專利名稱：用于治療cns病癥的三嗪化合物的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及用于治療中樞神經(jīng)系統(tǒng)(CNS)疾病和病癥的三嗪化合物和其藥學(xué)上可接受的衍生物、含有它們的藥用組合物、其在治療這類疾病中的用途以及制備方法。
EP-A-0021121和EP-A-0247892描述了3，5-二氨基三嗪，例如在治療CNS病癥中有活性而且尤其可用于治療癲癇的3，5-二氨基-6-(2，3-二氯代苯基)-1，2，4-三嗪(拉莫三嗪)。
本發(fā)明涉及為鈉通道阻滯劑的5-氨基三嗪衍生物。該化合物是一種令人驚奇的有效抗痙攣劑，相對(duì)于拉莫三嗪而言其效力增強(qiáng)和在CNS副作用和抑制二氫葉酸鹽還原酶方面其選擇性增強(qiáng)。所以，該化合物可用于治療CNS疾病如癲癇。
因此，本發(fā)明提供式(Ⅰ)的化合物 即5-氨基-6-[2，3，5-三氯代苯基]-1，2，3-三嗪及其藥學(xué)上可接受的衍生物。
藥學(xué)上可接受的衍生物是指式(Ⅰ)化合物的任何藥學(xué)上可接受的鹽或溶劑化物、或在給予接受者時(shí)能夠提供(直接或間接)式(Ⅰ)化合物或其活性代謝產(chǎn)物或殘留物的任何化合物(例如前體藥物)。此后論及式(Ⅰ)化合物包括式(Ⅰ)化合物及其藥學(xué)上可接受的衍生物。
式(Ⅰ)化合物的合適的藥學(xué)上可接受的鹽包括與無機(jī)酸或有機(jī)酸、優(yōu)選無機(jī)酸形成的酸加成鹽如鹽酸鹽、氫溴酸鹽和硫酸鹽。
合適的前體藥物是本領(lǐng)域公知的并包括例如在式(Ⅰ)化合物的四個(gè)氮原子中的任何一個(gè)上的N-?；苌?，例如單?；苌锶缫阴；?、丙酰基等衍生物或基團(tuán)如R-O-CH2-氮或R-O-C(O)-氮。
式(Ⅰ)化合物尤其可用作抗痙攣劑。因此，它們可用于治療癲癇。它們可以用來改善患有癲癇的患者(通常為人類)的病況。它們可用來緩解患者的癲癇癥狀?！鞍d癇”包括以下發(fā)作-單純部分性發(fā)作，復(fù)雜部分性發(fā)作，繼發(fā)性全身性發(fā)作，包括失神發(fā)作、肌陣攣性發(fā)作、陣攣性發(fā)作、強(qiáng)直性發(fā)作、強(qiáng)直陣攣性發(fā)作和失張性發(fā)作的全身性發(fā)作。
式(Ⅰ)化合物另外還可用于治療雙相情感障礙，或者稱為躁狂抑郁癥?？梢灾委煝裥突颌蛐碗p相情感障礙。所以，式(Ⅰ)化合物可以用來改善雙相情感障礙病人的病況。它們可以用來緩解患者的雙相情感障礙癥狀。式(Ⅰ)化合物也可以用來治療單相抑郁癥。
式(Ⅰ)化合物可用作鎮(zhèn)痛劑。因此，它們可以用來治療或防止疼痛。它們可以用來改善疼痛患者通常為人類的病況。它們可以用來緩解患者的疼痛。所以，式(Ⅰ)化合物可以用作首先的鎮(zhèn)痛劑以治療急性疼痛如肌肉骨骼疼痛、手術(shù)后疼痛和外科疼痛，慢性疼痛如慢性炎癥疼痛(例如類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎和骨關(guān)節(jié)炎)，神經(jīng)病理性疼痛(例如皰疹后疼痛、三叉神經(jīng)痛和交感神經(jīng)性持續(xù)疼痛(sympatheticallymaintained pain))以及伴隨腫瘤和fibromyalgia的疼痛。式(Ⅰ)化合物也可以用于治療或防止偏頭痛伴隨的疼痛。
式(Ⅰ)化合物還可用于治療包括非潰瘍性消化不良的功能性腸病癥、非心源性胸痛并可特別用于治療應(yīng)激性結(jié)腸綜合征。應(yīng)激性結(jié)腸綜合征是一種胃腸道病癥，其特征為腹痛和排便習(xí)慣改變，但沒有任何器質(zhì)性疾病的證據(jù)。因此，式(Ⅰ)化合物可以用來緩解應(yīng)激性結(jié)腸綜合征伴隨的疼痛?；加袘?yīng)激性結(jié)腸綜合征的病人的病況因此可以得到改善。
