專利名稱：1-[2-(1h-茚-3-基)乙基]-4-(萘-1-基)-哌嗪衍生物及其制備和在治療上的應(yīng)用的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及的是1-[2-(1H-茚-3-基)乙基]-4-(萘-1-基)哌嗪衍生物及其制備和在治療疾病中的應(yīng)用。
本發(fā)明的化合物可由通式(I)表示
式中X代表氫原子，C1-C3烷氧基或環(huán)丙基甲氧基；Y代表氫原子或甲氧基。
X優(yōu)選代表C1-C3烷氧基，特別是甲氧基Y優(yōu)選代表甲氧基。
本發(fā)明的化合物可以呈堿或(加成)鹽的狀態(tài)存在。
在EP-0490772的專利申請中描述了與通式(I)化合物類似的化學(xué)結(jié)構(gòu)的化合物，這些化合物可以用作抗抑郁劑和抗焦慮劑。
按照本發(fā)明．可以根據(jù)后面的反應(yīng)流程1和反應(yīng)流程2所說明的方法制備通式(I)的化合物。
反應(yīng)流程1
根據(jù)反應(yīng)流程1，用一種還原劑在惰性溶劑中處理由通式(II)表示的1H-茚-3-乙酸衍生物(通式(II)中的Y與前面(I)式中的Y相同)，來制備通式(III)的醇，反應(yīng)溫度隨溶劑而不同，在30-140℃之間。所述還原劑可為簡單還原劑，也可為配合物，堿金屬氫化物或金屬氫化物，例如氫化鋁鋰，氫化硼，氫化硼-四氫呋喃或氫化硼-二甲硫配合物，以及氫化鋁等，溶劑為芳香族溶劑或醚類，例如甲苯、二甲苯、乙醚、四氫呋喃、二烷等。然后。在一種有機堿(如三乙胺或吡啶)的存在下，有時還需在一種惰性溶劑存在下于溫度0-40℃用4-甲基苯磺酰氯處理上述醇以得到由通式(IV)表示的衍生物。
最后，讓上面得到由通式(IV)表示的化合物與通式(V)表示的哌嗪衍生物(通式(V)中的X與前面的X相同)進行反應(yīng)，反應(yīng)溫度為100-150℃，優(yōu)選為130℃，該反應(yīng)可能在一種高沸點溶劑中進行，例如甲苯、二甲苯、N，N-二甲基甲酰胺或1-甲基吡咯烷-2-酮。
按照反應(yīng)流程2所示的方法，首先讓通式(II)1H-茚-3-乙酸衍生物(式(II)中Y與前面定義的相同)與N，N’-羰基二咪唑在隋性溶劑(如四氫呋喃)中于20-50℃的溫度下反應(yīng)，原處便可得到相應(yīng)的咪唑化物(imidazolide)。而后，用通式(V)表示的哌嗪衍生物與前述的咪唑化物反應(yīng)以便制備由(VI)式表示的酰胺，通式(V)中的X與前面定義的相同，該反應(yīng)是在惰性溶劑(如醚類化合物，例如四氫呋喃或二烷)中于溫度20-50℃下進行的。
最后，在惰性溶劑中用一種簡單還原劑或配合物還原劑還原前述的酰胺，還原劑可以是堿金屬或其他金屬的氫化物。如氫化鋁鋰、氫化硼、氫化硼-四氫呋喃或氫化硼-二甲硫配合物及氫化鋁，溶劑可為芳香族化合物或醚類，例如甲苯、二甲苯、乙醚、四氫呋喃、二烷等，根據(jù)反應(yīng)溶劑的不同，反應(yīng)溫度為30-140℃。
反應(yīng)流程2
通式(II)所表示的起始化合物在以下文獻中有描述C.A.76(23)140279s，C.A.104(1)5652q和J.Chem.Soc.PerkinTrans.(1972)1(7)941。即在鋅粉的存在下和在Reformatsky反應(yīng)的反應(yīng)條件下，通過溴代乙酸乙酯與2，3-二氫-1H-茚-1-酮(Y＝H，市場有售)或6-甲氧基-2，3-二氫-1H-茚-1-酮(Y＝OCH3，見文獻J.Org.Chem.(1970)35(3)467和J.Org.Chem(1977)42(12)2155)反應(yīng)，得到(6-Y-2，3-二氫-1H-茚-1-亞基)乙酸乙酯和5-Y-1H-茚-3-乙酸乙酯和混合物。在醇堿介質(zhì)中水解此混合物給出由通式(II)表示的酸。
