專(zhuān)利名稱(chēng)：：在疏水性溶劑中增溶親水性物質(zhì)(如蛋白質(zhì))的方法
技術(shù)領(lǐng)域：
：本發(fā)明涉及一種將親水性物質(zhì)，例如蛋白質(zhì)溶解在它通常不可溶的疏水性溶劑中的新型方法。將親水性分子例如蛋白質(zhì)與疏水性物質(zhì)例如類(lèi)脂相結(jié)合起來(lái)在許多方面是有利的。親水性分子在類(lèi)脂環(huán)境中時(shí)能夠具有優(yōu)點(diǎn)例如穩(wěn)定性增強(qiáng)。此外，這種親水性物質(zhì)穿過(guò)類(lèi)脂性障礙物，例如皮膚的運(yùn)送將變得更為容易。早期的將疏水性載體用于蛋白質(zhì)運(yùn)送的建議包括脂質(zhì)體的應(yīng)用。后來(lái)的系統(tǒng)是非脂質(zhì)體的，但仍然依賴(lài)于攜帶蛋白質(zhì)或其它親水性分子的親水相前提，此親水相與疏水相形成一種乳化液。這些系統(tǒng)的實(shí)例揭示在EP-A-0366277和EP-A-0521994。WO-A-95/13795揭示了一種系統(tǒng)，靠它獲得一種真正的單相制劑是可能的，此處親水性物質(zhì)真正“溶解”在疏水相中。在其中揭示的方法中，親水性物質(zhì)首先與一種兩親物在液體介質(zhì)中相結(jié)合，在這種液體介質(zhì)中，兩親物和親水物之間沒(méi)有化學(xué)相互作用。液體介質(zhì)然后被去除，留下兩親物分子和親水性物質(zhì)的一個(gè)系統(tǒng)。最后，向系統(tǒng)中加入一種疏水性溶劑會(huì)產(chǎn)生一種單相制劑，此處親水性物質(zhì)溶解在疏水性溶劑中?，F(xiàn)在令人驚奇地發(fā)現(xiàn)通過(guò)一種改進(jìn)后的通常更快速的方法生成一種親水性物質(zhì)在疏水性溶劑中的單相制劑是可能的。因此，一方面，本發(fā)明提供了一種在疏水性溶劑中含有親水性物質(zhì)的單相疏水制劑的制備方法，該方法包括(ⅰ)在疏水相存在的情況下，將親水性物質(zhì)與一種兩親物相結(jié)合；及(ⅱ)去除存在的所有親水性溶劑；其中親水性溶劑去除步驟在保持疏水相為固態(tài)的條件下進(jìn)行。在一個(gè)優(yōu)選的實(shí)施例中，親水性物質(zhì)和兩親物首先溶解在一種親水性溶劑中，例如含水溶劑，通常只有水，然后將此溶液與疏水性溶劑相結(jié)合。親水性溶劑的去除步驟通過(guò)凍干法便利地實(shí)現(xiàn)，這種方法在確保疏水性溶劑一直保持在固態(tài)直至所有水都被去除的溫度下進(jìn)行。在某些情況下，油在凍干期間可能變成液態(tài)，這是由于固體塊的某些部分(通常在表面和邊緣)局部溫度升高的結(jié)果，在這些地方親水性溶劑已經(jīng)被去除。這兒由親水性溶劑的升華產(chǎn)生的冷卻效應(yīng)不再存在，在這些區(qū)域油將熔化。這種狀態(tài)將導(dǎo)致一種令人滿意的終產(chǎn)物的生成，只要油一出現(xiàn)就將其從固體塊的剩余部分中排去(否則，積聚的油將形成層而阻止親水性溶劑的進(jìn)一步去除)?；蛘撸S持凍干期間的溫度以致即使在親水性溶劑已被去除后油仍保持固態(tài)。在這種情況下，凍干之后，接著將制劑的溫度升高以生成單相制劑。