專利名稱：胰島素栓劑的制法的制作方法
技術領域：
本發(fā)明是涉及藥物的生產(chǎn)方法，特別是胰島素栓劑的生產(chǎn)方法。
到目前為止，治療糖尿病最有效的藥物仍是胰島素。目前臨床上給胰島素的主要方法是皮下注射，該方法的缺點是使用不方便、局部疼痛、有發(fā)生感染的機會、長時間注射會引起皮膚硬化、脂肪組織萎縮等；利用直腸栓劑給藥被認為代替上述皮下注射的最好方法之一。
在通常情況下，直腸吸收蛋白質(zhì)類物質(zhì)胰島素的能力很弱，因此在胰島素栓劑中需加入吸收促進劑。十幾年來，國際上研制了包含各種吸收促進劑的胰島素栓劑，但其主要缺點是(1)吸收率較低；(2)吸收促進劑對直腸粘膜產(chǎn)生不可逆損害；水楊酸鈉類物質(zhì)被認為是目前較好的胰島素吸收促進劑，雖無上述第二個缺點，但仍存在第一個缺點，即吸收率較低。
現(xiàn)將目前效果較好的以水楊酸鈉或苯甲酸鈉以及它們的衍生物作為吸收促進劑的胰島素栓劑的制法，例如，日本專利公開號為J62267238的“胰島素栓劑的制法”介紹如下1.在整個栓劑中，胰島素的重量占0.1-1％，吸收促進劑占2-5％和/或水溶性糖類占0.5-30％，上述各物質(zhì)用水溶液溶解，干燥后得粉末，將粉末與基質(zhì)混合后制成栓劑。
2.吸收促進劑可以是[I]，結(jié)構所示的物質(zhì) (R可用-H、-OH、-OCH3、-Cl、-Br等代替)3.吸收促進劑也可是[II]結(jié)構所示的物質(zhì) (X可用-Cl、-Br等代替)4.水溶性糖類可以是乳糖、甘露糖醇、D-赤蘚糖、L-阿拉伯糖、D-核糖、D-木糖、D-葡萄糖、D-甘露糖、D-半乳糖、D-果糖、L-山梨糖、海藻糖、麥芽糖、纖維二糖、龍膽二糖、密二糖、龍膽三糖、松三糖。
評價胰島素栓劑的效果通常是看其降低血糖的幅度或相對幅度(血糖下降百分率)(Camx)；下降最大的幅度所需時間(tmax)和血糖下降持續(xù)時間(MRT)。上述方法制成的胰島素栓劑的缺點具體表現(xiàn)在Cmax幅度不大、MRT短。例如，用上述方法對健康狗做試驗的結(jié)果如下1.0IU/公斤體重時(IU-胰島素國際單位，本文中IU其意義同此)，Cmax平均為60％；MRT約為2-2.5小時。造成這些缺點的主要原因如下1.直腸粘膜對蛋白質(zhì)多肽等大分子吸收能力差，雖然在栓劑中加入了吸收促進劑，但效果不甚明顯；2.栓劑中的胰島素在直腸中吸收持續(xù)時間短，其主要原因是栓劑在直腸內(nèi)釋放的胰島素容易被腸道內(nèi)蛋白水解酶分解。Scot、Harner、Laskowski等人分別進行了報導胰島素與胰蛋白酶一起孵化9分鐘，胰島素的活性即損失50％。[見文獻Scot.D.AJ.Biol.Chem.63，641(1925)；Harner B K；Nash.TJ.Biol.Chem.97，443(1932)；LaskowskiM；Haesseler M.A；Science 127，115(1958)]。在直腸內(nèi)雖然幾乎沒有胰蛋白酶，但直腸內(nèi)有大量細菌，它們體內(nèi)含有大量蛋白水解酶，能夠分解胰島素，故胰島素在直腸內(nèi)損失較多，導致胰島素在直腸中吸收持續(xù)時間短。
本發(fā)明的目的就是針對上述問題，提供一種增強直腸對胰島素的吸收能力，釋放的胰島素在腸道內(nèi)存續(xù)時間長的胰島素栓劑的制法。