通式(V)表示的哌嗪的衍生物是已知化合物，并可用文獻中敘述的方法制備，所述文獻例如為EP-0343050，EP-0354093和EP-0434561專利申請以及J.Med.Chem.(1986)29(11)2379、J.Med.Chem.(1988)31(10)1968和J.Med.Chem.(1991)34(8)2623。
以下的實施例詳細地說明本發(fā)明的化合物的制備方法。
微量元素分析，紅外光譜及核磁共振譜都證實了所得產(chǎn)物的結(jié)構(gòu)。
實施例序號后面括弧中的化合物序號對應(yīng)于后面表中第一欄中的序號。
實施例1(化合物N°4)4-[2-(5-甲氧基-1H-茚-3-基)乙基]-1-(7-甲氧基萘-1-基)哌嗪(E)-2-丁烯二酸鹽(2∶1)1.1.5-甲氧基-1H-茚-3-乙醇將0.76克(0.02摩爾)氫化鋁鋰加入到50毫升乙醚中，制備出懸浮液，向懸浮液中加入含2.04克(0.01摩爾)5-甲氧基-1H-茚-3-乙酸溶液，攪拌此混合物，加熱回流達32小時，放置冷卻該混合物。加入1.6毫升濃度為10％的酒石酸鉀鈉水溶液水解其混合物，再加熱至沸騰一小時，過濾，用四氫呋喃洗滌殘留物，減壓蒸發(fā)濾液，得到油狀殘余物1.8克，通過蒸餾將其純化，得1.55克黃色液體，可直接用于下一步反應(yīng)。
1.2.4-甲基苯磺酸2-(5-甲氧基-1H-茚-3-基)乙酯在11毫升干燥的吡啶中溶解1.27克(0.0067摩爾)5-甲氧基-1H-茚-3-乙醇，攪拌其混合物，用冰浴冷卻，一點一點地加入1.4克(0.0073摩爾)4-甲基苯磺酰氯，在冷卻條件下維持攪拌過夜，然后室溫下攪拌4小時。
將反應(yīng)后得到的溶液倒入由16毫升10N鹽酸和48克冰組成的混合物中。用乙醚處理所得到的混合物，分離有機相，用水洗滌，用硫酸鎂干燥。過濾．減壓蒸干濾液．得到1.94克無色油狀產(chǎn)物，它可直接用于下一步反應(yīng)。
1.3. 4-[2-(5-甲氧基-1H-茚-3-基)乙基]-1-(7-甲氧基萘-1-基)哌嗪(E)-2-丁烯二酸鹽(2∶1)混合2.07克(0.006摩爾)]-甲基苯磺酸2-(5-甲氧基-1H-茚-3-基)乙酯和2.90克(0.012摩爾)1-(7-甲氧基萘-1-基)哌嗪，攪拌其混合物并置于氬氣氛下油浴加熱到130℃達2小時。
用二氯甲烷溶解該混合物，用水洗滌得到的溶液，再用稀氫氧化鈉溶液洗滌，再用水洗滌，用硫酸鎂干燥，過濾后，減壓蒸干濾液。得4.08克油狀物。
以混合物二氯甲烷/丙酮(92/8)洗脫，在硅膠色譜柱上進行純化。得2.09克堿。取2.03克(0.0049摩爾)堿溶于由異丙醇和乙醚組成的混合物中，稍加熱后，加入由0.569克反丁烯二酸溶于熱異丙醇構(gòu)成的溶液。在攪拌下放置冷卻過夜。最后得到2.16克中性反丁烯二酸鹽，熔點158-159℃。
實施例2(化合物N°2)4-[2-(5-甲氧基-1H-茚-3-基)乙基]-1-(萘-1-基)哌嗪2.1.4-[(5-甲氧基-1H-茚-3-基)乙酰基]-1-(萘-1-基)哌嗪將2.45克(0.012摩爾)5-甲氧基-1H-茚-3乙酸溶于12毫升四氫呋喃中，在氬氣氛下向此溶液中少量多次地加入2.0克(0.012摩爾)N，N’-羰基二咪唑。攪拌此混合物達一小時。
