專利名稱：：含有阿帕芬作活性成分的眼用水溶液的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
：本發(fā)明涉及含有阿帕芬(apafant)作活性成分的眼用水溶液，以及通過(guò)降低基于溶液中所含添加劑的離子強(qiáng)度(0.05或0.05以下)使阿帕芬在該眼用水溶液中穩(wěn)定化的方法。
背景技術(shù)：
：阿帕芬是化學(xué)名稱為4-(2-氯苯基)-9-甲-2-[3-(4-嗎啉基)-3-丙酰-1-基]-6H-噻吩并[3，2-f][1，2，4]-三唑并[4，3-a][1，4]二氮雜的化合物(見(jiàn)以下結(jié)構(gòu)式[1])，已知它對(duì)三唑并二氮雜草血小板活化因子(下文中稱之為PAF)具有高拮抗活性(日本公開特許公報(bào)176591/1986)。PAF是炎癥化學(xué)介質(zhì)，它具有很高的生理活性，并證明其與炎癥(例如哮喘病、腎炎)、彌散性血管內(nèi)凝血綜合癥和休克有關(guān)。已知對(duì)PAF具有強(qiáng)拮抗作用的阿帕芬具有多種醫(yī)藥用途。例如WO93/07129公開了阿帕芬適于用作骨質(zhì)疏松的治療劑，因其對(duì)骨吸收具有抑制作用。日本公開特許公報(bào)106826/1991公開了阿帕芬適用于治療心臟病如心力衰竭，因?yàn)榘l(fā)現(xiàn)其可抑制脊骨斷裂的小鼠心臟內(nèi)β-腎上腺素能受體介導(dǎo)的收縮力下降。WO90/01927公開了阿帕芬可用于自身免疫疾病，因?yàn)榘l(fā)現(xiàn)其能使患有特發(fā)性血小板減少性紫癜的患者體內(nèi)的血小板增加。還報(bào)道了阿帕芬可濃度依賴性地提高過(guò)敏性休克患者的存活率(J.Pharmacol.Exp.Ther.，260,748-755(1992))，并且對(duì)內(nèi)毒素或PAF引起的高血壓具有拮抗作用(Eur.J.Pharmacol.，135,117-122(1987))。另外，還報(bào)道了阿帕芬在臨床藥理學(xué)雙盲試驗(yàn)中能完全防止因采用PAF吸入劑產(chǎn)生的氣道內(nèi)耐藥性的增加，并能抑制心血管病的發(fā)展和PAF引起的副反應(yīng)(Clin.Pharmacol.Ther.，47,456-462(1990))。眼用方面，WO91/18608公開了阿帕芬還能用作止癢劑局部涂敷在眼部等部位，因其能抑制PAF活性引起的瘙癢。但并未公開過(guò)含有阿帕芬作為活性成分的眼用水溶液。因此，為改進(jìn)含有用作藥物活性成分的阿帕芬的眼用水溶液，研究了阿帕芬在眼用水溶液中的穩(wěn)定性。但問(wèn)題在于采用常規(guī)技術(shù)進(jìn)行配制無(wú)法得到穩(wěn)定的含阿帕芬的眼用水溶液。因此，為改進(jìn)含有阿帕芬作活性成分的眼用水溶液，必須解決阿帕芬在眼用水溶液中的不穩(wěn)定的問(wèn)題。本發(fā)明人為提供含阿帕芬作活性成分并具有極好的穩(wěn)定性的眼用水溶液而作了大量研究。結(jié)果，本發(fā)明人發(fā)現(xiàn)可通過(guò)將眼用溶液的離子強(qiáng)度調(diào)節(jié)至0.05或0.05以下而制備出具有極好穩(wěn)定性的眼用水溶液。本發(fā)明公開本發(fā)明涉及含有阿帕芬和添加劑的眼用水溶液，其中通過(guò)將離子強(qiáng)度降至0.05或0.05以下以使阿帕芬穩(wěn)定，還涉及使阿帕芬穩(wěn)定化的方法(下文中的溶液均指本發(fā)明的眼用溶液)。本發(fā)明的眼用溶液中的添加劑是眼用制劑中常用的試劑，如pH調(diào)節(jié)劑(例如，鹽酸、氫氧化鈉)；具有調(diào)節(jié)滲透壓比的作用的等滲劑，如非電解質(zhì)(例如甘油、丙二醇、甘露醇、葡萄糖)和電解質(zhì)(例如，氯化鈉、氯化鉀)；緩沖劑(例如磷酸二氫鈉、磷酸氫二鈉、磷酸鈉、乙酸鈉)；穩(wěn)定劑(例如檸檬酸鈉、乙二胺四乙酸鈉)；以及防腐劑(例如氯芐烷銨，對(duì)羥苯甲酸甲酯)。