體和生理鹽水；實(shí)施例1、2分所提供的復(fù)合遞藥系統(tǒng)別的給藥方式分別為靜脈給藥和瘤旁瘤內(nèi)給藥。其中紫杉醇給藥劑量為臨床常規(guī)給藥劑量的1/2。表4治療乳腺癌的藥物對(duì)小鼠乳腺腫瘤4T1細(xì)胞系藥效測(cè)試結(jié)果組別瘤重/g抑瘤率/％實(shí)施例10.7358.34實(shí)施例20.7458.28對(duì)比例71.89-對(duì)比例81.53-對(duì)比例91.76-“-”表示未測(cè)出。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，治療結(jié)束時(shí)，遞藥系統(tǒng)組方不變的基礎(chǔ)上具有兩種不同給藥途徑的實(shí)施例1和實(shí)施例2瘤重及抑瘤率差異不顯著，但二者與對(duì)比例7紫杉醇單藥組及對(duì)比例8、9均有顯著差異，說明實(shí)施例1、2具有較好的抗乳腺腫瘤藥效。綜上所述，本發(fā)明提供的治療乳腺癌的藥物組合物，采用紫杉醇和姜黃素以一定的比例協(xié)同使用，具有能夠高效活化caspase-8、促進(jìn)線粒體釋放細(xì)胞色素C、Smac/Diablo和AIF進(jìn)入腫瘤細(xì)胞胞質(zhì)、促進(jìn)腫瘤細(xì)胞凋亡等優(yōu)點(diǎn)。含有所述的治療乳腺癌的藥物傳遞系統(tǒng)，該藥物傳遞系統(tǒng)在有效成分外包覆介孔材料載體和脂質(zhì)層，具有靶向給藥的優(yōu)點(diǎn)；具體的，以介孔材料為內(nèi)殼，可以增加難溶藥物的溶解度、提高載藥量；以磷脂和膽固醇材料構(gòu)建具有功能性的脂質(zhì)層，可防止藥物到達(dá)靶部位前泄露，從而增加藥物穩(wěn)定性、降低毒副作用，在入胞后發(fā)生破膜作用，實(shí)現(xiàn)藥物的迅速釋放；在脂質(zhì)層外修飾聚乙二醇，構(gòu)成長(zhǎng)循環(huán)遞藥系統(tǒng)，可以提高藥物活性。盡管已用具體實(shí)施例來說明和描述了本發(fā)明，然而應(yīng)意識(shí)到，在不背離本發(fā)明的精神和范圍的情況下可以作出許多其它的更改和修改。因此，這意味著在所附權(quán)利要求中包括屬于本發(fā)明范圍內(nèi)的所有這些變化和修改。當(dāng)前第1頁1 2 3