向反應(yīng)混合物中加入由2.55克(0.012摩爾)1-(萘-1-基)哌嗪溶于10毫升四氫呋喃組成的溶液，放置反應(yīng)混合物過夜。
減壓蒸干溶劑后，用水和乙醚處理殘余油狀物，過濾，收集得到的固體物質(zhì)，干燥之。得產(chǎn)物4.13克，它可直接用于下一步反應(yīng)。
2.2.4-[2-(5-甲氧基-1H-茚-3-基)7-基]-1-(萘-1-基)哌嗪在氬氣氛下，加入0.76克(0.02摩爾)氫化鋁鋰于一500毫升圓底燒瓶中，并用乙醚覆盞。在圓底燒瓶上裝一Soxhlet萃取器，其中裝有2.0克(0.005摩爾)4-[(5-甲氧基-1H-茚-3-基)乙?；鵠-1-(萘-1-基)哌嗪，回流乙醚使反應(yīng)得以進行，反應(yīng)30小時。
用1.6毫升10％酒石酸鉀鈉水溶液處理反應(yīng)混合物，過濾此混合物，同時先用乙醚，后用四氫呋喃洗滌固體產(chǎn)物．減壓蒸干濾液。得到一種可以結(jié)晶的油狀物，用乙醚處理后，在己烷和二異丙醚混合溶劑中重結(jié)晶，最終得化合物0.45克。熔點102-103℃。
實施例3(化合物N°3)4-[2-(1H-茚-3-基)乙基]-1-(7-甲氧基萘-1-基)哌嗪(E)-2-丁烯二酸鹽(1∶1)3.1.1H-茚-3-乙醇向200毫升干燥的乙醚中加入3.4克(0.09摩爾)氫化鋁鋰制備出懸浮液，向此懸浮液中滴加由7.7克(0.044摩爾)1H-茚-3-乙酸溶于150毫升乙醚而生成的溶液，攪拌此混合物，加熱回流達20小時。
放置此混合物使之冷卻，用約8毫升10％酒石酸鉀鈉水溶液水解此混合物．重新加熱加到沸騰達一小時。過濾，同時用乙醚洗滌濾渣。減壓蒸干濾液，蒸餾純化其殘留物。
得到5.2克產(chǎn)物，它可直接用于下一步反應(yīng)。
3.2.4-甲基苯磺酸2-(1H-茚-3-基)乙酯將5克(0.031摩爾)1H-茚-3-乙醇溶于50毫升干燥吡啶中，攪拌此混合物，并在冰浴中冷卻之。一點一點地加入5.9克(0.031摩爾)4-甲基苯磺酸酰氯。在冷卻條件下攪拌1小時，而后于室溫下攪拌4小時。
將該溶液倒入由100毫升10N鹽酸和200克冰組成的混合物中，用乙醚對此混合物萃取兩次，分離有機相，水洗，用硫酸鎂干燥，過濾。減壓蒸干濾液，最后得7克油狀產(chǎn)物，可直接用于下一步反應(yīng)。
3.3.4-[2-(1H-茚-3-基)乙基]-1-(7-甲氧基萘-1-基)哌嗪(E)-2-丁烯二酸鹽(1∶1)將1.15克(0.00366摩爾)4-甲基苯磺酸2-(1H-茚-3-基)乙酯與1.95克(0.008摩爾)1-(7-甲氧基萘-1-基)哌嗪混合在一起，攪拌之，置于氬氣氣氛，油浴加熱130℃，維持3小時。
放置使之冷卻后用10毫升10％氫氧化鈉處理，再用二氯甲烷萃取，用水洗滌萃取液。用硫酸鎂干燥后，過濾，減壓蒸干濾液。
以二氯甲烷/丙酮(98/2)混合溶劑洗脫，在硅膠色譜柱中對其殘留物加以純化，得1.3克(0.00338摩爾)堿。將堿溶于50毫升異丙醇，再加入0.4克反丁烯二酸，在攪拌下使之冷卻后，放置過夜。
過濾后，用乙醚洗滌。干燥。在乙醇中重結(jié)晶后，最終得到1.15克反丁烯二酸鹽。其熔點為184-185℃。
實施例4(化合物N°10)4-[2-(5-甲氧基-1H-茚-3-基)乙基]-1-[7-(環(huán)丙基甲氧基)萘-1-基]哌嗪(E)-2-丁烯二酸鹽(1∶1)4.1.N-(7-羥基萘-1-基)乙酰胺在冰浴冷卻下，將100克(0.55摩爾)8-氨基萘-2-醇加入到125毫升(135.25克，1.325摩爾)乙酸酐中．在冷卻條件下攪拌此混合物達1小時。