通過(guò)將凍干后的制劑升高到室溫，這通常能夠得以簡(jiǎn)單地實(shí)現(xiàn)，它也將導(dǎo)致疏水相回到液態(tài)。也可以應(yīng)用去除親水性溶劑的其它方法，例如噴霧干燥。在本發(fā)明的上下文中，術(shù)語(yǔ)“親水性物質(zhì)”涉及任何通常在親水性溶劑，例如含水溶劑中可溶，而在疏水性溶劑中不可溶的物質(zhì)。在本發(fā)明中應(yīng)用的親水性物質(zhì)是各種各樣的，但親水性高分子代表了可以應(yīng)用的物質(zhì)的一種實(shí)例。本發(fā)明的方法提供了一種便利的和比較快速的生成所述的單相制劑的方法。當(dāng)涉及油、親水性物質(zhì)或兩者的穩(wěn)定性時(shí)，尤其當(dāng)兩親物的濃度高時(shí)，方法的快速是一個(gè)特別的優(yōu)點(diǎn)。此外，即使當(dāng)應(yīng)用例如甘油三酯作為疏水相時(shí)，也能獲得兩親物與親水性物質(zhì)之間的低比率，例如低至7∶1，這允許制劑有較高的裝載容量。正如上面提及的，在一個(gè)優(yōu)選的實(shí)施方案中，兩親物“出現(xiàn)”在親水相中。但是，如果適當(dāng)?shù)脑?，兩親物可以首先溶解或分散在油中。當(dāng)應(yīng)用在水中分散不好的兩親物時(shí)，這尤其適合。本發(fā)明的方法的另一個(gè)優(yōu)點(diǎn)是它允許不能很好地凍干的兩親物的應(yīng)用，例如那些在實(shí)施凍干法通常采取的溫度下為液態(tài)的兩親物。各種各樣的高分子適合于應(yīng)用在本發(fā)明中?？偟膩?lái)說(shuō)，高分子化合物將是親水性的或至少具有親水區(qū)域，因?yàn)閷⑹杷愿叻肿尤芙庠谟托匀芤褐型ǔ：苌儆欣щy。合適的高分子的實(shí)例包括蛋白質(zhì)和糖蛋白，低核酸和聚核酸，例如DNA和RNA，聚糖和任何這些物質(zhì)的超分子組合，包括在某些情況下為整個(gè)細(xì)胞或小器官。也可以很便利地共溶解一個(gè)小分子例如維他命與一個(gè)高分子例如聚糖如環(huán)糊精結(jié)合而成的復(fù)合物。小分子例如維他命B12也可以與高分子化學(xué)共軛，并且可以因此包含在組合物中。可以成功地用本發(fā)明的方法溶解的具體的蛋白質(zhì)的實(shí)例包括胰島素、降鈣素、血紅蛋白、細(xì)胞色素C、辣根過(guò)氧化物酶、抑肽酶、蕈狀酪氨酸酶(mushroomtyrosinase)、紅細(xì)胞生成素、生長(zhǎng)激素(somatotropin)、生長(zhǎng)激素(growthhormone)、生長(zhǎng)激素釋放因子、galanin、尿激酶、因子Ⅸ、組織血纖維蛋白溶酶原活化劑、超氧化物歧化酶、過(guò)氧化氫酶、過(guò)氧化物酶、鐵蛋白、干擾素、因子Ⅷ、微生物毒素、肽和蛋白抗原及它們的片段(所有上述蛋白質(zhì)能來(lái)自任何合適的來(lái)源)。其它可以應(yīng)用的高分子是FITC標(biāo)記的葡聚糖和從串酵母(Torullayeast)中提取出來(lái)的RNA?？磥?lái)高分子化合物的分子量沒(méi)有上限，因?yàn)榉肿恿繛榧s1,000,000的葡聚糖能夠用本發(fā)明的方法輕易地溶解。除高分子外，本發(fā)明的方法也可用于溶解更小的有機(jī)分子。