專利名稱：抗寄生蟲制劑的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及結(jié)構(gòu)為式(Ⅰ)化合物的腸胃外制劑的制備，此化合物稱為25-環(huán)己基阿凡曼菌素B1。
(I)此化合物是阿凡曼菌素家族的一員，歐洲專利公開0214713對此有記載并要求了專利保護(hù)。阿凡曼菌素類是高度活性的抗寄生蟲劑，尤其可用作驅(qū)蠕蟲劑、殺外寄生蟲劑、殺蟲劑和殺螨劑。
抗寄生蟲劑對于動物最為常用的施用制劑是非腸胃的、皮下或肌肉制劑。通常，水是一種方便的用于注射的液體，但阿凡曼菌素類在水中的溶解度太低，簡單的水溶液濃度低到無法使用。如4389397號美國專利所述，用表面活性劑作為促溶劑和使用合適的有機(jī)共溶劑形成膠團(tuán)溶液，可使某些阿凡曼菌素在水中溶解。然而，這些制劑所提供的活性化合物的劑量不足以令人滿意地除去動物體內(nèi)外的寄生蟲。
歐洲專利公開146414記載了阿凡曼菌素的共溶劑溶液，即含有少量水的甘油甲醛和丙二醇的混合液或丙二醇，供腸胃外使用。但是，已知丙二醇在皮下或肌肉注射中引起刺激作用。此外，這些制劑中的少量水會導(dǎo)致阿凡曼菌素的水解作用。
這種含有可與水混溶的有機(jī)溶劑的阿凡曼菌素制劑，傾向于在注射部位使阿凡曼菌素產(chǎn)生不期望的局部沉淀。這可能在注射部位導(dǎo)致刺激和腫脹，并使抗寄生蟲效果降低和不一致。
確實，市售抗寄生蟲劑“可用于家畜注射的Ivomec”(一種稱為異阿凡曼菌素的共溶劑阿凡曼菌素制劑)僅適用于皮下注射，并可能在注射部位導(dǎo)致刺激和腫脹。
另一種提供阿凡曼菌素注射液的方法是，將阿凡曼菌素溶于藥用油中。英國專利公開2166436中公開了用花生油、棉籽油以及油酸乙酯作為某些阿凡曼菌素的溶劑。然而，花生油和棉籽油提供的溶液不能使化合物Ⅰ的濃度至少達(dá)到1%w/v，而這正是一般的獸醫(yī)藥品所要求的。獸醫(yī)制劑通常都是在農(nóng)場于低溫下使用或貯存，溫度低至4℃甚至更低，因此，即使阿凡曼菌素于正常室溫下在油中的溶解度足夠高，它也可能在暴露于低溫條件時沉淀或形成過飽和溶液，從而變得不能使用。純的油酸乙酯以及含有大量油酸乙酯的油類混合物侵蝕常用獸醫(yī)注射器的某些塑料或橡膠組分，使它們變得不能使用。
歐洲專利公開285561記載了用純的芝麻油作為另一組化合物米爾倍霉素(milbemycins)的可能溶劑。在比較粘度和可注射性的研究中發(fā)現(xiàn)，純芝麻油的粘度太高，在用常規(guī)的獸醫(yī)注射器時，不能用它作為溶劑進(jìn)行注射。由于此原因，在實際的野外條件下，不能用純芝麻油作注射用溶劑。
本發(fā)明旨在提供化合物(Ⅰ)的腸胃外制劑，它能有效地防治體內(nèi)和體外的寄生蟲，它在對家畜作皮下和肌肉注射時易于被家畜耐受，并可用常規(guī)的注射器進(jìn)行注射。
本發(fā)明提供了25-環(huán)己基阿凡曼菌素B1即化合物(Ⅰ)的一種溶液，其溶劑含有50-95%體積的芝麻油，剩余部分是油酸乙酯。
優(yōu)選的溶劑混合物含有75-90%體積的芝麻油，剩余部分是油酸乙酯。
對于皮下或肌肉注射來說，優(yōu)選的阿凡曼菌素含量為1-30mg/ml，最優(yōu)選為大約10mg/ml。
本發(fā)明的制劑是單相溶液，它可有效地治療由內(nèi)寄生蟲引起的多種疾病，其中尤其包括蠕蟲病，這是最經(jīng)常由稱為線蟲的一類寄生蠕蟲引起的疾病，它能給豬、羊、馬和牛飼養(yǎng)業(yè)帶來嚴(yán)重的經(jīng)濟(jì)損失，并能影響家養(yǎng)動物和禽類。這些化合物還能有效地防治影響各種動物的其他線蟲，包括例如狗中的惡絲蟲屬，以及能夠感染人體的各種寄生蟲，包括腸胃寄生蟲如鉤蟲屬、板口線蟲屬、蛔蟲屬、類圓線蟲屬、毛線蟲屬、毛細(xì)線蟲屬、鞭蟲屬、蟯蟲屬，以及存在于血液或其他組織和器官中的寄生蟲如線狀蠕蟲(filiarialworm)和腸外階段的類圓線蟲屬和毛線蟲屬。
本發(fā)明的制劑還可有效地治療外寄生蟲感染，尤其包括家畜和家禽的節(jié)肢動物外寄生蟲如蜱、虱、螨、蚤、麗蠅、叮咬昆蟲及能影響牛和馬的遷移性雙翅目幼蟲。
已經(jīng)意外地發(fā)現(xiàn)，本發(fā)明制劑的性質(zhì)優(yōu)于上述現(xiàn)有技術(shù)制劑，即用它們對家畜進(jìn)行皮下或肌肉注射時對注射部位無刺激或幾乎無刺激，適合用于常用的標(biāo)準(zhǔn)注射器，并能產(chǎn)生一致的抗寄生蟲效果。
本發(fā)明溶液的進(jìn)一步的優(yōu)點是，制劑載體中含有不飽和酸的酯類，因此在長時間貯存時不使阿凡曼菌素受空氣氧化。
本發(fā)明的溶液可如下簡單地配制將化合物(Ⅰ)溶于芝麻油油酸乙酯混合物中，然后消毒和包裝，用于常規(guī)方式的注射。