式(Ⅰ)化合物也可以用來治療神經(jīng)變性性疾病如阿爾茨海默氏病、ALS、運(yùn)動(dòng)神經(jīng)元病、帕金森病、肌肉硬化、黃斑變性和青光眼。式(Ⅰ)化合物也可以用于神經(jīng)保護(hù)和用于治療中風(fēng)、心搏停止、肺分流術(shù)、創(chuàng)傷性腦損傷、脊髓損傷等后的神經(jīng)變性。
式(Ⅰ)化合物還可用于治療耳鳴。
式(Ⅰ)化合物甚至還可用于防止或減輕對(duì)誘導(dǎo)依賴性藥物的依賴性，或防止或減輕對(duì)誘導(dǎo)依賴性藥物的耐受性或反轉(zhuǎn)對(duì)誘導(dǎo)依賴性藥物的耐受性。誘導(dǎo)依賴性藥物的實(shí)例包括阿片樣物質(zhì)類(例如嗎啡)、CNS抑制劑(例如乙醇)、精神興奮藥(例如可卡因)和尼古丁。
因此，本發(fā)明還提供式(Ⅰ)化合物或其藥學(xué)上可接受的衍生物用于人類醫(yī)學(xué)和獸醫(yī)學(xué)的用途。
所以，本發(fā)明還提供式(Ⅰ)化合物在生產(chǎn)用于治療基本上如前所述的病癥的藥物中的用途。
本發(fā)明還包括治療患有或易患基本上如前所述的疾病的患者的方法，該方法包括給予所述患者治療有效量的式(Ⅰ)化合物。
本文所用的術(shù)語“治療”包括確定的疾病的治療，而且也包括確定疾病的預(yù)防。
將式(Ⅰ)化合物給予患者、尤其是人類患者的準(zhǔn)確量由主治醫(yī)師負(fù)責(zé)。然而，所用的劑量取決于許多因素，包括患者的年齡、性別、待治療的確切病癥及其嚴(yán)重程度、和給藥途徑。
按游離堿計(jì)，式(Ⅰ)化合物可以以0.1-10mg/kg體重/天的劑量給予患者，更具體為0.33mg/kg體重/天。按游離堿計(jì)，成人劑量范圍一般為8-1000mg/天，如35-800mg/天、優(yōu)選10-200mg/天或20-200mg/天。
式(Ⅰ)化合物及其藥學(xué)上可接受的衍生物可以以藥物組合物的形式方便地給藥。因此，在本發(fā)明的另一方面中，我們提供適用于人類醫(yī)學(xué)或獸醫(yī)學(xué)的含有式(Ⅰ)化合物或其藥學(xué)上可接受的衍生物的藥物組合物。可以方便地提供這類以與一種或多種生理學(xué)可接受的載體或賦形劑混合的組合物以常規(guī)方式使用。
盡管將式(Ⅰ)化合物以原料化學(xué)物質(zhì)給予也是可能的，但是最好是以藥用制劑給予式(Ⅰ)化合物。本發(fā)明制劑包括其式(Ⅰ)化合物和一種或多種可接受的載體或稀釋劑以及任選其它的治療成分。所述載體在可與所述制劑的其它成分配伍和對(duì)其接受者無害的意義上必須是“可接受的”。
所述制劑包括適用于口服、胃腸外(包括皮下如皮下注射或皮下貯存片、皮內(nèi)、鞘內(nèi)、肌內(nèi)如肌內(nèi)貯存以及靜脈內(nèi))、直腸和局部(包括皮膚、口頰和舌下)給藥的各種制劑，盡管最適合的給藥途徑可能取決于例如接受者的病況和病癥。所述制劑可以方便地以單位劑型提供，并可以用藥學(xué)領(lǐng)域公知的任何方法制備。所有這些方法包括的步驟有使式(Ⅰ)化合物或其藥學(xué)上可接受的酸加成鹽(“活性成分”)與包括一種或多種輔助成分的載體混合。一般來說，通過使所述活性成分與液體載體或磨碎的固體載體或它們兩者均勻密切地混合，然后，如果必要，把所述產(chǎn)物成型為所需要的制劑，從而制備所述制劑。
適于口服給藥的本發(fā)明的制劑可以是獨(dú)立的單位如膠囊劑、扁囊劑或片劑(例如特別適于兒科給藥的咀嚼片劑)，每個(gè)單位含有預(yù)定量的所述活性成分；散劑或顆粒劑；溶液劑或在水性或非水性液體中的懸浮液；水包油乳液或油包水乳液。所述活性成分也可以是大丸劑、藥糖劑或糊劑。
片劑可以通過任選與一種或多種輔助成分壓制或模塑制得。通過在合適的機(jī)器中將任選與粘合劑、潤(rùn)滑劑、惰性稀釋劑、隔離劑、表面活性劑或分散劑混合的自由流動(dòng)形式(如粉或顆粒)的活性成分壓制制備壓制片。通過在合適的機(jī)器中將用惰性液體稀釋劑濕潤(rùn)的粉狀化合物的混合物模塑制備模制片。所述藥片可任選包衣或刻痕，并可以配制使得緩慢或控制釋放其中的活性成分。