適于采用選自上述添加劑的一種或多種。離子強(qiáng)度由本發(fā)明眼用溶液的添加劑所得的電解質(zhì)中各種離子(i)的離子強(qiáng)度來(lái)表示，并且是由以下公式計(jì)算出的數(shù)值。添加劑的總離子強(qiáng)度Ci離子的摩爾濃度Zi離子值可選用的本發(fā)明眼用溶液的離子強(qiáng)度是0.05或0.05以下。特別優(yōu)選離子強(qiáng)度為0.005或0.005以下，并可以是無(wú)限近似0的數(shù)值。在本發(fā)明眼用溶液中用作活性成分的阿帕芬的濃度可依據(jù)癥狀而定，其濃度優(yōu)選為0.01-1％(重量/體積)，更優(yōu)選0.1-1％(重量/體積)。在制備眼用溶液時(shí)，一般優(yōu)選將pH和滲透壓比調(diào)節(jié)到眼用制劑適用的的范圍內(nèi)。采用pH調(diào)節(jié)劑如鹽酸或氫氧化鈉，或磷酸鹽緩沖劑來(lái)調(diào)節(jié)pH。一般采用電解等滲劑如氫氧化鈉調(diào)節(jié)滲透壓比。但也可采用不含等滲劑的溶液用作眼用溶液。為調(diào)節(jié)本發(fā)明眼用溶液的滲透壓比，優(yōu)選加入非電解質(zhì)等滲劑，如甘油、丙二醇、甘露醇或葡萄糖，它們與離子強(qiáng)度無(wú)關(guān)。在非電解質(zhì)等滲劑中，特別優(yōu)選的等滲劑是甘油(例如在日本藥典中定義的甘油或濃縮甘油)。眼用溶液中甘油的含量?jī)?yōu)選是1.2-3.0％(重量/體積)?？蓪B透壓比調(diào)節(jié)至眼用制劑適用的范圍內(nèi)，并且優(yōu)選是0.5-2.0。根據(jù)報(bào)道，PAF拮抗劑阿帕芬適用于骨質(zhì)疏松(WO93/07129)，心臟病如心力衰竭(日本公開特許公報(bào)106826/1991)，以及自身免疫疾病(WO90/01927)，提高過(guò)敏性休克患者的存活率(J.Pharmacol.Exp.Ther.，260，748-755(1992))，對(duì)內(nèi)毒素或PAF引起的高血壓具有拮抗作用(Eur.J.Pharmacol.，135，117-122(1987))，能防止因采用PAF吸入劑產(chǎn)生的氣道內(nèi)耐藥性的增加，并能抑制心血管病的發(fā)展和PAF引起的副反應(yīng)(Clin.Pharmacol.Ther.，47，456-462(1990))等。眼用方面，公開了阿帕芬用作止癢劑用于眼部的用途(WO91/18608)。但問(wèn)題在于眼用制劑在穩(wěn)定性方面存在缺點(diǎn)。本發(fā)明人為提供含阿帕芬的具有極好穩(wěn)定性的眼用水溶液作了大量研究。由于阿帕芬是難溶于水的物質(zhì)，不經(jīng)特殊設(shè)計(jì)很難將其配制成眼用水溶液。(1)首先，本發(fā)明人注意到阿帕芬是堿性物質(zhì)，并對(duì)按照多數(shù)常規(guī)方法將其溶于酸然后用堿調(diào)節(jié)pH的方法進(jìn)行了研究。首次嘗試中，將阿帕芬溶于鹽酸，然后用氫氧化鈉調(diào)節(jié)pH，并加入用作電解質(zhì)等滲劑的氯化鈉調(diào)節(jié)滲透壓。但發(fā)現(xiàn)阿帕芬分解，并且在制劑中無(wú)法達(dá)到令人滿意的穩(wěn)定性。因此，研究了采用非電解質(zhì)等滲劑甘油時(shí)阿帕芬的穩(wěn)定性，未發(fā)現(xiàn)阿帕芬分解。(2)經(jīng)進(jìn)一步廣泛研究，發(fā)現(xiàn)阿帕芬可溶于熱水，即使將所得的溶液冷卻至室溫也不會(huì)出現(xiàn)結(jié)晶沉淀，阿帕芬在溶液中穩(wěn)定。