將反應(yīng)混合物倒入375毫升冰水中，攪拌數(shù)小時，過濾，收集紫色固體，用30毫升乙醚洗滌3次后減壓干燥。最后得108.8克產(chǎn)品，它可直接用于下一步反應(yīng)。熔點193-195℃。
4.2.N-[7-(環(huán)丙基甲氧基)萘-1-基]乙酰胺向100毫升二甲亞砜中加入3.4克(0.085摩爾)氫化鈉(在輕油中，純度為60％，事先用無水戊烷洗滌過)，得一懸浮液。在氮氣氛下，向此懸浮液中加入17.1克(0.085摩爾)N-(7-羥基萘-1-基)乙酰胺溶于50毫升二甲亞砜形成的溶液，同時要用冰水浴冷卻其混合物，并在室溫下維持攪拌2小時。加入9.05克(0.1摩爾)氯甲基環(huán)丙烷，于室溫下攪拌4小時，然后放置過夜。
將其混合物倒入1升水中，攪拌1小時，然后在冷卻條件下放置過夜。
過濾，得固體產(chǎn)物，水洗，干燥。得到13克產(chǎn)品，它可作下一步反應(yīng)使用。熔點154-155℃4.3.7-(環(huán)丙基甲氧基)萘-1-胺在氮氣氛下加熱回流由13克(0.05摩爾)N-[7-(環(huán)丙基甲氧基)萘-1-基]乙酰胺，35毫升10N氫氧化鈉和150毫升2-甲氧基乙醇組成的混合物，加熱二4小時。
減壓蒸干溶劑，向殘余物中加入200毫升二氯甲烷和200毫升水，加入炭黑，攪拌之。利用硅藻土過濾，分離有機相，用硫酸鎂干燥，再過濾，減壓蒸干溶劑。用二氯甲烷洗脫在硅膠色譜柱上對殘余物加以純化。得7.8克油狀物，冷卻時該產(chǎn)物可結(jié)晶，其熔點49-50℃。
4.4.1-[7-(環(huán)丙基甲氧基)萘-1-基]哌嗪在氮氣氛下加熱回流由7.7克(0.036摩爾)7-(環(huán)丙基甲氧基)萘-1-胺，6克(0.036摩爾)雙(2-氯乙基)胺的鹽酸鹽50毫升丁醇和約50毫克碘化鉀組成的混合物，回流10小時。加入2.5克(0.018摩爾)碳酸鉀，繼續(xù)加熱回流10小時。第二次，再加入1.25克(0.009摩爾)碳酸鉀，再加熱回流10小時。
蒸發(fā)丁醇，加入100毫升二氯甲烷和50毫升10％的氫氧化鈉溶解殘余物，在炭黑存在下攪拌其混合物。過濾，分離有機相，用硫酸鎂干燥，減壓蒸干溶劑后，用二氯甲烷/甲醇(90/10)混合溶劑洗脫，在硅膠色譜柱中純化共殘余物。蒸干溶劑后得4.2克油狀產(chǎn)品，直接用于下步反應(yīng)使用。
4.5.4-[2-(5-甲氧基-1H-茚-3-基)乙基]-1-[7-(環(huán)丙基甲氧基)萘-1-基]哌嗪(E)-2-丁烯二酸鹽(1∶1)在氮氣氛下緩緩加熱由1.14克(0.0033摩爾)4-甲基苯磺酸2-(5-甲氧基-1H-茚-3-基)乙酯和2克(0.007摩爾)1-[7-(環(huán)丙基甲氧基)萘-1-基]哌嗪組成的混合物，在130℃加熱達3小時。向反應(yīng)混臺物中加入20毫升10％的氫氧化鈉溶液，然后用二氯甲烷萃取。用硫酸鎂干燥有機相。減壓蒸干溶劑后，用二氯甲烷/丙酮(98/2)洗脫，在硅膠色譜柱中對殘余物進行純化，得到1.3克(0.00286摩爾)堿將該堿溶于20毫升異丙醇中，加熱溶液至回流，再加入0.33克(0.00286摩爾)反丁烯二酸。放置冷卻，過濾分出固相，在乙醇中重結(jié)晶，用乙醚洗滌后，干燥產(chǎn)品，最后得0.65克反丁烯二酸鹽、熔點154-155℃。
在下表中列出了本發(fā)明的幾個化合物的化學(xué)結(jié)構(gòu)及其物理性質(zhì)。
表中在“X”欄中，“OCH2cC3H5”代表環(huán)丙基甲氧基。在“鹽”欄中，“-”表示化合物呈堿狀態(tài)“fum”表式反丁烯二酸鹽，或(E)-2-丁烯二酸鹽括號中的比例表示堿與酸的克分子比。