胃腸外給藥的制劑包括可含有抗氧化劑、緩沖劑、抑菌劑和使所述制劑與預(yù)定的接受者的血液等滲的溶質(zhì)的水性或非水性無菌注射液；和可包括懸浮劑和增稠劑的水性或非水性無菌懸浮液。所述制劑可以以單劑量或多劑量容器如密封的安瓿和管制瓶供給，并可以貯藏在冷凍干燥(凍干)條件下，只需要在使用前即刻加入無菌液體載體如注射用水。由上述類型的無菌粉、顆粒和片可以制備臨時(shí)配制的注射液和懸浮液。
直腸給藥的制劑可以以含有常用載體如可可脂、硬脂或聚乙二醇的栓劑的形式提供。
口腔局部給藥如口頰或舌下的制劑包括在一種調(diào)味基質(zhì)如蔗糖和阿拉伯樹膠或西黃蓍膠中含有活性成分的糖錠劑和在一種基質(zhì)如明膠和甘油或蔗糖和阿拉伯膠中含有活性成分的軟錠劑。
本發(fā)明化合物也可以配制成貯存制劑。這類長(zhǎng)效制劑可以通過植入(例如皮下或肌肉內(nèi))或肌內(nèi)注射給藥。因此，例如，可以將本發(fā)明化合物用合適的聚合物或疏水物質(zhì)(例如以在一種可接受的油中的乳液)或離子交換樹脂、或者以略溶的衍生物(如略溶的鹽)來配制。
除了上述特別述及的成分外，所述制劑可以包括本領(lǐng)域關(guān)于所述制劑類型常規(guī)的其它試劑，例如適于口服給藥的制劑可以包括調(diào)味劑。
如上所述，優(yōu)選的單位劑量制劑是含有所述活性成分的有效日劑量或其合適部分劑量的制劑。按游離堿計(jì)，最好為5mg-1000mg如8mg-1000mg，35mg-800mg更好，而最好為10-200mg或20-200mg。
式(Ⅰ)化合物可以與其它治療藥物如其它抗痙攣劑聯(lián)合使用。當(dāng)式(Ⅰ)化合物與其它治療藥物聯(lián)合使用時(shí)，所述化合物可以通過任何方便的途徑序貫或同時(shí)給予。因此，在再一方面，本發(fā)明提供含有式(Ⅰ)化合物或其藥學(xué)上可接受的衍生物與其它治療藥物的組合。
可以方便地提供上述組合用于藥物制劑形式中，所以，含有上述組合和藥學(xué)上可接受的載體或賦形劑的藥物制劑構(gòu)成了本發(fā)明的另一方面。這類組合的單個(gè)組分可以以分開的藥物制劑或組合的制劑序貫或者同時(shí)給予。
當(dāng)式(Ⅰ)化合物或其藥學(xué)上可接受的衍生物與第二種對(duì)相同疾病具有活性的治療藥物組合使用時(shí)，每種化合物的劑量可能不同于所述化合物單獨(dú)使用時(shí)的劑量。本領(lǐng)域技術(shù)人員將容易地鑒別出合適的劑量。
本發(fā)明提供制備式(Ⅰ)化合物和其藥學(xué)上可接受的衍生物的方法。
用以下概述的方法可以制備式(Ⅰ)化合物，該方法形成本發(fā)明的再一方面。
按照構(gòu)成本發(fā)明另一方面的通用方法(A)，在合適的反應(yīng)條件下，例如通過還原優(yōu)選采用還原金屬如阮內(nèi)鎳和氫源如一水合肼、在一種合適的溶劑如乙醇中、優(yōu)選在高溫如70-75℃之間，可以由式(Ⅱ)化合物 制備式(Ⅰ)化合物。
按照構(gòu)成本發(fā)明另一方面的另一方法(B)，在合適反應(yīng)條件下使其中n為1或2的式(Ⅲ)化合物 與還原劑反應(yīng)，可以制備式(Ⅰ)化合物。合適的還原劑包括硼氫化物、優(yōu)選硼氫化鈉。在一種溶劑混合物如一種醚、優(yōu)選四氫呋喃和一種醇、優(yōu)選叔丁醇中并在室溫下可以進(jìn)行所述反應(yīng)。
在合適的反應(yīng)條件下，使式(Ⅱ)化合物與一種氧化劑如一種過酸(例如過一硫酸鉀或間-氯代過苯甲酸)并在低溫如＜5℃下反應(yīng)，從而可以制備式(Ⅲ)化合物，這構(gòu)成本發(fā)明的又一方面。
在稀無機(jī)酸、優(yōu)選稀硫酸存在下，使2，3，5-三氯代苯甲酰氰與S-甲硫基氨基脲鹽、優(yōu)選氫碘酸鹽反應(yīng)，從而可以適當(dāng)?shù)刂频檬?Ⅱ)化合物，并且這構(gòu)成本發(fā)明的再一方面。