小有機(jī)分子的實(shí)例包括葡萄糖、羧基熒光素和許多藥物制劑，例如抗癌制劑，但是，當(dāng)然本方法同樣能夠應(yīng)用于其它的小有機(jī)分子，例如維他命或者藥物上或生物上的活性試劑。此外，化合物例如氯化鈣和磷酸鈉也能用此方法溶解。實(shí)際上，本發(fā)明對(duì)藥物上和生物上的活性試劑尤其有利，因?yàn)闊o(wú)水溶液的應(yīng)用可以使分子進(jìn)入體內(nèi)的方法得以改變，例如用以提高生物利用率。另一種可以包含在本發(fā)明的疏水性組合物中的物質(zhì)是無(wú)機(jī)物例如小無(wú)機(jī)分子或膠體物質(zhì)例如膠態(tài)金屬。本發(fā)明的方法使膠態(tài)金屬例如膠態(tài)金、鈀、鉑或銠的一些性質(zhì)，即使在疏水性溶劑中也能夠被保持，而通常情況下微粒在其中會(huì)聚集。這對(duì)于在有機(jī)溶劑中進(jìn)行的反應(yīng)的催化作用尤其有用。有許多兩親物可以應(yīng)用于本發(fā)明，兩性離子兩親物例如磷脂就屬于那些已經(jīng)被發(fā)現(xiàn)是尤其適合的兩親物。帶卵磷脂首基的磷脂已經(jīng)被特別成功地應(yīng)用，這些磷脂的實(shí)例包括卵磷脂(PC)本身、溶血卵磷脂(lyso-PC)、神經(jīng)鞘磷脂、任何這些物質(zhì)的衍生物，例如十六烷基膽堿磷酸或含有磷酸膽堿的兩親聚合物。在本申請(qǐng)中，術(shù)語(yǔ)卵磷脂(PC)和卵磷脂(lecithin)可互換應(yīng)用。合適的天然卵磷脂可以來(lái)源于任何便利的來(lái)源，例如蛋和尤其是大豆。在大多數(shù)情況下，優(yōu)選選擇一種化學(xué)上類(lèi)似于被選擇的疏水性溶劑的兩親物，這在下面更詳細(xì)地討論。疏水性溶劑的選擇取決于組合物預(yù)定的目的、被溶解的物質(zhì)類(lèi)型和兩親物。合適的溶劑包括帶不飽和脂肪酸的長(zhǎng)鏈脂肪酸例如優(yōu)選油酸和亞油酸，醇，尤其是中鏈醇例如辛醇和帶支鏈的長(zhǎng)鏈醇例如葉綠醇、單酸甘油酯例如甘油單油酸酯(GMO)、甘油二酯和甘油三酯，尤其是中鏈甘油三酯和它們的混合物。當(dāng)疏水性溶劑和兩親物恰當(dāng)?shù)仄ヅ鋾r(shí)，通常獲得最佳的結(jié)果。例如，對(duì)一種溶劑例如油酸，溶血卵磷脂相對(duì)卵磷脂是兩親物的一種更合適的選擇，而當(dāng)疏水性溶劑是甘油三酯時(shí)則相反?；蛘?，在疏水性溶劑具有兩親性質(zhì)的情況下(例如游離脂肪酸，如油酸，它們?cè)谟袎A存在的情況下能夠離子化而生成油酸鈉)，包含一種額外的兩親物就不必要，如果溶劑分子的一部分在混合過(guò)程進(jìn)行之前或期間轉(zhuǎn)化成兩親物的形式。尤其，所應(yīng)用的堿是一種揮發(fā)性的堿例如三乙胺。當(dāng)溶解降鈣素或胰島素時(shí)，這種方法尤其成功。因此，第二方面，本發(fā)明提供了一種在疏水性溶劑中含有親水性物質(zhì)的單相疏水制劑的制備方法，該方法包括(ⅰ)在疏水相存在的情況下，將親水性物質(zhì)與堿相結(jié)合；及(ⅱ)去除存在的所有親水性溶劑；其中疏水相是具有疏水性質(zhì)的相，其中親水性溶劑的去除步驟在保持疏水相為固態(tài)的條件下進(jìn)行。正如上面所討論的，優(yōu)選堿是揮發(fā)性的堿例如三乙胺。合適的疏水性溶劑包括中鏈和長(zhǎng)鏈脂肪酸，它們的實(shí)例包括油酸和亞油酸。