基于以上發(fā)現(xiàn)研制出眼用水溶液。發(fā)現(xiàn)可通過(guò)將阿帕芬溶于熱水，將所得的溶液冷卻至室溫，并加入所需量的pH調(diào)節(jié)劑(緩沖劑)和等滲劑，從而得到穩(wěn)定眼用水溶液。對(duì)(1)和(2)的發(fā)現(xiàn)進(jìn)行綜合分析，發(fā)現(xiàn)含阿帕芬作為活性成分的眼用水溶液的離子強(qiáng)度會(huì)極大地影響阿帕芬的穩(wěn)定性，并且可通過(guò)降低離子強(qiáng)度獲得穩(wěn)定的眼用水溶液。另外，發(fā)現(xiàn)眼用水溶液的離子強(qiáng)度應(yīng)為0.05或0.05以下。特別優(yōu)選0.005或0.005以下。本發(fā)明主要基于上述(1)和(2)的理論。首先，根據(jù)上述理論(1)，通過(guò)將阿帕芬溶于酸、并用堿中和所得溶液的方法制備水溶液。在這種情況下，其中的中和步驟中，離子強(qiáng)度接近允許范圍的上限。但可通過(guò)加入甘油、丙二醇、甘露醇、葡萄糖等非電解質(zhì)等滲劑得到所需的穩(wěn)定眼用水溶液。然后根據(jù)理論(2)，通過(guò)將阿帕芬溶于熱水中，并在所得溶液中加入pH調(diào)節(jié)劑和等滲劑的方法制備水溶液。在這種情況下，其中阿帕芬的溶解步驟中不會(huì)產(chǎn)生離子強(qiáng)度，并且隨后的操作具有相當(dāng)?shù)淖杂啥?。因此，不僅可以采用甘油、丙二醇、甘露醇、葡萄糖等非電解質(zhì)等滲劑，還可采用氯化鈉、氯化鉀等電解質(zhì)等滲劑。如需要，在上述制備方法中阿帕芬溶解后，還可以加入所需量的緩沖劑如磷酸二氫鈉、磷酸氫二鈉、磷酸鈉或乙酸鈉，穩(wěn)定劑如檸檬酸鈉或乙二胺四乙酸鈉，防腐劑如氯芐烷銨或?qū)αu苯甲酸酯等。加入這些成分后所得眼用溶液的離子強(qiáng)度應(yīng)為0.05或0.05以下。另外，本眼用溶液的pH應(yīng)在眼用制劑適用的范圍內(nèi)，并優(yōu)選4-8。實(shí)施本發(fā)明的最佳方式以下所示的是本發(fā)明眼用溶液的配制實(shí)施例，它們僅用于更好地理解本發(fā)明，但對(duì)本發(fā)明的范圍不構(gòu)成任何限制。實(shí)施例1將阿帕芬(1g)攪拌加入0.1N鹽酸(45毫升)中，至完全溶解。在溶液中加入0.1N氫氧化鈉(45毫升)，攪拌該混合物。在其中加入微量鹽酸或氫氧化鈉，將pH調(diào)節(jié)至7.4，然后加入無(wú)菌純水使總體積達(dá)100毫升。最后將所得的無(wú)色透明水溶液過(guò)濾滅菌，制備出1％(重量/體積)含阿帕芬的眼用水溶液(離子強(qiáng)度μ＝0.045計(jì)算值)。實(shí)施例2在實(shí)施例1中制得的眼用溶液中加入1.8g甘油(日本藥典中的濃縮甘油)用以調(diào)節(jié)滲透壓比，得到眼用水溶液(離子強(qiáng)度μ＝0.045計(jì)算值)。實(shí)施例3將阿帕芬(1g)攪拌加入0.1N鹽酸(45毫升)中，至完全溶解。在溶液中加入0.1N氫氧化鈉(45毫升)，甘油(日本藥典中的濃縮甘油)(1.8g)和氯芐烷銨(5mg)，攪拌該混合物。在其中加入微量鹽酸或氫氧化鈉，將pH調(diào)節(jié)至7.4，然后加入無(wú)菌純水使總體積達(dá)100毫升。最后將所得的無(wú)色透明水溶液過(guò)濾滅菌，制備出1％(重量/體積)含阿帕芬的眼用水溶液(離子強(qiáng)度μ＝0.045計(jì)算值)。實(shí)施例4按與實(shí)施例3類似的方法制備0.1％(重量/體積)含阿帕芬的眼用水溶液(離子強(qiáng)度μ＝0.045計(jì)算值)。實(shí)施例570-80℃下，將阿帕芬(1g)攪拌加入無(wú)菌純水(70毫升)中，至完全溶解。