或者在合適的反應(yīng)條件下、在一種合適的溶劑如一種醇、優(yōu)選丙-1-醇中，并在高溫如溶劑回流溫度下，使式(Ⅳ)化合物溶液 在320-750nm之間進(jìn)行光分解作用可以制備式(Ⅱ)化合物，而且這形成本發(fā)明的再一方面。
按照常規(guī)方法可以制備2，3，5-三氯代苯甲酰氰和S-甲硫基氨基脲，而且這構(gòu)成本發(fā)明的又一方面。
在合適的反應(yīng)條件下，使式(Ⅴ)化合物 與脫水劑、優(yōu)選二磷酰氯反應(yīng)可以制備式(Ⅳ)化合物，而且這形成本發(fā)明的另一方面。
在一種合適的溶劑例如乙醇中、并在高溫例如50℃下，通過式(Ⅵ)化合物 與S-甲硫基氨基脲鹽、優(yōu)選氫碘酸鹽的反應(yīng)可以恰當(dāng)?shù)刂频檬?Ⅴ)化合物，而且這形成本發(fā)明的又一方面。
在合適的條件下，使2，3，5-三氯代苯甲氰與強(qiáng)酸水溶液、優(yōu)選濃鹽酸反應(yīng)可以制備式(Ⅵ)化合物，這形成本發(fā)明的又一方面。
按照常規(guī)方法可以制備式(Ⅰ)化合物的前體藥物。
提供以下實(shí)施例闡明本發(fā)明，不應(yīng)該將其解釋為對(duì)本發(fā)明進(jìn)行的限制。中間體12，3，5-三氯代苯甲酸將2，3，5-三氯代苯甲醛(197.40g，0.94mol,Lancaster)溶解于叔丁醇(785ml)中，在氮?dú)庀掠?0℃攪拌并加熱。將2M氫氧化鈉水溶液(940ml)溫?zé)嶂?0℃并加到所述醛溶液中。在將溫度維持于57-60℃下，用計(jì)量泵在45分鐘內(nèi)加入過氧化氫(27.50％水溶液，699g，5.65mol)。然后在氮?dú)庀略贁嚢璨⒓訜崴龇磻?yīng)混合物1小時(shí)，冷卻并真空蒸發(fā)。將殘留的淤漿過濾，并用甲苯(2×300ml)洗滌濾液，然后在充分?jǐn)嚢柘掠?M鹽酸酸化(pH為1)。過濾生成的稠濃的白色沉淀，用水(3×300ml)洗滌并于50℃真空干燥。得率為180g(85％)。M.p.155-158℃(泡沫)。中間體22，3，5-三氯代苯甲酰氯于120℃，將2，3，5-三氯代苯甲酸(75g，0.33mol，實(shí)施例1)和亞硫酰氯(197.47ml，271.32g，2.28mol)在無水甲苯(350ml)中回流3小時(shí)。將反應(yīng)混合物冷卻至室溫并真空蒸發(fā)。將殘留物與無水甲苯(3×100ml)共沸得到棕色粘性油狀物。
可以如下進(jìn)行另一種制備將2，3，5-三氯代苯甲酸(75g，333mmol，1當(dāng)量)加入到甲苯(225ml)中，并將該淤漿用連接的(attached)迪安-斯達(dá)克裝置在回流下加熱2小時(shí)。加熱時(shí)酸溶解到所述溶液中。充分?jǐn)嚢柘吕鋮s該溶液，維持內(nèi)部溫度于70-80℃下通過滴液漏斗用1小時(shí)加入吡啶(0.2ml，催化，約0.5mol％)和亞硫酰氯(26.7ml，365mmol，1.1當(dāng)量)。一旦加入完成，立即將混合物在回流下加熱2小時(shí)。冷卻溶液，真空去除揮發(fā)物，然后與甲苯(2×50ml)共沸得到澄清黃色油狀產(chǎn)物。中間體32，3，5-三氯代苯甲酰氰于150℃，用迪安-斯達(dá)克裝置將氰化銅(Ⅰ)(63.88g，0.71mol)、碘化鉀(108.20g，0.65mol)在無水二甲苯(590ml)中回流24小時(shí)。加入2，3，5-三氯代苯甲酰氯的無水二甲苯(150ml)溶液，將所得的懸浮物在氮?dú)庀掠?50℃回流3天。過濾懸浮液，真空蒸發(fā)濾液。δ(CDCl3)7.80(s，1H)，8.0(s，1H)。
可以如下進(jìn)行另一種制備用所連接的迪安-斯達(dá)克裝置將碘化鉀(66.25g，400mmol，1.2當(dāng)量)(過篩使得粒度＜1mm)和氰化銅(Ⅰ)(36g，400mmo1，1.2當(dāng)量)在二甲苯中(400ml)回流下加熱3小時(shí)。冷卻該混合物，加入2，3，5-三氯代苯酰氯的二甲苯溶液(100ml)。用所連接的迪安-斯達(dá)克裝置回流下加熱該混合物。所述混合物在30分鐘內(nèi)逐漸顯現(xiàn)紅/橙色，過夜獲得淺棕色溶液。