這種方法對(duì)于溶解降鈣素或胰島素尤其有用。本發(fā)明的制劑的一個(gè)優(yōu)點(diǎn)是它們基本上無(wú)水，因此對(duì)水解作用是穩(wěn)定的。它們對(duì)凍熔作用也是穩(wěn)定的，并且在高溫下具有更強(qiáng)的穩(wěn)定性，這可能是因?yàn)闉榱说鞍踪|(zhì)展開(kāi)并變性，必須有水出現(xiàn)。這意味著它們可以被期望比親水性物質(zhì)的含水制劑具有一個(gè)更長(zhǎng)的貯存期限。用本發(fā)明的方法提供的溶液是極其多用途的，有許多應(yīng)用。它們可以或者單獨(dú)應(yīng)用，或者與含水相相結(jié)合而形成一種乳化液或類(lèi)似的兩相組合物，這也形成了本發(fā)明的另一方面?？梢詰?yīng)用用本發(fā)明的方法生成的組合物的一個(gè)方面是用于哺乳動(dòng)物，包括人，在通常情況下在親油溶劑中不可溶的物質(zhì)的口服給藥。這可以用于飲食補(bǔ)充物例如維他命的給藥，或者用于生物活性物質(zhì)，尤其是蛋白質(zhì)或糖蛋白，包括胰島素和生長(zhǎng)激素的給藥。在另一個(gè)應(yīng)用中，有可能例如通過(guò)上面描述的方法，將營(yíng)養(yǎng)素例如維他命包膠或微囊包膠，然后它們不僅能夠用作人類(lèi)的食品補(bǔ)充物，而且能夠用于農(nóng)業(yè)和水產(chǎn)養(yǎng)殖業(yè)，后者的一個(gè)實(shí)例是用于幼蝦養(yǎng)殖中飼料的生產(chǎn)。此外，該組合物在非腸道使用的藥物或其它制劑，以及局部或眼用制劑的制備中找到了應(yīng)用。對(duì)于這種應(yīng)用，通常優(yōu)選應(yīng)用如上面所述的油溶液和含水相的乳化液。許多治療性和預(yù)防性的治療意欲持續(xù)的或延遲的釋放或者包含一個(gè)兩組分系統(tǒng)，例如包括一種用于立即釋放的組分和一種用于延遲的或持續(xù)釋放的組分。因?yàn)樗鼈兊母叻€(wěn)定性，本發(fā)明的制劑對(duì)意欲持續(xù)的或延遲的釋放的高分子制劑尤其有用。通過(guò)此處揭示的方法產(chǎn)生的組合物有更長(zhǎng)的貯存期限，這在醫(yī)藥領(lǐng)域中是一個(gè)特別的優(yōu)點(diǎn)。親水物溶在油中生成的制劑可以在制藥或類(lèi)似工業(yè)中找到應(yīng)用，用于氣味的掩蔽。在制藥工業(yè)中這是一個(gè)特別的問(wèn)題，因?yàn)樵S多藥物有令人不快的氣味，因此對(duì)病人，尤其是兒童不受歡迎。另一個(gè)應(yīng)用是在化妝品工業(yè)中，親水性化合物的疏水制劑又能非常容易地溶合到化妝品制劑中?？梢砸赃@種方式應(yīng)用的高分子的實(shí)例包括那些有某種增濕或酶催作用的物質(zhì)。本發(fā)明也可用于將蛋白質(zhì)例如膠原蛋白溶合在皮膚藥膏和洗液中。因此，第三方面，本發(fā)明提供了本發(fā)明的方法在藥物、化妝品、營(yíng)養(yǎng)品、飼料或食物補(bǔ)充組合物制備中的應(yīng)用。尤其，當(dāng)本發(fā)明的方法應(yīng)用于藥物組合物的制備時(shí)，它將用于局部、口用或眼用制劑的制備。最后，本發(fā)明在化學(xué)和生物合成領(lǐng)域有許多應(yīng)用，例如，無(wú)水酶催化合成。