將所得的水溶液在室溫下冷卻。在其中加入微量鹽酸或氫氧化鈉，將pH調(diào)節(jié)至7.4，然后加入無(wú)菌純水使總體積達(dá)100毫升。最后將所得的無(wú)色透明水溶液過(guò)濾滅菌，制備出1％(重量/體積)含阿帕芬的眼用水溶液(離子強(qiáng)度μ＝0計(jì)算值)。實(shí)施例6向?qū)嵤├?中制得的眼用溶液中加入2.6g甘油(日本藥典中的濃縮甘油)用以調(diào)節(jié)滲透壓比，得到眼用水溶液(離子強(qiáng)度μ＝0計(jì)算會(huì)值)。實(shí)施例770-80℃下，將阿帕芬(1g)攪拌加入無(wú)菌純水(70毫升)中，至完全溶解。將所得的水溶液在室溫下冷卻。在其中加入甘油(日本藥典中的濃縮甘油)(2.5g)，二水合磷酸二氫鈉(50mg)和氯芐烷銨(5mg)，使它們均溶解。在其中加入微量鹽酸或氫氧化鈉，將pH調(diào)節(jié)至6.0，然后加入無(wú)菌純水使總體積達(dá)100毫升。最后將所得的無(wú)色透明水溶液過(guò)濾滅菌，制備出1％(重量/體積)含阿帕芬的眼用水溶液(離子強(qiáng)度μ＝0.003計(jì)算值)。實(shí)施例8按與實(shí)施例7類似的方法制備0.1％(重量/體積)含阿帕芬的眼用水溶液(離子強(qiáng)度μ＝0.003計(jì)算值)。表1中各實(shí)施例的組分由重量％(重量/體積)，體積％(體積/體積)或摩爾濃度(M)來(lái)表示。表1</tables>(a)鹽酸(b)氫氧化鈉(c)日本藥典中的濃縮甘油(d)二水合磷酸二氫鈉對(duì)照實(shí)施例1將阿帕芬(1g)攪拌加入0.1N鹽酸(45毫升)中，至完全溶解。在溶液中加入0.1N氫氧化鈉(45毫升)和氯化鈉(153mg)，攪拌該混合物。在其中加入微量鹽酸或氫氧化鈉，將pH調(diào)節(jié)至7.4，然后加入無(wú)菌純水使總體積達(dá)100毫升。最后將所得的無(wú)色透明水溶液過(guò)濾滅菌，制備出1％(重量/體積)含阿帕芬的眼用水溶液(離子強(qiáng)度μ＝0.071計(jì)算值)。對(duì)照實(shí)施例2將阿帕芬(1g)攪拌加入0.1N鹽酸(45毫升)中，至完全溶解。在溶液中加入0.1N氫氧化鈉(45毫升)和十二水合磷酸氫二鈉(358mg)，攪拌該混合物。在其中加入微量鹽酸或氫氧化鈉，將pH調(diào)節(jié)至7.4，然后加入無(wú)菌純水使總體積達(dá)100毫升。最后將所得的無(wú)色透明水溶液過(guò)濾滅菌，制備出1％(重量/體積)含阿帕芬的眼用水溶液(離子強(qiáng)度μ＝0.075計(jì)算值)。對(duì)照實(shí)施例3將阿帕芬(1g)攪拌加入0.1N鹽酸(45毫升)中，至完全溶解。在溶液中加入0.1N氫氧化鈉(45毫升)和十二水合磷酸氫二鈉(3.58g)，攪拌該混合物。在其中加入微量鹽酸或氫氧化鈉，將pH調(diào)節(jié)至7.4，然后加入無(wú)菌純水使總體積達(dá)100毫升。最后將所得的無(wú)色透明水溶液過(guò)濾滅菌，制備出1％(重量/體積)含阿帕芬的眼用水溶液(離子強(qiáng)度μ＝0.345計(jì)算值)。表2中各對(duì)照實(shí)施例的組分由重量％(重量/體積)，體積％(體積/體積)或摩爾濃度(M)來(lái)表示。表2(a)鹽酸(b)氫氧化鈉(c)十二水合磷酸氫二鈉制劑性質(zhì)試驗(yàn)穩(wěn)定性試驗(yàn)(離子強(qiáng)度對(duì)阿帕芬剩余百分比的影響)采用以下方法研究活性成分阿帕芬的剩余百分比，用以研究本發(fā)明眼用溶液的穩(wěn)定性。實(shí)驗(yàn)方法在玻璃容器中裝入被測(cè)制劑，在80℃下保存3天、6天和14天，采用高效液相色譜法測(cè)定制劑中阿帕芬的含量。