在回流下，將所述混合物加熱40小時(shí)，然后冷卻，并過濾除去無機(jī)物質(zhì)。于55℃真空除去二甲苯，與甲苯(2×50ml)共沸，然后通過buchi入口管加入石醚60-80(260ml)得到棕色溶液。冷卻后形成棕色沉淀。室溫下將該溶液攪拌過夜，過濾去除固體物，并用石油醚60-80(100ml)洗滌。所述固體在氮?dú)鈱酉鲁楦傻玫降谝慌S色固體2，3，5-三氯代苯甲酰腈(45.5g，58.1％)。
濃縮所述濾液，使其靜置24小時(shí)，然后收獲第二批(6.8g，8.7％)，接著再收第三批(5.3g，6.8％)。
總收率(57.6g，73.8％)。N.m.r.(d6-DMSO)dppm8.03(d，1H)，8.34(d，1H)。中間體4S-甲硫基氨基脲化氫碘氨基脲(448g，0.50mol，Aldrich)和碘代甲烷(300ml，5mol)在95％乙醇(2000ml)中回流5小時(shí)，然后冷卻至室溫。過濾所需的產(chǎn)物，用乙醚(3×100ml)洗滌，真空干燥。得率為647g。M.p.138-140℃。中間體53-甲基硫代-5-氨基-6-[2，3，5-三氯代苯基]-1，2，4-三嗪[式(Ⅱ)]方法A將S-甲硫基氨基脲化氫碘(38.59g，0.17mol)懸浮于稀硫酸(95.83ml濃硫酸/95.83ml水)中，并在室溫下攪拌1小時(shí)。緩慢加入2，3，5-三氯代苯甲酰氰(18g，0.077mol)的乙腈(90ml)溶液，在室溫下將生成的混合物攪拌攪拌11天。用水稀釋反應(yīng)混合物，并用乙酸乙酯(3×250ml)提取。用水(2×300ml)洗滌乙酸乙酯層，經(jīng)無水硫酸鎂干燥，過濾并真空蒸發(fā)濾液。將殘留物溶解于丙-1-醇(500ml)中并于130℃回流4小時(shí)。將反應(yīng)混合物冷卻至室溫并真空蒸發(fā)，將殘留物分配于2N氫氧化鈉水溶液(100ml)和乙酸乙酯(300ml)之間。用水(2×100ml)洗滌乙酸乙酯層，經(jīng)無水硫酸鎂干燥，過濾并真空蒸發(fā)濾液。用環(huán)己烷至1∶3環(huán)己烷∶乙醚作洗脫劑經(jīng)‘快速層析’純化殘留物。得率為1.90g(8％)M.p.138-140℃。方法B將-[S-甲硫基脲亞氨基]-2-[2，3，5-三氯代苯基]-乙腈(1.00g，3.11mmol)在丙-1-醇(40ml)中攪拌，并在氮?dú)庀录訜嶂粱亓?。?00瓦鎢燈照射混合物，使反應(yīng)混合物置于該條件下48小時(shí)。將所述反應(yīng)物冷卻至室溫，然后關(guān)閉鎢燈并真空蒸發(fā)溶液，得到靜置時(shí)結(jié)晶的黑色油狀物。用甲醇研制所述固體，過濾并干燥，得到產(chǎn)物3-甲基硫代-5-氨基-6-[2，3，5-三氯代苯基]-1，2，4-三嗪。得率為770mg(77.0％)。N.M.R.(d6-DMSO)δppm2.50(s，3H)，7.15(寬s，1H)，7.63(d，1H)，7.90(寬s，1H)，8.00(d，1H)。LC/MS，電子噴霧陽性(M+1)+=321/323。中間體63-甲硫氧基(methvlsulfoxv)-5-氨基-6-[2，3，5-三氯代苯基]-1，2，4-三嗪[式(Ⅲ)]將3-甲基硫代-5-氨基-6-[2，3，5-三氯代苯基]-1，2，4-三嗪(6g，18.7mmol，1當(dāng)量)懸浮于二氯甲烷(650ml)中，并冷卻至5℃。一次性加入間-氯代過苯甲酸(5.66g，18.7mmol，理論上為57％，約1當(dāng)量)并在氮?dú)庀掠冢?0℃攪拌20分鐘，獲得澄清黃色溶液。TLC(1∶1環(huán)己烷∶乙酸乙酯)分析表明無殘留原料。將亞硫酸鈉(10g)和水(200ml)加入到劇烈攪拌的溶液中猝滅該反應(yīng)。分離各層，用10％亞硫酸鈉水溶液(100ml)洗滌有機(jī)層。發(fā)現(xiàn)Merck過氧化物試驗(yàn)條為陰性。用飽和碳酸氫鈉(200ml)洗滌有機(jī)層，然后用鹽水溶液(200ml)洗滌，之后經(jīng)無水硫酸鎂干燥。