本發(fā)明的各個(gè)方面優(yōu)選的特征是就各個(gè)其它方面作必要的改進(jìn)后而言的。本發(fā)明現(xiàn)在將參見(jiàn)以下的實(shí)施例進(jìn)一步地描述，這不應(yīng)理解成作任何限制。實(shí)施例1(ⅰ)將20毫克抑肽酶溶解在1毫升蒸餾水中。(ⅱ)將1克大豆卵磷脂溶解在9毫升Miglyol818中，以給出卵磷脂在M818中的濃度接近100毫克/毫升。(ⅲ)將三個(gè)B10帶螺紋蓋的小玻璃瓶準(zhǔn)備好，裝有以下數(shù)量的上面描述的兩種溶液。內(nèi)容物很好地混合。<tablesid="table1"num="001"><tablewidth="705">ABC蒸餾水600微升600微升600微升抑肽酶(20毫克/毫升)125微升63微升0微升M818/卵磷脂(9∶1)1毫升1毫升1毫升卵磷脂(重量，毫克)100100100抑肽酶(重量，毫克)2.51.250</table></tables>(ⅳ)然后將小瓶在液氮中冷凍，并且在-45℃的溫度下凍干二天。(ⅴ)凍干后，將小瓶中的內(nèi)容物升高至室溫，由此獲得透明的或略帶乳白色的油。(ⅵ)測(cè)定200微升樣品在600納米處的光密度，用樣品C(不含抑肽酶)作為空白樣。<tablesid="table2"num="002"><tablewidth="705">ABC抑肽酶在油中的濃度(毫克/毫升)2.51.250光密度6000.3300.0960.00</table></tables>在平行實(shí)驗(yàn)中，僅僅向油中加入2.5毫克抑肽酶，給出一個(gè)大于1.0的光密度，表明在這個(gè)實(shí)施例中，由于所采用的方法的結(jié)果，在兩個(gè)樣品A和B中發(fā)生了溶解。實(shí)施例2(ⅰ)將80毫克抑肽酶溶解在4毫升蒸餾水中。(ⅱ)將100毫克水楊酸溶解在10毫升Miglyol818中。(ⅲ)用探測(cè)器超聲破碎法將大豆卵磷脂分散在蒸餾水中，濃度為250毫克/毫升。(ⅳ)將上述準(zhǔn)備好的溶液按下表分散在B10帶螺紋蓋的小玻璃瓶中。<tablesid="table3"num="003"><tablewidth="705">ABCDEA′B′C′D′E′抑肽酶(20毫克/毫升)02503755007500250350500750蒸餾水600350---600350---卵磷脂(250毫克/毫升)400400400400400400400400400400M81811111-----M818+水楊酸-----11111抑肽酶(毫克)057.51015057.51015</table></tables>(ⅴ)將混合物都進(jìn)行渦旋運(yùn)動(dòng)10秒鐘，在液氮中冷凍，并且在-45℃下凍干二天。(ⅵ)凍干后，將瓶在37℃下加熱15分鐘。(ⅶ)溶液的透明度或其它性質(zhì)通過(guò)測(cè)定油在600納米處的光密度來(lái)評(píng)價(jià)。結(jié)果在下表中給出。<tablesid="table4"num="004"><tablewidth="705">ABCDE抑肽酶(毫克/毫升)057.51015僅有M8180.0090.1910.5660.3901.576M818+水楊酸0.0000.0060.0000.0120.021</table></tables>結(jié)果表明，用此處描述的方法，能夠獲得蛋白質(zhì)在油中有效的溶解，尤其在有促進(jìn)劑例如水楊酸存在的情況下(描述在國(guó)際專(zhuān)利申請(qǐng)PCT/GB95/02891中)。