本發(fā)明的目的是這樣實現(xiàn)的將占栓劑總重量0.001％-1％的胰島素與占栓劑總重量的15％-50％的吸收促進劑和/或占栓劑總重量的0.5％-30％的水溶性糖類和占栓劑總重量0.5％-30％的抑菌劑在水溶液中溶解并攪拌，干燥后得粉末，將其粉末與含有占栓劑總重量的0.5％-30％的月桂氮酮或有機溶媒的基質(zhì)均勻混合、冷卻成型即成。
本發(fā)明的主要優(yōu)點1.增強直腸對胰島素的吸收功能在本發(fā)明的栓劑基質(zhì)中加入一定量的月桂氮酮或有機溶媒(例如二甲基亞楓等)可引起直腸粘膜蛋白構型可逆性變化，使組織膨脹、疏松、構成間隙而更利于藥物滲透；2.胰島素在腸道內(nèi)存續(xù)時間長直腸內(nèi)有大量細菌，細菌體內(nèi)有能水解胰島素的蛋白水解酶，在本發(fā)明的栓劑中加入一定量抑菌劑，如甲硝唑等來抑制這些細菌，從而達到了保護胰島素，延長了胰島素在直腸中存在的時間，也就是延長了胰島素在直腸中的吸收持續(xù)時間，即增加胰島素的吸收量。
實踐證明本發(fā)明的胰島素栓劑的綜合效果是很明顯的，即胰島素的用量減少、血糖降低輻度較大、作用時間長。附表1列出本發(fā)明制出的胰島素栓劑同上述日本專利(J62267238)所介紹的方法制出胰島素栓劑的實驗結(jié)果相比較的情況(胰島素用量為1.0IU/公斤體重)，從表中可以看出，本發(fā)明方法制出的胰島素栓劑比日本專利(J662267238)所介紹的方法制出胰島素栓劑在血糖降低最大百分率(Cmax)較好，而在血糖降低持續(xù)時間上則比日本專利(J662267238)所介紹的方法制出的栓劑增加一倍。
實施例1制出均一的含有胰島素粉末將水楊酸鈉3克、甲硝唑0.5克分別加入9毫升4℃的0.01NNaOH溶液(含吐溫80為0.003％)中(吐溫80即Tween-80)，在4℃條件下充分攪拌后(允許最后有少量不溶物)，4℃條件下待用。取胰島素粉末(28IU/毫克)溶于4℃條件0.0055NNaOH溶液(含吐溫80為0.003％)中，使?jié)舛葹?2.5IU/毫升，輕輕攪拌使之完全溶解后，取320微升在低溫下加入前述溶液中，使之充分混合，迅速冷凍干燥，將干燥物用研缽研碎后，過篩(孔徑為250微米)得均一粉末，4℃條件下待用。
栓劑基質(zhì)的調(diào)制分別取混合脂肪酸甘油脂6.3克、大豆卵磷脂1.818克，80℃水浴加熱，攪拌使它們完全融化，再加入月桂氮酮0.5克，攪拌使它們均勻混合，保持42℃待用。
胰島素栓劑的制造將上述的含有胰島素均一粉末迅速加入42℃上述基質(zhì)中，充分攪拌均勻，澆注冷卻成型，4℃保存。
這樣制成的胰島素栓劑含胰島素2.0IU/1.212克栓劑，重量百分比為0.0059％，含甲硝唑4.1％，含水楊酸鈉24.8％，含月桂氧酮4.1％，大豆卵磷脂15％，混合脂肪酸甘油脂占52％。
在制取每1.212克栓劑含有胰島素分別為1.0IU和3.0IU的胰島素栓劑時，利用上述相同方法，只是在制取均一粉末時，分別加入160毫升和480毫升上述胰島素溶液。這樣制成的栓劑含胰島素重量百分比分別為0.0029％和0.0088％。
比較例日本專利J62267238的制法制造均一含有胰島素的粉末將水楊酸鈉21.42克加入132.1毫升4℃的0.005M檸檬酸溶液(含0.001％吐溫-80)中，低溫充分攪拌后，加入5.1毫克胰島素粉末(28IU/毫克)，使之完全溶解，混合均勻，迅速冷凍干燥成粉末，粉末用研缽研碎后，過篩(孔徑350微米)后，4℃條件下待用。