過濾有機(jī)溶液，真空下去除溶劑得到黃色固體3-甲硫氧基-5-氨基-6-[2，3，5-三氯代苯基]-1，2，4-三嗪。得率為5.82g(92.2％)。N.m.r.(CDCl3)δppm3.05(s，3H)，7.39(d，lH)，7.69(d，1H)。LC/MS電子噴霧陽性(M+1)+=337/339。中間體72-氧代-2-[2，3，5-三氯代苯基]-乙酰胺[式(Ⅵ)]將2，3，5-三氯代苯甲酰氰(10.0g，46mmol)加入到濃鹽酸(140ml)中，并在室溫下攪拌48小時(shí)。用水(100ml)稀釋該懸浮液，然后過濾。用水洗滌淺棕色固體，然后風(fēng)干1小時(shí)。然后將粗產(chǎn)物溶解于乙酸乙酯(400ml)中，用飽和碳酸氫鈉水溶液(2×300ml)、然后用鹽水(300ml)洗滌，再后經(jīng)硫酸鎂干燥，過濾并蒸發(fā)得到米色固體。該固體在己烷/甲苯(200ml)中研磨，過濾并真空干燥，得到灰白色固體2-氧代-2-[2，3，5-三氯代苯基]-乙酰胺。得率為7.02g(65.3％)。N.m.r.(d6-DMSO)δppm7.77(d，1H)，8.09(d，1H)，8.13(寬s，1H)，8.48(寬s，1H)。LC/MS，電子噴霧陰性(M-1)=250/252。中間體82-[S-甲硫基脲亞氨基-2-[2，3，5-三氯代苯基1-乙酰胺[式(Ⅴ)]將2-氧代-2-[2，3，5-三氯代苯基]-乙酰胺(5.00g，19.8mmol)和S-甲硫基氨基脲化氫碘(9.20g，39.5mmol)懸浮于乙醇(100ml)中，在氮?dú)庀掠?0℃加熱過夜。如果薄層層析表明仍然存在原料，再加入一部分S-甲硫基氨基脲化氫碘(4.00g，17.2mmol)，于50℃繼續(xù)攪拌2小時(shí)。真空蒸發(fā)反應(yīng)混合物得到棕色油狀物。將該油狀物溶解于乙酸乙酯(400ml)中，用水(300ml)、然后用鹽水(300ml)洗滌，經(jīng)硫酸鎂干燥，過濾并真空蒸發(fā)得到黃棕色膠狀物。用1∶1乙酸乙酯∶己烷作洗脫劑經(jīng)柱層析純化膠狀物。獲得主要為E異構(gòu)體的淺黃色固體產(chǎn)物，得率為4.25g(63.2％)。N.M.R.(d6-DMSO)δppm2.14(s，3H)，7.28(d，1H)，7.31(寬s，1H)，7.84(d，1H)，8.28(寬s，1H)。LC/MS，電子噴霧陽性(M+1)+=339/341。中間體92-[S-甲硫基脲亞氨基]-2-[2，3，5-三氯代苯基]-乙腈[式(Ⅳ)]2-[S-甲硫基氨基脲-2-[2，3，5-三氯代苯基]-乙酰胺(2g，5.89mmol)分批加入到二磷酰氯(2.97g，1.63ml，11.8mmol)的1，4-二噁烷溶液(16ml)中，在氮?dú)庀聰嚢?小時(shí)。真空蒸發(fā)深色溶液得到深黃色油狀物。將該油狀物溶解于乙酸乙酯(50ml)中，用水(50ml)、飽和碳酸氫鈉水溶液(50ml)、鹽水(50ml)洗滌后，經(jīng)硫酸鎂干燥，過濾并真空蒸發(fā)得到深黃色油狀物。用3∶1己烷∶乙酸乙酯作洗脫劑經(jīng)柱層析純化所述粗產(chǎn)物。獲得為黃色油狀物的產(chǎn)物即2-[S-甲硫基脲亞氨基]-2-[2，3，5-三氯代苯基]-乙腈，放置后結(jié)晶為黃色固體。得率為1.16g(61.2％)。N.M.R.(d6-DMSO)δppm2.20(s，1H)，3.38(寬s，3H)，7.68(寬s，1H)，7.95(d，1H)，8.12(寬s，1H)。LC/MS，電子噴霧陽性(M+1)+=321/323。實(shí)施例5-氨基-6-[2，3，5-三氯代苯基]-1，2，4-三嗪方法A將阮內(nèi)鎳(3.50g，在水中的懸浮液，F(xiàn)luka)懸浮于3-硫代甲基-5-氨基-6-(2，3，5-三氯代苯基)-1，2，4-三嗪(1.75g，5.44×10-3mol)的無水乙醇溶液(30ml)中，并于70℃攪拌。將一水合肼(3.50ml，3.54g，0.11mol)在30分鐘內(nèi)滴加到所述懸浮液中。