實驗結(jié)果清楚地表明，本發(fā)明的化合物可作為藥物使用。
按照Sanger和Schoemaker在文獻“PsychopharmacologY”(1992)10885-92”中所描述的方法，對本發(fā)明的這些化合物作了它們對存在于大鼠腦內(nèi)海馬體的5-HT1A型5-羥色胺受體(recepteursserotoninergiques)的親和性體外實驗，這些化合物抑制了標記特異配位體[3H]-8-羥基-2-(二正丙基氨基)四氫化萘(以下用“[3H]-8-OH-DPAT”表示，此化合物見Gozlan et al.，Nature(1982)305 140-142)在受體5-HT1A上的結(jié)合。
實驗用動物為160-200克重的Sprague-Dawley雄性大鼠。將大鼠斷頭活殺，取出其大腦，切下海馬體。向海馬體中加入10倍體積的50mM Tris緩沖溶液(或每100毫克鮮組織中加入1毫升緩沖溶液)，其緩沖溶液用鹽酸將pH值調(diào)節(jié)到7.4，而后加入到Ultra-TurraxPolytronTM磨研機中，磨研此組織的時間為30秒，磨研機的轉(zhuǎn)速為其最大轉(zhuǎn)速的一半。在4℃溫度下討磨勻的組織洗滌三次，且每次都在48000×g離心力下離心10分鐘，同時將沉淀物懸浮于新的冷卻緩沖溶液中。將最后得到的沉淀物懸浮于緩沖溶液中，使其濃度為每毫升深度為50mM的緩沖溶液中含起始組織100毫克。然后在37℃溫度下培養(yǎng)10分鐘。
通過在含有10μM甲丙芐胺和3μM氟苯哌苯醚的最終體積為1毫升的緩沖溶液中培養(yǎng)100微升膜懸浮液來測定與[3H]-8-OH-DPAT(1nM)的結(jié)合。在37℃培養(yǎng)15分鐘后，用Whatman GF/BTM過濾膜過濾以回收膜狀物，并用5毫升冰冷緩沖溶液分3次洗滌之。在閃爍液中萃取膜狀物，通過液體閃爍照像法測定其放射性。將保留在過濾膜上的放射劑量定義為[3H]-8-OH-DPAT的特異結(jié)合，且當與濃度為10μM的5-羥色胺一起培養(yǎng)時，這一特異結(jié)合能夠被抑制。在[3H]-8-OH—DPAT的濃度為1μM的情況下，其特異結(jié)合相當于過濾膜上測量到的總放射性的90％。
對于所研究的化合物的每一個濃度，測定與[3H]-8-OH-DPAT結(jié)合的抑制百分率，而后得出濃度CI50，即抑制50％結(jié)合的濃度。
CI50在10-300nM之間。
對于本發(fā)明的化合物，還在體外做了對5-羥色胺受體5HT1D(存在于牛尾狀核中)的親和性的研究，結(jié)果明顯表明基本上如Heuring and Peroutka，J.Neurosci.，(1987)，7，804-903所描述的那樣，抑制了標記特異配位體[3H]-5-羥色胺的結(jié)合。
使用前．在-80℃溫度下保存牛尾狀核(noyau cande de bovin)(Collectorgane，巴黎)。向組織中加入10倍體積的50mM Tris緩沖溶液(即每100毫克鮮組織加入1毫升緩沖溶液)，緩沖溶液用鹽酸將pH調(diào)節(jié)到7.4，其組織加入到Ultra-Turrax PolytronTM磨研機中磨研30秒鐘，磨研機轉(zhuǎn)速為最大轉(zhuǎn)速的一半。在4℃的溫度下洗滌此均勻分散的組織2次，并以40000xg的離心力離心10分鐘，且每次均將沉淀物懸浮于冰冷緩沖液中。將最后得到的沉淀物懸浮于濃度為50mM的緩沖液中，并使其濃度達到每毫升濃度為50mM的緩沖液中含起始組織100毫克。在37℃溫度下培養(yǎng)15分鐘。然后，在40000xg的離心力下離心膜懸浮液10分鐘，再將沉淀物懸浮于8倍體積的培養(yǎng)介質(zhì)中，該培養(yǎng)介質(zhì)中含有Tris(50mM)，抗壞血酸(0.1％)，氯化鈣(4mM)，甲丙芐胺(10μM)，美舒麥角(Mesulergine)(100nM)，和8-羥基-二丙基氨基-四氫化萘(100nM)。并以鹽酸調(diào)節(jié)pH值至7.4。