栓劑基質(zhì)的調(diào)制取混合脂肪酸甘油脂45.0克，大豆卵磷脂5.0克，在80℃的水浴中加熱，攪拌使它們完全融化，混勻后，保持42℃待用。
胰島素栓劑的制造同實施例1。
這樣制成的胰島素栓劑含胰島素2.0IU/克栓劑，重量百分比為0.007％，水楊酸鈉占30％，大豆卵磷脂占7％，混合脂肪酸甘油脂占63％。
實驗動物用新西蘭大耳白兔，雄性，體重1.8-2.2公斤，每組3只，將前述實施例1、比較例的方法制取的栓劑分別給予各組兔。給藥前后耳緣靜脈采血，分別測定各兔給藥前后血糖濃度變化。

圖1所示實施例1制成的栓劑給健康兔前后各組兔血糖濃度下降百分率。給藥前血糖濃度為91.4±15.1毫克/100毫升。各曲線分別代表胰島素給藥量為栓劑0.5IU/公斤(-)，1.0IU/公斤(·-·)，1.5IU/公斤(△-△)和肌注0.4IU/公斤(……)的結(jié)果。圖2表示為比較例制成的栓劑給健康兔前后各組兔血糖下降百分率。給藥前兔血糖濃度為89.9±17.1毫克/100毫升。胰島素用量為1.0IU/公斤。從圖2中可以看出比較例的Cmax為61％，達到最低濃度所需時間tmax為45分鐘，MRT為2.5小時。從圖1可以看出用實施例1的栓劑，1.0IU/公斤的曲線Cmax為57％，更重要的是MRT為5小時，遠遠長于比較例的栓劑的2.5小時，在降血糖輻度上和降血糖持續(xù)時間上，本發(fā)明的效果明顯好于日本專利J62267238。本發(fā)明的胰島素栓劑量為1.0IU/公斤時，約相當于肌注0.4IU/公斤；栓劑為1.5IU/公斤時，比1.0IU/公斤降糖效果更為明顯。
穩(wěn)定性實驗將實施例1方法制成的栓劑(2.0IU/1.212克)在4℃條件下存放一個月，再重復以上動物實驗，結(jié)果與圖1的1.0IU/公斤曲線相同。
實施例2將實施例1的月桂氮酮改用為二甲基亞楓，其余同實施例1。本實施例中二甲基亞楓含量占4.1％，其余各成份含量(除月桂氮酮外)同實施例1。
實施例3和實施例4本栓劑制法同實施例1，但各種成份含量和百分比分別見附表2和附表3。
圖3顯示實施3中甲硝唑含量分別為1.0％(-)和10.0％(·-·)的栓劑降低正常兔血糖的情況。該組兔給藥前的血糖為82.0±8.0毫克/100毫升，栓劑的胰島素量為1.0IU/公斤。由圖3和圖1可以看出，甲硝唑的量能夠決定Cmax和tmax甚至MRT。甲硝唑越少，則Cmax輻度越小，tmax越小、MRT也越短。反映出胰島素由于缺少甲硝唑保護，被直腸內(nèi)細菌蛋白水解酶水解而損失的情況。但甲硝唑過多并不能明顯改變Cmax、tmax和MRT，只有在含量適當情況下，如4.1％甲硝唑才能有效地增強胰島素的作用。
圖4顯示實施例4中月桂氮酮含量分別為1％(-)和10％(·-·)的栓劑降低正常兔血糖的情況。
該組兔給藥前的血糖為89.0±14.6毫克/100毫升，栓劑胰島素量均為1.0IU/公斤。由圖4和圖1可以看出月桂氮酮的量能決定Cmax，月桂氮酮越少，則Cmax輻度越小，反之則越大。由此表明月桂氮酮能增強直腸粘膜對胰島素的通透性能，但月桂氮酮量過多，也不能明顯改變Cmax，它只能在適量情況下起明顯的作用，如含量4.1％。
實施例5制取均一的含有胰島素粉末將水楊酸鈉3克、甲硝唑0.5克、D-半乳糖0.969克分別加入9毫升4℃的0.01NNaOH溶液(含吐溫-80為0.003％)中，其余同實施例1的含有胰島素的均一粉末制法。
栓劑基質(zhì)的調(diào)制分別取混合脂肪酸甘油脂5.34克、大豆卵磷脂1.818克，在80℃水浴加熱、攪拌，使它們完全融化，再分別加入月桂氮酮0.25克，二甲基亞楓0.25克，攪拌使它們混合均勻，保持在42℃條件下待用。