下面的實例通過舉例描述了本發(fā)明的制劑。
實例通過下述方法制備并測試25-環(huán)己基阿凡曼菌素B1在油制劑中的溶液。
實例1用下述成分配制注射液，該注射液在1ml芝麻油和油酸乙酯的公稱90/10混合物中含有10mg化合物Ⅰ化合物Ⅰ10mg油酸乙酯0.1ml芝麻油加至1.0ml將油酸乙酯和芝麻油混合并加熱至80℃，同時用氮吹掃。然后將化合物Ⅰ加至熱油中直至溶解，使得到的溶液迅速冷卻，如果需要，用芝麻油調(diào)整體積至1ml。通過膜過濾使此最終溶液消毒并無菌包裝。
實例2采用實例1的方法，用下列成分配制注射液，該注射液在1ml芝麻油和油酸乙酯的公稱50/50混合物中含有10mg化合物Ⅰ
化合物Ⅰ10mg油酸乙酯0.5ml芝麻油加至1.0ml實例3采用實例1的方法，用下列成分配制注射液，該注射液在1ml芝麻油和油酸乙酯的公稱75/25混合物中含有10mg化合物Ⅰ化合物Ⅰ10mg油酸乙酯0.25ml芝麻油加至1.0ml實例4采用L.G.Cramer等的方法(Vet.Record122611-612，1988)加以修改，測定化合物Ⅰ對外寄生蟲的效果。
通過皮下注射在第0天以200ug/kg的劑量給兩組牛施用化合物Ⅰ。A組施用的化合物Ⅰ是根據(jù)美國專利4389397的含水膠團(tuán)制劑，在每毫升制劑中含有2.5mg化合物Ⅰ、120mgTween80(注冊商標(biāo))、200mg甘油甲醛、大約10mg芐醇，剩余部分為水。處理B組的化合物Ⅰ是實例1的制劑。然后，在第0、2和4天對處理組及各種處理的對照組接種微小牛蜱(Boophilusmicroplus)幼蟲，使蜱發(fā)育成成蟲。第21和32天之間收集產(chǎn)生的吸血的雌性蜱成蟲，記錄日平均計數(shù)示于表1中。
表1收集的雌性微小牛蜱的日平均計數(shù)天膠團(tuán)制劑未處理對照實例1制劑未處理對照210287002206510324230879099624075301507251655406632676267085227854803292836108352928515193016031310031320010總計2573454304727用實例1制劑處理不僅延遲了雌性蜱成蟲的產(chǎn)生，而且使收集到的蜱減少。
實例5在牛的半膜肌內(nèi)注射阿凡曼菌素制劑后，評價其耐受性。在處理后第7和14天無痛處死牛，然后摘取注射部位及其周圍的組織。檢查組織的宏觀病理學(xué)，利用下述分級系統(tǒng)評價注射部位的損傷。
0＝正常，無可見損傷1＝輕度傷疤2＝重度傷疤3＝包囊碎片＜1.0cm34＝包囊碎片＞1.0＜2.5cm35＝包囊碎片＞2.5cm3等級0、1和2被認(rèn)為是可接受的。大于2的等級具有包囊碎片。實例1和2的化合物Ⅰ制劑以200ug/kg的劑量對牛進(jìn)行肌肉注射。將注射部位的耐受性與以同樣劑量和途徑施用的抗寄生蟲劑異阿凡曼菌素(商標(biāo);用于牛的Ivomec)的共溶劑制劑作比較。
表2肌肉注射部位耐受性等級的比較處理天家畜數(shù)平均等級實例1制劑750.414100.0實例2制劑750.414100.0Ivomec743.751482.75實例1和2制劑中的化合物Ⅰ易于被耐受，只在注射7天后有少量小損傷;14天后完全消失。相反，肌肉注射的Ivomec的耐受性在第7天很差，在注射后14天仍可見到包囊碎片。
權(quán)利要求
1.一種制備25-環(huán)己基阿凡曼菌素B1溶液的方法，包括將25-環(huán)己基阿凡曼菌素B1溶于一種溶劑中，該溶劑含有50-95%體積的芝麻油，剩余部分是油酸乙酯。
2.根據(jù)權(quán)利要求1的方法，其特征在于，其中的溶劑含有75-90%體積的芝麻油，剩余部分是油酸乙酯。
3.根據(jù)權(quán)利要求1或2的方法，其特征在于，所形成的溶液含有1-30mg/ml 25-環(huán)己基阿凡曼菌素B1。
4.根據(jù)權(quán)利要求3的方法，其特征在于，所形成的溶液含有大約10mg/ml 25-環(huán)己基阿凡曼菌素B1。
5.一種治療動物寄生蟲感染的方法，包括注射由前述任一項權(quán)利要求的方法制備的溶液。
全文摘要
一種抗寄生蟲劑25-環(huán)己基阿凡曼菌素B1在含有50-95％芝麻油，剩余部分是油酸乙酯的溶劑中的溶液，它可有效地防治寄生蟲，易于被動物耐受，并可利用標(biāo)準(zhǔn)的注射器注射。
文檔編號A61K9/08GK1046282SQ9010207
公開日1990年10月24日 申請日期1990年4月11日 優(yōu)先權(quán)日1989年4月11日
發(fā)明者斯蒂芬·理查德·威克斯, 愛德華·戴維遜 申請人:美國輝瑞有限公司