通過在最終體積為1毫升的培養(yǎng)介質(zhì)中培養(yǎng)100微升膜懸浮液來測定與[3H]-5-羥色胺(2nM)的結(jié)合。
在37℃溫度下培養(yǎng)30分鐘后，在0～4℃溫度下培養(yǎng)5分鐘，用Whatman GF/BTM濾膜過濾收集膜狀物，用1毫升冰冷Tris 50mM緩沖液分兩次洗滌之。緩沖液的pH值是用鹽酸調(diào)節(jié)到7.4的。
在閃爍液中對濾膜進行萃取，通過液體閃爍照像法測定其放射性。將保留在濾膜上的放射性劑量定義作為[3H]-5-羥色胺的特異結(jié)合，且當與濃度為0.1μM的5-羥色胺共同培養(yǎng)時，這一特異結(jié)合可被抑制。在[3H]-5-羥色胺的濃度為2nM的情況下，其特異結(jié)合相當于過濾膜上測量到的總放射性的70％。對于所研究的化合物的每一個濃度，測定與[3H]-5-羥色胺結(jié)合的抑制百分率，而后得出抑制50％結(jié)合的濃度CI50。
在這樣的實驗中，本發(fā)明中活性最好的化合物的CI50低于30nM。
對于本發(fā)明的化合物，還在體外做了抑制螺環(huán)哌丁苯與大鼠大腦皮層中的5-羥色胺受體(5-HT2)結(jié)合的實驗。
實驗中，取出大鼠大腦，剝下皮層，于0℃溫度下，在10倍體積的一種混合液中將其分散均勻，所述的混合液每升含有50mM Tris/HCl緩沖溶液(pH＝7.4)，120mH氯化鈉和5mM氯化鉀。在40000xg的離心力下離心此均勻混合物達10分鐘，如此進行兩次，即收集沉淀物，洗滌之，在同樣的混合緩沖液中制成懸浮液，使之重新均勻分散，再離心分離。最后，按照100毫克濕組織對1毫升緩沖液的比例，以同樣的緩沖混合液稀釋最后得到的沉淀物。
這時，在10微摩爾/升甲丙芐胺的存在下，于37℃對組織預(yù)先培養(yǎng)10分鐘，而后在濃度為0.3毫微摩爾/升的3H-螺環(huán)哌丁苯(其特異活性為15-30Ci毫摩爾)及本發(fā)明的化合物的存在下，于37℃培養(yǎng)20分鐘。
然后通過Whatman GF/BTM濾膜過濾回收膜狀物，用5毫升冷緩沖液洗滌兩次。用液體閃爍照像法測定保留在濾膜上的放射性。
為了評價本發(fā)明化合物的活性，散了3H-螺環(huán)哌丁苯特異結(jié)合的抑制百分率隨起抑制作用的藥物濃度變化的曲線，由曲線圖確定抑制50％特異結(jié)合的濃度CI50以濃度為100微摩爾/升5-HT所抑制的結(jié)合定義為特異結(jié)合。
本發(fā)明的化合物的濃度CI50值在50-1500nM之間。
最后，對于本發(fā)明的化合物還在體外作了對5-羥色胺受體5HT1C親和性的研究，5HT1C存在于堵的腦脈絡(luò)叢中。實驗結(jié)果清楚地表明基本上如Pazos et al.，Eur.J.Pharmacol.，(1984)，106，539-546；Yagalof and Hartig，Mol.Pharmacol.，(1986)，26，120-125所述的那樣，這些化合物抑制了標記特異配位體[3H]美舒麥角的結(jié)合。