胰島素栓劑制取同實施例1。
這樣制成的胰島素栓劑的胰島素含量為2.0IU/1.212克，重量百分比為0.0059％；甲硝唑4.1％，月桂氮酮和二甲基亞楓分別占2.05％，D-半乳糖占8.0％。
實施例6該方法制成的胰島素栓劑除胰島素含量外，其余同實施例1。
用本方法制含有胰島素均一粉末時，向其中加入1.6毫升實施例1的胰島素溶液。
用本方法制成的胰島素栓劑的胰島素含量為10IU/1.212克栓劑，重量百分含量為0.029％。其余成份含量同實施例1。
當制胰島素含量分別為5.0IU/1.212克栓劑和15IU/1.212克栓劑時，只需在制造含有胰島素均一粉末時，分別向其中加入0.8毫升和2.4毫升實施例1中的胰島素溶液即可。這兩種栓劑中的胰島素重量百分比分別為0.015％和0.044％。
用9.0-11.0公斤雄性雜種狗，每組三只，將實施例6方法制成的胰島素栓劑給予各組狗，給藥前后取血，分別測定各血樣內(nèi)的血糖含量。給藥前的血糖含量為93.5±9.4毫克/100毫升。
圖5顯示實施例6制成的栓劑給予各組狗后，血糖下降百分率曲線，各曲線分別代表胰島素劑量分別為栓劑0.5IU/公斤(-)，1.0UI/公斤(·-·)，1.5IU/公斤(△…△)，肌注胰島素0.4IU/公斤(……)的結(jié)果。
由這組曲線可以看出，在每公斤體重相同胰島素劑量栓劑情況下，健康狗與健康兔的血糖降低情況即tmax、Cmax和MRT相似。1.0IU/公斤體重時，tmax為1.5小時，Cmax為60％，MRT為5小時。遠遠優(yōu)于日本專利J62267238的方法制取的栓劑降低正常狗的血糖結(jié)果Cmax為47％-72％，MRT為2-2.5小時。
附表1Cmax(％)MRT(小時)
附表2
各栓劑胰島素含量均為2.0IU/1.212的栓劑，重量百分比為0.059％。附表權利要求
1.胰島素栓劑的制法是將占栓劑總重量0.001％-1％的胰島素與占栓劑總重量的15％-50％的吸收促進劑和/或占栓劑總重量的0.5％-30％的水溶性糖類和占栓劑總重量0.5％-30％的抑菌劑在水溶液中溶解并攪拌、干燥后得粉末，將其粉末與含有占栓劑總重量的0.5％-30％的月桂氮酮或有機溶媒的基質(zhì)均勻混合、冷卻成型即成。
2.根據(jù)權利要求1所述的胰島素栓劑，其特征在于抑菌劑是甲硝唑。
3.根據(jù)權利要求1所述的胰島素栓劑，其特征在于有機溶媒是二甲基亞楓。
4.根據(jù)權利要求2所述的胰島素栓劑，其特征在于甲硝唑為4.1％。
5.根據(jù)權利要求3所述的胰島素栓劑，其特征在于二甲基亞楓為4.1％。
6.根據(jù)權利要求1所述的胰島素栓劑，其特征在于月桂氮酮為4.1％。
全文摘要
本發(fā)明是涉及藥物的生產(chǎn)方法，特別是胰島素栓劑的生產(chǎn)方法。本發(fā)明就是將胰島素與吸收促進劑和/或水溶性糖類和抑菌劑在水溶液中溶解并攪拌，干燥后得粉末，將其粉末與含有月桂氮酮或有機溶媒的基質(zhì)均勻混合、冷卻成型即成。本發(fā)明可增強直腸對胰島素的吸收功能，并具有使胰島素在腸道內(nèi)存續(xù)時間長的特點。
文檔編號A61K38/28GK1139578SQ9511184
公開日1997年1月8日 申請日期1995年7月3日 優(yōu)先權日1995年7月3日
發(fā)明者馬鳴超, 王捷, 廖萬國, 馬驥 申請人:馬鳴超