將所得的混合物于70-75℃攪拌2小時(shí)，過濾，用熱的無水乙醇(3×20ml)洗滌并真空蒸發(fā)濾液。用15∶25環(huán)己烷∶乙醚至乙醚作洗脫劑經(jīng)‘快速層析’、然后用Supelcosil ABZ柱并用50％乙腈/水和0.1％甲酸作洗脫劑經(jīng)制備Hplc性純化所述殘留物。得率0.134g(9％)。M.p.220-222℃，Rt=13.691分鐘，N.m.r.(d6-DMSO)δppm6.90(寬s，1H)，7.60(d，1H)，7.70(寬s，1H)，8.0(d，1H)，8.70(s，lH)。LC/MS(EI)M+=275/277。方法B3-甲硫氧基-5-氨基-6-[2，3，5-三氯代苯基]-1，2，4-三嗪(5.82g，17.2mmol，1當(dāng)量)溶解于THF叔丁醇的1∶1混合物(1800ml)中。一次性加入硼氫化鈉(915g，24.08mmol，約1.4當(dāng)量)，并將生成的混合物在氮?dú)庀掠谑覝財(cái)嚢?小時(shí)。真空下去除所有溶劑得到黃色固體，然后將黃色固體與四氫呋喃(200ml)共沸。緩慢加入10％枸緣酸水溶液500ml)，將溫度保持于20℃以下，然后加入乙酸乙酯(500ml)。分離各層，再用乙酸乙酯(500ml)提取水層。用飽和鹽水洗滌合并的有機(jī)層，經(jīng)無水硫酸鎂干燥，過濾，在真空下去除揮發(fā)物得到黃色固體。，用20％乙酸乙酯的己烷液作洗脫劑、增加至60％乙酸乙酯的己烷液，采用柱層析純化所述產(chǎn)物。合并含產(chǎn)物的流分，真空蒸發(fā)，得到為黃色固體的3-硫代甲基-5-氨基-6-(2，3，5-三氯代苯基)-1，2，4-三嗪。
得率為1.5g(31.7％)。
N.m.r.(d6-DMSO)δppm7.67(d，1H)，8.02(d，1H)，8.75(s，1H)，7.0-7.2(寬s，1H)，7.7-8.0(寬s，1H)。LC/MS電子噴霧陽性(M+1)+=275/277。藥學(xué)實(shí)施例無菌制劑可以以相似的方式制備其它無菌制劑以獲得不同濃度的化合物。
制備其它規(guī)格如25和100mg/片的片劑。
本發(fā)明化合物 5.0mg微晶纖維素(Avicel PH102)適量 700.0mg使本發(fā)明化合物通過30目篩，然后與微晶纖維素混合以得到均勻混合物。之后將所述混合物填裝入OEL大小硬明膠膠囊殼中，以得到每膠囊含5.0mg本發(fā)明的化合物的膠囊劑。以相似方式可以制得每膠囊含有如25或100mg本發(fā)明的化合物的其它規(guī)格的膠囊劑。
以相似方式可以制備如5和25mg/膠囊的本發(fā)明化合物的其它規(guī)格軟明膠膠囊劑。
與拉莫三嗪(約30倍)相比，升高狀態(tài)的選擇性和較高的使用依賴性抑制提供了式(Ⅰ)化合物通過它在高頻發(fā)放的動(dòng)作電位(例如癲癇活動(dòng))期間選擇性阻滯傳導(dǎo)的機(jī)制。它支持這樣的發(fā)現(xiàn)與拉莫三嗪相比，式(Ⅰ)化合物是一種有效的抗痙攣劑并具有更高的治療指數(shù)?？汞d攣活性已經(jīng)表明在兩種全身性癲癇嚙齒動(dòng)物模型中，即反映人全身性強(qiáng)直-陣攣性發(fā)作的動(dòng)物模型的大鼠最大電休克試驗(yàn)(MES)和預(yù)示人失神發(fā)作和肌陣攣型癲癇小發(fā)作的小鼠戊四唑輸注試驗(yàn)，式(Ⅰ)化合物均有抗癲癇活性。
例如，試驗(yàn)前2小時(shí)，用試驗(yàn)化合物的0.25％甲基纖維素懸浮液經(jīng)口給予雄性Han Wistar大鼠(150-200g)。試驗(yàn)前肉眼觀察存在共濟(jì)失調(diào)。用耳電極施以200mA電流，持續(xù)時(shí)間200毫秒，并注意是否存在后肢伸展。式(Ⅰ)化合物顯示ED50為1.7mg/kg，而拉莫三嗪為6.1mg/kg，式(Ⅰ)化合物治療指數(shù)(共濟(jì)失調(diào)ED50與MES ED50的比值)為23.7而拉莫三嗪為3.3。