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表3所示的是具有不同的離子強(qiáng)度的1％(重量/體積)含阿帕芬的眼用水溶液中阿帕芬的剩余百分比，作為某些實(shí)施例的實(shí)驗(yàn)結(jié)果。表3</tables>-未實(shí)施如表3所示，阿帕芬的分解隨離子強(qiáng)度增加而增進(jìn)。但即使將制劑在上述強(qiáng)化的條件下保存14天，在離子強(qiáng)度為0.045或0.045以下的制劑中，阿帕芬的剩余百分比仍為93％或更高。特別是，制劑經(jīng)14天保存后，在離子強(qiáng)度為0.003或0.003以下的制劑中，阿帕芬的剩余百分比為97％或更高，這時(shí)，沒(méi)有離子強(qiáng)度對(duì)阿帕芬的剩余百分比的影響。由上述結(jié)果可知，本發(fā)明的眼用溶液具有極好的穩(wěn)定性，并且適于用作含阿帕芬作為活性成分的眼用水溶液。工業(yè)實(shí)用性本發(fā)明涉及含有阿帕芬作活性成分的眼用水溶液，以及通過(guò)降低基于溶液中所含的添加劑的離子強(qiáng)度(0.05或0.05以下)使阿帕芬在該眼用水溶液中穩(wěn)定化的方法。權(quán)利要求1.一種穩(wěn)定的眼用水溶液，其中含有阿帕芬和添加劑，該溶液的離子強(qiáng)度為0.05或0.05以下。2.權(quán)利要求1的眼用水溶液，其中的離子強(qiáng)度為0.005或0.005以下。3.權(quán)利要求1或2的眼用水溶液，其中阿帕芬的濃度為0.01-1％(重量/體積)。4.權(quán)利要求1或2的眼用水溶液，其中阿帕芬的濃度為0.1-1％(重量/體積)。5.權(quán)利要求1-4中任一權(quán)利要求中的眼用水溶液，其中的添加劑是非電解質(zhì)等滲劑。6.權(quán)利要求5的眼用水溶液，其中非電解質(zhì)等滲劑是甘油、丙二醇、甘露醇或甘油。7.權(quán)利要求5的眼用水溶液，其中非電解質(zhì)等滲劑是甘油。8.權(quán)利要求7的眼用水溶液，其中甘油的濃度為1.2-3.0％(重量/體積)。9.使含有阿帕芬和添加劑的眼用水溶液中的阿帕芬穩(wěn)定化的方法，其特征在于將離子強(qiáng)度調(diào)節(jié)至0.05或0.05以下。10.權(quán)利要求9的使阿帕芬穩(wěn)定化的方法，其中將離子強(qiáng)度調(diào)節(jié)至0.005或0.005以下。11.權(quán)利要求9或10的使阿帕芬穩(wěn)定化的方法，該方法使溶液中所含的阿帕芬的濃度為0.01-1％(重量/體積)。12.權(quán)利要求9或10的使阿帕芬穩(wěn)定化的方法，該方法使溶液中所含的阿帕芬的濃度為0.1-1％(重量/體積)。13.權(quán)利要求9至12的使阿帕芬穩(wěn)定化的方法，其中加入作為添加劑非電解質(zhì)等滲劑。14.權(quán)利要求13的使阿帕芬穩(wěn)定化的方法，其中的非電解質(zhì)等滲劑是甘油、丙二醇、甘露醇或葡萄糖。15.權(quán)利要求13的使阿帕芬穩(wěn)定化的方法，其中的非電解質(zhì)等滲劑是甘油。16.權(quán)利要求15的使阿帕芬穩(wěn)定化的方法，其中甘油的濃度是1.2-3.0％(重量/體積)。全文摘要本發(fā)明涉及含有阿帕芬和添加劑的眼用水溶液,其中通過(guò)將離子強(qiáng)度降至0.05或0.05以下使阿帕芬穩(wěn)定化,還涉及使阿帕芬在該眼用水溶液中穩(wěn)定化的方法。文檔編號(hào)A61K31/5517GK1199339SQ96197526公開日1998年11月18日申請(qǐng)日期1996年10月9日優(yōu)先權(quán)日1995年10月9日發(fā)明者宮城章吾,桑野光明,久納紀(jì)之申請(qǐng)人:參天制藥株式會(huì)社