實(shí)施例3(1)在三個(gè)7毫升玻璃小瓶中，將1毫升鮭魚(yú)(salmon)降鈣素溶液分散在蒸餾水中，濃度為1毫克/毫升。(2)向來(lái)自(1)的一個(gè)小瓶，標(biāo)記為“A”，一滴滴地加入0.4毫升油酸，同時(shí)進(jìn)行渦旋運(yùn)動(dòng)。立即在液氮中冷凍分散液。(3)向來(lái)自(1)的一個(gè)小瓶，標(biāo)記為“B”，加入5微升冰醋酸，然后一滴滴地加入0.4毫升油酸，同時(shí)進(jìn)行渦旋運(yùn)動(dòng)。立即在液氮中冷凍分散液。(4)向來(lái)自(1)的一個(gè)小瓶，標(biāo)記為“C”，加入5微升三乙胺，然后一滴滴地加入0.4毫升油酸，同時(shí)進(jìn)行渦旋運(yùn)動(dòng)。立即在液氮中冷凍分散液。(5)在一個(gè)凍干器中，將所有小瓶在貯存溫度為+4℃下凍干一整夜。(6)第二天，加熱小瓶以獲得所有處于液態(tài)的油，測(cè)定每種油在600納米處的光密度。結(jié)果<tablesid="table5"num="005"><tablewidth="698">ABC光密度600納米0.0960.0960.005</table></tables>獲得了一透明的溶液。實(shí)施例4(1)在一個(gè)7毫升的玻璃小瓶中，配入1毫克牛胰島素，并加入1毫升蒸餾水。(2)向來(lái)自(1)的小瓶中加入5微升三乙胺，然后，一滴滴地加入0.4毫升油酸，同時(shí)進(jìn)行渦旋運(yùn)動(dòng)。立即在液氮中冷凍分散液。(3)在一個(gè)凍干器中，將小瓶在貯存溫度為+4℃下凍干一整夜。(4)第二天，加熱小瓶以獲得處于液態(tài)的油，其中，以與上面的實(shí)施例3中描述的有關(guān)降鈣素的同樣的方式，胰島素溶解成一透明溶液。權(quán)利要求1．一種在疏水性溶劑中含有親水性物質(zhì)的單相疏水制劑的制備方法，該方法包括(ⅰ)在疏水相存在的情況下，將親水性物質(zhì)與一種兩親物相結(jié)合；及(ⅱ)去除存在的所有親水性溶劑；其中親水性溶劑的去除步驟在保持疏水相為固態(tài)的條件下進(jìn)行。2．一種根據(jù)權(quán)利要求1的方法，其中首先將親水性物質(zhì)和兩親物溶解在一種親水性溶劑中，然后將此溶液與疏水相相結(jié)合。3．一種根據(jù)權(quán)利要求1的方法，其中在疏水相與親水性物質(zhì)相結(jié)合之前，兩親物被溶解或者與疏水相相結(jié)合。4．一種根據(jù)權(quán)利要求1～3中的任一項(xiàng)的方法，其中親水性溶劑的去除步驟用凍干法實(shí)現(xiàn)。5．一種根據(jù)權(quán)利要求1～3中的任一項(xiàng)的方法，其中親水性物質(zhì)包括高分子、小的有機(jī)或無(wú)機(jī)分子或膠體物質(zhì)。6．一種根據(jù)權(quán)利要求5的方法，其中高分子包括蛋白質(zhì)、糖蛋白、低核酸或聚核酸、聚糖或者它們的超分子組合。7．