使用前，將腦脈絡(luò)叢(Collectorgane，巴黎)保存在-80℃的溫度下。將組織及10倍體積的蔗糖溶液(0.32H)加入到PotterTM均化器中，在0-4℃以每分鐘800轉(zhuǎn)的速度使之分散均勻。將膜懸浮液離心10分鐘(離心力1000xg，溫度4℃)，將漂浮物離心20分鐘(離心力30000xg，4℃)。將沉淀物懸浮于10倍體積的Tris 50mM緩沖液中(事先用鹽酸調(diào)節(jié)pH值至7.4)，隨后在37℃培養(yǎng)15分鐘。最后，離心懸浮液20分鐘(離心力30000xg，4℃)。再將沉淀物置于28倍體積的培養(yǎng)緩沖液中，此緩沖液中含有Tris(50mM)，抗壞血酸(0.1％)，氯化鈣(4mM)和甲丙芐胺(10μM)，且事先用鹽酸將pH調(diào)節(jié)至7.4。
通過將100微升膜懸浮液在最終體積為500微升的培養(yǎng)介質(zhì)中進行培養(yǎng)來測定[3H]美舒麥角(1nM)的結(jié)合。在37℃培養(yǎng)30分鐘后，在0-4℃培養(yǎng)5分鐘，用Whatman GF/BTM濾膜過濾收集膜狀物．過濾膜事先用0.05賄的聚亞乙基亞胺處理30分鐘，并每次用1毫升冰冷的50mM Tris緩沖液(用鹽酸調(diào)節(jié)pH至7.4)洗滌兩次。
在閃爍液中萃取過濾膜，通過液體閃爍照像法測定其放射性。將保留在濾膜上的放射劑量定義作[3H]美舒麥角的特異結(jié)合，且當與濃度為10μM的5-羥色胺共同培養(yǎng)時，這一特異結(jié)合可被抑制。在[3H]美舒麥角濃度為1nM的情況下，其特異結(jié)合相當于在濾膜上測量到的總放射性的90％。對于所研究的化合物的每一個濃度，測定與[3H]美舒麥角結(jié)合的抑制百分率，而后得到抑制50％結(jié)合的濃度CI50。
在這樣的實驗中，本發(fā)明的化合物的CI50在5-500nM之間。
對于本發(fā)明化合物的(5HT1A型)中樞活性(activite centrale)的評價是按文獻中所描述的方法在描體內(nèi)進行實驗的(H.Depoortere，Sleep 1976，3rd Europ.Congr.Sleep Res.，Montpellier 1976，358-361(Karger，Basel 1977))，即研究這些化合物對由利血平(reserpine)誘發(fā)的“pointes PGO”(ponto-géniculo-occipitales)的效應(yīng)(PGO-R實驗)。
在人工通風(fēng)的情況下，對中箭毒的貓使用待研究的化合物，研究積累劑量(靜脈注射，0.1-3毫克/公斤)的作用。向腹腔內(nèi)注射利血平(劑量為0.75毫克/公斤)，4小時之后每隔30分鐘給藥一次。借助置于皮層和深層的電極(側(cè)膝位)，測定腦電圖及相位(phasique)的活動(pointes PGO-R)。
對于所研究化合物的每一個劑量，測定pointes PGO數(shù)目減少的百分比，而后得出減少50％的有效劑量DA50。
本發(fā)明的化合物的DA50值(靜脈內(nèi)注射)低于0.3毫克/公斤。
最后，按照文獻(Corne et al.，Br.J.Pharmacol(1962)20106-120)所描述的方法對本發(fā)明的化合物作了抗5-羥色胺(5HT2型)活性的研究。即以大鼠為對象，研究這些化合物對由L-5-羥基色氨酸(L-5-HTP)引起的頭部抽搐的抑制效應(yīng)。