當(dāng)在PTZ后1小時(shí)(至第二個(gè)轉(zhuǎn)換的時(shí)間)給藥的小鼠戊四唑輸注試驗(yàn)中，式(Ⅰ)化合物顯示ED503.8mg/kg，而拉莫三嗪ED50為8.4mg/kg。鎮(zhèn)痛活性此外，已經(jīng)表明式(Ⅰ)化合物在疼痛模型中具有鎮(zhèn)痛活性。在大鼠足趾內(nèi)給予角叉菜膠(100μl 2％)后3小時(shí)，與急性痛覺過敏和炎癥一致的是，炎癥爪的重量降低而爪體積增加。給予角叉菜膠前30分鐘經(jīng)口給予式(Ⅰ)化合物對(duì)角叉菜膠誘導(dǎo)的重量降低產(chǎn)生劑量相關(guān)性抑制，其ED50為7.5mg/kg，而拉莫三嗪為23.5mg/kg。在該模型中，式(Ⅰ)化合物在30mg/kg時(shí)也顯示明顯的抗炎活性(爪體積減少50％)。對(duì)MPTP誘導(dǎo)的神經(jīng)毒性的活性小鼠MPTP模型一般用作帕金森病模型。
以2小時(shí)的間隔，使雄性C57BL/6小鼠接受4次腹膜內(nèi)注射MPTP.HCl(15mg/kg的游離堿；Research Biochemicals)鹽水液。對(duì)照小鼠只接受鹽水。以2小時(shí)的間隔，在每次注射MPTP前30分鐘用試驗(yàn)化合物的橄欖油液皮下注射給藥4次。
MPTP注射7天后，處死小鼠，解剖出紋狀體，立即冷凍并貯藏于-80℃?zhèn)溆梅治?。在分析組織的當(dāng)天，在10份體積(wt./vol.)含1.9mM亞硫酸氫鈉和1.6mg/ml DBA-HBr的0.1M高氯酸中超聲處理樣品。離心(2800g，10分鐘，室溫)并過濾(孔大小為0.5μm，Millipore)后，將上清液轉(zhuǎn)移至管制瓶中并置于自動(dòng)取樣器(M231×L，Gilson)。用高效液相層析檢測(cè)多巴胺含量。當(dāng)式(Ⅰ)化合物的給藥劑量為3mg/kg(×4)時(shí)，它對(duì)多巴胺耗竭產(chǎn)生75％保護(hù)，當(dāng)劑量為10mg/kg(×4)時(shí)產(chǎn)生98％保護(hù)。
權(quán)利要求
1．式(Ⅰ)的化合物及其藥學(xué)上可接受的衍生物
2．用于治療的按照權(quán)利要求1的化合物。
3．含有權(quán)利要求1的化合物和藥學(xué)上可接受的載體的藥用組合物。
4．權(quán)利要求1的化合物在生產(chǎn)用于治療以下病癥的藥物中的用途癲癇、雙相情感障礙即躁狂抑郁癥、疼痛、功能性腸紊亂、神經(jīng)變性疾病、神經(jīng)保護(hù)、神經(jīng)變性、耳鳴或?qū)φT導(dǎo)依賴性的藥物的依賴性或?qū)φT導(dǎo)依賴性的藥物具有耐受性。
5．治療患有或易于罹患以下病癥的患者的方法癲癇、雙相情感障礙即躁狂抑郁癥、疼痛、功能性腸紊亂、神經(jīng)變性疾病、神經(jīng)保護(hù)、神經(jīng)變性、耳鳴或?qū)φT導(dǎo)依賴性的藥物的依賴性或?qū)φT導(dǎo)依賴性的藥物具有耐受性。
6．通過還原式(Ⅱ)化合物制備權(quán)利要求1定義的式(Ⅰ)化合物的方法，式(Ⅱ)化合物如下
7．通過還原式(Ⅲ)化合物制備權(quán)利要求1定義的式(Ⅰ)化合物的方法，式(Ⅲ)化合物如下 其中n可以為1或2。
8．制備權(quán)利要求1定義的式(Ⅰ)化合物的方法，其中式(Ⅲ)化合物 通過氧化式(Ⅱ)化合物來制備
9．式(Ⅱ)化合物及其藥學(xué)上可接受的衍生物
10．式(Ⅲ)化合物及其藥學(xué)上可接受的衍生物 其中n可以為1或2。
全文摘要
式(Ⅰ)的化合物及其藥學(xué)上可接受的前體藥物、鹽和溶劑化物。
文檔編號(hào)A61K31/53GK1284951SQ98813745
公開日2001年2月21日 申請(qǐng)日期1998年12月18日 優(yōu)先權(quán)日1997年12月22日
發(fā)明者B·科克斯, M·P·赫利, M·S·諾布斯, G·P·沙 申請(qǐng)人:葛蘭素集團(tuán)有限公司