一種根據(jù)權(quán)利要求6的方法，其中蛋白質(zhì)是胰島素、降鈣素、血紅蛋白、細(xì)胞色素C、辣根過(guò)氧化物酶、抑肽酶、蕈狀酪氨酸酶、紅細(xì)胞生成素、生長(zhǎng)激素、生長(zhǎng)激素、生長(zhǎng)激素釋放因子、galanin、尿激酶、因子Ⅸ、組織血纖維蛋白溶酶原活化劑、超氧化物歧化酶、過(guò)氧化氫酶、過(guò)氧化物酶、鐵蛋白、干擾素、因子Ⅷ、微生物毒素、肽和蛋白抗原及它們的片段。8．一種根據(jù)權(quán)利要求1～7中的任一項(xiàng)的方法，其中兩親物是磷脂。9．一種根據(jù)權(quán)利要求8的方法，其中磷脂帶卵磷脂首基。10．一種根據(jù)權(quán)利要求9的方法，其中磷脂是卵磷脂(PC)、溶血卵磷脂(lyso-PC)、神經(jīng)鞘磷脂、上述某一種的衍生物例如十六烷基膽堿磷酸或含有磷酸膽堿的兩親聚合物。11．一種根據(jù)權(quán)利要求1～10中的任一項(xiàng)的方法，其中疏水相包括長(zhǎng)鏈脂肪酸、中鏈醇、帶支鏈的長(zhǎng)鏈醇、單酸甘油酯或中鏈甘油三酯。12．一種根據(jù)權(quán)利要求1～11中的任一項(xiàng)的方法，其中兩親物包括卵磷脂，疏水相是甘油三酯，或者其中兩親物包括溶血卵磷脂，疏水相是油酸。13．一種根據(jù)權(quán)利要求2～12中的任一項(xiàng)的方法，其中親水性溶劑是含水溶劑，優(yōu)選水。14．一種在疏水性溶劑中含有親水性物質(zhì)的單相疏水制劑的制備方法，該方法包括(ⅰ)在疏水相存在的情況下，將親水性物質(zhì)與一種堿相結(jié)合；及(ⅱ)去除存在的所有親水性溶劑；其中疏水相是具有疏水性質(zhì)的相，其中親水性溶劑的去除步驟在保持疏水相為固態(tài)的條件下進(jìn)行。15．一種根據(jù)權(quán)利要求14的方法，其中堿是一種揮發(fā)性的堿。16．一種根據(jù)權(quán)利要求15的方法，其中堿是三乙胺。17．一種根據(jù)權(quán)利要求14～16中的任一項(xiàng)的方法，其中疏水性溶劑是中鏈或長(zhǎng)鏈脂肪酸或這些物質(zhì)的這種或者那種的混合物。18．一種根據(jù)權(quán)利要求14～17中的任一項(xiàng)的方法，通過(guò)權(quán)利要求4～7中的任何一項(xiàng)或多項(xiàng)特征進(jìn)行改進(jìn)。19．一種根據(jù)權(quán)利要求14～18中的任一項(xiàng)的方法，其中親水性物質(zhì)是降鈣素。20．一種根據(jù)權(quán)利要求14～18中的任一項(xiàng)的方法，其中親水性物質(zhì)是胰島素。21．在權(quán)利要求1～20中的任一項(xiàng)中定義的方法應(yīng)用于藥物、化妝品、營(yíng)養(yǎng)品、飼料或食物補(bǔ)充組合物的制備中。22．根據(jù)權(quán)利要求21的應(yīng)用，其中藥物組合物用于局部、口服或眼用。全文摘要本發(fā)明提供了制備包含溶解于疏水相中的親水性物質(zhì)例如蛋白質(zhì)的單相制劑的方法,本發(fā)明的方法可用于制備藥物、化妝品、營(yíng)養(yǎng)品、飼料或食物補(bǔ)充組合物。文檔編號(hào)A61K38/28GK1213962SQ97193180公開(kāi)日1999年4月14日申請(qǐng)日期1997年3月18日優(yōu)先權(quán)日1996年3月19日發(fā)明者R·R·C·紐申請(qǐng)人:科特克斯(英國(guó))有限公司