對小鼠(雄性CD1，Charles River France，體重18-22克)，以腹膜內(nèi)注射或口服方式按逐漸增加的劑量使用待研究的產(chǎn)品或其溶劑，皮下注射L-5-HTP的劑量為250毫克/公斤，腹膜內(nèi)注射與L-5-HTP皮下注射可同時進行，或者口服則在L-5-HTP皮下注射前60分鐘先服用這些化合物。注射L-5-HTP 45分鐘后開始數(shù)小鼠頭部抽搐的次數(shù)，對每只小鼠計時一分鐘。
對每一組實驗．計算出抽搐次數(shù)的平均值和與對照組相比變化的百分數(shù)，按照文獻(Miller and Tainter，Proc.Soc.Exp.Biol.Hed.，(1944)57，261)的作圖法，根據(jù)效應(yīng)/劑量曲線確定出DA50值(與對照組小鼠相比，抽搐平均次數(shù)減少50％的有效劑量)。
本發(fā)明的化合物的DA50值小于3毫克/公斤(腹膜內(nèi)注射)；約1.5毫克/公斤(口服)以上實驗結(jié)果表明本發(fā)明的化合物對5HT1A、5HT1D和5HT1C這些5-羥色胺受體具有很強的親和性，對5HT2受體也具有一定的親和性。體內(nèi)實驗表明，這些化合物具有5HT1A的激動劑性質(zhì)和5HT2的拮抗劑性質(zhì)。
這些實驗結(jié)果啟示人們這些化合物可以用于治療所有由5HT1A、5HT1D、5HT1C和/或5HT2等5-羥色胺受體機能障礙引起的疾病，特別是治療焦慮和抑郁等癥。
因此，本發(fā)明的這些化合物可以和適當?shù)馁x形劑一起制成各種形式適合于藥用的口服或非腸道用藥物制劑，例如片劑、糖衣丸劑、膠囊劑、膠囊、栓劑、口服或注射用溶液或懸浮液劑。用藥劑量為每日1-1000毫克活性物質(zhì)。
權(quán)利要求
1.符合下述通式(I)的化合物，該化合物可呈堿或呈加成鹽的狀態(tài)，
式中X表示氫原子，C1-C3烷氧基或環(huán)丙基甲氧基；Y表示氫原子或甲氧基。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的化合物，其特征在于X表示C1-C3烷氧基，而Y代表甲氧基。
3.根據(jù)權(quán)利要求2所述的化合物，其特征在于X代表甲氧基。
4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的化合物的制備方法，其特征在于或者是a)將通式(II)表示的1H-茚-3-乙酸衍生物與還原劑反應(yīng)，
式中Y與權(quán)利要求1定義的相同，生成由通式(III)表示的醇，
然后用4-甲基苯磺酰氯處理該醇以生成由通式(IV)表示的衍生物，
最后，讓這一化合物與通式(V)表示的哌嗪衍生物進行反應(yīng)，
通式(V)中X與權(quán)利要求1定義的相同或者是b)首先讓所述的由通式(II)表示的1H-茚-3-乙酸衍生物與N，N’-羰基二咪唑反應(yīng)，以便原地得到相應(yīng)的咪唑化物，而后使之與所述的通式(V)代表的哌嗪衍生物反應(yīng)，以便得到由通式(VI)表示的酰胺
最后，用還原劑還原所述的酰胺。
5.藥物，其特征在于它是由權(quán)利要求1所述的化合物組成的。
6.藥物組合物，其特征在于含有與一種賦形劑配合在一起的根據(jù)權(quán)利要求1所述的化合物。
全文摘要
由通式(I)表示的化合物及該化合物在治療疾病中的應(yīng)用，式中X代表氫原子，C
文檔編號A61P25/24GK1112554SQ95101928
公開日1995年11月29日 申請日期1995年2月15日 優(yōu)先權(quán)日1994年2月16日
發(fā)明者P·曼努里, D·奧比茨, M·佩諾特, M·塞夫林, P·喬治 申請人:合成實驗室公司